Tendo em vista o crescente uso do óleo essencial do orégano com diferentes finalidades terapêuticas, testes de toxicidade pré-clínica são imprescindíveis. No presente trabalho o potencial genotóxico deste óleo essencial foi testado através do teste de micronúcleos em medula óssea de ratos Wistar (Rattus norvergicus). Grupos de 5 ratos machos e 5 fêmeas foram tratados com o óleo essencial do orégano, por via oral em três doses: 2000, 1000 e 500 mg.kg-1 respectivamente, um controle negativo utilizando o veículo da administração do óleo, Tween 80 (0,001%), um controle positivo utilizando ciclofosfamida, substância sabidamente mutagênica (25 mg.kg-1) e um controle positivo utilizando os compostos majoritários encontrados no óleo testado. Em todas as doses utilizadas, com exceção do GC+, a frequência de micronúcleos foi avaliada após 3 dias de administração. A citotoxicidade foi avaliada pela relação entre eritrócitos policromáticos e eritrócitos normocromáticos (EPC/ENC) e a frequência de eritrócitos micronucleados. O óleo essencial, nas doses testadas, não afetou o desenvolvimento ponderal de ratos machos e fêmeas tratados. Os resultados revelaram através da proporção de EPC/ENC, que o óleo essencial do orégano e o controle positivo com os compostos majoritários causaram uma leve toxicidade na medula óssea de ratos Wistar, por meio de uma leve depressão na medula óssea. Não houve um aumento estatisticamente significativo (Kruskal-Wallis p > 0,01) de frequência de micronúcleos em eritrócitos policromáticos nas 3 doses do óleo essencial do orégano, mas aumentou a frequência de EPCMN do controle positivo com os compostos majoritários induzindo assim genotoxicidade nos eritrócitos dos ratos. Com base nos resultados é possível sugerir que através deste teste citogenético o óleo essencial do orégano utilizado neste experimento, não apresenta atividade genotóxica nas doses utilizadas. / Given the increasing use of essential oil of oregano with different therapeutic effects, toxicity tests are essential pre-clinical. In this work the genotoxic potential of essential oil was tested by the micronucleus test in bone marrow of rats (Rattus norvegicus). Groups of 5 males and 5 female rats were treated with the essential oil of oregano orally in three doses: 2000, 1000 and 500 mg.kg-1 respectively, a negative control using the vehicle for administering the oil, Tween 80 (0.001%), a positive control using cyclophosphamide, a substance known to be mutagenic (25 mg.kg-1) and a positive control using the major compounds found in oil tested. At all doses, except for GC +, the frequency of micronuclei was evaluated after 3 days of administration. Cytotoxicity was evaluated by the ratio of polychromatic erythrocytes and erythrocytes normochromatic (EPC / ENC) and the frequency of micronucleated erythrocytes. The essential oil in the doses tested, did not affect the growth of male and female rats treated. The results revealed by the ratio of EPC / forward, that the essential oil of oregano and the positive control with the major compounds caused a mild toxicity in the bone marrow of rats, through a slight depression in the bone marrow. There was a statistically significant increase (Kruskal-Wallis p> 0.01) frequency of micronuclei in polychromatic erythrocytes in 3 doses of essential oil of oregano, but increased the frequency of MNPCE positive control with the major components thus inducing genotoxicity in erythrocytes mice. Based on the results is possible to suggest that through this cytogenetic test the essential oil of oregano used in this experiment does not show genotoxic activity at the doses used.

MESQUITA, Maria do Amparo da Silva Bida. Avaliação mutagênica em cirurgiões dentistas expostos ocupacionalmente à radiação ionizante. 2011. 74 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-05-20T11:49:40Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_masbmesquita.pdf: 875478 bytes, checksum: e5e4005322d24a9f6ad24cd588814354 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-05-20T12:41:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_masbmesquita.pdf: 875478 bytes, checksum: e5e4005322d24a9f6ad24cd588814354 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-20T12:41:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_masbmesquita.pdf: 875478 bytes, checksum: e5e4005322d24a9f6ad24cd588814354 (MD5) Previous issue date: 2011 / X-rays are widely used in medical and dental practices, but are potent mutagens able to induce mutations and chromosomal aberrations. This study aimed to evaluate the effects of ionizing radiation-induced X-rays in exfoliated buccal mucosa cells of dentists exposed occupationally, through the application of the micronucleus test, to show the number and frequency of micronuclei, and other nuclear abnormalities such as binucleated cells, karyorrhexis (nuclear fragmentation) and karyolysis (nuclear dissolution). The age of the study population was 32 to 65 years, represented by dentists and 95% white and 5% were black, while the unexposed was 30% white and 25% were black. In relation to exposure to chemical and physical agents, the results showed that 100% of dentists are exposed to both types of agents. Over the past decade, 65% of those exposed and 45% of unexposed X-ray performed for therapeutic purposes. The working time, the group of subjects with exposure to ionizing radiation overcomes the unexposed group, 19.40 ± 8.74 vs corresponding 11 to 32 years in expoxtos and 6.55 ± 7.09 vs corresponding 11 to 25 years in the unexposed. Regarding the use of protection of 100% in both groups did not use protection. The assessment of mutagenicity was observed by the number of micronuclei in exfoliated cells of oral epithelium, vs. 5.85 ± 3.58 in those exposed and 1.00 ± 0.85 in the unexposed, but also by the frequency of micronuclei, and 0.41 ± 0.27 MN in the exposed and 0.02 ± 0.04 MN in unexposed, with a significance of p <0.001 in exposed compared to unexposed. Abnormalities such as nuclear karyorrhexis (39.49 ± 16, 29 vs 16, 03 ± 8.61), karyolysis (6.92 ± 5.87 x 1.11 ± 0.99) and binucleated cells (12.45 ± 8 , 43 x 0.76 ± 0.23) compared to unexposed, demonstrate apoptosis, necrosis and citotocixidade and were statistically significant p <0.01. No correlation was found between positive lifestyle habits, genetic diseases and the presence of micronuclei and nuclear abnormalities. Thus, the results of this study indicate that dental radiation induced damage to the genetic material of cells exfoliated buccal mucosa, also causing increased apoptosis, indicating that the use of this procedure should be ordered only when necessary. This work also demonstrates the importance of evaluating the nuclear and other abnormalities not only micronuclei as indicators of DNA damage. Concern about these effects is relevant mainly to the occupationally exposed, as well as establishing a prognosis of the incidence of cancer development, the monitoring of exposure of dentists to these agents can be an important step for planning strategies and security measures. / Os raios X são bastante utilizados nas práticas médicas e odontológicas, mas são agentes mutagênicos potentes capazes de induzir às mutações e aberrações cromossômicas. Este trabalho teve por objetivo avaliar os efeitos da radiação ionizante induzida por raios X em células esfoliadas da mucosa bucal de cirurgiões dentistas exposto ocupacionalmente, através da aplicação do teste de micronúcleos, para evidenciar número e freqüência de micronúcleo, além de outras anormalidades nucleares, como células binucleadas, cariorrexe (fragmentação nuclear) e cariólise (dissolução nuclear). A idade da população estudada foi de 32 a 65 anos, representado por cirurgiões dentistas sendo 95% de brancos e 5% negros, enquanto que a não exposta foi de 30% branco e 25% negros. Em relação à exposição a agentes químicos e físicos, os resultados mostraram que 100% dos cirurgiões dentistas se expõem aos dois tipos de agentes. Nos últimos dez anos, 65% dos expostos e 45% dos não expostos realizaram raio X com fins terapêuticos. Quanto ao tempo de trabalho, o grupo dos sujeitos com exposição à radiação ionizante supera o grupo dos não expostos, 19,40 ± 8,74 vs correspondendo de 11 a 32 anos nos expoxtos e 6,55 ± 7,09 vs correspondendo de 11 a 25 anos nos não expostos. Quanto ao uso de proteção, 100% de ambos os grupos não utilizam proteção. A avaliação mutagênica foi evidenciada pelo número de micronúcleo em células esfoliadas do epitélio bucal, 5,85 ± 3,58 vs nos expostos e de 1,00 ± 0,85 nos não expostos, como também pela freqüência de micronúcleo, sendo 0,41± 0,27MN nos expostos e de 0,02 ± 0,04 MN nos não expostos, com significância de p< 0,001 nos expostos em relação aos não expostos. As anormalidades nucleares como cariorrexe (39,49 ± 16, 29 vs 16, 03 ± 8,61), cariólise (6,92 ± 5,87 x 1,11 ± 0,99) e células binucleadas(12,45 ± 8,43 x 0,76 ± 0,23), em relação aos não expostos, evidenciam apoptose, necrose e citotocixidade e foram estatisticamente significante p<0,01. Não foi encontrada correlação positiva entre hábitos de vida, doenças genéticas e a presença de micronúcleos ou anormalidades nucleares. Assim, os resultados deste trabalho indicam que as radiações odontológicas induzem danos ao material genético de células esfoliadas da mucosa bucal, ocasionando também aumento de apoptose, indicando que o uso deste procedimento deve ser requisitado somente quando necessário. Este trabalho demonstra também a importância de se avaliar as outras anormalidades nucleares e não apenas os micronúcleos como indicadores de danos ao DNA. A preocupação com esses efeitos é pertinente, principalmente aos expostos ocupacionalmente, pois além de estabelecer um prognóstico da incidência do desenvolvimento de câncer, a monitoração das exposições dos cirurgiões dentistas a esses agentes pode ser um passo importante para o planejamento e estratégias de medidas de segurança.

O selênio (Se) é um nutriente essencial para o funcionamento adequado do organismo humano e também interfere na fisiopatologia de diversas doenças, principalmente daquelas que possuem o estresse oxidativo nas suas bases patológicas. Esse é o caso da doença de Parkinson (DP), que causa diversos distúrbios do movimento e afeta principalmente indivíduos idosos no mundo todo. Além do estresse oxidativo, vários outros fatores contribuem para a patogênese da DP, entre eles a exposição ao pesticida paraquat (PQ). Por causar a morte seletiva dos neurônios dopaminérgicos da substância negra do mesencéfalo, que é considerada a neurodegeneração característica da DP, o PQ pode ser utilizado para induzir modelos animais da doença. Neste contexto, o objetivo deste trabalho é investigar os efeitos do Se sobre a neurotoxicidade, genotoxicidade, função locomotora e alterações teciduais em ratos Wistar submetidos a um modelo experimental da DP induzido por PQ. Ainda, uma ampla revisão bibliográfica sobre os efeitos do Se sobre a DP também foi conduzida. Os principais resultados experimentais deste estudo indicaram que o PQ induziu danos no DNA dos leucócitos dos animais testados, mas não às células do encéfalo, sendo que o uso do Se protegeu contra os danos no DNA encontrados nos leucócitos (dados obtidos com a aplicação do Ensaio Cometa). O PQ causou dano locomotor nos animais, que também foram evitados através do uso do Se (conforme indicou os dados do Teste da Barra Estreita). Com a realização de análises histopatológicas verificou-se que o PQ ocasionou alterações teciduais no tecido pulmonar dos ratos, mas não no fígado, testículos e cerebelo. Os efeitos tóxicos do PQ ao pulmão foram minimizados pelo Se. Através de análise histomorfométrica, não foi encontrada diferença significativa na espessura da camada granular do cerebelo entre os grupos experimentais testados. De forma integrada, os resultados obtidos experimentalmente neste trabalho associados à pesquisa bibliográfica realizada indicaram que o uso do Se é promissor para combater os efeitos tóxicos do PQ. Ainda, sugeriram que o mineral possui potencial para ser usado no tratamento dietoterápico da DP e em estratégias de prevenção da mesma em indivíduos com histórico familiar da doença. / Selenium (Se) is an essential nutrient for the proper functioning of the human body, and interferes in the pathophysiology of various diseases, particularly those that have oxidative stress in their pathological bases. This is the case of Parkinson's disease (PD), which causes movement disorder and affects mainly elderly individuals worldwide. In addition to oxidative stress, several other factors contribute to the pathogenesis of PD, including exposure to pesticide paraquat (PQ). By causing the selective death of dopaminergic neurons in the substantia nigra of the midbrain, which is considered the characteristic neurodegeneration of PD, PQ can be used to induce animal models of the disease. In this context, the aim of this study is to investigate the effects of Se on neurotoxicity, genotoxicity, locomotor function and tissue changes in Wistar rats submitted to an experimental model of PD induced by PQ. Still, a broad literature review on the effects of Se on PD was conducted. The main experimental results of this work indicated that the PQ induced DNA damage in leukocytes of the animals tested, but not in the brain cells, and the use of Se protected against DNA damage found in leukocytes (data obtained using the Comet Assay). The PQ caused locomotor damage in the animals, which was also avoided by the use of Se (as indicated by the data from Narrow Beam Test). By performing histopathological analysis, it was found that PQ caused injury in the lung tissue of rats, but not in liver, testis, and cerebellum. Se attenuated the toxic effects of PQ to the lung. By histomorphometric analysis, there was no significant difference in the thickness of the granular layer of the cerebellum between the tested experimental groups. In an integrated manner, the results obtained experimentally in this work associated to the performed literature review indicated that the use of Se is promising to combat the toxic effects of PQ. Also suggested that the mineral has the potential to be used in the dietary treatment of PD and in prevention strategies of the disease in individuals with a family history of the PD.

VASCONCELLOS, Marne Carvalho de. Estudo de toxicologia clínica e genotoxicidade do fitoterápico tamaril cápsula, em voluntários sadios. 2004. 159 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-07T12:54:19Z No. of bitstreams: 1 2004_dis_mcvasconcellos.pdf: 895108 bytes, checksum: 935784afbf93c26d42e05fccd89e50b4 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-08T16:52:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_dis_mcvasconcellos.pdf: 895108 bytes, checksum: 935784afbf93c26d42e05fccd89e50b4 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-08T16:52:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_dis_mcvasconcellos.pdf: 895108 bytes, checksum: 935784afbf93c26d42e05fccd89e50b4 (MD5) Previous issue date: 2004 / Tamaril® is a phytomedicine constituded of 5 medicinal plants well known for their laxative proprieties: Cassia fistula (soft extract), Cassia angustifolia (Senna), Coriandrum sativum L. e Glycyrrhiza glabra L. (Alcaçuz) and Tamarindus indicus L. (soft extract). Every medication to be launched on the market must succeed in a series of research steps, where clinical toxicology evaluation is an important one among them. Genotoxic assessment, which aims on the processes altering DNA integrity, is a relatively recent field in drug development and stands on the interface between toxicology and genetics. This study consisted on the evaluation of clinical safety and genotoxic potential of Tamaril® capsules in healthy volunteers. The clinical evaluation consisted of an open study with 25 healthy volunteers of both sexes (13 males and 12 females) who received a daily oral dose of two capsules Tamaril® for 28 consecutive days. The volunteers were selected for the study if considered in good health after criterious clinical, physical and laboratorial evaluations. At the end of the 28 study days, blood samples (5 mL) were collected from each volunteer for the genotoxic assessment of Tamaril® on peripheral lymphocytes through the comet assay. The mean age of the volunteers was of 30.1± 6.9 years and the body mass index was of 24.21±3.00 Kg/cm2 on the pre-study evaluation and 24.26±3.05 Kg/cm2 on the post-study. Hematological, hepatic, renal and metabolic functions, as well as sodium and potassium did not show signs of abnormality in any volunteer throughout the weeks of the study. Soften faces, abdominal pain and flatulence were the adverse events regularly observed. Through the comet assay, score 1 DNA damage was most frequently registered on peripheral lymphocytes of volunteers treated with Tamaril® (p<0.05). Clinical and genotoxic evaluation of healthy volunteers receiving Tamaril® for 28 uninterrupted days did not show signs of toxicity related to the treatment. / O Tamaril® é um fitoterápico composto de cinco plantas medicinais: Cassia fistula (extrato mole), Cassia angustifolia (Sene), Coriandrum sativum L., Glycyrrhiza glabra L. (Alcaçuz), e Tamarindus indicus L. (extrato mole); todas com conhecida ação laxativa. Todo medicamento que vai ser registrado pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa), passa por diversas etapas de pesquisa sendo uma delas a toxicologia clínica. A genotoxicidade é uma especialidade relativamente recente, e se situa na interface entre a toxicologia e a genética. Esta visa o estudo dos processos que alteram o DNA (ácido desoxirribonucléico). O objetivo desse estudo foi avaliar a segurança e o potencial genotóxico da formulação de Tamaril® cápsulas em voluntários saudáveis. O ensaio clínico consistiu de um estudo aberto com 25 voluntários de ambos os sexos, (13 homens e 12 mulheres), que receberam diariamente duas cápsulas de Tamaril® v.o. por 28 dias ininterruptos. Os voluntários foram incluídos no estudo após avaliação clínica, exames físicos e laboratoriais. Ao final de 28 dias, amostras de sangue (5mL) foram coletadas de cada voluntário, para avaliar o efeito genotóxico do Tamaril® em linfócitos periféricos humanos através do teste do cometa. A idade média dos voluntários foi de 30,1 ± 6,9 anos e o índice de massa corpórea foi de 24,21 ± 3,00 Kg/ cm2 no pré-estudo e 24,26 ± 3,05 Kg/ cm2 no pós-estudo. As funções hematológica, hepática, renal e metabólica, bem como os eletrólitos sódio e potássio foram analisados semanalmente através dos exames laboratoriais, os quais não evidenciaram sinal de toxicidade, estando todos os resultados dentro da faixa de normalidade. Fezes pastosas, dor abdominal e flatulência foram os eventos adversos mais observados. Pelo teste do cometa, foram observados danos tipo 1 (p<0,05) nos linfócitos periféricos dos voluntários tratados com Tamaril®. Os estudos de Toxicologia Clínica e genotoxicidade não evidenciaram nenhuma toxicidade nos voluntários tratados com Tamaril® por 28 dias ininterruptos 2 cápsulas por dia v.o.

Orientadora : Profª Drª Marta Margarete Cestari / Coorientadora : Profª Drª Wanessa Algarte Ramsdorf / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa: Curitiba, 20/12/2016 / Inclui referências : f. 55-68 / Resumo: Como resultado do crescimento da população humana e da mudança nos padrões de vida, produção, consumo e eliminação de resíduos, os contaminantes ambientais estão aumentando em quantidade e espécie. Os nanomateriais, considerados contaminantes emergentes, se destacam nesse contexto. Suas propriedades físicas e químicas distintas podem diminuir os custos de produção e melhorar a eficiência de uma gama enorme de produtos que vão de cosméticos a eletroeletrônicos. Os nanotubos de carbono (NTCs) são, desde a década de 90, um dos tipos de nanomateriais mais estudados em função de suas propriedades intrínsecas que lhes asseguram protagonismo nos mais variados setores da indústria do século 21. Tendo em vista que a genotoxicidade dos nanotubos de carbono é um assunto ainda muito controverso, nós realizamos testes de exposição aguda e subcrônica por via hídrica a uma amostra comercial de nanotubos de carbono de paredes múltiplas em diferentes concentrações em duas espécies de peixes; um modelo exótico (Danio rerio), e uma espécie nativa (Astyanax altiparanae). Através do ensaio cometa em eritrócitos e do teste do micronúcleo písceo, também em eritrócitos, foi constatado que a amostra de nanotubos de carbono testada não produziu genotoxicidade aparente por meio de quebras de simples/dupla fita no DNA ou efeitos castogênicos e/ou aneugênicos em nenhuma das espécies, independentemente do tempo de exposição. Todavia, os resultados obtidos indicam a possibilidade de ocorrência de crosslinks DNA-NTCs. Palavras-Chave: Nanotubos de carbono; Genotoxicidade; Astyanax altiparanae; Danio rerio; Ensaio Cometa; Teste do Micronúcleo Písceo. / Abstract: As a result of the human population growth and changing life styles, production, consumption, and man-made disposal, the environmental contaminants are increasing in quantity and type. The nanomaterials, considered emerging contaminants, stand out in this context. Their unique fiscal and chemical proprieties may decrease the production costs and improve the efficiency of a large range of products, from cosmetics to eletro-eletronics. The carbon nanotubes (CNTs) are, since the 90's, one of the most studied nanomaterials because of its intrinsic proprieties that assure them important roles in several industrial sectors of the 21st century. Since the carbon nanotubes genotoxicity is still a controversial issue, we performed tests of acute and subcronical hydric exposal to a commercial sample of multi-walled carbon nanotubes in two fish spices, an exotic model (Danio rerio) and a native one (Astyanax altiparanae). Making use of the alkaline comet assay on erythrocytes and the piscine micronucleous also performed on erythrocytes, was found that the tested carbon nanotubes sample did not generate apparent genotoxicity by means of single/double DNA strand break or clastogenic/aneugenic effects over any of the species, independently of the exposure time. However, our findings indicates the possibility of occurrence of DNA-CNTs crosslinks. Key Words: Carbon Nanotubes; Genotoxicity; Astyanax altiparanae; Danio rerio; Comet Assay; Piscine Micronucleous Test.

Tendo em vista o crescente uso do óleo essencial do orégano com diferentes finalidades terapêuticas, testes de toxicidade pré-clínica são imprescindíveis. No presente trabalho o potencial genotóxico deste óleo essencial foi testado através do teste de micronúcleos em medula óssea de ratos Wistar (Rattus norvergicus). Grupos de 5 ratos machos e 5 fêmeas foram tratados com o óleo essencial do orégano, por via oral em três doses: 2000, 1000 e 500 mg.kg-1 respectivamente, um controle negativo utilizando o veículo da administração do óleo, Tween 80 (0,001%), um controle positivo utilizando ciclofosfamida, substância sabidamente mutagênica (25 mg.kg-1) e um controle positivo utilizando os compostos majoritários encontrados no óleo testado. Em todas as doses utilizadas, com exceção do GC+, a frequência de micronúcleos foi avaliada após 3 dias de administração. A citotoxicidade foi avaliada pela relação entre eritrócitos policromáticos e eritrócitos normocromáticos (EPC/ENC) e a frequência de eritrócitos micronucleados. O óleo essencial, nas doses testadas, não afetou o desenvolvimento ponderal de ratos machos e fêmeas tratados. Os resultados revelaram através da proporção de EPC/ENC, que o óleo essencial do orégano e o controle positivo com os compostos majoritários causaram uma leve toxicidade na medula óssea de ratos Wistar, por meio de uma leve depressão na medula óssea. Não houve um aumento estatisticamente significativo (Kruskal-Wallis p > 0,01) de frequência de micronúcleos em eritrócitos policromáticos nas 3 doses do óleo essencial do orégano, mas aumentou a frequência de EPCMN do controle positivo com os compostos majoritários induzindo assim genotoxicidade nos eritrócitos dos ratos. Com base nos resultados é possível sugerir que através deste teste citogenético o óleo essencial do orégano utilizado neste experimento, não apresenta atividade genotóxica nas doses utilizadas. / Given the increasing use of essential oil of oregano with different therapeutic effects, toxicity tests are essential pre-clinical. In this work the genotoxic potential of essential oil was tested by the micronucleus test in bone marrow of rats (Rattus norvegicus). Groups of 5 males and 5 female rats were treated with the essential oil of oregano orally in three doses: 2000, 1000 and 500 mg.kg-1 respectively, a negative control using the vehicle for administering the oil, Tween 80 (0.001%), a positive control using cyclophosphamide, a substance known to be mutagenic (25 mg.kg-1) and a positive control using the major compounds found in oil tested. At all doses, except for GC +, the frequency of micronuclei was evaluated after 3 days of administration. Cytotoxicity was evaluated by the ratio of polychromatic erythrocytes and erythrocytes normochromatic (EPC / ENC) and the frequency of micronucleated erythrocytes. The essential oil in the doses tested, did not affect the growth of male and female rats treated. The results revealed by the ratio of EPC / forward, that the essential oil of oregano and the positive control with the major compounds caused a mild toxicity in the bone marrow of rats, through a slight depression in the bone marrow. There was a statistically significant increase (Kruskal-Wallis p> 0.01) frequency of micronuclei in polychromatic erythrocytes in 3 doses of essential oil of oregano, but increased the frequency of MNPCE positive control with the major components thus inducing genotoxicity in erythrocytes mice. Based on the results is possible to suggest that through this cytogenetic test the essential oil of oregano used in this experiment does not show genotoxic activity at the doses used.

A genotoxicidade do SnCl2 foi avaliada nos ensaios Salmonella/Microssoma, WP2 Mutoxiteste e com a utilização de linhagens haplóides e diplóides de S. cerevisiae. O presente estudo pôde demonstrar, claramente, que o SnCl2 apresenta um potencial tóxico e uma significativa atividade mutagênica em diferentes ensaios de reversão. O mutante rad52D, deficiente no mecanismo de reparação recombinacional, incapaz de reparar quebras simples e duplas no DNA, foi o mais sensível. As células tratadas com Sn2+ formaram agregados que levaram a uma superestimativa da toxicidade, quando não corretamente desfeitos. Ensaios de inativação corretos, nas doses de 25 mM e 75 mM de SnCl2, foram obtidos através da desagregação das células com EDTA ou tampão fosfato. O Sn2+ induziu reversão na levedura, nos lócus his1-798 (células diplóides), his1-208 e lys-1-1 (células haplóides), bem como mutação no quadro de leitura em células haplóides no lócus hom3-10. Em células diplóides, o SnCl2 induziu recombinação mitótica intragênica, enquanto que a recombinação intergênica não foi significativamente pronunciada. A mutagenicidade do Sn2+ foi demonstrada pelos ensaios de reversão de auxotrofias, mas não pôde ser evidenciada nos ensaios de mutação para a frente. A morte seletiva dos mutantes espontâneos para a canavanina, quando as células são tratadas com SnCl2, sugeriu uma indução de disfunções da membrana das células As células da levedura em fase de crescimento exponencial apresentaram, com apenas 0,1% da concentração de SnCl2, o mesmo perfil de sobrevivência quando comparado com as células em fase de crescimento respiratório, sugerindo um maior envolvimento de parâmetros fisiológicos na resistência ao estresse oxidativo gerado pelo SnCl2 após as células atingirem a fase pós diáuxica. As superoxido dismutases, mas não a catalase, protegeram contra as espécies reativas de oxigênio que o estanho produziu. O mutante sod1D apresentou uma sensibilidade três vezes maior do que a linhagem selvagem, enquanto que o mutante sod2D demonstrou uma sensibilidade pequena ao SnCl2. O duplo mutante sod1Dsod2D mostrou um aumento acentuado na sensibilidade quando comparado com a linhagem selvagem. No teste de Salmonella/Microssoma, o SnCl2 não induziu mutação no quadro de leitura (TA97 e TA98) e nem substituição de pares de bases (TA100), ao passo que uma resposta positiva foi observada com a linhagem TA102 que detecta mutagênicos oxidativos. O SnCl2 também induziu mutação na linhagem IC203 (uvrA oxyR), e não na linhagem IC188 (uvrA). Esses resultados indicaram que o SnCl2 é um agente mutagênico moderado. Provavelmente, o dano ao DNA é causado por espécies reativas de oxigênio e é reparado por um processo recombinacional e por um processo sujeito a erros.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-09-26T17:01:31Z No. of bitstreams: 1 2016_MarcosAntôniodaSilvaElias.pdf: 1915158 bytes, checksum: fe392a5316d4f8462b451127a6156b87 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-01-09T21:15:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_MarcosAntôniodaSilvaElias.pdf: 1915158 bytes, checksum: fe392a5316d4f8462b451127a6156b87 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-09T21:15:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_MarcosAntôniodaSilvaElias.pdf: 1915158 bytes, checksum: fe392a5316d4f8462b451127a6156b87 (MD5) / Existe atualmente a preocupação de que o desmatamento, o uso de inseticidas e as mudanças climáticas possam estar contribuindo para o declínio da abundância de polinizadores em algumas regiões. O objetivo desta tese foi verificar o impacto desses fatores de risco nas abelhas nativas polinizadoras do tomateiro. No capítulo I foram mensuradas as variáveis da paisagem: proporção de vegetação nativa, tamanho relativo do maior fragmento e a distância entre o cultivo e a vegetação nativa mais próxima e relacionadas com a abundância de visitas de abelhas às flores do tomateiro amostradas em cultivos convencionais. A abundância total de polinizadores, além do grupo Exomalopsis e Centris aumentaram com a cobertura de vegetação nativa. No entanto, a fragmentação da paisagem favoreceu a abundância da maioria dos polinizadores do tomateiro. Não houve relação entre a distância dos fragmentos de vegetação nativa e a abundância para nenhum dos grupos. O capítulo II apresenta a genotoxicidade do inseticida deltametrina em células da hemolinfa, hemócitos, de indivíduos da espécie de abelha nativa Melipona quadrifasciata. As duas concentrações subletais do inseticida deltametrina levaram a um aumento significativo de danos ao DNA em hemócitos da abelha quando comparados ao inseticida imidacloprid e com o controle negativo. No capítulo III as potenciais consequências das mudanças climáticas foram avaliadas para cinco espécies de abelhas nativas. Foram realizadas projeções conjuntas através de cinco algoritmos para o ano de 2100 em dois cenários de emissão de carbono. Haverá redução na área de habitat adequado para as cinco espécies no futuro e essa redução ocorrerá também em áreas de plantio de tomate no Brasil. O presente estudo sugere que o desmatamento, os inseticidas e as mudanças climáticas podem afetar negativamente a abundância, a permanência e a distribuição espacial futura de abelhas nativas polinizadoras associadas aos cultivos de tomate. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Deforestation, use of pesticides and climate change are some of the factors of concern that may be contributing to the decline in abundance of pollinators in some regions. The objective of this thesis was to evaluate the impact of these risk factors in pollinating native tomato bees. In Chapter I, landscape variables: proportion of native vegetation, the largest fragment size and the distance between the crop and the closest native vegetation were measured and related to the abundance of bee visits to tomato flowers sampled in conventional crops. The total abundance of pollinators, in addition to Exomalopsis and Centris group increased with native vegetation cover. However, the landscape fragmentation favored abundance of most tomato pollinators. There was no relation between the distance of fragments of native vegetation and abundance for either group. Chapter II presents the genotoxicity of deltamethrin in hemolymph cells, hemocytes, of individuals of the native bee, Melipona quadrifasciata. The two sublethal concentrations of deltamethrin led to a significant increase in DNA damage in bee hemocytes when compared to imidacloprid insecticide and with the negative control. In Chapter III, the potential consequences of climate change were evaluated for five species of native bees. joint projections were conducted through five algorithms for the year 2100 in two carbon emission scenarios. There will be a reduction in habitat area suitable for five species in the future and this reduction will also occur in areas of tomato planting in Brazil. This study suggests that deforestation, pesticides and climate change can negatively affect the abundance, the permanence and future spatial distribution of pollinating native bees associated with tomato crops.

Dissertação de Mestrado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde da Universidade do Extremo Sul Catarinense, UNESC para obtenção do título de mestrado em Ciências da Saúde. / Phenylalanine (Phe) accumulates in the brain of patients affected by phenylketonuria, a disease caused by a deficiency of phenylalanine hydroxylase activity. Phenylketonuric patients present severe neurologic symptoms. However, the pathophysiological mechanisms of the brain damage are not fully understood yet. It may be postulated that Phe may elicit neurotoxicity. This study aimed to evaluate the genotoxic effect of high concentrations of phenylalanine in the cerebral cortex and peripheral blood of young rats using the Comet Test . In experiment was performed in vivo acute administration of a single subcutaneous injection of Phe ((5.2 μmol/g body weight), p-chlorophenylalanine (p-Cl-Phe) (0.9 μmol/g body weight) , an enzyme inhibitor PHA and Phe in combination with p-Cl-Phe, at the same dosis control group received saline; In vitro and Phe; using the model mimics the fenicetonúria that in animals. One hour after injection of metabolites, the animals were killed and structures were collected. DNA damage was evaluated using Comet Assay, by calculating index of damage (ID) and frequency of damage (FD). We found that the Phe and p-Cl-Phe alone induced DNA damage in vivo and similarly the association of Phe and p-Cl-Phe caused an increase in ID and FD compared to the control group, suggesting that this association induces damage DNA. For in vitro experiments, slices of cerebral cortex and peripheral blood aliquots were incubated in the presence of different concentrations of Phe and absence (control) for 30 min, phenylalanine genotoxic effect exerted leading to the FD and ID values significantly higher the control group in the cerebral cortex did not occur in peripheral blood. Our data provide evidence that DNA damage may be implicated in the pathophysiology of the brain damage observed in patients affected by phenylketonuria. / O acúmulo de fenilalanina (Phe) no cérebro ocorre na fenilcetonúria, doença causa da pela deficiênciada atividade da enzima fenilalanina hidroxilase. Os pacientes fenilcetonúricos apresentam sintomas neurológicos graves. Entretanto os mecanismos fisiopatológicos dos danos cerebrais ainda não são totalmente compreendidos. No entanto, é possível postular que a Phe possa provocar efeitos neurotóxicos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito genotóxico da de altas concentrações fenilalanina em córtex cerebral e sangue periférico de ratos jovens utilizando o Teste Cometa . No experimento em in vivo foi realizada administração aguda de uma única injeção subcutânea de Phe ((5,2 µmol/g de peso corporal) , p-clorofenilalanina (p-Cl-Phe) (0,9 µmol/g de peso corporal) ( um inibidor da enzima PHA) e Phe em associação com p-Cl-Phe; grupo controle recebeu solução salina , e in vitro Phe; utilizando-se um modelo que mimetiza a fenicetonúria em animais. Os animais foram mortos 1 hora após a administraçãodos metabólitos. Os danos ao DNA no córtex cerebral foram analisados através do Ensaio Cometa pela medidado índice dedano(ID) e da frequência de dano (FD). Observamos que a Phe e p-Cl-Phe isoladamente induziram dano ao DNA in vivo e da mesma forma a associação de Phe e p-Cl-Phe causou um aumento no ID e FD em comparaçãoao grupo controle, sugerindo que essa associação induz dano ao DNA. Para os experimentos in vitro, fatias de córtex cerebral e alíquotas de sangue periférico foram incubadas na presença diferentes concentrações de Phe e na ausência (controle) de durante 30 minutos, a fenilalanina exerceu efeito genotóxico levando a com valores de ID e FD significativamente maiores em relação ao grupo controle em córtex cerebral o que não ocorreu em sangue periférico Nossos resultados fornecem evidências de qu edanos no DNA podem contribuir para o entendimento dos sintomas neurológicos observados empacientes afetados porfenilcetonúria.

O selênio (Se) é um nutriente essencial para o funcionamento adequado do organismo humano e também interfere na fisiopatologia de diversas doenças, principalmente daquelas que possuem o estresse oxidativo nas suas bases patológicas. Esse é o caso da doença de Parkinson (DP), que causa diversos distúrbios do movimento e afeta principalmente indivíduos idosos no mundo todo. Além do estresse oxidativo, vários outros fatores contribuem para a patogênese da DP, entre eles a exposição ao pesticida paraquat (PQ). Por causar a morte seletiva dos neurônios dopaminérgicos da substância negra do mesencéfalo, que é considerada a neurodegeneração característica da DP, o PQ pode ser utilizado para induzir modelos animais da doença. Neste contexto, o objetivo deste trabalho é investigar os efeitos do Se sobre a neurotoxicidade, genotoxicidade, função locomotora e alterações teciduais em ratos Wistar submetidos a um modelo experimental da DP induzido por PQ. Ainda, uma ampla revisão bibliográfica sobre os efeitos do Se sobre a DP também foi conduzida. Os principais resultados experimentais deste estudo indicaram que o PQ induziu danos no DNA dos leucócitos dos animais testados, mas não às células do encéfalo, sendo que o uso do Se protegeu contra os danos no DNA encontrados nos leucócitos (dados obtidos com a aplicação do Ensaio Cometa). O PQ causou dano locomotor nos animais, que também foram evitados através do uso do Se (conforme indicou os dados do Teste da Barra Estreita). Com a realização de análises histopatológicas verificou-se que o PQ ocasionou alterações teciduais no tecido pulmonar dos ratos, mas não no fígado, testículos e cerebelo. Os efeitos tóxicos do PQ ao pulmão foram minimizados pelo Se. Através de análise histomorfométrica, não foi encontrada diferença significativa na espessura da camada granular do cerebelo entre os grupos experimentais testados. De forma integrada, os resultados obtidos experimentalmente neste trabalho associados à pesquisa bibliográfica realizada indicaram que o uso do Se é promissor para combater os efeitos tóxicos do PQ. Ainda, sugeriram que o mineral possui potencial para ser usado no tratamento dietoterápico da DP e em estratégias de prevenção da mesma em indivíduos com histórico familiar da doença. / Selenium (Se) is an essential nutrient for the proper functioning of the human body, and interferes in the pathophysiology of various diseases, particularly those that have oxidative stress in their pathological bases. This is the case of Parkinson's disease (PD), which causes movement disorder and affects mainly elderly individuals worldwide. In addition to oxidative stress, several other factors contribute to the pathogenesis of PD, including exposure to pesticide paraquat (PQ). By causing the selective death of dopaminergic neurons in the substantia nigra of the midbrain, which is considered the characteristic neurodegeneration of PD, PQ can be used to induce animal models of the disease. In this context, the aim of this study is to investigate the effects of Se on neurotoxicity, genotoxicity, locomotor function and tissue changes in Wistar rats submitted to an experimental model of PD induced by PQ. Still, a broad literature review on the effects of Se on PD was conducted. The main experimental results of this work indicated that the PQ induced DNA damage in leukocytes of the animals tested, but not in the brain cells, and the use of Se protected against DNA damage found in leukocytes (data obtained using the Comet Assay). The PQ caused locomotor damage in the animals, which was also avoided by the use of Se (as indicated by the data from Narrow Beam Test). By performing histopathological analysis, it was found that PQ caused injury in the lung tissue of rats, but not in liver, testis, and cerebellum. Se attenuated the toxic effects of PQ to the lung. By histomorphometric analysis, there was no significant difference in the thickness of the granular layer of the cerebellum between the tested experimental groups. In an integrated manner, the results obtained experimentally in this work associated to the performed literature review indicated that the use of Se is promising to combat the toxic effects of PQ. Also suggested that the mineral has the potential to be used in the dietary treatment of PD and in prevention strategies of the disease in individuals with a family history of the PD.