Fibulin-4 is an extracellular matrix protein which plays an essential function in the assembly of elastic fibres, and may be involved in the modulation of TGFβ bioavailability and smooth muscle cell differentiation. Mutations in fibulin-4 can cause autosomal recessive cutis laxa, a frequently lethal connective tissue disorder. Although patient studies have provided some insights into the pathological mechanisms of this disease, a detailed analysis of the consequences of fibulin-4 mutations on a molecular and cellular level was required.The findings presented in this thesis demonstrate that cutis laxa-causing fibulin-4 mutations may lead to reduced extracellular levels of fibulin-4 due to its increased susceptibility to protease degradation and misfolding/aggregation. An accumulation of autophagic vesicles was observed, indicating a blockage of autophagy, possibly due to intracellular accumulation of aggregated/misfolded mutant protein. In the extracellular matrix, mutations affected the ability of fibulin-4 to interact with the major components of the elastic fibre assembly, heparin, LTBP-1 and fibronectin. In addition, fibulin-4 mutations generally reduced expression levels of elastic fibre assembly components. In summary, these findings contribute to the understanding of fibulin-4 associated cutis laxa, and provide a basis upon which future therapeutic interventions may be developed.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-23T21:10:53Z No. of bitstreams: 1 Lorena Marçal Aspecto clínico evolutivo e anatomopatologico da ....pdf: 2530583 bytes, checksum: e03486782523976068e1339a92bdd480 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-23T21:10:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lorena Marçal Aspecto clínico evolutivo e anatomopatologico da ....pdf: 2530583 bytes, checksum: e03486782523976068e1339a92bdd480 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Algumas formas clínicas da leishmaniose tegumentar (LT) são conhecidas pela sua refratariedade ao tratamento e/ou pela raridade de apresentação. Há a tendência de se considerar a LRC uma variante da leishmaniose tegumentar, uma forma de cicatrização peculiar (surge após cicatriz de leishmaniose prévia) que denota refratariedade ao tratamento, e não uma forma clínica da doença. Este trabalho foi descrito diante da raridade da manifestação dessa forma evolutiva de LT e da grande casuística de LRC nesta população estudada. Objetivo: Analisar as características clínicas, epidemiológicas, histológicas e terapêuticas dos pacientes com LRC procedentes da região do Vale de Jiquiriçá, Bahia. Metodologia: O estudo foi realizado no Município de Jiquiriçá, pertencente à região Sudoeste da Bahia, considerada endêmica para leishmaniose tegumentar (LT). Realizou-se um estudo descritivo retrospectivo e prospectivo e o tempo total de análise foi de 10 anos, tendo inicio em 2001. Na primeira fase do estudo, todos os 840 prontuários de pacientes ativos ou inativos foram analisados para se detectar casos onde a descrição clínico–evolutiva da lesão fosse compatível com LRC. Na segunda fase, os pacientes previamente diagnosticados e os que surgiram durante o acompanhamento totalizaram os 43 (5,1% dos casos de LT) pacientes de LRC desta casuística que foram analisados por 02 anos da seguinte forma: visita por médicos infectologistas e dermatologista mensalmente, com avaliação fotográfica e preenchimento de questionário padrão; exames diagnósticos como IDRM, histopatológico e exames laboratoriais; além de acompanhamento clínico do tratamento instituído avaliando-se efeitos colaterais das drogas e critérios de cura. Os esquemas terapêuticos propostos foram ao acaso e de acordo com ensaios terapêuticos, em paralelo, que os mesmos pacientes participaram. Resultados: A análise da série de 43 casos de pacientes portadores de LRC provenientes do Vale do Jiquiriçá revelou uma população de adultos jovens sendo 25% destes na faixa etária de 21-30 anos, lavradores (58%), portadores de lesões únicas ( > 75%) e de tamanho mediano em sua maioria (de 1 a 6 cm), predominantemente no segmento superior (cabeça e tronco), com 74% de prevalência. A maioria da população foi feminina, com 51,1% dos casos. Todos evoluíram com refratariedade ao tratamento (média de 8,5 meses de acompanhamento) com posterior cura clínica (82%). As melhores respostas foram obtidas com os esquemas de Glucatime + Pentoxifilina, com 4,1 meses de tratamento e Glucantime +Azitromicina + Pentoxifilina com 5,1 meses. Os pacientes apresentam histopatologia diferente da literatura, sem granulomas bem formados e com achado de Leishmanias em alguns casos. Em relação à apresentação clínica, as lesões apresentavam tubérculos ou placas ao redor das cicatrizes prévias, ao invés de pápulas como consta na literatura. Trata-se da maior casuística do Brasil. Conclusão: Trata-se de um estudo descritivo retrospectivo e prospectivo com avaliações de aspectos clínico-evolutivos, histopatológicos, epidemiológicos e terapêuticos de 43 pacientes portadores de LRC, que demonstrou uma população feminina, jovem, composta por lavradores e com lesões únicas no segmento superior do corpo. Os indivíduos evoluíram com refratariedade ao tratamento, apesar cura clínica final. / Clinical forms of cutaneous leishmaniasis (CL) are known for their resistance to treatment and / or rare presentation. There is a tendency to consider the LRC a variant of cutaneous leishmaniasis, a peculiar form of healing (scar comes after previous leishmaniasis) that denotes resistance to treatment, not a clinical form of the disease. This work was described on the rarity of the manifestation of this evolving form of LT and the large series of LRC in the population studied. Objective: To analyze the epidemiological, clinical, pathological and therapeutically characteristics of patients from the region LRC Valley Jiquiriçá, Bahia. Methodology: The study was conducted in the municipality of Jiquiriçá, belonging to the Southwest region of Bahia, considered endemic for cutaneous leishmaniasis (CL). We conducted a retrospective descriptive study and prospective and total analysis time was 10 years, having started in 2001. In the first phase of the study, all 840 medical records of active or inactive patients were analyzed to detect cases where the clinical description of lesion evolution was compatible with LRC. In the second phase, patients previously diagnosed and those that emerged during the period totaled 43 (5.1% of cases of CL) patients in this series that LRC were analyzed by 02 years as follows: seen by infectious disease specialists and dermatologists monthly with photographic evaluation and completion of a standard questionnaire, diagnostic tests such as Montenegro skin Test (MST), histopathological and laboratory tests, in addition to clinical follow up of treatment by evaluating the side effects of drugs and cure criteria. The treatment regimens were offered at random and according to therapeutic trials, in parallel, the same patients participated. Results: The analysis of series of 43 cases of patients suffering from LRC Jiquiriçá Valley revealed a population of young adults and 25% of those aged 21-30 years, farmers (58%) patients with single lesions (> 75%) and average size of the majority (1-6 cm), predominantly in the upper segment (head and trunk), with 74% prevalence. Most of the population was female, with 51.1% of cases. All of them developed resistance to treatment (mean 8.5 months of follow-up) with subsequent clinical cure (82%). The best responses were obtained with the schemes Glucatime  + pentoxifylline at 4.1 months of treatment and Glucantime  + Azithromycin +Pentoxifylline with 5.1 months. Patients have different histopathology in the literature, no well-formed granulomas and found Leishmanias in some cases. Regarding clinical presentation, the lesions or plaques tubers around the previous scars, papules rather than as stated in the literature. It is the largest sample of Brazil. Conclusion: This is a retrospective descriptive study and prospective evaluation of clinical, evolutionary, pathological, epidemiological and treatment of 43 patients with LRC, which showed a population of women, youth, farmers, and composed with a single lesion in the upper segment the

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-05-12T13:10:16Z No. of bitstreams: 1 Manuela Silva Costa Aspectos...2014.pdf: 1681771 bytes, checksum: d094d7232796821bd77aacd07eb4a3a1 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-05-12T13:10:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Manuela Silva Costa Aspectos...2014.pdf: 1681771 bytes, checksum: d094d7232796821bd77aacd07eb4a3a1 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-12T13:10:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Manuela Silva Costa Aspectos...2014.pdf: 1681771 bytes, checksum: d094d7232796821bd77aacd07eb4a3a1 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Introdução: As leishmanioses representam um grande problema de saúde pública sendo consideradas como doença emergente e sem controle - doença de categoria 1 - e que o foco das pesquisas deve ser a aquisição de novos conhecimentos e medidas eficazes de controle. Sob o ponto de vista clínico, a leishmaniose tegumentar (LT) nas Américas apresenta as seguintes modalidades: infecção inaparente, ganglionar, cutânea localizada (LCL), cutânea disseminada (LD), cutânea difusa (LCD), recidiva cútis (LRC) e mucosa. A primeira descrição sobre LRC ocorreu na leishmaniose no Oriente com o nome “chronic lúpus-like”, definidas como lesões de aparecimento tardio e refratariedade aos tratamentos ou como uma reação peculiar do sistema imune do hospedeiro ao parasito. A LRC é uma variante da LT convencional, uma forma de cicatrização, sendo importante entender aspectos relacionados à resposta imune do hospedeiro. Objetivo: Avaliar aspectos clínico-imunológicos e terapêuticos da LRC em pacientes da região do Vale de Jiquiriçá, Bahia, Brasil. Metodologia: O estudo foi realizado no Município de Jiquiriçá, pertencente à região Sudoeste da Bahia. Os pacientes foram atendidos no ambulatório de Doenças infecciosas e Parasitárias do Centro de Referência em Doenças Endêmicas do Vale do Jiquiriçá (CERDEJJC). Realizou-se um estudo descritivo retrospectivo e prospectivo com tempo de avaliação de 13 anos, tendo início em 2001. Na 1ª fase do estudo, foi realizada revisão dos prontuários dos pacientes com LRC curados ou com lesões parcialmente cicatrizadas (melhora clínica); na 2ª fase, casos novos de LRC foram cadastrados, tratados, acompanhados e a intradermorreação de Montenegro (IDRM) foi realizada em 43% (n=28) da casuística total (65 pacientes). Os esquemas terapêuticos definidos para nosso estudo foram: 1a escolha, com a associação das drogas Antimoniato-N-metilgucamina (405mg/Sb5+) + Azitromicina (500mg) + Pentoxifilina (400mg), sendo que nos casos de falha terapêutica instituiu-se o uso de Anfotericina B como terapia de 2a escolha. Resultados: A análise da série de 65 casos de LRC adultos jovens, portadores de lesões únicas e de tamanho mediano (de 1a 6 cm) acometendo vários segmentos corporais (face, tronco MMSS e MMII). Os casos tiveram maior concentração no gênero masculino (53,8%). Em 98% dos casos (n=63) evoluíram com refratariedade ao tratamento com posterior cura clínica (lesões totalmente cicatrizadas). A resposta terapêutica com a associação de (Sb5+ + Azitromicina + Pentoxifilina) e nos casos de falha terapêutica, com Anfotericina B foram satisfatórias para cicatrização total das lesões ao final do tratamento. O tempo médio de cicatrização total após terapia variou entre 2 a 5 meses. Na apresentação clínica das lesões observamos: placas, nódulos infiltrados, descamação, eritema, lesões satélites ao redor das cicatrizes e relatos de prurido no local. Conclusão: a LRC constitui-se como uma forma hiperérgica da LT, pouco diagnosticada pela raridade e por baixa suspeição clínica e resposta terapêutica satisfatória com associação de Sb5+, Azitromicina 500 e Pentoxifilina 400mg como 1ª escolha, representando 21% dos pacientes curados com tempo de cura de 2,6 meses e nos casos de falha terapêutica 18,5% obtiveram cicatrização total após terapia com Anfotericina B. Como subsídios evolutivos no surgimento da LRC, tivemos: idade adulta, diferença insignificante entre os gêneros, lesões com surgimento em indivíduos com cicatrizes anteriores de LT, localizadas em vários segmentos corporais e IDRM fortemente positva (>10mm) pós-cura total. / Introduction: Leishmaniasis represent a major public health problem being considered as emerging and uncontrolled disease - disease of category 1 - and the focus of research should be new knowledge and effective control measures. In relation clinical modalities, cutaneous leishmaniasis (CL) in the Americas presents the following forms: inapparent infection, lymphnode and localized cutaneous leishmaniasis (LCL), disseminated cutaneous leishmaniasis (DL), diffuse cutaneous leishmaniasis (DCL), cutis recidivans leishmaniasis (CRL) and mucosal form. The first description of CRL occurred in Orient leishmaniasis called "chronic lupus-like lesions” defined as a late compromise and refractory to treatment or as a peculiar reaction of the immune response of the host to the parasite. The CRL is a variant of the conventional TL, a form of wound healing. Objective: To evaluate clinical, immunological and therapeutic aspects of the CRL in patients of the Jiquiriçá Valley region, Bahia, Brazil. Methodology: The study was conducted in Jiquiriçá municipality, belonging to southwest Bahia state. The patients were enrolled at the outpatient Infectious and Parasitic Diseases of the Reference Center for Endemic Diseases Jiquiriçá Valley (CERDEJJC). We conducted a retrospective and prospective descriptive study with evaluation time of 13 years, beginning in 2001. In the 1st phase of the study, review of patient charts was performed with CRL healed or partially healed lesions (clinical improvement); in the 2nd stage, new cases of CRL were registered, treated, monitored and the Montenegro skin test (MST) was performed in 43% (n=28) of the total sample (65 patients).Therapeutic regimens were defined for this study: first choice, drugs association as meglumine anthimoniate (405mg) + Azithromycin (500mg) + Pentoxifylline (400mg), in cases of failure, instituted Amphotericin B as second-line therapy. Results: The analysis of the series of 65 cases of RCL young adults, persons with single lesions and median size (the first 6cm) affecting several body parts (face, upper and lower limbs, trunk). The cases had a higher concentration in males (53.8%). In 98% of cases (n=63) developed resistance to treatment with subsequent clinical cure (completely healed lesions). Therapeutic responses with drugs associations (meglumine anthimoniate + Azithromycin + Pentoxifylline), in cases of failure with amphotericin B were satisfactory for complete healing of lesions after the treatment. The median time to complete healing after therapy ranged from 2-5 months. The clinical presentation of the lesions observed: plates, infiltrated nodules, scaling, erythema, satellites lesions around the scars and pruritus. Conclusion: CRL is considered as a hyperergic form of TL underdiagnosed by the rarity and low clinical suspicion and satisfactory therapeutic response with Sb5+ association + Azithromycin 500 and pentoxifylline 400mg as 1st choice, representing 21% of patients cured with time of healing of 2.6 months and in cases of treatment failure 18.5% had complete healing after treatment with amphotericin B. As evolutionary subsidies in the emergence of CRL, we had: adulthood, insignificant difference between the genders, lesions and the onset in individuals with previous scars of TL, located in several body segments and MST strongly positve (>10mm) after total healing.

Made available in DSpace on 2016-03-22T17:27:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissert marcelo rocha cutis laxa.pdf: 3934539 bytes, checksum: 0cae748a5eb1aeff8680c47c0189a4f6 (MD5) Previous issue date: 2006-06-29 / Cutis Laxa é uma rara doença, congênita ou adquirida, localizada ou generalizada, do tecido conectivo. Existem três padrões hereditários distintos definidos da doença: autossômico dominante, autossômico recessivo e outro ligado ao cromossoma X.16,52,93-104 A doença caracteriza-se clinicamente por apresentar pele pendular, inelástica. A face do paciente com Cutis Laxa é característica com aparência senil, pele enrugada, com ectrópio palpebral, inclinação das comissuras palpebrais, nariz alargado, achatado e com columela curta, lábio superior alargado e orelhas grandes.16,52,99,101,105-114 A Cutis Laxa Congênita tem aparecimento precoce, na criança recém nascida ou na infância, costuma ter envolvimento sistêmico grave e cutâneo extenso, podendo levar ao óbito ainda na infância. Esta forma está ligada a herança autossômica recessiva. As alterações sistêmicas encontradas nessa forma congênita são: cardiovasculares ( ectasia de aorta e grandes vasos, cardiomegalia, insuficiência cardíaca congestiva, estenose de artéria pulmonar, dilatação do seio de valsalva e prolapso de válvulas cardíacas); respiratórias( enfisema pulmonar, pneumotórax, traqueobroncomegalias e bronquiectasias);digestivas( presença de divertículos no tubo digestivo, dilatação esofágica, hepatomegalia e má rotação intestinal); gênito-urinárias( divertículos, cistocele, prolapso retal e uterino, genitália infantil e esterilidade); podem também ocorrer o aparecimento de diversos tipos de hérnias e alterações osteoarticulares.16,52,97-98,101-104,106-107,115 A forma adquirida da Cutis Laxa, tem sido descrita após processos inflamatórios, exposição solar prolongada, reações alérgicas, urticária, picada de artrópodes, após uso de drogas ( isoniazida, penicilina), eritema multiforme e outras dermatoses inespecíficas. Também pode estar associada a outras doenças como: lúpus eritematoso sistêmico, artrite reumatóide, amiloidose, sarcoidose, síndrome nefrótica, sífilis, deficiência de alfa 1 antitripsina, dermatite herpetiforme, linfoma, mieloma múltiplo e infecção por Borrelia burgdorferi,. Essa forma costuma ser localizada, sem comprometimento sistêmico, com aparecimento no adulto jovem e seu curso costuma ser benígno.16,52,98,100,105-106,108-114 Histologicamente existe fragmentação, encurtamento e degeneração das fibras elásticas. Encontra-se infiltrado linfocítico e neutrofílico. A lesão mostra predominância de fagócitos e histiócitos, que resultam em fibras elásticas anormais e conseqüente diminuição do tecido elástico.16,52,92-115

GORAB is a protein that localises to the trans-Golgi network (TGN) and is known to interact with Rab6. The loss of GORAB leads to gerodermia osteodysplastica (GO), an autosomal recessive disorder which results in lax skin, precocious skin aging, osteoporosis, susceptibility to fractures and joint hyperelasticity. Both the function of GORAB and the mechanism of pathogenesis in GO patients are poorly defined. In this study, the cellular functions of GORAB have been investigated. Using a variety of approaches (yeast two-hybrid assays, pull-downs with recombinant proteins, proximity biotinylation assays combined with mass spectrometry and co-immunoprecipitations) it was possible to establish a network of interactions with Golgi-localised proteins, including Arf GTPases and the COPI-associated protein Scyl1, that suggests a possible role of GORAB in COPI-mediated trafficking. Consistent with this hypothesis, ultrastructural changes of the Golgi apparatus were observed as were abnormal protein glycosylation in primary skin fibroblasts derived from GO patients, detected using both lectin binding assays and mass spectrometric glycan profiling. Moreover, immuno-electron microscopy studies revealed unequal distribution of GORAB within the TGN and fluorescence recovery after photobleaching experiments show GORAB being very stably associated with Golgi membranes. These properties of GORAB seem to result from its ability to oligomerise and to interact with vimentin filaments. Based on these data, a model of GORAB acting as a scaffolding protein that organises sites of COPI budding at the TGN has been proposed. Additionally, analysis of both published and newly identified GORAB mutations found in GO patients revealed that they affect various properties of GORAB including its interaction with small GTPases and GORAB ability to oligomerise, which suggests that these features are important for GORAB cellular functions. Together, these data suggest that the underlying cause of the skin and bone defects observed in GO patients is impaired COPI trafficking at the Golgi apparatus resulting in abnormal glycosylation of extracellular matrix proteins.

El presente proyecto de un producto de mascarilla para el cuidado del cutis para mujeres de 18 a 24 años muestra la viabilidad de su ejecución, en base a la investigación realizada en Surco, La Molina y San Isidro a los NSE “A”, y “B”, que permitió detectar que las mujeres buscan productos de belleza con insumos naturales porque les brinda confianza y rechazan los productos que contienen químicos y se pudo validar con un experto dermatólogo que las mujeres preguntan con mayor constancia sobre que tratamientos pueden llevar para el cuidado de su piel. Así mismo, se identificó que muchas mujeres valoran altamente la información que se les brinda sobre el cuidado de su piel y con qué frecuencia deben usar este tipo de productos para que su piel se sienta más suave. Por último, se encontró que varias mujeres suelen preparar mascarillas caseras para cuidar su cutis porque tienen mayor confianza al hacerlos ellas mismas y que suelen ayudarse a través de tutoriales, ya que muchos de los productos que ofrecen en el mercado contienen químicos. Para poner en marcha este proyecto se hizo un análisis de la industria: consumidor, proveedores, competidores y otros factores externos. Además, se desarrollaron los siguientes planes: Plan Estratégico, Plan de Operaciones, Plan de Marketing, Plan de Recursos Humanos y Responsabilidad Social Empresarial y el Plan Financiero. Los cuales contienen las estrategias necesarias para la viabilidad de este proyecto. Como resultado, luego de una inversión inicial de 8,720 soles en el primero año de operaciones se tendrá una utilidad neta de 1,369 soles, 75,376 soles para el segundo año y 412,941 soles para el tercero año. / The present project of a mask product for skin care for women between 18 and 24 years old shows the feasibility of its execution, based on the research carried out in Surco, La Molina and San Isidro to the NSE “A”, and “ B ”, which made it possible to detect that women seek beauty products with natural inputs because it gives them confidence and reject products that contain chemicals and it was validated with an expert dermatologist that women ask more constantly about what treatments they can take to care of your skin. Likewise, it was identified that many women highly value the information provided to them about their skin care and how often they should use these types of products so that their skin feels smoother. Finally, it was found that several women tend to prepare homemade masks to take care of their skin because they have greater confidence in making them themselves and that they usually help themselves through tutorials, since many of the products they offer on the market contain chemicals. To start this project, an analysis of the industry was made: consumer, suppliers, competitors and other external factors. In addition, the following plans were developed: Strategic Plan, Operations Plan, Marketing Plan, Human Resources Plan and Corporate Social Responsibility, and the Financial Plan. Which contain the necessary strategies for the viability of this project. As a result, after an initial investment of 8,720 soles in the first year of operations, there will be a net profit of 1,369 soles, 75,376 soles for the second year and 412,941 soles for the third year. / Trabajo de investigación

The biomechanical and molecular characteristics of equine hyperelastosis cutis (HC) are not fully known. This study sought to better characterize HC by analysis of ultimate tensile strength, modulus of elasticity, toughness, and thickness of skin from 23 affected and unaffected horses. In addition total soluble collagen and glycosaminoglycan concentrations of skin were analyzed from 26 affected and unaffected horses. Affected horses' skin proved to be significantly weaker at five of seven sample locations (p<=0.05). The modulus of elasticity proved to be significantly different at three of seven sample locations and toughness at two of seven locations (p<=0.05). No significant difference was proven to exist between HC affected and unaffected horses for skin thickness or total soluble collagen and GAG concentrations. Collectively this data demonstrates that HC animals' reduced skin tensile strength is not due to a deficit of either collagen or GAG, but likely a result of altered collagen micro-architecture.

Orientadores: Carlos Eduardo Steiner, Edi Lucia Sartorato / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-09T07:50:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Scherrer_DanielZanetti_M.pdf: 2073780 bytes, checksum: 5690d67c200b80bd6e6b14beca0d0f07 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Cutis laxa é um distúrbio raro do tecido conectivo em que a pele perde sua firmeza, cedendo excessivamente e conferindo ao indivíduo um aspecto envelhecido. Dentre as formas geneticamente determinadas, há uma de herança autossômica dominante, uma de herança ligada ao X e três de herança autossômica recessiva. Sugere-se que cutis laxa autossômica recessiva tipo II ou cutis laxa com déficit de crescimento e de desenvolvimento seja a mesma entidade descrita com as denominações de ¿síndrome da pele enrugada¿ e gerodermia osteodisplástica. Tal confusão quanto à nomenclatura é, em parte, causada pelo desconhecimento de suas bases biológicas. Recentemente se definiu que a cutis laxa autossômica recessiva tipo I é causada por mutações nos genes FBLN4 e FBLN5, localizados nos cromossomos 11q13.1 e 14q32.1, respectivamente. Por outro lado, dois indivíduos com cutis laxa descritos na literatura apresentaram alterações da lisil oxidase, codificada pelo gene LOX localizado em 5q23. Deste modo, o presente estudo visou analisar três famílias não aparentadas com quadro típico de cutis laxa autossômica recessiva tipo II, ¿síndrome da pele enrugada¿ ou gerodermia osteodisplástica para mutações nos genes LOX, FBLN4 e FBLN5. Para tanto, foram obtidas amostras de DNA genômico a partir de linfócitos do sangue periférico, utilizando métodos descritos na literatura pertinente. Todos os genes candidatos tiveram suas regiões codificantes amplificadas e submetidas à análise de seqüenciamento direto. Nenhuma mutação que caracterizasse o fenótipo foi encontrada nesses genes. Assim, o presente estudo excluiu os genes LOX, FBLN4 e FBLN5 como responsáveis para essa forma de cutis laxa nessas famílias / Abstract: Cutis Laxa is a rare disorder of connective tissue in which the skin sags excessively, giving to the individual an aged aspect. Concerning the genetic forms, there is an autosomal dominant, an X-linked recessive, and three autosomal recessive conditions. It has been suggested that type II autosomal recessive cutis laxa or cutis laxa with growth and developmental delay is the same entity described with the denominations of wrinkly skin syndrome and gerodermia osteodysplastica. Such confusion is caused, in part, by the fact that its biological basis remains unknown. Recently, type I autosomal recessive cutis laxa has been associated with mutations in FBLN4 and FBLN5 genes located on 11q13 and 14q32, respectively. On the other hand, some patients with cutis laxa show abnormalities in lysyl oxidase, coded by the LOX gene located on 5q23. In this way, the present study analyzed three unrelated families with typical picture of type II autosomal recessive cutis laxa, ¿wrinkly skin syndrome¿ or gerodermia osteodysplastica for mutations in LOX, FBLN4, and FBLN5 genes. Molecular studies were performed in genomic DNA samples from peripheral blood. All codifier regions of the three candidate genes were amplified and submitted to direct sequence analysis. No mutation that characterized the phenotype was found in the genes. Thus, the present study excluded LOX, FBLN4 and FBLN5 as responsible for this form of cutis laxa in these families / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Carlos Eduardo Steiner, Claudia Vianna Maurer Morelli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T22:10:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Scherrer_DanielZanetti_D.pdf: 3629453 bytes, checksum: 18c59f0316e08a663d1352236ede8f6e (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Cutis laxa autossômica tipo II (CLAR tipo II) é um distúrbio raro do tecido conectivo em que a pele perde sua firmeza, cedendo excessivamente e conferindo ao indivíduo um aspecto envelhecido. Sugere-se que CLAR tipo II seja a mesma entidade descrita como "síndrome da pele enrugada" e gerodermia osteodisplástica. Tal confusão quanto à nomenclatura é, em parte, causada pelo conhecimento limitado de suas bases biológicas. O presente estudo visou analisar três famílias não aparentadas com quadro típico de CLAR tipo II para mutações nos genes ATP6V0A2, SCYL1BP1 e PYCR1. Nenhuma mutação foi identificada nos genes ATP6V0A2 e SCYL1BP1. Por outro lado, a triagem de mutações por sequenciamento direto do DNA no gene PYCR1, que desempenha um papel crítico na biossíntese de prolina, revelou duas novas variantes (p.Q10X e p.A241V), com efeito patogênico predito por análises de bioinformática. Em complementação, foi determinado o perfil de expressão gênica em tecido de pele e fibroblasto a partir de dois indivíduos com CLAR tipo II pela investigação de microarranjos, identificando os genes e as vias metabólicas possivelmente alteradas em tal condição, com a finalidade de entender os mecanismos subjacentes a este tipo de cutis laxa. Foi utilizado o Human Genome U133 Plus 2.0 array (Affymetrix¿), e analisados por meio dos pacotes Affy e RankProd do BioConductor. O perfil transcricional apresentado por pele fresca pela análise de microarranjos nos indivíduos com CLAR tipo II detectou 542 genes diferencialmente expressos em comparação com controles saudáveis pareados por sexo, idade e topografia anatômica. A análise de enriquecimento das categorias de ontologia gênica, utilizando o programa DAVID, incluiu a diferenciação e desenvolvimento epidérmico, ectodérmico e de queratinócitos. As vias de sinalização mais ativadas analisadas por software Ingenuity foram relacionadas a doenças e condições dermatológicas, além de "câncer, desenvolvimento e função do tecido conjuntivo, esquelético e muscular", bem como o metabolismo lipídico. Este é o primeiro estudo utilizando investigação de microarranjos na doença CLAR tipo II. Os resultados incluíram duas novas alterações genéticas (p.Q10X e p.A241V), além de fornecer uma visão completa das vias celulares diferencialmente expressas em tal condição. Desta forma, estes resultados contribuem para uma melhor compreensão da CLAR tipo II quanto aos mecanismos moleculares e nosologia / Abstract: Autosomal recessive cutis laxa, type 2 (ARCL2), is a rare disorder of connective tissue in which the skin sags excessively, giving to the individual an aged aspect. It has been suggested that ARCL2 is the same entity described under the denominations of wrinkly skin syndrome and gerodermia osteodysplastica. Such confusion is caused, in part, due to limited knowledge of its molecular basis. In the present study three unrelated families with ARCL2 were analyzed for mutations in ATP6V0A2, SCYL1BP1, and PYCR1. No causative mutations were identified in ATP6V0A2 and SCYL1BP1. However, screening for mutations in PYCR1 revealed two new variant (p.Q10X and p.A241V) by direct DNA sequencing, with predicted pathogenic effect on bioinformatic analysis. In complementation, in order to shed some light into the molecular mechanisms underlying this type of cutis laxa, gene expression profile in skin tissue and fibroblast were studied in two patients with ARCL2 using microarray investigation. This study was performed using the Human Genome U133 Plus 2.0 array (Affymetrix¿), and analyzed using Affy and RankProd packages from Bioconductor. Transcriptional profiling in skin tissue by microarray analysis from ARCL2 patients detected 542 differentially expressed genes compared to healthy controls matched by gender, age, and anatomic region. The top enriched gene ontology categories analyzed by DAVID included the differentiation and development of keratinocytes, epidermis and ectoderm. Among the most activated signaling pathways analyzed by Ingenuity software were related diseases and dermatological conditions and "cancer, connective tissue development and function, skeletal and muscular systems" as well as lipid metabolism. This is the first study using microarray investigation in the ARCL2 disease. Our results include two new genetic alterations (p.Q10X and p.A241V) and also provide a complete view of cellular pathways differentially expressed in such condition. The present study contributed to a better understanding of ARCL2 molecular mechanisms and nosology of this group / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.