Made available in DSpace on 2012-05-07T14:43:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000024.pdf: 4199729 bytes, checksum: 74211f1c6055fb1ae7b4b202afa26f78 (MD5) Previous issue date: 2006 / A dietilcarbamazina tem sido altamente efetiva contra filariose linfática, mas seu efeito sobre células de vertebrados permanece controverso. Apesar de ter sido descrita sua ação sobre microtúbulos, a hipótese de que esta droga atue sobre a espermatogênese não havia sido testada. Após o tratamento de camundongos Swiss com 200mg de DEC/kg durante doze dias, as análises ultraestruturais mostraram vacuolização das células de Sertoli e espermatogônias com características morfológicas de apoptose, como condensação do citoplasma e aumento da densidade cromossomal. Algumas espermátides apresentaram mitocôndrias vacuoladas, as quais estavam desorganizadas em relação ao eixo microtubular do flagelo. Além disso, as células de Leydig mostraram numerosas gotículas de lipídio distribuídas no citoplasma, corpos multivesiculares e círculos concêntricos gigantes de retículo endoplasmático liso, alguns dos quais englobando gotículas de lipídio. Algumas células de Leydig não apresentaram núcleo indicando um processo de esteatose. Baixas dosagens de DEC produziram alterações similares nas células de Leydig, entretanto seus efeitos foram diretamente proporcionais à concentração da droga. Os níveis de testosterona no soro foram significativamente menores no grupo tratado com 200mg de DEC/kg quando comparados com o controle. Entretanto, nenhuma mudança significante foi observada nas taxas de gravidez e no número de filhotes quando machos tratados com DEC acasalaram com fêmeas não tratadas, nas doses estudadas. Os resultados do presente estudo indicam que a DEC apresenta um importante efeito sobre a morfologia testicular e esteroidogênese de camundongos provavelmente por afetar tubulina e/ou complexo de microtúbulos. Porém, os presentes dados não excluam a possibilidade desta droga atuar diretamente sobre as vias enzimáticas hormonais

Orientador: Mary Anne Heide Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T02:22:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goes_RejaneMaira_M.pdf: 31146697 bytes, checksum: 001c044df43af0a388d9ff9fdaec86bc (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: O presente estudo teve como objetivo principal analisar os processos envolvidos na espermatogênese de um passeriforme, passer domesticus. Para isso foram empregadas técnicas de microscopia eletrônica de transmissão, técnicas de microscopia de luz, bem como dois testes citoquímicos. A análise dos cortes em parafina revelam que o testículo deste animal é constituído de uma massa de túbulos semíniferos anastomosados contendo epitélio germinativo com células em diversos graus de maturação. As espermatogônias formam uma camada basal neste epitélio e acima delas são encontrados grupos de espermatócitos primários. Ao nível ultra-estrutural podemos verificar que os espermatócitos primários apresentam aspectos nucleares muito peculiares, permitindo sua classificação nas subfases da prófase I. Os estágios da prófase I, neste animal, são marcados pela presença de uma estrutura intra-nuclear esférica, o corpo redondo, e massas citoplasmáticas densas. O posicionamento das espermátides no interior do túbulo seminífero, e seu modo de interação com a célula de Sertoli, são resposáveis pela formação de feixes, organizados radialmente no interior do túbulo. Com bases em diversas características morfológicas, principalmente o grau de compactação cromatínica, as espermátides foram classificadas em 6 estádios de diferenciação: E1, E2, E3, E4, E5 e E6. Em cortes ultrafinos verifica-se que o grau de compactação cromatínica resulta no surgimento de padrões nucleares regulares e o tratamento pelo Azul de Toluidina á ph 4.0 indica a substituição das proteínas histônicas por protaminas. O desenvolvimento do flagelo e acrossomo iniciam-se muito cedo durante a espermiogênese, em regiões adjacentes e em associação com um complexo de Golgi bem desenvolvido, e o feixe de microtúbulos se relaciona a diversas mudanças celulares, contribuindo para obtenção da forma final dos espermatozóides. Os espermátozoides testiculares são células helicoidais, com acrossomo cônico bastante alongado, onde se destaca a crista espiral. Eles apresentam núcleo compacto e cauda extremamente longa. Na cauda, além do axonema com fibras densas acessórias, destaca-se a mitocôndria muito longa, fazendo um trajeto helicoidal ao redor do axonema. As células de Sertoli desempenham um papel fundamental na espermatogênese do pardal, fornecendo um suporte mecânico e estando envolvidas no processo de espermiação / Abstract: This study was undertaken to analyse the process of spermatogenesis of a passerine bird, Passe r domesticus. Preparation were made for cytochemical analysis and morphological studies with light and electron microscopes. Sections of parattin embedded testes revealed its or ganization in the form of branching seminiferous tubules, with cells of the germinative epithelium in various maturation stages. Spermatogoniae form a basal layer, overlaid by primary spermatocytes. Typical nuclei permitted the classification of these cells into sub-stages of prophase I, in which the intra nuclear round body and dense cytoplasmic masses were also observed. The positioning of the spermatids in the seminiferous tubules and their envelopment by the Sertoli cell, lead to their organization into bundles. Spermatids were grouped into six stages (E1, E2, E3, E4, E5 e E6) according their morphological characteristics, especially the degree of chromatin condensation. Ultrathin sections revealed that nuclear compactation occur in regular, well established patterns, while the Toluidine Blue staining at pH 4.0 indicated the substitution of histones by protamines. Early development of the acrosome and the flagellum occur adjacent to a well developed Golgi complex. The microtubular sheath is related to various cellular events, probably contibuting to the final shape of the spermatozoa. Spermatozoa are helically coiled cells with a long conical acrosome, marked by a spiral keel, a compact nucleus and a very long tail. In the tail, the axoneme is surrounded by dense accessory fibers, and a long helically arranged mitochondrion. Sertoli cells are of fundamental importance in spermiogenesis. They contribute with the mechanical support, metabolic processes such as reabsortion and partipate in spermiation / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-11-21T14:22:35Z No. of bitstreams: 1 2012_RosanaCamargoNishimura.pdf: 5708270 bytes, checksum: 77b7bbcafa5c6d350028f17c8eb48482 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2012-11-21T14:41:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_RosanaCamargoNishimura.pdf: 5708270 bytes, checksum: 77b7bbcafa5c6d350028f17c8eb48482 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-21T14:41:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_RosanaCamargoNishimura.pdf: 5708270 bytes, checksum: 77b7bbcafa5c6d350028f17c8eb48482 (MD5) / Embriões de mamíferos sofrem duas ondas de reprogramação, uma no zigoto, onde os genomas maternos e paternos são desmetilados e em seguida metilados de novo, e outra nas células germinativas primordiais. Acredita-se que a metilação de novo nas células germinativas masculinas esteja estabelecida ainda antes do nascimento, no entanto, como e quando esse processo ocorre em bovinos ainda não foi estabelecido. Sendo assim, este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de verificar se há reprogramação epigenética durante a espermatogênese através da avaliação do perfil de metilação da região do éxon 1 do gene XIST em diferentes células espermáticas. Foram utilizados espermatócitos, espermátides alongadas e espermatozóides da cabeça e cauda do epidídimo coletados de testículos obtidos em abatedouro. As células coletadas tiveram o seu DNA extraído e em seguida tratado com bissulfito de sódio. O DNA tratado foi amplificado através de PCR nested, e o produto amplificado foi inserido em um vetor e clonado em bactérias. O DNA plasmidial foi extraído e sequenciado. As sequências do experimento foram comparadas com a sequência do gene XIST depositada no GenBank, e aquelas que apresentaram taxa de conversão do bissulfito de sódio ≥95% e homologia ≥97% com a sequência do GenBank foram utilizadas. Para a comparação do nível de metilação entre os grupos foram utilizados os testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, com nível de significância de P<0,05. O grupo dos espermatócitos, espermátides alongadas, espermatozóides de cauda e cabeça de epidídimo apresentaram 15,70%±14,54, 1,96%±1,96, 74,09%±6,78 e 45,09%±20,19 de metilação, respectivamente, sendo que o grupo da cabeça de epidídimo apresentou-se mais metilado do que os grupos espermatócitos e espermátides alongadas (P<0,01). Quando foram formados e comparados dois grupos, um com espermatócitos e espermátides alongadas, e outro com espermatozoides de cabeça e cauda de epidídimo, a análise mostrou haver diferença entre eles (P<0,01) com relação a percentagem de metilação. Os resultados sugerem que a reprogramação epigenética em bovinos ainda está ocorrendo durante a formação do espermatozóide. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Mammalian embryos undergo two waves of genome reprogramming, the first in the zygote, when paternal and maternal genomes are demethylated and, just after, re-methylated, and the second in the primordial germ cells. It is believed that re-methylation is reestablished in male germ cells before birth, however, it is not clear when and how this process occurs in bovine. Thus, this work aimed to verify if there is epigenetic reprogramming during spermatogenesis through the evaluation of the methylation profile of XIST gene exon 1 in different spermatogenic cells. Spermatocytes, elongated spermatids and spermatozoa from epididymis head and tail were collected from bovine testes obtained from a slaughterhouse. The collected cells had their DNA extracted and treated with bisulfite. The treated DNA was amplified through nested PCR, and the product was inserted on a vector and cloned in bacteria. The plasmidial DNA was extracted and sequenced. The sequences of the experiment were compared with the sequence of gene XIST from the GenBank and those that presented bisulfite conversion rate of ≥95% and homology of ≥97% with the sequence from GenBank were utilized. To compare the methylation level between the groups Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests were used, with significance level of P<0.05. The spermatocytes, elongated spermatids and spermatozoa from epididymis head and tail groups presented 15.70%±14.54, 1.96%±1.96, 74.09%±6.78 and 45.09%±20.19 of methylation respectively. The epididymis head group was more methylated then spermatocytes and elongated spermatids groups (P<0.01). When arranged in two groups, one with spermatocytes and elongated spermatids, and another with epididymids spermatozoa, and compared, it was observed that the methylation level was different (P<0.01) between them. These results suggest that epigenetic reprogramming is still occurring during spermatozoa formation.

Orientadores: Mary Anne Heidi Dolder, Jose Lino Neto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:24:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Conte_Monica_M.pdf: 472372 bytes, checksum: 91f13686806d6016acbe46c534f0fb30 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientador: Mary Anne Heide Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T19:12:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Normann_CarlosAugustoBorbaMeyer_M.pdf: 9722023 bytes, checksum: 700d6c5f88e51e4c23c9fa229302ed25 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O presente trabalho objetiva descrever a espermiogênese do carrapato do boi - (Boophilus microplus) (Canestrini, 1887), sob aspectos histológicos, histoquímicos, morfológicos e ultra-estruturais. A espermatogênese ocorre no testículo de carrapatos que iniciaram o repasto com sangue. As células da linhagem gamética encontram-se isoladas em cistos. A espermiogênese inicia­-se no organismo masculino, sendo concluída no aparelho reprodutor feminino, em fêmeas jovens. Espermatócitos encistados, após uma fase de crescimento, sofrem meiose e iniciam a diferenciação em espermátides redondas e, posteriormente, em alongadas. No organismo feminino dá-se a transformação das espermátides alongadas em espermatozóides. A espermiogênese envolve a fusão de uma série de vesículas, situadas logo abaixo da membrana plasmática -as cisternas sub-superficiais-, em uma única área limitada por membranas, a cavidade cistérnica. A formação da cavidade se dá a partir do deslocamento das cisternas para o pólo oposto ao que se encontra o núcleo. Esse processo é denominado polarização, sendo, portanto, originadas espermátides polarizadas. As cisternas, aparentemente, são formadas por túbulos do retículo endoplasmático; esses túbulos apresentam uma membrana notadamente elétron-densa. Apresentam conteúdo glico­protéico, demonstrando uma reação argirófila que aumenta gradualmente durante a diferenciação. No citoplasma de espermátides redondas e polarizadas, observam-se abundantes figuras de retículo endoplasmático rugoso, polissomos, complexos de Golgi, mitocôndrias, túbulos de retículo liso e, em espermátides com a cavidade cistérnica em formação, corpos multi­vesiculares. Também se observa a formação de uma vesícula fortemente PAS­positiva em posição supra-nuclear, a qual a literatura sugere tratar-se do acrossomo. As espermátides redondas passam por um alongamento, o qual é concomitante com a formação da cavidade cistérnica e com o deslocamento pôstero-Iateral do núcleo na célula. As espermátides alongadas, com a invaginação da cavidade, passam a dividir-se em três regiões cilíndricas concêr"1tricas. A primeira é o tubo externo, para onde se desloca o núcleo. A segunda é a cavidade, que apresenta uma matriz mais elétron-densa que o citoplasma da espermátide, de caráter glico-protéico. No terceiro compartimento, o cilindro interno, encontram-se muitas mitocôndrias; o cilindro interno constitui-se no centro de invaginação da espermátide em alongamento. Na membrana da cavidade cistérnica encontram-se projeções formadas durante a fusão das cisternas. Essas projeções são bastante complexas, sendo formadas por um eixo protéico fibroso, envolvido por membrana da cavidade. No organismo feminino, observa-se a eversão da espermátide. Nesse processo, observa-se a invaginação da membrana plasmática, formando o denominada canal acrossômico. Este canal encontra-se revestido por uma vesícula que se alonga, como uma cisterna, a qual é aparentemente derivada da vesícula supra-nuclear glicoprotéica presente em espermátides redondas polarizadas. Esta vesícula, a qual encontra-se abaixo da membrana plasmática da espermátide alongada, encontra-se abaixo da membrana do canal. Paralelo a este evento, ocorre a eversão da membrana da cavidade cistérnica, a qual passa a recobrir a superfície externa do espermatozóide. Observam-se as projeções da membrana da cavidade cistérnica recobrindo o espermatozóide, excetuando-se em dois pontos: a porção posterior, desprovida de projeções, e a extremidade anterior,.. na qual as projeções apresentam morfologia bastante diversa da visualizada no restante da célula. Estas projeções são ultra­estruturalmente mais simples, tendo um pedúnculo largo e bastante conspícuo. As projeções do espermatozóide aparentemente estão ligadas à geração de movimento, uma vez que estas estão ligadas a elementos do citoesqueleto. Observa-se que o citoplasma dos espermatozóides apresenta uma clara divisão em uma área central de filamentos mais espessos, tipo intermediários, e outra cortical, rica em microfilamentos. O núcleo dessas células encontra-se na porção posterior, lateralmente ao canal acrossômico. As mitocôndrias encontram-se dispersas no citoplasma das porções anterior e médio-anterior; nas áreas médio-posterior e posterior do espermatozóide, elas situam-se entre a região cortical e central do citoplasma. O movimento dos espermatozóides, observado in vivo, é de avanço por torção / Abstract: The objective of this study was to describe the spermatogenesis of the cattle tick (Boophilus microplus) (Canestrini, 1887), based on histological, histochemical, morphologic and ultrastructural infromation. Spermatogenesis occurs in the testis of ticks which begin their blood repast. The gametic cell lineage is isolated in cysts. Spermiogenesis begins in the male and is concluded in the reproductive ducts of young females. Encysted spermatocytes, after the growth phase, pass through meiosis and differentiate into round spermatids, then elongated spermatids. In the female organism, the elongated spermatids are transformed into spermatozoa. Spermatogenesis involves the fusion of vesicles situated just below the plasmic membrane, called the sub-surface cisternae, leading to the formation of the cisternal cavity. This cavity is formed by the concentration of cisternae in the pole opposite to the nuclear region. This process was called polarization and it originates the polarized spermatids. The cisternae apparently develope from a transformed endoplasmic reticulum; these tubules have very dense membranes. They have a glicoproteinaceous content, and give an argentophylic reaction, which gradually increases during differentiation. In the cytoplasm of round and polarized spermatids, abundant rough endoplasmic reticulum can be seen, and in spermatids engaged in forming their cisternal cavity, there are also many multivesicular bodies. Also, a strongly P.A.S. positive vesicle can be found positioned above the nucleus, which some authors consider to be the acrosome. The round spermatids pass through an elongation, concomitantly with the formation of the cisternal cavity and the latero-posterior positioning of the nucleus. Elongated spermatids are subdivided into three concentrical cilindrical regions by the invagination of the cisternal cavity. The first is the external tube, where the elongated nucleus is lodged. The second is the cisternal cavity which has a progressively dense matrix of glicoproteins. The third compartment, referred to as the internal cilinder, contains many mitochondria. This internal cilinder is the invagination center of the elongating spermatid. The membrane of the cisternal cavity forms innumerable projections, resulting from the fusion of the cisternae. These projections are quite complex, with a fibrous proteic axis, surrounded by the membrane cavity. In the female, the eversion of the spermatids is observed. During this process, the plasmic membrane invaginates,originating the acrosomal canal. This canal is covered by a flattened, elongated cistern-like vesicle, which is apparently derived from the supra-nuclear vesicle, which is rich in glicoproteins and first observed in polarized spermatids. This vesicle is in close contact with the plasmic membrane in elongated spermatids and maintans the same position in relation to this membrane when it lines the canal. At the same time, the eversion of the cisternal cavity occurs, turning this membrane inside out to cover the surface of the spermatozoon. Projections of the cisternal cavity membrane can be observed covering the entire spermatozoon with the exception of two regions: The posterior region which is smooth and the anterior extremity where the projections are very different from those seen on the rest of the spermatozoal surface. These projections are quite simple and rounded with a conspicuous peduncle. The projections appear to be associated with movement, since they are connected to cytoskeletal elements. The cytoplasm of spermatozoa have a clearly separated central region filled with thick filaments, similar to intermediate filaments and a cortical region rich in microfilaments. The nucleus of these cells is posterior and it follows the canal laterally. Mitochondria can be seen dispersed in the cytoplasm of the anterior and medial-anterior portion, while in the medial-posterior and posterior portion of the spermatozoon, they are alined separating the cortical and central regions of the cytoplasm. The motility of the spermatozoon, observed "in vivo", is advancement by torsion / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Fernanda da Cruz Landim / Banca: Maria Dalva Cesário / Banca: Maria Denise Lopes / Resumo: O estudo da espermatogênese e, consequentemente, das células-tronco espermatogoniais (SSC), podem acarretar descobertas de novos conhecimentos sobre a biologia dessas e de outros tipos de células-tronco (SC) adultas, bem como, futuramente, proporcionar tratamentos para infertilidade masculina, entendimento sobre a origem e formação de tumores testiculares, conservação de espécies em extinção e melhoramento genético de animais de produção, entre outros temas importantes em medicina reprodutiva. No entanto, os sistemas de cultivos e composição dos meios utilizados para induzir a espermatogênese in vitro, à partir de SSC, não são totalmente conhecidos. Desta forma, o objetivo geral deste experimento foi estudar a diferenciação celular e a indução da espermatogênese in vitro de SCC oriundas da digestão testicular de camundongos Swiss (entre 6-10 dias pós-parto, dpp) cultivadas em diferentes sistemas: o bidimensional (2D) ou convencional e o tridimensional (3D). Para tanto, após a digestão testicular, a suspensão celular foi transferida para placas cobertas por uma fina camada de ágar (sistema 2D). Enquanto, uma camada mais espessa de ágar (SACS - Soft Ágar Culture System) ou metilcelulose (MCS - Methylcellulose Culture System) foram confeccionadas para mimetizar a disposição celular in vivo (sistema 3D). Além disso, também foram avaliados o efeito da adição de gonadotrofinas ao meio de cultivo, em ambos os sistemas. A formação e manutenção de clusteres de espermatogônias foram mais visíveis nas placas contendo gonadotrofinas, independente do sistema de cultivo. Porém, o sistema de cultivo 3D-MCS-gonadotrofinas(+) mostrou-se mais vantajaso em relação ao sistema de cultivo 2D, uma vez que beneficiou a neoformação de estruturas císticas semelhante a luz dos túbulos seminíferos, além de resultar em suspensão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The study of spermatogenesis and spermatogonial stem cells (SSC) may result in the discovery of new knowledge about the biology of these and other types of adults stem cells (SC). In the future, could be provided treatments for male infertility , understanding the origin and formation of testicular tumors, preservation of endangered species and genetic improvement of livestock and others importants issues in reproductive medicine. However, culture systems and composition of culture media used to induce spermatogenesis in vitro from the SSC are not fully understood. Thus, the goal of this experiment was to study the induction of those cells differentiation and spermatogenesis in vitro from the testicular digestion of Swiss mice 6-10dpp cultivated in different systems: the two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D). After testicular digestion, the suspension cell was transferred to plates coated with a thin layer of agar (2D). While a thicker layer of agar (SACS - Soft Agar Culture System) or methylcellulose (MCS - Methylcellulose Culture System) were made to mimic the in vivo cell (3D). We also evaluated the effect of the addition of gonadotropins. The cluster formation and maintenance of spermatogonia was more visible on gonadotropins (+), in both systems. . However, the 3D-MCS(+) was more advantageous compared to 2D culture system because benefited the formation of clusters of spermatogonia and also the newly formed cystic structures similar to lumen of the tubules seminiferous tubules. We could concluded that the 3D-MCS(+) culture demonstrated better spatial organization found in vivo. However, the potential fertility of these... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-16T11:01:09Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 559724 bytes, checksum: 00663003be3fba609be5f35085706a4a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-16T11:01:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 559724 bytes, checksum: 00663003be3fba609be5f35085706a4a (MD5) Previous issue date: 2002-02-04 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Embora a onça parda seja o segundo maior felino das Américas e apresente uma ampla distribuição latitudinal, abrangendo os mais diversos habitats, muito pouco se sabe a respeito de sua morfofisiologia testicular, incluindo o processo espermatogênico. Os parâmetros de biometria corporal e morfofisiologia testicular são de suma importância no desenvolvimento de protocolos para reprodução assistida nas diferentes espécies. Foram estudados no presente experimento nove onças pardas adultas provenientes de cativeiro, estes animais pesaram em média 45Kg com massa testicular média de 7,45 g tendo apresentando assim índice gonadossomático de 0,03%. O volume médio de túbulos seminíferos por testículo foi de 5,2 ml, o que representou cerca de 78% do parênquima testicular. Em relação à massa corporal, cerca de 0,02% desta é alocada em túbulos seminíferos, ou seja, o índice tubulossomático. A onça parda adulta apresentou cerca de 18 metros de túbulo seminífero por grama de testículo. O compartimento intertubular representou cerca de 22% do parênquima testicular, o que equivale à cerca de 1,5 ml por testículo. Já as células de Leydig isoladamente, corresponderam a 8% do parênquima testicular, sendo o índice leydigossomático 0,002%. O espaço intertubular foi caracterizado como sendo do tipo II segundo a classificação de FAWCETT et al. (1973). O diâmetro e altura do epitélio seminífero foram em média 227,37 m e 67,78 m, respectivamente. Os valores registrados neste estudo encontram-se dentro da amplitude observada para as demais espécies já estudadas. Neste estudo, a duração do ciclo do epitélio seminífero foi estimada usando-se injeções intratesticulares de timidina triciada.A duração total do ciclo do epitélio seminífero da onça parda foi calculada em 9,96 dias e como aproximadamente 4,5 ciclos do epitélio seminífero são necessários para que todo o processo espermatogênico seja completado, cerca de 44,8 dias são despendidos na produção de espermatozóides, a partir de uma espermatogônia. A duração da espermiogênese, prófase e demais eventos da meiose da onça parda adulta foram respectivamente 14,08; 15,2 e 1,79 dias. Foram descritos oito estádios do ciclo do epitélio seminífero, através do método da morfologia tubular, o qual se baseia na forma e posição do núcleo das espermátides e na ocorrência de divisões meióticas. Os valores observados na onça parda para a freqüência relativa das fases pré- meiótica, meiótica e pós-meiótica foram respectivamente 4,0; 1,8 e 4,15 dias. O estudo do processo espermatogênico torna-se extremamente relevante, subsidiando com informações básicas o desenvolvimento e sedimentação de tecnologias em reprodução assistida. Embora a onça parda (Puma concolor) seja o segundo maior felino das Américas e apresente uma ampla distribuição latitudinal, muito pouco se sabe a respeito de sua morfofisiologia testicular, incluindo a sua espermatogênese. Neste trabalho estimou- se que na onça parda cerca de 7,7 espermatócitos primários são produzidos a partir de uma espermatogônia do tipo A. O rendimento meiótico foi em torno de 3,0 células, o que equivale a uma perda de 25% no processo meiótico; o rendimento geral da espermatogênese foi de 22,7 células. Cada célula de Sertoli é capaz de sustentar cerca de 12,5 células germinativas, das quais 7,3 são espermátides arredondadas. A onça parda, com aproximadamente vinte e seis milhões de espermatozóides produzidos por grama de testículo por dia, encontra-se classificada entre as espécies de alta eficiência espermatogênica. / Although the puma is the bigger feline of Americas and presents an ample latitudinal distribution, enclosing most diverse habitats, much little is known regarding its morfofisiologia to testicular, including the spermatogenic process. The parameters of corporal biometry and morfofisiology of testis are of utmost importance in the development of protocols for reproduction attended in the different species. Nine adult pumas proceeding from captivity had been studied in the present experiment, these animals had weighed in average 45Kg with mass to testicular average of 7,45 g having thus presenting gonadossomatic index of 0,03%. The average volume of seminiferous tubules for testicule was of 5,2 ml, what it represented about 78% of testis. In relation to the corporal mass, about 0,02% of this it is placed in seminiferous tubules, or either, the tubulessomatic index. The adult puma presented about 18 meters of seminiferous tubules for gram of testicule. The intertubular compartment represented about 22% of testis, what it is equivalent to 1,5 ml of the testis. The Leydig cells separately, had corresponded 8% of the testis, being leydigossomatic index 0,002%. The intertubular space was characterized as being of type II according to classification of FAWCETT et al., (1973). The diameter and height of the seminiferous epithelium had been in average 227,37mm and 67,78mm, respectively. The values registered in this study meet inside of the amplitude observed for the already studied species. In this study. The duration of the cycle of the seminiferous epithelium was observed using intra- testicular injections of tritium thimidine. A total duration of the cycle of the seminiferous epithelium of the puma was calculated in 9,96 days and as approximately 4,5 cycles of the seminiferous epithelium are necessary so that all spermatogenic process is completed, about 44,8 days are expended in the production of spermatozoa, from a espermatogônia. The duration of spermiogenesis, prophase and other events of meiosis of the puma had been respectively 14,08; 15,2 and 1,79 days. Eight stadiums of the cycle of the seminiferous epithelium had been described, through the method of the tubular morphology, which is based on the form and position of the nucleus of spermatides and on the occurrence of meiotic divisions. The values observed in the puma for the relative frequency of the phases daily pre-meiotic, meiotic and pos-meiotic had been respectively 4,0; 1,8 and 4,15 days. In this work it was observed that in the puma about 7,7 primary espermatócitos are produced from a espermatogônia of the type A; the meiótico income was around 3,0 cells, what is equivalent to a loss of 25% in the meiótico process; the general income of spermatogenesis was of 22,7 cells. Each cell of Sertoli is capable to support about 12,5 germ cells, them which 7,3 is rounded spermatides. The puma, with approximately twenty and six million spermatozoa produced per gram of testis per day, meets classified between the species of high spermatogenic efficiency. / Não foi encontrado o CPF do autor. Dissertação submetida com o início do trabalho sem numeração das páginas (Itens 1, 2 e 3) e a página 1 começando da metade até o final (Itens 4, 5 e 6).

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-16T22:53:52Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Arthur do Nascimento Cabral.pdf: 3365751 bytes, checksum: 976e5152fbbcd8fa55f5f64eba574253 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-27T22:30:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Arthur do Nascimento Cabral.pdf: 3365751 bytes, checksum: 976e5152fbbcd8fa55f5f64eba574253 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-27T22:30:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Arthur do Nascimento Cabral.pdf: 3365751 bytes, checksum: 976e5152fbbcd8fa55f5f64eba574253 (MD5) Previous issue date: 2017-06-20 / CAPES / O presente estudo objetivou investigar aspectos helmintológicos deMabuya arajara, bem como avaliar a relação do ciclo testicular da espécie com o desenvolvimento do segmento sexual renal(SSR) e a sazonalidade ambiental. Realizamos coletas bimensais(setembro 2009/julho 2010) na Chapada do Araripe, Nordeste do Brasil. Imediatamente após as coletas, todos os lagartos foram pesados, mensurados quanto ao comprimento rostro-cloacal (CRC) e eutanasiados. Parasitologicamente, após análises do trato digestivo deM. arajara, os helmintos foram clareados com lactofenol eidentificados com a utilização de microscópio deluz. Ao todo, 56%dos lagartos examinados foram infectados por quatro espécies de nematodes: Physalopteroidesvenancioi, Physalopterasp., Strongyluris oscarie Parapharyngodon alvarengai, sendo esta última espécie amais expressiva(prevalência de53.5%; intensidade de infecção 3,37 +2,0; índicedediscrepância0,69). Parapharyngodon alvarengai atuou constantemente no intestino de M. arajaraao longo do ano,estando suas maiores taxas de infecção associadas ao mês de julho e com extensão por toda estação seca da região. Além disso, lagartos de maiores CRC e CRC/massa foram mais infectados frente aos demais. Por outro lado, as relações entre abundância parasitária/massa e entre os sexos não foram significativas. Portanto, classificamos M.arajara como um novo hospedeiro para os nematodes descritos. Considerando aspectos reprodutivos, rins e testículos dos espécimes foram submetidos a tratamentos histológicos. Realizamos colorações com Hematoxilina e Eosina, Ácido Periódico Reativo de Schiff(PAS) e Azul de Alcian (AA)para avaliação geral do tecido, detecção de polissacarídeos neutros e ácidos, respectivamente. O pico reprodutivo foi refletido pela máxima espermatogênese durante a estação seca da região. Citologicamente, os túbulos seminíferos foram preenchidos por espermatozoides e células germinativas em diferenciação. O SSR consistiu em um epitélio colunar alto, núcleos basais e conteúdo de secreção eosinófilo ePAS+que preencheu todo o citoplasma das células. A estação chuvosa marcou o estado de inatividade reprodutiva pela não produção de espermatozoides. Em sincronia, o SSR foi formado por um epitélio cúbico e ausência ou pequena quantidade de material de secreção AA+. A reprodução de M. arajara é sazonal e, assim como os dados parasitológicos mostraram, a estação seca da região atuou no ajuste da espermatogênesee da ação suplementar do SSR. Sugerimos, portanto, que uma possível elevação dos níveis de testosterona neste período, responsável pelo desencadeamento da atividade reprodutiva da espécie, contribua para a susceptibilidade à infecção parasitária. / The present study aimed to investigate helminthological aspects of Mabuya arajara, and evaluate the relationship between testicular cycleof the species with the development of renal sexual segment (RSS) and environmental seasonality. Bi-monthly field sampling were conducted (September 2009/ July2010)in Chapada do Araripe, north eastern Brazil. Immediately after collected, all lizards were weighed, snout-vent length (SVL)was measured and euthanized. For parasitology, after analysis of the digestive tract of M. arajara, helminthes were cleared with lacto phenol and identified using light microscopy. As result,56%ofexamined lizards were infected by four species of nematodes: Physalopteroides venancioi, Physaloptera sp., Strongyluris oscariand Parapharyngodon alvarengai, with this last species the most expressive(prevalenceof53.5%; mean infection intensityof3.37 +2.0; discrepancyindexof0.69). Parapharyngodonalvarengaiwas present in the intestine of M. arajara throughout the year, being its highest rate of infection related to the month of July and extending during the dry season of the region. In addition, lizards of larger SVLand SVL/mass were more infected compared to the others. However, the relationships between parasite abundance/mass and between sexes were not significant. Therefore, we classified M. arajara as a new host for the nematodes here identified. Concerning reproductive aspects, kidneys and testicles were submitted to conventional histological processes. We performed colorations with hematoxylin and eosin, Periodic Reactive Acid of Schiff(PAS) and Alcian blue for general tissue evaluation, neutral and acid polysaccharides detection, respectively. Thereproductivepeak was reflected by the maximum spermatogenesis during the dry season. Cytologically, the seminiferous tubules were completed by spermatozoids and germ cells in differentiation. The renal sexual segment(RSS)consisted of a high columnar epithelium, with nuclei located basally and secretion of eosinophilic granules filling the cytoplasm of epithelial cells, it also showed a strong positive reaction PAS+.The rainy season marked the state of reproductive inactivity by the non-production of spermatozoids. In synchrony, the SSR was formed by cubic epithelium and the absence or low quantity of secretion content of AA+. The reproduction of M. arajara is a seasonal and, as indicated by the parasitological data, the dry season seems to influence the spermatogenesis and supplementary action of RSS. We suggest, therefore, that a possible elevation of testosterone levels in this period, responsible for triggering of the reproductive activity of the species, contributes to the susceptibility to parasitic infection.

Orientadores: Ubirajara Ferreira, Sidney Glina / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T05:07:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castro_MarcosAntonioSantana_M.pdf: 1660960 bytes, checksum: 01fb3a36cde03c94c15d31bc92d19ac1 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: INTRODUÇÃO: A cisplatina é uma droga amplamente utilizada no tratamento do câncer e seu efeito antineoplásico deve-se à habilidade de inibir a síntese de ácido desoxirribonucléico (DNA). O grau de lesão testicular induzido por este quimioterápico é variável, podendo afetar tanto o epitélio seminífero como as estruturas do tecido intertubular. Sabe-se ainda, que a cisplatina induz à queda dos níveis de antioxidantes séricos, que pode resultar em falência do mecanismo de defesa contra a lesão oxidativa ocorrida. OBJETIVO: Verificar os efeitos da administração isolada da cisplatina ou associada a superóxido de dismutase (SOD) e catalase na quantificação da produção espermática através de contagens das células da linhagem espermatogênica e das reservas espermáticas testicular e epididimária, e nas proporções volumétricas dos componentes testiculares de ratos adultos. MATERIAL E MÉTODOS: Vinte e quatro ratos Wistar adultos foram divididos casualmente em três grupos: Grupo I - Controle: submetidos à injeção intraperitoneal (IP) de soro fisiológico (SF) a 0,9% e também, através da veia femoral (n = 8); Grupo II: submetidos à injeção IP de cisplatina na dose de 4 mg/kg de peso corporal e a SF 0,9%, através da veia femoral (n = 8) e Grupo III: submetidos à injeção IP de cisplatina na mesma dose e a SOD + catalase, na dose de 2,5 mg/ml cada, através da veia femoral (n = 8). Todos os animais foram sacrificados 13 dias após injeção intraperitoneal. RESULTADOS: O tratamento com cisplatina com ou sem uso de antioxidantes não afetou os seguintes parâmetros: (1) pesos testicular, epididimário e das glândulas anexas; (2) número de células da linhagem espermatogênica assim como nas razões destas células com as células de Sertoli; (3) reservas espermáticas testicular e epididimária totais ou por grama de parênquima; e (4) diâmetro nuclear/nucleolar médio das espermatogônias, espermatócitos primários em preleptóteno, em paquíteno e das células de Sertoli. Entretanto, o tratamento afetou significativamente os seguintes parâmetros: (1) peso corporal de ratos tratados com cisplatina e cisplatina + antioxidantes reduzidos; (2) proporção volumétrica que se mostrou diminuída no epitélio seminífero testicular nos animais tratados com cisplatina sugestivo de possível proteção pelos antioxidantes; (3) percentual da túnica própria dos testículos de ratos tratados com cisplatina + antioxidantes que se mostrou aumentado em relação aos tratados com cisplatina; (4) percentual do estroma testicular dos animais tratados com cisplatina aumentado em relação aos tratados com cisplatina + antioxidantes; (5) percentual de núcleos das células de Leydig dos testículos de ratos tratados com cisplatina e cisplatina + antioxidantes que se evidenciou reduzido; e (6) diâmetro nuclear médio de espermátides arredondadas nos animais tratados com cisplatina e cisplatina + antioxidantes que se mostrou reduzido. CONCLUSÕES: a proporção volumétrica dos componentes testiculares, principalmente o epitélio seminífero, foi o parâmetro mais afetado pela cisplatina, sendo este efeito redutor minimizado pelo uso de antioxidantes / Abstract: INTRODUCTION: Cisplatin is a common widely used antineoplasic drug with the ability to inhibit DNA synthesis. The extent of testicular lesion induced by cisplatin is variable affecting both the seminiferous epithelium and the structures of the intertubular spaces. Cisplatin is also known to lead to a reduction of the serum levels of antioxidants which could result in the failure of the defense mechanism against oxidative lesion. OBJECTIVE: To evaluate the effects of the administration of cisplatin alone or in association with superoxide dismutase (SOD) and catalase in the quantification of sperm production through the analysis of germ cell counts, of testicular and epidydimal sperm reserves as well as of the volumetric densities of the testicular components of adult rats. MATERIAL AND METHODS: Twenty-four adults Wistar rats were randomly assigned to either of three groups: Group I- Control: submitted to i.p. injection of 0,9% saline solution as well as through the femoral vein (n=8); Group II: submitted to i.p. injection of cisplatin (4mg/kg body weight) and 0,9% saline solution through the femoral vein (n=8) and Group III: submitted to i.p. injection of cisplatin (4mg/kg body weight) and SOD + catalase (2,5mg/ml each) injection through the femoral vein (n=8). All animals were killed 13 days following i.p injection. RESULTS: Treatment with cisplatin or cisplatin plus antioxidants did not affect the following parameters: (1) testicular, epidydimal and the accessory complex glands; (2) number of germ cells as well as their ratios to the Sertoli cells; (3) testicular and epidydimal sperm reserves (total or per gram) and (4) nuclear/nucleolar mean diameter of spermatogonia, primary spermatocytes at preleptotene and pachytene stages and the Sertoli cells. However, the treatment significantly affected the following parameters to a variable extent: (1) reduced body weight of rats treated with cisplatin and cisplatin plus antioxidants; (2) reduced volume density of testicular seminiferous epithelium in animals treated with cisplatin but protected with antioxidants; (3) increased percentage of the testicular tunica propria of the rats treated with cisplatin plus antioxidants in comparison with the cisplatin treated animals; (4) increased percentage of testicular stroma in animals treated with cisplatin as compared to the cisplatin plus antioxidants treated rats; (5) reduced percentage of the Leydig cell nuclei of rats treated both with cisplatin and cisplatin plus antioxidants and (6) reduced mean nuclear diameter of round spermatids of rats treated both with cisplatin and cisplatin plus antioxidants. CONCLUSION: volume density of the testicular components, mainly that of the seminiferous epithelium, was the most important parameter affected by cisplatin, its effect being ameliorated by the use of antioxidants / Mestrado / Cirurgia / Mestre em Cirurgia

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:18:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_AdelinaAparecidaFrancisca_D.pdf: 14108792 bytes, checksum: 1219342c239466be393a3a69a7387917 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: o estudo do conjunto de características estruturais, ultra-estruturais e citoquímicas das fases iniciais da espermatogênese, assim como das células presentes nos canais condutores de esperma durante um ciclo reprodutivo podem contribuir de forma significativa para o entendimento da morfologia e fisiologia da reprodução, do processo de maturação dos espermatozóides e de aspectos comportamentais e ecológicos de populações de lagartos. Com o objetivo de contribuir para essas diferentes áreas do conhecimento, o presente trabalho traz novos dados do lagarto Tropidurus itambere, sobre o ciclo reprodutivo testicular e epididimário, a espermatogênese, diferenciação das espermátides e dos espermatozóides analisados com o uso de técnicas de citoquímica estrutural e ultra-estrutural e com o uso de imunocitoquímica ultra-estrutural. Além disso, espermatozóides testiculares e espermatozóides presentes no receptáculo seminal de remeas foram observados com a utilização de lectinas, para localização de açúcares específicos. Também são caracterizados os aspectos morfológicos e histoquímicos (localização de glicoproteínas, polissacarídeos, glicosaminoglicanos ácidos) dos canais condutores de esperma em machos e fêmeas. Esses dados foram obtidos para animais durante o ciclo reprodutivo anual, capturados num fragmento de Mata Atlântica do estado de São Paulo. O ciclo reprodutivo é anual, com breve período de descontinuidade, dados muito semelhantes aos estabelecidos em outros trabalhos prévios de ecologia. A espermatogênese é mostrada pela primeira vez em lagartos desde suas fases iniciais da diferenciação celular. Algumas variações puderam ser notadas quanto à ultra-estrutura do espermatozóide deste lagarto Tropidurídeo e outros das famílias Iguanidae e Agamidae, reforçando a revisão sistemática proposta recentemente. O oviduto é constituído por três regiões distintas, das quais a mais distal é responsável pela estocagem dos espermatozóides por um curto período do ciclo anual. Foram detectados em eventos da espermatogênese, durante o ciclo anual proteínas básicas (principalmente no cone subacrosomal, centríolos da peça intermediária, corpos densos, proteínas periféricas do axonema e bainha fibrosa do flagelo), polissacarídeos (célula de Sertoli e sua organização durante os picos do ciclo reprodutivo, e na formação do complexo acrosomal), glicogênio (formação do complexo acrosomal), fosfatase ácida (em regiões claras do complexo acrosomal e em volta de espermatozóides em degeneração no período quiescente) e lipídeos (na vesícula pró-acrosomal e em vesículas espalhadas no citoplasma da célula de Leydig), áçucares específicos (durante a formação do complexo acrosomal em espermátides e em quase todas as estruturas do espermatozóide). Taís dados inexistiam para o grupo de Lacertílio_ e guardam algumas semelhanças, principalmente quanto à formação do acrosomo, com alguns anuros e aves. Foi detectada através de imunocitoquímica a presença de actina no cone subacrosomal e perforatório do complexo acrosomal, o que confirma a homologia destas organelas quanto à estrutura e função no espermatozóide de lagartos / Abstract: The study of the structural, ultrastructural and cytochemical characteristics of the initial phases of spermatogenesis was undertaken, also including the cells present in the sperm throughout the reproductive cycle. This data brings significant contributions toward a better understanding of the morphology and physiology of reproduction, of the maturation process of the spermatozoa and the behavior and ecology of lizard populations. With this objective, this study brings new data on the lizard, Tropidurus itambere, its testicular and epididymal characteristics during the reproductive cycle, its spermatogenesis showing the differentiation of spermatid and spermatozoon structure and ultrastructure, as analyzed by cytochemical techniques and with ultrastructural immunocytochemistry. A comparison of testicular spermatozoa and those found in the female's seminal receptical was made using lectins to locate specific sugars. Morphological and histochemical methods located glycoproteins, polisaccharides, acid glycosaminoglycans in the sperm ducts of males and females. This data was studied throughout the reproductive cycle of animals obtained from a fragment of the Atlantic forest in the state of São Paulo. The cycle is annual with a brief descontinuous period, as previously very similar of the established by ecological studies. Spermatogenesis is shown for the first time in a lizard, including the first stages of cell differentiation. Some variations were observed for the spermatozoon of this Tropiduridae lizard in relation to the Iguanidae and Agamidae, which reinforces recent revision of their systematic positions. The oviduct is divided into three portions, the most distal one being responsible for spermatozoon storage during a short period in the annual cycle. Basic proteins were detected in specific structures during the annual cycle (especially the subacrosomic cone, centrioles in the midpiece, dense bodies, peripheral proteins of the axoneme and fibrous sheath of the flagellum). Polisacchaddes were found in the Sertoli cell, showing peak organization of this cell during the reproductive period and its disorganization in quiescence, as well as occurring during acrosomal complex formation, while glycogen was identified only in the acrosomal complex.. Acid phosphatase was verified in the clear regions of the acrosomal complex and surrounding the degenerating sperm cells of the quiescent period. Lipids are plentiful in the Leydig cells of this period and in the pro acrosomic vesicle. Specific sugars were verified during the acrosomic complex formation in spermatids and mark almost all structures in the spermatozoon. This data is new among lizards and can be compared with anurans and birds, especially for acrosome formation. Actin was detected with an immunocytochemical method in the subacrosomic cone and the perforatorium of the acrosomic complex, thus confirming their homology as to structure and function / Doutorado / Histologia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural