O objetivo deste trabalho foi o de avaliar o efeito da suplementação da dieta de Tilápias (Oreochromis niloticus) utilizando sal comercial composto dos microminerais cobre, manganês e zinco, sobre a histologia e o desenvolvimento das gônadas dos machos. Foram utilizados 1200 machos masculinizados de tilápia, com média de peso de 120g, suplementadas com níveis crescentes (0,00; 0,35; 0,70; 1,05; 1,40 e 1,75 mg/kg) de um produto comercial composto por Cu 13,40 g/kg; Mn 26,70 g/kg e Zn 66,70 g/kg. O experimento foi conduzido em um sistema de recirculação de água, composto por 24 tanques divididos ao meio totalizando 48 unidades experimentais. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com medidas repetidas no tempo. As biometrias e coletas foram realizadas em 16 e 32 semanas de experimento, para avaliar o desenvolvimento dos peixes. As gônadas coletadas foram preparadas e cortadas para confecção de lamina histológica, após coradas com hematoxilina e eosina, e posteriormente fotografadas, utilizando microscópio com câmera acoplada. A contagem das fotos foi realizada manualmente, e avaliou-se o número de células por mm3, para espermatogônias, espermatócitos, espermátides e espermatozoides. As correlações entre número de espermatozoides, espermatócitos, espermátides e tratamentos foi de -0,30, -0,20 e -0,30, respectivamente, demonstrando que o efeito da suplementação crescente com o sal, é prejudicial para o desenvolvimento das células reprodutivas masculinas. Foi observado que os tratamentos com adição igual ou superior a 0,70 mg/kg do sal comercial causaram danos as gônadas para os parâmetros da gametogênese de número de espermatócitos, espermátides e espermatozoides. Sendo assim, a utilização de sais que contenham combinação de Cu 13,40 g/kg; Mn 26,70 g/kg e Zn 66,70 g/kg reprodutores machos de tilápia, não é recomendada em função dos danos causados nas etapas da gametogênese, reduzindo a produção de espermatozoides. / The objective of this study was to evaluate the effect of supplementing the diet of tilapia (Oreochromis niloticus) using commercial salt compound of micro minerals copper, manganese and zinc, on the histology and gonadal development of males. A total of 1200 masculinized male tilapia were used, with 120 g average weight, supplemented with increasing levels (0.00, 0.35, 0.70, 1.05, 1.40 and 1.75 mg / kg) of a product commercial composed of Cu 13,40 g/kg; Mn 26,70 g/kg e Zn 66,70 g/kg. The trial was conducted in a water recirculation system, consisting of 24 tanks divided in half, totaling 48 experimental units. The experimental design was completely randomized with repeated measures over time. The biometry and samples were taken at 16 and 32 weeks of experiment, to evaluate the fish development. The collected gonads were prepared and sliced for making histological slide, after stained with hematoxylin and eosin, and then photographed using a microscope with attached camera. The count of the photos was performed manually, and was rated the number of cells per mm3 to spermatogonia, spermatocytes, spermatids and sperm cell. The correlations between the number of spermatozoa, spermatocytes, spermatids and treatments was of -0.30, -0.20 and -0.30, respectively, demonstrating that the effect of increasing supplementation of the salt is detrimental to the development of male reproductive cells. It was observed that the addition equal or superior to 0.70 mg / kg of commercial salt caused damage in the gonads for gametogenesis parameters number of spermatocytes, spermatids and sperma cell. Thus, the use of combination of salts containing 13.40 g Cu / kg; Mn 26.70 g / kg Zn and 66.70 g / kg breeding male tilapia is not recommended due to the damage caused in the stages of gametogenesis, reducing the sperm production.

Resumo não disponível

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-05T14:27:32Z No. of bitstreams: 1 Gian Carlo DAngelo de Queiroz1.pdf: 5453543 bytes, checksum: 9dcdbbae128642bdc513a5304225e2f4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-05T14:27:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gian Carlo DAngelo de Queiroz1.pdf: 5453543 bytes, checksum: 9dcdbbae128642bdc513a5304225e2f4 (MD5) Previous issue date: 2010-07-30 / The directly heat applied on the testis has given new information about the mechanisms triggers of spermatogenesis damages. Pentoxifylline (PTX) is a methylxanthine with antioxidants, anti-inflammatory and anti-apoptotic properties and beside this with a lot of utilities in clinical area. The present work had an objective to evaluate the inhibitory capacity of pentoxifylline on deleterious actions, produced by heat in the testicular parenchyma and its capacity to accelerate the spermatogenesis recovery process. Seventy two male Wistar rats (Rattus norvegicus, var. albinus) were used and divided in control group, heat shock (HS), HS treated with 50mg/Kg of PTX and HS treated with 100mg/Kg of PTX. All animal were submitted to testicular heat shock, excepted the control group and evaluated on 1, 3, 7, 15, 30 and 60 days according to histopathological and histometrical alterations as well as serum levels of testosterone. In this experiment, the different protocols did not produced alteration in the epididymis, prostate and seminal gland weight. However, it was observed a reduction tendency of testicular weight, seminiferous tubule volume, tubular diameter and epithelium height in the animals that suffered heat shock. The Leydig cell volume was reduced in animals submitted to stress thermic, but this fact did not influence the testosterone levels. Utilizing Nile's blue to stain apoptotic cells was noted a reduction in this kind of cell's death in group HS+100mg/Kg of PTX in relation with HS group on 30th days. In the same way was observed reduction on apoptotic cells in the HS+50mg/Kg group, when compared with HS on 60th days. The histopathological found on 3rd, 7th and 15th day post-heat shock are compatible with testis degeneration picture. On these periods, in the animals treated with pentoxifylline, the lesions were minor scale and some stages of seminiferous epithelium cycle were well characterized. In the period between 30 e 60 days after heat shock, we can observe that animals not treated with PTX showed seminiferous tubule with desquamated cells in the lumen, germ epithelium loosening and vacuoles of Sertoli cell. Although, it had been observed partial recovery of spermatogenesis. The animals treated with pentoxifylline with 50 or 100mg/Kg during this period, the spermatogenesis had all stages of seminiferous epithelium cycle. Thus, according to results, PTX seems to have exercised inhibitor role on pro-inflammatory and apoptotic mechanisms, triggered by directly heat shock applied on testis, and for accelerating the of spermatogenic process recovery. / O calor aplicado diretamente sobre o testículo tem fornecido novas informações sobre os mecanismos desencadeadores dos danos à espermatogênese. A pentoxifilina é uma metilxantina com propriedades antioxidante, antiinflamatória e antiapoptótica com diversas utilidades na área clínica. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade inibidora da pentoxifilina sobre as ações deletérias produzidas pelo calor no parênquima testicular e capacidade em acelerar a recuperação do processo espermatogênico. Foram utilizados 72 ratos Wistar machos (Rattus norvegicus, var. albinus) divididos em grupo controle, choque térmico, choque térmico tratado com 50mg/Kg e 100mg/Kg de pentoxifilina, submetidos ao estresse térmico testicular e avaliados nos dias 1, 3, 7, 15, 30 e 60 quanto as alterações histopatológicas e histomorfométricas dos testículos bem como, aos níveis séricos de testosterona. Neste trabalho, os diferentes protocolos experimentais não produziram alterações no peso do epidídimo, da próstata e glândula seminal. Contudo, foi constatada tendência à redução de peso testicular, do volume total de túbulos seminíferos, diâmetro tubular e altura de epitélio seminífero nos animais que sofreram choque térmico. O volume de células de Leydig reduziu nos animais submetidos ao estresse térmico, porém isto não influenciou os níveis de testosterona. Utilizando-se azul do Nilo para marcação de células apoptóticas foi constatada redução deste tipo de morte celular no grupo HS+100mg/Kg de PTX em relação ao grupo HS aos 30 dias e, 60 dias no grupo choque térmico + 50mg/Kg comparado com o grupo choque térmico. Os achados histopatológicos nos tempos 3, 7 e 15 pós-choque térmico são compatíveis com o quadro de degeneração testicular. Neste período os animais tratados com pentoxifilina as lesões ocorreram em menor escala e alguns estágios do ciclo do epitélio seminíferos foram bem caracterizados. No período compreendido entre 30 e 60 dias após o choque térmico, podemos constatar que os animais não tratados com pentoxifilina possuíam túbulos seminíferos com células que perderam sua coesão em seu lume, afrouxamento do epitélio germinativo e vacúolos nas células de Sertoli, apesar de ter sido observada recuperação parcial do processo espermatogênico. Os animais tratados com pentoxifilina na dose de 50 ou 100mg/Kg, neste período, o processo espermatogênico possuía todos os estágios do ciclo do epitélio seminífero. Portanto, de acordo com os resultados a pentoxifilina exerceu papel inibidor dos mecanismos pró-inflamatórios ou pró-apoptóticos desencadeados pelo choque térmico aplicado diretamente nos testículos, além de acelerar o processo de recuperação da espermatogênese.

Orientadores: Irani Quagio-Grassiotto, Maria Ines Borella / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T21:58:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nobrega_RafaelHenrique_M.pdf: 10312793 bytes, checksum: 13a65bc78504251ac2368131cd7f57fd (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Nos peixes teleósteos, a unidade morfofuncional da espermatogênese é o espenrmatocisto ou cisto, constituído por células germinativas, em desenvolvimento sincrônico, envoltas perifericamente pelas células de Sertoli. Em função da cinética da espermatogênese e do tipo de reprodução (contínua ou sazonal), o epitélio germinativo pode se desenvolver de forma constante ou sofrer modificações cíclicas durante o ciclo reprodutivo. O presente trabalho teve como objetivo analisar, através de parâmetros histológicos, ultra-estruturais e imuno-histoquímicos, as alterações do epitélio germinativo em duas espécies de ciclos reprodutivos diferentes (Serrasalmus spilopleura - reprodução contínua e Pimelodus maculatus - reprodução sazonal) e correlacioná-las com as células esteroidogênicas e as células gonadotrópicas, no intuito de melhor compreender a fisiologia reprodutiva dos teleósteos tropicais de água doce. Em S. spilopleura, o epitélio germinativo organiza-se em cistos basais de espermatogônias e cistos apicais de células germinativas em desenvolvimento mais avançado. As espermatogônias basais apresentam intensa atividade proliferativa durante todo o ciclo reprodutivo. As células de Sertoli proliferam no intuito de acompanhar o crescimento dos cistos e aumentar o tamanho do testículo a cada ciclo reprodutivo. Quanto à esteroidogênese, a atividade 3"beta"-HSD é maior na região espermatogênica do que na região relacionada à espermiação. Em relação às células gonadotrópicas, as células LH são requeridas durante a espermatogênese e na espermiação, enquanto que as células FSH são mais ativas na liberação dos espermatozóides e provavelmente na proliferação das células sle Sertoli. Em P. maculatus, o epitélio germinativo passa por modificações morfofuncionais, categorizadas em quatro classes reprodutivas: regredida, maturação, maturação final e regressão. A proliferação das espermatogônias é intensa durante a maturação e depois diminui na maturação final e regressão. As células de Sertoli proliferam em maior freqüência na classe regredida, o que contribui para o crescimento do testículo durante o ciclo reprodutivo. A atividade 3"beta"-HSD é intensa na maturação e na maturação final, e depois diminui na regressão e na classe regredida. Os processos de espermatogênese e liberação de espermatozóides são dependentes de andrógenos. As células LH e FSH estão em maior quantidade durante a maturação e a maturação final, e depois diminuem na regressão e na classe regredida. A espermatogênese e a liberação dos espermatozóides são mais dependentes da atividade gonadotrópica do que os processos de proliferação espermatogonial e regressão testicular / Abstract: In teleost fish, the morphofuncional unit of the spermatogenesis is the spermatocyst or cyst, which are constituded by synchronous developmental germ cells surrounded by Sertoli cells. Depending on the spermatogenesis kinetics and the type of reproduction (continuous/non-seazonal or seazonal), the germinal epithelium may be constant or undego cyclical changes during the reproductive cyc1e. The aim, of the present work is to analyze, through histological, ultrastructural and immunohistochemical evaluation, the changes of the germinal epithelium in two different reproductive cycles (Serrasalmus spilopleura continuous/non-seazonal reproduction and Pimelodus maculatus - seazonal reproduction) and to correlate them with steroidogenic cells and gonadotropic cells, for a better knowledge on the reproductive physiology of the tropical fresh water teleosts. In S. spilopleura, the germinal epithelium was organized in basal cysts of spermatogonia and apical cysts of more advanced developmental germ cells. The basal spermatogonia had intense proliferative activity during the whole reproductive cycle. Sertoli cells proliferation occured in order to accompany the cyst growth and to increase the testis size during each reproductive cycle. For steroidogenic activity, 3"beta"-HSD was stronger in the spermatogenic area than in the area related to spermiation. In re1ation to gonadotropic cells, LH cells were requ~sted during spermatogenesis and spermiation, whereas FSH cells were more active in spermatozoa liberation and probably in the Sertoli celI proliferation. In P. maculatus, the germinal epithelium undergoes morphological changes, classified in 4 reproductive classes: regressed, maturation, final maturation and regression. The spermatogonial prolif~ration was intense during maturation and decreased in final maturation and regression. Sertoli cells proliferated more in regressed class, contributing to testis growth during the reproductive cycle. The 3"beta"-HSD activity was strong in maturation and final maturation, and decreased in regression and in regressed class. Then, spermatogenesis processes and spermatozoa release are dependent of androgenic. LH and FSH cells were in large number during maturation and final maturation, and decreased in regression and in regressed class. In P. maculatus, spermatogenesis and spermatozoa release are more dependent of the gonadotropic activity than the processes such as spermatogonial proliferation and testicular regression / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Irani Quagio Grassiotto, Luiz Roberto Malabarba / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-24T19:44:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Baicere-Silva_ClariannaMartins_D.pdf: 11314225 bytes, checksum: beda03a1ee3e0b2d960e66de41e95061 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A família Characidae apresenta 16 subfamílias e noventa e dois gêneros não assinalados a nenhuma subfamília e, portanto, considerados incertae sedis. Neste grupo são inúmeros os problemas taxonômicos/filogenéticos. A maior parte destes gêneros encontravam-se alocados na subfamília Tetragonopterinae, mas dada à falta de evidências de que Tetragonopterinae constitui um grupo monofilético, manteve-se na subfamília apenas o gênero Tetragonopterus. Os gêneros incertae sedis, em Characidae, constituem um grupo imenso e heterogêneo de peixes, predominantemente pequenos, abundantes nos rios e em outros habitats aquáticos da região neotropical. O conhecimento das relações de parentesco entre os Characidae e, consequentemente, entre os antigos Tetragonopterinae, tem por base principalmente características osteológicas, de anatomia de partes moles e, mais recentemente, dados de seqüência molecular. Sabe-se que as características reprodutivas podem conter importantes sinais filogenéticos. Portanto, procedeu-se uma análise filogenética a partir de dados reprodutivos como a estrutura testicular, o tipo de espermiogênese e a ultraestrutura dos espermatozoides de representantes de alguns dos gêneros incertae sedis em Characidae, anteriormente alocados em Tetragonopterinae e outros Characiformes utilizados como grupo externo. A topologia da árvore obtida, foi parcialmente congruente com as hipóteses existentes para o grupo, comprovando a utilidade deste tipo de dado no que se refere à elucidação dos padrões evolutivos em Characidae / Abstract: The family Characidae presents 16 subfamilies and ninety-two genera not reported to any subfamily and therefore considered incertae sedis. In this group there are numerous taxonomic / phylogenetic problems. Most of these genera were allocated in the subfamily Tetragonopterinae, but given the lack of evidence that Tetragonopterinae constitute a monophyletic group, remains the only genus Tetragonopterus in the subfamily. Genera incertae sedis in Characidae are a vast and heterogeneous group of fish, mostly small, abundant in rivers and other aquatic habitats of the Neotropics. Researches of relationships among the Characidae and consequently between the old Tetragonopterinae is based mainly in external morphollogical and osteological features and, more recently, molecular sequence data. It is known that reproductive characteristics may contain significant phylogenetic signals. So we proceeded from a phylogenetic analysis of reproductive data such as testicular structure, the type of spermiogenesis and sperm ultrastructure of representatives of some of the genera incertae sedis in Characidae, previously allocated to Tetragonopterinae and other Characiformes used as outgroup. The tree topology obtained was parcially congruent with the hypotheses exist for the group proving the usefulness of this type of data in relation to elucidate the evolutionary patterns in characid / Doutorado / Biologia Tecidual / Doutora em Biologia Celular e Estrutural

Made available in DSpace on 2014-06-12T22:59:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3620_1.pdf: 954189 bytes, checksum: 41d1c13dacc710ba98bd96517bd50f35 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Objetivamos investigar o efeito da desnutrição materna durante a lactação, com a Dieta Básica Regional (DBR), no testículo de ratos, através de análises quantitativa e qualitativas. Ratas Wistar acasaladas aos 3 meses de idade receberam ração normoprotéica até o nascimento dos seus filhotes. Os filhotes foram divididos em dois grupos: controle C (n=6), com água e dieta normoprotéica; e desnutrido D (n=6), com água e dieta multicarencial (DBR); dada às mães, lactantes. Após o desmame, os grupos foram mantidos com água e dieta padrão do biotério (Labina-Purina), ad libitum até a eutanásia aos 3 meses de vida quando foram pesados, anestesiados, perfundidos com paraformaldeído a 4% em tampão fosfato (0,05M - pH 7,4) e orquiectomizados. O índice gonadossomático (IGS) foi estabelecido a partir da razão entre os pesos testiculares e corporal, obtidos no dia da eutanásia. Os testículos foram incluídos em parafina, processados histologicamente e corados com hematoxilina e eosina, depois analisados em microscópio de campo claro. Os pesos corporal (PC) e testicular (PT) do grupo desnutrido (324±6g; 1,67±0,05g) não diferiram dos pesos corporal e testicular do grupo controle (303±10g; 1,67±0,03g). Já o índice gonadossomático (IGS) do grupo desnutrido (1,11%) foi significativamente maior (p=0,021) do que o IGS do grupo controle (1,04%). O diâmetro tubular (DT) do grupo desnutrido (300±3&#956;m) foi semelhante ao grupo controle (295±2&#956;m), da mesma forma o comprimento do túbulo seminífero por testículo (CTS) do grupo desnutrido (16,9±0,7m) foi próximo do CTS do grupo controle (18±1,7m), ou seja, não houve diferença estatística significativa (p>0,05). Entretanto a altura do epitélio seminífero (AES) do grupo desnutrido (74±2&#956;m) foi estatisticamente menor (p<0,05) do que a AES do grupo controle (82±3&#956;m). A proporção de túbulos seminíferos foi menor (p<0,05) no D(84,0%) em relação ao C(81,7%). Houve redução de 48,8% no número de células de Sertoli por testículo do D (2,1±0,3 x107) em relação ao C(4,1±0,8 x107) (p<0,05). Os resultados sugerem que a desnutrição pós-natal com DBR em ratos adultos jovens, promoveu modificações significativas nos testículos, com ênfase na programação do número de células de Sertoli, no animal adulto, o que pode levar a alteração no processo espermatogênico e na produção espermática

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4259_1.pdf: 954189 bytes, checksum: 41d1c13dacc710ba98bd96517bd50f35 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Objetivamos investigar o efeito da desnutrição materna durante a lactação, com a Dieta Básica Regional (DBR), no testículo de ratos, através de análises quantitativa e qualitativas. Ratas Wistar acasaladas aos 3 meses de idade receberam ração normoprotéica até o nascimento dos seus filhotes. Os filhotes foram divididos em dois grupos: controle C (n=6), com água e dieta normoprotéica; e desnutrido D (n=6), com água e dieta multicarencial (DBR); dada às mães, lactantes. Após o desmame, os grupos foram mantidos com água e dieta padrão do biotério (Labina-Purina), ad libitum até a eutanásia aos 3 meses de vida quando foram pesados, anestesiados, perfundidos com paraformaldeído a 4% em tampão fosfato (0,05M - pH 7,4) e orquiectomizados. O índice gonadossomático (IGS) foi estabelecido a partir da razão entre os pesos testiculares e corporal, obtidos no dia da eutanásia. Os testículos foram incluídos em parafina, processados histologicamente e corados com hematoxilina e eosina, depois analisados em microscópio de campo claro. Os pesos corporal (PC) e testicular (PT) do grupo desnutrido (324±6g; 1,67±0,05g) não diferiram dos pesos corporal e testicular do grupo controle (303±10g; 1,67±0,03g). Já o índice gonadossomático (IGS) do grupo desnutrido (1,11%) foi significativamente maior (p=0,021) do que o IGS do grupo controle (1,04%). O diâmetro tubular (DT) do grupo desnutrido (300±3&#956;m) foi semelhante ao grupo controle (295±2&#956;m), da mesma forma o comprimento do túbulo seminífero por testículo (CTS) do grupo desnutrido (16,9±0,7m) foi próximo do CTS do grupo controle (18±1,7m), ou seja, não houve diferença estatística significativa (p>0,05). Entretanto a altura do epitélio seminífero (AES) do grupo desnutrido (74±2&#956;m) foi estatisticamente menor (p<0,05) do que a AES do grupo controle (82±3&#956;m). A proporção de túbulos seminíferos foi menor (p<0,05) no D(84,0%) em relação ao C(81,7%). Houve redução de 48,8% no número de células de Sertoli por testículo do D (2,1±0,3 x107) em relação ao C(4,1±0,8 x107) (p<0,05). Os resultados sugerem que a desnutrição pós-natal com DBR em ratos adultos jovens, promoveu modificações significativas nos testículos, com ênfase na programação do número de células de Sertoli, no animal adulto, o que pode levar a alteração no processo espermatogênico e na produção espermática

Neste estudo foram investigados os efeitos da inalação crônica de cocaína crack na espermatogênese de camundongos púberes e maduros. Camundongos Balb/c machos de duas diferentes idades, jovem e adulta (n=20), foram expostos à fumaça de 5g de cocaína crack em uma câmara de inalação, 5 dias por semana, durante 2 meses. Animais controle (n=10) foram mantidos em biotério durante o período de experimentação. Análises morfométricas quantitativas de cortes histológicos de testículos foram feitas em microscopia óptica. A qualidade da espermatogênese foi avaliada durante a fase VII de maturação do epitélio seminífero, através da quantificação dos tipos celulares normais e degenerados presentes nos espaços intra e intertubular (células germinativas, células de Sertoli e células de Leydig). As diferenças foram consideradas significativas quando p<0,05. O número de túbulos seminíferos em fase VII por testículo mostrou significante redução (p=0,023) em animais jovens expostos. Houve redução significativa observada no número de células de Sertoli (p=0,000) e espermátides alongadas (p=0,005) de animais jovens expostos. A degeneração celular é aumentada em todos os grupos expostos, com maior severidade no grupo jovem (p=0,000). A inalação de fumaça de cocaína crack induz a alterações na espermatogênese, sendo sua toxicidade maior em animais jovens expostos durante a fase de maturação gonadal . Estes achados são de interesse na saúde pública e mais investigações devem ser feitas focando efeitos similares em homens. / In the present study, the effects of chronic inhalation of crack cocaine on the spermatogenesis of pubertal and mature mice were investigated. Balb/c mice of two different ages, young and adult (n=20), were exposed to the smoke of 5g of crack in an inhalation chamber for 5 days a week during 2 months. Correspondents control animals (n=10) were kept in animal house during experimentation. Morphological quantitative analyses of testis were made in optical microscope. The spermatogenesis was evaluated during phase VII of maturation of the seminiferous epithelium. The number of spermatogenesis cell types (germ cells and Sertoli cells), the germ cell degenerations and the intertubular Leydig cells population was scored. Differences were considered significant when p<0.05. The number of tubular phase VII per testis showed significant (p= 0,023) reduction in young exposed animals. Significant reductions (p=0,000) were observed in Sertoli cells and spermatids elongated (p=0,005) in young intoxicated animals. Apoptosis is also increased in all intoxicated groups being more severe in young groups (p=0,000). Inhalation of crack cocaine smoke induced spermatogenesis disruption of chronic exposed mice. Crack toxicity was more severe in pubertal mice when sexual gonad undergoes maturation. We think that our findings should be of public health concern and that further investigations focusing similar effects on human males are warranted.

Este trabalho caracteriza os efeitos das condições reais de exposição ao material particulado urbano na espermatogênese por meio de análises histológicas de testículos de duas gerações de camundongos BALB/c durante o período gestacional, pósgestacional ou em ambos os momentos combinados. A geração parental foi exposta à poluição do ar em câmaras com ou sem filtros para PM2,5 (câmaras filtrada e não filtrada, respectivamente) por 4 meses, formando dois grupos: não exposto; e exposto. Estes animais foram acasalados e a freqüência do plug vaginal apresentou tendência de queda nas fêmeas expostas (p>0,05). O número de fêmeas prenhes também foi reduzido (p=0,007) e o número de nativivos foi menor na câmara não filtrada (186) quando comparada com a filtrada (268), contudo, o número de animais por ninhada não foi alterado (p>0,05). Após o acasalamento os machos foram eutanasiados, seus testículos pesados, fixados em solução de Bouin ou paraformaldeído 4% e corados com HE, PCNA, Ki67 ou TUNEL. Metade dos animais produzidos na primeira geração, constituída de animais de 1 dia de vida, foi transferida de uma câmara para outra formando os grupos pré-natal e pós-natal. Os animais remanescentes das câmaras filtrada e não filtrada constituíram os grupos não exposto e pré+pós-natal, respectivamente. Após 90 dias, os animais da primeira geração foram eutanasiados e seus testículos foram retirados, pesados, fixados e corados da mesma forma que sua geração parental. Os animais expostos ao PM2,5 da geração parental apresentaram aumento do peso dos testículos (p=0,002), dos epidídimos (p<0,001) e do peso relativo testículo/corpo (p=0,003), epidídimo/corpo (p=0,001). Não houve alteração no número de células germinativas e somáticas e nem na proliferação celular (p>0,05). A apoptose pela coloração de HE foi reduzida no estádio IV (p=0,046) e aumentada no estádio VIII (p=0,019) da espermatogênese. Pela técnica de TUNEL os estádios IV (p=0,017), V (p=0,035) e VIII (p=0,024) mostraram apoptose menor nos animais do grupo exposto. O estádio IV foi identificado como o de maior apoptose espontânea nas duas técnicas empregadas, HE (p<0,001); e TUNEL (p<0,001), entre os animais não expostos. O ciclo do epitélio seminífero foi alterado com freqüência reduzida do estádio IV entre os animais expostos (p=0,005). Os animais da primeira geração expostos no período pré-natal apresentaram redução de peso corpóreo (p<0,001) e dos testículos (p=0,012), bem como, aumento do peso relativo testículos/corpo (p=0,013). O número de células somáticas não foi alterado, mas o de espermatócitos nos grupos pós-natal (p=0,011) e pré+pós-natal foi aumentado (p=0,035) enquanto nos grupos pré-natal e pós-natal houve redução no número de espermátides alongadas (p<0,001). Não houve diferença significativa na taxa de proliferação, apoptose e freqüência dos estádios do ciclo do epitélio seminífero entre os grupos de exposição (p>0,05). O estádio IV mostrou-se o mais sensível para a ocorrência de apoptose espontânea nas duas técnicas empregadas: HE (p<0,001); e TUNEL (p<0,001). A freqüência normal dos estádios entre os animais não expostos mostrou que os estádios finais são os mais freqüentes (VI, VIII e VII, nesta ordem) e os iniciais os menos freqüentes (II e I, nesta ordem) para ambas as gerações. Estes resultados fornecem dados que sugerem que o PM2.5 da poluição atmosférica urbana é capaz de alterar o sistema reprodutivo masculino e a espermatogênese não dependendo do período da vida (durante ou após a gestação) em que os animais são expostos. / The present paper describes the effects of real exposure to urban PM2.5 on spermatogenesis by histological analysis of testes of mice (BALB/c) from two generations during fetal or postnatal phases of development and of mice exposed in both phases of development. Parental generations (BALB/c mice) were exposed to air pollution in chambers with or without filters for PM2.5 for 4 months (filtered and non-filtered chambers, respectively), forming two groups, namely non-exposed and exposed. These animals were mated and a frequency of decrease on vaginal plug in the exposed females was observed (p>0.05). The number of pregnant females was reduced as well (p=0.007) and the number of born alive decreased in the non-filtered chamber (186) when compared to the filtered chamber (268); however, the litter size was not altered (p>0.05). After mating, the male were killed, their testes were weighed and fixed in Bouins solution or 4% paraformaldehyde and stained in H&E, PCNA, Ki67 or TUNEL. Half of 1-day old offspring was crossed over between chambers forming the prenatal and postnatal groups; remaining offspring from filtered and non-filtered chambers comprised the non-exposed and pre+postnatally exposed groups, respectively. After 90 days, the animals from first generation were killed and their testes were removed, weighed, fixed and stained like the parental generation. The animals exposed to PM2.5 from the parental generation showed increased testis weight (p=0.002), epididymis weight (p<0.001), relative testis weight (p=0.003), and relative epididymis weight (p=0.001). The germ and somatic cells number was not reduced, and neither was cell proliferation (p>0.05). The apoptosis labeled by H&E was reduced in stage IV (p=0.046) and increased in stage VIII (p=0.019) of spermatogenesis. By using the TUNEL technique, stages IV (p=0.017), V (p=0.035) and VIII (p=0.024) showed fewer apoptosis in the exposed animal group. Stage IV was identified as the most spontaneous apoptosis in both methods: HE (p<0.001) and TUNEL (p<0.001), among the non-exposed animals. The cycle of the seminiferous epithelium was altered with reduced frequency of stage IV between the exposed animals (p=0.005). The animals from the first generation exposed during the prenatal period had a reduced body (p<0.001) and testis weight (p=0.012) and an increased relative testis weight (p=0.013). Differences in germ cell proliferation, apoptosis, and staging were not significantly different among treatment groups (p>0.05). Nevertheless, germ cell populations of post- (p=0.011) and pre+postnatally (p=0.035) PM-exposed animals contained an increased percentage of spermatocytes, while pre- and postnatal groups (p<0.001) had a reduced number of elongated spermatids. Stage IV was shown to be the most sensitive for the occurrence of spontaneous apoptosis in both methods used: H&E (p<0.001); and TUNEL (p<0.001). The normal frequency of the stages between non-exposed animals showed that the final stages are more frequent (VI, VIII e VII) and the beginning stages less frequent (II e I) to both generations. These results suggest that PM2.5 from urban air pollution is capable of altering the male reproductive system and spermatogenesis independently of the period of life when the animals are exposed to it (during or after pregnancy).

No Estado do Maranhão, na região da Baixada Maranhense, presenta na fauna silvestre o réptil Kinosternon scorpioides, um quelônio de água doce popularmente conhecido como jurará e que possui valor social, econômico e ambiental para os ribeirinhos da cidade de São Bento. Este estudo contempla suas características biológicas reprodutivas baseadas em seu ambiente natural, com o intuito de permitir a preservação e o estabelecimento de planos de manejo reprodutivo e de uso sustentável da espécie. Recentemente poucos estudos em todo o mundo tratam sobre os aspectos do ciclo reprodutivo de tartarugas em face das características endócrinas, na América do Sul estudos desse tipo são recentes e escassos, sendo assim este é o primeiro estudo, que se tem conhecimento, que elucida um padrão sazonal reprodutivo da espécie K. scorpioides, associando hormônios gonadais com aspectos comportamentais. Trinta e oito animais adultos tiveram seus órgãos reprodutivos caracterizados para as enzimas esteroidogênicas P450 aromatase, P450c17 e PNADPH redutase através de imunomarcação e blotting, além de índice gonadossomático, morfometria e concentração de testosterona, corticosterona e estradiol pela técnica de radioimunoensaio. As mudanças biométricas, morfometria celular e a esteroidogênese testicular entre os períodos chuvoso e seco sugerem que o estrógeno produzido pelas células de leydig podem afetar a produção e a apoptose de células germinais durante o processo de espermatogênese, e a presença das enzimas P450aromatase e P450c17 em células de leydig acompanhados com a recrudescência testicular também reforça a ideia, de que elas podem desempenhar um papel na quiescência testicular. Esse trabalho evidenciou que as enzimas citocromo P450, citocromo P450c17 e NADPH-citocromo P450-redutase estão presentes no testículo e epidídimo nos diferentes períodos climáticos e podem estar relacionados à síntese de testosterona em tartarugas concordando com os diferentes achados para biometria e espermiogênese nos períodos chuvoso e seco, o que, nos leva a sugerir um estado de quiescência durante o período seco e atividade espermatogênica no período chuvoso, semelhante ao que ocorre com as espécies que apresentam comportamento reprodutivo sazonal / In the state of Maranhão, in the lowland region, the reptile Kinosternon scorpioides, a freshwater chelonian, popularly known as swear has social, economic and environmental value to the riparian of the city of São Bento. This study includes reproductive biological characteristics based on their natural environment in order to enable the preservation and the establishment of reproductive management plans and sustainable use of the species. To date, few studies around the world address the aspects of the reproductive cycle of the turtles in the face of the endocrine features. In South America, these studies are recent and scarce. So this is the first study that elucidates a reproductive seasonal pattern of the species K. scorpioides, by associating gonadal hormones with behavioral aspects. Thirty-eight adult animals had their reproductive organs characterized for P450 steroidogenic enzyme aromatase, P450c17 and NADPH reductase by immunostaining and immunoblotting, and gonadossomatic index, morphology and concentration of testosterone, corticosterone and estradiol by radioimmunoassay. Biometric changes, cell morphology and testicular steroidogenesis between the rainy and dry seasons suggests that the estrogen produced by the leydig cells can affect the production and apoptosis of germ cells during spermatogenesis process; and the presence of P450aromatase and P450c17 enzymes in the leydig cells accompanied with testicular recrudescence also reinforces the idea that they may play a role in testicular quiescence. This work showed that the cytochrome P450 enzymes, P450c17 and NADPH-cytochrome P450 reductase are present in the testis and epididymis at different climatic periods and may be related to testosterone synthesis in turtles agreeing to the different findings for biometrics and spermiogenesis in and dry rainy periods. These findings suggest a state of quiescence during the dry season and spermatogenic activity during the rainy season, similar to those found in species with seasonal reproductive behavior