Nesse trabalho foram estudadas 2 estratégias visando a purificação de IgM a partir de plasma humano. A primeira estratégia baseou-se em um processo desenhado para a fábrica de produção de hemoderivados do Instituto Butantan para a produção dos fatores de coagulação VIII e IX, albumina e IgG. Após 2 colunas cromatográficas, a IgM foi separada das 2 proteínas mais abundantes do plasma, a albumina e a IgG e o enriquecimento da IgM em relação a IgA e IgG foi bastante satisfatória. A segunda estratégia está inserida no processo de fracionamento de plasma desenvolvida em nosso laboratório. Através de um estudo sistemático em coluna de troca aniônica, obtivemos uma fração contendo IgG, uma contendo albumina, ambos praticamente puros e uma terceira contendo IgM e outras proteínas contaminantes. Os resultados obtidos indicam que a IgM pode ser purificada com sucesso empregando ambas as estratégias. Entretanto, para se obter um produto mais homogêneo, será necessário ainda adicionar uma ou mais etapas de purificação. / In this work we studied two strategies for the purification human plasma IgM. The first strategy was based on a process designed for the hemoderivatives production factory of the Butantan Institute for the production of coagulation factors VIII and IX, albumin and IgG. After 2 chromatographies, IgM was separated from the 2 most abundant plasma proteins, that is, albumin and IgG and the achieved enrichment of IgM in relation to IgG and IGA was very satisfactory. The second strategy is part of a plasma fractionation process under development in our laboratory. Through a systematic study using an anionic exchange column we separated a fraction containing IgG, a second containing albumin, being both nearly pure and a third fraction containing IgM and other contaminating proteins. The obtained results indicate that IgM can be purified successfully by both strategies. However, to obtain a more homogeneous product, additional purification steps are necessary.

Nesse trabalho foram estudadas 2 estratégias visando a purificação de IgM a partir de plasma humano. A primeira estratégia baseou-se em um processo desenhado para a fábrica de produção de hemoderivados do Instituto Butantan para a produção dos fatores de coagulação VIII e IX, albumina e IgG. Após 2 colunas cromatográficas, a IgM foi separada das 2 proteínas mais abundantes do plasma, a albumina e a IgG e o enriquecimento da IgM em relação a IgA e IgG foi bastante satisfatória. A segunda estratégia está inserida no processo de fracionamento de plasma desenvolvida em nosso laboratório. Através de um estudo sistemático em coluna de troca aniônica, obtivemos uma fração contendo IgG, uma contendo albumina, ambos praticamente puros e uma terceira contendo IgM e outras proteínas contaminantes. Os resultados obtidos indicam que a IgM pode ser purificada com sucesso empregando ambas as estratégias. Entretanto, para se obter um produto mais homogêneo, será necessário ainda adicionar uma ou mais etapas de purificação. / In this work we studied two strategies for the purification human plasma IgM. The first strategy was based on a process designed for the hemoderivatives production factory of the Butantan Institute for the production of coagulation factors VIII and IX, albumin and IgG. After 2 chromatographies, IgM was separated from the 2 most abundant plasma proteins, that is, albumin and IgG and the achieved enrichment of IgM in relation to IgG and IGA was very satisfactory. The second strategy is part of a plasma fractionation process under development in our laboratory. Through a systematic study using an anionic exchange column we separated a fraction containing IgG, a second containing albumin, being both nearly pure and a third fraction containing IgM and other contaminating proteins. The obtained results indicate that IgM can be purified successfully by both strategies. However, to obtain a more homogeneous product, additional purification steps are necessary.

Δ9-Tetrahydrocannabinol (THC) is the most psychoactive substance out of the over 80 active cannabinoids. Due to its psychoactive and impairing properties, detection and quantitation is important to determine impairment levels of individuals. With an increased use of recreational marijuana, the risk of Driving Under the Influence of Drugs (DUID) is steadily increasing. Current legislation outlaws driving under the influence of Marijuana however there exists limitations with current methods of detection of drug analyte. Δ9-Tetrahydrocannabinol, 11-Hydroxy- THC, and 11-nor-carboxy-THC, were used in detection because these analytes are produced in the metabolism of THC. Since THC is very lipid soluble, it is present in lipid rich environments in the body. Due to the lipid rich nature of meibomian fluid, a component of tears, and the presence of Fatty Acid Binding Protein (5) FAPB5, a protein known to bind to cannabinoids, tear fluid could be used as a less-invasive biological matrix to test for the presence of THC and its metabolites. This project optimized a collection of tear fluid, along with a simple buffer extraction, to create a method suitable for direct injection using LC-MS/MS. Collection was completed by BVI Weck-Cel® Sterile Cellulose strips, measuring approximately 2 x 20 mm, and placed in Thompson eXtreme PVDF 0.2 𝜇m, pre-slit, red cap, filter vials containing Quantisal buffer solution for extraction. All analysis and calibrations were completed with fortified matrix standards with concentrations ranging from 0.25 - 250 ng/mL. Validation was consistent with American Academy of Forensic Sciences Academy Standards Board (ASB) Standards of Forensic Toxicology Standard 036, First Edition 2018. Tear samples were collected from volunteer patients according to Institutional Review Board (IRB) standards before and after administration of Marijuana. Samples were collected approximately 30 minutes post administration in order to capture tears when the analyte is most potent in the body. Samples and calibration standards were analyzed using Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS) with the QSight® 220 CR LC-MS/MS and the Halo® C18 3.0x50 mm (2.7 µm) column. Limit of Detection (LOD) and Limit of Quantitation (LOQ) for THC was calculated at 0.25 ng/mL. Limit of Detection of THCOOH was detected at 0.25 ng/mL and Limit of Quantitation was calculated at 1 ng/mL. Upon analysis of Patient Samples, it was determined that THC and metabolites could be detected and quantitated in tear fluid. However, it is noted that insufficient sample volume in collection of this type of sample is an issue that leads to poor quantitation and should be optimized in future research.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-01-19Bitstream added on 2014-06-13T20:18:20Z : No. of bitstreams: 1 nogueira_cr_me_araiq.pdf: 3939682 bytes, checksum: f8705affaf8fef2708da3356ae2f0d01 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho descreve o isolamento e identificação dos constituintes químicos de Aristolochia melastoma Manso. O extrato acetônico de caules e raízes foi fracionado por cromatografia em coluna de sílica gel, e as frações obtidas foram submetidas a outros fracionamentos cromatográficos (CCDP, Sephadex LH-20, CC de C-18 e CLAE) e/ou lavagens com solventes orgânicos, resultando no isolamento de vinte compostos conhecidos: aristolactama AII, 9,9'-diacetato-secoisolariciresinol dimetil éter, tirosol, ácido p-hidroxibenzóico, ácido vanilínico, ácidos aristolóquicos I e II, aristolocatos de sódio IIIa e IVa, 4,5-dioxodeidroasimilobíneo, aristolocato de sódio I, sitosterol 3-O-β-D-glucopiranosídeo, glicerol, talictosídeo, uridina, talictricosídeo, icarisídeo D2, adenosina, kaempferol 3-O-β-robinobiosídeo e isorhamnetina 3-O-β-robinobiosídeo. A lignana 9,9'-diacetato-secoisolariciresinol dimetil éter e talictricosídeo são relatados pela primeira vez na família Aristolochiaceae. As identificações desses compostos foram baseadas nas análises dos seus dados espectrométricos (RMN 1D e 2D, UV e EM). Além disso, a análise dos dados obtidos a partir de literatura especializada acerca da ocorrência e biogênese de derivados nitrofeniletílicos sugere que a família Aristolochiaceae pode ter evoluído no sentido de formação de compostos nitrados / This work describes the isolation and identification of the chemical constituents of A. melastoma Manso. The acetone extract from stems and roots was fractionated by CC over silica gel and the resultant fractions were subjected to other chromatographic methods (PTLC, Sephadex LH-20, CC RP-18, and HPLC) and/or washed with organic solvents to give twenty known compounds: aristolactam AII, secoisolariciresinol dimethyl ether diacetate, tyrosol, p-hydroxybenzoic acid, vanillic acid, sodium aristolochates I, IIIa, and IVa, 4,5-dioxodehydroasimilobine, aristolochic acids I and II, sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside, glycerol, uridine, thalictoside, icariside D2, adenosine, thalictricoside, kaempferol 3-O-β-robinobioside, and isorhamnetin 3-O-β-robinobioside. Among these, secoisolariciresinol dimethyl ether diacetate and thalictricoside have being reported for the first time in the Aristolochiaceae family. The identifications of these compounds were based on analyses of their spectroscopic data (1D- and 2D-NMR, UV, and MS). Furthermore, an analysis of data obtained from specialized literature on the occurrence and biogenesis of nitrophenylethyl derivatives suggests that the Aristolochiaceae family may have evolved towards nitro compounds

Orientador: Lucia Maria Xavier Lopes / Banca: André Luiz Meleiro Porto / Banca: Lidilhone Hamerski Carbonezi / Resumo: O presente trabalho descreve o isolamento e identificação dos constituintes químicos de Aristolochia melastoma Manso. O extrato acetônico de caules e raízes foi fracionado por cromatografia em coluna de sílica gel, e as frações obtidas foram submetidas a outros fracionamentos cromatográficos (CCDP, Sephadex LH-20, CC de C-18 e CLAE) e/ou lavagens com solventes orgânicos, resultando no isolamento de vinte compostos conhecidos: aristolactama AII, 9,9'-diacetato-secoisolariciresinol dimetil éter, tirosol, ácido p-hidroxibenzóico, ácido vanilínico, ácidos aristolóquicos I e II, aristolocatos de sódio IIIa e IVa, 4,5-dioxodeidroasimilobíneo, aristolocato de sódio I, sitosterol 3-O-β-D-glucopiranosídeo, glicerol, talictosídeo, uridina, talictricosídeo, icarisídeo D2, adenosina, kaempferol 3-O-β-robinobiosídeo e isorhamnetina 3-O-β-robinobiosídeo. A lignana 9,9'-diacetato-secoisolariciresinol dimetil éter e talictricosídeo são relatados pela primeira vez na família Aristolochiaceae. As identificações desses compostos foram baseadas nas análises dos seus dados espectrométricos (RMN 1D e 2D, UV e EM). Além disso, a análise dos dados obtidos a partir de literatura especializada acerca da ocorrência e biogênese de derivados nitrofeniletílicos sugere que a família Aristolochiaceae pode ter evoluído no sentido de formação de compostos nitrados / Abstract: This work describes the isolation and identification of the chemical constituents of A. melastoma Manso. The acetone extract from stems and roots was fractionated by CC over silica gel and the resultant fractions were subjected to other chromatographic methods (PTLC, Sephadex LH-20, CC RP-18, and HPLC) and/or washed with organic solvents to give twenty known compounds: aristolactam AII, secoisolariciresinol dimethyl ether diacetate, tyrosol, p-hydroxybenzoic acid, vanillic acid, sodium aristolochates I, IIIa, and IVa, 4,5-dioxodehydroasimilobine, aristolochic acids I and II, sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside, glycerol, uridine, thalictoside, icariside D2, adenosine, thalictricoside, kaempferol 3-O-β-robinobioside, and isorhamnetin 3-O-β-robinobioside. Among these, secoisolariciresinol dimethyl ether diacetate and thalictricoside have being reported for the first time in the Aristolochiaceae family. The identifications of these compounds were based on analyses of their spectroscopic data (1D- and 2D-NMR, UV, and MS). Furthermore, an analysis of data obtained from specialized literature on the occurrence and biogenesis of nitrophenylethyl derivatives suggests that the Aristolochiaceae family may have evolved towards nitro compounds / Mestre

Orientador: Jose Pedrazzolli Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T08:01:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cruz_AlessandrodeCarvalho_M.pdf: 6535924 bytes, checksum: 32e397fd65c63f6c293df90358e9eff3 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Neste trabalho, a codeína foi determinada em plasma humano, através de metodologia analítica baseada no acoplamento da extração sólido-líquido "online" HPLC-MS/MS por electrospray positivo. O método foi desenvolvido visando a injeção direta de amostras plasmáticas sem prévio tratamento. O padrão interno utilizado foi o tramadol. O tempo total de análise foi de 3 min./amostra e devido ao sincronismo entre a corrida cromatográfica e a extração "on-line" automatizada o método possibilita a análise de mais de 400 amostras por dia. O uso de coluna monolítica (Chromolith Performance RP-18e, 100 mm x 4.6 mm) e extração em fase sólida automatizada (sistema Prospekt 2) demonstrou ser altamente eficiente em relação à resolução dos picos cromatográficos, tempo de retenção e pressão no interior da coluna cromatográfica. A curva de calibração foi definida com o intervalo de concentração de 5 à 200 ng/mL, atingindo boa linearidade. Excelentes resultados foram alcançados em relação à precisão e exatidão intra e inter-dia apresentando uma variação de 2.33 à 7.25% (CV%) e 2.35 à 9.97% (RE%), respectivamente. A metodologia analítica desenvolvida neste trabalho, baseada no acoplamento "on-line" SPE-HPLC-MS/MS apresentou boa seletividade, robustez, exatidão e precisão, bem como uma alta produtividade nas análises para determinação de codeína em plasma humano / Abstract: A specific LC-MS/MS method was developed and validated for automated determination of codeine in human plasma, using on-line solid-phase extraction (SPE) system coupled with positive ion electrospray ionization tandem mass spectrometry. Method allowed plasma direct injection onto cartridge without sample pre-treatment. Total analysis time per run was 3 min, allowing high-throughput for codeine determination. SPE on-line along monolithic column (Chromolith Performance RP-18e, 100 mm x 4.6 mm) demonstrated to be highly effective in terms of backpressure, separation speed and peak asymmetry. Calibration curves range was linear 5.0-200 ng/mL. Method showed an excellent intra-assay and inter-assay precision ranged from 2.33 to 7.25% (CV%) as well as great intra-assay and inter-assay accuracy, ranging from -2.35 to 9.97% (RE%). SPE-LC-MS/MS method provided selectivity, robustness, accuracy, precision and high-throughput to assess codeine pharmacokinetics in human plasma samples / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientadores: Helena Teixeira Godoy, Adriana Dillenburg Meinhart / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-21T21:32:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silveira_TayseFerreiraFerreirada_M.pdf: 1868575 bytes, checksum: 8629665bddc67f1a79ffda3ae8c84789 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: As folhas e talos da erva-mate (Ilex paraguariensis St. Hillaire) são empregadas no preparo do chimarrão e do chá mate. Estas bebidas apresentam elevada importância biológica devido à alta concentração de compostos fenólicos presente na erva-mate. No entanto, nota-se que dados acerca da composição química de extratos obtidos simulando a forma como essas bebidas são comumente preparadas pelo consumidor ainda são escassos. Assim, neste trabalho foi investigado o efeito da temperatura da água (65°C, 75°C, 85°C e 95°C) sobre os teores de rutina e dos ácidos gálico, siríngico, cafeico, ferrúlico, p-cumárico, 5-cafeoilquínico, 3,4-dicafeoilquínico, 3,5-dicafeoilquínico e 4,5-dicafeolquínico, transferidos da erva-mate (moída grossa e tradicional) para os extratos aquosos de chimarrão, os quais foram preparados da mesma forma como a bebida é tradicionalmente consumida. Além disso, foi realizado um estudo multivariado, utilizando-se um planejamento composto central e a técnica de otimização simultânea de respostas descrita por Derringer e Suich, para determinar as condições ótimas de preparo da bebida de chá mate (otimizando o tempo de infusão, temperatura e volume de água), com a finalidade de obter os níveis máximos de transferência dos ácidos 5-cafeoilquínico, 3,4-dicafeoilquínico, 3,5-dicafeoilquínico, 4,5-dicafeolquínico do chá para a bebida pronta para consumo. As condições ótimas foram utilizadas no preparo de bebidas a partir de amostras comerciais de chá mate. As análises foram realizadas por cromatografia líquida de alta eficiência. Para viabilizar a determinação dos compostos nos extratos aquosos das bebidas, um método cromatográfico foi desenvolvido e otimizado utilizando-se um planejamento composto central e a função de desejabilidade de Derringer e Suich. As variáveis otimizadas foram a concentração inicial e final de metanol e tempo de gradiente. As respostas estudadas foram a resolução e a simetria dos picos. O método otimizado resultou em um gradiente de 39,4 minutos que variou de 13,9% a 40% de metanol. Os resultados dos parâmetros de validação do método indicaram que este foi adequado para a determinação e quantificação de compostos fenólicos nos extratos aquosos de erva-mate. De acordo com os dados obtidos, a temperatura da água de preparo do chimarrão não afetou significativamente os níveis de compostos fenólicos presentes nos extratos aquosos obtidos a partir da erva-mate tradicional. Comportamento oposto foi verificado para os extratos preparados com erva-mate moída grossa, onde o aumento da temperatura favoreceu a obtenção de extratos com níveis mais elevados de compostos fenólicos. Quanto ao preparo do chá mate todas as variáveis estudadas apresentaram efeito positivo significativo. As condições ótimas de preparo a partir de 2 g de chá foram 16 minutos de infusão, em 300 mL de água a 95°C. As bebidas de chá mate obtidas nestas condições, a partir de amostras comerciais de chá, apresentaram teores dos ácidos 5-cafeoilquínico, 3,4-dicafeoilquínico, 3,5-dicafeoilquínico, 4,5-dicafeolquínico que variaram entre 3,72±0,17 mg e 31,06±8,75 mg, 0,52±0,01 mg e 6,17±0,99 mg, 0,33±0,043 mg e 26, 18±9,96 e 0,80±0,02 mg e 15,84±5,69 mg, respectivamente. Os extratos aquosos do chimarrão e do chá mate preparados apresentaram níveis elevados de compostos fenólicos e podem ser considerados como fontes potenciais destes compostos para a dieta / Abstract: Yerba mate (Ilex paraguariensis), a plant originated from South America, is employed for preparing "chimarrao¿ and the mate tea beverage. Many biological assays have postulated the beneficial consequences from the consumption of these beverages, which are rich in phenolic compounds and other phytochemicals, for the human health. However, it could be noted that there is a lack of data concerning to chemical composition of the extracts obtained by simulating the way as the beverages are popularly prepared, considering the possible variations that could exist due to the homemade preparation, as temperature and time of contact of the leaves with water. Thus, in this research it was investigated the impact of the water temperature (65°C, 75°C, 85°C and 95°C) upon the levels of gallic acid, syringic acid, caffeic acid, ferulic acid, p-coumaric acid, 5-caffeoyilquinic acid, 3,4-dicaffeoyilquinic acid, 3,5- dicaffeoyilquinic acid, 4,5- dicaffeoyilquinc acid and rutin transferred from yerba mate (course ground and traditional) to the aqueous extracts of "chimarrao¿, obtained by reproducing in the laboratory the homemade preparation. Moreover, a multivariate study was conducted, employing a central composite design and the Derringer and Suich¿s desirability function, to determine the optimal conditions of preparing the mate tea beverage, aiming to reach the maximum transference of 5-caffeoyilquinic, 3,4-dicaffeoyilquinic, 3,5-dicaffeoyilquinic and 4,5-dicaffeoyilquinc acids, from the tea to the ready to drink beverages. The parameters evaluated were time of infusion, temperature and volume of water. The optimal conditions found were applied for preparing mate tea beverages from commercial tea samples. The extracts were analyzed by reversed phase high performance liquid chromatography. To make viable the analysis of the aqueous extracts, a chromatographic method was developed and optimized, using multivariate statistical techniques, as central composite design and the desirability¿s function of Derringer and Suich. The optimized method was: initial concentration of methanol 13.9%, final concentration of 40% in a gradient time of 39.4 minutes The results of the method validation indicated that it has fitted well to the phenolic compounds determination and quantification in the aqueous extracts of yerba mate. According to data, the temperature of water used to prepare "chimarrao¿ did not affect significantly the levels of the phenolic compounds obtained from traditional yerba mate. An opposite behavior was verified for the extracts prepared from course-ground yerba mate, being possible to conclude that the increase of the temperature favored the obtention of extracts with higher levels of phenolic compounds. Concerning the mate tea all the variables presented statistically significant effect upon the studied system. The optimal preparing conditions from 2 g of tea were 16 minutes of infusion, in 300 mL of water at 95°C. The beverages obtained in these conditions from commercial samples of tea presented concentrations of 5-caffeoyilquinic, 3,4-dicaffeoyilquinic, 3,5-dicaffeoyilquinic and 4,5- dicaffeoyilquinc acids varying between 3.72±0.17 mg e 31.06±8.75 mg, 0.52±0.01 mg and 6.17±0.99 mg, 0.33±0.043 mg and 26.18±9.96 and 0.80±0.02 mg and 15.84±5.69 mg, respectively. It was showed that the mate beverages extracts obtained as they are homemade prepared are excellent sources of phenolic compounds, mostly of chlorogenic acid / Mestrado / Ciência de Alimentos / Mestra em Ciência de Alimentos

Os desreguladores endócrinos são compostos micropoluentes de ação deletéria que causam efeitos aos animais e aos seres humanos. Estes vêm trazendo a várias décadas, problemas relacionados à má formação ou ainda infertilidade de várias espécies. A presença destes compostos na ordem de ng L-1 já é capaz de gerar efeitos nocivos ao sistema endócrino. Este trabalho visou à determinação da presença e quantidade de alguns destes compostos como 17α-etinilestradiol, bisfenol A e estrona entre outros, nas águas do rio Arroio Fundo, localizado em Jacarepaguá no RJ que possui um índice de qualidade de água ruim. A primeira etapa deste trabalho foi a implementação e validação de metodologia para determinação do 17α-etinilestradiol por cromatografia líquida acoplada a detector de fluorescência onde foram estabelecido limite de detecção, de quantificação e linearidade conforme orientação do Inmetro (2010). Além da avaliação das amostras ambientais através da metodologia estabelecida. Na etapa subsequente foram realizados os experimentos relativos à determinação dos desreguladores endócrinos através da espectrometria de massas por detector tipo tandem quadrupolo, onde também foram realizados os procedimentos de validação e determinação dos compostos bisfenol A e estrona que não foram suscetíveis a efeito de matriz durante a ionização, que acabou impedindo a determinação de outros desreguladores endócrinos. Os resultados indicam que não há redução da presença dos desreguladores endócrinos detectados, e de outros compostos orgânicos também detectados, mas não identificados, entre os pontos a montante e a jusante da Unidade de Tratamento do Rio Arroio Fundo. Todavia em função do grande efeito de matriz oriundo do fato da amostra ser de extrema complexidade, não foi possível realizar uma identificação e quantificação de todos os compostos alvos. / Endocrine disrupters are compounds micropollutants of deleterious effects that cause effects to animals and humans has brought these problems to several decades related to poor training or infertility of various species. The presence of these compounds in the ng L-1 order is already capable of generating negative effects on the endocrine system. This work aimed at determining the presence and amount of some of these compounds as 17α-ethinylestradiol, bisphenol A and estrone among others, in the waters of the river Arroio Fundo, located in Jacarepaguá in Rio de Janeiro that has a bad water quality index. The first stage of this work was the implementation and validation of a method for determination of 17α-ethinylestradiol by liquid chromatography-fluorescence detection which were established limit of detection, quantification and linearity as directed by Inmetro (2010). Besides the evaluation of the samples through the established methodology. In subsequent step were carried out experiments on the determination of endocrine disruptors by tandem quadrupole mass spectrometry detector, were being performed validation procedures and determination of the compounds bisphenol A and estrone, which were not susceptible to matrix effect during ionization, which prevented the determination of other endocrine disrupters. The results indicate that there is no reduction of the presence of detected endocrine disruptors and other organic compounds, also detected but not identified, between the points upstream and downstream of Arroio Fundo treatment plant. However due to the large matrix effect originating from the fact that the sample be extremely complex, could not perform an identification and quantification of all target compounds.

Os desreguladores endócrinos são compostos micropoluentes de ação deletéria que causam efeitos aos animais e aos seres humanos. Estes vêm trazendo a várias décadas, problemas relacionados à má formação ou ainda infertilidade de várias espécies. A presença destes compostos na ordem de ng L-1 já é capaz de gerar efeitos nocivos ao sistema endócrino. Este trabalho visou à determinação da presença e quantidade de alguns destes compostos como 17α-etinilestradiol, bisfenol A e estrona entre outros, nas águas do rio Arroio Fundo, localizado em Jacarepaguá no RJ que possui um índice de qualidade de água ruim. A primeira etapa deste trabalho foi a implementação e validação de metodologia para determinação do 17α-etinilestradiol por cromatografia líquida acoplada a detector de fluorescência onde foram estabelecido limite de detecção, de quantificação e linearidade conforme orientação do Inmetro (2010). Além da avaliação das amostras ambientais através da metodologia estabelecida. Na etapa subsequente foram realizados os experimentos relativos à determinação dos desreguladores endócrinos através da espectrometria de massas por detector tipo tandem quadrupolo, onde também foram realizados os procedimentos de validação e determinação dos compostos bisfenol A e estrona que não foram suscetíveis a efeito de matriz durante a ionização, que acabou impedindo a determinação de outros desreguladores endócrinos. Os resultados indicam que não há redução da presença dos desreguladores endócrinos detectados, e de outros compostos orgânicos também detectados, mas não identificados, entre os pontos a montante e a jusante da Unidade de Tratamento do Rio Arroio Fundo. Todavia em função do grande efeito de matriz oriundo do fato da amostra ser de extrema complexidade, não foi possível realizar uma identificação e quantificação de todos os compostos alvos. / Endocrine disrupters are compounds micropollutants of deleterious effects that cause effects to animals and humans has brought these problems to several decades related to poor training or infertility of various species. The presence of these compounds in the ng L-1 order is already capable of generating negative effects on the endocrine system. This work aimed at determining the presence and amount of some of these compounds as 17α-ethinylestradiol, bisphenol A and estrone among others, in the waters of the river Arroio Fundo, located in Jacarepaguá in Rio de Janeiro that has a bad water quality index. The first stage of this work was the implementation and validation of a method for determination of 17α-ethinylestradiol by liquid chromatography-fluorescence detection which were established limit of detection, quantification and linearity as directed by Inmetro (2010). Besides the evaluation of the samples through the established methodology. In subsequent step were carried out experiments on the determination of endocrine disruptors by tandem quadrupole mass spectrometry detector, were being performed validation procedures and determination of the compounds bisphenol A and estrone, which were not susceptible to matrix effect during ionization, which prevented the determination of other endocrine disrupters. The results indicate that there is no reduction of the presence of detected endocrine disruptors and other organic compounds, also detected but not identified, between the points upstream and downstream of Arroio Fundo treatment plant. However due to the large matrix effect originating from the fact that the sample be extremely complex, could not perform an identification and quantification of all target compounds.

Orientador: Isabel Cristina Sales Fontes Jardim / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-26T10:34:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_ClaudiodeCastro_M.pdf: 1652977 bytes, checksum: b266745fcbc738cc97c41fdc4d79a00b (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: / Resumo: Neste trabalho, prepararam-se fases estacionárias (FE) fluoradas capeadas para utilização em Cromatografia Líquida de Alta Eficiência em Fase Reversa (CLAE-FR). A preparação da FE consistiu na sorção do polímero poli(metil-3,3,3-trifluorproprilsiloxano) (PMTFS) sobre sílica, tipo B, com tamanho de partícula de 5 ?m, seguido de imobilização térmica a 226 oC, por 12 horas e extração com diclorometano, a fim de eliminar o polímero não aderido ao suporte. A FE imobilizada, Si(PMTFS), foi submetida à reação de capeamento com trimetilclorossilano e hexametildissilaxano, para a redução dos grupos silanóis que não foram recobertos pelo polímero. Testes físico-químicos e cromatográficos comprovaram a eficiência da imobilização do polímero e do capeamento. O desempenho cromatográfico da FE fluorada capeada, Si(PMTFS)ec, foi superior ao da não capeada e os testes de Tanaka e colaboradores demonstraram que o capeamento diminuiu a atividade silanofílica da FE e aumentou a sua hidrofobicidade. A FE Si(PMTFS)ec apresentou o mecanismo "U-shape", pois se observou o aumento da retenção de compostos básicos e polares em altas porcentagens do modificador orgânico na fase móvel. As FE de Si(PMTFS)ec apresentaram estabilidade química superior às FE não capeadas, porém, elas mostraram-se mais instáveis que as FE C8, C18 preparadas no grupo. Embora a estabilidade química à fase móvel em meio básica seja uma desvantagem, a mesma possui o mecanismo "U-shape" que pode ser utilizado para aumentar a retenção dos compostos básicos, sem o uso de condições drásticas de pH, além de ser uma FE mais apropriada quando se emprega o espectrômetro de massas, pois a alta concentração de solvente orgânico na fase móvel melhora a ionização dos analitos, aumentando as suas detectabilidades. A FE Si(PMTFS)ec constitui em uma alternativa bem sucedida para emprego em CLAE-FR, devido a sua capacidade em separar vários tipos de compostos / Abstract: / Abstract: In this work, end-capped fluorinated stationary phases (SP) for use in High-Performance Liquid Chromatography on Reversed Phase (RP-HPLC) were prepared. The preparation of the SP consisted in the sorption of the polymer poly(methyl-3,3,3-trifluorproprilsiloxane) (PMTFS) onto type B silica, with particle size of 5 µm, followed by thermal immobilization at 226 °C for 12 h and extraction with dichloromethane to eliminate the polymer that had not interacted with the support. The immobilized SP, Si (PMTFS), was subjected to an end-capping reaction to reduce the silanol groups that were not covered by the polymer. Physical-chemical and chromatographic tests were conducted to evaluate the efficiency of the immobilization of the polymer and of the end-capping reaction. The chromatographic performance of the end-capped fluorinated SP, Si (PMTFS)ec, was greater than that of the non-end-capped phase. The Tanaka tests showed a decrease in silanophilic activity and an increase in hydrophobicity. The Si (PMTFS)ec SP showed a U-shaped mechanism, because of the observed increase in retention of basic compounds at high percentages of the organic component in the mobile phase. The Si (PMTFS)ec SP showed superior chemical stability to non-end-capped SP, however, less stability than C8 and C-18 SP also prepared by the group. Although chemical stability in alkaline mobile phase is a disadvantage, it has a "U-shape" mechanism that can be used to increase the retention of basic compounds without the use of drastic conditions of pH, and is more appropriate for use with a mass spectrometer. Due to the high concentrations of organic solvent in the mobile phase the ionization of the analytes is better, increasing the detectability. The Si (PMTFS)ec SP can be used in RP-HPLC due to its ability to separate various types of compounds / Mestrado / Quimica Analitica / Mestre em Química