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Rustificação in vitro de Lippia grata Schauer : Iluminação de lâmpadas LED x ventilação naturalZÁRATE-SALAZAR, Jhonatan Rafael 27 February 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Lippia grata Schauer is an aromatic species, endemic to the Brazilian Northeast and of recognized medicinal importance due to the anti-inflammatory, antioxidant and antimicrobial activity present in its essential oils, making it a promising natural resource in the treatment of diseases. In vitro cultivation could make the use of its medicinal potential more efficient without the need to affect its natural habitat by anthropogenic actions. In this sense, the present research aimed to evaluate, with a morphophysiological and biochemical focus, L. grata plants grown in vitro under the use of LED lamps associated with natural ventilation in the flasks. The experimental units were constituted by nodal segments of L. grata, 1 cm long, removed below the apical bud and inoculated in flasks containing 10 mL of MS nutrient medium supplemented with 30 g L-1 of sucrose, gelled with 2.5 g L-1 phytagel and pH adjusted to 5.7. The natural ventilation of the flasks was controlled by two types of partial (ventilation) and total (non-ventilation) seals, distributed randomly in four different lighting systems, LVA 5: 1 = Red and Blue LEDs (5: 1) ; LVA 1: 1 = Red and Blue LEDs (1: 1); LB = White LED and FL = Fluorescent Lamp, calibrated at 60 μmol m - 2 s - 1 of luminous intensity inside a growth room with photoperiod of 16 hours, 80 ± 5% relative humidity and temperature of 25 ± 2 ° C , for 45 days, under a completely randomized design (DIC), with a 4x2 factorial arrangement, with 3 replicates, each replicate being 15 experimental units. On the 45th day, the plants were analyzed according to their biometric, biochemical and histological parameters. In this sense, we show that the natural ventilation of the flasks reduces the incidence of hyperhydric leaves in all lighting systems by 62%, presenting larger plants and more expanded leaves, and in these conditions the plants reduced their fresh mass by 27% indirectly evidencing the effect of gaseous exchange. The biochemical parameters of the plants were also positively influenced by the natural ventilation of the weak ones, since the contents of chloroplastídicos pigments and total soluble carbohydrates contents increased by 46% and 115%, respectively. In addition, under a histological approach we observed that there was a greater cellular organization of the epidermis and cortical parenchyma of the main leaf vein, a situation that was not observed in plants with conditions without ventilation. The influence of the lighting systems was also remarkable, especially the White LED, since it presented plants with less number of hyperhydric leaves even in non-ventilated bottles, which translates into a larger number of normal leaves, in addition to showing a greater number of shoots and roots. Also, the White LED associated with natural ventilation conditions was the only lighting system that promoted significant increases in chlorophyll a; chlorophyll b; total chlorophyll (a + b); carotenoids; total soluble carbohydrates; and sucrose in 87%; 143%; 102%; 76%; 223% and 116%, respectively, compared to that obtained under non-ventilated conditions. In view of this, we concluded that there is a synergistic effect in the use of White LED lamps associated with natural ventilation conditions of the weaker ones in the in vitro culture of L. grata as they contribute to the reduction of hyperhydric symptoms and stimulate a greater metabolic activity expressed through increase in their biochemical parameters. / Lippia grata Schauer é uma espécie aromática, endêmica do Nordeste brasileiro e de reconhecida importância medicinal devido à atividade anti-inflamatória, antioxidante e antimicrobiana presentes em seus óleos essenciais, fazendo dela um recurso natural promissor no tratamento de doenças. O cultivo in vitro poderia tornar mais eficiente o uso de suas potencialidades medicinais sem a necessidade de afetar seu habitat natural por ações antropogênicas. Nesse sentido, o presente trabalho de investigação objetivou avaliar com enfoque morfofisiológico e bioquímico, plantas de L. grata cultivadas in vitro sob o uso de lâmpadas LED’s associadas à ventilação natural nos frascos. As unidades experimentais foram constituídas por segmentos nodais de L. grata, com 1 cm de comprimento, retirados abaixo da gema apical e inoculadas em frascos contento 10 mL de meio nutritivo MS suplementado com 30 g L-1 de sacarose, gelificado com 2,5 g L-1 phytagel e pH ajustado a 5,7. A ventilação natural dos frascos foi controlada por meio de dois tipos de vedação, parcial (com ventilação) e total (sem ventilação), distribuídos aleatoriamente em quatro diferentes sistemas de iluminação, LVA 5:1= LED Vermelha e Azul (5:1); LVA 1:1= LED Vermelha e Azul (1:1); LB= LED Branco e FL= Lâmpada Fluorescente, calibradas em 60 μmol m− 2 s – 1 de intensidade luminosa dentro de uma sala de crescimento com fotoperíodo de 16 horas, 80±5% de umidade relativa e temperatura de 25±2°C, durante 45 dias, conduzidas sob um delineamento inteiramente casualizado (DIC), com um arranjo fatorial 4x2, com 3 repetições, sendo cada repetição 15 unidades experimentais. No 45° dia, as plantas foram analisadas em função dos seus parâmetros biométricos, bioquímicos e histológicos. Nesse sentido, evidenciamos que a ventilação natural dos frascos reduz em 62% a incidência de folhas hiperídricas em todos os sistemas de iluminação apresentando plantas de maior tamanho e folhas mais expandidas, ademais nessas condições as plantas reduziram sua massa fresca em 27% evidenciando indiretamente o efeito do intercâmbio gasoso. Os parâmetros bioquímicos das plantas também foram influenciados positivamente pela ventilação natural dos fracos uma vez que os teores dos pigmentos cloroplastídicos e teores de carboidratos solúveis totais aumentaram em 46% e 115%, respectivamente. Ademais, sob um enfoque histológico observamos que houve uma maior organização celular da epiderme e do parênquima cortical da nervura principal das folhas, situação que não foi observada em plantas com condições sem ventilação. A influência dos sistemas de iluminação também foi destacável, em especial do LED Branco uma vez que apresentou plantas com menor número de folhas hiperídricas mesmo em frascos sem ventilação o qual se traduz em um maior número de folhas normais aliás de exibir maior número de brotos e raízes. Assim mesmo, o LED Branco associado a condições de ventilação natural foi o único sistema de iluminação que promoveu expressivos aumentos nos teores de clorofila a; clorofila b; clorofila totais (a+b); carotenoides; carboidratos solúveis totais; e sacarose em 87%; 143%; 102%; 76%; 223% e 116%, respectivamente, comparado com o obtido em condições sem ventilação. Perante isto, concluímos que existe um efeito sinérgico no uso de lâmpadas LED Brancas associadas a condições de ventilação natural dos fracos no cultivo in vitro de L. grata uma vez que contribuem na redução nos sintomas de hiperidricidade e estimulam uma maior atividade metabólica expressada através do aumento dos teores em seus parâmetros bioquímicos.
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Micropropagação do cubiu (Solanum sessiliflorum Dunal)Machado, Rosineide da Paz 11 August 2005 (has links)
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Previous issue date: 2005-08-11 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Cubiu (Solanum sessiliflorum Dunal), a genetic resource from western Amazon, presents a great potential for the modern agriculture, on account of its rusticity, good yield
capacity and usage of its fruits in various diversified ways. On account of it being a sexual reproduction plant, it keeps a high genetic variability as to the agronomic importance characteristics which are not interesting in a commercial viewpoint, where the purpose is the evenness of the growing plants as well as their fructification. Micropropagation is an alternative for obtaining clones with desirable characteristics such as high productivity,
superior quality or biotic and abiotic stress tolerance, providing a fast multiplication within a small physical space. The aim of the present study was to establish protocols for the in vitro culture of cubiu. Different mg/L concentrations of the BAP (0.0; 0.5; 1.0; 3.0; 5.0) and AIA
(0.0; 0.5; 1.0; 2.0; 3.0) growth regulators and all possible combinations between them in MS medium were assessed in the in vitro induction and regeneration of cubiu sproutings and rooting. The experimental design was in random blocks with five replicates and 25 treatments, constituting a 5x5 factorial scheme. The best BAP and AIA mg/L combinations the following respectively: for leaves 1.0 plus 0.5 producing an average number of 8 leaves per explant; for sprountings 3.0 plus 0.5 producing an average number of 3.10 sprouts per explant; for the
height of sproutings 3.0 plus 0.5 producing an average height of 4.17 cm; for root 1.0 plus 0.5 producing an average number of 8.45 roots and for the length of root 1.0 and 0.5 producing a 6.4 cm mean length. It was possible to micropropagate the S. sessiliflorum species adding BAP and AIA growth regulators to the MS medium, obtaining a larger number of sproutings as well as complete plants with well developed root system and ideal height for acclimatization. / O cubiu (Solanum sessiliflorum Dunal), recurso genético originário da Amazônia Ocidental, apresenta potencialidades para a agricultura moderna, dada a sua rusticidade, boa capacidade de produção e ao aproveitamento dos seus frutos de forma diversificada. Por ser uma planta de reprodução sexuada, mantém alta variabilidade genética quanto às características de importância agronômica, o que não é interessante do ponto de vista comercial, quando se objetiva a uniformização do crescimento e frutificação das plantas.
Através da micropropagação é possível a obtenção de clones com características desejáveis como a alta produtividade, qualidade superior ou tolerância ao estresse biótico e abiótico, propiciando a multiplicação rápida e em pequeno espaço físico. Este trabalho teve como objetivo estabelecer protocolos para o cultivo in vitro do cubiu. Foram estudadas diferentes concentrações em mg/L dos reguladores de crescimento BAP (0,0; 0,5; 1,0; 3,0 e 5,0) e AIA (0,0; 0,5; 1,0; 2,0 e 3,0) e 25 combinações entre estes, em meio MS, na indução e regeneração in vitro de brotações e enraizamento do cubiu. O delineamento experimental foi em blocos
casualizados com cinco repetições e 25 tratamentos, constituindo um esquema fatorial de 5x5. As combinações em mg/L de BAP e AIA com as melhores respostas foram respectivamente: para folhas 1,0 e 0,5 produzindo um número médio de 8 folhas por explante; para brotações
3,0 e 0,5 produzindo um número médio de 3,10 brotos por explante; para altura das brotações 3,0 e 0,5 produzindo altura média de 4,17 cm; para raiz 1,0 e 0,5 produzindo número médio de 8,45 raízes e para o comprimento da raiz 1,0 e 0,5 produzindo comprimento médio de 6,4 cm. Foi possível micropropagar a espécie S. sessiliflorum adicionando-se ao meio MS os reguladores de crescimento BAP e AIA, obtendo-se além de maiores números de brotações, plantas completas com sistema radicular e altura ideal para aclimatização.
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GERMINAÇÃO ASSIMBIÓTICA E DESENVOLVIMENTO DE Dendrobium nobile Lindl. SOB EFEITO DE REGULADORES HORMONAIS E ÁGUA DE COCO / ASYMBIOTIC GERMINATION AND DEVELOPMENT OF Dendrobium nobile Lindl. UNDER EFFECT OF PLANT GROWTH REGULATORS AND COCONUT WATERSoares, Jackeline Schultz 18 February 2010 (has links)
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JackelineSchultzSoares.pdf: 419520 bytes, checksum: 681b65601587b028c9aa1b2b88798f13 (MD5)
Previous issue date: 2010-02-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Orchidaceae differs of most botanical families by its seeds did not have enough reservations for germination. The present work aimed: 1. to study the influence of plant growth regulators BAP (6-benzylaminopurine) e GA3 (gibberellic acid), at concentrations of 0.0; 2.0 and 5.0 mg L-1, as pre-germinative treatment in the process of initial development of Dendrobium nobile Lindl seedlings; 2. to determine the volume of coconut water (0; 50; 100; 150 and 200 mL L-1), that, added to culture media, promoted better germination and in vitro cultivation of D. nobile. Seeds of D. nobile that were produced by manual self-pollinating were used as material of study. After six months of sowing and keeping in germination and growth chamber with controlled temperature and photoperiod (12 hours and 23 ºC ±), seedlings were removed from pots and evaluated about number, percentage of germination, fresh mass, height, diameter and number of psedobulbs, number of leaves, number of roots and length of the greatest root. Completely randomized experimental design was used. Every variables and vegetal attributes were submitted to variance analysis and when they were significative, to regression analysis. D. nobile seeds germinated more in the absence of plant growth regulators and treatments with BAP or GA3 for imbibitions of seeds influenced statistically in vitro development of D. nobile. The addition of 200 mL L-1 of coconut water to culture media promoted the best results for plant heights, number or roots, number of pseudobulbs and fresh mass of D. nobile. / Orchidaceae diferencia-se da maioria das famílias botânicas por suas sementes não possuírem reservas suficientes para a germinação. O presente trabalho objetivou: 1- estudar a influência dos reguladores hormonais BAP (6-benzilaminopurina) e GA3 (ácido giberélico), nas concentrações de 0,0; 1,0; 2,0 e 5,0 mg L-1, como tratamento pré-germinativo no processo de germinação e desenvolvimento inicial de plântulas de Dendrobium nobile Lindl; 2- determinar o volume de água de coco (0; 50; 100; 150 e 200 mL L-1 ), que, acrescido ao meio de cultura proporcionou melhor germinação e cultivo in vitro de D. nobile. Foram utilizadas como material de estudo sementes de D. nobile produzidas mediante autopolinização manual Após seis meses do semeio e permanência em câmara de germinação e crescimento com temperatura e fotoperíodo controlados (12 horas e 23 ºC ± 2) as plântulas foram retiradas dos frascos e avaliadas quanto ao número, porcentagem de germinação, massa fresca, altura, diâmetro e número de pseudobulbos, número de folhas, número de raízes e comprimento da maior raiz. Foi utilizado o delineamento experimental inteiramente casualizado. Todas as variáveis e atributos vegetais foram submetidos à análise de variância e quando significativos à regressão. As sementes de D. nobile germinaram mais na ausência de reguladores vegetais, e os tratamentos com BAP ou GA na embebição das sementes influenciaram 3estatisticamente o desenvolvimento in vitro de D. nobile. A adição de 200 mL L-1 de água de coco ao meio de cultura propiciou os melhores resultados para altura de plantas, número de raízes, número de pseudobulbos e massa fresca de D. nobile.
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GERMINAÇÃO ASSIMBIÓTICA E DESENVOLVIMENTO DE Dendrobium nobile Lindl. SOB EFEITO DE REGULADORES HORMONAIS E ÁGUA DE COCO / ASYMBIOTIC GERMINATION AND DEVELOPMENT OF Dendrobium nobile Lindl. UNDER EFFECT OF PLANT GROWTH REGULATORS AND COCONUT WATERSoares, Jackeline Schultz 18 February 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-02-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Orchidaceae differs of most botanical families by its seeds did not have enough reservations for germination. The present work aimed: 1. to study the influence of plant growth regulators BAP (6-benzylaminopurine) e GA3 (gibberellic acid), at concentrations of 0.0; 2.0 and 5.0 mg L-1, as pre-germinative treatment in the process of initial development of Dendrobium nobile Lindl seedlings; 2. to determine the volume of coconut water (0; 50; 100; 150 and 200 mL L-1), that, added to culture media, promoted better germination and in vitro cultivation of D. nobile. Seeds of D. nobile that were produced by manual self-pollinating were used as material of study. After six months of sowing and keeping in germination and growth chamber with controlled temperature and photoperiod (12 hours and 23 ºC ±), seedlings were removed from pots and evaluated about number, percentage of germination, fresh mass, height, diameter and number of psedobulbs, number of leaves, number of roots and length of the greatest root. Completely randomized experimental design was used. Every variables and vegetal attributes were submitted to variance analysis and when they were significative, to regression analysis. D. nobile seeds germinated more in the absence of plant growth regulators and treatments with BAP or GA3 for imbibitions of seeds influenced statistically in vitro development of D. nobile. The addition of 200 mL L-1 of coconut water to culture media promoted the best results for plant heights, number or roots, number of pseudobulbs and fresh mass of D. nobile. / Orchidaceae diferencia-se da maioria das famílias botânicas por suas sementes não possuírem reservas suficientes para a germinação. O presente trabalho objetivou: 1- estudar a influência dos reguladores hormonais BAP (6-benzilaminopurina) e GA3 (ácido giberélico), nas concentrações de 0,0; 1,0; 2,0 e 5,0 mg L-1, como tratamento pré-germinativo no processo de germinação e desenvolvimento inicial de plântulas de Dendrobium nobile Lindl; 2- determinar o volume de água de coco (0; 50; 100; 150 e 200 mL L-1 ), que, acrescido ao meio de cultura proporcionou melhor germinação e cultivo in vitro de D. nobile. Foram utilizadas como material de estudo sementes de D. nobile produzidas mediante autopolinização manual Após seis meses do semeio e permanência em câmara de germinação e crescimento com temperatura e fotoperíodo controlados (12 horas e 23 ºC ± 2) as plântulas foram retiradas dos frascos e avaliadas quanto ao número, porcentagem de germinação, massa fresca, altura, diâmetro e número de pseudobulbos, número de folhas, número de raízes e comprimento da maior raiz. Foi utilizado o delineamento experimental inteiramente casualizado. Todas as variáveis e atributos vegetais foram submetidos à análise de variância e quando significativos à regressão. As sementes de D. nobile germinaram mais na ausência de reguladores vegetais, e os tratamentos com BAP ou GA na embebição das sementes influenciaram 3estatisticamente o desenvolvimento in vitro de D. nobile. A adição de 200 mL L-1 de água de coco ao meio de cultura propiciou os melhores resultados para altura de plantas, número de raízes, número de pseudobulbos e massa fresca de D. nobile.
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Expressão gênica em embriões de Bos taurus e Bos indicus produzidos in vivo e in vitroViana, Sabine Wohlres 09 March 2009 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-04-04T13:30:03Z
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Previous issue date: 2009-03-09 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Embriões produzidos in vivo e in vitro apresentam diferenças morfológicas e de desenvolvimento as quais podem ser influenciadas pelo de cultivo. Além disso, existem poucos estudos mostrando o efeito do ambiente in vitro sobre os embriões provenientes de diferentes raças bovinas como, por exemplo, Gir (Bos indicus) e Holandesa (Bos taurus). Alguns genes importantes para a formação, sobrevivência e posterior desenvolvimento de embriões bovinos podem ter seu padrão de expressão influenciado por diversos fatores relacionados ao sistema de produção e a raça. O objetivo deste estudo foi avaliar a abundância relativa de transcritos relacionados ao transporte de água e solutos (Aquaporinas), formação da blastocele (Na/KATPases), apoptose (BAX) e resposta a estresse celular (Peroxiredoxina 1) em blastocistos bovinos das raças Gir e Holandesa produzidos in vivo e in vitro para identificar efeitos de sistema de produção e/ou raça. Para cada grupo (Gir-in vivo; Gir-in vitro; Holandês-in vivo; Holandês-in vitro), blastocistos (n=15) divididos em três conjuntos foram utilizados para a extração do RNA, amplificação, e transcrição reversa. Os cDNAs obtidos foram submetidos à PCR em Tempo-Real, utilizando o gene H2a como controle endógeno, e analisados pelo software REST©. Na avaliação de efeito do sistema de produção para a raça Gir, a expressão relativa do gene PRDX1 apresentou-se sub-regulada (p<0,01) assim como nos genes Na/KATPase-β2 e BAX (p<0,05), enquanto os genes AQP3, AQP11 e Na/K-ATPase-α1 não apresentaram diferenças significativas (p>0,05) nas amostras de embriões produzidos in vitro comparados com embriões in vivo. Na raça Holandesa, a expressão relativa do gene BAX apresentou-se sobre-regulada (p<0,01), enquanto o gene Na/K-ATPase-β2 apresentou uma tendência a sub-regulação (p=0,06) e os genes AQP3, AQP11, Na/K-ATPase-α1, PRDX1 não apresentaram diferenças significativas (p>0,05) nas amostras de embriões produzidos in vitro comparados com embriões in vivo. Quando a produção in vivo foi avaliada entre as raças, os embriões da raça Holandesa apresentaram os genes AQP3, Na/K-ATPase-α1, PRDX1, e BAX sub-regulados (p<0,05), enquanto os genes Na/K-ATPase-β2 e AQP11 não demonstraram diferenças significativas na expressão (p>0,05) quando comparados com embriões da raça Gir. Para a produção in vitro, apenas o gene BAX apresentou-se sobre-regulado (p<0,05) nos embriões da raça Holandesa quando comparados com embriões da raça Gir. Com base nestes resultados podese concluir que, para os genes avaliados, existem diferenças na expressão gênica inerentes às raças observadas nos embriões produzidos in vivo e que o sistema de produção in vitro pode influenciar a expressão gênica, atenuando estas variações. A avaliação de outros transcritos é necessária para uma melhor compreensão dos efeitos relacionados aos processos de produção de embriões bovinos em diferentes raças. / Embryos produced in vivo and in vitro show morphological and developmental differences, which can be influenced by culture environment. Nevertheless, there are few studies showing the effect of in vitro environment on embryos from different bovine breeds, such as Gyr (Bos indicus) and Holstein (Bos taurus). Some important genes associated to formation, survival and subsequent development of bovine embryos can be affected by various factors related to the production system and breed. The aim of this study was to evaluate the relative abundance of transcripts associated to water transport (Aquaporins), blastocoel formation (Na/K-ATPases), apoptosis (BAX) and response to cellular stress (Peroxiredoxin 1) in bovine blastocysts from Gyr and Holstein breed produced in vivo and in vitro to identify breed and/or production system effects. For each group (Gyr-in vivo; Gyr-in vitro; Holstein-in vivo; Holstein-in vitro), blastocysts (n=15) distributed in 3 pools were used for RNA extraction, followed by RNA amplification and reverse transcription. The cDNAs obtained were submitted to Real-Time PCR, using the H2a gene as endogenous control, and analyzed with REST software©. For the production system in the Gyr embryos, the relative expression of PRDX1 gene was down-regulated (p<0.01) as well as Na/K-ATPase-β2 and BAX genes (p<0.05), and the AQP3, AQP11 and Na/K-ATPase-α1 genes were not significantly different (p>0.05) when in vitro embryos were compared with in vivo produced ones. In Holstein embryos, BAX was up-regulated in in vitro embryos (p<0.01), while AQP3, AQP11, Na/K-ATPaseα1, Na/K-ATPase-β2 and PRDX1 genes were not significantly different (p>0.05) from in vivo produced embryos. When the breed effect was evaluated, Holstein in vivo produced blastocysts presented AQP3, Na/K-ATPase-α1, PRDX1, and BAX genes down-regulated (p<0.05) while Na/K-ATPase-β2 and AQP11 genes were not significantly different (p>0.05) from Gyr embryos. For the in vitro produced embryos, only Bax was up-regulated (p<0.05) in Holstein embryos compared with Gyr embryos. Based on those results, for the evaluated genes, it is possible to conclude that are inherent breed differences in gene expression observed in in vivo produced embryos and that the in vitro production system influences in the relative expression in both breeds, attenuating the inherent breed differences. Other genes should be evaluated for a better understanding of these breeds differences.
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Caracterização fotossintética e do desenvolvimento de plantas de batata-doce cultivadas in vitro e aclimatizadas / Characterization photosynthetic and of the development of sweet potato cultivated in vitro and aclimatizedCassana, Francine Ferreira 05 March 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-03-05 / Sweet potato is a species of economical importance that presents several factors
that limit its productivity, of which the main one is the use of shoots and roots in
order to obtain plantlets, favoring diseases dissemination, mainly viruses.
Therefore, the tissue culture is of great importance for the production of plantlets
with improved genetic and phyto-sanitary qualities. However, biochemical and
environmental factors interfere in the metabolism in vitro, hindering the
establishment of the plants during the aclimatization phase. The objective of this
study was to analyze the influence of the sucrose and of the photon flux density
in the development and in the photosynthetic capacity of sweet potato plants
cultivated in vitro and aclimatizated. The photon flux density of 42 µmol m -2 s -1
maximized growth and development and, the increase in sucrose concentration
allowed a significant increase in photosynthetic pigment contents as well as an
increase of plant biomass. For the determination of the photosynthetic
characteristics (Potential Photosynthesis and Chlorophyll Fluorescence) were
monitored in leaves generated in vitro and ex vitro, after transferring the plants to
a greenhouse. The results demonstrated that the sucrose concentration of 20 g L -1
and the photon flux density of 21 µmol m -2 s -1 provided physiological conditions
which allowed a more efficient adaptation during acclimatization. However,
there was no effect of in vitro treatments in the photosynthetic performance of
leaves generated ex vitro. / A batata doce é uma espécie de expressão econômica que apresenta vários fatores
que limitam sua produtividade, dentre os quais se destaca a utilização de ramas e
raízes para a obtenção de mudas, que favorece a disseminação de doenças,
principalmente viroses. Desta forma, a técnica de cultura de tecidos é de extrema
importância para produção destas mudas, com alta qualidade genética e
fitossanitária. Entretanto, fatores bioquímicos e ambientais interem no
metabolismo in vitro, dificultando o estabelecimento das plantas durante a fase
de aclimatização. O objetivo deste estudo foi analisar a influência da sacarose e
da densidade de fluxo de fótons no desenvolvimento e na capacidade
fotossintética de plantas de batata doce cultivadas in vitro e aclimatizadas. A
densidade de fluxo de fótons de 42 µmol m -2 s -1 maximizou o crescimento e
desenvolvimento e o acréscimo na concentração de sacarose proporcionou um
aumento significativo nos teores de pigmentos fotossintéticos, como no aumento
da biomassa das plantas. Para a determinação das características fotossintéticas
folhas geradas in vitro e ex vitro foram monitoradas sob o aspecto da
Fotossíntese Potencial e Fluorescência das Clorofilas. Os resultados
demonstraram que a concentração de 20 g L -1 de sacarose e a densidade de fluxo
de fótons de 21 µmol m -2 s -1 proporcionaram condições fisiológicas que
permitiram uma adaptação mais eficiente durante a aclimatização. Por outro lado,
não ocorreu efeito dos tratamentos in vitro na performance fotossintética das
folhas geradas ex vitro.
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Compatibilidade reprodutiva e micropropagação de ameixeiras japonesas. / Reproductive compatibility and micropropagation of Japanese plum.Bandeira, Juliana de Magalhães 09 April 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-04-09 / The Japanese plum (Prunus salicina Lindl.) has an important role in the horticulture
worldwide. It has great importance in Brazilian market and is gaining fans for its
production, especially in Rio Grande do Sul and Santa Catarina where winter
conditions are propicious to its cultivation. However, there are some problems faced
by farmers and breeders, which limit the increase in domestic production of plum
trees, among these, there are the gametophytic self-incompatibility, due to the
presence of a codominant multi-site (containing the so-called S-alleles) and
susceptibility to Xillela fastidiosa Wells, which affects quality of propagation material. In
face of these problems, the objective of this work was to identify physiologically Salleles
of six cultivars of Japanese plum and develop a micropropagation protocol for
the cv. America. Thus, experiments of controlled pollination were carried out in
experimental fields at Embrapa Clima Tempreado (Pelotas/RS) and the in vivo
pollination were carried out in the laboratory of six cup cultivars of Japanese plum
(America, Rosa Mineira, Pluma 7, Amarelinha, Reubennel and Santa Rosa), to
evaluate the fruit set and pollen tube growth (CTP), respectively. Additionaly, were
also performed experiments of micropropagation in the Laboratory of Plant Tissue
Culture (UFPel/RS) to identify an appropriate protocol for micropropagation of cv.
America. In studies of reproductive compatibility, the fruit set was very low for all
crosses, with the larger value had occur in the autopollination of 'Reubennel' (8.41%).
'America' only formed fruit when pollinated with the cvs. Rosa Mineira, Amarelinha,
Santa Rosa and Reubennel, these last one had mutual compatibility with cv.
America. 'Amarelinha' and 'Rosa Mineira' proved to be compatible with the pollen of
'Rosa Mineira' and 'Reubennel'. There was significant interaction for CTP level and
pollen used to pollinate each female parents, and the crosses between 'America' x
'Pluma 7' and 'Rosa Mineira' x 'Santa Rosa' were incompatible while cv. America is
self-incompatible. Some crosses that showed no pollination and fruiting in the field,
hit the egg (level 6) or ovary (level 5) during in vivo pollination, such as 'Reubennel' x
'Rosa Mineira', 'Rosa Mineira' and 'Amarelinha' x 'America' and 'Amarelinha' and
'Pluma 7', and 'Santa Rosa' x 'America'. These results, together with the molecular
data of S-alleles, allow a better understanding of the reproductive biology of P. salicina.
In the micropropagation experiments we found that the in vitro establishment of basal
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explants of cv. America in MS medium is higher than the apical explants. BAP
concentrations between 0.25 and 0.50mg dm-3 are more appropriate for the
multiplication while MS medium supplemented with 1.0mg dm-3 GA3 and 2.0g dm-3 of
vegetal charcoal is the most appropriate to in vitro elongation of their shoots. Half of
concentration of salts and vitamins of MS medium with the addition of 1.0mg dm-3 of
IBA is the most efficient for the in vitro rooting of Japanese plum, cv. America, during
periods of less than 20 days, reaching 88% survival after 30 days of acclimatization. / A ameixeira japonesa (Prunus salicina Lindl.) tem papel de destaque na fruticultura
mundial. Possui grande importância no mercado brasileiro e vem ganhando adeptos
à sua produção, principalmente no Rio Grande do Sul e Santa Catarina onde as
condições de inverno favorecem o seu cultivo. Porém, existem alguns problemas
enfrentados pelos produtores e melhoristas que limitam o aumento da produção
nacional de ameixeiras, entre esses, destacam-se a autoincompatibilidade
gametofítica, devido à presença de um loco multialélico (contendo os denominados
alelos-S) e a suscetibilidade à Xillela fastidiosa Wells, que afeta a qualidade do material
propagativo. Frente a esses problemas, o objetivo da realização deste trabalho foi
identificar fisiologicamente os alelos-S de seis cultivares de ameixeira japonesa e
desenvolver um protocolo de micropropagação para a cv. América. Desta forma,
foram realizados experimentos de polinização controlada nos campos experimentais
da Embrapa Clima Temperado (Pelotas/RS) e polinização in vivo, em laboratório, de
seis cultivares copa de ameixeira japonesa (América, Rosa Mineira, Pluma 7,
Amarelinha, Reubennel e Santa Rosa), onde foram avaliados a frutificação efetiva e
o crescimento do tubo polínico (CTP), respectivamente. Também foram realizados
experimentos no Laboratório de Cultura de Tecidos de Plantas (UFPel/RS), visando
identificar um protocolo adequado para a micropropagação da cv. América. Nos
estudos de compatibilidade reprodutiva, a frutificação efetiva foi muito baixa para
todos os cruzamentos, sendo observado maior valor na autopolinização da
Reubennel (8,41%). América somente apresentou frutificação quando polinizada
com as cvs. Rosa Mineira, Amarelinha, Santa Rosa e Reubennel, sendo que essa
última apresentou compatibilidade mútua com a cv. América. Amarelinha e Rosa
Mineira mostraram-se compatíveis com o pólen da Rosa Mineira e Reubennel .
Houve interação significativa para o grau de CTP e o pólen utilizado para polinizar
cada um dos genitores femininos, sendo que os cruzamentos entre América x
Pluma 7 e Rosa Mineira x Santa Rosa foram incompatíveis enquanto que a cv.
América apresentou-se autoincompatível. Alguns cruzamentos que não
apresentaram polinização e frutificação no campo, atingiram o óvulo (grau 6) ou o
ovário (grau 5) durante a polinização in vivo, tais como Reubennel x Rosa Mineira ;
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Rosa Mineira e Amarelinha x América e Amarelinha e Pluma 7 , e Santa Rosa x
América . Estes resultados, juntamente com os dados moleculares dos alelos-S,
permitem um melhor entendimento a respeito da biologia reprodutiva de P. salicina.
Nos experimentos de micropropagação verificou-se que o estabelecimento in vitro
de explantes basais da cv. América em meio MS, é superior ao de explantes apicais.
Concentrações de BAP entre 0,25 e 0,50mg dm-3 são mais adequadas para sua
multiplicação enquanto que o meio MS suplementado com 1,0mg dm-3 de AG3 e 2,0g
dm-3 de carvão vegetal é o mais adequado para o alongamento in vitro de suas
brotações. A metade da concentração dos sais e vitaminas do meio MS com a
adição de 1,0mg dm-3 de AIB é o mais eficiente para o enraizamento in vitro de
brotações de ameixeira japonesa, cv. América, por períodos inferiores a 20 dias,
atingindo 88% de sobrevivência após 30 dias de aclimatização.
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Efeitos de diferentes fontes de nitrogênio e do déficit hídrico sobre o desenvolvimento e a modulação do metabolismo ácido das crassuláceas (CAM) em plantas atmosféricas de Guzmania monostachia / Effects of different sources of nitrogen and water deficiency on development and modulation of crassulacean acid metabolism (CAM) in atmospheric plants of Guzmania monostachiaCoutinho Neto, Antônio Azeredo 22 February 2018 (has links)
As bromélias são plantas que podem utilizar o nitrogênio em suas formas inorgânica e orgânica. Algumas delas apresentam comportamento heteroblástico, isto é, na fase adulta apresentam a sobreposição das folhas, formando um tanque, o qual pode armazenar água e nutrientes. Já na fase juvenil, também chamada de atmosférica, o tanque inexiste. Plantas adultas da espécie hetereblástica Guzmania monostachia quando cultivadas na natureza parecer preferir o nitrogênio na forma amoniacal ou ureídica; no entanto, para as atmosféricas não existem ainda estudos a respeito. Quanto à fotossíntese, plantas adultas com tanque de G. monostachia apresentam um sistema facultativo, isto é, numa condição hídrica favorável realizam a fotossíntese C3, já sob seca, podem alterar para o metabolismo ácido das crassuláceas (CAM). Por outro lado, as plantas atmosféricas dessa espécie expressam o CAM constitutivamente. Em resposta às adversidades ambientais, como a seca temporária ou a indisponibilidade de nutrientes, um aumento na produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) pode ocorrer e, dependendo da concentração alcançada nos tecidos, pode causar injúrias. Entretanto, as ROS também podem estar envolvidas com processos de sinalização celular, desde que em baixas concentrações. Folhas destacadas de plantas adultas de Guzmania monostachia, submetidas a um déficit hídrico e cultivadas na presença de diferentes fontes nitrogenadas, mostraram diferentes intensidades de CAM e teores consideráveis de ROS no ápice foliar. Entretanto, pouco se conhece, até o momento, sobre a modulação do CAM e a produção de ROS em plantas da fase juvenil. Os principais objetivos desta pesquisa foram 1) investigar quais seriam as fontes nitrogenadas mais propícias ao crescimento e desenvolvimento de plantas atmosféricas de Guzmania monostachia cultivadas in vitro na presença isolada de nitrato, amônio, glutamina ou ureia, na concentração total de N de 5mM. 2) analisar os efeitos do cultivo prévio de plantas atmosféricas em diferentes fontes de nitrogênio (mesmas condições acima) submetidas, em seguida, a um período de 7 dias de déficit hídrico provocado por PEG adicionado ao meio de cultura, sobre a modulação da intensidade do CAM, produção de ROS e atividades das enzimas antioxidantes. Foram realizadas análises morfométricas, anatômicas, além das fisiológicas, como conteúdo de pigmentos fotossintéticos (capítulo 1). Além disso, analisaram-se a suculência foliar, o acúmulo noturno de ácidos orgânicos, conteúdo de H2O2, atividade das enzimas PEPC e das relacionadas ao sistema antioxidante (capítulo 2). Os resultados de cultivo in vitro apontam que diferentes fontes nitrogenadas modificam metabolicamente e estruturalmente a bromélia Guzmania monostachia na fase atmosférica, sendo a fonte nítrica a que propiciou o surgimento de maiores proporções dos parênquimas aquífero e clorofiliano, aumentando a possibilidade de estocagem de água e de produção de clorofilas e carotenoides. Diferentemente das outras fontes de N, o nitrato foi a que propiciou o maior acúmulo noturno de ácidos orgânicos nas plantas submetidas à deficiência hídrica. Houve também uma maior suculência dos tecidos no tratamento com nitrato, mesmo após a imposição dos 7 dias de deficiência hídrica, indicando que um aumento na capacidade de armazenar água possa ser uma condição estrutural importante para se incrementar a expressão do CAM. O conteúdo de peróxido de hidrogênio aumentou quando as plantas previamente cultivadas em nitrato foram submetidas ao déficit hídrico, sugerindo que essa ROS poderia atuar como um sinalizador na modulação positiva do CAM; já que as atividades das enzimas antioxidantes diminuíram em relação ao controle (SOD e GR) ou permaneceram iguais estatisticamente (CAT, APX, GPOX). Em conclusão, as plantas atmosféricas de Guzmania monostachia, cresceram e se desenvolveram mais adequadamente na presença de nitrato e esta forma de N propiciou um aumento da suculência e da intensidade do CAM, quando houve a posterior imposição de um período de deficiência hídrica, sugerindo um aumento da tolerância à falta de água. Ao contrário, trabalhos anteriores do grupo mostraram que as plantas adultas com tanque de G. monostachia intensificaram o CAM na presença de amônio, indicando, portanto, que plantas de diferentes fases de desenvolvimento possuem, além de diferenças morfológicas, comportamentos fisiológicos diferentes / Bromeliads are plants that can use inorganic and organic nitrogen forms. Some of them feature the heteroblastic behavior which in adulthood have an overlapping of leaves forming a tank that can store water and nutrients. On the other hand, the juvenile phase, also called atmospheric, does not form the tank. Adult plants of the bromeliad species Guzmania monostachia are heteroblastic when growing in the wild and seem to prefer ammonium and urea. However, to the best of our knowledge, there are no studies with the atmospheric plants. Considering the photosynthetic metabolism, G. monostachia adult plants have a facultative system where the plant performs the C3 metabolism in good water conditions and change to the Crassulacean acid metabolism (CAM) under drought. Furthermore, plants of this species can express CAM constitutively. In response to environmental adversities, such as drought or variation in nutrient availability, an increase in the production of reactive oxygen species (ROS) can occur and, depending on the concentration achieved in their tissues, can cause injury. However, the ROS can also be involved in the processes of signaling of the cells when at low concentrations. Leaves that were withdrawn from adult plants of G. monostachia and were subjected to treatments of water deficit and different nitrogen sources showed different intensities of CAM and considerable levels of ROS in the foliar apex. However, little is known about the modulation of the CAM metabolism and the production of ROS in the juvenile G. monostachia bromeliads. The aims of this research were to 1) investigate which nitrogen source contribute more to the growth and development of atmospheric plants cultivated in vitro with isolated nitrate, ammonium, glutamine or urea, in a total N concentration of 5 mm; 2) examine the effects of the previous cultivation of atmospheric plants in different nitrogen sources on the modulation of the intensity of the CAM, ROS production and activities of antioxidant enzymes when the plants where submitted to in a period of seven days of water deficit caused by PEG added to the culture medium. Morphometric, physiological, anatomical and the photosynthetic pigments were analyzed (Chapter 1). In addition, foliar succulence the accumulation of nocturnal organic acids, H2O2 content, the activity of PEPC enzymes and the antioxidant system related were analyzed, (Chapter 2). The results of in vitro cultivation indicated that different nitrogen sources modified the metabolism and the tissue structure of the atmospheric Guzmania monostachia, as the nitrate provided the emergence of the larger proportions of the aquifer and chlorophyll parenchyma, increasing the possibility of water storage and production of chlorophylls and carotenoids. Unlike other sources of N, nitrate was the only that provided the greatest accumulation of nocturnal organic acids in plants submitted to water deficiency. There was also a greater succulence in the tissues submitted to the nitrate treatment, even after the exposition of seven days of water deficit, indicating an increase in the capacity of storing water that can be an important structural condition to increase the expression of CAM. The H2O2 content increased when the plants previously cultivated in nitrate were submitted to water deficit, suggesting that ROS could act as a signaling in the modulation of the CAM metabolism as the activities of antioxidant enzymes decreased compared to the control treatments (SOD and GR) or remained the statistically same (CAT, APX, GPOX). In conclusion, the atmospheric plants grew and developed more in the presence of nitrate and this form of N provided an increment in leaf succulence and intensification of CAM when there was the subsequent imposition of a period of water deficit, suggesting an increment of the tolerance for water deficit conditions. In contrast, previous researches showed that the adult plants of G. monostachia with tank intensified the CAM in the presence of ammonium, indicating that plants of different stages of development have, in addition to morphological differences, differences in their physiological behaviors
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Morfog?nese in vitro e triagem fitoqu?mica de Myracrodruon urundeuva Fr. All.Silva, Tecla dos Santos 28 September 2017 (has links)
Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2018-07-12T20:09:46Z
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Previous issue date: 2017-09-28 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado da Bahia - FAPEB / Myracrodruon urundeuva Fr. All. (Anacardiaceae) is an endangered tree that has wood and medicinal potential. This work aimed to study the induction of in vitro buds of M. urundeuva and to analyze the calogenesis process, as well as qualitatively evaluate the chemical composition of different organs of the species submitted to different culture conditions. In the induction of shoots, silver nitrate (AgNO3) and plant regulators 6-benzylaminopurine (BAP), kinetin (KIN), meta-topoline (mT) and naphthaleneacetic acid (NAA) were evaluated using different explants (cotyledons, petiole, nodal, cotyledonary and apical segments). For calogenesis, combinations of 2,4-D, KIN and glutamine in leaf explants were tested. The callus growth curve was performed for 56 days (7 day intervals) and the reducing sugars (RS), sucrose and total soluble sugars (TSS) were quantified. For the phytochemical study, we used methanolic extracts from material grown in vitro, in a greenhouse and in a natural environment. It is possible the induction of buds in M. urundeuva from the explant cotyledon node with the use of BAP combined with NAA. Calogenesis is potentiated with the combination of 2,4-D, KIN and glutamine in the nutrient medium. The growth curve of the callus is sigmoidal. The carbohydrate content, except for RA, presents a distinct behavior, varying according to the growth curve phases of the callus. The type of cultivation influences the yield of extracts of M. urundeuva and there are differences in the production of secondary metabolites between the different organs of the species. / Myracrodruon urundeuva Fr. All. (Anacardiaceae) ? uma ?rvore amea?ada de extin??o que possui potencial madeireiro e medicinal. Este trabalho objetivou estudar a indu??o de brotos in vitro de M. urundeuva e analisar o processo de calog?nese, bem como avaliar qualitativamente a composi??o qu?mica de diferentes ?rg?os da esp?cie submetida a distintas condi??es de cultivo. Na indu??o de brotos avaliou-se o uso do nitrato de prata (AgNO3) e dos reguladores vegetais 6-benzilaminopurina (BAP), cinetina (CIN), meta-topolina (mT) e ?cido naftalenoac?tico (ANA) sob distintos explantes (cotil?dones, pec?olo, segmentos nodais, cotiledonares e apicais). Para calog?nese testou-se combina??es de 2,4-D, CIN e glutamina em explantes foliares. Realizou-se a curva de crescimento dos calos durante 56 dias (intervalos de 7 dias) e quantificou-se os a??cares redutores (AR), sacarose e a??cares sol?veis totais (AST). Para o estudo fitoqu?mico, utilizou-se extratos metan?licos advindos de material cultivado in vitro, casa de vegeta??o e em ambiente natural. ? poss?vel a indu??o de brotos em M. urundeuva a partir do explante n? cotiledonar com o uso de BAP combinado com ANA. A calog?nese ? potencializada com a combina??o de 2,4-D, CIN e glutamina no meio nutritivo. A curva de crescimento dos calos apresenta forma sigmoidal. O conte?do de carboidratos, excetuando os AR, apresenta comportamento distinto, variando de acordo com as fases da curva de crescimento dos calos. O tipo de cultivo influencia no rendimento de extratos de M. urundeuva e existem diferen?as na produ??o de metab?litos secund?rios entre os diferentes ?rg?os da esp?cie.
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Micropropagação de espécies de helicônia, caracterização morfológica e identificação molecular de bactérias contaminantes / Micropropagation of heliconia species, morphological characterization and molecular identification of contaminating bacteriaNakano, Vania Ayaka 29 August 2008 (has links)
O gênero Heliconia tem participação crescente na floricultura tropical, sendo utilizada principalmente como flor de corte e para o paisagismo. A aplicação da micropropagação na produção de helicônias pode atuar na otimização da produtividade e na melhoria da qualidade do produto, proporcionando a multiplicação rápida e em grande escala das mudas, independentemente do período do ano, a multiplicação de híbridos e matrizes de grandes potenciais, a produção mais uniforme e redução do período até a colheita. Entretanto, o sucesso do processo de micropropagação depende de vários fatores, entre eles, o estabelecimento do explante in vitro, a adequação do meio de cultura e a escolha do melhor substrato na fase de aclimatação, como estudadas no presente trabalho. Uma das maiores dificuldades enfrentadas no estabelecimento in vitro dos explantes de helicônias é a contaminação bacteriana. De acordo com os resultados obtidos, as cultivares Heliconia bihai cv. Peach Pink, H. ortotricha Candy Cane e H. ortotricha L. Anderss cv. Total Eclipse respondem diferentemente aos tratamentos de assepsia testados. A utilização do meio MS (Murashige; Skoog, 1962), com a concentração normal dos sais MS, 2,5 mg/ L BAP e 0,10 mg/L ANA foi o meio de cultura mais adequado para o cultivo in vitro de H. ortrotricha cv. Candy Cane, proporcionando uma boa taxa de brotação por explante e plantas bem desenvolvidas. Durante a aclimatação das plantas de H. ortotricha Candy Cane, as misturas de Plant Max® Horticultura + Fibra de coco e Plant Max® Horticultura + Casca de arroz carbonizado foram superiores em relação aos outros substratos testados, tanto pelo maior índice de plantas sobreviventes, quanto pelo maior crescimento da parte aérea, apresentando uma boa coloração das folhas e um maior desenvolvimento do sistema radicular. Para identificação dos contaminantes, 100 isolados de bactérias foram obtidos de meios de cultura contaminados e das folhas das plantas de casa de vegetação e submetidos a análises moleculares para a caracterização por Análise de Restrição de DNA Ribossomal Amplificado (ARDRA) e identificação pelo sequenciamento parcial do gene 16S rRNA. As bactérias isoladas das folhas de helicônia em meios de cultura TSA e R2A foram somente quatro gêneros nas três cultivares, identificados como Arthrobacter sp., Xanthomonas sp., Burkholderia sp. e Rhizobium sp.. Em meio de cultura contaminado constatou-se a presença de Burkholderia sp. nas culturas de H. ortotricha Candy Cane e H. ortotricha L. Anderss. cv. Total Eclipse e de Burkholderia sp. e Rhizobium em H. bihai cv. Peach Pink. As bactérias contaminantes durante o estabelecimento in vitro dos explantes de helicônias podem ser, portanto, provenientes das comunidades endofíticas da planta matriz fornecedora do explante / The Heliconia genus has increasing participation in the tropical floriculture, used mainly as cut flower and for landscape. The use of micropropagation in the process of heliconia production can improve product quality and productivity, providing large-scale and efficient plant multiplication, independently of the season, clonal multiplication of hybrids and other valuable plants, consequently with a more uniform production and possibility of a shorter period for harvesting. However, the success of the micropropagation process depends on various factors, such as the explant establishment in vitro, culture medium and a suitable substrate for acclimatization, which were studied in this work. Bacterial contamination is one of the difficulties for the in vitro establishment of heliconia explants. The results showed that Heliconia bihai cv. Peach Pink, H. ortotricha Candy Cane and H. ortotricha L. Anderss. cv. Total Eclipse responded differently to the descontamination treatments used. The use of full strength of MS (Murashige; Skoog, 1962) medium supplemented with 2,5 mg/L BAP and 0,10 mg/L ANA was the best for the in vitro culture of H. ortrotricha cv. Candy Cane, providing good multiplication rates, with well developed plants. H. ortotricha Candy Cane acclimatization showed better results in substrate mixtures containing Plant Max® Horticulture + Coconut fiber and Plant Max® Horticulture + Rind of carbonized rice with better rates of survival, better development of the aerial parts and root system development. For identification of the contaminantes, 100 bacteria isolates were obtained from contaminated culture media and leaves of greenhouse plants and submitted to morphological and molecular analyses to characterization for Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis (ARDRA) and identification for partial 16S rRNA gene sequencing. The bacterial isolates obtained from the leaves in TSA and R2A culture media had been only four species in the three heliconia cultivars, and were identified as Arthrobacter sp., Xanthomonas sp., Burkholderia sp. and Rhizobium sp.. In culture media contaminated Burkholderia sp. was evidenced in cultures of H. ortotricha Candy Cane and H. ortotricha L. Anderss. cv. Total Eclipse and Burkholderia sp. and Rhizobium sp. in H. bihai cv. Peach Pink. The bacterial contaminants observed during the in vitro establishment of heliconia explants originated from the endophytic community of the plants which were used as explant sources
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