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Análise da expressão e localização subcelular das proteínas urease e allantoicase em Colletotrichum graminicola utilizando mutantes URE1:EGFP e ALA1:EGFP

Perino, Elvio Henrique Benatto January 2017 (has links)
Orientadora : Profª. Drª. Chirlei Glienke / Coorientadora : Prof. Dr. Holger Bruno Deising / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa: Curitiba, 30/05/2017 / Inclui referências e anexos / Bibliografia: f. 91-100 / Resumo: O Brasil destaca-se por ser o terceiro maior produtor mundial de milho, entretanto, apesar desta alta produtividade, esta cultura é afetada por um grande número de doenças. Estas doenças acarretam em perdas na produção, sendo a antracnose uma das doenças fúngicas com maior relevância, de distribuição mundial. O fungo responsável pela antracnose é o Colletotrichum graminicola. Em estudos funcionais de genes associados a virulência e patogenicidade nesta espécie, foi demonstrado que o processo de penetração na planta é atenuado em transformantes com mutação ou deleção dos genes allantoicase e/ou urease (MÜNCH et al, 2011, GLIENKE et al, 2015). Com base nesses trabalhos sugere-se que as enzimas allantoicase e urease são importantes para os estágios iniciais do processo de infecção no hospedeiro por C. graminicola. A fim de determinar em que estágio do desenvolvimento do fungo e onde essas enzimas celulares atuam neste fitopatógeno, foram obtidos e analisados mutantes de C. graminicola para os genes urease e allantoicase (ALA1:eGFP e URE1:eGFP), os quais apresentam fusão dos genes alvo com o gene repórter eGFP. Os mutantes foram caracterizados, sendo selecionados somente aqueles que apresentavam cópia única do cassete inserido no local correto e fluorescência em microscopia. Todos os mutantes apresentando essas características, assim como três ectópicos referentes a cada transformação foram avaliados quanto aos sintomas produzidos em folhas de milho destacadas, localização subcelular através do gene repórter, quanto ao crescimento em meio de cultura com restrição de nitrogênio, bem como a atividade das enzimas urease e allantoicase. Com base nos resultados de microscopia de fluorescência, sugere-se que as enzimas urease e allantoicase estão presentes principalmente no citoplasma de esporos de C. graminicola antes da germinação e formação de apressório, sendo que a fluorescência é fortemente reduzida nos estágios iniciais do processo de infecção, ou seja, em tubos germinativos, em hifas de penetração e biotróficas. Nenhuma fluorescência foi observada em hifas necrotróficas do fungo. Palavras-chave: Zea mays, Colletotrichum graminicola, eGFP, urease, allantoicase. / Abstract: Brazil is the third largest producer of maize in the world, however despite this productivity, the culture is affected by a large number of diseases, which lead to losses in production. Anthracnose is one of the main fungal diseases and has a worldwide distribution. The fungus responsible for the anthracnose disease is Colletotrichum graminicola. In functional studies of genes associated with virulence and pathogenicity processes in this specie, it has been shown that the plant penetration process is attenuated in transformants with mutation or deletion of allantoicase and/or urease genes (GLIENKE et al, 2015; MÜNCH et al, 2011). Based on these studies, it is suggested that the enzymes allantoicase and urease are important to the initial penetration stages for C. graminicola. To determine the development stage and the cellular location these enzymes act in this pathogen, the objective was to obtain and analyze C. graminicola mutants (ALA1:eGFP and URE1:eGFP) with fusion of the target genes, allantoicase and urease, with the reporter gene eGFP. The mutants were characterized and only those which presented a single copy of the construct in the right position and fluorescence in microscopy were selected. All the selected mutants and three ectopics for each gene were evaluated by produced symptoms in detached maize leaves, cellular localization through the reporter gene, ability to grow in nitrogen limitation medium, as well as the enzymes activity for urease and allantoicase gene. Based on the results, we conclude that the enzymes urease and allantoicase are present mainly in the cytoplasm of the C. graminicola conidia before germination and appressoria formation, the fluorescence is severely reduced in the initial stage of infection, i.e. in germ tube and biotrophic and penetration hyphae. No fluorescence was observed in necrotrophic hyphae of C. graminicola. Keywordse: Zea mays, Colletotrichum graminicola, eGFP, urease, allantoicase.
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Contribuição das proteínas tirosina cinases e cálcio-calmodulina cinase tipo II em modelos animais de epilepsia / Involvement of protein tyrosine kinases and calcium/calmodulin kinase type II in animal model of epilepsy

Queiroz, Claudio Marcos Teixeira de [UNIFESP] January 2005 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:05:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Programa de Apoio a Núcleos de Excelência (PRONEX) / As epilepsias do lobo temporal são as que apresentam maior refratariedade ao tratamento farmacológico e perfazem 2/3 das intervenções cirúrgicas de epilepsia, sendo portanto de grande custo social, econômico e psicológico. Assim, modelos animais de epilepsia do lobo temporal são de grande relevância não só para o entendimento das bases neurais dessa patologia, mas também para o desenvolvimento de abordagens terapêuticas capazes de evitar a instalação da doença. Esses são os objetivos da presente dissertação de doutorado. Após um evento traumático (no caso deste trabalho, um estado de mal epiléptico), diversas alterações morfológicas e fisiológicas acontecem, caracterizando a gênese da síndrome epiléptico (epileptogênese). Dentre as alterações podemos destacar a intensa fosforilação de proteínas em resíduos de tirosina e a ativação de diferentes segundos mensageiros. Os dois primeiros capítulos desta tese descrevem a tentativa de bloquear os processos de epileptogênese por meio da inibição da fosforilação de resíduos de tirosma através do tratamento farmacológico com inibidores das tirosina cinases, a herbimicina A e o K-252a. O terceiro capítulo analisa eletrofisiologicamente o circuito neural do giro denteado em animais que apresentavam uma mutação em um sítio inibitório da proteína cálcio/calmodulina cinase do tipo II (CaMK1I). No primeiro capítulo, mostramos que o tratamento agudo com herbimicina A (348M, 5L, icv), é capaz de bloquear a potenciação duradoura (LTP) induzida por um estímulo tetânico bem como de atenuar (~40 por cento) a ativação neuronal (expressão de c-Fos) decorrente de um estado de mal epiléptico induzido pela administração sistêmica de pilocarpina (SE). Apesar dos significativos efeitos agudos, este tratamento mostrou-se incapaz de atenuar a freqüência de crises espontâneas, bem como o padrão de morte neuronal observado após o estado de mal epiléptico induzido pela pilocarpina. Entretanto, o tratamento com herbimicina A alterou o padrão de marcação de metais pesados (Zn+2) no hilo do giro denteado e na região de CA, do hipocampo, porém não apresentou efeito sobre o padrão de brotamento das fibras musgosas observado na camada molecular do giro denteado. No segundo capítulo, mostramos que a herbimicina e o K252a modificam a atividade epileptiforme induzida pela administração intra-hipocampal de ácido caínico, sem alterar o padrão de morte neuronal. Esses resultados sugerem que o tratamento com inibidores de proteínas tirosina cinases é capaz de modificar o padrão de ativação agudo do hipocampo após um estímulo (ie., o estado de mal epiléptico ou a LTP), porém sem qualquer efeito sobre o processo de epileptogênese. No terceiro capítulo, estudamos a excitabilidade e a plasticidade do giro denteado à estimulação da via perfurante (principal aferência da formação hipocampal) em animais que apresentam uma CaMKII geneticamente modificada. Essa proteína uma vez ativada não pode ser inibida. A caracterização eletrofisiológica demonstrou que esses animais apresentam potenciais de campo evocados no giro denteado aparentemente semelhante aos animais controle (wild-type), porém sua responsividade a padrões de estimulação em salvas e sua plasticidade apresentaram clara alteração. Essa modificação foi caracterizada por uma maior variabilidade nas respostas à trens de estimulação (freqüências de 1 e 2 Hz) e maior inibição do pulso pareado em trens de estimulação (para pulsos pareados aplicados a freqüência de 5 Hz). Além disso, conforme já descrito na literatura, mostramos que a susceptibilidade a atividade epileptiforme depende do padrão de estimulação utilizado para os diferentes animais (mutantes vs. wild-type). Assim, utilizando o modelo clássico do abrasamento demonstramos que a mutação não altera a evolução da epileptogênese. Entretanto, ao utilizarmos duas variantes de um padrão de estimulação similar à freqüência teta (5Hz, Intermittent vs. Continuous theta-burst stimulations), demonstramos a importância da mutação na manutenção da excitabilidade do giro denteado. Esses resultados destacam a importância da CaMKII na atividade epileptiforme além de sugerir novas abordagens experimentais (ie., sensibilidade à padrões de estimulação eletrofisiológica) no estudo da epiloptogênese. Em resumo, os resultados apresentados nessa tese contribuem para um melhor entendimento dos fenômenos subjacentes aos processos de plasticidade neuronal e da contribuição destes para o fenômeno de epiloptogênese, além de sugerir abordagens promissoras de intervenção e estratégias farmacológicas de relevância clínica. / Temporal lobe epilepsies are highly refractory to pharmacological treatment. Up to 70% of these patients undergo chirurgical resection of temporal region, procedure with important consequences for the social, economic and psychological spheres. Experimental animal models that mimic temporal lobe epilepsy provide an insightful approach to study the neural basis of epilepsy as well as create opportunities to test promising therapeutic drugs. The present thesis tests the antiepileptogenic activity of two protein tyrosine kinase inhibitors and the relevance of Ca+2/calmodulin kinase type II (CaMKII) mutants. Multiples morphological and physiological alterations take place after a traumatic brain injury (in this thesis, the status epilepticus) leading the animal to an epileptic conditions. During this period, the epileptogenesis process, there is strong tyrsine phosphorylation with the activation of many second messengers. The first two chapters of the thesis describe experiments in which herbimycin A and K-252a, two protein tyrosine kinase inhibitors, were used to attenuate synaptic plasticity and epileptogenesis. The third chapter, the dentate gyrus network was studied after angular bundle stimulation in animals presenting one punctual mutation at the autoinhibitory phosphorylation site of the CaMKII. In the first chapter, we showed that one single herbimycin A injection (348μM, 5μL, icv) was able to attenuate long-term potentiation (LTP) in the commissural CA3 neurons and also, to decrease status epilepticus- (SE-) induced neuronal activation (c-Fos expression) in almost 40%.Although markedly acute effects, the present herbimycin A treatment was not able to diminish spontaneous seizure frequency, cell death or aberrant mossy fiber sprouting observed after the pilocarpine-induced SE. Curiously, herbimycin-treated animals presented decreased neo-Timm staining in the hilus and CA3 region despite the epileptic condition. In the second chapter, we confirmed the ability of protein tyrosine kinase inhibitors to decrease SE-induced neuronal activation. Herbimycin A icv treatment altered the kainic acid-induced epileptiform profile in EEG recordings. Cell death pattern was not altered by any pharmacological treatment. These results suggest that protein tyrosine kinase inhibitiors are able to modify the acute neuronal activation and plasticity (ictogenesis or LTP) but is ineffective in attenuating the epileptogenesis process.In the third chapter, we studied the dentate gyrus excitability and plasticity after angular bundle stimulation in CaMKII mutant animals. Once in its self-sustained mode, this mutation does not allow the reduction of the catalytic activity of the kinase. These animals present normal electrophysiological profiles (similar to wild-type animals) but with reduced amplitude. Shortterm plasticity was clearly altered. Mutant animals presented increased variability in the responses to trains of stimulation at 1 and 2 Hz, and at at 5Hz stronger paired-pulse inhibition. Accordingly to the literature, we also showed that the epileptiform susceptibility depends on the stimulation pattern used in both animals (mutants vs. wild-type). Thus, although the mutation did not altered the behavior and the electrographic kindling evolution, we showed that mutant animals were prone to afterdischarges when stimulate by an intermittent theta-burst stimulation. On the other hand, the same animals needed more bursts to induce afterdischarges when the stimulation was set in the continuos mode.Taken together, the present results contribute to a better understanding of the protein tyrosine kinase and CaMKII function in neuronal plasticity underlying the epileptogenesis process and sum efforts in searching for a clinic antiepileptogenic drug. / FAPESP: 00/10826-3 / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Organismos geneticamente modificados e alimentos transgênicos

Caus, Cesar Antônio January 2002 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Filosofia e Ciências Humanas. Programa de Pós-Graduação em Antropologia social / Made available in DSpace on 2012-10-20T07:53:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-26T01:49:41Z : No. of bitstreams: 1 182248.pdf: 6317648 bytes, checksum: 7d56f9e9bbf8088d4d9958e428275e26 (MD5) / No Brasil, o debate sobre organismos geneticamente modificados (OGMs) e alimentos transgênicos, que têm sido objeto de discussão sobretudo no espaço acadêmico universitário e na retórica argumentativa de ativistas de Organizações Não-Governamentais (ONGs) e profissionais autônomos, traz a público posições divergentes a respeito da relação custo/beneficio do uso da transgenia na área agrícola. O presente trata estudo das representações sociais do risco associados aos OGMs e aos alimentos transgênicos, com o propósito de levantar e examinar, entre diferentes pontos de vista, os mais significativos para considerar o risco e os alimentos dentro do escopo da "abordagem cultural do risco" (de Mary Douglas & Aaron Wildavsky, 1982) e da "teoria da alimentação" (de Claude Fischler, 1992). Discorre-se sobre os principais argumentos proferidos no Seminário Transgênicos: contextualizando o debate: prós e contras e para além dos prós e contras, realizado no auditório do Centro de Filosofia e Ciências Humanas, da Universidade Federal de Santa Catarina (CFH/UFSC). A pesquisa apóia-se em dados qualitativos para a análise a partir de um corpus tomado através de entrevistas individualizadas junto a agrônomos e representantes de ONG's. Conclui-se que as conseqüências associadas à transgenia de plantas estão centralizadas no deslocamento da noção de propriedade para novos domínios transformando a descoberta científica na invenção comercial e, nesse movimento, transpondo as noções das propriedades da natureza e da cultura dos alimentos.
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Organismos geneticamente modificados (OGMs) : obstáculos à obtenção e uso no Brasil / Genetically modified organism (GMO) : research and use obstacles in Brazil

Cunha, Elza Angela Battaggia Brito da 12 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-graduação em Agronegócios, 2007. / Submitted by wesley oliveira leite (leite.wesley@yahoo.com.br) on 2009-10-02T19:10:40Z No. of bitstreams: 1 2007_ElzaAngelaBBritoDaCunha.pdf: 1164862 bytes, checksum: f9a2c6f920a5e1e9c878c468a002ec74 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2009-10-16T15:27:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_ElzaAngelaBBritoDaCunha.pdf: 1164862 bytes, checksum: f9a2c6f920a5e1e9c878c468a002ec74 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-10-16T15:27:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_ElzaAngelaBBritoDaCunha.pdf: 1164862 bytes, checksum: f9a2c6f920a5e1e9c878c468a002ec74 (MD5) Previous issue date: 2007-12 / O presente trabalho trata das dificuldades enfrentadas no Brasil por universidades, institutos de pesquisa, cooperativas rurais e empresas para obterem licença autorizando-os a efetuarem pesquisa com organismos geneticamente modificados (OGMs) voltados ao complexo agro-industrial e, posteriormente, autorização para a sua liberação comercial. O trabalho tem por objetivo geral determinar quais são os obstáculos que se interpõem no país à pesquisa e liberação comercial de OGMs destinados ao complexo agro-industrial e para tanto sustentou-se que os principais entraves sejam os seguintes: as exigências da legislação nacional de biossegurança de OGMs; as dificuldades das entidades públicas de pesquisa para negociarem os direitos de propriedade intelectual; e a existência incipiente de cooperação técnica e financeira entre as entidades de pesquisa pública e as empresas privadas. A pesquisa abrangeu os fatos ocorridos no Brasil relacionados à biotecnologia no período de doze anos a contar de 1995. Esse marco foi adotado considerando-se os efeitos jurídicos da primeira lei de biossegurança de OGMs vigente no país. O trabalho envolveu dois métodos de pesquisa: a exploratória e a descritiva. Na fase conceitual valeu-se da pesquisa exploratória por meio do levantamento bibliográfico, além do levantamento da legislação internacional e nacional sobre propriedade intelectual, legislação de biossegurança vigente e de sua análise comparada com a legislação original que regulava no país a biossegurança de (OGMs) a partir de 1995, e demais dados secundários junto ao Ministério da Agricultura, Pecuária e do Abastecimento - MAPA e junto à Embrapa. Essa fase teve como principal escopo aumentar a compreensão acerca do tema e propiciar subsídios para a formulação do problema e das hipóteses. Na segunda etapa foi utilizada a pesquisa descritiva quantitativa também denominada levantamento de campo com o objetivo de testar as hipóteses para a amostra escolhida. Ao final se conseguiu: identificar os principais entraves da legislação nacional de biossegurança e suas conseqüências; demonstrar a lógica da propriedade intelectual (PI) e as oportunidades que podem advir dessa legislação para o desenvolvimento da biotecnologia no país; e ilustrar a importância da cooperação entre a pesquisa pública e empresas privadas por meio do estudo de caso relacionado à Política de Gestão da Propriedade Intelectual da Embrapa. _____________________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This work is about the difficulties that the Brazilian universities, research institutes, rural cooperatives and enterprises have to face in order to obtain the government licenses to make researches and the commercial use of agribusiness genetically modified organism (GMO). The main objective of this work is to determine the obstacles in Brazil concerning the research and the commercial use of the agribusiness GMO, for that we state that the main obstacles are: the national biotechnology legislation; the difficulties of the public research institutes to negotiate the intellectual property rights; and the low technical and financial cooperation between research public entities and private companies. The research made the facts that occurred in the country twelve years after 1995 covert. This act was adopted considering the juridical effects of the first national biotechnology legislation. In this work we adopted two methods of research: the exploratory research, and the description research. In the first one we took the principal concepts using the bibliographic survey, as well as the national and international intellectual property legislation survey and the national biotechnology legislation and its comparing analysis with the original legislation in the country after 1995, and data base from the Brazilian Agricultural Ministry and Embrapa. This step had the principal objective to enlarge the comprehension on the matter which is essential to the problem’s and the hypothesis’s formulations. In the second step we used a quantity descriptive research, with the objective to test the hypothesis for the chosen sample. In the end we came to the results: the identification of the main problems about the national biotechnology legislation and its consequences; we demonstrated the logic of the intellectual property rights and the opportunities that this legislation could do to the development of biotechnology in the country; and we illustrated the importance of the strategic use of the collaboration between public research and private companies using a case study related to Embrapa’s Intellectual Property Rights Policy .
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Avaliação da segurança alimentar das toxinas Cry1Ia12 e Cry8Ha1 em mamíferos

Guimarães, Luciane Mourão 04 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2008. / Submitted by Rosane Cossich Furtado (rosanecossich@gmail.com) on 2010-03-08T16:01:49Z No. of bitstreams: 1 2008_LucianeMouraoGuimaraes.pdf: 971641 bytes, checksum: 404c464660eb900740c9c1e7db22f86d (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-05-06T18:47:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_LucianeMouraoGuimaraes.pdf: 971641 bytes, checksum: 404c464660eb900740c9c1e7db22f86d (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-06T18:47:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_LucianeMouraoGuimaraes.pdf: 971641 bytes, checksum: 404c464660eb900740c9c1e7db22f86d (MD5) Previous issue date: 2008-04 / Com a aprovação do plantio de Organismos Geneticamente Modificados (OGM) no Brasil, e com a Lei de Biossegurança/2005, é importante que sejam ampliados e efetivados os estudos toxicológicos de proteínas que são expressas em cultivares transgênicas de interesse econômico, a fim de garantir a sua segurança alimentar para o consumo humano e animal. Os genes cry, denominados cry1Ia12 e cry8Ha1, isolados pelo nosso grupo de pesquisa, a partir de uma estirpe de Bacillus thuringiensis, estão sendo introduzidos em cultivares de algodão, com o intuito de gerar resistência ao ataque de insetos-praga, reduzindo dessa forma o uso indiscriminado de pesticidas, aumentando a qualidade dos produtos finais. No presente trabalho, as atividades desenvolvidas tiveram como foco a avaliação dos efeitos antinutricionais e/ou tóxicos, em mamíferos (ratos), das toxinas entomotóxica Cry1Ia12 e Cry8Ha1 em ensaios sub- crônico e agudo. Para isso, foi estabelecido e otimizado um sistema de expressão heteróloga e de purificação dessas entomotoxinas em larga escala. No ensaio sub- crônico, as toxinas Cry1Ia12 e Cry8Ha1 foram incluídas na dieta dos animais, na proporção de 100 mg/Kg de dieta, representando 0,1% da proteína total, e ofertadas durante 10 dias. Como proteína de referência ou padrão foi utilizada albumina da clara do ovo, por ser de alto valor biológico. Nenhum efeito adverso oriundo do consumo das proteínas teste foi observado nos animais, quando comparados àqueles que receberam a proteína padrão. Os diferentes parâmetros analisados compreenderam taxa de crescimento, ganho de peso, consumo de dieta, eficiência alimentar, balanço nitrogenado, utilização líquida de proteína (NPU), digestibilidade in vivo, valor biológico, peso seco relativo de órgãos internos e glândulas anexas, histologia do duodeno e bioquímica sanguínea. No ensaio agudo, as toxinas Cry1Ia12 e Cry8Ha1 foram administradas aos animais em jejum de 12 horas, com auxílio de uma sonda orogástrica, em dose única, encerrando 12 mg de proteína dissolvida em NaCl 0,15 M, calculada com base na quantidade total de proteína ingerida no experimento sub- crônico. Como controle foi utilizado apenas NaCl 0,15 M. A taxa de mortalidade dos ratos foi zero, não tendo sido detectada qualquer alteração de comportamento. Os resultados obtidos demonstraram a inexistência de efeitos antinutricionais e tóxicos em ratos após a administração das toxinas Cry1Ia12 e Cry8Ha1, evidenciando a segurança alimentar dessas proteínas e reforçando o seu potencial de utilização no desenvolvimento do algodão GM com resistência a insetos-praga. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The approval of Genetically Modified Organisms (OGM) in Brazil as well as the Biosafety Law/2005 demand the enlargement and effectiveness of toxicological analyses of proteins expressed is transgenic cultivars of economical interest. These analyses can guarantee its food security for the human and animal consumption. The cry genes, called cry1Ia12 and cry8Ha1 isolated by our research group, from a Bacillus thuringiensis ancestry, are currently being introduced in cotton cultivars, aiming the generating of the resistance against insect-pests attack. This strategy will decrease the indiscriminate use of pesticides improving the products quality. The research activities developed in the present work, focused the evaluation of antinutritional and/or toxic effects, of Cry1Ia12 e Cry8Ha1 entomotoxic in mammals (mice) using sub-chronic and acute bioassays. To accomplish that, an optimized heterologous expression system followed by a large scale step purification was carried out. For the sub-chronic bioassays, a proportion of 100 mg / Kg of the toxins Cry1Ia12 and Cry8Ha1 were included in the animals’ diet representing 0,1% of the total protein. This diet was offered to the mice during 10 days, and egg albumin was used as a protein standard due to its high biological value. No adverse effect was observed in the animals which consumed the test proteins when compared to those that received the control protein. The different analyzed parameters corresponding to growth tax, weight gaining, diet consumption, alimentary efficiency, nitrogen balance, liquid use of protein (NPU), digestion in vivo, biological value, relative dry weight of internal organs and enclosed glands, duodenum histology and sanguine biochemistry. In the acute bioassays, the toxins Cry1Ia12 and Cry8Ha1 were administered in a unique dose, using an orogastric probe to animals in 12 hours fast. These doses contained 12 mg of protein dissolved in NaCl 0,15 M and its calculations were based on the total amount of protein ingested in the sub-chronic experiments. A solution of NaCl 0,15 M was used as a control. The mice mortality rate was zero, and no behavior alteration was detected. According to the results, the toxins Cry1Ia12 and Cry8Ha1 did not show antinutritional and toxic effects for the mice. Thus, the alimentary biosafety of those proteins reinforce their potential use in the development of cotton GM with resistance against insect-pests.
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Análise da coexistência da soja transgênica e convencional no Mato Grosso : rumo a novas formas de governança

Leitão, Fabricio Oliveira January 2009 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-graduação em Agronegócios, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-03-22T20:26:44Z No. of bitstreams: 1 2009_FabricioOliveiraLeitao.pdf: 564703 bytes, checksum: 52b8162f0ca5ceef4eb5ef4957b23419 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-05-07T21:24:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_FabricioOliveiraLeitao.pdf: 564703 bytes, checksum: 52b8162f0ca5ceef4eb5ef4957b23419 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-07T21:24:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_FabricioOliveiraLeitao.pdf: 564703 bytes, checksum: 52b8162f0ca5ceef4eb5ef4957b23419 (MD5) Previous issue date: 2009 / Este trabalho buscou entender como vem se dando a coexistência da soja no Brasil após o advento da soja transgênica e entender as perspectivas sobre esse assunto já que essa nova tecnologia trouxe impactos na governança da cadeia como um todo. Foi intuito desse estudo saber se a soja transgênica se tornará uma base técnica única e irreversível em nosso país. Como objetivo geral do trabalho buscou-se descobrir junto aos principais agentes dessa cadeia (multiplicadores de sementes, armazenadores/processadores, produtores rurais e revendedores de insumos) a evolução da coexistência da soja no Estado de Mato Grosso e quais motivos levam esses agentes a irem em direção a uma ou outra opção de cultivo para revelar se realmente há possibilidade da soja transgênica dominar esse sistema de produção. Como objetivos específicos buscaram-se verificar a proporção da área plantada de soja transgênica e convencional desde a introdução da soja transgênica, e a expectativa da área destinada para a safra 2008/9; descobrir se há práticas de segregação utilizadas pelos agentes dessa cadeia e saber sua percepção sobre uma possível implementação da rastreabilidade e preservação de identidade para a soja convencional; inferir sobre os custos de produção da soja convencional e transgênica e o valor de um possível prêmio pago para os produtores que produzem soja convencional; identificar quais motivos levam os produtores a optar pelo cultivo de soja transgênica e convencional; saber, dos agentes envolvidos, sua percepção sobre a nova tecnologia e a continuidade do cultivo da soja convencional no Mato Grosso; inferir sobre a percepção dos atores em relação a um marco jurídico mais adequado, principalmente no que diz respeito ao pagamento dos royalties e sobre a contaminação da soja nas diversas etapas da produção; e entender como estão sendo realizados os contratos entre os agentes após o advento da soja transgênica. O presente trabalho apoiou-se nas contribuições teóricas trazidas pela Nova Economia Institucional e Economia dos Custos de Transação, Organização xii Industrial, Economia da Qualidade, e Enfoque Sistêmico do Agribusiness. Como metodologia utilizou-se de uma Survey junto aos produtores rurais e a técnica de Análise Rápida (Rapid Rural Appraisal – RRA) com os armazenadores/processadores, multiplicadores de sementes e revendedores de insumos. A pesquisa foi caracterizada também como aplicada, de campo, exploratória, bibliográfica e descritiva com uma abordagem qualitativa e quantitativa. Como principais resultados, foi constatado que, em geral, os agentes dessa cadeia acreditam na evolução da área plantada com soja transgênica no Brasil, (mesmo que alguns não acreditem que essa irá dominar totalmente o mercado da soja). Foram percebidas também mudanças consideráveis na governança dessa cadeia, destacando que a decisão em plantar soja transgênica ou convencional está se deslocando cada vez mais das mãos dos produtores para outros agentes dessa cadeia. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / This work searched to understand better as it comes if giving to the coexistence of the soybean in Brazil after the advent of the transgenic soybean and to understand the perspectives on this subject since this new technology brought impacts in the governance of the chain as a whole. It was intention of this study to know if the transgenic soybean will become a base irreversible technique in our country. As objective generality of the work searched to discover next to the main agents of this chain (multiplying of processing, producing seeds, storing/agricultural and peddling of inputs) the evolution of coexistence of the soybean in the State of Mato Grosso is evolving and which reasons take these agents to go in direction to one or another option of culture to disclose if really has possibility of the transgenic soybean to dominate this production system. As objective specific they had searched to verify the ratio of the planted area of transgenic and conventional soybean since the introduction of the transgenic soybean, and the expectation of the area destined for harvest 2008/9; to discover if has practical of segregation used by the agents of this chain and to know its perception on a possible implementation of the rastreability and identity preservation for the conventional soybean; to infer on the costs of production of the conventional and transgenic soybean and the value of a possible paid prize for the producers that deliver conventional soy; to identify which reasons they take the producers to opt to the culture of transgenic and conventional soybean; to know, of the involved agents, its perception on the new technology and the continuity of the culture of the conventional soybean in the Mato Grosso; to more infer the perception of the actors on an adjusted legal landmark, mainly in what it says respect to the payment of royalties and on the contamination of the soy in the diverse stages of the production; e to understand as they are being carried through contracts between the agents after the advent of the transgenic soybean. The present work was supported in the theoretical contributions brought by the New Institucional Economy and Economy of the Costs of Transaction, Industrial Organization, Economy of the Quality, and Systemic Approach in Agribusiness. As methodology one used of a Survey next to the agricultural producers and the technique of Fast Analysis (Agricultural Rapid Appraisal - RRA) with storing/processing, multiplying of seeds and the peddlers of inputs. The research was also characterized as applied, of field, exploratory, bibliographical and descriptive with a qualitative and quantitative boarding. As main results, he was evidenced that, in general, the agents of this chain believe the evolution of the area planted with transgenic soybean in Brazil, (exactly that some do not believe that this will go to total dominate the market of the soy). Considerable changes in the governance of this chain had also been perceived, detaching that the decision in planting transgenic or conventional soybean is if dislocating each time more than the hands of the producers for other agents of this chain.
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O risco nas fronteiras entre política, economia e ciência : a controvérsia acerca da política sanitária para alimentos geneticamente modificados

Motta, Renata Campos 12 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Sociais, Centro de Pesquisa e Pós-Graduação sobre as Américas, 2008. / Submitted by Diogo Trindade Fóis (diogo_fois@hotmail.com) on 2009-09-25T14:55:00Z No. of bitstreams: 1 2008_RenataCamposMotta.pdf: 310951 bytes, checksum: f21d65aae4360d3fd1520b3075f31bfa (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-08-04T18:53:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_RenataCamposMotta.pdf: 310951 bytes, checksum: f21d65aae4360d3fd1520b3075f31bfa (MD5) / Made available in DSpace on 2010-08-04T18:53:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_RenataCamposMotta.pdf: 310951 bytes, checksum: f21d65aae4360d3fd1520b3075f31bfa (MD5) Previous issue date: 2008-12 / O tema desta pesquisa são as relações de luta entre política, economia e ciência para a definição da política sanitária referente aos riscos dos alimentos geneticamente modificados. Parte-se da discussão teórica encontrada na sociologia do risco e na sociologia da ciência, para definir o risco como problema de fronteiras entre os campos político, científico e econômico, bem como fonte de disputas entre países. Esta problemática é ilustrada no caso dos alimentos geneticamente modificados. Como existem diferentes políticas para estes produtos e eles são comercializados internacionalmente, a decisão em um país afeta o outro, configurando-se relações globais de definição do risco. No que tange à pesquisa empírica, analisou-se a controvérsia comercial da Organização Mundial do Comércio (OMC) na qual Estados Unidos da América, Canadá e Argentina contestam a política européia para produtos transgênicos. Este caso indicou que a progressiva diferenciação e complexidade dos campos aumenta a produção de riscos nas relações entre os campos político, econômico e científico, inclusive o risco de interferência em suas respectivas autonomias. As regras da OMC estabelecem um modelo de relações de divisão de trabalho entre os campos no intuito de minimizar este problema, partindo da aposta na capacidade dos Estados de conhecer, controlar e legitimar, via a ciência, os riscos à saúde. Entretanto, a definição de como uma sociedade pretende lidar com o risco à saúde desafia esta divisão de trabalho. O argumento desenvolvido nessa pesquisa é que a definição da política de proteção contra os riscos à saúde é objeto constante de disputas, resolvidas caso a caso, conforme se enfatizam as oportunidades lucrativas abertas pelo desenvolvimento de produtos e as vantagens percebidas de seu consumo, a sensibilidade para os danos possíveis, o conhecimento disponível sobre os riscos, a possibilidade de controle e a forma de distribuição desses riscos. Segue-se que tentativas de fixar um critério de legitimidade falham. Assim, embora a OMC tente "enquadrar" a política sanitária européia para os alimentos geneticamente modificados, não há indicações de que a União Européia implementará as recomendações daquele órgão. __________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This master thesis investigates the conflicting relations among politics, economy and science over the definition of a health policy on the risks of genetically modified food. The theoretical debate departs from the risk sociology and the sociology of science in order to define risk as a problem of boundaries between the political, scientific and economic fields, as well as a source of struggles between countries. This issue is illustrated in the study case of genetically modified food. As there are different national policies on these products and they are traded internationally, a decision taken in a country affects another one, leading to global relationships of risk definition. The empirical investigation dealt with the analysis of a commercial controversy in the World Trade Organization (WTO), in which the United States of America, Canada and Argentina have contested the European policy for transgenic products. This study revealed that the progressive differentiation and complexity of the fields increase the production of risks in the interactions between the political, economic and scientific fields, including the risk of interferring in their respective autonomies. The WTO rules establish a model of relationships anchored on a division of labor between the fields, in order to minimize this problem, based on the confidence in the State’s capacity of knowing, controlling and legitimizing, through science, the health risks to their populations. However, the definition of how a society decides to deal with health risks challenges this division of labour. The argument developed in this research is that setting a policy to protect people against health risks is object of permanent disputes, resolved on a case-by-case basis, depending on the emphasis placed on profit opportunities opened by new products development and the perceived advantages from their consumption, the sensitivities to possible damages, available knowledge about risks, the possibilities of controlling them and the pattern of risk distribution. It follows that attempts to determine a criterion of legitimacy fail. Therefore, notwithstanding the effort made by the WTO to “tailor” the European health policy for genetically modified food, there is no indication that the European Union will implement the recommendations from that body.
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Deveres de proteção e o direito fundamental a ser protegido em face dos riscos de alimentos transgênicos

Ayala, Patryck de Araújo January 2009 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Jurídicas. Programa de Pós-Graduação em Direito. / Made available in DSpace on 2012-10-24T14:59:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 266668.pdf: 2437720 bytes, checksum: 393cc8b5f978b99b2712b9fa4be3bd44 (MD5)
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As representações sociais dos transgênicos na relação entre ciência, tecnologia e sociedade

Allain, Juliana Mezzomo January 2007 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Filosofia e Ciências Humanas. Programa de Pós-Graduação em Psicologia. / Made available in DSpace on 2012-10-23T10:27:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 246710.pdf: 5646351 bytes, checksum: 11e4d03b65b32f6a8469793c73d88668 (MD5) / Essa pesquisa teve como objetivo investigar as representações sociais dos transgênicos no Brasil em diferentes contextos. Desde a sua fundação, essa teoria tem contribuído para se pensar a relação entre ciência e sociedade. Essa pesquisa se dividiu em três estudos: uma análise documental dos artigos sobre transgênicos publicados em dois jornais brasileiros no período de 2000 a 2005, um mapeamento da estrutura das representações sociais de três grupos sociais diferentes e um estudo quase-experimental que verificou o impacto de uma exposição científica sobre transgênicos nas representações sociais de alunos do ensino médio. Os resultados do primeiro estudo mostraram que o discurso da mídia que priorizava uma discussão sobre os diferentes riscos (sanitários, ambientais e sociais) dessa nova tecnologia nos primeiros anos, foi sendo substituído pela discussão acerca dos benefícios econômicos que os transgênicos podem trazer para o país. O segundo estudo mostrou que esse objeto ainda recente não foi representado por um dos grupos estudados, mas os outros grupos já possuem uma representação crítica quanto aos mesmos. Por fim, o terceiro estudo mostrou que a atividade da divulgação científica, e a exposição científica em particular, pode ajudar na formação de representações que ajudem no processo de reflexividade sobre a relação entre ciência e sociedade.
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O fator tempo como obstáculo na importação e movimentação de sementes geneticamente modificadas para pesquisa / The time factor as an obstacle in the import and movement of genetically modified seeds for research

Durante, Enio José 08 December 2014 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-02-14T16:08:56Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 361427 bytes, checksum: cb0bf9d0e6f1779c6b62e737cadbd72a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-14T16:08:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 361427 bytes, checksum: cb0bf9d0e6f1779c6b62e737cadbd72a (MD5) Previous issue date: 2014-12-08 / Não existe crescimento sustentável de forma desordenada. Nesse contexto, cabe ao poder público normatizar, fiscalizar e apresentar soluções para questões que possam se tornar empecilho ao dinamismo do agronegócio brasileiro. Como exemplo desse empecilho, pode-se citar a grande quantidade de normativas para o setor de sementes no Brasil, que pode tornar-se um gargalo ao desenvolvimento da agricultura. O intercâmbio de material genético é um dos principais recursos que os pesquisadores utilizam para introduzir características desejáveis em um cultivar. Porém, os trâmites burocráticos para conseguir autorização de importação, as exigências alfandegárias e o saturado sistema quarentenário brasileiro causam enorme atraso aos processos de importação de sementes, prejudicando o agronegócio brasileiro. Este trabalho teve dois objetivos: primeiro foi fazer revisão crítica da normativa relacionada à importação de sementes para a pesquisa, com a finalidade de identificar itens que possam causar atrasos ao processo e, por meio de um estudo de caso de uma empresa importadora de germoplasma, estimar o tempo gasto com as importações, desde sua autorização até a liberação da semente para o pesquisador. Para identificar os gargalos na legislação, fez-se uma análise da Instrução Normativa do MAPA que autoriza a importação de sementes para pesquisa, o que possibilitou apontar os itens que causam atrasos e, consequentemente, prejuízos ao processo. Para determinar o tempo gasto com o processo de importação de sementes para pesquisa, fez-se uma análise de todos os processos de importação, realizados no período de 2009 a 2012, levantando-se o tempo, em dias, que cada órgão anuente envolvido precisou para aprovar e liberar as sementes para os pesquisadores. Os resultados indicaram que no período de 2009 a 2012, em média, a CTNBio precisou de 157 dias para aprovar uma autorização de importação de sementes geneticamente modificadas para a pesquisa; o MAPA necessitou de 68 dias; o desembaraço na Alfândega demorou 10 dias; e o tempo de quarentena foi de 149 dias. Conclui-se que, no período de 2009 a 2012, o pesquisador que desejasse plantar um ensaio de material regulado precisava planejar o plantio com antecedência mínima de mais de um ano (384 dias), para assegurar-se de que a semente importada iria chegar a suas mãos, tendo atendido todos os requisitos legais. / There is no sustainable growth in a disorderly manner. In this context rests upon the Government to regulate, supervise and provide solutions to issues that they may behold a hindrance to the dynamism of Brazilian agribusiness. An example would be the overwhelming number of regulations that may become a bottleneck to development situation experienced by the seed industry in Brazil. The exchange of genetic material is one of the main features that researchers use to introduce desirable traits into one cultivar. However, the bureaucratic red tape to get an import license, customs requirements and the saturated quarantine system cause huge delays in the process of importing seeds, hurting Brazilian agribusiness. This study had two objectives: the first was to make a critical review of the rule relating to the importation of seeds for research, in order to identify items that cause delays to the process and, through a case study of a company that import research seeds, estimate the time spent on imports, since its authorization to release the seed for the researcher. To identify problems in the legislation, there was made an analysis of the MAPA rule that statement authorizing the import of seeds for research, allowing identify items that cause delays and consequently damage to the process. To determine the time spent in seed import process for research, an analysis of all import process was made from 2009 to 2012, rising time, in days, that each authorizing agency involved, needed to approve and realize the seeds to researchers. The results indicated that from 2009 to 2012, on average, CTNBio needed 157 days to approve one import permit of genetically modified seed for research, MAPA needed 68 days, the clearance at the Customs needed 10 days and the quarantine period was 149 days. In conclusion, from 2009 to 2012, the researcher who wanted to plant a trial of regulated material, needed to plan the planting with at least more than one year (384 days), to ensure that imported seeds would get in your hands having met all legal requirements. / Não foi localizado o currículo lattes do autor.

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