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Resistência genética e controle químico de Stenocarpella macrospora do milho Lages SC 2012 / Genetics resistance and chemical control of Stenocarpella macrospora of maize

Bampi, Daiana 07 February 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV12MA063.pdf: 46944968 bytes, checksum: 6b8d53259f4109a052b1401a704602a0 (MD5) Previous issue date: 2012-02-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The macrospora spot, caused by the fungus Stenocarpella macrospora, has become one of the most important maize diseases in Brazil in recent years. The objectives of the study were: a) evaluate the resistance of maize hybrids macrospora spot b) determine the sensitivity of S. macrospora to fungicides by inhibition of mycelial growth and conidial germination c) evaluate the protective and curative control of the disease in young corn plants d) quantify the effect of fungicides on control the expansion macrospora spot. The resistance was evaluated on 52 hybrids and two isolates of the fungus. The inoculation was made at the V2 developmental stage, placing each plant in 0.2 mL of the suspension of 7x104 conidia mL-1. Disease severity was evaluated 14 days after inoculation. The sensitivity of S. macrospora in vitro were evaluated 12 fungicides, six concentrations and two isolates of the fungus. The percentage of inhibition of mycelial growth and conidial germination was calculated in comparison with control, estimation of 50% inhibitory concentration (IC50). The efficiency of fungicides to control protective and curative was determined in a greenhouse, with the isolated SC and the hybrid AS1565. We evaluated 16 fungicides, applied at V2. Preventive control the inoculation was made depositing 0.2 mL of the suspension of 7x104 conidia mL-1 48 hours after application. In the curative control the inoculation was made 48 hours before application. Disease severity was determined 21 days after inoculation. In control the expansion of macrospora spot seven fungicides were evaluated, applied directly to leaves of maize with leaf lesions with hybrid AS 1565. The lesions were measured every three days for a period of 27 days. In each lesion was also quantified the number of pycnidia cm2-1. There was significant difference in severity leaf among the hybrids. There was no significant effect of isolates of the fungus on the severity of the disease. Resistant hybrids were not found. The disease severity ranged from 8.88% for hybrid 30A30HX to 17.76% for the AO 1050. The fungicides tested were effective in inhibiting the growth of the mycelium, and the IC50 was less than 1 ppm for all fungicides. There was no difference between isolates. The strobilurins had higher fungitoxicity in inhibition of germination of the conidia, and the IC50 was between 0.0035 and 0.03 ppm, and the isolated SC showed a higher sensitivity to the fungicides. In preventive aplication, all fungicides differed from the control, reducing the average 85% the severity macrospora spot compared to control. In the curative control all fungicides differed from the control, but mixtures of triazole + strobilurin showed greater efficiency, reducing an average of 75% disease severity, whereas the isolated products as the strobirulins reduced 62%, benzimidazoles 55% and triazoles 38% . The fungicide tebuconazole, and mixtures of triazoles + strobilurins, reduced on average 68% expansion of the macrospora spot, and 58.7% the formation of pycnidia cm2-1. It although no resistant hybrid was found genetic variability exists among the hybrids tested and that the application of fungicides significantly reduced the severity of the macrospora spot / A mancha-de-macrospora, causada pelo fungo Stenocarpella macrospora, tem se tornado uma das doenças mais importantes na cultura do milho nos últimos anos no Brasil. Os objetivos do trabalho foram: a) avaliar a resistência de híbridos de milho a mancha-demacrospora; b) determinar a sensibilidade de S. macrospora a fungicidas pela inibição do crescimento do micélio e germinação de conídios; c) avaliar o controle protetor e curativo da doença em plantas jovens de milho; d) quantificar o efeito de fungicidas na expansão da mancha-de-macrospora. Quanto a resistência foram avaliados 52 híbridos e dois isolados do fungo. A inoculação foi feita no estádio fenológico V2, depositando em cada planta 0,2 mL da suspensão de 7x104 conídios mL-1. A severidade da doença foi avaliada aos 14 dias após a inoculação. Quanto à sensibilidade de S. macrospora in vitro foram avaliados 12 fungicidas, seis concentrações e dois isolados do fungo. A porcentagem de inibição do crescimento micelial e germinação de conídios foi calculada em relação à testemunha, estimando-se valores de concentração inibitória de 50% (CI50). A eficiência de fungicidas no controle protetor e curativo foi determinada em casa-de-vegetação, com o isolado de SC e o híbrido AS1565. Foram avaliados 16 fungicidas, aplicados no estádio V2. No controle preventivo a inoculação de 0,2 mL da suspensão de 7x104 conídios mL-1 foi realizada 48 horas depois da aplicação. No controle curativo a inoculação foi realizada 48 horas antes da aplicação. A severidade da doença foi determinada 21 dias após a inoculação. No controle da expansão da mancha-de-macrospora foram avaliados sete fungicidas aplicados diretamente em folhas de milho AS 1565 com lesões foliares. As lesões foram mensuradas a cada três dias por um período de 27 dias. Em cada lesão também foram quantificados o número de picnídios cm2-1. Houve diferença significativa na severidade entre os híbridos. Não houve efeito significativo dos isolados do fungo sobre a severidade da doença. Não foi encontrado nenhum híbrido resistente. A severidade da doença variou de 8,88% para o híbrido 30A30HX a 17,76% para o AO 1050. Foi constatado que os fungicidas testados foram eficazes na inibição do crescimento do micélio, sendo que a CI50 foi menor que 1 ppm para todos os fungicidas, não havendo diferença entre isolados. Na inibição da germinação de conídios as estrobilurinas apresentaram maior fungitoxicidade, pois a CI50 ficou entre 0,0035 e 0,03 ppm, sendo que o isolado de SC mostrou maior sensibilidade aos fungicidas. Na aplicação preventiva todos os fungicidas diferiram da testemunha, reduzindo em média 85% à severidade da mancha-demacrospora em relação à testemunha. No controle curativo todos os fungicidas diferiram da testemunha, contudo as misturas de triazóis + estrobilurinas mostraram maior eficácia, reduzindo em média 75% a severidade da doença, enquanto que os produtos isolados como as estrobilurinas reduziram 62%, benzimidazóis 55% e triazóis 38%. O fungicida tebuconazole e as misturas de triazóis + estrobilurinas, reduziram em média 68% a expansão da mancha-demacrospora, e 58,7% a formação de picnídio cm2 -1. Foi constatado que apesar de não haver híbridos resistentes existe variabilidade genética entre os híbridos testados e que a aplicação de fungicidas reduz significativamente a severidade da mancha-de-macrospora
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Intensidade e controle de ferrugem em cultivares de Hemerocallis hibrida / Intensity and control of rust in Hemerocallis hibrida cultivars

Ribeiro, Roberta Sabatino 24 July 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV12MA104.pdf: 3071931 bytes, checksum: 12c25e131b1ed773136ed462f974fe61 (MD5) Previous issue date: 2012-07-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The rust (Puccinia hemerocallidis Thuem) is the main disease of daylily. In Brazil, there are no registered fungicides to control this disease and there are no studies indicating the more resistant cultivars. The study aimed to verify, on field conditions, the effectiveness of fungicides mixtures and rock dust on the control of rust and on the agronomic characteristics of five cultivars the daylily, identify the resistance degree of this cultivars to rust, as well to verify, in vitro, the efficacy of seven fungicides and rock dust on the germination inhibition of P. hemerocallidis urediniospore. The experiments were conducted at the Center of Agroveterinaries Sciences, CAV/UDESC in Lages, SC. On field conditions evaluated the cultivars Cora Offer, Daniela Esther Nass, Hariet, Margaret Mee and São Paulo and the products rock dust, pyraclostrobin + epoxiconazole, trifloxystrobin + tebuconazole, picoxystrobin + cyproconazole and azoxystrobin + cyproconazole. The fungicides were applied every thirty days for a total of three applications and the rock dust was applied every seven days for a total of thirteen applications. Weekly were quantified the incidence and severity of rust on leaves and through these data were calculated the Area Under Disease Progress Curve (AUDPC). It was also evaluated number of leaves, of flowers and of tillers. It was observed that all mixtures of fungicides reduced the disease incidence and severity, as well, delayed leaf senescence process. The mixtures pyraclostrobin + epoxiconazole, trifloxystrobin + tebuconazole and picoxystrobin + cyproconazole provided higher number of flowers the plants. The rock dust reduced the severity of the disease, but had lowest control in relation to fungicides mixtures, besides had not increased in none agronomic characteristics. The cultivar Daniela Esther Nass had the lowest incidence and severity of rust and the smallest reduction in number of leaves. The cultivar Daniela Esther Nass was classified as moderately resistant/resistant to rust, the Cora Offer as moderately susceptible/ susceptible, the Hariet and Margaret Mee as susceptible, and São Paulo as very susceptible. In the in vitro assay were evaluated the products azoxystrobin, picoxystrobin, pyraclostrobin, trifloxystrobin, cyproconazole, epoxiconazole, tebuconazole and rock dust at concentrations of 0, 0.01, 0.1, 1, 10 and 100 mg L-1. The products were diluted and mixed in a water-agar media, and stored at 4°C for 24 hours. Was added 0.5 mL of a suspension containing urediniospore of P. hemerocallidis and the incubation was at 22°C, in the dark, for 6 hours. The IC50 values were within the range of 0.01 to 0.1 mg L-1 for fungicides of the strobilurin chemical group; between 0.1 and 1 mg L-1 to tebuconazole; between 1 and 10 mg. L-1 to epoxiconazole, and between 10 and 100 mg. L-1 to cyproconazole and rock dust. The CI100 was observed only in fungicides azoxystrobin and picoxystrobin. It was concluded that all fungicides of the strobilurin chemical group and tebuconazole showed highly toxicity to urediniospores of the P. hemerocallidis, and fungicides epoxiconazole and cyproconazole, such as the rock dust had moderately toxicity this pathogen / A ferrugem (Puccinia hemerocallidis) é a principal doença do hemerocale. No Brasil, não há fungicidas registrados para o controle desta doença e também não há trabalhos indicando quais as cultivares mais resistentes. O trabalho teve como objetivos verificar, a campo, a eficácia de mistura de fungicidas e do pó de rocha no controle da ferrugem e nas características agronômicas de cinco cultivares de hemerocale, identificar o grau de resistência destas cultivares à ferrugem e também verificar, in vitro, a eficácia de sete fungicidas e do pó de rocha na inibição da germinação de uredosporos de P. hemerocallidis. Os experimentos foram conduzidos no Centro de Ciências Agroveterinárias, CAV/UDESC, em Lages, SC. A campo, avaliou-se as cultivares Cora Offer, Daniela Esther Nass, Hariet, Margaret Mee e São Paulo e os produtos pó de rocha, piraclostrobina + epoxiconazol, trifloxistrobina + tebuconazol, picoxistrobina + ciproconazol e azoxistrobina + ciproconazol. Os fungicidas foram aplicados a cada trinta dias, num total de três aplicações e o pó de rocha a cada sete dias, num total de treze aplicações. Semanalmente quantificou-se a incidência e a severidade da ferrugem em folhas e através destas calculou-se a Área Abaixo da Curva de Progresso da Doença (AACPD). Avaliou-se ainda o número de folhas, de flores e de afilhos. Observou-se que todas as misturas de fungicidas reduziram a incidência e a severidade da ferrugem, bem como retardaram o processo de senescência das folhas. As misturas piraclostrobina + epoxiconazol, trifloxistrobina + tebuconazol e picoxistrobina + ciproconazol propiciaram maior número de flores as plantas. O pó de rocha reduziu a severidade da doença, mas apresentou menor controle em relação as misturas de fungicidas, além disso, não apresentou incremento em nenhuma característica agronômica. A cultivar Daniela Esther Nass apresentou a menor incidência e severidade à ferrugem e a menor redução no número de folhas. A cultivar Daniela Esther Nass foi classificada como moderadamente resistente/resistente à ferrugem, a Cora Offer como moderadamente suscetível/suscetível, a Hariet e a Margaret Mee como suscetíveis, e a São Paulo como altamente suscetível. No ensaio in vitro foram avaliados os produtos azoxistrobina, picoxistrobina, piraclostrobina, trifloxistrobina, ciproconazol, epoxiconazol, tebuconazol e pó de rocha nas concentrações de 0; 0,01; 0,1; 1; 10 e 100 mg.L-1. Os produtos foram diluídos e misturados em meio de ágar-água e armazenadas a 4ºC durante 24 horas. Adicionou-se 0,5 mL de uma suspensão contendo uredosporos de P. hemerocallidis e a incubação foi a 22ºC, no escuro, durante 6 horas. As CI50 ficaram num intervalo entre 0,01 e 0,1 mg.L-1 para os fungicidas do grupo químico das estrobilurinas; entre 0,1 e 1 mg.L-1 para o tebuconazol; entre 1 e 10 mg.L-1 para o epoxiconazol; e entre 10 e 100 mg. L-1 para o ciproconazol e o pó de rocha. A CI100 foi observada apenas nos fungicidas azoxistrobina e picoxistrobina. Todos os fungicidas do grupo químico das estrobilurinas e o tebuconazol apresentaram elevada fungitoxicidade a uredosporos de P. hemerocallidis; e os fungicidas ciproconazol e epoxiconazol, bem como o pó de rocha apresentaram ação moderadamente fungitóxica a este patógeno
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Resistência de genótipos de milho à mancha de macrospora / Resistance of maize genotypes to macrospora spot

Piletti, Giovani Jian 21 February 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV13MA115.pdf: 363959 bytes, checksum: 6e95b30ef3170c9a81eb55320f07a3ed (MD5) Previous issue date: 2013-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The importance of pathogens that infect corn crop is a major obstacle to the continued increase in crop yield. Genetic resistance is a major strategy for disease control, however, in Brazil there is no information maize cultivars resistant to macrospora spot caused by the fungus Stenocarpella macrospora. With the objective to evaluate the resistance of different cultivars to macrospora spot, the impact of their occurrence on yield and quality of grain, get an ideal concentration of conidial S. macrospora to beused for inoculation of corn and investigate whether there are differences in disease severity from isolates of the fungus were developed four experiments. The first experiment tested six xoncentration: 0,60, 120, 180, 240 and 300 000 conidia mL-1 and the second tested isolates drom the regions of Vacaria, Passo Fundo, São Valentim, Campinas do Sul, state of Rio Grande do Sul, and Quilombo e Lages, Santa Catarina state, and Pato Branco, Paraná state. The inoculum concentration data were subjected to regression analysis (P <0.05) while data from different isolates were submitted to Tukey test (P <0.05). the third study was conducted in a greenhouse, in 2011, with 92 cultivars and three isolates of the fungus and mountainous regions west of the State of Santa Catarina (OSC and SSC) and Campos de Cima da Serra of the State of Rio Grande do Sul (CCSRS). It was used a completely randomized designs with five replicates. It was evaluated the severity of the macrospora spot 21 days after inoculation. Data were analyzed by ANOVA and means were compared by the Scott Knott test (P <0.05) and genotype groups responses being analyzed by orthogonal contrast (P <0.05). the fourth experiment was conducted in the field in Lages, SC, 2011/2012 season, with eigth genotypes: CD 393, NBX 920YG, TORK TL, AS 1565, DKB 240YG, SG 6304YG, P30F53YG and SCS 155 CATARINA under inoculating conidia of S. macrospora in different stages (V10, V12 and tasseling) and a control. It was evaluated the incidence of white rot cob, percentage of rot grains, thousand grain weigth and grain yield. Data were analyzed by analysis of variance and then by Tukey test (P <0.005). Dunnett s test was conducted to compare the stages of inoculation with control for each hybrid. The results in these experiments have revealed that there was infection and expression of symptoms in all cultivars, differing in severity. The hybrids showed uo for the three most resistant isolates, indicating that the gratest genetic variability of VPA and HD did not guarantee greater resistance to macrospora spot. It was also verified differneces in aggressiveness among isolates from different regions, being isolated from the Quilombo showed that on average greater disease severity, for this isolated significant difference between transgenic and conventional cultivars. It can be confirmed that was not detected complete resistance to S. macrospora. From the regression analysis it was determined that with 180.000 conidia ml-1 was reached maximum severity. Of the eighjt hybrids tested, five had decreased productivity when inoculated with S. macrospora. For all hybrids increased incidence of white rot cob and rot grains compared stages of inoculation with the witness (check) and as the stadium came from tasseling inoculation increased the percentage of rot cob and rot grain. It was demonstrated in this study that there is genetic variation for resistance to white rot cob caused by S. macrospora with inoculum derived from leaf lesions / A importância dos patógenos que infectam a cultura do milho constitui um dos principais entraves para o contínuo aumento na produtividade da cultura. A resistência genética é uma das principais estratégias de controle de doenças foliares, no entanto, no Brasil não há informações de cultivares de milho resistente à mancha de macrospora causada pelo fungo Stenocarpella macrospora. Com o objetivo de avaliar a resistência de diferentes cultivares comerciais à mancha de macrospora, o impacto da sua ocorrência na produtividade e qualidade de grãos, obter uma concentração ideal de conídios de S. macrospora a ser utilizada na inoculação do milho e investigar se há diferença na severidade da doença a partir de isolados do fungo foram desenvolvidos quatro experimentos. O primeiro experimento testou seis concentrações de conídios: 0, 60, 120, 180, 240 e 300 mil conídios mL-1 e o segundo testou isolados oriundos das regiões de Vacaria, Passo Fundo, São Valentim, Campinas do Sul, Estado do Rio Grande do Sul, Lages e Quilombo, Estado de Santa Catarina, e Pato Branco, Estado do Paraná. Os dados de concentração de inóculo foram submetidos à análise de regressão (P<0,05) enquanto os dados dos diferentes isolados foram submetidos ao teste de Tukey (P<0,05). O terceiro trabalho foi conduzido em casa de vegetação, no ano de 2011, com 92 cultivares e três isolados do fungo das regiões Oeste e Serrana do Estado de Santa Catarina (OSC e SSC) e Campos de Cima da Serra do Estado do Rio Grande do Sul (CCSRS). Utilizou-se delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco repetições. Avaliou-se a severidade da mancha de macrospora aos 21 dias após a inoculação. Os dados foram submetidos à ANOVA e as médias comparadas pelo teste de Scott Knott (P<0,05), respostas ente grupos de genótipos analisadas por contraste ortogonal (P<0,05). O quarto experimento foi realizado a campo no município de Lages, SC, safra 2011/2012, com oito genótipos: CD 393, NBX 920YG, TORK TL, AS 1565, DKB 240YG, SG 6304YG, P30F53YG e SCS 155 CATARINA, sob inoculação de conídios de S. macrospora em diferentes estádios de (V10, V12 e Pendoamento) e uma testemunha. Avaliaram-se incidência de podridão branca de espiga, porcentagem de grãos ardidos, massa de mil grãos e rendimento de grãos. Os dados foram analisados por meio de análise de variância e posteriormente por teste de Tukey (P<0,05). Foi realizado teste de Dunnett para comparação dos estádios de inoculação com a testemunha, para cada híbrido. Os resultados obtidos em tais experimentos permitem afirmar que houve infecção e expressão de sintomas em todas cultivares avaliadas, diferindo no nível de severidade. Os híbridos simples demonstraram-se mais resistentes para os três isolados, demonstrando que a maior variabilidade genética da VPA e do HD não garantiu maior resistência à mancha de macrospora. Foi verificado também diferenças de agressividade entre os isolados de regiões diferentes, sendo o isolado de Quilombo o que apresentou na média maior severidade da doença. Para este isolado houve diferença significativa entre cultivares transgênicas e convencionais. Pode-se confirmar que não foi detectada resistência completa à S. macrospora. A partir da análise de regressão determinouse que com 180 mil conídios mL-1 foi alcançada máxima severidade. Dos oito híbridos avaliados, cinco apresentaram queda de produtividade quando foram inoculados com S. macrospora. Para todos os híbridos houve aumento de podridão branca da espiga e grãos ardidos quando comparados os estádios de inoculação com a testemunha e conforme o estádio de inoculação se aproximou do pendoamento aumentou espigas doentes e grãos ardidos. Ficou evidenciado neste estudo que existe variabilidade genética para resistência a podridão da espiga causada por S. macrospora com inóculo oriundo das lesões foliares
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Avaliação da resistência de variedades de cana-de-açúcar ao raquitismo-da-soqueira com base na taxa de colonização dos colmos por Leifsonia xyli subsp. xyli. / Resistance of brazilian sugarcane cultivars to ratoon stunting disease basead on the rate of stalk colonization by Leifsonia xyli subsp. Xyli.

Patricia Benites Ros 27 October 2004 (has links)
O método sorológico \"tissue blot enzyme immunoassay\" foi utilizado para determinar a taxa de colonização dos vasos do xilema por Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx) em colmos de 28 variedades de cana-de-açúcar, incluindo a CB47-355, CB41-76 e CB49-260 como padrão resistente, intermediário e suscetível, respectivamente. Para cada variedade, 16 gemas foram tratadas termicamente a 50,5ºC por 2 horas e, em seguida, submetidas a banho fungicida a base de benomyl na dose de 6,5 g do princípio ativo por 10 litros de água. Oito gemas foram imersas por 10 minutos em caldo da CB49-260 sabidamente colonizada por Lxx diluído em água destilada na proporção 1:5 (\"INOCULADO\") e a outra metade em água (\"SADIO\"). Após a inoculação, foram plantados três vasos (repetições) para o tratamento, sendo as plantas mantidas em casa-de-vegetação até a colheita durante 7 meses, quando então 2 colmos de cada vaso foram amostrados para determinar a taxa de colonização dos vasos. A variedade CB47-355 não apresentou nenhum vaso colonizado, enquanto na CB41-76 e CB49-260 a taxa de colonização foi igual a 17% e 76%, sendo classificadas como resistente, intermediária e suscetível, respectivamente, concordando com literatura prévia. Das variedades em teste, 12 comportaram-se como intermediárias e 13 como suscetíveis. No primeiro caso, a %VC variou de 7 a 25 e, nas suscetíveis, de 25,7 a 76. Portanto, o aumento da taxa de colonização é praticamente linear da mais resistente para a mais suscetível, o que é característico de caráter quantitativo. Considerando que nenhuma variedade comercial mostrou-se resistente e que Lxx causa perdas significativas em todos os países produtores de cana-de-açúcar, sugere-se que os programas de melhoramento devem dirigir programas para a seleção de genitores e progênies para obter variedades resistentes. Enquanto isso não ocorre, atenção dever ser dada para o uso de mudas indexadas. / The tissue blot immunoassay (TBIA) for detecting Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx) colonized vascular bundles (CVB) were used in determining the reaction of 28 brazilian sugarcane cultivars to ratoon stunting disease (RSD), including CB47-355, CB41-76 e CB49-260 as resistant, intermediate and susceptible standards. For each cultivar, 16 buds were hot water treated at 50,5 oC for 2 hours and protected against root rots with benomyl. Eight buds of each cultivar were than inoculated with infected sap of the CB49-260 diluted 1:5 in water, and the remaining 8 buds were inoculated with distilled water for planting the control plots. The reps of each cultivar were planted in plastic plots at green house. At harvesting, seven months after planting, two stalks were sampled from each plot. The rate of colonization of vascular bandles by Lxx in stalks of each cultivar was determined. Statistical analysis by the univariate clustering method (Scott-Knott) was reliable for grouping genotypes according to their levels of Lxx resistance by the percentage of CVB. The cultivar CB47-355 did not present any CVB, while CB41-76 and CB49-260 presented 17% and 76%, being classified as resistant, intermediate and susceptible, in agreement with previous literature. Among the varieties in test, 12 were intermediates and 13 susceptibles. The percent of CVB among the intermediate and susceptible cultivars varied from 7% to 25% and 25,7 to 76%, respectively. The knowledge of resistance of each cultivar is essential for advising the use of complementary phytossanitary measures to control the disease. Since all cultivars are intermediate or susceptible, the sugarcane breeding programs need specific works for selection and releasing of resistant cultivars. Before this, schemes of nurseries and the use clean seed cane are recommended.
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Epidemiologia da vassoura-de-bruxa (Crinipellis perniciosa (STAHEL) Singer) em cacaueiros enxertados em Uruçuca, BA. / Epidemiology of witches' broom (Crinipellis perniciosa (STAHEL) Singer) on grafted cocoa in Uruçuca, BA.

Silvio André Meirelles Alves 22 January 2003 (has links)
A vassoura-de-bruxa é a doença mais importante da cultura do cacaueiro, nos países onde ela ocorre. Em 1989 foi constatada pela primeira vez a presença do patógeno causador dessa doença na principal região produtora do Brasil. A falta de medidas de controle eficientes resultou, nos últimos anos, em menor produção, mudanças no uso da terra, venda de propriedades, diminuição do nível de emprego e danos ao meio ambiente. Em vista do pouco conhecimento sobre aspectos epidemiológicos da doença nas condições do sudeste da Bahia, elaborou-se o presente trabalho com os seguintes objetivos: estudar o gradiente de infecção da vassoura-de-bruxa em ramos e frutos em cacaueiros enxertados; comparar o efeito de genótipos e três tratamentos (poda fitossanitária semestral, poda fitossanitária mensal e poda fitossanitária aliada a aplicação de fungicida mensais) no controle da doença; estudar o progresso da vassoura-de-bruxa no tempo, quantificado em ramos e frutos doentes. O experimento foi conduzido em Uruçuca, BA, em área contendo 16 genótipos diferentes, adjacente a uma área com cacaueiros abandonados com alta incidência da doença. A área experimental foi dividida em três partes, as quais receberam os seguintes tratamentos: poda fitossanitária semestral, poda fitossanitária mensal e poda fitossanitária aliada a aplicação de fungicida mensal. Pelo menos uma vez por mês foram contados os ramos e frutos com vassoura. Os resultados mostraram a ausência de evidência clara da existência de gradiente de doença. Os níveis de resistência genética à vassoura-de-bruxa de ramos e frutos não foram correlacionados entre si. Houve bom ajuste do progresso da doença ao modelo monomolecular. As menores taxas de crescimento foram obtidas no tratamento com poda e aplicação de fungicida mensal. O tratamento que combinou poda e pulverização com fungicida apresentou diferença significativa na redução do percentual de frutos com vassoura. Os genótipos NO-34, NO-17 e NO-02 foram os que apresentaram menores percentagens de frutos com vassoura, sendo significativamente diferentes dos genótipos NO-24 e NO-13. / Witches' broom is the most important disease of cocoa, in the countries where it occurs. In 1989, it was verified for the first time the presence of the pathogen in the main producing area of Brazil. The lack of efficient control measures resulted, in the last years, in losses in the production, changes in the use of the soil, sale of properties, decrease of the employment level and damages to the environment. In view of the little knowledge on epidemic aspects of the disease in the conditions of the southeast of Bahia, the present work was elaborated with the following objectives: to study the gradient of the witches' broom infection in flushes and pods in grafted cocoa; to compare the effect of genotypes and three treatments (half-yearly phytosanitation, monthly phytosanitation and monthly phytosanitation allied to fungicide application) in the control of the disease; to study the witches' broom temporal progress, quantified in flushes and pods. Trials were carried out in Uruçuca, BA, in area contends 16 different genotypes, adjacent an area with abandoned cocoa with high incidence of the disease. The experimental area was divided in three parts, which received the following treatments: half-yearly phytosanitation, monthly phytosanitation and monthly phytosanitation allied to fungicide application. At least once a month, flushes and pods with broom were counted. Results showed the absence of clear evidence of the existence of disease gradient. The levels of genetic resistance to the witches' broom of flushes and pods were not correlated to each other. There was good adjustment of progress of the disease to the monomolecular model. The smallest growth rates were obtained in the treatment with monthly phytosanitation and fungicide application. The treatment that allied phytosanitation and fungicide application presented significant difference in the reduction of the percentage of witches' broom infected pods. The genotypes NO-34, NO-17 and NO-02 presented smaller percentages of diseased pods, being significantly different from the genotypes NO-24 and NO-13.
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Cancro bacteriano do tomateiro: metodologia de inoculação, reação de genótipos do hospedeiro e eficiência de químicos sobre o controle. / Bacterial canker of tomato: inoculation methodology, reaction of host genotypes and efficiency of chemicals on the control.

Adriana Zanin Kronka 08 March 2004 (has links)
O cancro bacteriano, causado por Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Cmm), é uma das doenças mais importantes da cultura do tomate (Lycopersicon esculentum Mill.), especialmente para tomateiros estaqueados. O controle está fundamentado na adoção de um conjunto de medidas preventivas, pois poucas são as informações sobre materiais resistentes à doença e não existe um produto químico que a controle eficientemente. Os objetivos desta tese foram determinar um método de inoculação adequado à seleção de genótipos de tomateiro resistentes ao cancro bacteriano; avaliar a reação de genótipos de tomateiro à inoculação com Cmm; e avaliar o efeito de acibenzolar-S-metil e outros produtos fitossanitários no controle da doença. Para o ensaio de metodologia, foram avaliados quatro métodos de inoculação (aspersão de suspensão bacteriana na face inferior das folhas; aspersão, sob pressão, de suspensão bacteriana na face inferior das folhas; corte do sistema radicular, com tesoura, seguido de imersão na suspensão bacteriana; e ferimento na haste com alfinete entomológico transpassando uma gota de suspensão de inóculo depositada na axila foliar) e três concentrações de inóculo (108 ufc/mL, 107 ufc/mL e 106 ufc/mL). Posteriormente, foi avaliado o efeito da inoculação em plantas com diferentes idades, aos 7, 14, 21 e 28 dias após a emergência. Foram utilizados os genótipos Kadá e Rotam-4 e um isolado bacteriano proveniente de Bragança Paulista, SP. A avaliação foi realizada através de uma escala descritiva, atribuindo-se notas que foram convertidas em índice de murcha bacteriana. A inoculação de Cmm, quatorze dias após a emergência das plantas, através da aspersão de suspensão bacteriana (108 ufc/mL) na face inferior das folhas, com avaliação aos 30 dias após inoculação, foi a metodologia mais apropriada para a avaliar a reação de genótipos de tomateiro. Estabelecida a metodologia, foram avaliados dez genótipos comerciais de tomateiro (Carmen, Débora max, IPA-6, Santa Clara, Alambra, Júpiter, Olimpo, Fanny, Jumbo e Densus) para identificação de materiais resistentes ao cancro bacteriano, tendo-se Kadá e Rotam-4 como controles suscetível e resistente, respectivamente. Alambra e Jumbo apresentaram comportamento semelhante a Rotam-4, sendo materiais promissores para o plantio em áreas com histórico de ocorrência da doença. Para a avaliação de controle do cancro bacteriano foram testados os seguintes produtos: acibenzolar-S-metil (ASM), ASM + mancozeb, ASM + oxicloreto de cobre, mancozeb + oxicloreto de cobre, e oxitetraciclina. Três esquemas de aplicação dos produtos foram adotados: (E1) 4 aplicações (a primeira e a segunda realizadas seis e três dias antes da inoculação; a terceira e a quarta, aos três e seis dias após a inoculação); (E2) apenas as duas aplicações préinoculação; (E3) apenas as duas aplicações pós-inoculação. Esses produtos foram incorporados a meio de cultura para avaliação in vitro de seus efeitos sobre Cmm. Independente da forma de aplicação, o ASM, isolado ou em mistura com fungicidas, proporcionou reduções significativas na severidade da doença e não inibiu o desenvolvimento da bactéria in vitro. / Bacterial canker, caused by Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Cmm), is one of the most important diseases of tomato (Lycopersicon esculentum Mill.). Its control is based on a set of preventive measures, once there is a few information about resistant materials and the chemical control is not efficient. The objectives of this thesis were to determine a suitable inoculation methodology to bacterial canker resistance studies; to evaluate the reaction of commercial tomato genotypes to the inoculation with Cmm; and to evaluate the acibenzolar-S-methyl and other phytossanitary products effects on the control of that disease. To methodology trial, four inoculation methods were evaluated, including foliar pulverization with bacterial suspension; foliar pulverization under pressure with bacterial suspension; cutting of roots with scissor, followed by their immersion in bacterial suspension; and stem wounding with a pin passing over a drop of inoculum suspension deposited on the insertion point of leaf. Besides the inoculation methods, three inoculum concentrations were investigated: 108 cfu/mL; 107 cfu/mL and 106 cfu/mL. Later, it was evaluated the effect of inoculation on plants with different ages: 7, 14, 21 and 28 days after emergency. To those trials, genotypes Kadá and Rotam-4, and a bacterial isolate from Bragança Paulista, SP, were employed. The evaluation was accomplished through a descriptive scale, being attributed notes that were turned into bacterial wilt index. Inoculation of Cmm, fourteen days after emergency of plants, through aspersion with bacterial suspension (108 cfu/mL) over the inferior face of leaves, and evaluation 30 days after inoculation, was the most appropriated methodology to evaluate resistance to bacterial canker in tomato genotypes. After the establishment of the inoculation methodology, ten commercial tomato genotypes (Carmen, Débora max, IPA-6, Santa Clara, Alambra, Jupiter, Olimpo, Fanny, Jumbo and Densus) were investigated to identify resistant materials to the bacterial canker. Kadá and Rotam-4 were employed as susceptible and resistant controls, respectively. Alambra and Jumbo had a similar behavior to Rotam-4, being the most promising materials for the planting in areas with report of occurrence of bacterial canker. To evaluate the bacterial canker control following products were tested: acibenzolar-S-methyl (ASM), ASM + mancozeb, ASM + copper oxicloride, mancozeb + copper oxicloride, and oxytetracycline. Three schemes of application of the products were adopted: (E1) 4 applications (first and second ones were accomplished six and three days before inoculation; third and fourth ones, three and six days after inoculation); (E2) two applications before inoculation only; (E3) two applications after inoculation only. The effect in vitro of these products on Cmm was also evaluated. ASM, isolated or in mixture with fungicides, provided significant reductions in the disease severity independent of the scheme of application and had no effect on bacterial development in vitro.
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Yield losses of soybean due to target spot (Corynespora cassiicola), its genetic and chemical management / Perdas de rendimento da soja causadas por mancha alvo (Corynespora cassiicola) e manejo genético e químico da doença

Juan Pablo Edwards Molina 28 March 2018 (has links)
Target spot is a foliar disease of soybean that can produce yield losses. The disease has recently become a concern due to increasing intensity of its epidemics in the main soybean growing countries (USA, Brazil and Argentina). The goals of this study were to i) estimate the target spot control efficiency and yield response of labeled fungicides for the main soybean growing region of Brazil and identify factors affecting their performance; ii) characterize the relationship between target spot severity and soybean yield using meta-analytic techniques, and to identify patterns which allow understanding the heterogeneity in the relationship; iii) to explore the variability of genetic resistance of cultivars and verify the less time-consuming methodology for doing it; iv) explore the pathogen-host interaction effects on the epidemic development; v) compare the sensitiveness of the canopy strata position injured by C. cassiicola to reduce grain yield. Fungicides containing fluxapyroxad + pyraclostrobin were the most efficient ones to control target spot, with control levels of 75% and their yield response depended on the disease pressure (DP, DPLow < 35% target spot severity at untreated checks <= DPHigh). At DPLow was unprofitable the use of fungicides and at DPHigh the latter fungicides had the best performances increasing yield relative to the untreated check in > 469 kg ha-1 (+19.1%). Potential yield of soybean in absence of target spot was estimated in 3507 kg ha-1 for 41 trials in Brazil and the percentual reduction for each target spot severity point was calculated in 0.48%, what would represent a reduction of 24% in a hypothetical target spot severity of 50% (ranging from 8% to 42%). The soybean cultivar had a significant effect to explain this wide range of responses: potential losses of 11%, 18.5% and 42% was calculated for cultivar BMX Potência RR, TMG803 and M9144RR respectively at target spot severity = 50%. We observed high variability on the genetic resistance in the tested germplasm: cultivars with very low target spot intensity (BRS360) to highly susceptible cultivars. A single-point disease severity assessment was not as reliably as an integrative three-point assessment, which had no difference with a less time-consuming two-point disease assessment. In trials where 3 C.cassicola isolates from different regions of Brazil were inoculated individually on 3 soybean cultivars contrasting in their resistance level we observed that the incubation period, disease severity, lesion density and lesion size at 14 days after inoculation, were influenced by the cultivar and not by isolate geographical origin. Using disease severity coupled with defoliation assessments throughout the reproductive growth stages, we performed correlations between grain yield and the leaf area injury at different plant positions - growth stages. The best correlation was observed with the assessments at R5.5 for injuries at middle canopy section. / A mancha alvo é uma doença foliar que pode ocasionar perdas de rendimento na cultura da soja. A doença tornou-se recentemente uma preocupação nos principais países produtores de soja (EUA, Brasil e Argentina), devido à crescente intensidade de suas epidemias. Os objetivos deste estudo foram: i) estimar a eficiência de controle da mancha alvo por fungicidas comerciais registrados no Brasil e a resposta em rendimento da soja, identificando fatores que afetam o desempenho dos fungicidas; ii) caracterizar a relação entre a severidade da mancha alvo e o rendimento da soja, utilizando técnicas meta-analíticas e identificar padrões que permitam compreender a heterogeneidade existente nessa relação; iii) explorar a variabilidade da resistência genética de cultivares de soja e verificar a metodologia mais eficiente para discriminar cultivares suscetíveis de resistentes; iv) explorar os efeitos da interação entre a origem do isolado de C. cassiicola e a cultivar de soja no desenvolvimento da epidemia; v) comparar a sensibilidade da posição do estrato do dossel afetado por C. cassiicola na redução do rendimento de grãos. Fungicidas compostos pelos ingredientes ativos fluxapyroxad + piraclostrobina foram os mais eficientes para controlar a mancha alvo, com níveis de controle de até 75%, e sua resposta ao rendimento dependeu da pressão da doença (PD, PDbaixa < 35% de severidade da mancha alvo na testemunha não tratada <= PDalta). Na PDbaixa, a aplicação de fungicidas não foi lucrativa, e em PDalta os fungicidas compostos por fluxapyroxad + piraclostrobina apresentaram os melhores desempenhos, superando o rendimento em relação à testemunha em 469 kg ha-1 (+ 19,1%). O rendimento potencial geral da soja, na ausência da mancha alvo, foi estimado em 3507 kg ha-1 para 41 ensaios distribuídos no Brasil. A redução no rendimento para cada ponto percentual de incremento na severidade da mancha alvo foi calculada em 0,48%. Com isso, níveis (hipotéticos) de severidade de mancha alvo de 50% ocasionariam uma redução de rendimento de 24% (variando entre 8% a 42%). A cultivar de soja teve um efeito significativo para explicar esta grande amplitude de respostas: reduções potenciais (com 50% de severidade) de 11%, 18,5% e 42% foram calculadas, respectivamente, para as cultivares BMX Potência RR, TMG803 e M9144RR. Foi constatada alta variabilidade na resistência genética no germoplasma testado, desde cultivares com intensidade de mancha alvo muito baixa (BRS360) até cultivares altamente suscetíveis. Avaliações da severidade da doença em uma única data não foi tão confiável quanto a avaliação integrada de duas ou três datas. Em experimentos onde 3 isolados de diferentes regiões do Brasil foram inoculados isoladamente em 3 cultivares contrastantes nos níveis de resistência, observou-se que o período de incubação, a severidade da doença, a densidade de lesões e o tamanho das lesões aos 14 dias após a inoculação foram influenciados pela cultivar. Porém, não foi observado efeito da origem geográfica do isolado de C. cassiicola nos componentes monocíclicos avaliados. A severidade da doença em diferentes posições da planta, juntamente com as avaliações de desfolha ao longo dos estádios de crescimento reprodutivo da soja, foi correlacionada ao rendimento de grãos. A melhor correlação entre o rendimento de grãos e a intensidade da doença (severidade + desfolha) foi observada nas avaliações em R5.5 na seção média do dossel.
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Reação de variedades de maracujazeiro amarelo (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg) a bacteriose causada por Xanthomonas campestris pv. passiflorae. / Reaction of varieties of yellow passion fruit (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg.) to bacterial spot caused by Xanthomonas campestris pv. passiflorae.

Jaqueline Fogaça Miranda 21 May 2004 (has links)
O presente trabalho teve por objetivo avaliar a reação de oito variedades comerciais e dois acessos selvagens de maracujá amarelo (P.edulis Sims f. flavicarpa), quanto à resistência a Xanthomonas campestris pv. passiflorae e elaborar uma escala diagramática de sintomas para auxiliar na avaliação da severidade da mancha bacteriana. A escala foi desenvolvida a partir de 100 folhas com sintomas da doença. Desta amostra foram estabelecidos cinco níveis de severidade utilizados na escala (2%, 5%; 11%, 26% e 59%). A escala foi validada por sete avaliadores, que utilizaram 48 folhas com diferentes níveis de severidade. A validação da escala mostrou que os avaliadores apresentaram alta precisão nas suas avaliações, com coeficientes de determinação (R2) variando de 0,86 a 0,95. A maioria dos avaliadores apresentou uma leve tendência em superestimar a severidade da doença. A escala mostrou-se útil ao trabalho, permitindo avaliações com alta precisão e boa acurácia. Para avaliar a reação das dez populações (oito variedades comerciais e dois acessos selvagem) de maracujá amarelo em relação a X. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a reação de oito variedades comerciais e dois acessos selvagens de maracujá amarelo (P.edulis Sims f. flavicarpa), quanto à resistência a Xanthomonas campestris pv. passiflorae e elaborar uma escala diagramática de sintomas para auxiliar na avaliação da severidade da mancha bacteriana. A escala foi desenvolvida a partir de 100 folhas com sintomas da doença. Desta amostra foram estabelecidos cinco níveis de severidade utilizados na escala (2%, 5%; 11%, 26% e 59%). A escala foi validada por sete avaliadores, que utilizaram 48 folhas com diferentes níveis de severidade. A validação da escala mostrou que os avaliadores apresentaram alta precisão nas suas avaliações, com coeficientes de determinação (R2) variando de 0,86 a 0,95. A maioria dos avaliadores apresentou uma leve tendência em superestimar a severidade da doença. A escala mostrou-se útil ao trabalho, permitindo avaliações com alta precisão e boa acurácia. Para avaliar a reação das dez populações (oito variedades comerciais e dois acessos selvagem) de maracujá amarelo em relação a X. campestris pv. passiflorae, dois experimentos foram conduzidos em casa de vegetação, o primeiro entre os meses de setembro a dezembro de 2002 e o segundo entre os meses de janeiro a março de 2003. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso, com nove tratamentos e quatro repetições em ambos os ensaios, sendo que as parcelas experimentais consistiram de 30 e 25 plantas de cada material, respectivamente, no primeiro e segundo experimentos. As avaliações de severidade da doença foram realizadas aos 7, 14 e 21 dias após inoculação, através da escala diagramática de sintomas elaborada neste trabalho. Com os dados das três avaliações, estimou-se a área abaixo da curva do progresso da doença (AACPD) para cada material estudado. Os resultados permitiram detectar diferentes níveis de resistência entre as populações avaliadas. Os materiais mais resistentes a X. campestris pv. passiflorae foram as variedades Sul Brasil e IAC- serie 270, enquanto que as variedades IAC-277, Maguary e Flora foram as mais suscetíveis. / This study aimed to evaluate the reaction of eight populations of commercial yellow passion fruit and two of wild passion fruit (P.edulis Sims f. flavicarpa) to Xanthomonas campestris pv. passiflorae and elaborate a diagrammatic scale of symptoms for the evaluation of the severity of the disease. This scale was developed based on 100 leaves with different levels of disease. Out of this sample, five levels of severity were depicted in the scale (2%, 5%, 11%, 26%, and 59%). The scale was used by seven evaluators to assess the symptoms of 48 leaves with different degrees of severity. The evaluators showed high precision judging by the high correlation coefficients (R2) which ranged from 0.86 to 0.95. Most evaluators showed a tendency to super-estimate the severity of the disease. Notwimstanding, the scale allowed precise and accurate evaluations. Two experiments were performed in the greenhouse to determine the level of resistance of ten populations (eight commercial and two wild) of yellow passion fruit to X. campestris pv passiflorae. The first trial was conducted between September and December 2002, and the second between January and March 2003. The experimental design consisted of random blocks, with nine treatments and four replicates in both experiments. The experimental plot consisted of 30 and 25 plants of each variety, respectively in the first and second trials. Disease severity was evaluated 7, 14, and 21 days after inoculation using the diagrammatic scale. With the data of the three evaluations, the area under the disease progress curve (AUDPC) for each material was estimated and used in the analysis of variance. The results detected different levels of resistance among populations. The most resistant materials were the varieties Sul Brasil and IAC- serie 270, while the varieties IAC-277, Maguary e Flora were the most susceptible.
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Transferência do gene atacina A para plantas de maracujá amarelo (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg.) por biobalística. / Attacin a gene transference to plants of yellow passion fruit (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Deg.) by biolistics.

Elizabete Keiko Takahashi 29 August 2002 (has links)
O Brasil é o principal produtor de maracujá amarelo. Entretanto, a produtividade é baixa, cerca de 1 0.000 t por hectare. A produção de frutos varia com o cultivar, condições climáticas, manejo e outros fatores, principalmente doenças causadas por bactérias e vírus. Metodologias de transformação genética são alternativas modernas para obter plantas resistentes. A proteína derivada de inseto, atacina A atua como bactericida, e tem sido utilizada para conferir resistência a espécies vegetais. Os objetivos do presente estudo foram (i) obter a regeneração de brotos in vitro, (ii) testar a eficiência de agentes seletivos durante o processo organogênico, (iii) construir o cassete contendo o gene atacína A, e (iv) determinar as condições físicas e biológicas para a transformação genética de plantas de maracujá amarelo utilizando o método de biobaiística. Em relação a estudos in vitro, três recipientes de cultura foram avaliados como também diferentes concentrações de benzylaminopurina (BA) e água de coco que foram adicionadas ao meio basal. Phytagei e agar também foram testados como agentes solidificantes. As culturas foram avaliadas quanto à resposta morfogênica dos discos foliares. O gene atacina A foi sequenciado e clonado para receber o promotor CAMV 35S com um enhancer duplicado e o terminador 35S. Este vetor foi denominado pFFatacina. O cassete de expressão foi cionado nos vetores pcambia 1300 e pcambia 2300 que contêm os genes higromicina (hpt) e canamicina (nptll), respectivamente. Discos foliares, assim como segmentos entrenodais e hipocotiledonares que induzem calos, foram usados nos experimentos de biobaiística. A expressão do gene uida foi avaliada para testar os parâmetros de bombardeamento, pressão de gás Hélio (psi) e a distância da tela de retenção até o tecido alvo (cm). A resposta organogênica dos discos foliares não diferiu quando placas de petrí, tubos ou frascos foram usados, embora os tubos (2,4 x 8,5 cm, 30 mi) mostraram uma resposta ligeiramente melhor. O meio MS (Murashige & Skoog, Physiologia Plantarum, 15, 1962) solidificado com agar (0,6%) e suplementado com 0,5 mg/L BA e 5% de água de coco (w/v) provou ser eficiente na indução de organgênese. Brotos foram obtidos após 30 dias. Segmentos entrenodais e hipocotiledonares produziram 300 estruturas semelhantes a gemas por explante. Microscopia de varredura e análises histológicas demonstraram ser estruturas foliares, as quais evoluíram em brotos após 50 dias em Y2 MS. Higromicina a 5 mg/L provou ser um agente seletivo apropdado, inibindo organogênese em 60% dos explantes. Canamicina a 50 mg/L foi também efetiva. Calos morfogênicos de até 10 dias e discos foliares de 3 dias de cultivo mostraram elevados níveis de expressão transiente sob 80016,5 ou 100019,5 (psi de gás Héliolcm de distância de võo dos microprojéteis). Foram realizados experimentos de co-transformação com pB[426 (8,7 kb) que contém o gene npdi e pFFatacina (5,25 kb), como também utilizando-se um único vetor (pcatacina 1300), Freqüência de transformação estável de 0,85% foi obtida. A integração do transgene foi confirmada por PCR para o gene atacina A. Este é o primeiro trabalho que relata a transferência de um gene de interesse para plantas de maracujá amarelo por biobalística. / Brazil is the leading producer of the yellow passion fruit. However, the productivity is fairly low, about 10,000 t per hectare. Fruit yields vary with cultivars, climatic conditions, management and other factors, namely bacterial and virus díseases. Genetic transformation methodologies are modern alternatives to obtain plant resistance. The insectderived protein, attacin A acts as bacterícide, and it has been used to confer resistance to plant species. The objectives of the present study were (i) to obtain in vitro shoot regeneration, (ii) to test the efficiency of certain selective agents during the organogenesis process, (iií) to construct the cassette containing the attacin A gene, and (iv) to determine the physical and biological conditions for genetic transformation of passion fruit plants by using the biolistic approach. Regarding the ín vítro studies, three culture recipients were evaluated as well as different concentrations of benzylaminopurine (BA) and coconut water that suppiemented the basal medium. Phytagei and agar were aiso tested as solidifying agents. Cultures were evaluated with respect to leaf dises morphogenic responses. The attacín A gene was sequenced, and cioned to receive the CAMV 35S promoter with a duplicated enhancer sequence, and the 35S terminator. This vector was denoted pFFatacina. The cassette was cioned in pcambia 1300 and pcambia 2300 vectors that contain the hygromícin (hpt) and kanamycin (nptil) genes, respectively. Leaf discs, as well as internodal segments and hypocotyl-derived sections chosen to índuce calii, were used in the biolistic experiments. The uida gene expression was evaluated for testing bombardment parameters, namely the helium pressure (psi) and the distance from the stopping screen to the target tissue (cm). The organogenic response of the leaf discs did not differ when petri dishes, tubes or culture vesseis were used although the tubes (2,4 x 8,5 cm, 30 ml capacity) showed to be slightly better. The agar (0.6%)-solidifíed MS (Murashige & Skoog, Physíología Plantarum, 15, 1962) medium suppiemented with 0.5 mg/L BA and 5% (wlv) coconut water proved to be efficient to induce organogenesis. Shoots were obtained after 30 days. Internada[ and hypocotyl-derived segments produced 300 bud-like structures per explant. Scanning microscopy and histologícal anaiyses provided evidences that they were leaf structures, which last 50 days in 1/2 MS to evolve into shoots. Hygromicin at 5 mg/L proved to be proper as selective agent, inhibiting organogenesis in 60% of the explants. Kanamycin at 50 mg/L was also effective. Morphogenic calli up to 10 days old and 3 d-leaf discs showed high levels of transient uida gene expression under 80016.5 or 1000/9.5 helium pressureldistance from the stopping screen to the target tissue. Cotransformation experiments with pBI426 (8.7 kb) that contain the nptil gene and pFFatacina (5.25 kb) were carried on as well singre vector transformation tríals (pcatacina 1300). Stable transformation frequency of 0.85% was obtained. Transgene integration was confirmei by PCR for the attacin A gene. This is the first report on agronomicaily useful-gene transfer to yeilow passion fruit plants by biolistics.
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Mapeamento de QTLs para reação à doença mancha de Phaeosphaeria em milho. / Mapping QTLs for reaction to Phaeosphaeria leaf spot disease in maize.

José Ubirajara Vieira Moreira 25 February 2005 (has links)
A mancha foliar de Phaeosphaeria em milho (Zea mays L.) tornou-se uma preocupação no Brasil, nos últimos anos, por causa de sua ampla disseminação em áreas de cultivo. Estudos de herança da reação de genótipos de milho a essa doença foliar são necessários para dar suporte aos programas de melhoramento. Assim, o objetivo desta pesquisa foi mapear QTLs para estudar a herança e para identificar alelos favoráveis de reação à mancha foliar de Phaeosphaeria em uma população de milho tropical. Linhagens endogâmicas L 14- 04B e L 08-05F, altamente susceptível e altamente resistente à mancha foliar de Phaeosphaeria, respectivamente, foram utilizadas para gerar uma população F2. Duzentas e cinqüenta seis plantas F2 foram genotipadas com 143 marcadores microssatélites, e suas progênies F2:3 foram avaliadas em látices simples, 16 x 16, delineados em três estações experimentais, no ano agrícola de 2002/2003, e em quatro estações experimentais no ano agrícola de 2003/2004. A infecção artificial não foi usada, mas parcelas com o parental susceptível L-14-04B foram alocadas no início e no final de cada repetição, a cada dezesseis progênies, e como bordadura ao redor dos experimentos, para propiciar a disseminação dos esporos de P. maydis. Foram avaliadas dez plantas por parcela, aos 30 dias após o florescimento, por escala de notas de 1 (altamente resistente) a 9 (altamente susceptível). As médias de parcelas foram utilizadas para as análises de variância, e as médias dos ambientes foram usadas para mapear QTLs. A metodologia de mapeamento por múltiplos intervalos (MIM) foi utilizada para mapear QTLs. A análise de variância conjunta mostrou alta significância para as progênies e para a interação progênies x ambientes, mas a estimativa da variância genética foi significativamente maior que a estimativa da interação genética x ambientes, e o coeficiente de herdabilidade, no sentido amplo, foi alto (91,37%). Seis QTLs foram mapeados, um para cada dos seguintes cromossomos: 1 (Ph1), 3 (Ph3), 4 (Ph4), e 6 (Ph6); e dois para o cromossomo 8 (Ph8a e Ph8b). O grau médio de dominância foi de dominância parcial, mas a ação gênica dos QTLs variou de aditiva a dominância parcial, e a epistasia do tipo dominante x dominante foi também detectada entre os QTLs mapeados do cromossomo 8. A variância fenotípica, explicada pelos QTLs ( 2 R ), variou de 2,91% (Ph8b) a 11,86% (Ph8a), e os efeitos conjuntos dos QTLs explicaram 41,62% da variância fenotípica. Todos os alelos favoráveis para a reação à mancha de Phaeosphaeria; por exemplo, alelos de resistência, estavam na linhagem parental resistente L-08-05F. A correlação entre os valores de médias fenotípicas e os valores genotípicos preditos, baseados nos efeitos de QTLs das progênies, foi 70 , 0 = r ; a seleção, baseada em ambos os critérios (médias fenotípicas e valores preditos) para a intensidade de seleção de 10% (26 progênies) mostrou concordância de somente 46,15% (12 progênies). Todavia, os alelos favoráveis dos QTLs, mapeados da linhagem parental resistente L-08-05F, poderão ser transferidos para outras linhagens em programas de melhoramento via retrocruzamentos assistidos por marcadores moleculares, os quais poderão ser úteis para o melhoramento. / Phaeosphaeria leaf spot disease in maize (Zea mays L.) has becoming a concern in Brazil in the last years because of its increase spreading in maize growing areas. Inheritance studies of the reaction of maize genotypes to this foliar disease are necessary to support plant breeding programs. Thus, the objective of this research was to map QTLs to study the inheritance and to identify favorable alleles for reaction to the Phaeosphaeria leaf spot in a tropical maize population. Inbred lines L 14-04B and L 08-05F, highly susceptible and highly resistant to Phaeosphaeria leaf spot, respectively, were used to develop an F2 reference population. Two-hundred and fifty-six F2 plants were genotyped with 143 microsatellites markers, and their F2:3 progenies were evaluated in 16 x 16 simple lattice designs at three locations in the 2002/2003 growing season, and at four locations in the 2003/2004 growing season. Artificial infection was not used, but plots of the highly susceptible parental inbred L 14-04B were allocated at the beginning and at the end of each replication, at each set of sixteen progenies, and as a border all around the experiments, to provide the spread of P. maydis spores. Ten plants were evaluated per plot, 30 days after silk emergence, following a note scale; i.e., from 1 (highly resistant) to 9 (highly susceptible). The plot means were used for the analyses of variance, and the least squares means across environments were used to map QTLs. The multiple intervals mapping (MIM) was used for QTL mapping. The joint analysis of variance showed highly significance for progenies and for progenies by environment interaction, but the estimate of genetic variance was significantly greater than the estimate of the genetic by environment interaction, and the broad sense coefficient of heritability was high (91.37%). Six QTLs were mapped, one at each of the following chromosomes: 1 (Ph1), 3 (Ph3), 4 (Ph4), and 6 (Ph6); and two at chromosome 8 (Ph8a and Ph8b). The average level of dominance was partial dominance, but the gene action of the QTLs ranged from additive to partial dominance, and dominance x dominance epistasis was also detected between the QTLs mapped at chromosome 8. The phenotypic variance explained by the QTLs ( 2 R ) ranged from 2.91% (Ph8b) to 11.86% (Ph8a), and the joint QTLs effects explained 41.62% of the phenotypic variance. All the favorable alleles to reaction to Phaeosphaeria leaf spot; i.e., resistance alleles, were in the resistant parental line L- 08-05F. The correlation between mean phenotypic values and the predicted genotypic values based on QTLs effects of the progenies was 70 , 0 = r ; and the selection based under both criteria (phenotypic means and predicted values) at 10% selection intensity (26 progenies) showed an agreement of only 46.15% (12 progenies). Nonetheless, the favorable alleles of the QTLs mapped in the parental line L 08-05F could be transferred to other inbred lines by marker-assisted backcross breeding programs, which could make them useful for breeding purposes.

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