Orientador: Cesar Costapinto Santana / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-09-05T13:20:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Veredas_ViniciusDe_D.pdf: 13205142 bytes, checksum: 97c5009c255088bef6fcdc1fd92294c3 (MD5) Previous issue date: 2005 / Doutorado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Mestre em Engenharia Química

Os hidrocarbonetos policíclicos aromáticos nitrados (nitro-HPAs) são potencialmente genotóxicos, por isso existe um grande interesse na determinação analítica desses compostos no material particulado no ar. Os nitro-PAHs são emitidos diretamente para a atmosfera pela combustão incompleta ou podem ser formados in situ a partir dos HPAs precursores. Neste trabalho, são apresentados os resultados obtidos no desenvolvimento de um método de análise de nitro-HPAs (1-nitronaftaleno, 2-nitronaftaleno, 1-nitropireno, 2-nitropireno, 2-nitrofluoranteno, 3-nitrofluoranteno, 1,3-dinitropireno, 1,6- dinitropireno, 2-nitrofluoreno, 6-nitrocriseno, 7-nitrobenzo(a)antraceno, 9- nitroantraceno e 9-nitrofenantreno) por GCxGC. A separação destes compostos por GCxGC pode simplificar a etapa de pré-tratamento do extrato orgânico oriundo do material particulado no ar. A GCxGC promove a separação em duas colunas com mecanismos de separação diferentes, conectadas em série, o que resulta em uma capacidade de separação maior. O sistema GCxGC empregado neste trabalho possui um injetor com programação de temperatura (PTV), um modulador criogênico de dois jatos de CO2 líquido (Dual Jet) e um detector por ionização em chama (FID). A separação foi feita empregando a fase estacionária apolar 5% fenil polisilfenilene siloxano na primeira coluna (30 m / 0,25 mm / 0,25 µm) e a semipolar 14% cianopropilfenil polisiloxano na segunda coluna (1 m / 0,10 mm / 0,10 µm). Diferentes condições cromatográficas foram testadas, como: programação de temperatura no PTV, de 40-90ºC até 350ºC, com taxa de aquecimento de 2,2 e 14,5ºC/s; programação de temperatura no forno, de 40-90ºC até 300ºC, com taxa de aquecimento de 2, 2,5 e 3ºC/min; períodos de modulação de 3, 4 e 5s. O volume injetado foi 2µL, no modo splitless; a vazão do gás de arraste (He) foi constante e igual a 1 mL/min e o detector FID foi operado em 120 Hz. As larguras de pico medidas em 10% da altura variaram de 167 a 350ms para 1- nitronaftaleno e 6-nitrocriseno, respectivamente, e a capacidade de pico para o conjunto de colunas de separação usado foi estimada em cerca de 9800. Parâmetros de validação, tais como os limites de detecção (200 a 500 ng/mL) e de quantificação (650 a 1600 ng/mL) para alguns nitro-HPAs foram determinados. Para a quantificação, foram testados os métodos por padronização interna e externa, sendo que, através dos resultados deste trabalho, pode-se mostrar que a determinação de nitro-HPAs por GCxGC com o modulador empregado é possível se for feita através do método de padronização interna. O sistema GCxGC empregado causou dificuldades operacionais, principalmente na conexão das colunas e na modulação. Perdas de massa de analito foram detectadas nas análises por GCxGC, muito provavelmente causadas por uma conexão parcial das colunas. Isso poderia ser evitado se a conexão fosse feita pela fusão das colunas a um conector de vidro adequado a essa finalidade. Picos modulados divididos foram observados com frequência, o que comprometeu a precisão e exatidão dos resultados. A divisão dos picos ocorreu de modo aleatório dificultando a identificação da causa mais provável para a sua ocorrência. Cromatogramas GCxGC de extratos orgânicos não fracionados de particulados no ar, oriundos de queima direta de palha de cana-de-açúcar, de região afetada pela queima de cana-de-açúcar e de área urbana da cidade de São Paulo, mostraram a potencialidade do método / Nitro-polycyclic aromatic hydrocarbons (nitro-PAHs) are potentially genotoxic, so there is a great interest in the analytical determination of these compounds in airborne particulate matter. The nitro-PAHs are emitted directly into the atmosphere by incomplete combustion or may be formed in situ from PAHs. In this work, results obtained from the development of an analytical method for nitro-PAHs by GCxGC are presented. The nitro-PAHs studied were: 1- nitronaphthalene, 2-nitronaphthalene, 1-nitropyrene, 2-nitropyrene, 2- nitrofluoranthene, 3-nitrofluoranthene, 1,3-dinitropyrene, 1,6-dinitropyrene, 2- nitrofluorene, 6-nitrochrysene, 7-nitrobenzo(a)anthracene, 9-nitroanthracene and 9- nitrophenanthrene. The separation of these compounds by GCxGC should simplify the pretreatment step of the airborne particulate organic extract. In GCxGC two capillary columns of different mechanisms of separation are coupled by an interface called modulator, which increase significantly the chromatographic resolution. The GCxGC system used in this work is equipped with a PTV injector, a dual-stage double jets CO2 cryogenic modulator and a flame ionization detector (FID). The separation was carried out using a nonpolar stationary phase 5% methyl phenyl polysiloxane in the first column (30 m / 0.25 mm / 0.25 µm) and a semipolar 14% cyanopropyl phenyl dimethyl polysiloxane in the second column. Different chromatographic conditions were tested: the PTV was programmed from 40-90ºC to 350ºC at 2.2 and 14.5ºC/s; the oven was programmed from 40-90ºC to 350ºC at 2.0, 2.5 and 3.0ºC/min; the modulation periods tested were 3, 4 and 5s. The injected volume was 2µL in splitless mode, the carrier gas (He) flow rate of 1 mL/min was constant and the FID detector was operated at 120 Hz. Validation parameters, such as the limit of detection (200 - 500 ng/mL) and quantitation (650 - 1600 ng/mL) were determined. For quantification, the internal and external standardization methods were tested, and through the results of this study, it can be shown that the determination of nitro-PAHs by GCxGC with the modulator used is possible if made by internal standardization method. The GCxGC system presented operational difficulties, particularly in the column connection and in the modulation zone. A partial connection of the columns resulted in mass loss of the analytes. The connection of the columns could be more effective if it was made by fusing the columns to a glass connector suitable for this purpose. Divided modulated peaks were frequently observed, which compromised the precision and accuracy of the results. The division of the peaks occurred randomly hindering the identification of the most likely cause for its occurrence. GCxGC chromatograms corresponding to unfractionated organic extracts of airborne particulate material from the sugarcane straw burning, from an area impacted by sugar cane burning emissions and from an urban area of São Paulo City showed the capability of the method.

Submitted by Cleide Dantas (cleidedantas@ufpa.br) on 2014-05-27T16:41:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_DesenvolvimentoUmMetodo.pdf: 1769233 bytes, checksum: d38af4e8610ecdb4f98509427409e46c (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-09-09T13:14:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_DesenvolvimentoUmMetodo.pdf: 1769233 bytes, checksum: d38af4e8610ecdb4f98509427409e46c (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-09T13:14:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_DesenvolvimentoUmMetodo.pdf: 1769233 bytes, checksum: d38af4e8610ecdb4f98509427409e46c (MD5) Previous issue date: 2011 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Mikania lindleyana DC (Asteraceae) é uma trepadeira arbustiva, perene, lenhosa e sem gavinhas, com caule volúvel, cilíndrico estriado, verde e ramoso. É utilizada na Amazônia como diurético, antiinflamatório, analgésico, anti-hipertensivo, antiulceroso. Este trabalho teve por objetivo desenvolver um método para caracterização do extrato hidroetanólico das folhas de M. lindleyana DC por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). O extrato hidroetanólico (tintura) preparado conforme a FARMACOPÉIA BRASILEIRA V, 2010 foi submetido, após secagem, a análise fitoquímica, por Cromatografia em Camada Delgada (CCD) e por CLAE. Na prospecção química, observou-se a presença de cumarinas, alcalóides, aminoácidos, açúcares redutores, fenóis, taninos, esteróides, terpenos, saponinas e ácidos orgânicos. Na análise das frações (hexânica, clorofórmica e acetato de etila), do extrato hidroetanólico bruto e da cumarina (1mg/mL) por CCD, utilizando como eluente tolueno/diclorometano/acetona (45:25:30) observou-se no UV (365nm) bandas fluorescentes de cor verde clara (Rf 0.61) características de cumarina. Na análise do extrato bruto e da fração clorofórmica por CLAE e uma solução metanólica de cumarina pura a 0,1 mg/mL, utilizando como eluente metanol/água (47:53), picos no Rt de cerca de 6.00 minutos foram observados correspondentes a espectro característico com máximos de absorção entre 270 nm e 300 nm. Os resultados demonstram a presença de cumarina em EHEB e FC. nas respectivas quantidades de 0,014 no EHEB e 0,209 na FC. / Mikania lindleyana DC (Asteraceae), vernacular “Sucuriju”, is a creeping, shrubby, perennial, evergreen plant, growing in the Amazon region where it is used as diuretic, anti-hypertensive, anti-inflammatory and anti-ulcerous medicine. The main aim of this study was to develop a method for characterization of hydro-ethanolic extract (tincture) from the leaves of M. lindleyana DC, using UV and High performance Liquid Chromatography (HPLC). The hydro-ethanolic extract (tincture) was prepared based on Brazilian Pharmacopeia V, 2010 and its dry residue was submitted to phytochemical analyses, Thin Layer Chromatography (TLC) and High Performance Liquid chromatography (HPLC). Among the substances observed in the phytochemical analysis was coumarin, alkaloids, amino acids, reducing sugars, phenols, tannins, steroids, terpenes, saponins and organic acids. TLC test was done by applying hexanic, chloroformic and ethyl acetate Fractions together with Crude hydro-ethanolic extract and aqueous solution of coumarin Aldrich® 0,1mg/ml on the same plate using toluene/dichloromethane/acetone (45:25:30) as the eluent system. The chromatogram was then sprayed with an alcoholic solution of KOH 5%, and then observed under UV light at 254nm and 365 nm, revealing a light green band at an RF-0.61 for chloroformic fraction, crude hydro-ethanolic extract and for coumarin samples. The HPLC analysis was conducted using methanol/water 53:47 as the eluent system. The chloroformic fraction(CL), coumarin and the crude hydro-ethanolic extract (CHE) showed peaks at Retention time around 6.00minutes and spectra with maximum absorptions between 270nm and 300nm.This clearly demonstrate the presence of coumarins in the samples (CL= 0.209mg/mL and CHE= 0.014mg/mL).

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:37:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4755.pdf: 2085941 bytes, checksum: fc89e2d211130bbdae6540883bbb8f70 (MD5) Previous issue date: 2012-11-01 / The aim of this study was to use experimental design techniques during the development and validation of high performance liquid chromatography (HPLC) methods for analysis of drugs in the pharmaceutical industry in order to demonstrate its applicability and benefits of its use. A multivariate assessment of the robustness of an assay method for vitamins of the B complex enabled the visualization of interactions between variables, which would not be possible through the univariate approach. A mixture design was performed for determining the extraction solvents of sesquiterpene lactones in pharmaceutical formulation containing arnica tincture. The mixture of solvents selected through the study allowed desirable extraction of compounds of interest from the sample, which was confirmed through the validation of the methodology. Finally, we conducted an exploratory planning on an analytical methodology for the determination of latanoprost, timolol maleate, preservatives and degradation product in eye drops. The design allowed the reduction of chromatographic run time and waste generation by about 44%. / O objetivo deste trabalho foi utilizar técnicas de planejamento experimental durante o desenvolvimento e validação de métodos de cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE), para análise de medicamentos na indústria farmacêutica, a fim de demonstrar sua aplicabilidade e as vantagens de sua utilização. Uma avaliação multivariada da robustez do método de doseamento de vitaminas do complexo B permitiu a visualização de interações entre as variáveis, o que não seria possível através do estudo da forma univariada. Foi realizado também um planejamento de mistura para a determinação de solventes de extração de lactonas sesquiterpênicas de formulação farmacêutica à base de tintura de arnica. A mistura de solventes selecionada através do estudo permitiu extração desejável dos compostos de interesse da amostra, que foi comprovada através da validação da metodologia. Finalmente, foi realizado um planejamento exploratório de uma metodologia analítica de doseamento de latanoprosta, maleato de timolol, conservantes e produto de degradação em colírio. O planejamento permitiu a o redução do tempo de corrida e da geração de resíduos em cerca de 44%.

O pró-fármaco olmesartana medoxomila (OLM) é um anti-hipertensivo representante da classe dos bloqueadores seletivos dos receptores da angiotensina II (BRA). No Brasil, encontra-se disponível sob a forma de comprimidos revestidos (Benicar®). Foi aprovado pelo FDA em 2002. Não existe monografia disponível para este fármaco em nenhum código oficial. Desse modo, este trabalho objetivou o desenvolvimento de métodos analíticos para quantificação da OLM na substância química de referência (SQR) e forma farmacêutica, estabelecer a cinética de dissolução in vitro para os comprimidos revestidos deste fármaco e por fim investigar a presença de diferentes estruturas polimórficas da SQR deste anti-hipertensivo. A determinação da faixa de fusão, a espectrofotometria na região do infravermelho (IV), assim como a espectroscopia de ressonância magnética nuclear (RMN) de 1H e 13C permitiram a identificação da SQR. Os métodos por espectrofotometria na região do ultravioleta (UV), cromatografia em camada delgada (CCD), cromatografia a líquido de alta eficiência (CLAE) e cromatografia capilar eletrocinética micelar (MECC) foram utilizados para análise qualitativa do fármaco no produto acabado. A determinação quantitativa foi realizada através do desenvolvimento e validação de método indicativo da estabilidade por CLAE e MECC, avaliando-se os parâmetros descritos pelas guias de validação como: especificidade, robustez, linearidade, limites de detecção e quantificação, precisão e exatidão. Determinou-se ainda, a intercambialidade dos mesmos, através de análise estatística por ANOVA (p = 0,05), e comprovou-se que ambos podem ser utilizados para análise qualitativa e quantitativa da OLM em matéria-prima e produto acabado. O teste de dissolução foi desenvolvido e validado de acordo com o guia proposto pelo USP Fórum, utilizando como meio de dissolução 900 ml de uma solução a 0,5% (p/V) de lauril sulfato de sódio pH 6,8, a 37 ± 0,5 °C, pás a 50 rpm e quantificação por CLAE e espectrofotometria na região do UV. A análise do teor de OLM dissolvida, realizada por ambos os métodos, não apresentou diferença estatística (p > 0,05). Os perfis de dissolução do Benicar®, medicamento referência, e do Olmetec®, outra formulação disponível no mercado, foram considerados semelhantes, após aplicação do método modelo-independente (f1 e f2) e eficiência de dissolução. Avaliou-se, também, a cinética de dissolução de ambas as formulações através da aplicação de métodos modelo-dependentes. Os perfis de dissolução do Benicar® e Ometec® foram descritos pelos modelos propostos por Hixson-Crowell e de ordem zero, respectivamente. Os valores calculados para t50% e t80%, obtidos através da aplicação da equação de ordem zero, foram semelhantes aos valores experimentais encontrados no perfil de dissolução de ambos os produtos. As técnicas de espectrofotometria por reflexão difusa no IV com transformada de Fourier (ATRFTIR), difração de raios-X de pó (XRPD), calorimetria exploratória diferencial (DSC), termogravimetria (TGA) e microscopia eletrônica de varredura (MEV) permitiram a identificação de uma forma amorfa e outra polimórfica da SQR da OLM, diferentes daquela descrita na literatura. Logo, de acordo com os resultados obtidos, todos os métodos propostos podem ser utilizados para no controle de qualidade da OLM em SQR e produto acabado. / The prodrug olmesartan medoxomil (OLM) is a selective angiotensin II receptor blocker (ARB). In Brazil, it is available as coated tablets (Benicar®). It was approved by FDA in 2002. There is no monograph available for this drug in any official code. According to this, the main purpose of this study was to develop a quality control analytical methodology for OLM in bulk material and dosage form, to establish in vitro dissolution kinetic for OLM coated tablets, and to investigate the crystalline behavior of OLM bulk material. The investigation of melting range and application of techniques such as infrared spectrophotometry (IR), as well as the 1H and 13C nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy were used to identify OLM. Ultraviolet (UV) spectrophotometry, thin-layer chromatography (TLC), highperformance liquid chromatography (LC) and micellar electrokinetic chromatography (MEKC) were used for qualitative analysis of the drug in coated tablets. The quantitative determination was carried out through the development and validation of a stability-indicating LC and MEKC methods, evaluating the parameters described in the guidelines such as: specificity, robustness, linearity, detection and quantitation limits, precision, and accuracy. The results were compared statistically by ANOVA (p = 0.05), and no difference was found between them for both bulk material and coated tablets. A dissolution test was developed and validated according to the guideline proposed by the USP Forum, using 900 ml of dissolution medium containing 0.5% of sodium lauryl sulfate (w/V) pH 6.8, at 37 ± 0.5 °C, paddle at 50 rpm, and quantitation by LC and UV spectrophotometry. The resulting dissolution profiles did not show statistical difference (p > 0.05) between methods. The dissolution profiles of Benicar®, reference formulation, and Olmetec®, another commercial formulation available, were considered similar, using model independent (f1, f2, and dissolution efficiency) methods. The dissolution kinetic of both formulations, using model dependent approaches, revealed that Benicar® followed the Hixson-Crowell model, while Olmetec® the zero-order model. The calculated values of t50% and t80%, obtained from zero-order equation, were similar of experimental values found in the dissolution profile for both products. The attenuated total reflectance Fourier transformed infrared (ATR-FTIR) spectrophotometry, along with differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetry (TG), X-ray powder diffraction (XRPD), and scanning electron microscopy (SEM) allowed to identify one amorphous and other polymorphic forms of OLM. According to the obtained results, all proposed methods could be used in the quality control of OLM bulk material and coated tablets.

O pró-fármaco olmesartana medoxomila (OLM) é um anti-hipertensivo representante da classe dos bloqueadores seletivos dos receptores da angiotensina II (BRA). No Brasil, encontra-se disponível sob a forma de comprimidos revestidos (Benicar®). Foi aprovado pelo FDA em 2002. Não existe monografia disponível para este fármaco em nenhum código oficial. Desse modo, este trabalho objetivou o desenvolvimento de métodos analíticos para quantificação da OLM na substância química de referência (SQR) e forma farmacêutica, estabelecer a cinética de dissolução in vitro para os comprimidos revestidos deste fármaco e por fim investigar a presença de diferentes estruturas polimórficas da SQR deste anti-hipertensivo. A determinação da faixa de fusão, a espectrofotometria na região do infravermelho (IV), assim como a espectroscopia de ressonância magnética nuclear (RMN) de 1H e 13C permitiram a identificação da SQR. Os métodos por espectrofotometria na região do ultravioleta (UV), cromatografia em camada delgada (CCD), cromatografia a líquido de alta eficiência (CLAE) e cromatografia capilar eletrocinética micelar (MECC) foram utilizados para análise qualitativa do fármaco no produto acabado. A determinação quantitativa foi realizada através do desenvolvimento e validação de método indicativo da estabilidade por CLAE e MECC, avaliando-se os parâmetros descritos pelas guias de validação como: especificidade, robustez, linearidade, limites de detecção e quantificação, precisão e exatidão. Determinou-se ainda, a intercambialidade dos mesmos, através de análise estatística por ANOVA (p = 0,05), e comprovou-se que ambos podem ser utilizados para análise qualitativa e quantitativa da OLM em matéria-prima e produto acabado. O teste de dissolução foi desenvolvido e validado de acordo com o guia proposto pelo USP Fórum, utilizando como meio de dissolução 900 ml de uma solução a 0,5% (p/V) de lauril sulfato de sódio pH 6,8, a 37 ± 0,5 °C, pás a 50 rpm e quantificação por CLAE e espectrofotometria na região do UV. A análise do teor de OLM dissolvida, realizada por ambos os métodos, não apresentou diferença estatística (p > 0,05). Os perfis de dissolução do Benicar®, medicamento referência, e do Olmetec®, outra formulação disponível no mercado, foram considerados semelhantes, após aplicação do método modelo-independente (f1 e f2) e eficiência de dissolução. Avaliou-se, também, a cinética de dissolução de ambas as formulações através da aplicação de métodos modelo-dependentes. Os perfis de dissolução do Benicar® e Ometec® foram descritos pelos modelos propostos por Hixson-Crowell e de ordem zero, respectivamente. Os valores calculados para t50% e t80%, obtidos através da aplicação da equação de ordem zero, foram semelhantes aos valores experimentais encontrados no perfil de dissolução de ambos os produtos. As técnicas de espectrofotometria por reflexão difusa no IV com transformada de Fourier (ATRFTIR), difração de raios-X de pó (XRPD), calorimetria exploratória diferencial (DSC), termogravimetria (TGA) e microscopia eletrônica de varredura (MEV) permitiram a identificação de uma forma amorfa e outra polimórfica da SQR da OLM, diferentes daquela descrita na literatura. Logo, de acordo com os resultados obtidos, todos os métodos propostos podem ser utilizados para no controle de qualidade da OLM em SQR e produto acabado. / The prodrug olmesartan medoxomil (OLM) is a selective angiotensin II receptor blocker (ARB). In Brazil, it is available as coated tablets (Benicar®). It was approved by FDA in 2002. There is no monograph available for this drug in any official code. According to this, the main purpose of this study was to develop a quality control analytical methodology for OLM in bulk material and dosage form, to establish in vitro dissolution kinetic for OLM coated tablets, and to investigate the crystalline behavior of OLM bulk material. The investigation of melting range and application of techniques such as infrared spectrophotometry (IR), as well as the 1H and 13C nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy were used to identify OLM. Ultraviolet (UV) spectrophotometry, thin-layer chromatography (TLC), highperformance liquid chromatography (LC) and micellar electrokinetic chromatography (MEKC) were used for qualitative analysis of the drug in coated tablets. The quantitative determination was carried out through the development and validation of a stability-indicating LC and MEKC methods, evaluating the parameters described in the guidelines such as: specificity, robustness, linearity, detection and quantitation limits, precision, and accuracy. The results were compared statistically by ANOVA (p = 0.05), and no difference was found between them for both bulk material and coated tablets. A dissolution test was developed and validated according to the guideline proposed by the USP Forum, using 900 ml of dissolution medium containing 0.5% of sodium lauryl sulfate (w/V) pH 6.8, at 37 ± 0.5 °C, paddle at 50 rpm, and quantitation by LC and UV spectrophotometry. The resulting dissolution profiles did not show statistical difference (p > 0.05) between methods. The dissolution profiles of Benicar®, reference formulation, and Olmetec®, another commercial formulation available, were considered similar, using model independent (f1, f2, and dissolution efficiency) methods. The dissolution kinetic of both formulations, using model dependent approaches, revealed that Benicar® followed the Hixson-Crowell model, while Olmetec® the zero-order model. The calculated values of t50% and t80%, obtained from zero-order equation, were similar of experimental values found in the dissolution profile for both products. The attenuated total reflectance Fourier transformed infrared (ATR-FTIR) spectrophotometry, along with differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetry (TG), X-ray powder diffraction (XRPD), and scanning electron microscopy (SEM) allowed to identify one amorphous and other polymorphic forms of OLM. According to the obtained results, all proposed methods could be used in the quality control of OLM bulk material and coated tablets.

Made available in DSpace on 2011-05-04T12:36:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 / O glifosato é um herbicida não-seletivo, sistêmico e suas vendas representam em torno de 60 por cento das vendas de herbicida em todo o planeta, totalizando uma quantia de 1,2 bilhões de dólares anuais. Este princípio ativo é apontado como um potencial contaminante ambiental, juntamente a seu metabólito, o ácido aminometilfosfônico (AMPA), visto que são altamente hidrossolúveis. Adegradação de glifosato em AMPA ocorre rapidamente no meio ambiente. A dispersão pelo ar e a contaminação de corpos hídricos, são potenciais fontes de exposição a seres humanos, que pode acontecer de forma direta ou indireta, sendo que a exposição crônica a estas substâncias vem sendo estudada com resultados que sugerem correlação entre a exposição e desregulação endócrina, câncer e dermatites. O objetivo deste trabalho foi avaliar o processo de contaminação ambiental por Glifosato, na área rural da Serrinha do Mendanha, pertencente ao bairro de Campo Grande, município do Rio de Janeiro. Essa comunidade é considerada como periurbana, apesar das características comuns às comunidades agrícolas, devido à proximidade de centros urbanos. O local é caracterizado pela presença de pequenas propriedades, onde as principais culturas são as de chuchu, abobrinha, banana, aipim, jiló e quiabo,observando-se um elevado consumo do herbicida glifosato. Para a avaliação da contaminação ambiental foi otimizado um método de análise para o glifosato em água. Além disso, foram avaliadas as diferenças no processo de trabalho da área periurbana em relação a áreas exclusivamente rurais. O glifosato pode ser identificado e quantificado analiticamente através de vários métodos, sendo a cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM) a técnica escolhida para odesenvolvimento deste trabalho, após uma reação de derivatização, necessária para este tipo de análise.Foram investigadas 8 diferentes amostras de água, oriundas de 8 diferentes propriedades, sendo encontrado o metabólito AMPA na concentração de 2,98 ug/L em uma delas. Também foi investigado através de questionário. Apesar de apenas uma amostra ter apresentado resultado positivo, não se pode afirmar que a população não está exposta ambientalmente ao glifosato e a outros agrotóxicos, visto que há intensa aplicação destes produtos no local e esta não é feita com a devida proteção. Sugere-se estudos posteriores avaliando não só a matriz água, mas também o ar , além de matrizes biológicas, a fim se investigar os efeitos da exposição a estas substâncias sobre a saúde dos trabalhadores atuantes na Serrinha do Mendanha. / The herbicide glyphosate is a non-selective, systemic, and its sales represent around 60% of the sales of herbicide around the world, totaling an amount of 1.2 billion dollars annually. This active principle is identified as a potential environmental contaminant, together with its metabolite, the aminomethylphosphonic acid (AMPA), since they are highly water soluble. The degradation of glyphosate in AMPA occurs rapidly in the environment. The scattering by air and contamination of water bodies are potential sources of exposure to humans, which can happen directly or indirectly, Chronic exposure to these substances has been studied with results that suggest a correlation between exposure and endocrine disruption , cancer and dermatitis. The objective of this study was to evaluate the process of environmental contamination by Glyphosate in the rural area of Serrinha do Mendanha which belongs to the neighborhood of Campo Grande, Rio de Janeiro. This community is considered periurban due to the proximity to urban centers, despite the common characteristics with other agriculture communities. The site is characterized by the presence of small properties, where the main crops are vegetables, observing a high consumption of the herbicide glyphosate. To assess environmental contamination an analytical method was optimized to determine glyphosate in water. In addition, the differences between the work process in rural and periurban areas were evaluated. Glyphosate can be identified and quantified by several analytical methods, and the gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) the technique chosen for the development of this work after a reaction of derivatization is necessary for this type of analysis. In this study 8 different samples of water were investigated from 8 different properties, and found the metabolite AMPA in a concentration of 2.98 ug / L in one of them. The process of working was investigated through a questionnaire. Although only one sample has shown a positive result, it can not be said that the population is not environmentally exposed to glyphosate and other pesticides, as there is intense application of these products in place and this is not done with proper protection. It is suggested that further studies evaluating not only water but also the air, and biological matrices, to investigate whether the effects of exposure to these substances on the health of workers from Serrinha do Mendanha.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Dronedarone is a new antiarrhythmic agent and amiodarone analogue developed to reduce the toxic effects related to amiodarone. Dronedarone was approved for the maintenance of the sinus rhythmic in adult patients with atrial fibrillation and to reduce the risk of hospitalization in these patients. It is commercially available as film-coated tablets. There are no official monographs in any pharmacopoeia or analytical methods described in the literature for the analysis of dronedarone in pharmaceutical dosage form or bulk form. In the present study, an analytical methodology was developed for the analysis of dronedarone in pharmaceutical dosage form and bulk form. The reversed-phase liquid chromatography method was performed using a Waters XBridge C18 column (250 mm × 4.6 mm). The mobile phase consisted of buffer solution pH 4.9 / acetonitrile (35:65, v/v), running at a flow rate of 1.0 mL/min, using photodiode array detector set at 289 nm. The chromatographic separation was obtained within 7.0 min and it was linear in the concentration range from 5.0 to 100.0 μg/mL (r = 0.9999). The spectrophotometric method was developed and validated and dronedarone was quantified at 289 nm, using methanol as diluent. The micellar electrokinetic method was also developed and validated, using nimesulide as internal standard. The analyses were performed on a fused-silica capillary (50 μm i.d.; effective length, 40 cm), using electrolyte solution consisted of 40 mm borate buffer and 50 mM SDS at pH 9.2, with detection by photodiode array detector set at 216 nm. The injection was performed using the hydrodynamic mode at 50 mbar for 7 s and a constant voltage of 28 kV was applied during analysis. The electrophoretic separation was obtained within 7.0 min and it was linear in the concentration range from 25 to 150 μg/mL (r = 0.9995). The procedures were validated evaluating parameters such as the specificity, linearity, precision, accuracy, limits of detection and quantitation and robustness, giving results within the acceptable range. The proposed methods were applied for the analysis of the pharmaceutical product, showing significant correlation between the results (p > 0.05). The spectrophotometric method was developed and validated using acetate buffer pH 4.5 as diluent and UV detection at 289 nm, which was applied to evaluate the dissolution test. The dissolution test was developed using 900 mL of acetate buffer pH 4.5 at 37°C, as dissolution medium, and paddle as apparatus at a stirring rate of 75 rpm. / A dronedarona é um novo agente antiarrítmico análogo à amiodarona, desenvolvido com o propósito de reduzir os efeitos adversos relacionados à amiodarona. Foi aprovado para a manutenção do ritmo cardíaco normal em pacientes com fibrilação atrial e, assim, reduzir os riscos de hospitalização. Comercialmente, encontra-se disponível na forma farmacêutica de comprimidos revestidos. Não há monografias descritas em farmacopeias ou métodos na literatura para análise de dronedarona em forma farmacêutica ou matéria-prima. No presente trabalho, foi desenvolvida metodologia para a avaliação de dronedarona em forma farmacêutica e matéria-prima. O método por cromatografia líquida em fase reversa foi realizado utilizando-se coluna Waters XBridge C18 (250 mm × 4,6 mm). A fase móvel foi composta por solução tampão pH 4,9 / acetonitrila (35:65, v/v) eluída no fluxo de 1,0 mL/min e detecção no ultravioleta em 289 nm. A separação cromatográfica foi obtida no tempo de 7,0 min, sendo linear na faixa de concentração de 5-100 μg/mL (r = 0,9999). Paralelamente, desenvolveu-se e validou-se método por espectrofotometria no ultravioleta em 289 nm utilizando metanol como diluente. Também foi desenvolvido e validado método por cromatografia eletrocinética micelar utilizando nimesulida como padrão interno. As análises foram realizadas em capilar de sílica fundida (comprimento efetivo de 40 cm e diâmetro de 50 μm), mantido a 30°C, utilizando solução eletrolítica composta de tampão borato 40 mM e SDS 50 mM, pH 9,2, com detecção no ultravioleta em 216 nm. A injeção foi realizada no modo hidrodinâmico a 50 mbar durante 7 s e voltagem constante de 28 kV foi aplicada durante as análises. A separação eletroforética foi obtida em 7,0 min, sendo linear na faixa de 25-150 μg/mL (r = 0,9995). Os procedimentos foram validados considerando-se os parâmetros especificidade, linearidade, precisão, exatidão, limite de detecção e quantificação e robustez, cujos resultados cumpriram os requisitos preconizados. Os métodos propostos foram aplicados na análise quantitativa de produtos farmacêuticos, demonstrando correlação significativa dos resultados (p > 0,05). Desenvolveu-se e validou-se método por espectrofotometria no UV utilizando tampão acetato pH 4,5 como diluente e detecção em 289 nm, o qual foi aplicado para avaliar a percentagem dissolvida dos comprimidos de dronedarona. O método de dissolução foi desenvolvido utilizando como meio 900 mL de tampão acetato pH 4,5 mantido a 37°C, aparato pá e rotação de 75 rpm.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarceloVPA_DISSERT.pdf: 3152615 bytes, checksum: 2a3513c0df769468fec98423bf2dba29 (MD5) Previous issue date: 2013-03-21 / Tuberculosis is a serious disease, but curable in practically 100% of new cases, since complied the principles of modern chemotherapy. Isoniazid (ISN), Rifampicin (RIF), Pyrazinamide (PYR) and Chloride Ethambutol (ETA) are considered first line drugs in the treatment of tuberculosis, by combining the highest level of efficiency with acceptable degree of toxicity. Concerning USP 33 - NF28 (2010) the chromatography analysis to 3 of 4 drugs (ISN, PYR and RIF) last in average 15 minutes and 10 minutes more to obtain the 4th drug (ETA) using a column and mobile phase mixture different, becoming its industrial application unfavorable. Thus, many studies have being carried out to minimize this problem. An alternative would use the UFLC, which is based with the same principles of HPLC, however it uses stationary phases with particles smaller than 2 ?m. Therefore, this study goals to develop and validate new analytical methods to determine simultaneously the drugs by HPLC/DAD and UFLC/DAD. For this, a analytical screening was carried out, which verified that is necessary a gradient of mobile phase system A (acetate buffer:methanol 94:6 v/v) and B (acetate buffer:acetonitrile 55:45 v/v). Furthermore, to the development and optimization of the method in HPLC and UFLC, with achievement of the values of system suitability into the criteria limits required for both techniques, the validations have began. Standard solutions and tablets test solutions were prepared and injected into HPLC and UFLC, containing 0.008 mg/mL ISN, 0.043 mg/mL PYR, 0.030 mg.mL-1 ETA and 0.016 mg/mL RIF. The validation of analytical methods for HPLC and UFLC was carried out with the determination of specificity/selectivity, analytical curve, linearity, precision, limits of detection and quantification, accuracy and robustness. The methods were adequate for determination of 4 drugs separately without interfered with the others. Precise, due to the fact of the methods demonstrated since with the days variation, besides the repeatability, the values were into the level required by the regular agency. Linear (R> 0,99), once the methods were capable to demonstrate results directly proportional to the concentration of the analyte sample, within of specified range. Accurate, once the methods were capable to present values of variation coefficient and recovery percentage into the required limits (98 to 102%). The methods showed LOD and LOQ very low showing the high sensitivity of the methods for the four drugs. The robustness of the methods were evaluate, facing the temperature and flow changes, where they showed robustness just with the preview conditions established of temperature and flow, abrupt changes may influence with the results of methods / A tuberculose ? uma doen?a grave, por?m cur?vel em praticamente 100% dos casos novos, desde que obedecidos os princ?pios da moderna quimioterapia. S?o considerados f?rmacos de 1? linha no tratamento ? tuberculose: isoniazida, pirazinamida, etambutol e rifampicina. De acordo com USP 33 - NF28 (2010) as an?lises cromatogr?ficas para 3 dos 4 f?rmacos (isoniazida, pirazinamida e rifampicina) duram em m?dia 15 minutos e mais 10 minutos para a obten??o do 4? f?rmaco (etambutol) utilizando outra coluna, com outra mistura de fase m?vel, tornando esta aplica??o na pr?tica industrial desfavor?vel. Uma das alternativas ? utilizar o CLUE, o qual baseia-se nos mesmos princ?pios da CLAE, por?m utiliza fases estacion?rias com part?culas menores que 2 ?m. Dessa forma pretende-se com o presente estudo desenvolver e validar novos m?todos anal?ticos para determina??o simult?nea de tuberculost?ticos por CLAE/DAD e CLUE/DAD. Para isto, foi realizado um screening anal?tico, o qual verificou que ? necess?rio um gradiente de sistema de fase m?vel A (tamp?o acetato:metanol 94:6 v/v) e B (tamp?o acetato:acetonitrila 55:45 v/v). Posteriormente, ao desenvolvimento e otimiza??o do m?todo em CLAE e CLUE com a obten??o dos valores de adequabilidade do sistema dentro dos limites de aceita??es vigente para ambos as t?cnicas, as valida??es deram-se in?cio. Solu??es padr?es e solu??es testes dos comprimidos foram preparadas e injetadas no CLAE e CLUE, contendo isoniazida, pirazinamida, etambutol e rifampicina nas concentra??es de 0,008, 0,043, 0,030 e 0,016 mg.mL-1, respectivamente. A valida??o dos m?todos anal?ticos foram realizadas para: especificidade / seletividade, intervalos da curva anal?tica, linearidade, limite de detec??o, limite de quantifica??o, exatid?o, precis?o (repetibilidade, precis?o intermedi?ria) e robustez. Os m?todos foram adequados para determina??o dos 4 f?rmacos separadamente sem interfer?ncia nos demais. Precisos, devido ao fato de que os m?todos demonstraram que mesmo com varia??o de dias, al?m da repetibilidade, os valores ficaram dentro da faixa preconizada na legisla??o vigente. Lineares (R > 0,99), ou seja, os m?todos foram capazes de demonstrar que os resultados obtidos eram diretamente proporcionais ? concentra??o do analito na amostra, dentro de um intervalo especificado. Exatos, uma vez que os m?todos foram capazes de apresentar valores de coeficiente de varia??o e porcentagem de recupera??o dentro dos limites exigidos (98 a 102%). Os m?todos mostraram LD e LQ com n?veis baixos demonstrando que os m?todos possuem elevada sensibilidade aos quarto f?rmacos. A robustez foi avaliada frente ?s altera??es de temperatura e fluxo, onde os m?todos demonstraram-se robustos apenas nas condi??es previamente estabelecidas de temperatura e fluxo, altera??es bruscas podem acarretar influ?ncia nos resultados dos m?todos

O pró-fármaco olmesartana medoxomila (OLM) é um anti-hipertensivo representante da classe dos bloqueadores seletivos dos receptores da angiotensina II (BRA). No Brasil, encontra-se disponível sob a forma de comprimidos revestidos (Benicar®). Foi aprovado pelo FDA em 2002. Não existe monografia disponível para este fármaco em nenhum código oficial. Desse modo, este trabalho objetivou o desenvolvimento de métodos analíticos para quantificação da OLM na substância química de referência (SQR) e forma farmacêutica, estabelecer a cinética de dissolução in vitro para os comprimidos revestidos deste fármaco e por fim investigar a presença de diferentes estruturas polimórficas da SQR deste anti-hipertensivo. A determinação da faixa de fusão, a espectrofotometria na região do infravermelho (IV), assim como a espectroscopia de ressonância magnética nuclear (RMN) de 1H e 13C permitiram a identificação da SQR. Os métodos por espectrofotometria na região do ultravioleta (UV), cromatografia em camada delgada (CCD), cromatografia a líquido de alta eficiência (CLAE) e cromatografia capilar eletrocinética micelar (MECC) foram utilizados para análise qualitativa do fármaco no produto acabado. A determinação quantitativa foi realizada através do desenvolvimento e validação de método indicativo da estabilidade por CLAE e MECC, avaliando-se os parâmetros descritos pelas guias de validação como: especificidade, robustez, linearidade, limites de detecção e quantificação, precisão e exatidão. Determinou-se ainda, a intercambialidade dos mesmos, através de análise estatística por ANOVA (p = 0,05), e comprovou-se que ambos podem ser utilizados para análise qualitativa e quantitativa da OLM em matéria-prima e produto acabado. O teste de dissolução foi desenvolvido e validado de acordo com o guia proposto pelo USP Fórum, utilizando como meio de dissolução 900 ml de uma solução a 0,5% (p/V) de lauril sulfato de sódio pH 6,8, a 37 ± 0,5 °C, pás a 50 rpm e quantificação por CLAE e espectrofotometria na região do UV. A análise do teor de OLM dissolvida, realizada por ambos os métodos, não apresentou diferença estatística (p > 0,05). Os perfis de dissolução do Benicar®, medicamento referência, e do Olmetec®, outra formulação disponível no mercado, foram considerados semelhantes, após aplicação do método modelo-independente (f1 e f2) e eficiência de dissolução. Avaliou-se, também, a cinética de dissolução de ambas as formulações através da aplicação de métodos modelo-dependentes. Os perfis de dissolução do Benicar® e Ometec® foram descritos pelos modelos propostos por Hixson-Crowell e de ordem zero, respectivamente. Os valores calculados para t50% e t80%, obtidos através da aplicação da equação de ordem zero, foram semelhantes aos valores experimentais encontrados no perfil de dissolução de ambos os produtos. As técnicas de espectrofotometria por reflexão difusa no IV com transformada de Fourier (ATRFTIR), difração de raios-X de pó (XRPD), calorimetria exploratória diferencial (DSC), termogravimetria (TGA) e microscopia eletrônica de varredura (MEV) permitiram a identificação de uma forma amorfa e outra polimórfica da SQR da OLM, diferentes daquela descrita na literatura. Logo, de acordo com os resultados obtidos, todos os métodos propostos podem ser utilizados para no controle de qualidade da OLM em SQR e produto acabado. / The prodrug olmesartan medoxomil (OLM) is a selective angiotensin II receptor blocker (ARB). In Brazil, it is available as coated tablets (Benicar®). It was approved by FDA in 2002. There is no monograph available for this drug in any official code. According to this, the main purpose of this study was to develop a quality control analytical methodology for OLM in bulk material and dosage form, to establish in vitro dissolution kinetic for OLM coated tablets, and to investigate the crystalline behavior of OLM bulk material. The investigation of melting range and application of techniques such as infrared spectrophotometry (IR), as well as the 1H and 13C nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy were used to identify OLM. Ultraviolet (UV) spectrophotometry, thin-layer chromatography (TLC), highperformance liquid chromatography (LC) and micellar electrokinetic chromatography (MEKC) were used for qualitative analysis of the drug in coated tablets. The quantitative determination was carried out through the development and validation of a stability-indicating LC and MEKC methods, evaluating the parameters described in the guidelines such as: specificity, robustness, linearity, detection and quantitation limits, precision, and accuracy. The results were compared statistically by ANOVA (p = 0.05), and no difference was found between them for both bulk material and coated tablets. A dissolution test was developed and validated according to the guideline proposed by the USP Forum, using 900 ml of dissolution medium containing 0.5% of sodium lauryl sulfate (w/V) pH 6.8, at 37 ± 0.5 °C, paddle at 50 rpm, and quantitation by LC and UV spectrophotometry. The resulting dissolution profiles did not show statistical difference (p > 0.05) between methods. The dissolution profiles of Benicar®, reference formulation, and Olmetec®, another commercial formulation available, were considered similar, using model independent (f1, f2, and dissolution efficiency) methods. The dissolution kinetic of both formulations, using model dependent approaches, revealed that Benicar® followed the Hixson-Crowell model, while Olmetec® the zero-order model. The calculated values of t50% and t80%, obtained from zero-order equation, were similar of experimental values found in the dissolution profile for both products. The attenuated total reflectance Fourier transformed infrared (ATR-FTIR) spectrophotometry, along with differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetry (TG), X-ray powder diffraction (XRPD), and scanning electron microscopy (SEM) allowed to identify one amorphous and other polymorphic forms of OLM. According to the obtained results, all proposed methods could be used in the quality control of OLM bulk material and coated tablets.