A infecção por Helicobacter pylori (Hp) é uma das infecções bacterianas mais comuns em todo o mundo. As maiores prevalências da infecção foram encontradas nos países em desenvolvimento, onde, em geral são altas já na infância. O método diagnóstico considerado mais acurado para a infecção por Hp, em crianças, é o exame endoscópico com biópsias gástricas. Alguns autores referem que o único aspecto macroscópico que pode predizer a infecção é o da presença de nodosidades na mucosa gástrica. Este aspecto é denominado de gastrite endoscópica nodular. A especificidade da gastrite endoscópica nodular para a infecção por Hp, entretanto, recentemente foi questionada por outros autores. Realizamos um estudo transversal em uma amostra de crianças (um a 12 anos) com dor abdominal crônica, que preenchiam os critérios para a realização de endoscopia digestiva alta, no Hospital da Criança Conceição e no Hospital de Clínicas de Porto Alegre, de setembro de 1997 a setembro de 1999. O objetivo principal foi verificar a associação entre a infecção por Hp e a gastrite endoscópica nodular nessas crianças. A amostra foi constituída de 185 crianças de ambos os sexos, com baixa renda familiar, cujos pais apresentavam baixo nível de escolaridade. Foi realizado estudo histológico das lâminas de biópsia gástrica (no mínimo cinco fragmentos, corados com H-E ou Giemsa), conforme o Sistema Sydney modificado. A infecção por Hp foi caracterizada pela presença de Hp na lâminas de biópsias gástricas dos pacientes e a gastrite folicular, pela presença de folículos linfóides bem formados, em mucosa gástrica inflamada. A prevalência da infecção por Hp nas crianças com dor abdominal crônica foi de 27% (IC 95%: 20,8-34,0). Foi demonstrada uma associação muito forte entre a infecção por Hp e a gastrite endoscópica nodular nessas crianças (P<0,001; RP = 29,7). Houve um aumento da prevalência tanto da infecção por Hp como da gastrite endoscópica nodular com a idade dos pacientes. A gastrite endoscópica nodular , embora tenha demostrado uma baixa sensibilidade (44,0%), apresentou um valor preditivo positivo de 91,7% para a infecção por Hp. Tanto o teste de urease, como a gastrite endoscópica nodular mostraram-se muito específicas, 94,5% e 98,5%, respectivamente, para o diagnóstico da infecção. Quando se combinou o teste de urease com o aspecto de gastrite endoscópica nodular, encontrou-se, uma sensibilidade muito baixa (34,7%), mas uma especificidade de 100% para a infecção por Hp. A sensibilidade do teste de urease, isolado, para a infecção foi de 60,4% e o seu valor preditivo positivo de 80,5%. O aspecto endoscópico (gastrite endoscópica nodular) teve associação com o microscópico (gastrite folicular) (P<0,001). Houve uma forte e significativa associação entre a infecção por Hp e a gastrite crônica ativa ( P<0,001; RP = 10,8). O mesmo foi demonstrado entre a gastrite nodular e a gastrite crônica ativa (P<0,001; RP = 8,6). Também foi verificado um nítido aumento das razões de prevalência da gastrite crônica ativa e da gastrite endoscópica nodular, com a acentuação dos graus de densidade de Hp. Finalmente, foi demonstrada a importante correlação entre o grau de intensidade da gastrite, verificado no exame histológico, e a gastrite endoscópica nodular (r = 0,97; P<0,001). A prevalência da infecção por Hp encontrada em Porto Alegre, nas crianças, foi menor do que a de outras cidades brasileiras e similar àquela registrada em algumas cidades do primeiro mundo. A presença de nodosidade na mucosa gástrica foi a alteração, à endoscopia, mais freqüentemente verificada nas crianças com infecção por Hp. Considerando a baixa prevalência da infecção encontrada na nossa amostra, a presença de gastrite endoscópica nodular significa uma elevada probabilidade de infecção por Hp, dado o alto valor preditivo verificado. O achado negativo para a gastrite endoscópica nodular, entretanto, não exclui a possibilidade da presença de infecção por Hp. Uma maior colonização bacteriana da mucosa gástrica estaria associada ao aparecimento da gastrite endoscópica nodular, já que a sua prevalência aumentou com os graus de densidade de Hp, assim como ocorreu com a gastrite crônica ativa. E quando ocorre, nas crianças, há maior probabilidade de se tratar de uma gastrite mais ativa e mais intensa. / Helicobacter pylori infection is one of the most common bacterial infections worldwide. Highest prevalence is found in developing countries, where high infection rates are usually found among children. The most accurate diagnostic method for H. pylori infection in children is the endoscopic examination with gastric biopsies. Several authors report that the only macroscopic aspect capable of predicting infection is the presence of gastric mucosa nodules. This aspect has been named endoscopic nodular gastritis. However, other authors have recently questioned the specificity of endoscopic nodular gastritis for H. pylori infection. From September 1997 to September 1999, we carried out a crossover study with a group of children (one to 12 years old) who presented with chronic abdominal pain and matched the criteria to undergo high digestive endoscopy at the Hospital da Criança Conceição and at Hospital de Clínicas de Porto Alegre. Our main objective was to check the association between H. pylori infection and endoscopic nodular gastritis in these children. Our series comprised 185 boys and girls from low-income households and whose parents had little formal education. Gastric biopsy slides were histologically examined (at least 5 biopsy specimens stained with hematoxylin and eosin or Giemsa) in accordance with the modified Sydney System. H. pylori infection was identified by the presence of H. pylori on the patient’s gastric biopsy slides, and follicular gastritis was characterized by the presence of lymphoid follicles in the inflamed gastric mucosa. The prevalence of H. pylori infection in children with chronic abdominal pain was 27% (CI 95%: 20.8-34.0). H. pylori infection was significantly associated with endoscopic nodular gastritis in these children (P<0.001; PR: 29.7). The prevalence rate for both H. pylori infection and endoscopic nodular gastritis increased with the patient’s age. Although endoscopic nodular gastritis presented low sensitivity (44.0%), it had a high positive predictive value (91.7%) for H. pylori infection. Both urease test and endoscopic nodular gastritis had high specificity (94.5% and 98.5%, respectively) for the diagnosis of infection. When the urease test was associated with the endoscopic nodular gastritis aspect, sensitivity was very low (34.7%), but specificity was 100% for H. pylori infection. When used alone, the urease test showed sensitivity of 60.4%, and positive predictive value of 80.5%. The endoscopic aspect (endoscopic nodular gastritis) was associated with the microscopic aspect (follicular gastritis) (P<0.001). There was a strong and significant association between H. pylori infection and chronic active gastritis (P<0.001; PR=10.8). The same was observed for endoscopic nodular gastritis and chronic active gastritis (P<0.001; PR=8.6). We also observed a clear increase in the prevalence rates of chronic active gastritis and endoscopic nodular gastritis as a result of higher H. pylori density. Finally, we demonstrated the important correlation between the intensity of gastritis observed at histologic examination and endoscopic nodular gastritis (r=0.97; P<0.001). The prevalence rate of H. pylori infection in children in Porto Alegre was lower than in other Brazilian cities, but similar to some cities in developed countries. At endoscopy, the presence of nodules in the gastric mucosa was the most frequent finding in children with H. pylori infection. Endoscopic nodular gastritis had a high predictive value and, as our sample presented a low prevalence rate of the infection, was indicative of a high probability of H. pylori infection. The absence of endoscopic nodular gastritis does not, however, exclude the possibility of H. pylori infection. A larger bacterial colonization of the gastric mucosa may be associated with the finding of endoscopic nodular gastritis as its prevalence increases with H. pylori density, similarly to what occurs in chronic active gastritis. When endoscopic nodular gastritis is observed in children, there is a higher probability that the gastritis is more active and intense.

Em países onde a prevalência do Helicobacter pylori (Hp) vem declinando, tem-se constatado elevação na incidência da doença do refluxo gastroesofágico (DRGE). O possível papel protetor do Hp na DRGE foi sugerido, mas tem sido questionado na literatura. Na dispepsia funcional, onde o benefício do tratamento do Hp é incerto, o risco de desenvolvimento de esofagite péptica é controverso. O presente estudo foi realizado com o objetivo de avaliar o risco de desenvolvimento de esofagite péptica endoscópica em pacientes com dispepsia funcional doze meses após a erradicação do Hp. Neste ensaio clínico randomizado, controlado com placebo, foram incluídos 157 pacientes submetidos à endoscopia digestiva alta no Hospital de Clínicas de Porto Alegre, no período de janeiro de 1998 a maio de 2001, nos quais o diagnóstico de dispepsia funcional foi estabelecido (critérios de Roma II). Randomização duplo-cega foi realizada para a utilização de Lansoprazol + antibióticos (grupo antibiótico) ou Lansoprazol + Placebos (grupo controle) por 10 dias. A erradicação do Hp foi estabelecida pelo teste da urease e exame histológico. Esofagite péptica endoscópica foi definida segundo a classificação de Los Angeles por dois endoscopistas “cegos”. A idade média dos pacientes estudados foi de 40,4 anos, dos quais 87% da raça caucasiana. Cento e trinta e oito pacientes completaram o estudo após um período mediano de 14 meses de acompanhamento. A taxa de erradicação do Hp foi de 93,4% no grupo antibiótico (71/76) e de 1,6% (1/62) no grupo controle. Diagnósticos endoscópicos de esofagite péptica, todos de intensidade leve (grau A), foram estabelecidos em 12,5% (9/72) dos pacientes que erradicaram o Hp versus 9,1% (6/66) daqueles que permaneceram infectados (risco relativo= 1,38; IC 95%: 0,52 – 3,65). Os resultados permitem concluir que a erradicação do Hp não é fator de risco para o desenvolvimento de esofagite péptica endoscópica nessa população predominantemente caucasiana de dispépticos funcionais. / In countries where the prevalence of the Helicobacter pylori (Hp) has been declining, one has noticed the increase in the incidence of the gastroesophageal reflux disease (GERD). The possible protecting role of the Hp in the GERD has been suggested although questioned by the literature. In the functional dyspepsia where the benefit from the Hp treatment is uncertain, the risk of reflux oesophagitis is controversial. The aim of this study was to evaluate the risk of reflux oesophagitis in patients with functional dyspepsia twelve months after the Hp eradication. This randomized, placebo-controlled trial included 157 patients submitted to gastrointestinal endoscopy in the Hospital de Clinicas de Porto Alegre, Brazil, between January 1998 and May 2001. Functional dyspepsia was diagnosed according to the Rome II criteria. Double-blind randomization was performed to 10 days of Lansoprazole + antibiotics (antibiotic group) or Lansoprazole + Placebos (control group) . The Hp eradication was established by urease test and histological examination. Reflux oesophagitis was defined according to the Los Angeles classification by two “blind” endoscopists. The average age of the studied patients was 40,4, 87% out of them were of the Caucasian race. One hundred and thirty-eight patients completed the study after an median follow-up period of 14 months. The eradication rate of the Hp was of 93,4% in the antibiotic group (71/76) and of 1,6% (1/62) in the control group. Endoscopic diagnoses of reflux oesophagitis, all of them of mild intensity (grade A), were established in 12,5% (9/72) of the patients who eradicated the Hp versus 9,1% (6/66) of those who remained infected (relative risk = 1,38; CI 95%: 0,52 – 3,65). The results allow concluding that Hp eradication is not a risk factor for reflux oesophagitis in this predominantly Caucasian population of functional dyspeptic subjects.

GONÇALVES, M. H. R. B. Análise da associação dos marcadores cagT, LEC e oipA funcional e não funcional do Helicobacter pylori em afecções gástricas. 2015. 65 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-16T15:22:57Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_mhrbgoncalves.pdf: 2117891 bytes, checksum: 5e06f32a5a690624261d19c255b29315 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-16T15:23:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_mhrbgoncalves.pdf: 2117891 bytes, checksum: 5e06f32a5a690624261d19c255b29315 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-16T15:23:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_mhrbgoncalves.pdf: 2117891 bytes, checksum: 5e06f32a5a690624261d19c255b29315 (MD5) Previous issue date: 2015-12-15 / The Helicobacter pylori is a bacterium that colonizes the gastric mucosa of human beings. The chronic infection caused by this pathogen is strongly associated with an increased risk for gastric illnesses different, ranging from chronic gastritis and peptic ulcer for two types of gastric cancer, adenocarcinoma and lymphoma of the lymphoid tissue associated to mucosa. The aim of this study was to evaluate the association of cagT markers, LEC, functional and nonfunctional oipA in patients with disorders of gastritis, ulcers and stomach cancer. Genotyping of the strains was performed by PCR. Were evaluated 181 patients attended at the University Hospital Walter Cantídio, 87 (48.1%) men, 94 (51.9%) women, with ages ranging from 18-90 years, mean age of 53 + 17.8 years, with a positive diagnosis for H. pylori infection, these 48 carriers of gastric cancer, 69 patients with peptic ulcer and 64 with gastritis. The prevalence of the genotypes studied was: 145/181 (80.1%) cagT, 83/181 (45.9%) LEC 81/181 (44.7%) oipA and oipA"on"34/81.In the group of patients with gastric cancer was observed that the most frequent genotype was the cagT 43/48 (89,5%), followed by the oipA gene "on" 10/18 (55.6%) and LEC 17/48 (35.4%). In the group of patients with peptic ulcer genotype was the most frequent cagT 62/69 (89.8%), followed by gene LEC, 34/69 (49.3%) and the oipA"on" 13/31 (41.9%). In the group of patients with the most frequent genotype gastritis was cagT 40/64 (62.5%), followed by gene LEC 32/64 (50.0%) and the oipA "on" 11/32 (34.4%). Furthermore, by the presented data there is no association of H. pylori and gender and or age of the patients.The genetic study of the markers of H. pylori infection and its relationship with the gastric disorders is essential to establish the profile of virulence of strains and thus elucidate the clinical outcomes variables involved with this infection. / O Helicobacter pylori é uma bactéria que coloniza a mucosa gástrica de seres humanos. A infecção crônica causada por este patógeno está fortemente associada a um risco aumentado de doenças gástricas diferentes, variando de gastrite crônica e úlcera péptica para dois tipos de câncer gástrico, adenocarcinoma e linfoma do tecido linfóide associado à mucosa. O objetivo do presente estudo foi avaliar a associação dos marcadores cagT, LEC e oipA funcional e não funcional em pacientes portadores das afecções gastrite, úlcera e câncer gástrico.Foi realizada a genotipagem das cepas por meio da técnica de PCR. Foram avaliados 181 pacientes, atendidos no Hospital Universitário Walter Cantídio, sendo 87(48,1%) homens, 94(51,9%) mulheres, com idade variando de 18-90 anos, com média de 53 + 17,8 anos, com diagnóstico positivo para a infecção por H. pylori. Destes, 48 portadores de câncer gástrico, 69 pacientes com ‘úlcera péptica e 64 com gastrite. A prevalência dos genótipos estudados foi: 145/181 (80,1%) cagT, 83/181 (45,9%) LEC, 81/181 (44,7%) oipA, e oipA“on”34/81 (41,9%).No grupo dos pacientes com câncer gástrico observou-se que o genótipo mais frequente foi o cagT 43/48 (89,6%), seguido do gene oipA “on” 10/18 (55,6%) e LEC 17/48 (35,4%). No grupo dos pacientes com úlcera péptica o genótipo mais frequente foi o cagT 62/69 (89,8%), seguido do gene LEC; 34/69 (49,3%) e oipA”on” 13/31 (41,9%). No grupo dos pacientes com gastrite o genótipo mais frequente foi cagT 40/64 (62,5%), seguido do gene LEC 32/64 (50,0%) e oipA “on” 11/32 (34,4%). Não houve associação significativa dos genótipos do H. pylori com gênero, nem com faixa etária dos pacientes. O estudo genético dos marcadores de H. pylori e sua relação com as afecções gástricas é fundamental para se estabelecer o perfil de virulência das cepas e assim elucidar os variáveis desfechos clínicos envolvidos com essa infecção.

GONÇALVES, M. H. R. B. Análise da associação dos marcadores cagT, LEC e oipA funcional e não funcional do Helicobacter pylori em afecções gástricas. 2015. 65 f. Tese (Doutorado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-23T13:16:41Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_mhrbgoncalves.pdf: 2117891 bytes, checksum: 5e06f32a5a690624261d19c255b29315 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-23T13:16:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_mhrbgoncalves.pdf: 2117891 bytes, checksum: 5e06f32a5a690624261d19c255b29315 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-23T13:16:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_mhrbgoncalves.pdf: 2117891 bytes, checksum: 5e06f32a5a690624261d19c255b29315 (MD5) Previous issue date: 2015-12-15 / The Helicobacter pylori is a bacterium that colonizes the gastric mucosa of human beings. The chronic infection caused by this pathogen is strongly associated with an increased risk for gastric illnesses different, ranging from chronic gastritis and peptic ulcer for two types of gastric cancer, adenocarcinoma and lymphoma of the lymphoid tissue associated to mucosa. The aim of this study was to evaluate the association of cagT markers, LEC, functional and nonfunctional oipA in patients with disorders of gastritis, ulcers and stomach cancer. Genotyping of the strains was performed by PCR. Were evaluated 181 patients attended at the University Hospital Walter Cantídio, 87 (48.1%) men, 94 (51.9%) women, with ages ranging from 18-90 years, mean age of 53 + 17.8 years, with a positive diagnosis for H. pylori infection, these 48 carriers of gastric cancer, 69 patients with peptic ulcer and 64 with gastritis. The prevalence of the genotypes studied was: 145/181 (80.1%) cagT, 83/181 (45.9%) LEC 81/181 (44.7%) oipA and oipA"on"34/81.In the group of patients with gastric cancer was observed that the most frequent genotype was the cagT 43/48 (89,5%), followed by the oipA gene "on" 10/18 (55.6%) and LEC 17/48 (35.4%). In the group of patients with peptic ulcer genotype was the most frequent cagT 62/69 (89.8%), followed by gene LEC, 34/69 (49.3%) and the oipA"on" 13/31 (41.9%). In the group of patients with the most frequent genotype gastritis was cagT 40/64 (62.5%), followed by gene LEC 32/64 (50.0%) and the oipA "on" 11/32 (34.4%). Furthermore, by the presented data there is no association of H. pylori and gender and or age of the patients.The genetic study of the markers of H. pylori infection and its relationship with the gastric disorders is essential to establish the profile of virulence of strains and thus elucidate the clinical outcomes variables involved with this infection. / O Helicobacter pylori é uma bactéria que coloniza a mucosa gástrica de seres humanos. A infecção crônica causada por este patógeno está fortemente associada a um risco aumentado de doenças gástricas diferentes, variando de gastrite crônica e úlcera péptica para dois tipos de câncer gástrico, adenocarcinoma e linfoma do tecido linfóide associado à mucosa. O objetivo do presente estudo foi avaliar a associação dos marcadores cagT, LEC e oipA funcional e não funcional em pacientes portadores das afecções gastrite, úlcera e câncer gástrico.Foi realizada a genotipagem das cepas por meio da técnica de PCR. Foram avaliados 181 pacientes, atendidos no Hospital Universitário Walter Cantídio, sendo 87(48,1%) homens, 94(51,9%) mulheres, com idade variando de 18-90 anos, com média de 53 + 17,8 anos, com diagnóstico positivo para a infecção por H. pylori. Destes, 48 portadores de câncer gástrico, 69 pacientes com ‘úlcera péptica e 64 com gastrite. A prevalência dos genótipos estudados foi: 145/181 (80,1%) cagT, 83/181 (45,9%) LEC, 81/181 (44,7%) oipA, e oipA“on”34/81 (41,9%).No grupo dos pacientes com câncer gástrico observou-se que o genótipo mais frequente foi o cagT 43/48 (89,6%), seguido do gene oipA “on” 10/18 (55,6%) e LEC 17/48 (35,4%). No grupo dos pacientes com úlcera péptica o genótipo mais frequente foi o cagT 62/69 (89,8%), seguido do gene LEC; 34/69 (49,3%) e oipA”on” 13/31 (41,9%). No grupo dos pacientes com gastrite o genótipo mais frequente foi cagT 40/64 (62,5%), seguido do gene LEC 32/64 (50,0%) e oipA “on” 11/32 (34,4%). Não houve associação significativa dos genótipos do H. pylori com gênero, nem com faixa etária dos pacientes. O estudo genético dos marcadores de H. pylori e sua relação com as afecções gástricas é fundamental para se estabelecer o perfil de virulência das cepas e assim elucidar os variáveis desfechos clínicos envolvidos com essa infecção.

PEREIRA, Eliane dos Santos. Helicobacter pylori : importância dos genes da ilha e de adesão no câncer gástrico (Intestinal e Difuso) e em estudos de risco. 2015. 109 f. Tese (Doutorado em Microbiologia Médica) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-11-19T12:51:50Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_espereira.pdf: 9283891 bytes, checksum: a93370ba6b307228f91e2634a170e1b5 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-11-19T13:05:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_espereira.pdf: 9283891 bytes, checksum: a93370ba6b307228f91e2634a170e1b5 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-19T13:05:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_espereira.pdf: 9283891 bytes, checksum: a93370ba6b307228f91e2634a170e1b5 (MD5) Previous issue date: 2015 / Gastric cancer (GC) is the third cause of cancer death worldwide. The etiology of gastric cancer is multifactorial and it i s being well established an association with infection by Helicobacter pylori . The genetic susceptibility to GC is postulated by exposure of a large proportion of the population to risk factors, but only part of this people develops the neoplasia. Furtherm ore, the H. pylori pathogenic character is given by the presence of cag - PAI pathogenicity island (cytotoxin associated gene pathogenicity island - cagPAI ) as well as allelic variation vacA s1m1 . About the host, genetic polymorphisms have been associated wi th the risk of GC, indicating these changes are potential genetic susceptibility markers in these tumors, however, few repair enzymes SNPs are studied. In the context of gastric carcinogenesis, it is necessary to consider the differences about histopatholo gy, age and gender. So, the aim of this study is to investigate the association of SNPs in DNA repair genes, APE1 2197 (T> G) and MLH1 - 93 (G>A), added to CDH1 - 160 (C>A) and - 347 (G>GA) SNPs. The CDH1 protein is associated with hereditary diffuse cancer an d genetic susceptibility. The histological subtypes, age and sex were importante data considered to the analyses. H. pylori genotype was determined by the presence of genes. cagA , cagE, cagG, cagT, virB11, vacA, oipA and hopQII. The H. pylori genotypes con sidered at risk study and individualized in the latest study. For this, it were included 285 patients with gastric cancer and 391 healthy controls matched for age and sex (1: 1 or 1: 2) from two different regions in Brazil: Ceará and Pará. The positivity f or H. pylori was observed in 87.71% of cases. In a risk study was observed a protection for intestinal tumors and it was associated with the G allele of APE1 (T> G) in women <55 years and GA allele CDH1 - 347 (G>GA) for men aged ≥ 55 years. In diffuse tumors, the group aged <55, the A allele of MLH1 - 93 (G>A) was associated with protection and the G allele of APE1 (T>G) was associated with risk in men in this age group. The G allele of APE1 (T>G) was also associated with the absence of distant metastases and the A allele of MLH1 (G>A) with absence of lymph nodes commitment. In the intestinal subtype, carriers patients G allele of APE1 (T>G were infected with significantly less virulent strains. In the stu dy with H. pylori strains, most cases had the full island regardless of histologic subtype. The cagA and cagE genes were present in most strains. According to the classification tree method analysis, some genes as cagG and cagE (in vacAs1 strains) proved f undamental in the separation of GC histological subtypes. The presence of cagG and cagE genes concomitantly or absence of cagG in H. pylori looks like classifies the intestinal tumor. While the presence of the cagG gene associated with the cagE absence cla ssifies the diffuse tumors. The cagM (+) cagG (+) genotype with the presence of the cagE gene classifies the intestinal tumor, since in the absence of cagE the tumors are classified by diffuse type. Regarding adhesion genes, there was a greater frequency o f oipA gene, followed by hopQI and hopQII . In summary, these data indicate that H. pylori genotype, histological subtype tumors, age and gender are important factors to be considered in polymorphisms analyzes. Despite the complexity to explain what are the factors that contribute to the separation of strains in intestinal and diffuse subtypes, it is clear that there are different pathways associated with these strains. And these genes may be potential markers of different histological subtypes. / O câncer gástrico (CG) é a terceira causa de morte por câncer no mundo. A etiologia do CG é multifatorial sendo bem estabelecida a associação com a infecção por Helicobacter pylori. A susceptibilidade genética ao CG é postulado pela exposição de uma grande proporção da população a fatores de risco, mas somente um grupo desenvolve essa neoplasia. Por outro lado, o caráter patogênico de H. pylori é dado pela presença da ilha de patogenicidade cag-PAI (cytotoxin associated gene pathogenicity island - cagPAI) bem como a variação alélica vacA s1m1. Pelo lado do hospedeiro, polimorfismos genéticos têm sido relacionados com o risco de CG, indicando que estas alterações são marcadores potenciais de susceptibilidade genética nestes tumores, entretanto, poucos SNPs de enzimas de reparo são estudadas. No contexto da carcinogenêse gástrica, há ainda que se considerar as diferenças com respeito a histopatologia, idade e gênero. Assim o objetivo deste trabalho é verificar a associação dos SNPs em genes de reparo do DNA, APE1 2197(T>G) e MLH1 -93(G>A), adicionadas aos SNPs de CDH1 -160 (C>A) e -347 (G>GA) por ser uma proteína associada ao câncer difuso hereditário, com a susceptibilidade genética. Os subtipos histológicos, idade e sexo foram dados importantes considerados para as análises. O genótipo de H. pylori, foi determinado pela presença dos genes cagA, cagE, cagG, cagT, virB11, vacA, oipA e hopQII sendo os genótipos de H. pylori considerado no estudo de risco e individualizada no último estudo. Para isso, foram incluídos 285 pacientes com câncer gástrico e 391 controles saudáveis pareados por idade e sexo (1:1ou 1:2) de duas regiões diferentes do Brasil: Ceará e Pará. Positividade para H. pylori em 87,71% dos casos. Foi observado no estudo de risco uma proteção para os tumores intestinais foi associado ao alelo G de APE1 (T>G) em mulheres com <55 anos e o alelo GA de CDH1 -347 (G>GA) para homens com ≥ 55 anos de idade. Nos tumores difusos, o grupo com < 55 anos, o alelo A de MLH1 -93 (G>A) foi associado à proteção e o alelo G de APE1 (T>G) foi associado com o risco em homens neste grupo de idade. O alelo G de APE1 (T>G) também foi associado à ausência de metástase a distância e o alelo A de MLH1 (G>A) com ausência de metástase em linfonodos regionais. No subtipo intestinal, pacientes portadores do alelo G de APE1(T>G) foram significativamente infectados por cepas menos virulentas. No estudo com as cepas de H. pylori a maioria dos casos possuiu a ilha completa independente do subtipo histológico. Os genes cagA e cagE estavam presentes na maioria das cepas. Segundo as análises através do método da árvore de classificação, alguns genes como cagG e cagE (em cepas vacAs1) se mostraram fundamentais na separação dos subtipos histológicos de CG. A presença dos genes cagG e cagE concomitantemente, ou ausência de cagG in H. pylori parece classificar o tumor em intestinal. Enquanto que a presença do gene cagG associado a ausência de cagE classifica os tumores em difusos. O genótipo cagM (+) cagG (+) com a presença do gene cagE classifica o tumor em intestinal , já na ausência de cagE, classifica os tumores em difusos. Em relação aos genes de adesão houve uma maior frequência do gene oipA, seguido de hopQI e hopQII. Em resumo, estes dados indicam que o genótipo de H. pylori , subtipo histológico, idade e gênero são importantes fatores a serem considerados em análises com polimorfismos. E apesar da complexidade de explicar quais são os fatores que contribuem para a separação das cepas nos subtipos intestinal e difuso, é notório que existem vias diferentes associadas a essas cepas. E que estes genes podem ser potenciais marcadores de diferentes subtipos histológicos.

MAIA, K. C. S. C. Marcadores de virulência do Helicobacter pylori em crianças e adolescentes residentes em uma comunidade de Fortaleza. 2015. 77 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-05-12T13:29:56Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_kcscmaia.pdf: 3185347 bytes, checksum: cea4102b239ee541c3a0365f6f9593c9 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-05-12T13:30:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_kcscmaia.pdf: 3185347 bytes, checksum: cea4102b239ee541c3a0365f6f9593c9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-12T13:30:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_kcscmaia.pdf: 3185347 bytes, checksum: cea4102b239ee541c3a0365f6f9593c9 (MD5) Previous issue date: 2015-09-29 / The Helicobacter pylori infect about half of the world’s population and is related to the development of gastric disorders. The infection is generally acquired during childhood and the bacterium demonstrates a high level of genotypic diversity, the expression of various genes that confer greater virulence strains. The aim of this study was to evaluate genetic markers of virulence of H. pylori strains in children and adolescents resident in the Community Parque Universitario in Fortaleza, Ceara. The gastric juice, for the culture and the DNA extraction of H. pylori, was collected from Enterotest. The genotyping of strains was carried out by the PCR technique. We evaluated 94 individuals, of which 61 (64.9%) H. pylori positive by culture and PCR for gene ureA, 30 (49.2%) males and 31 (50.8%) females. The age ranged 08-18 years, mean age of 12,82 + 3,052. The prevalence of genotypes was: 50/61 (82.0%) cagA, 26/61 (42.6%) cagE, 18/61 (29.5%) babA2, 14/61 (23.0%) homA, 13/61 (21.3%) homB, 31/61 (50.8%) homA/homB. There was no significant association of H. pylori genotypes with the genre, neither with age range of individuals. There was also no association of cagA with other genotypes, although it noted a strong association with homB (p = 0.057). The prevalence of cagE, babA2, and hom was much lower than that described in the literature for children and symptomatic adults, suggesting that, after infection in childhood, the individual strains may change during the course of infection. / O Helicobacter pylori infecta cerca de metade da população mundial e apresenta forte relação com as principais afecções gástricas. A aquisição desta bactéria ocorre principalmente na infância, e a mesma demonstra um alto nível de diversidade genotípica, pela expressão de vários genes que conferem maior patogenicidade a esse microorganismo. O objetivo do presente estudo foi avaliar marcadores genéticos de virulência das cepas de H. pylori em crianças e adolescentes residentes na comunidade Parque Universitário em Fortaleza, Ceará. O suco gástrico, utilizado para cultivo e extração do DNA do H. pylori, foi colhido através do Enteroteste. A genotipagem das cepas foi realizada através da técnica de PCR. Participaram do estudo 94 indivíduos, dos quais 61 (64,9%) foram positivos para H. pylori através da cultura e do PCR para o gene ureA, sendo 30 (49,2%) do gênero masculino e 31 (50,8%) do feminino. A idade variou de 08 a 18 anos, com média de 12,82 + 3,052. A prevalência dos genótipos estudados foi: 50/61 (82,0%) cagA, 26/61 (42,6%) cagE, 18/61 (29,5%) babA2, 14/61 (23,0%) homA, 13/61 (21,3%) homB, 31/61 (50,8%) homA/homB. Não houve associação significativa dos genótipos do H. pylori com gênero, nem tampouco com a faixa etária dos indivíduos. Também não houve associação de cagA com os demais genótipos, embora note-se uma forte tendência de associação deste com homB (p = 0,057). A prevalência encontrada para cagE, babA2 e hom foi abaixo do descrito na literatura para crianças e adultos sintomáticos, sugerindo que, após a infecção na infância, as cepas do indivíduo podem sofrer alterações durante o curso da infecção.

O patógeno gástrico Helicobacter pylori é uma espiroqueta microaerofílica que infecta o estômago humano, causando gastrite, úlcera e até câncer gástrico. Esta bactéria produz grandes quantidades da enzima urease, essencial para a sobrevivência deste organismo no ambiente ácido do estômago. No entanto, nosso grupo já demonstrou que ureases possuem propriedades independentes de sua atividade ureolítica em modelos mamíferos, através de rotas mediadas por derivados de lipoxigenases. Neste trabalho avaliamos o potencial pró-inflamatório da urease de H. pylori, além de seus efeitos em células epiteliais gástricas. A urease induz edema de pata em camundongos com intensa infiltração de neutrófilos. In vitro, a urease a 100 nM foi quimiotática para neutrófilos humanos, induzindo a produção de espécies reativas de oxigênio. Neutrófilos ativados por urease mostraram um aumento de meia-vida, com a inibição de apoptose sendo acompanhada por alterações nos conteúdos das proteínas Bcl-XL e Bad. Estes efeitos da urease persistem na ausência de atividade enzimática. Os efeitos de edema de pata em camundongos, quimiotaxia e proteção contra a apoptose em neutrófilos humanos foram revertidos na presença de inibidores de lipoxigenase, como esculetina e AA861. Neutrófilos expostos a urease mostraram elevados níveis de 5-lipoxigenase, e nenhuma alteração nos níveis de ciclo-oxigenases. Também observamos que a urease é endocitada por células AGS de epitélio gástrico, que ocorre via endossomos EEA1 e Lamp1-positivos e é dependente de colesterol. Adicionalmente, a urease induz a migração de células AGS em um experimento que simula o ensaio de wound-healing. A urease também estimula a expressão de GM-CSF. Juntos, estes dados indicam que a urease, além do papel na sobrevivência no ambiente ácido do estômago, tem um papel importante nas doenças inflamatórias estomacais causadas por H. pylori. / The gastric pathogen Helicobacter pylori produces large amounts of urease, whose enzyme activity enables the bacterium to survive in the stomach. We have previously shown that ureases display enzyme-independent effects in mammalian models, most through lipoxygenases-mediated pathways. Here, we evaluated potential pro-inflammatory properties of H. pylori urease and its effects in epithelial gastric cells. Urease induced paw edema with intense neutrophil infiltration. In vitro 100 nM urease was chemotactic to human neutrophils, inducing production of reactive oxygen species. Urease-activated neutrophils showed increased lifespan, with inhibition of apoptosis accompanied by alterations of Bcl-XL and Bad contents. These effects of urease persisted in the absence of enzyme activity. Urease-induced paw edema, neutrophil chemotaxis and apoptosis inhibition reverted in the presence of the lipoxygenase inhibitors esculetin or AA861. Neutrophils exposed to urease showed increased content of lipoxygenase(s) and no alteration of cyclooxygenase(s). We observed that the endocytosis occur via EEA1 and Lamp1 endosomes, and is dependent of lipid rafts. Additionally, the urease induces the migration of AGS cells in an experiment that simulates the wound healing assay. Urease also stimulates the over-expression of GM-CSF by AGS cells. Altogether, our data indicate that the urease, besides allowing the bacterial survival in the stomach, could play an important role in the pathogenesis of the gastrointestinal inflammatory disease caused by H. pylori.

Resumo não disponível

SILVA, Cicero Igor Simoes Moura. Genótipos cagA , vacA e alelos e sítios de fosfolilação de tirosina da proteína caga do h. pylori em pacientes com e sem história familiar de câncer gástrico. 2009. 73 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-18T14:08:21Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_cismsilva.pdf: 858659 bytes, checksum: d9ead253a62bca88b77a42f2664ed067 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-18T14:09:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_cismsilva.pdf: 858659 bytes, checksum: d9ead253a62bca88b77a42f2664ed067 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-18T14:09:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_cismsilva.pdf: 858659 bytes, checksum: d9ead253a62bca88b77a42f2664ed067 (MD5) Previous issue date: 2009 / The H. Pylori strains demonstrate a high level of phenotypic and genotypic diversity, the expression of various genes, which confer greater pathogenicity to the bacteria. Relatives of patients with gastric cancer have a higher risk of developing gastric diseases, especially if they are infected with more virulent strains of H. pylori. The objective was to characterize the strains of H. pylori, the presence of genes vacA, cagA, and sites of tyrosine phosphorylation of CagA protein - EPIYA in patients with and without family history of gastric cancer, and correlate the presence of the cagA gene to the level of activity and inflammation chronic gastritis. The genotyping of strains of H. pylori was performed by PCR and sequencing of the phosphorylation sites EPIYA. We evaluated 94 biopsy samples of gastric mucosa from dyspeptic patients H. pylori positive, 55 with a family history of gastric cancer and 39 without family history. All genotyped strains were vacA positive, and 45.7% with the vacA allele s1m1; s1m2 vacA 26.6%, 4.3% were vacA s2m1; 10.6% vacA s2m2; 3 hybrid strains and 9 (9.6 %) showed only the allele sequence signal (s). Of the 94 strains genotyped 87.2% were cagA positive, with no statistical difference between groups of familiar and unfamiliar (92.7% vs 82.0%, p = 0.058). The cagA gene was present in most patients with gastritis, with statistical significance in the group of relatives of cancer (p = 0.004). The degree of activity and inflammation of gastritis, was more significant in the group of patients with cagA positive strains, with pangastritis Corpal and gastritis. In the antrum, there were significant only in relation to the activity of gastritis. The studed strains, 93.9% showed EPIYA phosphorylation sites, with 59.2% of these had only one site, 38.2% with two sites and 2.6% with three sites. There was no statistical difference in the number of sites EPIYA between the groups. It is important to genetically characterize the strains of H. pylori to establish clearly its role in different clinical conditions related to it. Keywords: H. pylori. / Cepas de H. pylori demonstram um alto nível de diversidade fenotípica e genotípica, pela expressão de vários genes, que conferem maior patogenicidade à bactéria. Familiares de pacientes com câncer gástrico têm maior risco de desenvolver doenças gástricas, principalmente se forem infectados por cepas mais virulentas de H. pylori. O objetivo foi caracterizar as cepas de H. pylori, quanto à presença dos genes vacA, cagA e dos sítios de fosforilação de tirosina da proteína CagA – EPIYA, em pacientes com e sem história familiar de câncer gástrico, e correlacionar a presença do gene cagA com o grau de atividade e de inflamação da gastrite crônica. A genotipagem das cepas de H. pylori foi realizada através da técnica de PCR e do sequenciamento dos sítios de fosforilação EPIYA. Foram avaliados 94 fragmentos de biópsia de mucosa gástrica provenientes de pacientes dispépticos H. pylori positivo, 55 com história familiar de câncer gástrico e 39 sem historia familiar. Todas as cepas genotipadas foram vacA positivas, sendo 45,7% com o alelo vacA s1m1; 26,6% vacA s1m2; 4,3% eram vacA s2m1; 10,6% vacA s2m2; 3 cepas híbridas e 9 (9,6%) apresentaram somente o alelo da sequência sinal(s). Das 94 cepas genotipadas 87,2% foram cagA positivas, não havendo diferença estatística entre os grupos de familiares e não familiares (92,7% vs 82,0%; p= 0.058). O gene cagA estava presente na maioria dos pacientes portadores de gastrite, havendo significância estatística no grupo dos familiares de câncer (p= 0,004). O grau de atividade e inflamação da gastrite, foi mais significante no grupo de pacientes com cepas cagA positivo, com pangastrite e gastrite corpal. No antro, somente houve significância com relação à atividade da gastrite. Das cepas estudadas, 93,9% apresentaram sítios de fosforilação EPIYA, sendo que 59,2% destas apresentaram somente um sitio, 38,2% com dois sítios e 2,6% com três sítios. Não houve diferença estatística com relação ao número de sítios EPIYA, entre os grupos estudados. É importante a caracterização genética das cepas de H. pylori para se estabelecer com clareza o seu papel nos diversos quadros clínicos a ele relacionado.

Made available in DSpace on 2016-04-27T12:29:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 leticia_reis_ioc_mest_2015.pdf: 3103267 bytes, checksum: 648a377c84bdbc6ab7ad9515f306ad19 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Desde sua associação com as doenças gastroduodenais como a úlcera péptica, a gastrite crônica e o câncer gástrico em 1982, a infecção por Helicobacter pylori, é reconhecida como uma das mais prevalentes, infectando cerca de 50% da população mundial. No entanto, devido a sua imensa variabilidade na prevalência, nos fatores de virulência e no desfecho da infecção, estudos regionais são sempre recomendados. Por ser uma bactéria fastidiosa, H. pylori tem no seu isolamento um método demorado, não possuindo um meio de cultivo ideal e por isso apresenta diferentes resultados com esta metodologia. A histologia, é o método mais utilizado na prática para a detecção deste microrganismo, permitindo também a avaliação da mucosa gástrica e do seu grau de inflamação. Técnicas moleculares como reação em cadeia da polimerase também são muito usadas em pesquisas para detecção da bactéria e de genes de virulência, a exemplo, do gene cagA. Estudos demonstram que a presença deste gene pode caracterizar as linhagens de acordo com a maior intensidade da inflamação deflagrada nas regiões gástricas. No presente estudo, coletamos biópsias do antro e corpo gástrico de 72 pacientes entre 19 e 77 anos, com lesões gastroduodenais evidenciadas na endoscopia digestiva alta. O isolamento da bactéria a partir de fragmento do antro, foi realizado em meio Brucella com albuMAXII ®. Em 64% (46/72) das amostras visualizamos colônias puntiformes que imediatamente foram positivas no teste da urease O DNA destes isolados foram submetidos a PCRs para os genes glmM (codifica uma fosfoglucosamina mutase) e vacA (codifica a citotoxina vacuolizante VacA), obtendo-se amplificação em 91% (42/46) e em 82% (38/46) dos isolados, respectivamente. Para as amostras negativas em cultivo, procedemos à extração do DNA diretamente do tecido gástrico e posterior amplificação do gene glmM. Das 26 amostras testadas, o gene glmM foi amplificado em 4 (15%) amostras de tecido gástrico. Para caracterizar as linhagens, as amplificações também foram realizadas para o gene cagA, sendo este evidenciado em 65% (30/46) dos isolados. As análises histopatológicas a partir de biópsias do antro e corpo revelaram a bactéria em 77% (56/72) das amostras, além de avaliar o grau de inflamação nestas duas regiões. Estes achados foram então associados com as respectivas linhagens cagA+ e cagA-. Os resultados demonstraram atividade inflamatória moderada-acentuada no antro (54,1%-45,8%) e corpo (58,3%-37,5%) gástrico associados a linhagens cagA+, e também no antro associado a linhagens cagA- (46,1%-38,4%). No corpo gástrico, no entanto, resultados diferentes foram observados para as linhagens cagA- com amostras apresentando leve (46,1%) ou acentuado infiltrado inflamatório (38,4%). Esses dados podem representar a interação de outros fatores no desfecho da inflamação como polimorfismos nos genes relacionados a resposta inflamatória e ainda, a presença de outros genes de virulência nas linhagens estudadas / Since its association with gastroduodenal diseases such as peptic ulcer, chronic gastrites, and gastric cancer in 1982, Helicobacter pylori infection has been recognized as one of the most prevalent, infecting about 50% of the world population. However, due to its immense variability in prevalence, virulence factors and outcome of infection, regional studies are always recommended. Because it is a fastidious bacteria, H. pylori is a time-consuming in its isolation method, having no ideal culture medium and therefore presents different results with this methodology. Histology is the most common method in clinical practice for the detection of this microorganism, allowing the evaluation of the mucosa and the degree of inflammation. Molecular techniques such as polymerase chain reaction are also widely used in research to detect the bacteria and virulence genes, like cagA gene. Studies have shown that the presence of this gene may characterize the strains according to the greater intensity of inflammation triggered in gastric regions. In the present study, we collected biopsies of the gastric antrum and body of 72 patients, with ages between 19 and 77 years old, whose endoscopy showed gastroduodenal lesions. The isolation of the bacteria from an antral biopsy was accomplished in Brucella media with albuMAX II®. In 64% (46/72) of the samples, we visualized pinpoint colonies that were immediately positive in the urease test. We performed PCR assays on DNA from the isolates for the glmM (encodes for a phophoglucosamine mutase) and vacA (encodes the production of a vacuolating cytotoxin) genes, resulting in amplification of 91% (42/46) and 82% (38/46), respectively. For negative samples in culture, we proceed to DNA extraction directly from gastric tissue and subsequent amplification for the gene glmM. Of 26 samples tested, the glmM.gene was amplified in 4 (15%) of the gastric tissue samples. To characterize the strains, the amplifications were also performed for the cagA gene, which was evidenced in 65% (30/46) of the isolates. The histopathological analysis using samples of the gastric antrum and body, revealed the bacteria in 77% (56/72) of the samples besides evaluating the degree of inflammation in these two regions. These findings were then correlated with the respective cagA + and cagA- strains. The results showed moderate to severe inflammatory activity in the gastric antrum (54.1%-45.8%) and body (58.3%-37.5%) associated with cagA + strains and also in the antrum associated with cagA- strains (46.1%-38.4). In the gastric body, however, different results were observed for cagA- strains with samples presenting mild (46.1%) or severe (38.4%) inflammatory infiltrate. Such data may represent the interaction of other factors in the outcome of inflammation as polymorphisms in the genes related to inflammatory response, and the presence of other virulence genes in the studied strains. / 2017-02-01