Orientadores: Altair Antoninha Del Bel Cury, Renata Cunha Matheus Rodrigues-Garcia / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-06T13:46:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira-Cenci_Tatiana_M.pdf: 1048789 bytes, checksum: e19520a3c91fdd0a8f929e43936e3dcc (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A candidose é a infecção oral fúngica mais comum diagnosticada em humanos, com prevalência de até 67% em usuários de prótese. Embora tenha sido inicialmente associada apenas a Candida albicans, outras espécies podem ser responsáveis por mais de 50% dos casos de infecção. Ainda, fatores como presença de saliva e bactérias parecem desempenhar importante papel na colonização por Candida. Assim, este estudo objetivou verificar a influência destes fatores na a:fesão de duas espécies de Candida (Candida albicans e Candida glabrata) sobre a superfície de resinas acrílicas e reembasadores. Corpos de prova (2,5x1 ,2xO,2 cm) confeccionados com duas resinas acrílicas (convencional e de microondas) e dois reembasadores (temporário e permanente) tiveram sua rugosidade (Ra) e energia livre de superfície (ELS) mensuradas, sendo aleatoriamente divididos de acordo com a exposição aos fatores: presença ou ausência de saliva, presença ou ausência de bactérias e espécie de Candida. Os espécimes foram levados a uma câmara de fluxo utilizando-se uma bomba peristáltica para perfusão de cultura de bactérias seguida por uma das espécies de Candida, ou apenas a cultura de uma das espécies de Candida. A contagem das células de Candida aderidas foi realizada em microscópio óptico (400x). Os dados foram submetidos à análise de variância para Ra e adesão, e ao teste de Kruskal-Wallis para ELS (a=0,05). O reembasador temporário apresentou a maior Ra, seguido do permanente, enquanto as resinas acrílicas exibiram as menores rugosidades (p<0,0001). Os valores de ELS foram similares para os materiais, mas diferentes do reembasador temporário (p<0,0001). A adesão de C. albicans e C. glabrata variou de 3,2 a 564,4 e 3,2 a 1400,4 cel/mm2 respectivamente, com diferenças estatísticas (p<0,05) em alguns grupos. O reembasador temporário mostrou maiores níveis de adesão. A colonização foi diminuída pela saliva, enquanto na presença de bactérias e saliva houve aumento da adesão (p<0,05). Estes resultados sugerem que a adesão inicial das duas espécies de Candida foi fortemente afetada pela rugosidade, presença de saliva e bactérias, mas não pela energia livre de superfície / Abstract: Candida-associated stomatitis is reported in up to 67% of a population wearing dentures. Recently, disease-associated Candida species have shifted from C. albicans to norralbicans species. Since factors such as presence of saliva and oral bacteria appear to play a major role in the initial phases of yeasts adhesion, this study aimed to determine whether these factors produced differences in acrylic resins and denture liners C. albicans and C. glabrata adherence. Samples (2.5x1.2xO.2 em) of two acrylic resins (heat and microwavecured) and two denture liners (soft and hard) were prepared and had their surface free energy (SFE) and surface roughness (Ra) measured and were randomly divided according to their exposure to the following factors: saliva coating or uncoating, presence or absence of bacteria and Candida species. Specimens were assayed in a flow chamber connected to a peristaltic pump for perfusion of bacteria culture plus one of the Candida species culture or only the Candida culture (control). Adhesion was determined by count on a light microscope (400 x). Statistical analyses was performed by ANOVA (Ra and Candida species adhesion) and Kruskal-Wallis (SFE) (a=.05). Soft liner presented the roughest surface, followed by the hard liner, whereas acrylic resins exhibited the smoothest surfaces (p<.0001). The SFE values of ali materiais were similar but different from the soft liner (p<.0001). C. albicans and C. glabrata adhesion on the materiais ranged fr0m 3.2 to 564.4, and 3.2 to 1400.4 cells mm-2 respectively, with statistically signific,ant differences (p<.05) in some cases. The soft liner exhibited the highest levels of adhesion. The overall colonization was significantly decreased by saliva (p<.Oq), while bacteria increased the adhesion in the presence of saliva. These results taken together suggest that initial adhesion of Candida species was strongly affected by the surface roughness, presence of saliva and bacteria, but not by surface free energy / Mestrado / Protese Dental / Mestre em Clínica Odontológica

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:29:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5629_1.pdf: 20032687 bytes, checksum: d731e88ee3e7c7f4ba8501e372528ee0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O ciclo do Schistosoma mansoni depende da existência de hospedeiros intermediários que no Brasil são caramujos do gênero Biomphalaria. Em muitas espécies de invertebrados sabe-se que os hemócitos e fatores humorais da hemolinfa são responsáveis pela defesa imunológica contra patógenos, que efetivamente podem impedir ou limitar uma espécie de funcionar como vetor competente. Sabendo-se que o B. glabrata demonstra maior suscetibilidade ao S. mansoni em relação ao B. straminea, o presente estudo teve como objetivo elucidar as bases celulares do sistema de defesa dos caramujos das espécies B. glabrata e B. straminea. Para a avaliação morfológica dos hemócitos nas condições sadios e infectados pelos miracídios de S. mansoni, foi utilizada a microscopia óptica, de interferência diferencial e microscopia eletrônica de transmissão. Na caracterização dos hemócitos através de lectinas (UEA-1, DBA, LCA, BS-I e WGA) conjugadas a FITC, foi utilizado o microscópio confocal a laser. Foi realizado também a avaliação cinética diferencial das células nas condições sadios e infectados pelos miracídios de S. mansoni, utilizando hemocitômetro nos tempos de 2h, 15 e 30d. Neste trabalho foi identificado cinco tipos celulares na hemolinfa das duas espécies: células blásticas, granulócitos e hialinócitos do tipo I, II e III. As células blásticas se mostram esféricas com núcleo grande localizado centralmente, em B. straminea infectados estas células não apresentaram muitas modificações morfológicas, porém em B. glabrata este tipo celular passou a apresentar alterações no formato da célula. Os granulócitos apresentaram-se com vários grânulos eletrodensos. Em B. glabrata infectados estas células não se mostraram com alterações morfológicas, porém, em B. straminea foi possível identificar liberação de grânulos. O hialinócito do tipo I foi o tipo celular mais encontrado na hemolinfa de ambas as espécies, tais células são polimórficas e apresentam muitas projeções citoplasmáticas. Estas células em caramujos infectados apresentaram-se com maior adesão celular e maior quantidade de grânulos de glicogênio. Nos hialinócitos do tipo I em B. straminea, não identificamos adesão celular, e assim como B. glabrata, passaram a apresentar mais projeções citoplasmáticas após infecção. Os hialinócitos do tipo II e III são células ovais e geralmente apresentam coloração homogênea. Estes tipos celulares apresentaram poucas alterações morfológicas após a infecção nas duas espécies estudadas. Em relação à marcação com lectinas foi evidenciado um aumento na marcação após a infecção em quase todos os hemócitos de B. glabrata e B. straminea. Na avaliação da dinâmica hemocitária em B. glabrata foram identificadas variações significantes em três dos cinco tipos celulares: células blásticas, granulócito e hialinócito I. Os mesmos resultados foram encontrados em B. straminea. Neste trabalho foi realizada a caracterização e padronização dos hemócitos de B. glabrata e B. straminea, sadios e infectados com miracídios de S. mansoni. Desta forma, o presente estudo possibilitou um melhor entendimento sobre o papel dessas células no processo de defesa contra o S. mansoni e sugere uma relação da resposta imune celular na suscetibilidade ou não ao Trematóide

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:13:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2675_1.pdf: 5125867 bytes, checksum: 3af3a0a0031b7c44221c8e7af794b638 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As radiações ionizantes podem induzir mutações gênicas, aberrações cromossômicas e morte celular. Recentemente, começou a haver grande empenho no desenvolvimento de técnicas que auxiliem na compreensão desses possíveis danos biológicos surgidos após exposições dos organismos a certas doses de radiação ionizante. Dentre estas técnicas, o teste do micronúcleo tem se mostrado um ótimo biomarcador de efeitos de genotoxicidade do dano ao DNA. Esta técnica também pode ser utilizada para detecção de genotoxicidade ambiental, na biomonitoração. O molusco Biomphalaria glabrata, devido às suas características biológicas e ambientais, tem se apresentado como um ótimo modelo experimental, possibilitando a avaliação de efeitos produzidos por agentes físicos e químicos. Diante disso, o presente trabalho visou detectar os efeitos genotóxicos da radiação gama de 60Co em hemócitos de Biomphalaria glabrata, por meio do teste do micronúcleo, bem como estabelecer este ensaio como um novo biomarcador ambiental. Os moluscos foram divididos em grupos e submetidos a dose de 0 (controle), 25, 35, 45 e 55 Gy de radiação gama. Após 48 horas da irradiação, a hemolinfa dos moluscos foi coletada e analisada em microscópios óptico e de fluorescência. As lâminas foram coradas com Giemsa e hoechst 33258, posteriormente foram analisadas quanto ao número de hemócitos, alterações nucleares e frequência de micronúcleos. A análise estatística foi realizada por meio do Teste do c2, ANOVA e teste de Tukey, com p<0,05. Os resultados obtidos demonstram que moluscos adultos de B. glabrata se mostraram sensíveis aos efeitos da radiação gama de 60Co. Na dose 35 Gy apresentaram um número menor de hemócitos, enquanto que os expostos a 55 Gy uma maior quantidade de hemócitos. Os hemócitos dos moluscos irradiados apresentaram alterações morfológicas e aterações celulares nas doses de 35, 45 e 55 Gy, sendo a dose de 55 Gy a mais radiotóxica. A freqüência de micronúcleos não foi dose-dependente, porém apresentou diferença significativa entre o grupo controle e os grupos irradiados. Pode-se concluir que a análise morfológica e a frequência de micronúcleo de hemócitos de Biomphalaria glabrata são parâmetro

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-03T13:27:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Felipe Tiago José dos Santos.pdf: 1035954 bytes, checksum: ae34d41fab1104d003ae261da82c351f (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-03T13:27:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Felipe Tiago José dos Santos.pdf: 1035954 bytes, checksum: ae34d41fab1104d003ae261da82c351f (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013 / Os efeitos danosos da radiação podem ser minimizados por substâncias radioprotetoras, ou podem ser potencializados por substâncias radiossensibilizadoras sendo estas substâncias denominadas radiomodificadores. O estudo de substâncias com estes potenciais pode conduzir a entre outras possibilidades, oferecer melhor proteção a trabalhadores ocupacionalmente ou acidentalmente expostos às radiações ionizantes, bem como na utilização terapêutica (quimiorradioterapia) em pacientes. Os liquens e seus metabólitos secundários têm apresentado atividade que estão relacionadas com a capacidade radiomodificadora. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a ação radiomodificadora do ácido barbático, ácido úsnico e atranorina extraídos dos liquens Cladonia salzmanni Nyl, Cladonia substellata, e Cladonia kalbii. A extração e purificação das substâncias liquenicas foi realizada no Laboratório de Produtos Naturais, Departamento de Bioquímica, UFPE. Foi realizado teste de toxicidade aguda com embriões de Biomphalaria glabrata no estágio de blástula afim de, determinar a toxicidade das substâncias liquênicas não irradiadas e irradiadas, bem como determinar a CL50 das substâncias liquênicas não irradiadas. A cromatografia em camada delgada foi realizada para avaliar estabilidade das substâncias liquênicas submetidas à radiação gama, na dose de 4 Gy. Para avaliar a atividade antioxidante foi realizado o ensaio utilizando o radical DPPH. Posteriormente foi estimada a capacidade radiomodificadora das substâncias por meio da analise da toxicidade aguda, utilizando embriões de B. glabrata divididos nos seguintes grupos: Grupo controle, mantidos com água filtrada; Grupo controleirradiado: primeiramente irradiados e depois mantidos com água; Grupo substância liquênica (1) onde os embriões foram primeiramente expostos as substâncias liquênicas em seguida submetidos a irradiação; e Grupo substância liquênica (2) onde os embriões foram submetidos a irradiação e posteriormente expostos as substâncias liquênica. Como resultado, foi obtido a CL50 do ácido barbático de 242,7 μg/mL; do ácido úsnico igual a 1,3 μg/mL; a atranorina não apresentou toxicidade para o modelo experimental utilizado. As substâncias liquênicas irradiadas não apresentaram alteração na quantidade de embriões inviáveis quando comparado com as substâncias não irradiadas. As substâncias analisadas por meio do ensaio com o radical DPPH, não apresentaram atividade antioxidante. A avaliação da capacidade radiomodificadora das substâncias liquênicas demonstrou que a irradiação aumentou a quantidade de embriões inviáveis quando comparado com o grupo controle. Adicionalmente, foi observado que os embriões expostos ao ácido barbático (100,0 μg/mL) e ao ácido úsnico (0,6 μg/mL) antes da irradiação apresentaram uma quantidade de embriões inviáveis, maior do que o grupo controle irradiado. Os resultados sugerem que o ácido barbático e o ácido úsnico tornaram as células mais sensíveis aos efeitos danosos da radiação, ou seja, apresentaram ação radiossensibilizante.

orionpizango@gmail.com / Case report: A 43-year-old female presented with decreased visual acuity in the right eye.“Snowball-like” retinal lesions were found in both eyes on examination. Due to a lackof improvement with intravitreal antifungal empirical treatment, vitreous culture wasperformed and Candida glabrata was isolated. The patient then received intravitreal ampho-tericin B, as well as systemic treatment with caspofungin and amphotericin B lipid complex.Discussion: Endogenous fungal endophthalmitis is a sight-threatening condition. There arefew reports of C. glabrata endogenous endophthalmitis. Treatment regimens for Candidaendophthalmitis include combinations of systemic and/or intravitreal antifungals, as wellas vitrectomy.

We report a rare case of Candida glabrata liver abscess and fungemia complicating severe calculus cholecystitis in a 64-year-old female patient who had no history of immunosuppression or diabetes mellitus. The patient underwent cholecystectomy, resection of liver abscess, and systemic antifungal therapy using micafungin. Copyright

Objectives: Candida glabrata is the second most common cause of oral candidiasis, second only to C. albicans. Incidence of antifungal resistance has shown a steady increase for C. glabrata. Iron has shown to modulate C. albicans pathogenesis and affect drug-susceptibility. Here, we assess the effect of iron on the growth, antifungal-susceptibility, biofilms, and cell wall of C. glabrata.Methods: Growth, minimal inhibitory concentration (MIC), and biofilm experiments were conducted using 96-well polystyrene plates. Yeast Nitrogen Base medium was used for growth experiments. Cultures of C. glabrata and C. albicans were grown over two nights in respective media containing varying iron concentrations. Rosewell Park Memorial Institute medium was used for MIC and biofilm experiments. Serial dilution was performed to obtain desired concentrations of antifungal drugs. For all experiments, growth was assessed at OD600nm over 24 hours using BioTek Synergy Multi Mode Reader. Paraformaldehyde treated cells and specific stains were used for cell wall studies. Results: Growth of C. glabrata declined significantly below 5μM iron, while C. albicans continued to grow at decreasing iron concentrations, up to 0.5μM. MIC experiments revealed 1.562μM, 1.562μM, and 4μM, as the MIC for Deferasirox, Nystatin, and Fluconazole, respectively. Drug synergy experiments revealed a 128-fold reduction in the amount of Nystatin and Fluconazole needed, with the addition of 1/8th of Deferasirox concentration. The biofilm experiments were inconclusive and the cell wall studies showed decreased levels of mannan, chitin, and an increased β-glucan exposure in high iron conditions. Conclusion: C. glabrata is more sensitive to alterations in environmental iron when compared to C. albicans. Drug synergy experiments underscore the importance of Deferasirox in lowering the MICs of Nystatin or Fluconazole. This can allow use of classical antifungals at lower doses, thereby limiting their side effects. Cell wall studies discuss the effect of iron on the virulence of the C. glabrata. / Oral Biology

Vulvovaginal candidiasis is a common gynecologic diagnosis that can be treated empirically with fluconazole. We present a patient that developed post-operative () fungemia after being empirically treated for vulvuovaginal candidiasis with fluconazole multiple times throughout the year prior to robotic total laparoscopic hysterectomy and bilateral salpingo-oophorectomy. is becoming increasingly resistant to azole antimycotic therapy. It is likely that this patient had undertreated fluconazole-resistant vulvovaginitis prior to surgery, and that the pelvic infection was the source of fungemia.

Die Zahl invasiver Pilzinfektionen ausgelöst durch C. glabrata steigt zunehmend und auch die Ausbildung multipler Resistenzen wird immer häufiger registriert. In dieser Arbeit wurden zwei klinische MDR-C. glabrata-Stämme systematisch analysiert, um den Ursprung der Mehrfachresistenz zu finden. Aufgefallen waren jene Isolate in vorhergehenden Untersuchungen von Aldejohann et. al., die 176 Stämme, die dem Referenzzentrum NRZ-Myk zugesandt wurden, auf ihr Resistenzverhalten gegen Echinocandine analysierten und auf FKS-Mutationen untersuchten. Die Isolate CG22 und CG56 zeigten ein Resistenzverhalten gegen Anidulafungin ohne eine FKS-Mutation aufzuweisen. In Mehrfachtestungen wurde das einheitliche Verhalten von CG56 in zehn Einzelkolonien verifiziert, um Mischkulturen oder heterogenes Verhalten innerhalb des Isolates ausschließen zu können. Nach Analyse der gesamten Genomsequenz von CG56 zeigte sich eine Mutation kurz vor der HS-Region von FKS2, die eine Erklärung für das Resistenzverhalten zu liefern scheint. Neben der Mutation in FKS2 wurde ebenfalls eine Mutation in FKS1 und in ERG3 bestätigt. Die Mutation in ERG3 führt zu einer Verschiebung im Sterolsynthesepathway und zu einer Neuverteilung der Zellmembranbestandteile. Das klinische Isolat CG22 fällt mit Resistenzen gegen Azole, Echinocandine und Amphotericin B auf und zeigte ebenfalls eine Mutationen in ERG3. Zusätzlich dazu ergab sich eine Loss-of- Function-Mutation in ERG4 und damit verbunden einen massiv reduzierten Ergosterolgehalt der Zellmembran. Die seltene Kombination aus ERG3 und ERG4 Mutation scheint die Erklärung für die außergewöhnliche Amphotericin B-Resistenz von CG22 zu liefern und wird hier als erstmals bei einem C. glabrata Isolat beschrieben. Dieser besondere Stamm, der sogar als panresistent bezeichnet werden kann, sollte Bestandteil weiterer Forschung werden. Der Sterolsynthesepathway dient als Angriffspunkt vieler Antimykotika und kann durch seine vielen Intermediate und abweichenden Abläufen zu unterschiedlichen Stoffwechselendprodukten führen. Der Ergosterolgehalt der Zellmembran eines C. glabrata-Stammes kann weitere Rückschlüsse auf die Empfindlichkeit des Isolates geben und somit die Chancen des Therapieerfolges der Antimykotikagabe besser vorhersagen und könnte somit einen vielversprechenden Beitrag zur Behandlung lebensbedrohlicher Candidosen leisten. / The number of invasive fungal infections caused by C. glabrata is increasing and the development of resistance to multiple drug classes is also being recorded more frequently. In this study, two clinical MDR C. glabrata strains were systematically analyzed to find the origin of their Multidrug Resistance. These isolates had attracted attention in previous studies by Aldejohann et. al. who studied 176 strains that have been sent to the NRZ-Myk reference center. The strains have been analyzed for their resistance to echinocandins and have been examined for mutations in FKS1 and FKS2 hotspots. The isolates CG22 and CG56 showed resistance to anidulafungin without showing mutation in the FKS hotspots. In multiple testing, the uniform behavior of CG56 was verified in ten individual colonies in order to exclude mixed cultures or heterogeneous behavior within the isolate. Analysis of the entire genome sequence of CG56 revealed a mutation just upstream of the HS region of FKS2, which appears to provide an explanation for the resistance behavior. In addition to the mutation in FKS2, a mutation in FKS1 and ERG3 was also confirmed. The mutation in ERG3 leads to a shift in the sterol synthesis pathway and to a redistribution of the cell membrane components. The clinical isolate CG22 was found to be resistant to azoles, echinocandins and amphotericin B. CG22 showed a mutation in ERG3 and additionally a loss-of-function mutation in ERG4. This leads to a massively reduced ergosterol content of the cell membrane. The rare combination of ERG3 and ERG4 mutation seems to explain the extraordinary amphotericin B resistance of CG22 and is described for the first time in a C. glabrata isolate. This particular strain, which can even be described as panresistant, should become part of further research. The sterol synthesis pathway serves as a target for many antimycotics and can lead to different metabolic products due to its many intermediates and divergent processes. The ergosterol content of the cell membrane of a C. glabrata strain can provide further information on the susceptibility of the isolate. This could possibly predict the chances of therapeutic success of antimycotic treatment better and could therefore make a promising contribution to the treatment of life-threatening candidiasis.

Les LBP/BPIs sont des protéines importantes de la réponse antimicrobienne des mammifères, encore mal caractérisées chez les invertébrés. L'objectif de ce projet était d'élucider le rôle des LBP/BPIs dans la réponse immunitaire du gastéropode B. glabrata. Nous avons montré que l'une des LBP/BPI (BgLBP/BPI1) était une protéine majeure de la glande albumène et des masses d'oeufs et possédait les activités attendues des BPIs telle que la capacité de perméabilisation des bactéries.De plus, nous avons découvert une nouvelle activité biocide (anti-oomycète) inconnue jusqu'alors chez les LBP/BPI, et démontré que BgLBP/BPI1 influence à la fois la production d'oeufs et leur protection contre les infections à oomycètes. Nous avons ensuite examiné la diversité et l'évolution des BgLBP/BPIs et montré qu'au moins 5 LBP/BPIs, regroupées en 3 clades phylogénétiques, étaient exprimées chez B. glabrata. Une étude de l'expression de représentants de ces 3 clades a montré qu'ils étaient exprimés dans différents tissus, appuyant l'hypothèse de l'acquisition de spécificités fonctionnelles par les membres de cette famille multigénique. / LBP/BPIs are important immune factors of the mammalian antimicrobial response,poorly characterized in invertebrates. The aim of this work was to elucidate the role of LBP/BPIs in the immune response of the fresh-water snail B. glabrata. Firstly, we showed that one member, BgLBP/BPI1, was highly abundant in the albumen gland and the egg masses. Importantly, in addition to the expected activities of BPIs, such as the induction of bacterial permeability, we discovered a novel biocidal (antioomycete) activity that was unsuspected so far. We demonstrated that BgLBP/BPI1 is a major fitness-related protein, acting on both egg production and offspring protection against oomycete infections. Then, we investigated the sequence diversity and evolution of this LBP/BPI protein family and showed that at least 5 LBP/BPIs were expressed in B. glabrata, belonging to three distinct phylogenetic clades. Expression studies of representatives of the three clades showed that they are expressed in different tissues, differently regulated, and therefore supported the hypothesis of the acquisition of functional specificities by the members of this multigenic family.