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Estudo fitoquimico de Poecilanthe parviflora Benth. e Lonchocarpus atropurpureus Benth. (Leguminosae) isolamento, determinação estrutural e atividade biologica

Ruiz, Ana Lucia Tasca Gois, 1972- 24 July 2018 (has links)
Orientador: Eva Gonçalves Magalhães / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-24T06:11:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ruiz_AnaLuciaTascaGois_M.pdf: 3596278 bytes, checksum: 7ed9784fcb93623487d38260733b3022 (MD5) Previous issue date: 1998 / Mestrado
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Aplicação de silica, contendo o grupo etilenodiamina ancorado, como fase estacionaria para CLAE

Silva, Cesar Ricardo da 24 July 2018 (has links)
Orientador: Isabel Cristina Sales Fontes Jardim / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-24T07:24:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_CesarRicardoda_M.pdf: 2555049 bytes, checksum: d86781396350cecdb1267f041e6427ea (MD5) Previous issue date: 1998 / Mestrado
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Estudo da imobilização, via radiação gama, da fase estacionaria liquida, polimetiloctadecilsiloxano, sobre suporte de silica para uso em cromatografia liquida de alta eficiencia (CLAE)

Hespanhol, Maria do Carmo 18 July 2018 (has links)
Orientador : Isabel Cristina Sales Fontes Jardim / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-18T06:22:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hespanhol_MariadoCarmo_M.pdf: 4715127 bytes, checksum: 4806b1942e755bb4fd3ecb621d5fe342 (MD5) Previous issue date: 1993 / Mestrado
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Avaliação da contaminação de oleos vegetais e azeites por benzo (A) pireno

Pupin, Antonio Marcos, 1963- 17 March 1994 (has links)
Orientador: Maria Cecilia Figueiredo Toledo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-18T23:17:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pupin_AntonioMarcos_M.pdf: 3268218 bytes, checksum: 26b631d2f6cf0b857e22a39427bd579d (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Amostras de óleos comerciais de alho, arroz, canola, girassol, railho, palma (azeite de dendê) e soja e de azeites deoliva foram analisadas quanto ao teor de benzo(a)pireno (B(a)P).Foram também avaliadas possíveis fontes de contaminação de óleos de milho e soja, incluindo a secagem do grão, diferentes etapas do processo de refino e o solvente de extração. A metodologia analítica envolveu extração liquido liquido, limpeza em coluna de sílica gel e determinação por cromatografia líquida de alta eficiência. 0 limite de detecção do B(a)P foi de 0,5 jig/Kg e sua recuperação média, 97,2%. Os teores médios de B(a)P encontrados em óleos de arroz, girassol, milho, palma, soja e em azeite de oliva foram respectivamente: 1,8 ; 0,2 ; 10,8 ; 2,1; 2,2 e 10,9 ug/Kg. Nos óleos de alho e canola não foi detectada a presença de B(a)P. As amostras de azeites de oliva apresentaram níveis variados de contaminação.Os menores níveis de B(a)P (n.d. a 1,2 ug/Kg) foram determinados em azeites de oliva importados da Europa. Azeites importados da Europa, porém embalados no Brasil, e azeites de oliva mistos com óleos de soja e milho mostraram teores relativamente maiores de B (a)P, variando entre n.d. a 9,7 e 2,2 a 9,2 jig/Kg, respectivamente. Azeites de oliva provenientes da Argentina apresentaram os maiores níveis de contaminação, com até 164, 4 j-íg/Kg de B (a) P. Não foi detectada a presença de B{a)P em grãos de milho e de soja antes e após o processo de secagem. A hexana, solvente de extração do óleo, mostrou-se contaminada com níveis médios de B{a)P de 4,1 ug/Kg, sugerindo sua participação na contaminação de óleos. A partir dos níveis de B(a)P encontrados nos óleos analisados e com base em dados de consumo destes produtos pela população, estimou-se que os óleos de soja e de milho contribuem com 0,09 e 0,4 [iq de B(a)P na dieta total diária do consumidor brasileiro, respectivamente / Abstract: Samples of vegetable oils on the brazilian market including canola, corn, soybean, sunflower, rice, palm, garlic and olive oils were analysed for benzo(a)pyrene (B(a)P). Possible sources of contamination of soybean and corn oils, such as the grain drying, different steps of the refining process and the extraction solvent were also evaluated. The analytical method involved liquid-liquid extraction, clean-up on silica gel column and determination by high performance liquid chromatography with fluorescence detector. The limit of detection was 0.5 ug/Kg, and the mean recovery was 92,7%. The mean level of B(a)P in rice, sunflower, soybean, corn, palm and olive oils were: 1.8 ; 0.2 ; 2.1 ; 10.8 ; 2.2 and 10.9 ug/Kg, respectively. No B(a)P was detected in garlic and rapeseed oils. Samples of olive oils showed variable levels of contamination. The lowest B(a)P levels (n.d. to 1.2 ug/Kg) were determined in olive oil imported from Europe. European olive oils packed in Brazil and olive oils blended with soybean and corn oils showed relatively higher levels of B(a)P, in the range of n.d. to 9.7 and 2.2 to 9.2 ug/Kg, respectively. Olive oils imported from Argentine showed the highest levels of contamination, up to 164.4 ug/Kg. No B(a)P was found in soybean and corn grains either before or after the drying process. Hexan, the oil extraction solvent, showed a mean level of 4.1 ug/Kg B(a)P, suggesting its participation in the oil contamination. Based on the average consumption of vegetable oils in Brazil and on their content of B(a)P, individual daily intakes of 0.09 and 0.4 ug B(a)P through the consumption of soybean and corn oils were estimated, respectively / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos
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Estudo de carotenoides por espectrometria de massas e cromatografia liquida de alta eficiencia

Mercadante, Adriana Zerlotti, 1962- 16 December 1994 (has links)
Orientador: Delia Rodriguez-Amaya / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-19T15:27:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mercadante_AdrianaZerlotti_D.pdf: 5186908 bytes, checksum: 1f64f65714825edec82f10c0f2d95e66 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Devido a várias funções ou ações atribuídas aos carotenóides, tem havido um amplo esforço mundial para se obter dados analíticos confiáveis sobre esses compostos. Como há um número muito grande de carotenóides, um dos maiores problemas analíticos é a sua identificação conclusiva. O uso criterioso de parâmetros clássicos de identificação (tempo de retenção, co-cromatografia, espectros de absorção e reações químicas), aplicados à cromatografia líquida de alta eficiência, permitiu a identificação dos seguintes carotenóides da manga cultivares, Keitt e Tommy Atkins: trans-p-caroteno, p-criptoxantina (cis e trans), trans-zeaxantina, luteoxantina (cis e trans), violaxantina (trans, 9-cis e 13-cis) e neoxantina (cis e trans). Sem especificação da forma geométrica (isomérica), estes carotenóides e adicionalmente luteína e epoxi-ß-caroteno tiveram suas identidades confirmadas por espectrometria de massas. Todos os espectros de massas dos carotenóides mostraram o pico do íon molecular e as esperadas fragmentações características. A composição quantitativa foi determinada por CLAE com padronização interna, empregando Sudan I. Uma coluna de ciano, com gradiente de acetona em n-hexano como fase móvel, foi utilizada porque proporcionou uma melhor separação das xantofilas em comparação com a coluna de C18, e possibilitou o uso de Sudan I como padrão interno. As mangas Keitt e Tommy Atkins apresentaram trans-violaxantina como o principal carotenóide, seguido de 9-cis-violaxantina e p-caroteno. Apesar de ter ocorrido uma variação razoável entre lotes da mesma cultivar, trans-violaxantina, 9-cis-violaxantina, neoxantina e cisneoxantina tenderam a teores maiores na cv. Tommy Atkins, enquanto o conteúdo de zeaxantina foi maior na cv. Keitt. Comparando a composição de carotenóides das mangas Keitt provenientes de dois Estados, verificou-se que o p-caroteno apresentou concentração duas vezes maior na manga procedente da Bahia, Estado com clima mais quente, do que na procedente de São Paulo. Os teores de trans- e 9-cis-violaxantina também foram maiores nas mangas da Bahia, aproximando-os dos níveis encontrados na cv. Tommy Atkins de São Paulo. Durante o amadurecimento das mangas Keitt e Tommy Atkins, os teores de p-caroteno e violaxantina praticamente triplicaram, 9-cisviolaxantina quadruplicou e a pequena quantidade de 13-cis-violaxantina desapareceu ou ficou reduzida-a traços. Houve um ligeiro aumento de ß-criptoxantina, luteoxantina e neoxantina durante o amadurecimento das frutas. Em termos de porcentagens, apenas pequenas transformações' foram notadas, sendo a mudança mais nítida a diminuição de neoxantina e 13-cis-violaxantina. Com o desaparecimento dia violaxantina, os sucos de manga de três marcas comerciais apresentaram p-caroteno como carotenóide predominante, seguido de auroxantina, carotenóide ausente na fruta fresca. Os teores de ß-caroteno se situaram dentro da faixa obtida para a manga "in natura". Com o auxílio do espectro de absorção no UV-visível, espectro de massas e, quando necessário, reações de isomerização e redução, foram identificados treze carotenóides em maracujá: fitoeno, fitoflueno, ?-caroteno (principal), neurosporeno, ß -caroteno, licopeno, prolicopeno, epoxi-ß-caroteno, ß-criptoxantina, ß-citraurina, anteraxantina, violaxantina e neoxantina. As duas colunas (C18 e ciano) com várias combinações de solventes como fase móvel, não se mostraram eficientes para separar os carotenóides do maracujá. Também utilizando espectrometria de massas, confirmou-se o carotenóide monoidroxilado, encontrado em verduras folhosas brasileiras, como sendo a a-criptoxantina. Este carotenóide, embora em pequena quantidade, foi detectado em todas as onze verduras analisadas, enquanto o acaroteno foi encontrado em apenas quatro dessas verduras / Abstract: Considering the many functions or actions attributed to carotenoids, there is a worldwide effort to obtain reliable analytical data on these compounds. Since there is a large number of natural carotenoids, one of the main analytical problems is conc1usive identification. With the combined use of c1assical parameters (retention time, spiking, visible absorption spectra and chemical reactions) applied to high performance liquid chromatography (HPLC), the folIowing carotenoids were identified in mango cultivars Keitt and Tommy Atkins: trans-ß-carotene, ßcryptoxanthin (cis and trans), trans-zeaxanthin, luteoxanthin (cis and trans), violaxanthin (trans, 9-cis and 13-cis) and neoxanthin (cis and trans). Mass spectrometry confinned the identity, but not the geometric (isomeric) form, of these carotenoids, additionalIy detecting lutein and epoxy-ß-carotene when a large amount of sample was utilized. AlI carotenoids showed the molecular ion peak and the expected characteristic fragmentations. The quantitative composition was determined by HPLC with internal calibration, using Sudan I. A nitrile column, with a gradient of acetone in n-hexane as mobile phase, was utilized because it allowed better separation of the xanthophylls than the C18 column and Sudan I could be used as internal standard. The mango cultivars Keitt and Tommy Atkins presented trans-violaxanthin as the major carotenoid followed by 9-cis-violaxanthin and ß-carotene. Although some variation occurred between lots of the same cultivar, trans-violaxanthin, 9-cisviolaxanthin, neoxanthin and cis-neoxanthin tended to have higher levels in cv. Tommy Atkins. On the other hand, the zeaxanthin content was higher in cv. Keitt. Comparing the carotenoid composition of mangoes Keitt from two different states, the ß-carotene level in mangoes from Bahia State, a state with a hot c1imate, was twice that of São Paulo mangoes. The trans- and 9-cis-violaxanthin contents were also higher in the mangoes from Bahia, being c10ser to the levels found in Tommy Atkins, from São Paulo. During ripening of the mangoes cv. Keitt and Tommy Atkins, ßcarotene and violaxanthin increased three-fold and 13-cis-violaxanthin four-fold. The small amount of 13-cis-violaxanthin disappeared or was reduced to trace amount. ßCryptoxanthin, luteoxanthin and neoxanthin contents increased slightly with ripening. In terms of percentages, on1y small transformations could be observed, the most distinct change being the decrease of neoxanthin and 13-cis-violaxanthin. With the disappearance of violaxanthin, the mango juice of three commercial brands presented ß-carotene as the major carotenoid followed by auroxanthin, which was not detected in the fresh fruit. The ß-carotene contents fell within the range obtained for fresh mangoes. Using the data from chromatographic behavior, UV-visible spectra, mass spectra and, when necessary, specific chemical reactions, thirteen carotenoids were identified in passion fruit: phytoene, phytofluene, ?-carotene (principal), neurosporene, ß-carotene, lycopene, prolycopene, epoxi-ß-carotene, ß-cryptoxanthin, ß-citraurin, antheraxanthin, violaxanthin and neoxanthin. Many solvent systems and two columns (C18 and ciano) were tested but were found inefficient to separate all the passion fruit carotenoids. Mass spectrometry was also employed to confmn the monohydroxy carotenoid found in Brazilian leafy vegetables as a-cryptoxanthin. This carotenoid was detected in all of the eleven leaves analysed while a-carotene was found only in four / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos
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Preparação de líquidos iônicos imidazólicos derivados do safrol e sua aplicação no pré-tratamento de biomassa lignocelulósica

Lins, Roberto Manoel Gonçalves, 1991-, Rebelo, Ricardo Andrade, 1960-, Universidade Regional de Blumenau. Programa de Pós-Graduação em Química. January 2016 (has links) (PDF)
Orientador: Ricardo Andrade Rebelo. / Dissertação (Mestrado em Química) - Programa de Pós-Graduação em Química, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau.
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Desenvolvimento e validação de método analítico empregando DLLME e HPLC/UV para determinação de benzodiazepínicos em amostra de água / Development and validation of analytical method employing DLLME and HPLC/UV for the determination of benzodiazepines in water sample

Marques, Tamires Valim, 1987- 02 December 2014 (has links)
Orientador: Rodnei Bertazzoli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica / Made available in DSpace on 2018-08-24T13:08:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marques_TamiresValim_M.pdf: 6834346 bytes, checksum: 5eb1bc6d88a438ca9002c92109a6c660 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A crescente preocupação com a poluição das águas por novos poluentes denominados emergentes tem se intensificado, visto que aumentou o número destes compostos detectados em água. Dentre estes compostos encontram-se os fármacos e produtos de higiene pessoal, usados cotidianamente pela população. O presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de um método simples, rápido e sensível utilizando a microextração líquido líquido (DLLME) combinada com a cromatografia líquida de ultra eficiência (HPLC) com detecção ultravioleta (UV) para a determinação de alguns benzodiazepínicos (bromazepam, clonazepam e diazepam) em amostras de água. A determinação foi realizada em uma coluna C18 de acordo com as condições cromatográficas ótimas (fase móvel acetonitrila:água (60:40, v/v); vazão 1,2 mL min-1; detecção 225 nm). No método de extração, uma mistura apropriada de solvente extrator e dispersor foi injetada rapidamente na amostra aquosa (10 mL) com auxílio de uma seringa. De modo que uma solução turva foi formada, esta solução é caracterizada por conter pequenas partículas do solvente extrator que se dispersa na fase aquosa. Os parâmetros da extração, tais como natureza e volume dos solventes extrator e dispersor, tempo de extração, pH da amostra, força iônica, velocidade e tempo de centrifugação, foram estudados para a otimização. Com as condições ótimas definidas (solvente extrator: clorofórmio, 200 ?L; solvente dispersor: metanol, 700 ?L; pH da amostra 9,0; velocidade e tempo de extração: 5000 rpm, 1 minuto; força iônica: adição de 1% (p/v) de (NH4)2SO4) o método proposto foi validado seguindo as figuras de método preconizadas pela ANVISA na Resolução N° 899 de 2003. A faixa linear para cada fármaco foram 8,0 - 96 ?g L-1 para bromazepam, 4,0 - 48 ?g L-1 para clonazepam e 1,0 - 12 ?g L-1 para diazepam. Todas as curvas obtiveram valores de (r) superiores a 0,999. Os limites de detecção e quantificação obtidos foram 2,4 e 8,0 ?g L-1 para bromazepam, 1,2 e 4,0 ?g L-1 para clonazepam, 0,2 e 1,0 ?g L-1 para diazepam, respectivamente. As recuperações variaram de 50 a 110% com RSD (Desvio Padrão Relativo) inferiores a 12,7 %. Finalmente, o método proposto foi aplicado em amostras coletadas na represa Billings localizada no município de Diadema-SP. / Abstract: The growing concern over water pollution caused by so-called new emerging pollutants has intensified since increased the number of these compounds detected in water. Among these compounds are pharmaceuticals and personal care products used daily by the population. This study aimed to develop a simple, rapid and sensitive liquid using liquid micro extraction (DLLME) combined with ultra-performance liquid chromatography (HPLC ) with ultraviolet detection (UV) for the determination of some benzodiazepines (bromazepam, clonazepam and diazepam) in water samples . The determination was performed on a C18 column in accordance with the optimal chromatographic conditions (mobile phase acetonitrile: water (60:40, v/v), flow rate 1.2 mL min-1, detection 225 nm). In the extraction method, a suitable mixture of extractant and dispersing solvent was injected rapidly into the aqueous sample (10 ml) with a syringe. So that a cloudy solution was formed, this solution is characterized by containing fine drops of the extractor solvent is dispersed in the aqueous phase. The parameters of the extraction, such as the nature and volume of the extractor and disperser solvents, extraction time, sample pH, ionic strength, speed and time of centrifugation, were studied for optimization. With the defined optimal conditions (extracting solvent: chloroform, 200 ?L; disperser solvent: methanol, 700 ?L, sample pH 9.0, extraction time and speed: 5000 rpm, 1 minute; ionic strength: adding 1% (p/v) (NH4)2SO4) the proposed method was validated following the figures of merit recommended by the ANVISA Resolution No. 899 of 2003. The linear ranges for each drug were 8.0 to 96 ?g L- 1 for bromazepam, 4.0 to 48 ?g L- 1 for clonazepam and 1.0 to 12 ?g L- 1 for diazepam. All curves obtained values (r) greater than 0.999. The limits of detection and quantification obtained were 2.4 and 8.0 ?g L- 1 to bromazepam, 1.2 and 4.0 ?g L- 1 to clonazepam, 0.2 and 1.0 ?g L- 1 for diazepam, respectively. Recoveries ranged from 50 to 110% with RSD (Relative Standard Deviation) of less than 12.7%. Finally, the proposed method was applied to samples collected in the Billings dam located in Diadema-SP. / Mestrado / Materiais e Processos de Fabricação / Mestre em Engenharia Mecânica
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Desenvolvimento de uma metodologia de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) para análise SARA de petróleo. / Development of methodology by high perform liquid chromatography (HPLC) for petroleun SARA analysis.

Ramos, Rodrigo Ricardo 09 June 2014 (has links)
Este trabalho teve como principal objetivo o desenvolvimento da técnica de cromatografia líquida de alta eficiência para a análise SARA de amostras de petróleo. As amostras de petróleo foram separadas em frações contendo saturados, aromáticos, resinas e asfaltenos. Para se obter êxito no desenvolvimento da técnica de cromatografia líquida em escala preparativa, o primeiro passo foi o desenvolvimento da técnica em escala analítica. Os parâmetros encontrados foram então extrapolados para escala preparativa. Através da técnica de cromatografia líquida de alta eficiência desenvolvida, foi possível obter uma separação eficaz das frações SARA de amostras de petróleo, resultado que não se mostra tão eficiente quando se trabalha com cromatografia líquida clássica. As comparações entre as metodologias por cromatografia clássica de coluna aberta e cromatografia líquida de alta eficiência desenvolvida no trabalho mostram que a cromatografia líquida possui enorme vantagem em relação à metodologia clássica. Dentre elas podemos destacar a grande reprodutibilidade já que os parâmetros de análise são altamente controlados o que não ocorre em cromatografia de coluna aberta, além da capacidade de automação e menor risco ocupacional. As frações separadas foram caracterizadas por espectrometria de massas, espectroscopia de fluorescência e infravermelho. Através da espectrometria de massas foi possível observar uma distribuição de massas entre o intervalo de massa que vai do ion de m/z 100 Da até o íon de m/z 800 Da, com esta distribuição centrada em 350 Da. A espectrometria de massa aliada a software de identificação de componentes de frações de petróleo através de massas moleculares permitiu determinar a fórmula molecular dos compostos presentes nas frações de asfaltenos das amostras de petróleo analisadas. A análise realizada pelo programa gerou os seguintes resultados: o programa encontrou estrutura molecular para aproximadamente 60% dos picos contidos no espectro de massas, destes, 6,05% dos compostos encontrados possuíam enxofre, 45,2% dos compostos possuem N e 32,1% possuem oxigênio em sua composição. A análise dos espectros de emissão de fluorescência mostrou que petróleos mais leves apresentam emissão de fluorescência mais intensas isso se deve ao fato de que petróleos mais pesados, de menor API, possuem mais espécies propensas a desativar o estado excitado, justificando assim a diminuição da emissão de fluorescência com aumento do API. / This work had as main objective the development of the technique of high performance liquid chromatography for SARA analysis of oil samples. The oil samples were separated into fractions containing saturates, aromatics, resins and asphaltenes. To achieve successful development of the technique for preparative scale liquid chromatography, the first step was the development of the technique in analytical scale. The parameters obtained were then extrapolated to preparative scale. Through the technique of high performance liquid chromatography developed, it was possible to obtain an effective separation of SARA fractions of oil samples, a result that does not show as efficient when working with classical liquid chromatography. Comparisons between both methodologies, classical and HPLC has showed that HPLC has huge advantage over classical methods. The separated fractions were characterized by mass spectrometry, fluorescence spectroscopy and infrared. Through mass spectrometry was possible to observe a distribution of masses between the mass range that goes from the ion m / z 100 Da to the ion m / z 800 Da, with this distribution centered at 350 Da. The analysis of the fluorescence emission spectra showed that lighter oils exhibit more intense fluorescence emission that is due to the fact that heavier oils, smaller API, have more likely species to disable the excited state, thus justifying the reduction of emissions fluorescence with an increased API.
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Desenvolvimento de duas estratégias de purificação de IgM a partir de plasma humano. / Development of two strategies for the purification of human plasma IgM.

Verinaud, Claudia Iwashita 06 September 2016 (has links)
Nesse trabalho foram estudadas 2 estratégias visando a purificação de IgM a partir de plasma humano. A primeira estratégia baseou-se em um processo desenhado para a fábrica de produção de hemoderivados do Instituto Butantan para a produção dos fatores de coagulação VIII e IX, albumina e IgG. Após 2 colunas cromatográficas, a IgM foi separada das 2 proteínas mais abundantes do plasma, a albumina e a IgG e o enriquecimento da IgM em relação a IgA e IgG foi bastante satisfatória. A segunda estratégia está inserida no processo de fracionamento de plasma desenvolvida em nosso laboratório. Através de um estudo sistemático em coluna de troca aniônica, obtivemos uma fração contendo IgG, uma contendo albumina, ambos praticamente puros e uma terceira contendo IgM e outras proteínas contaminantes. Os resultados obtidos indicam que a IgM pode ser purificada com sucesso empregando ambas as estratégias. Entretanto, para se obter um produto mais homogêneo, será necessário ainda adicionar uma ou mais etapas de purificação. / In this work we studied two strategies for the purification human plasma IgM. The first strategy was based on a process designed for the hemoderivatives production factory of the Butantan Institute for the production of coagulation factors VIII and IX, albumin and IgG. After 2 chromatographies, IgM was separated from the 2 most abundant plasma proteins, that is, albumin and IgG and the achieved enrichment of IgM in relation to IgG and IGA was very satisfactory. The second strategy is part of a plasma fractionation process under development in our laboratory. Through a systematic study using an anionic exchange column we separated a fraction containing IgG, a second containing albumin, being both nearly pure and a third fraction containing IgM and other contaminating proteins. The obtained results indicate that IgM can be purified successfully by both strategies. However, to obtain a more homogeneous product, additional purification steps are necessary.
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Avaliação de sistemas de cromatografia líquida uni e bidimensional acoplados a espectrometria de massas na análise do proteoma dos corpos protéicos do milho / Maize protein bodies proteome by LC-MS/MS and LC/LC-MS/MS

Bicudo, Rogério de Campos 22 June 2007 (has links)
O valor nutricional do milho é limitado devido ao seu alto conteúdo de proteínas de reserva (zeínas), que são deficientes em aminoácidos essenciais como lisina e triptofano. Por esse motivo, a Embrapa (Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária) desenvolveu a variedade de milho BR473, que tem um excelente valor energético e um maior conteúdo protéico quando comparado ao milho comum. Tal variedade possui 0,9 e 4,0 g/kg de grão de triptofano e lisina, respectivamente, contra 0,6 e 2,6 do milho comum. O alto conteúdo de lisina em algumas variedades de milho como a opaco-2 (o2), por exemplo, é relacionado à presença de proteínas não-zeínas. Para identificar essas proteínas, o que poderia explicar o alto conteúdo protéico da variedade BR473, foi analisado o proteoma dos corpos protéicos dos grãos desse milho. Para tal, foram usadas e avaliadas as cromatografias uni e bidimensional, acopladas a espectrometria de massas (LC-MS/MS e LC/LC-MS/MS), uma vez que tais técnicas se tornaram ferramentas poderosas para seqüenciamento e identificação de proteínas. Neste trabalho, foram identificadas seis proteínas por LC-MS/MS e dezesseis proteínas por LC/LC-MS/MS. / The nutritional value of maize seed is limited due to its high content of zeins (storage proteins), which are deficient in essential amino acids as lysine and tryptophan. Because of this, Embrapa (Brazilian Agricultural Research Corporation) developed the BR 473 maize variety, which has excellent energetic value and higher proteic content than the normal maize. BR 473 maize variety has 0.9 and 4.0 g/kg of grain of tryptophan and lysine, respectively, against the 0.6 and 2.6 from normal maize. The high lysine content in some maize varieties as opaque-2 (o2), for example, has been related to the presence of non-zein proteins. In order to identify them, which could explain the high proteic content of BR 473 maize variety, the protein bodies proteome of these grains were analyzed. For this purpose, one and two-dimensional liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (LC-MS/MS and LC/LC-MS/MS) were used and evaluated, since these techniques have become a powerful tool for protein sequencing and identification. We have identified six proteins by LC-MS/MS and sixteen proteins by LC/LC-MS/MS.

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