FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / Um estudo transversal sobre a utilizaÃÃo de medicamentos fitoterÃpicos nas Unidades BÃsicas de AtenÃÃo à SaÃde da FamÃlia (UBASF) do municÃpio de MaracanaÃ-Ce foi realizado em duas etapas entre agosto de 2002 e janeiro de 2003; Primeiramente, foram entrevistados nas farmÃcias das UBASF, mediante questionÃrio estruturado, 226 usuÃrios maiores de 18 anos, com prescriÃÃo contendo medicamento fitoterÃpico; e posteriormente, utilizando-se metodologia qualitativa, foram selecionados 12 prescritores (6 mÃdicos e 6 enfermeiros) e 12 usuÃrios para um estudo aprofundado sobre a fitoterapia, considerando os aspectos sÃcio-culturais que envolvem tal prÃtica. Esta etapa foi realizada mediante entrevistas semi-estruturadas, gravadas, nos respectivos consultÃrios e residÃncias. Dos 226 usuÃrios entrevistados, 85,4% foram do sexo feminino e 14,6% do masculino, com mÃdia de idade de 38 anos; 94,2% receberam explicaÃÃo do prescritor quanto ao uso do fitoterÃpico; apenas 27,0% relacionaram o fitoterÃpico ao Programa farmÃcias Vivas; 63,1% jà havia utilizando o fitoterÃpico antes, dentre os quais, a maioria relatou sua eficiÃncia terapÃutica. Dos 542 medicamentos prescritos, 58% foram alopÃticos e 41,7% fitoterÃpicos; a mÃdia de medicamentos por prescriÃÃo foi de 2,39 e a mÃdia de fitoterÃpicos foi de 1,01%. Os fitoterÃpicos mais prescritos foram: o Xarope Expectorante (63,8%), o Sabonete de Alecrim (11,4%) e a Tintura de Mororà (11,4%). Dentre os 12 prescritores entrevistados, 91,66% afirmaram que prescrevem medicamentos fitoterÃpicos com freqÃÃncia e reconhecem sua eficiÃncia terapÃutica; o fator econÃmico tambÃm foi constantemente citado. Foi observada a homogeneidade das opiniÃes entre mÃdicos e enfermeiros; 100% dos prescritores reclamaram a quantidade insuficiente dos fitoterÃpicos em relaÃÃo à demanda. Dos 12 usurÃrios entrevistados nas residÃncias, todos demonstraram sua crenÃa na eficiÃncia dos fitoterÃpicos (caseiros ou das UBASF), geralmente relacionada à origem ânaturalâ dos mesmos, conceito legado da cultura empÃrica da comunidade; a referÃncia ao fator econÃmico como justificativa para o uso de produtos fitoterÃpicos foi insignificante. O presente estudo demonstrou que a Fitoterapia em Maracanaà à bastante aceita por usuÃrios e prescritores. Entretanto, o paÃs necessita de uma legislaÃÃo especÃfica para a produÃÃo de fitoterÃpicos na atenÃÃo primaria, que forneÃa subsÃdios aos Programas de Fitoterapia, no que concerne à realizaÃÃo de estudos de eficÃcia e toxicidade dos medicamentos produzidos, e de aÃÃes de FarmacovigilÃncia e controle de qualidade na produÃÃo e uso racional dos mesmos

Le Gentiopicroside (GPS) est un secoiridoïde isolé de Gentiana lutea qui est appelé Qin Jiao en chinois. C'est l'une des plantes médicinales les plus couramment utilisée en Chine. Le GPS a des activités biologiques et pharmacologiques allant des propriétés antiviral, anti-inflammatoire, analgésique, anti-hépatotoxique et cholérétiques. Toutefois, la modification structurelle et la synthèse totale du GPS est toujours un défi pour les chimistes organiciens.Dans ce mémoire, nous avons traité la conception, la synthèse et l'évaluation pharmacologique d'une série de composés dérivés du GPS comme inhibiteurs potentiels du virus de l'hépatite C (HCV). Certaines fonctions communes dans la conception de médicaments, tels que des halogènes, du soufre, de l'azoture et un groupe amino, ont été introduites au fragment sucre du GPS. Dans le même temps, nous avons étudié trois approches pour synthétiser la partie aglycone du GPS, deux d'entre elles sont basées sur des cycloadditions [3+3] inter- ou intramoléculaire organocatalyzées à partir des aldéhydes insaturés B et D. La troisième est basée sur le réarrangement d'énol-esters α,β-insaturés F, catalysé par un N-hétérocyclique carbène (NHC). L'intermédiaire commun pour ces approches est un ester insaturé A qui a été préparé en quatre étapes à partir de D-(-)-mannitol et de méthylcrotonate commerciaux. La cycloaddition [3+3] entre l'énal 54 et l'énol stabilisé 59 ne fournit pas le cyclo-adduit attendu même si sur un modèle de réaction les 3,4-dihydropyranne 68 et pyranone 69 ont été formées. Le traitement de l'énol-ester 77 avec un NHC donne un accès à un précurseur potentiel dans la synthèse totale du GPS. / Gentiopicroside (GPS) is a secoiridoid compound isolated from Gentiana lutea which is called Qin Jiao in Chinese. It is one of the most common herbal medicines used in China. The biological and pharmacological activities of GPS contain antiviral, anti-inflammatory, analgesia, antihepatotoxic and choleretic activities. GPS is involved in ongoing phase III clinical trials as the first class new drug. However, the structural modifications and total synthesis of GPS is still a challenge for organic chemists.In this thesis we have processed the design, synthesis and pharmacological evaluation of a series of GPS derivatives as potential hepatitis C virus (HCV) entry inhibitors. Some common functional elements in drug design, such as halogen, sulfur, azide and amino group, have been successfully introduced on the sugar moiety of GPS. In the mean time, we studied three approaches to synthesize the aglycone part of GPS. Two of them are based on organocatalyzed inter- or intramolecular [3+3] cycloadditions from unsaturated aldehydes B and D. The third one was based on an NHC-catalysed rearrangement of α,β-unsaturated enol-esters F. The common key intermediate for these approaches was the unsaturated ester A which was prepared in four steps from commercially available D-(-)-manitol and methylcrotonate. The formal [3+3] cycloaddition between enal 54 and the stabilized enol 59 did not provide the expected cyclo-adduct even if on a model reaction 3,4-dihydropyran 68 and pyranone 69 were formed. The α-substituted position of enal 54 could explain this default in reactivity under proline organocatalysis. The treatment of enol-ester 77 with N-Heterocyclic-Carbene gave an access to the advanced precursor 78 potentially useful in the total synthesis of GPS.

No / New antimalarial drugs are urgently needed to combat emerging multidrug resistant strains of malaria parasites. This Highlight focuses on plant-derived natural products that are of interest as potential leads towards new antimalarial drugs including synthetic analogues of natural compounds, with the exception of artemisinin derivatives, which are not included due to limited space. Since effective antimalarial treatment is often unavailable or unaffordable to many of those who need it, there is increasing interest in the development of locally produced herbal medicines; recent progress in this area will also be reviewed in this Highlight.

Numerous natural products are widely used as first-line/alternative therapeutics and dietary supplements in both western and eastern society. However, the safety and efficacy profiles for herbal products are still limited. Organic anion transporters (OATs; SLC22 family) are expressed in many barrier organs and mediate in vivo body disposition of a broad array of endogenous substances and clinically important drugs. As some dietary flavonoids and phenolic acids were previously demonstrated to interact with OATs, it is necessary to explore the potential interaction of such components found in natural products in order to avoid potential OAT-mediated drug-drug interactions (DDIs). The inhibitory effects of 23 natural products were assessed on the function of human (h) OATs, hOAT1 (SLC22A6), hOAT3 (SLC22A7), and hOAT4 (SLC22A11) and/or the murine (m) orthologs mOat1 and mOat3. For compounds exhibiting marked inhibition at initial screening, dose-response curves (IC50 values) and DDI indices were determined. At the initial screening concentrations, 14, 19, and 2 test compounds exhibited significant inhibition on hOAT1, hOAT3, and hOAT4, respectively. Additionally, all test Danshen (a Chinese herbal medicine) hydrophilic components significantly reduced mOat1- and mOat3-mediated substrate uptake at 1 mM. For selected compounds, the IC50 and Ki values were estimated to be in the micromolar or even nanomolar range. Considering the clinical plasma concentration and unbound fraction in plasma, DDI indices for gallic acid, gentisic acid, lithospermic acid, protocatechuic acid, rosmarinic acid, salvianolic acid B, and tanshinol indicated DDIs may occur in vivo in situations of co-administration of these compounds and clinical therapeutics known to be OAT substrates. Finally, a new, rapid, and sensitive liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method was developed and validated to quantify gallic acid and gentisic acid in cell lysates in order to measure cellular uptake of these compounds in mOat1- or mOat3-expressing cells. Significant cellular uptake of gallic acid was observed in mOat1-expressing cells, compared with background control cells. The absorptive uptake was completely blocked by probenecid (known OAT inhibitor) at 1 mM. These results indicate that gallic acid is a substrate for mOat1 and suggest that human OAT1 might be involved in the active renal secretion of gallic acid.

As partes aéreas de Equisetum giganteum L. (Equisetaceae), espécie nativa da América do Sul, denominada cavalinha e rabo-de-cavalo, são utilizadas popularmente sob a forma de infuso ou decocto no tratamento de afecções urinárias e hepáticas e principalmente como diurética, hemostática, adstringente, remineralizante e emagrecedora. Entretanto, poucos estudos científicos foram realizados envolvendo esta espécie. Quanto às propriedades biológicas de seus extratos, têm sido relatadas atividades diurética e antimicrobiana, e ausência de efeitos tóxicos agudos em camundongos, quando administrados por via oral. Considerando a ampla disponibilidade de E. giganteum no mercado brasileiro e o seu potencial terapêutico, torna-se necessária a definição de parâmetros de controle de qualidade para a matéria-prima vegetal, bem como o desenvolvimento de produtos padronizados. Assim, este trabalho objetivou avaliar parâmetros de controle de qualidade e estabelecer critérios químicos que permitam diferenciar E. giganteum de outras espécies do gênero e, a partir de uma solução extrativa aquosa, desenvolver extrato seco por spray drying e caracterizá-lo. Para isso, partes aéreas de E. giganteum e outras espécies disponíveis foram utilizadas. Análises comparativas destas amostras foram realizadas por CCD, CLAE e teor de flavonóides totais. Para E. giganteum, o teor de cinzas, os constituintes fenólicos e flavonóides totais foram determinados por método espectrofotométrico no UV/VIS. Análise por CCD foi realizada em placas de gel de sílica; fase móvel acetato de etila:ácido fórmico:ácido acético glacial:água (100:11:11:26); e detecção com reagente Natural / UV a 365 nm. Análises por CLAE dos extratos metanólicos foram realizadas empregando coluna de fase-reversa (C18) e detector de arranjo de diodos. O material vegetal foi também submetido à hidrólise ácida, a qual foi otimizada empregando Desenho Composto Central Rotacional e Análise de Superfície de Resposta para investigar os efeitos da concentração de HCl e do tempo de hidrólise. As agliconas correspondentes aos flavonóides heterosídicos foram extraídas e analisadas por método de CLAE previamente validado. O teor de flavonóides totais foi avaliado por ensaio colorimétrico com cloreto de alumínio a 425 nm. Análises por CLAE-DAD e CLAE-EM/EM também foram realizadas na intenção de caracterizar os compostos fenólicos presentes em E. giganteum. Uma solução extrativa aquosa foi obtida por decocção a partir da matéria-prima vegetal e posteriormente seca por spray drying empregando equipamento NIRO® atomizer semi-industrial. O extrato seco obtido foi então caracterizado. Os resultados demonstraram para E. giganteum um teor de cinzas totais e insolúveis em ácido (a 600ºC) respectivamente de 20,07 ± 0,21% e 13,75 ± 0,39%. O teor de fenólicos totais foi de 7,27 ± 0,05 mg equivalente a ácido gálico por grama, e de 0,420 ± 0,014 g% para os flavonóides totais. Na análise por CCD de E. giganteum foi verificada a presença de manchas características de polifenóis, sendo que, na análise por CLAE, alguns constituintes apresentaram espectro de UV característicos de derivados do ácido cinâmico e do canferol A diferenciação entre E. giganteum e E. arvense, e em menor extensão para E. hyemale e E. bogotense, foi possível através do perfil cromatográfico obtido nas análises por CCD e CLAE. A possível presença de tiamina foi caracterizada por CCD nestas amostras. Nas condições ótimas de hidrólise determinadas para E. giganteum, canferol e, em menor teor, quercetina foram encontradas. A análise comparativa das agliconas dos flavonóides por CLAE e dos flavonóides totais por espectrofotometria revelou similaridades químicas entre E. giganteum, E. hyemale e E. bogotense, mas não para E. arvense, o qual apresentou um perfil de agliconas distinto. A maior parte dos compostos fenólicos puderam ser caracterizados em E. giganteum por meio da análise por CLAE-EM/EM, sendo encontrado principalmente derivados heterosídicos do canferol, mas também outros compostos fenólicos raros. A obtenção de extrato seco por spray drying a partir de solução extrativa aquosa de E. giganteum mostrou-se viável, com alto rendimento do processo (85,6%). O produto foi caracterizado como um pó fino com baixa densidade, baixa fluidez e alta umidade residual, mas baixa atividade de água. Com relação a sua composição química, o extrato seco apresentou alto teor de minerais e açúcares redutores. A presença na droga vegetal e no extrato seco de E. giganteum de alto teor de minerais, corrobora seu uso como remineralizante. Os resultados obtidos neste trabalho representam as primeiras contribuições para o estabelecimento de parâmetros e métodos para a caracterização e o controle de qualidade da droga vegetal de E. giganteum. A viabilidade de produção e a caracterização do extrato seco obtido contribuem para o desenvolvimento de novos produtos farmacêuticos e a avaliação de outras atividades biológicas. / Aerial stems of Equisetum giganteum L. (Equisetaceae, traditional name: ‘‘horsetail’’), a native plant from South America, are used in folk medicine for treating kidney and hepatic illness, due to their diuretic, hemosthatic, adstringent, remineralizant and weight loss properties. However, few scientific studies have been performed regarding this species. Concerning the biological properties, diuretic and antimicrobial activities, as well as no oral acute toxicity in mice have been reported. Considering the large availability of the E. giganteum in the Brazilian market and its therapeutic potential, the definition of the quality control parameters for the raw material, as well as the development of standardized products with well-established biological activities becomes necessary. Thus, the aim of this work was to establish identification methods and to evaluate quality control parameters for the E. giganteum raw material in order to compare this species with others of the genus, as well as to develop and to characterize a spray-dried product from an aqueous E. giganteum extractive solution. Dried aerial stems of E. giganteum and other species available were employed in the comparative analysis by TLC, HPLC and UV/VIS total flavonoid content. The ash content was determined. Total phenolic and flavonoid contents were determined by UV/VIS spectrophotometric method. The TLC analysis was carried out on silica gel plates; mobile phase ethyl acetate:formic acid:glacial acetic acid:water (100:11:11:26); and detection with Natural Product reagent / UV at 365 nm. HPLC analysis of methanol extracts was performed with a C18 column and a diode-array detector. The plant raw material was also submitted to acid hydrolysis which was optimized using Central Composite Rotational Design and Response Surface Analysis for investigate the effects of HCl concentration and hydrolysis time. The corresponding flavonoid aglycones were extracted and analyzed by a previously validated HPLC method. Total flavonoid content was measured also by aluminium chloride colorimetric assay at 425 nm. In attempt to characterize phenolic compounds in E. giganteum, HPLC-DAD and HPLC-MS/MS analysis were performed. An aqueous extractive solution (AES) was prepared by decoction of E. giganteum grounded stems using water. The resulting AES was spray-dried using a Niro Production Minor equipped with rotary atomizer (GEA, Copenhagen, Denmark). The spray-dried extract was then characterized. The content of total ash and acidinsoluble ash (at 600 °C) in E. giganteum stems were 20.07 ± 0.21% and 13.75 ± 0.39% (mean ± S.D.), respectively. The total phenolic content was 7.27 ± 0.05 mg expressed as gallic acid equivalent per gram (GAE/g), and the total flavonoid content was 0.420 ± 0.014 g% (w/w). In the TLC of E. giganteum was verified the presence of spots characteristic of polyphenols. The HPLC fingerprint revealed the existence of some constituents with UV spectra characteristics of cinnamic acid and kaempferol derivatives. The differentiation between E. giganteum and E. arvense, and in a minor extension for E. hyemale and E. bogotense, was possible by the chromatographic profile in TLC and HPLC analysis. The possible presence of thiamine was characterized by TLC in these samples. In the optimum condition found for hydrolysis of E. giganteum raw material, quercetin and kaempferol aglicones were found. The comparative analysis of flavonoids aglycones using HPLC and total flavonoids spectrophotometric methods revealed similarities between E. giganteum, E. hyemale and E. bogotense, but not for E. arvense, which showed a distinct profile of aglycones. The HPLC-MS/MS analysis of E. giganteum hydroethanol extractive solution allowed to characterize some flavonoids heterosides, mainly quercetin and kaempferol derivatives, and other rare compounds. The spray-dried extract (SDE) of E. giganteum was obtained with a high process yield (85.6%) and characterized as a very fine powder with low density, poor flowability and high loss on drying, but low water activity. The high content of reducing sugars and minerals, represented by total ash, was also observed in the SDE and can explain some these characteristics. The high content of sugars and minerals in the SDE also corroborate the traditional use of the plant as remineralizant. The results obtained in this study represent one of the first contributions to the establishment of parameters and methods for the characterization and quality control of raw material of E. giganteum. The feasibility of production and subsequent characterization of dried extract obtained contributes to the development of new pharmaceuticals products and to the evaluation of new biological activities.

As partes aéreas de Equisetum giganteum L. (Equisetaceae), espécie nativa da América do Sul, denominada cavalinha e rabo-de-cavalo, são utilizadas popularmente sob a forma de infuso ou decocto no tratamento de afecções urinárias e hepáticas e principalmente como diurética, hemostática, adstringente, remineralizante e emagrecedora. Entretanto, poucos estudos científicos foram realizados envolvendo esta espécie. Quanto às propriedades biológicas de seus extratos, têm sido relatadas atividades diurética e antimicrobiana, e ausência de efeitos tóxicos agudos em camundongos, quando administrados por via oral. Considerando a ampla disponibilidade de E. giganteum no mercado brasileiro e o seu potencial terapêutico, torna-se necessária a definição de parâmetros de controle de qualidade para a matéria-prima vegetal, bem como o desenvolvimento de produtos padronizados. Assim, este trabalho objetivou avaliar parâmetros de controle de qualidade e estabelecer critérios químicos que permitam diferenciar E. giganteum de outras espécies do gênero e, a partir de uma solução extrativa aquosa, desenvolver extrato seco por spray drying e caracterizá-lo. Para isso, partes aéreas de E. giganteum e outras espécies disponíveis foram utilizadas. Análises comparativas destas amostras foram realizadas por CCD, CLAE e teor de flavonóides totais. Para E. giganteum, o teor de cinzas, os constituintes fenólicos e flavonóides totais foram determinados por método espectrofotométrico no UV/VIS. Análise por CCD foi realizada em placas de gel de sílica; fase móvel acetato de etila:ácido fórmico:ácido acético glacial:água (100:11:11:26); e detecção com reagente Natural / UV a 365 nm. Análises por CLAE dos extratos metanólicos foram realizadas empregando coluna de fase-reversa (C18) e detector de arranjo de diodos. O material vegetal foi também submetido à hidrólise ácida, a qual foi otimizada empregando Desenho Composto Central Rotacional e Análise de Superfície de Resposta para investigar os efeitos da concentração de HCl e do tempo de hidrólise. As agliconas correspondentes aos flavonóides heterosídicos foram extraídas e analisadas por método de CLAE previamente validado. O teor de flavonóides totais foi avaliado por ensaio colorimétrico com cloreto de alumínio a 425 nm. Análises por CLAE-DAD e CLAE-EM/EM também foram realizadas na intenção de caracterizar os compostos fenólicos presentes em E. giganteum. Uma solução extrativa aquosa foi obtida por decocção a partir da matéria-prima vegetal e posteriormente seca por spray drying empregando equipamento NIRO® atomizer semi-industrial. O extrato seco obtido foi então caracterizado. Os resultados demonstraram para E. giganteum um teor de cinzas totais e insolúveis em ácido (a 600ºC) respectivamente de 20,07 ± 0,21% e 13,75 ± 0,39%. O teor de fenólicos totais foi de 7,27 ± 0,05 mg equivalente a ácido gálico por grama, e de 0,420 ± 0,014 g% para os flavonóides totais. Na análise por CCD de E. giganteum foi verificada a presença de manchas características de polifenóis, sendo que, na análise por CLAE, alguns constituintes apresentaram espectro de UV característicos de derivados do ácido cinâmico e do canferol A diferenciação entre E. giganteum e E. arvense, e em menor extensão para E. hyemale e E. bogotense, foi possível através do perfil cromatográfico obtido nas análises por CCD e CLAE. A possível presença de tiamina foi caracterizada por CCD nestas amostras. Nas condições ótimas de hidrólise determinadas para E. giganteum, canferol e, em menor teor, quercetina foram encontradas. A análise comparativa das agliconas dos flavonóides por CLAE e dos flavonóides totais por espectrofotometria revelou similaridades químicas entre E. giganteum, E. hyemale e E. bogotense, mas não para E. arvense, o qual apresentou um perfil de agliconas distinto. A maior parte dos compostos fenólicos puderam ser caracterizados em E. giganteum por meio da análise por CLAE-EM/EM, sendo encontrado principalmente derivados heterosídicos do canferol, mas também outros compostos fenólicos raros. A obtenção de extrato seco por spray drying a partir de solução extrativa aquosa de E. giganteum mostrou-se viável, com alto rendimento do processo (85,6%). O produto foi caracterizado como um pó fino com baixa densidade, baixa fluidez e alta umidade residual, mas baixa atividade de água. Com relação a sua composição química, o extrato seco apresentou alto teor de minerais e açúcares redutores. A presença na droga vegetal e no extrato seco de E. giganteum de alto teor de minerais, corrobora seu uso como remineralizante. Os resultados obtidos neste trabalho representam as primeiras contribuições para o estabelecimento de parâmetros e métodos para a caracterização e o controle de qualidade da droga vegetal de E. giganteum. A viabilidade de produção e a caracterização do extrato seco obtido contribuem para o desenvolvimento de novos produtos farmacêuticos e a avaliação de outras atividades biológicas. / Aerial stems of Equisetum giganteum L. (Equisetaceae, traditional name: ‘‘horsetail’’), a native plant from South America, are used in folk medicine for treating kidney and hepatic illness, due to their diuretic, hemosthatic, adstringent, remineralizant and weight loss properties. However, few scientific studies have been performed regarding this species. Concerning the biological properties, diuretic and antimicrobial activities, as well as no oral acute toxicity in mice have been reported. Considering the large availability of the E. giganteum in the Brazilian market and its therapeutic potential, the definition of the quality control parameters for the raw material, as well as the development of standardized products with well-established biological activities becomes necessary. Thus, the aim of this work was to establish identification methods and to evaluate quality control parameters for the E. giganteum raw material in order to compare this species with others of the genus, as well as to develop and to characterize a spray-dried product from an aqueous E. giganteum extractive solution. Dried aerial stems of E. giganteum and other species available were employed in the comparative analysis by TLC, HPLC and UV/VIS total flavonoid content. The ash content was determined. Total phenolic and flavonoid contents were determined by UV/VIS spectrophotometric method. The TLC analysis was carried out on silica gel plates; mobile phase ethyl acetate:formic acid:glacial acetic acid:water (100:11:11:26); and detection with Natural Product reagent / UV at 365 nm. HPLC analysis of methanol extracts was performed with a C18 column and a diode-array detector. The plant raw material was also submitted to acid hydrolysis which was optimized using Central Composite Rotational Design and Response Surface Analysis for investigate the effects of HCl concentration and hydrolysis time. The corresponding flavonoid aglycones were extracted and analyzed by a previously validated HPLC method. Total flavonoid content was measured also by aluminium chloride colorimetric assay at 425 nm. In attempt to characterize phenolic compounds in E. giganteum, HPLC-DAD and HPLC-MS/MS analysis were performed. An aqueous extractive solution (AES) was prepared by decoction of E. giganteum grounded stems using water. The resulting AES was spray-dried using a Niro Production Minor equipped with rotary atomizer (GEA, Copenhagen, Denmark). The spray-dried extract was then characterized. The content of total ash and acidinsoluble ash (at 600 °C) in E. giganteum stems were 20.07 ± 0.21% and 13.75 ± 0.39% (mean ± S.D.), respectively. The total phenolic content was 7.27 ± 0.05 mg expressed as gallic acid equivalent per gram (GAE/g), and the total flavonoid content was 0.420 ± 0.014 g% (w/w). In the TLC of E. giganteum was verified the presence of spots characteristic of polyphenols. The HPLC fingerprint revealed the existence of some constituents with UV spectra characteristics of cinnamic acid and kaempferol derivatives. The differentiation between E. giganteum and E. arvense, and in a minor extension for E. hyemale and E. bogotense, was possible by the chromatographic profile in TLC and HPLC analysis. The possible presence of thiamine was characterized by TLC in these samples. In the optimum condition found for hydrolysis of E. giganteum raw material, quercetin and kaempferol aglicones were found. The comparative analysis of flavonoids aglycones using HPLC and total flavonoids spectrophotometric methods revealed similarities between E. giganteum, E. hyemale and E. bogotense, but not for E. arvense, which showed a distinct profile of aglycones. The HPLC-MS/MS analysis of E. giganteum hydroethanol extractive solution allowed to characterize some flavonoids heterosides, mainly quercetin and kaempferol derivatives, and other rare compounds. The spray-dried extract (SDE) of E. giganteum was obtained with a high process yield (85.6%) and characterized as a very fine powder with low density, poor flowability and high loss on drying, but low water activity. The high content of reducing sugars and minerals, represented by total ash, was also observed in the SDE and can explain some these characteristics. The high content of sugars and minerals in the SDE also corroborate the traditional use of the plant as remineralizant. The results obtained in this study represent one of the first contributions to the establishment of parameters and methods for the characterization and quality control of raw material of E. giganteum. The feasibility of production and subsequent characterization of dried extract obtained contributes to the development of new pharmaceuticals products and to the evaluation of new biological activities.

As partes aéreas de Equisetum giganteum L. (Equisetaceae), espécie nativa da América do Sul, denominada cavalinha e rabo-de-cavalo, são utilizadas popularmente sob a forma de infuso ou decocto no tratamento de afecções urinárias e hepáticas e principalmente como diurética, hemostática, adstringente, remineralizante e emagrecedora. Entretanto, poucos estudos científicos foram realizados envolvendo esta espécie. Quanto às propriedades biológicas de seus extratos, têm sido relatadas atividades diurética e antimicrobiana, e ausência de efeitos tóxicos agudos em camundongos, quando administrados por via oral. Considerando a ampla disponibilidade de E. giganteum no mercado brasileiro e o seu potencial terapêutico, torna-se necessária a definição de parâmetros de controle de qualidade para a matéria-prima vegetal, bem como o desenvolvimento de produtos padronizados. Assim, este trabalho objetivou avaliar parâmetros de controle de qualidade e estabelecer critérios químicos que permitam diferenciar E. giganteum de outras espécies do gênero e, a partir de uma solução extrativa aquosa, desenvolver extrato seco por spray drying e caracterizá-lo. Para isso, partes aéreas de E. giganteum e outras espécies disponíveis foram utilizadas. Análises comparativas destas amostras foram realizadas por CCD, CLAE e teor de flavonóides totais. Para E. giganteum, o teor de cinzas, os constituintes fenólicos e flavonóides totais foram determinados por método espectrofotométrico no UV/VIS. Análise por CCD foi realizada em placas de gel de sílica; fase móvel acetato de etila:ácido fórmico:ácido acético glacial:água (100:11:11:26); e detecção com reagente Natural / UV a 365 nm. Análises por CLAE dos extratos metanólicos foram realizadas empregando coluna de fase-reversa (C18) e detector de arranjo de diodos. O material vegetal foi também submetido à hidrólise ácida, a qual foi otimizada empregando Desenho Composto Central Rotacional e Análise de Superfície de Resposta para investigar os efeitos da concentração de HCl e do tempo de hidrólise. As agliconas correspondentes aos flavonóides heterosídicos foram extraídas e analisadas por método de CLAE previamente validado. O teor de flavonóides totais foi avaliado por ensaio colorimétrico com cloreto de alumínio a 425 nm. Análises por CLAE-DAD e CLAE-EM/EM também foram realizadas na intenção de caracterizar os compostos fenólicos presentes em E. giganteum. Uma solução extrativa aquosa foi obtida por decocção a partir da matéria-prima vegetal e posteriormente seca por spray drying empregando equipamento NIRO® atomizer semi-industrial. O extrato seco obtido foi então caracterizado. Os resultados demonstraram para E. giganteum um teor de cinzas totais e insolúveis em ácido (a 600ºC) respectivamente de 20,07 ± 0,21% e 13,75 ± 0,39%. O teor de fenólicos totais foi de 7,27 ± 0,05 mg equivalente a ácido gálico por grama, e de 0,420 ± 0,014 g% para os flavonóides totais. Na análise por CCD de E. giganteum foi verificada a presença de manchas características de polifenóis, sendo que, na análise por CLAE, alguns constituintes apresentaram espectro de UV característicos de derivados do ácido cinâmico e do canferol A diferenciação entre E. giganteum e E. arvense, e em menor extensão para E. hyemale e E. bogotense, foi possível através do perfil cromatográfico obtido nas análises por CCD e CLAE. A possível presença de tiamina foi caracterizada por CCD nestas amostras. Nas condições ótimas de hidrólise determinadas para E. giganteum, canferol e, em menor teor, quercetina foram encontradas. A análise comparativa das agliconas dos flavonóides por CLAE e dos flavonóides totais por espectrofotometria revelou similaridades químicas entre E. giganteum, E. hyemale e E. bogotense, mas não para E. arvense, o qual apresentou um perfil de agliconas distinto. A maior parte dos compostos fenólicos puderam ser caracterizados em E. giganteum por meio da análise por CLAE-EM/EM, sendo encontrado principalmente derivados heterosídicos do canferol, mas também outros compostos fenólicos raros. A obtenção de extrato seco por spray drying a partir de solução extrativa aquosa de E. giganteum mostrou-se viável, com alto rendimento do processo (85,6%). O produto foi caracterizado como um pó fino com baixa densidade, baixa fluidez e alta umidade residual, mas baixa atividade de água. Com relação a sua composição química, o extrato seco apresentou alto teor de minerais e açúcares redutores. A presença na droga vegetal e no extrato seco de E. giganteum de alto teor de minerais, corrobora seu uso como remineralizante. Os resultados obtidos neste trabalho representam as primeiras contribuições para o estabelecimento de parâmetros e métodos para a caracterização e o controle de qualidade da droga vegetal de E. giganteum. A viabilidade de produção e a caracterização do extrato seco obtido contribuem para o desenvolvimento de novos produtos farmacêuticos e a avaliação de outras atividades biológicas. / Aerial stems of Equisetum giganteum L. (Equisetaceae, traditional name: ‘‘horsetail’’), a native plant from South America, are used in folk medicine for treating kidney and hepatic illness, due to their diuretic, hemosthatic, adstringent, remineralizant and weight loss properties. However, few scientific studies have been performed regarding this species. Concerning the biological properties, diuretic and antimicrobial activities, as well as no oral acute toxicity in mice have been reported. Considering the large availability of the E. giganteum in the Brazilian market and its therapeutic potential, the definition of the quality control parameters for the raw material, as well as the development of standardized products with well-established biological activities becomes necessary. Thus, the aim of this work was to establish identification methods and to evaluate quality control parameters for the E. giganteum raw material in order to compare this species with others of the genus, as well as to develop and to characterize a spray-dried product from an aqueous E. giganteum extractive solution. Dried aerial stems of E. giganteum and other species available were employed in the comparative analysis by TLC, HPLC and UV/VIS total flavonoid content. The ash content was determined. Total phenolic and flavonoid contents were determined by UV/VIS spectrophotometric method. The TLC analysis was carried out on silica gel plates; mobile phase ethyl acetate:formic acid:glacial acetic acid:water (100:11:11:26); and detection with Natural Product reagent / UV at 365 nm. HPLC analysis of methanol extracts was performed with a C18 column and a diode-array detector. The plant raw material was also submitted to acid hydrolysis which was optimized using Central Composite Rotational Design and Response Surface Analysis for investigate the effects of HCl concentration and hydrolysis time. The corresponding flavonoid aglycones were extracted and analyzed by a previously validated HPLC method. Total flavonoid content was measured also by aluminium chloride colorimetric assay at 425 nm. In attempt to characterize phenolic compounds in E. giganteum, HPLC-DAD and HPLC-MS/MS analysis were performed. An aqueous extractive solution (AES) was prepared by decoction of E. giganteum grounded stems using water. The resulting AES was spray-dried using a Niro Production Minor equipped with rotary atomizer (GEA, Copenhagen, Denmark). The spray-dried extract was then characterized. The content of total ash and acidinsoluble ash (at 600 °C) in E. giganteum stems were 20.07 ± 0.21% and 13.75 ± 0.39% (mean ± S.D.), respectively. The total phenolic content was 7.27 ± 0.05 mg expressed as gallic acid equivalent per gram (GAE/g), and the total flavonoid content was 0.420 ± 0.014 g% (w/w). In the TLC of E. giganteum was verified the presence of spots characteristic of polyphenols. The HPLC fingerprint revealed the existence of some constituents with UV spectra characteristics of cinnamic acid and kaempferol derivatives. The differentiation between E. giganteum and E. arvense, and in a minor extension for E. hyemale and E. bogotense, was possible by the chromatographic profile in TLC and HPLC analysis. The possible presence of thiamine was characterized by TLC in these samples. In the optimum condition found for hydrolysis of E. giganteum raw material, quercetin and kaempferol aglicones were found. The comparative analysis of flavonoids aglycones using HPLC and total flavonoids spectrophotometric methods revealed similarities between E. giganteum, E. hyemale and E. bogotense, but not for E. arvense, which showed a distinct profile of aglycones. The HPLC-MS/MS analysis of E. giganteum hydroethanol extractive solution allowed to characterize some flavonoids heterosides, mainly quercetin and kaempferol derivatives, and other rare compounds. The spray-dried extract (SDE) of E. giganteum was obtained with a high process yield (85.6%) and characterized as a very fine powder with low density, poor flowability and high loss on drying, but low water activity. The high content of reducing sugars and minerals, represented by total ash, was also observed in the SDE and can explain some these characteristics. The high content of sugars and minerals in the SDE also corroborate the traditional use of the plant as remineralizant. The results obtained in this study represent one of the first contributions to the establishment of parameters and methods for the characterization and quality control of raw material of E. giganteum. The feasibility of production and subsequent characterization of dried extract obtained contributes to the development of new pharmaceuticals products and to the evaluation of new biological activities.

nÃo hà / The practice of Living Pharmacies (FVs) in Fortaleza precedes Phytotherapy Deployment Policy in Public Health in the state of CearÃ, Decree No. 30016 of December 30, 2009. Conceived by Professor Francisco Josà Matos, the FVs make up the practices complementary integrative, anchored in the Municipal Public Policy and National Medicinal Plants and Herbal medicines. To understand how this municipal public policy within living pharmacy emerged and structure, and social actors see this public policy, there was the use of historical methods of the timeline, an analysis of questionnaires given to social actors managers FVs and another questionnaire for implementers of public policy. As the questionnaires analytical tool, we used descriptive statistics and an approach of discourse analysis. Was obtained, so that two timelines Public Policy of Medicinal Plants and Herbal medicines: one at the state level and the other nacional. Uma type of medicinal and herbal plant production system for FVs the city of Fortaleza showing steps production and its social actors involved for each PV. And the perception of social actors involved in FVs, as to feel motivated, pelapolÃtica benefit of FV in Fortaleza. Thus, the timelines of public policy in question showed that there is a cause and effect relationship in the emergence of a public policy; whereas the types of FVs allowed to observe how each one works before the public policy and its adaptations. Finally, there was sea perception of social actors as sesentirem be motivated, beneficiadospela FV policy in Fortaleza, which showed satisfactory levels. / A prÃtica das FarmÃcias Vivas (FVs) no MunicÃpio de Fortaleza precede a PolÃtica de ImplantaÃÃo da Fitoterapia em SaÃde PÃblica no Estado do CearÃ, Decreto N 30.016 de 30 de dezembro de 2009. Idealizada pelo professor Francisco Josà Matos, as FVs compÃem as praticas integrativas complementares, ancoradas na PolÃtica PÃblica Municipal e Nacional de Plantas Medicinais e FitoterÃpicos. Para compreender como essa polÃtica pÃblica municipal no Ãmbito farmÃcia viva surgiu e se estrutura, e como os atores sociais veem essa polÃtica pÃblica, fez-se do uso de metodologias histÃricas da linha do tempo, uma analise dos questionÃrios aplicados aos atores sociais gestores das FVs e outro questionÃrio destinado aos executores da polÃtica pÃblica. Como instrumento de anÃlise dos questionÃrios,empregou-se a estatÃstica descritiva e uma aproximaÃÃo da anÃlise do discurso. Obteve-se, assim, duas linhas do tempo da PolÃtica PÃblica de Plantas Medicinais e FitoterÃpicos: uma em Ãmbito estadual e a outra nacional.Uma tipologia de sistema de produÃÃo de plantas medicinal e fitoterÃpica para as FVs do MunicÃpio de Fortaleza mostrando as etapas de produÃÃo e seus atores sociais envolvidos para cada FV. E a percepÃÃo dos atores sociais envolvidos nas FVs, quanto a se sentirem-se motivados, beneficiados pelapolÃtica da FV em Fortaleza. Dessa forma, as linhas de tempo da polÃtica pÃblica em questÃo demonstraram que hà uma relaÃÃo de causa e efeito no surgimento de uma polÃtica pÃblica; ao passo que as tipologias das FVs permitiu observar como cada uma funciona perante à polÃtica pÃblica e suas adaptaÃÃes. Por ultimo,observou-sea percepÃÃo dos atores sociais quanto a sesentirem-se motivados, beneficiadospela polÃtica da FV em Fortaleza, que apresentou Ãndices satisfatÃrios.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A Amburana cearensis à uma planta nativa do sertÃo nordestino, popularmente conhecida como imburana de cerejeira e cumaru, utilizada empiricamente nas afecÃÃes do trato respiratÃrio. O presente estudo duplo-cego, randomizado, paralelo e controlado por placebo, teve como objetivo avaliar a eficÃcia terapÃutica do xarope de Cumaru como terapia complementar em asmÃticos sob tratamento regular com corticÃide inalatÃrio associado ao broncodilatador nas crises. Os pacientes foram incluÃdos no estudo com base na histÃria clÃnica, exame fÃsico e laboratorial foram randomizados em Grupo teste, que recebeu o Xarope de Cumaru e Grupo Placebo, que recebeu o placebo sendo ambos os grupos compostos por 21 pacientes, que ingeriram o xarope na dose de 15 mL trÃs vezes ao dia durante um perÃodo de 15 dias consecutivos. O estudo teve como desfecho primÃrio a mudanÃa na qualidade de vida avaliada atravÃs do questionÃrio de qualidade de vida em asma com atividades padronizadas - AQLQ(S) distribuÃdos em quatro domÃnios: sintomas, limitaÃÃo das atividades, estimulo ambiental e funÃÃo emocional e como desfechos secundÃrios a avaliaÃÃo das provas de funÃÃo pulmonar e a seguranÃa da formulaÃÃo sob investigaÃÃo mediante exames laboratoriais no perÃodo prÃ-tratamento e no primeiro dia apÃs a finalizaÃÃo do tratamento de 15 dias com o Xarope. Todos os pacientes eram procedentes da cidade de Fortaleza, com 96% pertencentes ao sexo feminino. O grau de escolaridade mÃnimo foi o ensino fundamental completo representado por 94,3% da amostra. A fase prÃ-estudo nÃo evidenciou diferenÃas estatisticamente significativas entre os grupos quanto ao gÃnero, IMC, VEF1, PFE, uso de medicaÃÃo resgate, escore total da qualidade devida mensurado pelo AQLQ (S) e presenÃa de comorbidade (p>0,05), entretanto observou-se diferenÃa estatisticamente significante quanto à mÃdia de idade, onde o grupo Cumaru (46,619  10,351) apresentou resultado significativamente maior que o grupo Placebo (37,238  10,319). A melhora na qualidade de vida foi estatisticamente significante no grupo Cumaru quando comparada ao grupo Placebo tanto no aspecto global como para o domÃnio sintomas, limitaÃÃo das atividades, estimulo ambiental e funÃÃo emocional mensurados pelo AQLQ(S) (p<0,05). No grupo Cumaru a proporÃÃo de pacientes com melhora global da qualidade de vida foi significativamente maior (61,90%) que a verificada no grupo placebo (9,52%), com risco relativo de 6,500. A CVF, VEF1; RelaÃÃo VEF1/ CVF e FEF 25-75% da CVF nÃo sofreram modificaÃÃes significativas nos dois grupos estudados (p>0,05) em nenhuma das etapas estudadas. A anÃlise hematolÃgica e bioquÃmica dos pacientes em ambos os grupos nÃo apresentou diferenÃas estatisticamente significantes entre os mesmos em nenhuma das fases estudadas. O xarope de Cumaru foi bem tolerado pelos pacientes e os efeitos adversos observados foram equivalentes aos do grupo placebo. Conclui-se que a administraÃÃo do xarope de Cumaru, na dose 45mL/dia por 15 dias, como terapia complementar proporcionou melhora significativa da qualidade de vida, sem causar toxicidade sistÃmica embora nÃo tenha modificado os parÃmetros espiromÃtricos representando uma alternativa segura para o tratamento da asma. / Amburana cearensis is a medicinal plant common to the Brazilian Northeastern and empirically used as bronchodilatador in respiratory tract diseases including asthma. A clinical trial double blind, placebo-controlled, randomized, parallel analyzed in the Unit of Clinical Pharmacology, Ceara, Brazil, the therapeutic efficacy of Cumaru syroup as complementar therapy in patients with mild asthma on regular treatment with inhaled corticosteroids. The study had three phases, pre, treatment and post treatment. The patients were included in the study based on clinical history, physical examination and laboratory test and were randomized into group that received Cumaru syrup and the placebo group who received the placebo and both groups consisting of 21 patients who ingested the syrup in the dose 15 mL three times daily for a period of 15 consecutive days. The study had as primary outcome the change in quality of life assessed by questionnaire of quality of life in asthma - with standardized activities - AQLQ (S) distributed in four areas: symptoms, activity limitation, emotional function and environmental stimuli and secondary outcome evaluation made by pulmonary function tests and safety of the formulation under investigation by laboratory tests in the pre-treatment and the first day after completion of treatment for 15 days with the syrup. All patients were from the city of Fortaleza, with 96% belonging to the female and The level of education was the least complete basic education represented 54% of the sample. The pre-study showed no statistically significant differences between groups regarding gender, IMC, FEV1, PEF, use of rescue medication, overall quality score measured by the AQLQ(S) and the presence of hypertension (p> 0.05), however there was statistically significant difference in mean age, where the placebo group showed significantly lower results (37,238  10,319) than the group Cumaru (46,619  10,351). The improvement in quality of life was statistically significant in group Cumaru when compared to the placebo group both in terms of global and for each domain: symptoms, activity limitation, environmental exposure and emotional function measured by the AQLQ(S) (p <0.05). Cumaru group in the proportion of patients with global improvement of quality of life was significantly higher (61.90%) that seen in the placebo group (9.52%), with relative risk of 6500. The FVC, FEV1, for FEV1 / FVC and FEF 25-75% of FVC did not suffer significant changes in both groups (p> 0.05) in any of the stages studied. The Cumaru syrup was well tolerated by patients and adverse events did not show any clinical relevance. The haematological and biochemical analysis of patients in both groups showed no statistically significant differences between them in any of the stages studied. Cumaru syrup was well tolerated by patients and adverse effects observed were equivalent to those in the placebo group. It is concluded that the administration of 45mL/day of Cumaru syrup during 15 days as complementary therapy provided significant improvement in quality of life, without causing systemic toxicity but has not modified the spirometric parameters representing a safe alternative for the treatment of asthma.

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_ANA_v_final.pdf: 1172794 bytes, checksum: 1c64c9f15396e01e910867c0f1a5ffbe (MD5) Previous issue date: 2010-12-17 / Maytenus ilicifolia Mart ex Reiss (Celastraceae) popularly known in Brazil as espinheirasanta is used against gastric disorders and ulcers. Quality of herbal medicines is essential to ensure the safety and efficacy of the drug. The dissolution test is an essential tool to assess the quality of herbal medicines in the solid dosage form for oral use. This work aimed to evaluate the dissolution behavior of eleven herbal medicines containing Maytenus ilicifolia, produced with powder or dry extract, purchased in local shops (Goiânia-GO, Brazil). Assay of catechin and epicatechin by high-pressure liquid chromatography (HPLC) and dissolution methods were validated and obtained results allowed the quantification of these markers with precision, accuracy and selectivity. The dissolution profiles have been determined adopting the following conditions: paddle apparatus at 75 rpm and HCl 0.1 M (900 mL at 37°C ± 0.5°C) as dissolution medium. Through the dissolution profiles it has been determined the mathematical model of release (first order), the percentage of catechin and epicatechin dissolved at 45 minutes and the efficiency of dissolution. Capsule containing powder showed rapid release of the markers in the medium (Q>85% in 12 minutes). Tests conducted to verify the quality of herbal medicines were average weight, weight variation, dissolution, chromatographic profile and sensory analysis. It was found that only 45.5% of analyzed herbal medicines products provide satisfactory results. The dissolution test, sensory analysis, average weight, weight variation and chromatographic profile were responsible for noncompliance of, respectively, 18.2%, 18.2%, 18.2%, 9.1% and 36.4% of the samples. Obtained data demonstrated the need to implement these tests in quality control of herbal medicines, so by investigating the release of the active ingredients of these medicines. / Maytenus ilicifolia Mart ex Reiss (Celastraceae), conhecida popularmente no Brasil por espinheira-santa é amplamente utilizada para tratar úlceras e desordens gástricas. A qualidade dos fitoterápicos é imprescindível a fim de assegurar a eficácia e a segurança do medicamento. O teste de dissolução é uma ferramenta essencial para avaliar a qualidade de fitoterápicos na forma farmacêutica sólida de uso oral. Este estudo foi realizado visando aplicar o teste de dissolução em onze fitoterápicos à base de Maytenus ilicifolia, produzidos com pó ou extrato seco, adquiridos no mercado farmacêutico local (Goiânia-GO, Brasil). O método de quantificação por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e o método de dissolução foram desenvolvidos e validados e os resultados obtidos permitiram quantificar os marcadores catequina e epicatequina com precisão, exatidão e seletividade. Os ensaios de dissolução foram conduzidos com o aparato pá a 75 rpm e ácido clorídrico 0,1 M (900 mL a 37°C ± 0,5°C) como meio de dissolução. Através dos perfis de dissolução determinou-se o modelo matemático de liberação dos marcadores (primeira ordem), a porcentagem de catequina e epicatequina dissolvidas em 45 minutos e a eficiência de dissolução. As formulações contendo o pó apresentaram rápida liberação dos marcadores no meio (Q>85% em 12 minutos). Os ensaios realizados para verificar a qualidade dos fitoterápicos foram peso médio, variação de peso, dissolução, perfil cromatográfico e análise sensorial. Apenas 45,5% dos fitoterápicos avaliados estavam em conformidade em todos os testes realizados. Os ensaios de dissolução, análise sensorial, peso médio, variação de peso e perfil cromatográfico foram responsáveis pela não conformidade de, respectivamente, 18,2%, 18,2%, 18,2%, 9,1% e 36,4% das amostras. Os dados obtidos demonstram a necessidade de se implementar o ensaio de dissolução no controle de qualidade de fitoterápicos, investigando assim a liberação das substâncias ativas desses medicamentos.