Orientadores: Jose Antonio Rocha Gontijo, Adrianne Christine Palanch / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T20:30:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Roza_NoemiAngelicaVieira_M.pdf: 2449991 bytes, checksum: 0b5ad477d60fbc3b8e8d3c108d67f620 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A prevalência de doenças cardiovasculares e obesidade esta associada ao aumento da ingestão de alimentos hipercalóricos em decorrência de modificações no padrão alimentar ocorrido nas ultimas décadas. A relação entre uma dieta rica em ácidos graxos saturados e resistência a insulina, Diabetes Mellitus e hipertensão e amplamente aceita. A ingestão de dieta hiperlipídica durante o período gestacional pode induzir na prole, na idade adulta, hipertensão, resistência a insulina, dislipidemia e obesidade, sintomas clássicos da Síndrome Metabólica, cada vez mais presentes também em crianças e adolescentes. Adicionalmente, a exposição a dieta hiperlipídica pode aumentar a expressão de proteínas da via inflamatória tais como JNK, IKK?, I?B, NF-?B. Este trabalho estudou a repercussão do tratamento pré-natal sobre a função renal, a inflamação no rim e o metabolismo glicídico como componentes importantes na elevação pressórica na prole de fêmeas alimentadas com dieta hiperlipídica. Ratas Wistar receberam dieta com 60% de lipídios desde o desmame, durante a prenhez e a lactação, sendo este modelo experimental comprovado por meio do perfil metabólico. As fêmeas apresentaram menor ganho de peso em todo o período, mesmo tendo um maior consumo calórico. Apos oito semanas de dieta, as ratas apresentaram alterações na função renal, queda da excreção de potássio e resistência periférica a insulina, associadas a elevação da pressão arterial. A prole de machos dessas fêmeas foi estudada em idades distintas. Os animais nasceram com menor massa corporal e, mesmo apos o desmame, continuaram ganhando menos peso ate a 16a semana de vida. A filtração glomerular aumentou e a reabsorção de sódio no rim aumentou significativamente na 16a semana de vida. Alem disto, nesta idade, a prole de machos apresentou resistência a insulina e aumento na expressão de proteínas da via inflamatória do NF-?B. Em consequência destas alterações verificou-se aumento da pressão arterial a partir da 8a semana de vida. O presente estudo demonstrou que a ingestão crônica materna de dieta hiperlipídica leva a modificações em mecanismos de controle da pressão arterial sistêmica na prole adulta / Abstract: Prevalence of cardiovascular disease and obesity is associated with increased calorie intake of food due to changes in dietary patterns in recent decades. The relationship between a diet rich in saturated fatty acids and insulin resistance, diabetes mellitus and hypertension is widely accepted. Eating high-fat diet during pregnancy can induce in the offspring in adulthood, hypertension, insulin resistance, dyslipidemia and obesity, classic symptoms of Metabolic Syndrome, also increasingly present in children and adolescents. Additionally, exposure to high-fat diet can increase the protein expression of inflammatory pathway such as JNK, IKK?, I?B, NF-?B. This study examined the impact of prenatal treatment on renal function, inflammation and glucose metabolism in the kidney as an important component in blood pressure elevation in the offspring of females fed high-fat diet. Female rats were fed a diet with 60% fat from weaning, during pregnancy and lactation, and this is evidenced by the experimental model of the metabolic profile. Females had lower weight gain during the entire period, despite having a higher caloric intake. After eight weeks of diet, rats showed changes in renal function, decreased excretion of potassium and insulin resistance, associated with elevated blood pressure. The male offspring of these females were studied at different ages. The animals were born with lower body mass, and even after weaning, less weight gain continued until the 16th week of life. The glomerular filtration and increased sodium reabsorption in the kidney increased significantly at week 16 of life. Moreover, at this age, the offspring of males showed insulin resistance and increased protein expression of inflammatory pathway of NF-?B. In consequence of these changes there was an increase in blood pressure from 8 weeks of age. This study showed that chronic ingestion of maternal high-fat diet leads to changes in control mechanisms of blood pressure in adult offspring / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

A maconha é a droga ilícita mais consumida entre gestantes. Entretanto, os efeitos do uso materno sobre a gestação e o desenvolvimento fetal não são bem esclarecidos. Estudos experimentais e epidemiológicos apresentam resultados conflitantes devido à via de administração, tempo de exposição, dose e como a toxicidade da Cannabis é testada. Neste estudo experimental foram investigados os efeitos da inalação materna da fumaça de Cannabis sativa, aproximando as reais condições de uso da droga por humanos. Camundongas gávidas (n=20) foram expostas diariamente durante 5 minutos à fumaça decorrente da queima de maconha ( 0,2 g de Cannabis), ou ao ar filtrado, a partir do 5,5° dia gestacional (DG) ao 17,5° DG. A ingestão de alimentos e o peso materno foram registrados. Análise por ultrassom foram realizadas entre o 10,5° e o 16,5° DG. No 18,5° DG metade das fêmeas foram eutanasiadas para a a avaliação dos fetos a termo, reabsorções e placentas. A duração da gestação, desfechos neonatais e comportamentais (reflexo, força muscular, ansiedade e memória) em neonatos e adultos foram avaliados na outra metade das fêmeas. A exposição diária de 5 min (dose baixa) durante a gestação resultou em redução do peso ao nascer mas o tamanho da prole não foi alterado; No entanto, o número de filhotes machos por prole foi maior. Além disso, o peso líquido da placenta foi aumentado e a proporção feto/placenta foi diminuída em machos, mostrando um efeito específico do sexo. A exposição também alterou a força muscular e reflexos em neonatos, além de causar prejuízos na memória e efeito ansiolítico na prole exposta. Em conclusão, os resultados indicam que o fumo da maconha durante a gestação, mesmo em doses baixas, pode ser embriotóxico, fetotóxico e pode alterar o comportamento em neonatos e adultos / Marijuana is the most used illegal drug among pregnant women. However, the effects of maternal use on pregnacy and fetal development are not well understood. Experimental and epidemiologicals studies have show conflicting results due to the route of administration, duration of exposure, dose, and a toxicity of Cannabis is tested. In this experimental study we investigated the effects of maternal inhalation of smoke Cannbis sativa , approaching the actual drug use conditons for humans. Pregnant mice (n=20) were exposed (only noise) daily for 5 min to smoke resulting from burning marijuana (0.2g Cannabis), or filtered air, from gestational day (GD) 5.5° to GD 17.5°. Food intake and maternal weight were recorded. Ultrasound analysis was performed on 10.5 and 16.5° GD. On 18.5° GD half the mice were euthanized for evaluation of term fetus, resorptions and placenta. The duration of pregnancy , neonatal outcomes and behavioral reponses (reflex,muscle strenght, anxiety and memory) were assessed in the other half of the females. The daily exposure of 5 min (low dose) during pregnancy resulted in reduced brth weiht but the size of the offspring was not changed; however, the number of males per offspring pups was higher. In addition, placental weight was increased and fetus/placenta ratio was decreased in males, showing a particular effect of sex.The exposure also altered muscle strength and reflexes in newborns and cause impars in memory and anxiolytic effects in exposed offspring. In conclusion, the results indicate that smoking marijuana during pregnancy, even in low doses, can be embryotoxic, foetotoxic and may change in the behavior in neonates and adults

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:57:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Erika_Alejandra_Giraldo_Gallo.pdf: 1240790 bytes, checksum: e1c81f5b6b4450551bde3768d0565387 (MD5) Previous issue date: 2010-11-04 / The aim of this study was to evaluate the association between fetal growth and size at birth with mental health problems at 11 years of age in the 1993 Pelotas (Brazil) Birth Cohort Study. Newborns were weighed and measured and calculated anthropometric indexes. At age 11, were assessed mental health problems with the strengths and difficulties questionnaire (SDQ). The prevalence of mental health problems was 32%. After adjustment for potential confounders, we found that newborns with the z score of weight for age and body mass index (BMI) for age <-2 SD were respectively 27% (95% CI: 7to 49) and 29% (95% CI: 10 to 51) greater risk of developing mental health problems at age 11 than born with normal scores. Newborns with BMI z score for age and head circumference > +2 SD were respectively 34% (95% CI: 6 to 71) and 19% (95% : 1 to 40) greater risk of developing the disease than babies with normal scores. The results suggest that factors occurring during pregnancy that are reflected in measures of size at birth can cause mental health problems in late stages. / O objetivo deste estudo foi avaliar a associação entre crescimento fetal e tamanho ao nascer com problemas de saúde mental aos 11 anos na Coorte de Nascimentos de 1993 de Pelotas, RS. Recém-nascidos foram pesados e medidos, e calculados índices antropométricos. Aos 11 anos, foram avaliados problemas de saúde mental com o questionário de capacidades e dificuldades (SDQ). A prevalência de problemas de saúde mental foi 32%. Após ajuste para fatores de confusão, recém-nascidos com escore z de peso/idade e índice de massa corporal (IMC)/idade <-2 DP apresentaram respectivamente 27% (IC95%: 7 a 21) e 29% (IC95%: 10 a 51) maior risco de desenvolver problemas de saúde mental aos 11 anos que nascidos com escore normal. Recém-nascidos com escore z de IMC/idade e perímetro cefálico >+2 DP apresentaram respectivamente 34% (IC95%: 6 a 71) e 19% (IC95%: 1 a 40) maior risco de desenvolver estes problemas que nascidos com escore normal. Os resultados sugerem que fatores ocorridos na gestação e refletidos nas medidas de tamanho ao nascer podem ocasionar problemas de saúde mental em etapas tardias.

Abstract Lysyl hydroxylase (E.C. 1.14.11.4) catalyzes the formation of hydroxylysine in collagens and other proteins with collagenous domains. The resulting hydroxylysine residues participate in the formation of collagen crosslinks, and serve as attachment sites for carbohydrate units. They have been regarded as non-essential, since the absence of lysyl hydroxylase 1 activity is not lethal, although it leads to the kyphoscoliotic type of Ehlers-Danlos syndrome, and since recombinant collagens I and III lacking any hydroxylysine form native-type fibrils in vitro. A novel human lysyl hydroxylase isoenzyme, lysyl hydroxylase 3, was identified, cloned and characterized here. The novel isoenzyme was expressed as a recombinant protein in insect cells, and the protein was shown to catalyze hydroxylation of lysine residues in vitro. No differences were found in the catalytic properties between the recombinant lysyl hydroxylases 3 and 1. The human lysyl hydroxylase 3 gene was shown to be 11.6 kb in size and to contain 19 exons. The introns contain 15 full-length or partial Alu retroposons, which are known to be involved in most human gene rearrangements that occur by homologous recombination. The three recombinant human lysyl hydroxylase isoenzymes were isolated here for the first time as homogenous proteins. Limited proteolysis data suggested that the lysyl hydroxylase polypeptides might consist of at least three distinct domains, A-C. The N-terminal domain A was found to play no role in lysyl hydroxylase activity as a recombinant B-C polypeptide was a fully active hydroxylase. This work also confirmed that lysyl hydroxylase 3 has collagen glucosyltransferase activity as well as trace amounts of collagen galactosyltransferase activity. However, the levels of these activities were so low that their biological significance remains to be determined. In the last part of this work, lysyl hydroxylase 3 knock-out mice were produced and analyzed. The homozygous null embryos were found to die at a very early stage of development due to lack of type IV collagen in the basement membranes. The data demonstrated that hydroxylysine formed by lysyl hydroxylase 3 is essential for early mouse development and that lysyl hydroxylase 1 or 2 cannot compensate for the lack of its function.

Abstract Type XIII collagen is a type II oriented transmembrane protein with a short intracellular domain, a single transmembrane domain and a large, mostly collagenous extracellular domain. Tissue localization and cell culture studies have implicated that it is involved in cell adhesion. The spatio-temporal expression of type XIII collagen mRNA and protein during murine development is studied here. Type XIII collagen mRNAs were expressed at a constant rate during development, with an increase of expression towards birth. The strongest expression was detected in the central and peripheral nervous systems of the developing mouse fetus. Cultured primary neurons expressed this collagen, and recombinant type XIII collagen was found to enhance neurite outgrowth. Strong expression was also detected in the heart, with localization to cell-cell contacts and perinatal accentuation in the intercalated discs. Other sites of type XIII collagen expression included cartilage, bone, skeletal muscle, lung, intestine and skin. Clear developmental shifts in expression suggest a role in endochondral ossification of bone and the branching morphogenesis in the lung. To elucidate the function of type XIII collagen transgenic mice were generated by microinjection of a cDNA construct that directs the synthesis of truncated α1(XIII) chains with an in-frame deletion of the central collagenous COL2 domain. This construct was thought to disrupt the assembly of normal type XIII collagen trimers. Expression of shortened α1(XIII) chains by fibroblasts derived from mutant mice was demonstrated, and the lack of intracellular accumulation in immunohistochemical analysis of tissues suggested that the mutant molecules were expressed on the cell surface. Transgene expression led to developmental arrest and fetal mortality in offspring from heterozygous mating with two distinct phenotypes. The early phenotype fetuses were aborted by day 10.5 of development due to a failure in the fusion of the chorion and allantois membranes and subsequent disruption in placentation, while the late phenotype fetuses were aborted by day 13.5 of development due to cardiovascular and placental defects. Furthermore, it was shown that the heterozygous mice that were initially of normal appearance and bred normally had an increased susceptibility to develop T-cell lymphomas and angiosarcomas later in life. The results presented here increase the evidence that type XIII collagen is involved in cell adhesion, with several important tasks during development. A role of type XIII collagen in malignant transformation of certain mesenchymal cell populations is also implicated.

Postnatal adaptation of neonate to extrauterine life is among others dependent on maturation of mitochondrial oxidative phosphorylation system (OXPHOS). It depends on effective mitochondrial biogenesis during fetal developement. The inadequate capacity of mitochondrial OXPHOS system plays an important role in the neonatal mortality and morbidity. Therefore the study of mitochondrial biogenesis on molecular and biochemical level is important to improve the care of very premature neonates, especially critically ill premature neonates. This thesis has been worked out in The laboratory for study of mitochondrial disorders (Department of Pediatrics, 1st Faculty of Medicine, Charles University in Prague). The thesis is based on molecular genetic analyses, which are focused on characterisation of ATP synthase gene expression and on changes in mitochondrial DNA content during human and rat fetal development. The results provide the better insight into mitochondrial respectively ATP synthase biogenesis during human and rat fetal development.

The purpose of this systematic review was to determine the impact of plant-based diets during pregnancy on physical development of a child, beginning in utero, compared to a standard omnivore diet. Peer reviewed articles were retrieved from PubMed, Cumulative Index to Nursing and Allied Health Literature (CINAHL), Medical Literature On-line (Medline), American Psychological Association Psychological Information Database (APA PsychINFO), Health Source, and Alternative Healthwatch. Articles that were reviewed were restricted to the last 15 years. Literature reviewed included randomized control trials, observational cohorts, and case series of human subjects within the United States and the United Kingdom. The literature reviewed demonstrated that maternal nutrition has a significant role in long term fetal health and programming. Diet quality and sufficient intake of nutrients has effects on birth outcomes. The literature also made it clear that adequate nutrient intake is dependent on effective nutritional and pregnancy education. In conclusion, the literature themes of fetal programming, nutritional education, and diet quality indicate that well planned plant-based diets could be effective in pregnancy. Further observational and experimental studies need to be done on this topic so that more conclusive data can be collected.

O sobrepeso/obesidade é uma condição multifatorial e poligênica que pode resultar em desequilíbrio calórico. Uma vez instalada, a obesidade tende a se manter, de modo que a prevenção figura como principal recurso e, a compreensão das causas, essencial. Este estudo teve o objetivo de avaliar a associação da expressão de genes relacionados à obesidade, inflamação e perfil lipídico em gestantes com sobrepeso/obesidade e eutróficas, na adiposidade dos recém-nascidos. Trata-se de um estudo prospectivo, inserido em estudo coorte de base populacional, realizado em 33 Unidades Básicas de Saúde e em hospital municipal de Araraquara (SP). Foram acompanhadas desde o início do pré-natal até o pós-parto, 78 gestantes, das quais 46 delas eram obesas ou com sobrepeso e 32, eutróficas. Trimestralmente, realizava-se aplicação de questionário digital sociodemográfico, de estilo de vida e morbidade, exames de ultrassonografia e exames de sangue para determinação de: glicemia de jejum, insulina, colesterol total, LDL, HDL, VLDL, triglicérides e PCR-us, hemoglobina glicada e hemograma completo). A análise da expressão gênica materna foi realizada apenas no terceiro trimestre, utilizando o método de extração por fenolclorofórmio para obter RNA a partir do sangue total, e a expressão gênica relativa foi analisada em triplicata por RT-qPCR no equipamento 7500 Fast Real PCR System (Applied Biosystems®, USA). A adiposidade do neonato foi estimada por pletismografia por deslocamento de ar (PEA POD®), na alta hospitalar. O presente estudo é inédito e mostrou que tanto o fator genético (expressão gênica dos genes LEPR, STAT3, PPARG, TLR4, IL6, NFkB e TNF) como fatores nutricionais e metabólicos maternos (IMC pré-gestacional, ganho de peso, HOMA-IR e diabetes mellitus gestacional) estão relacionados com a adiposidade do concepto logo após ao nascimento. O desenvolvimento fetal é um processo biológico complexo, regulado tanto por fatores maternos quanto fetais, incluindo influências genéticas e ambientais. Os mecanismos genéticos influenciam a regulação anti e pró-inflamatória que têm impacto na saúde materna. Expressões de sete dos dez genes investigados mostraram-se estatisticamente associados com a adiposidade do recém-nascido, independente de alguns genes serem mais ou menos expressos em gestantes obesas/sobrepeso. Portanto, o entendimento das diferentes vias do processo inflamatório, imunológico e sinalização da resistência à insulina são intimamente relacionados e dependentes. A elucidação dos fatores envolvidos no início da vida, observados neste estudo, e que podem ser prevenidos no pré-natal, devem ser cruciais para as políticas de saúde pública, na prevenção da obesidade infantil. / Overweight/obesity is a multicausal and polygenic condition that can result in energy imbalance. Once obesity tends to persist, prevention is the more effective strategy and understanding its causes is essential. This study aimed to evaluate the association of the gene expression related to obesity, inflammation and lipid profile in overweight/obese and eutrophic pregnant women and in newborn adiposity. It is a prospective study, inserted in a cohort study with population-based data, which was carried out at 33 Health Units and at a municipal maternity in Araraquara, Sao Paulo, Brazil. Seventy-eight pregnant women were followed since conception until postpartum, of whom 46 were obese or overweight and 32 were eutrophic. Every trimester, a sociodemographic, lifestyle and morbidity questionnaire was applied, ultrasonography and blood tests (fasting glucose, insulin, total cholesterol, LDL, HDL, VLDL, triglycerides and hs-CRP, glycated hemoglobin and complete blood count). The analysis of maternal gene expression was performed only in the third trimester, using the phenolchloroform extraction method to obtain RNA from whole blood, and relative gene expression was analyzed in triplicate by RT-qPCR in the 7500 Fast Real PCR System (Applied Biosystems®, USA). Newborn adiposity was estimated by air displacement plethysmography (PEA POD®) at hospital discharge. As far as we know this is the first study that verified that both genetic factors (LEPR, STAT3, PPARG, TLR4, IL6, NFkB and TNF gene expressions) and maternal nutritional and metabolic factors (pre-gestational BMI, gestational weight gain, HOMA-IR and gestational diabetes) are related to newborn adiposity at birth. Genetic mechanisms that participate in pro and anti-inflammatory regulation impact on maternal health, that may consequently play a role in the complex biological process of fetal development, that depends not only from maternal and fetal factors, but also of genetic and environmental influences. Expression of seven from ten genes investigated were statistically associated with newborn adiposity, regardless that some genes were more and other less expressed in obese/overweight pregnant women. Understanding immune and inflammatory pathways and insulin resistance signaling is crucial because its close association to maternal and newborn obesity, as observed in this study. The elucidation of factors involved in early life, as shown, should guide prenatal care in public health policies to prevent childhood obesity.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-07T12:41:36Z No. of bitstreams: 1 Ismaela Maria Ferreira de Melo.pdf: 1484897 bytes, checksum: 412f7fc7d3537d1d040e74378ac1ef3c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-07T12:41:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ismaela Maria Ferreira de Melo.pdf: 1484897 bytes, checksum: 412f7fc7d3537d1d040e74378ac1ef3c (MD5) Previous issue date: 2012-02-07 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Fluoroquinolones are frequently used in human and veterinary medicine for treatment and prevention of disease respiratory tract, digestive and urinary. Within this group we can highlight the enrofloxacin, a drug that presents a wide spectrum of activity against Gram positive and Gram negative. It is known that fluoroquinolones are the property of crossing the placenta and may have adverse effects on the developing fetus, especially when you consider that more than half of pregnancies are unplanned, and thus a large number of women may be exposed to potentially these drugs during the first trimester of pregnancy. However, the mechanisms of these adverse effects are still unknown. Thus, the present study was to evaluate the effect of enrofloxacin in pregnant rats on placental development and offspring. Enrofloxacin (Baytril ®) was administered at a dose of 5 mg / kg daily intramuscular throughout pregnancy. The placentas were analyzed morphologically, morphometrically and immunohistochemical tests for seven, fourteen and twenty days of pregnancy. The results showed that the treated group there was significant reduction in the number of implantation sites, weight and placental total area of the disk at fourteen and twenty days of development, and quantitative changes in the constituents of the layers of the labyrinth, trophoblastic giant cells and trofospongio of the placenta. There were observed no evidence of malformation in the head, trunk and limbs of neonates. However, there was a significant reduction in the number and weight of neonates in enrofloxacin-treated group compared to control, but without affecting its length. There was no change in the histochemical analysis, however, the TUNEL test showed stronger apoptotic activity in the placentas with only 14 days of development in the treated group compared to control. With this we conclude that enrofloxacin when administered at a dose of 5 mg/kg in rats during pregnancy interferes with placental development by altering the constituents of the placenta and increase apoptosis in the middle third of pregnancy, and reflecting the reduction in the number and weight of neonates. / As fluoroquinolonas são freqüentemente usadas na medicina humana e veterinária para tratamento e prevenção de doenças do trato respiratório, digestivo e urinário. Dentro deste grupo podemos destacar a enrofloxacina, um fármaco que apresenta um elevado espectro de atividade frente bactérias Gram positivo e Gram negativo. Sabe-se que as fluoroquinolonas têm a propriedade de atravessar a placenta podendo ter efeitos adversos no feto em desenvolvimento, principalmente se levarmos em consideração que mais da metade das gestações não são planejadas, e assim, um grande número de mulheres pode ser potencialmente expostas a estes fármacos durante o primeiro trimestre de gravidez. No entanto, os mecanismos desses efeitos adversos ainda são desconhecidos. Assim, a presente pesquisa teve como objetivo avaliar o efeito da enrofloxacina em ratas prenhas no desenvolvimento da placenta e da prole. A enrofloxacina (Baytril®) foi administrada na dose de 5 mg/kg, diariamente, via intramuscular, durante toda a gestação. As placentas foram analisadas morfologicamente, morfometricamente e imunohistoquimicamente aos sete, quatorze e vinte dias de prenhez. Os resultados mostraram que no grupo tratado houve redução significativa do número de sítios de implantação, do peso e área total do disco placentário aos quatorze e vinte dias de desenvolvimento, e alterações quantitativas nos elementos constituintes das camadas do labirinto, trofospongio e células trofoblasticas gigantes da placenta. Não foram observados nenhum indício de malformação na cabeça, tronco e membros dos neonatos. No entanto, houve uma redução significativa no número e peso dos neonatos no grupo tratado com a enrofloxacina em relação ao controle, porém sem afetar o seu comprimento. Não houve alteração na análise histoquímica, porém, o teste de TUNEL mostrou atividade apoptótica mais intensa apenas nas placentas com 14 dias de desenvolvimento do grupo tratado em relação ao controle. Com isso concluímos que a enrofloxacina quando administrada na dosagem de 5 mg/kg durante prenhez em ratas interfere no desenvolvimento placentário, por alterar os elementos constituintes da placenta e aumentar a apoptose no terço médio da gestação, tendo como reflexo a redução no número e peso dos neonatos.

Orientadores: José Antonio Rocha Gontijo, Flávia Fernandes Mesquita Vieira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T00:59:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Block_DanielBueno_M.pdf: 3824410 bytes, checksum: 3f680ece69f85c5b515f67c4ee1f67b4 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O ambiente em que vivemos tem grande influência no desenvolvimento e na vida adulta do feto, sendo que a alimentação ou o tabagismo vêem como hábitos e estilo de vida que estão diretamente relacionados a modificações na organogênese fetal. O tabagismo é um dos fatores de maior preocupação das autoridades em saúde pública, devido aos graves problemas à saúde causados pelo cigarro, os custos sociais e econômicos decorrentes destas afecções e, atualmente às possíveis implicações epigenéticas dada incidência do tabagismo em gestantes que pode repercutir sobre gerações futuras. Vários estudos tratam dos efeitos danosos e das repercussões do cigarro no organismo de gestantes e no desenvolvimento do feto, tais como hipertensão arterial, doenças cardiovasculares, maior prevalência de aborto espontâneo, morbidade intrauterina , retarde no crescimento fetal, entre outros. A inalação de monóxido de carbono (CO) pelas gestantes, através do cigarro, causa no feto um estado de hipóxia que pode ser, muitas vezes, fatal. Em resposta a este déficit de oxigênio alguns mecanismos fisiológicos podem ser observados, como: o aumento da expressão do hormônio endógeno eritropoietina (EPO) que regula a eritropoiese e consequentemente, os níveis de hemoglobina e a hematose dos tecidos. O fator induzível por hipóxia (HIF-1) atua na regulação da expressão EPO, sobre a angiogênese, e na viabilidade e proliferação celular vascular entre outras funções. Nesta emaranhada rede de estímulos, está intimamente envolvido o fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) que tem na hipóxia um dos principais estímulos a sua expressão. Este fator é o mais importante mediador do desenvolvimento vascular renal, principalmente do processo de diferenciação do corpúsculo glomerular. Observamos que a inalação de tabaco não modificou significativamente a evolução da massa corporal das mães durante a prenhes (figura 6). No entanto, a prole de animais submetidos ao fumo apresentou uma expressiva redução da massa corporal ao nascer - Ct 7,2± 0,05DPM g vs. Fm 6,3± 0,24DPM g (figura 7), e da nona e décima semana de vida - Ct 322± 20,5DPM g vs. Fm 286± 32,3DPM g e Ct 329± 20,4DPM g vs. Fm 294± 32,6DPM g, respectivamente (figura 8). Os resultados referente à função renal na prole Ct e Fm na 5ª semana de vida não mostraram diferenças significativas na filtração glomerular (CCr) tão pouco na reabsorção proximal de sódio. Contudo, a prole Fm apresentou um aumento significativo na excreção de sódio (FENa+ 24,5%, FEK 13,8%, FEPPNa+ 25,3% e CENa+ 20%) quando comparado ao Ct (figura 13). Por outro lado, na 10ª semana de vida, observamos um aumento significativo (p=0,01) no CCr - 13,9% e na CENa+ - 17,7%, na prole Fm vs. Ct. Nestes animais não houve diferença na reabsorção de Na+ no túbulo proximal e pós-proximal, consequentemente não observamos diferenças significativas na FENa+ e FEK (figura 14). Nos animais Fm de 13 semanas de vida nenhum dos parâmetros das provas funcionais renais se alteraram (figura 15). Contudo, estritamente nesta idade podemos observar um elevação na pressão arterial (p=0,02) entre os grupos Ct e Fm - 134± 9,79DPM mmHg e 146± 11,07DPM mmHg, respectivamente (figuras 11). Não observamos modificações significativas, através da estereologia renal, no volume renal (Ct 0,12 ±0,01 vs. Fm 0,11 ±0,004), na massa renal (Ct 0,43 ±0,03 vs. Fm 0,37 ±0,01) nos animais com 12 dias de vida. Embora, não estatisticamente significativo, a prole Fm apresentou uma redução de 10% no volume glomerular (Ct 16420 ±2411 vs. Fm 15860 ±1078) e 8,2% menos glomérulos (Ct 10450 ±2030 vs. Fm 8628 ±900) quando comparados ao Ct (figuras 16 a 19). Os resultados quantitativos das proteínas envolvidas na angiogênese e eritropoiese - VEGF e EPO, dados pelo ensaio de western blotting, não apresentaram diferenças significativas entre os grupos (figuras 20 a 22). Contudo, os resultados semi-quantitativos por imunolocalização mostrou uma elevada intensidade fluorocrômica do VEGF nos animais Fm e de HIF1? nos animais Ct no período embrionário - E17 (figuras 23 a 27). Observamos, também, uma expressiva modificação na estrutura da matriz extracelular por deposição de proteínas no sitio intersticial e perivascular renal nos animais Fm de 16 semanas vida comparadas ao Ct dadas pela histoquímica de picrossíruis e imunofluorêscencia de fibronectina (figura 29 a 32). Assim, podemos concluir que, a exposição intrauterina ao fumo e seus componentes, podem levar a uma modificação morfofuncional renal na vida adulta que reflete diretamente na manutenção da pressão arterial / Abstract: Prior study about developmental plasticity hypothesis suggests that various adverse intra-uterine exposures lead to persistent fetal developmental adaptations. Maternal smoking is a very important modifiable adverse fetal exposure in western countries and leads to a decrease in the offspring's birth weight. Thus far, the specific adverse fetal smoking exposures and mechanisms underlying these associations on renal development and functional disorder are unclear. The present study investigates, in adult male rats, the effect of smoking exposure (Sk) in utero on blood pressure (BP), and its association with nephron structure and function changes. In the current study, showed in 13-week old Sk offspring enhanced arterial blood pressure, reduced nephron number are associated with higher TGF-?1 glomerular expression. Sk glomeruli also presented an upregulated collagen and fibronectin deposition intrinsically related to fibrotic process as compared to age-matched control group. From our present knowledge, these are the first data showing renal morphological and functional modifications in the gestational smoking model of fetal programming. The fetal-programmed adult rats showed structural kidney disorders associated with a striking stage of fibrosis, which led us to state that the glomerular overflow and subsequently TGF-?1 activity inducing fibrotic protein expression that may cause glomerular EMT / Mestrado / Fisiopatologia Médica / Mestre em Ciências