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Cultura de embriões imaturos para obtenção de hibridos interespecificos em tomateiro

Fonseca, Monique Ines Segeren 16 September 1987 (has links)
Orientador : Maro Ran-ir-Sondalh / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T09:55:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fonseca_MoniqueInesSegeren_M.pdf: 5140815 bytes, checksum: 49f535b4327ac9f2dbba0d729605895d (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: A moléstia vira-cabeça é considerada uma das viroses de maior importância na cultura do tomateiro sendo que ainda não existem variedades comerciais (L. esculentum) adaptadas às nossas condições, com resistência satisfatória a essa moléstia. Algumas fontes promissoras de resistência foram identificadas em introduções de Lycopersicon peruvianum (LA 371, 462, 444 e PI 126928, 126930. 126944, 126946, 128657 e129146). No entanto a barreira pós-zigótica existente entre essas duas espécies, que é devido ao aborto precoce do embrião, impede a introgressão de genes limitando assim a exploração dessa espécie no melhoramento do tomateiro. A técnica da cultura "in vitro" de embrião híbrido imaturo, antes de ocorrer o aborto do mesmo, possibilita a obtenção de plantas, através do fenômeno da organogênese somática dos calos, desenvolvidos à partir das células embrionárias. A análise histológica e o acompanhamento do desenvolvimento de embriões híbridos, com 15, 20 e 25 dias após polinização, nos auxiliou na determinação da idade mais adequada para a cultura "in vitro", que é aproximadamente entre 15 e 20 dias (estádio III). O meio de cultura básico empregado nos experimentos foi solução salina de Murashige e Skoog, 1962, vitaminas de Sondahl (30 g/l) e Agar (7 g/l) para os ensaios dos tipos parentais. Para a cultura dos embriões híbridos, o meio foi enriquecido com 10 mg/l de glutamina e com 100 mg/l de caseina hidrolisada. Os frascos mantidos em sala de cultura, no escuro, por três dias e depois transferidos para sala de crescimento com fotoperíodo de 14 hs de luz (1.200 lux). A temperatura foi sempre mantida a 25+- 3ºC. Foram realizados tratamentos envolvendo diferentes concentrações de fitorreguladores (auxina x citocinina), adição de extratos complexos ao meio de cultura, além de algumas estratégias de polinização com a finalidade de se tentar diminuir as barreiras de incompatibilidade. O melhor tratamento com fitorreguladores para indução e crescimento de calos com posterior regeneração de plantas hibridas foi 10 mM de 6-BA e 2,5 mM de IAA. Entretanto, não houve influência dos extratos complexos ns indução e cres cimento dos calos. Por outro lado, a utilização da espécie L.pimpinellifolium como "ponte" entre o cruzamento das duas espécies utilizadas, promoveu o aparecimento de calo e também quando se utilizou 10%, de pólen da planta mãe (L.esculentum) misturado ao pólen do L. peruvianum. Foram regeneradas cerca de quatrocentas plantas originárias de quatro calos. O enraizamento das mesmas foi realizado utilizando-se o mesmo meio de cultura usado nos experimentos para a cultura dos embriões, sem adição de fitorreguladores. As plantas foram submetidas, posteriormente, a uma aclimatação gradativa, com a finalidade de se diminuirem as perdas de material na fase de plantio no campo. Mesmo assim, ocorreu urna mortalidade de aproximadamente 85%. A natureza híbrida das plantas regeneradas foi verificada pelo exame de diversas características morfológicas (formato e coloração de folha, tamanho e coloração de fruto, comprimento de estilo-estigma, pilosidade da haste, etc). Adicionalmente, foram realizados análises de eletroforese (gel de amido}, empregando-se duas isoenzimas (APS - fosfatase ácida e PGI - fosfogluco isomerase), para confirmação final natureza híbrida das plantas FI obtidas. Finalmente, foi sintetizada uma população segregante através de cruzamentos em Sib entre as plantas FI regeneradas. Esta população revelou elevada variabilidade para tolerância ao virus do "vira-cabeça", além de variação acentuada para diversas características morfológicas / Abstract: Tomato spotted wilt is a major limiting factor 'of tomato cultivation in Brazil, especially in certain times of the year. Good resistance to this disease and also to insect pests has been identified in Lycopersicon peruvianum. Mainly due to early embryo abortion, it is impossible to obtain hybrids of this species with L. esculentum by conventional methods. The present research was to determine optimal conditions for ¿in vitro¿ embryoculture and to obtain hybrids between two resistant L peruvianum accessions with brazilian cultivars of L. esculentum. Histological analysis of hybrid ernbryo development showed that 25 days after pollination nearly all ernbryos had aborted, therefore immature embryos of 15-20 days old were used for "in vitro" culturing. The basic culture medium contained salts and vitamins, as used by Murashige & Skoog (1962) and -Sôndahl & Sharp- (1979), respectively, with addition of 500 uM. rnioinositol, 30g/1 sucrose, 10mg/l glutamine, 100mg/l casein hydrolysate and 7g/1 agar. The pH was adjusted at 5.5. On this medium no development of the immature seeds was observed, all of them being oxidized after a few days. Several cornbinations of auxin and cytokinin were tested as well as addition of complex substrates to the basic medium and certain pollination strategies order to improve success. The best treatment was the addition of 10 uM 6-BA and 2.5 u.M IAA, which gave rise to callus formation of about 20% of the immature seeds. Four calli were obtained which showed normal development and shoot formation. Rooting was induced on the same basic medium, without hormones. Rooted plantlets were gradually adapted to nursery conditions and totally 62 were transplanted to the field. The hybrid nature of the regenerated plants was demonstrated by their morphological characters, like color and shape of leaves and fruits, stigma exerction and hairyness, and also by isozyme analysis for acid phosphatase and phosphoglucoisomerase. All FI plants showed self-incompatibility. A showed F2 plants, obtained by sibcrossing FI plants, showed self -compatibility. The seed of FI plants showed variation in size and color. The small sized green colored seeds had to be cultured again "in vitro" and were able to develop directly into plants. The average and large sized brown colored seeds were sown directly into soil. The larger seeds gave rise to plants with more L. esculentum characteristics, whereas the plants from smaller seeds showed greater L. peruvianum resemblance. Separate tests showed that the hybrid populations segregate for resistance to tomato spottet wilt, as well as to Scrobipalpula absoluta, with presently is a serious pest in Brazil. It is concluded that the above applied embryo culture technique can be an effective tool in overcoming the crossing-barriers between. L. esculentum / Mestrado / Genetica / Mestre em Ciências Biológicas
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Estudo comparativo entre híbridos diploides e tetraploides de mandioca (Manihot esculenta Crantz) : citogenética, apomixia e anatomia caulinar

Hashimoto, Danielle Yasmin Conceição 02 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Botânica, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-03-10T18:40:02Z No. of bitstreams: 1 2009_DanielleYasminCHashimoto.pdf: 2416987 bytes, checksum: 7af0243def7e3fb65c480ee0d5f7434f (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-05-04T19:19:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_DanielleYasminCHashimoto.pdf: 2416987 bytes, checksum: 7af0243def7e3fb65c480ee0d5f7434f (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-04T19:19:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_DanielleYasminCHashimoto.pdf: 2416987 bytes, checksum: 7af0243def7e3fb65c480ee0d5f7434f (MD5) Previous issue date: 2009-02 / Os híbridos interespecíficos diploide e tetraploide entre Manihot esculenta Crantz e M. oligantha Pax foram analisados em nível citogenético, anatômico embrionário e anatômico caulinar com o objetivo de se verificar os efeitos do tratamento de poliploidização. A análise citogenética foi realizada para determinar o número cromossômico de esporocitos em metáfase meiótica. No híbrido diploide, o número cromossômico encontrado foi 36, e no híbrido poliploidizado foi 72. Através de análises dos grãos de pólen, verificou-se que a média de viabilidade no híbrido diploide foi de 83,5%, enquanto que, para o tetraploide, a viabilidade do pólen foi de 64,8%. O estudo do esporocito também revelou 99,6% de tétrades normais para o híbrido diploide e 19,2% para o tetraploide, evidenciando efeitos de anormalidade meiótica produzidos possivelmente pelo tratamento de poliploidização. A taxa de apomixia saltou de 2,7% no tipo diploide para 18% no tetraploide, evidenciando uma possível associação da duplicação cromossômica com o aumento na ocorrência de apomixia. Na anatomia caulinar, os híbridos diploide e tetraploide mostraram muitas semelhanças, entretanto, em termos quantitativos, a planta poliploidizada revelou tecido medular mais desenvolvido e maior número de elementos de vasos, além de diâmetro caulinar aumentado. A análise de dissociados do caule mostrou que os elementos de vaso para os dois híbridos foram predominantemente do tipo reticulado, com placa de perfuração simples e extremidades oblíquas. Os laticíferos foram do tipo articulado e ramificado, e puderam ser vistos em ambos os híbridos. Os testes histoquímicos mostraram diferentes locais de acúmulo de amido e lignina no caule dos híbridos e presença de látex no floema interno de ambos. O aumento nas dimensões de estruturas e órgãos, em termos de número de camadas e tamanho celular, assim como o aumento observado no tecido vascular foram alterações induzidas pela poliploidia e podem estar relacionadas ao grau de tolerância da planta à seca. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The interspecific diploid and tetraploid hybrids between Manihot esculenta Crantz and M. oligantha Pax were analyzed in cytogenetic, embrionary and stem anatomy aspects, in order to verify the effects of the polyploidization treatment. Cytogenetic analysis were made to determine the chromosome number in sporocites in metaphase meiotic. The diploid and the tetraploid hybrids showed 36 and 72 chromosomes, respectively. Pollen viability indicated an average of the diploid hybrid of 83.5%, and another of 64.8% related to the tetraploid. Normal tetrads were found in the diploid (99.6%), while the tetraploid one had just 19.2% of them; this fact can be related to the abnormal meiotic effects developed by polyploidization. Apomixis rates varied from 2.7% in the diploid hybrid to 18% in the tetraploid one, pointing out that chromosome duplication may be related to increases in apomixis taxes. Stem anatomy showed many resemblances in diploid and tetraploid hybrids, however, in quantitative features, the polyploidized hybrid had medullar tissue more developed, besides a bigger number of vessel elements and greater stem diameter. Stem dissociated were mostly of the reticulate type, with simple perforation plates and oblique extremities. Laticifers were articulated and branched, and were seen in both hybrids. Histochemical tests revealed different places of accumulation of starch and lignin, besides occurrence of internal phloem and latex inside it in both hybrids. Increase in structures and organs size, number of layers and cell size, and the observed increase in vascular tissues were alterations induced by polyploidization and may be related to drought resistance.
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Perfil da expressão genica em raizes de milho expostas ao aluminio utilizando macroarrays

Felix, Juliana de Maria 03 July 2002 (has links)
Orientador : Marcelo Menossi Teixeira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T04:53:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Felix_JulianadeMaria_M.pdf: 5738923 bytes, checksum: 48665750593ebfe6e27f8936cc9aadd9 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O alumínio (Al) é tóxico para a maioria das plantas em concentrações micromolares, limitando a produtividade agrícola em grandes áreas do planeta. O principal sítio de toxicidade do Al é o ápice radicular, com o qual as plantas sensíveis apresentam um sistema radicular reduzido, explorando menor porção do solo. Os objetivos deste trabalho foram a implementação da tecnologia dos arranjos de DNA e a identificação de genes induzidos por Al em milho, a fim de tentar esclarecer os mecanismos de toxicidade e tolerância. Os arranjos foram construídos em náilon, com seqüências geradas pelo Sugarcane EST Project (SUCEST). Na etapa inicial foram analisados diversos fatores que influenciam a reprodutibilidade e sensibilidade do método, tais como a massa de DNA na membrana e as estratégias de normalização. Dada a alta similaridade entre os genes de cana e milho, obtivemos sucesso ao hibridar os arranjos contendo genes de cana com sondas de cDNA de raízes de milho. As alterações no transcrito ma de uma linhagem de milho tolerante ao Al (Cat 100-6) e outra linhagem sensível (S 1587-17) foram avaliadas em ápices radiculares expostos a cinco atividades de Al. Um total de 151 genes induzidos por Al foi identificado, havendo genes com as mais diversas funções, tais como fatores de transcrição, quinases e enzimas envolvidas na resposta ao estresse oxidativo. A maioria dos genes identificados não foi associada previamente com a resposta ao Al. Estes dados foram agrupados por métodos hierárquicos e de Self Organizing Maps, permitindo elucidar diversos mecanismos que a planta ativa em resposta ao Al. Nossos dados também indicam que a hibridação heteróloga de macroarranjos de DNA é uma estratégia que permite o estudo do perfil de expressão gênica em larga escala / Abstract: Aluminum (Al) is toxic to most plants at micromolar concentrations and decreases crop productivity in large areas in the world. The first and most dramatic symptom of Al toxicity is the inhibition of root growth, which leads to a reduced root system. Consequently, sensitive plants explore a smaller soil surface. The objectives of this work were to establish the DNA arrays technology in our group and to identify Al induced genes in maize plants to get insight on the Al tolerance and toxicity mechanisms. Macroarrays were constructed on nylon membranes using sequences from the Sugarcane EST Genome Project (SUCEST). Initially, we analyzed several factors that affect the data reproducibility and sensibilify of the method, such as the amount of DNA fixed on the membrane and normalization strategies. Because of the high similarity between maize and sugarcane, we successfully hybridized macroarrays containing sugarcane ESTs with heterologous probes from maize. The changes in the transcriptome of the root apex from the Al-tolerant (Cat 100-6) and the Al-sensitive (S158717) maize lines were evaluated in response to five Al activities. A total of 151 Al-induced genes were identified, covering a wide range of functions, such as transcription factors, kinases and enzymes related to oxidative stress response. Most of the identified genes were not previously related to Al-stress response. The expression profiles obtained from these genes were clustered by hierarchical methods and self organizing maps, allowing us to elucidate many mechanisms that plants activate in response to Al. Our results also indicated that the heterologous hybridization of macroarrays is a successful strategy for transcript profiling in large scale / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Estudos cariotipicos na familia Alismataceae vent. no Estado de São Paulo

Costa, Julia Yamagishi 06 July 2002 (has links)
Orientador : Eliana Regina Forni-Martins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T02:50:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_JuliaYamagishi_M.pdf: 5045326 bytes, checksum: a14be56e626e6c4bfcd0e31046a693ff (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A família Alismataceae, ordem Alismatales, é composta por plantas aquáticas ou semi aquáticas de folhas eretas ou flutuantes, que crescem em brejos ou solos encharcados. Dois dos 11 gêneros que compõem a família estão presentes nos neotrópicos. O gênero Echinodorus (26 espécies) possui cerca de 17 espécies no Brasil, sendo que nove ocorrem no estado de São Paulo. O gênero Sagittaria (25 espécies) possui cerca de seis espécies presentes no Brasil, com apenas três no estado de São Paulo. As plantas aquáticas apresentam uma série de problemas para a sistemática, pois muitas características morfológicas apresentam uma extensa plasticidade fenotípica, sendo muitas destas convergentes ou baseadas em aspectos não genéticos/hereditários. Com o objetivo de traçar tendências evolutivas/cariotípicas para o grupo e incorporar dados moleculares/citogenéticos para a família Alismataceae, foram investigadas nove espécies da família (incluindo uma ou mais populações de cada), através das técnicas convencional com Giemsa, bandamento C, bandamento CMA/DAPI e hibridação fluorescente in situ para a seqüência 45S do DNAr. As espécies apresentaram cariótipos com 2n=22 cromossomos, os quais variaram em comprimento (2,3 a 9, 1 _m) mostrando-se altamente assimétricos (TF% entre 12,9 e 20,5).Os números cromossômicos reforçam x=11 como o provável número básico para o grupo. Foram documentadas duas populações triplóides (2n=33) para a espécie Echinodorus tennellus, ambas apresentando anormalidades meióticas e alta inviabilidade de pólen, indicando a existência de citótipos para a espécie. Os procedimentos de bandamento cromossômico foram bastante eficientes para a caracterização de cada uma das espécies, indicando possível proximidade entre elas. Do mesmo modo, a hibridação in situ foi eficaz para demonstrar diferenças inter-populacionais nos sítios de hibridação em Sagittaria rhombifolia / Abstract: Alismataceae, order Alismatales, is composed of aquatic and semi-aquatic herbs, with emerged, submerged or floating leaves, growing in muddy and water-Iogged substrates. The family has 11 genera, two of which occur on the neotropical region. In Brazil, there are 17 species of Echinodorus (26 species) with nine in São Paulo state. In Sagittaria (25 species), there are six species in Brazil with only three in São Paulo state. Aquatic plants usually represent great problems for traditional systematics because a lot of morphological features exhibit extensive phenotypic plasticity and many characters are convergent or non-genetically based. In order to detect trends in the karyotypic evolution of this group as a whole, and incorporate molecular/cytogenetic data for the study of Alismataceae family, nine species (including one or more populations) of Alismataceae were investigated cytologically, with Giemsa staining, C-banding, CMA/DAPI banding and in situ hibridization with 45S rDNA sequence. Ali species presented 2n=22 chromosomes, showing a basic number x=11 for both genera, with chromosome size varying from 2.3 to 9.11lm and a high asymmetry index (TF% between 12.9 to 20.5). Two triploid (2n=33) populations of Echinodorus tennellus were observed, both presenting meiotic abnormalities and significative polen inviability. Banding procedures were efficient for species identification and detection of species similarity, oghether with in situ hibridization. In only one species, Sagittaria rhombifolia, inter-populational differences in the number and position of hibridization sites were found / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Ciências Biológicas
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Biologia reprodutiva e hibridação em especies sintopicas de Ludwigia (Onagraceae) no sudeste do Brasil

Vieira, Ana Odete Santos 15 February 2002 (has links)
Orientador : George John Shepherd / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-31T21:33:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vieira_AnaOdeteSantos_D.pdf: 14321416 bytes, checksum: fea06266b9e3525be324ce080fd3bd01 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A família Onagraceae Juss. é considerada como uma família natural e particularmente interessante para estudos sobre biologia da reprodução, pelo seu tamanho moderado e relativa abundância de infonnações morfológicas, sistemáticas, moleculares e químicas. O gênero Ludwigia L. ocupa uma posição isolada na família, o único na tribo Jussiaeeae, apresentando mais de 80 espécies de distribuição predominantemente sul-americana. Este estudo foi projetado para investigar os sistemas reprodutivos de doze populações de dez espécies simpátricas compartilhando áreas brejosas (Centro Experimental de Campinas - Instituto Agronômico, Campinas, SP), examinando relações com a fenologia, densidade floral, germinação, massa das sementes, habitats e hábitos. Espécies diferentes, ocupando o mesmo local, permitiram estudar o papel de algumas das barreiras à hibridação, externas e internas. A fenologia das populações foi estudada, em áreas amostrais delimitadas. Os picos de florescimento e frutificação e a densidade floral (DF) foram calculados mensalmente para cada população. Todas as espécies apresentam flores com duração de um dia e floresceram durante o outono e frutificaram do meio do outono até o fim do inverno (período seco). As menores DF máximas foram calculadas para as espécies anuais (0.4 para L. octovalvis população-OCTO até 1.9 para L. leptocarpa). Entre as espécies arbustivas eretas e auto-incompatíveis foram encontradas as maiores DFs, (L. sericea = 3,5 e L. nervosa = 7). Poucas flores abertas em cada dia aumentariam as taxas de polinização cruzada e evitariam a herbivoria floral por coleópteros, como observada na seção Myrtocarpus. O período de florescimento foi concentrado durante o início do período seco, quando os polinizadores, abelhas oligoléticas, estão ativas. A frutificação predomina durante o outono e as cápsulas abrem com as sementes ainda donnentes ou a germinação fica adiada até o início da próxima primavera, quando aumentam as chuvas e o número de horas de luz. As sementes podem ser dispersas pela água pois flutuam, como também é o caso das plântulas, pelo vento ou, secundariamente, na superficie de animais. As sementes foram estocadas, pesadas e colocadas para germinar, em estufa incubadora (25°C com 12 horas de luz). As espécies com as menores sementes foram as herbáceas anuais L. decurrens, L. erecta e L. hyssopifolia (cerca de 0,01 mg) e as maiores massas foram encontradas na população perene de L. octovalvis (SESSI) e em uma de L. tomentosa (TOM). Comparando diferentes tempos de armazenamento, L. octovalvis e L. erecta germinaram mais abundantemente no tempo menor de armazenamento, enquanto as outras espécies, principalmente L. decurrens, L. hyssopifolia e L. elegans, germinaram mais após maior período de armazenamento, indicando que entre as espécies de Ludwigia algumas devem perder a viabilidade ao longo do tempo ou que o período de dormência é variável. As espécies anuais com sementes menores tenderam a menores taxas de germinação (1% a 60%) enquanto as perenes, de sementes malOres, variaram de 14 a 86%. O menor período para germinação foi de 7 dias e os lotes de sementes continuaram germinando por até, no máximo, 133 dias (L. sericea). As plântulas desenvolvidas durante 5 meses que acumularam mais massa foram dos arbustos L. sericea e L. nervosa. Este conjunto de espécies de Ludwigia mostra uma variedade de hábitos e sistemas reprodutivos, de herbáceas autógamas até arbustos auto-incompatíveis. Nas espécies auto incompatíveis, os tubos polínicos, em cruzamentos de autopolinização, crescem até o tecido do estilete, confirmando um padrão para o gênero, diferente das outras Onagraceae, com interrupção no área do estigma. As espécies autocompatíveis incrementam o fluxo de pólen entre os indivíduos pelo pequeno número de flores abertas ao dia e distância entre as anteras e o est_ma. Não ocorre agamospermia. De cada um dos tratamentos sobre sistema reprodutivo, realizados em campo (polinização espontânea, autopolinização e polinização cruzada), foram recolhidos e sorteados frutos. Amostras foram pesadas e colocadas para germinar e as plântulas resultantes desenvolvidas e pesadas após 5 meses. As sementes originárias de pólen de outros indivíduos parecem ter o período de dormência diminuído e um aumento na proporção de germinação, entre as espécies herbáceas anuais de Ludwigia, enquanto que entre as espécies arbustivas a etapa mais marcante é o desenvolvimento inicial maior das plântulas. A obtenção de hibridos artificiais entre as espécies estudadas indica que também nas Ludwigia sul-americanas, como em outras seções do gênero, existem possibilidades de romper as barreiras à hibridação. Não existe reciprocidade na formação de frutos e sementes entre cruzamentos interespecíficos e o sistema de auto-incompatibilidade parece não interferir na formação de tubos polínicos de outras espécies. As barreiras detectadas seriam uma somatória de barreiras externas e internas: diferentes picos de floração associados a um comportamento dos polinizadores de visitas intraespecíficas, velocidade do crescimento do tubo polínico e dimensão do gineceu, formação de cápsulas normalmente deiscentes, formação e germinação das sementes. Estas barreiras não estariam agindo de forma isolada, mas em conjunto, na forma de filtros sobrepostos / Abstract: The family Onagraceae Juss. is considered a natural family and particularly interesting to study breeding systems because its moderate size and relatively abundant morphological, systematic, molecular and chemical information. Ludwigia L. is a distinct genus in the family, the only member of the tribe Jussiaeeae, comprises more than 80 species distributed mainly in South America. The purposes of this research were to study the breeding systems of 12 populations ITom 10 sympatric species growing together in wet habitats (Centro Experimental de Campinas - Instituto Agronômico, Campinas, SP), examining the relationships among phenology, floral density, seeds size, germination and habits. Different species living together are interesting to also determine the significance of hybridization natural barriers, external and internal. The phenology was analysed by limited sample areas. Flowering and ftuiting peakes and the floral density (DF) were calculated monthly for each population. AlI species have one day lasting yellow flowers and flowering occurs mainly in autumn and ftuiting ITom the middle of autumn to the end of winter (drought season). The maximum small DF was found to annual species (0.4 to L. octovalvis population-OCTO until .9 to L. leptocarpa). Among self-incompatible erect shrub species were found the highest DFs: L. sericea = 3,5 and L. nervosa = 7. Little flowers that were open each day would increase cross pollination and avoid floral herbivory by coleoptera, observed in section Myrtocarpus. The flowering season was concentrated during the beginning of drought season when pollinators, oligoletic bees were active. The capsules usually open with dormant seeds or the germination is delayed until the next spring, when there is more rainfall and increased daylight hours. The seeds are dispersed by water, because could be afloat, such as the seedlings, wind or secondarily by animal surface. The seeds were stored, weighed and germinated ( controlled environrnental chambers at 25°C and 12: 12h light-dark photoperiod). The smallest seeds were found in the herbaceous annual L. decurrens, L. erecta and L. hyssopifolia (about 0,01 mg) and the biggest mass was found in the perennial population of L. octovalvis (0,082 mg). Comparing two different storage periods, L. octovalvis and L. erecta germinated more copiously in the small period, while the other species, mainly L. decurrens, L. hyssopifolia and L. elegans, germinated more after the longer storage time. This indicated that Ludwigia species could lost viability or the dormancy period is variable. The annual species with small seeds tend to have smaller germination rates (1 %.; to 60%) while the perennials, with bigger seeds, germinated trom 14 to 86%. The period to germination was trom 7 days until maximum 133 days (L. sericea). The highest seedlings growth rate, after 5 months, were exhibited by the shrubby L. sericea and L. nervosa. Ludwigia species series show a variety ofhabits and reproductive biology, trom autogamous annual herbs until selfincompatible perennials erect shrubs. Agamospermy was not detected. The inhibition of zincompatible pollen tubes was in the upper part of the style, following a pattem, which is different trom the other Onagraceae. The self-compatible species increase pollen grains dispersal among individuals by the small number of open flower each day and distance between the anthers and stigma. From field studies each biology reproductive treatment: spontaneous pollination, manual self-pollination and cross-pollination were collected ftuits. Samples were weighed and the germination samples were monitored and seedlings were growth and weighed 5 months after. The cross- pollination seeds appear reduce the dormancy and increase the germination rate among Ludwigia herbaceous annual species, while among shrubby species, the most visible stage is the fastest initial development of seedlings. Experimental hybridization among studied species revealed that also among South - American Ludwigia species, such as the other sections in this genera, the hybridisation barriers could be broken. There was not reciprocity in the ftuits and seeds developing between interspecific crosses and the self-incompatibility system appear no interfere in the pollen tube growth between species. The detected barriers would be a sum of external and internal barriers: different flowering peak associated with pollination behaviour that prevail intraspecific visits, slow pollen tube velocity and ginoecium dimension, abnormally dehiscent capsules, viable seeds production. These barriers do not act alone, but together, such as an overlid filters system / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal
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Marcadores citológicos no cariótipo de espécies de Leptodactylus (Amphibia, Anura, Leptodactylidae) analisado com técnicas de citogenética clássica e molecular

Gazoni, Thiago [UNESP] 26 April 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-26Bitstream added on 2014-06-13T18:50:05Z : No. of bitstreams: 1 gazoni_t_me_rcla.pdf: 1473333 bytes, checksum: 32a409c305fa3a2b5e788c177a983ad4 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O gênero Leptodactylus é um dos mais diversificados em número de espécies e distribuição geográfica, sendo, particularmente, abundante em território brasileiro, onde novas espécies têm sido descritas nos últimos anos. Apesar de o gênero ser, desde longa data, objeto de estudos de taxonomia e sistemática, com base em múltiplos caracteres e, principalmente, naqueles com suporte no sequenciamento de DNA mitocondrial e nuclear e outros marcadores moleculares, persistem ainda muitos questionamentos. As informações citogenéticas obtidas no gênero são, relativamente, escassas e têm revelado que, de um modo geral, a maioria das espécies compartilha cariótipos similares, com 2n=22 e NF=44, mesmo em análises com técnicas de coloração diferencial, não se descartando, contudo, diferenças marcantes na constituição cariotípica de algumas espécies. Foram, então, cariotipados, com técnicas de citogenética clássica e molecular, 27 exemplares identificados como Leptodactylus labyrinthicus, L. rhodomystax, L. chaquensis, L. petersii, Leptodactylus cf. petersii, L. podicipinus, Leptodactylus aff. podicipinus e L. pentadactylus, com o intuito de buscar marcadores cromossômicos relevantes para o entendimento da evolução cromossômica, conhecimento da estrutura e organização molecular, bem como para a taxonomia e sistemática. Cariótipo modal com 2n=22 e NF=44 é compartilhado pela maioria das espécies, com diferenças pequenas no tamanho e morfologia de alguns cromossomos. Cariótipos discrepantes estão presentes em L. podicipinus, (2n=22, NF=36), Leptodactylus aff. podicipinus (2n=20, NF=40) e L. pentadactylus (2n=22, NF=44), na primeira pela presença de quatro pares de telocêntricos, na segunda pela redução do número diploide e na terceira, pela ocorrência de translocações sequenciais múltiplas, reconhecidas, também, na meiose pela formação de cadeias... / The genus Leptodactylus is one of the most diversified in species number and geographic distribution, being particularly abundant in Brazil, where new species have been described in recent years. The genus has been, since long time, object of studies on taxonomy and systematics based on multiple characters, and especially on those supported by the sequencing of mitochondrial and nuclear DNA and other molecular markers. Nevertheless, there are still many unsolved questions. The cytogenetic data obtained in the genus are relatively scarce and revealed that, in general, most species share similar karyotypes, with 2n = 22 and NF = 44, even in analysis carried out with differential staining techniques. However, conspicuous differences in karyotype constitution of some species can not be excluded. The karyotype of 27 specimens, identified as Leptodactylus labyrinthicus, L. rhodomystax, L. chaquensis, L. petersii, Leptodactylus cf. petersii, L. podicipinus, Leptodactylus aff. podicipinus, and L. pentadactylus, were analyzed, using techniques of classical and molecular cytogenetic. The aim of this study was searching for chromosomal markers relevant to understand chromosome evolution, knowledge of molecular structure and organization, as well as for taxonomy and systematics. Modal karyotype with 2n = 22 and FN = 44 is shared by most species, with small differences in size and morphology of some chromosomes. Discrepant karyotypes are present in L. podicipinus (2n = 22, NF = 36), Leptodactylus aff. podicipinus (2n = 20, NF = 40), and L. pentadactylus (2n = 22, NF = 44), the former by the presence of four pairs of telocentric chromosomes, the second by the reduced diploid number and the latter, by the occurrence of multiple sequential translocations, recognized also by a multivalent ring shaped chain in meiosis. The NOR pattern by silver nitrate impregnation and by FISH with rDNA probe ... (Complete abstract click electronic access below)
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Marcadores citológicos no cariótipo de espécies de Leptodactylus (Amphibia, Anura, Leptodactylidae) analisado com técnicas de citogenética clássica e molecular /

Gazoni, Thiago. January 2011 (has links)
Resumo: O gênero Leptodactylus é um dos mais diversificados em número de espécies e distribuição geográfica, sendo, particularmente, abundante em território brasileiro, onde novas espécies têm sido descritas nos últimos anos. Apesar de o gênero ser, desde longa data, objeto de estudos de taxonomia e sistemática, com base em múltiplos caracteres e, principalmente, naqueles com suporte no sequenciamento de DNA mitocondrial e nuclear e outros marcadores moleculares, persistem ainda muitos questionamentos. As informações citogenéticas obtidas no gênero são, relativamente, escassas e têm revelado que, de um modo geral, a maioria das espécies compartilha cariótipos similares, com 2n=22 e NF=44, mesmo em análises com técnicas de coloração diferencial, não se descartando, contudo, diferenças marcantes na constituição cariotípica de algumas espécies. Foram, então, cariotipados, com técnicas de citogenética clássica e molecular, 27 exemplares identificados como Leptodactylus labyrinthicus, L. rhodomystax, L. chaquensis, L. petersii, Leptodactylus cf. petersii, L. podicipinus, Leptodactylus aff. podicipinus e L. pentadactylus, com o intuito de buscar marcadores cromossômicos relevantes para o entendimento da evolução cromossômica, conhecimento da estrutura e organização molecular, bem como para a taxonomia e sistemática. Cariótipo modal com 2n=22 e NF=44 é compartilhado pela maioria das espécies, com diferenças pequenas no tamanho e morfologia de alguns cromossomos. Cariótipos discrepantes estão presentes em L. podicipinus, (2n=22, NF=36), Leptodactylus aff. podicipinus (2n=20, NF=40) e L. pentadactylus (2n=22, NF=44), na primeira pela presença de quatro pares de telocêntricos, na segunda pela redução do número diploide e na terceira, pela ocorrência de translocações sequenciais múltiplas, reconhecidas, também, na meiose pela formação de cadeias ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The genus Leptodactylus is one of the most diversified in species number and geographic distribution, being particularly abundant in Brazil, where new species have been described in recent years. The genus has been, since long time, object of studies on taxonomy and systematics based on multiple characters, and especially on those supported by the sequencing of mitochondrial and nuclear DNA and other molecular markers. Nevertheless, there are still many unsolved questions. The cytogenetic data obtained in the genus are relatively scarce and revealed that, in general, most species share similar karyotypes, with 2n = 22 and NF = 44, even in analysis carried out with differential staining techniques. However, conspicuous differences in karyotype constitution of some species can not be excluded. The karyotype of 27 specimens, identified as Leptodactylus labyrinthicus, L. rhodomystax, L. chaquensis, L. petersii, Leptodactylus cf. petersii, L. podicipinus, Leptodactylus aff. podicipinus, and L. pentadactylus, were analyzed, using techniques of classical and molecular cytogenetic. The aim of this study was searching for chromosomal markers relevant to understand chromosome evolution, knowledge of molecular structure and organization, as well as for taxonomy and systematics. Modal karyotype with 2n = 22 and FN = 44 is shared by most species, with small differences in size and morphology of some chromosomes. Discrepant karyotypes are present in L. podicipinus (2n = 22, NF = 36), Leptodactylus aff. podicipinus (2n = 20, NF = 40), and L. pentadactylus (2n = 22, NF = 44), the former by the presence of four pairs of telocentric chromosomes, the second by the reduced diploid number and the latter, by the occurrence of multiple sequential translocations, recognized also by a multivalent ring shaped chain in meiosis. The NOR pattern by silver nitrate impregnation and by FISH with rDNA probe ... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Sanae Kasahara / Coorientador: Ana Paula Zampieri Silva de Pietri / Banca: Christine Strüssmann / Banca: Patricia Pasquali Parise Maltempi / Mestre
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JURISDIÇÃO CONSTITUCIONAL E COISA JULGADA: Reflexos das decisões do Supremo Tribunal Federal sobre as relações jurídicas tributárias continuativas acobertadas pela coisa julgada análise crítica do Parecer/CRJ/Nº 492/2011

COLODETTI, A. D. 25 April 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-29T11:13:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_6545_Dissertação Arthur Daher Colodetti.pdf: 1127548 bytes, checksum: 4dae32258ad14e508abf40b390f3d8e8 (MD5) Previous issue date: 2013-04-25 / Trata-se de trabalho desenvolvido com o intuito de investigar se e em qual medida as decisões proferidas pelo Supremo Tribunal Federal logram alterar, para o futuro, o regime jurídico firmado por sentenças, já transitadas em julgado, que disciplinam relação jurídica tributária de trato continuado, isto é, que tratam de uma relação jurídica que, dada as particularidades dos elementos da norma que lhe dá esteio, tende a ser reproduzida ao longo do tempo. Em boa medida, o trabalho se dirige a analisar em que consiste e quais os limites, diante de uma teoria procedimental de democracia, da tendência de hibridação dos modelos de controle de constitucionalidade, segundo a qual das decisões tomadas pelo Supremo, independentemente se no controle abstrato/concentrado se no controle concreto/difuso, exurgem os mesmos efeitos. Para o fim de tentar atingir seus objetivos, no primeiro capítulo, o estudo parte da teoria da decisão judicial de Ronald Dworkin, autor que trabalha sob a lógica do commom law, ingressando, após, na crítica democrático-procedimental feita por Jürgen Habermas, pois acredita-se que esta aperfeiçoa aquela. No segundo capítulo, analisa-se o instituto da coisa julgada, tomando em linha de consideração a distinção entre enunciado e norma, bem como que esta carece da atividade de interpretação/aplicação, feita pelo homem, para juridicizar o fato. Em momento seguinte, no terceiro capítulo, lançando mão do referencial teórico firmado nos capítulos anteriores, analisa-se o sistema brasileiro de controle de constitucionalidade, criticando, ao fim, a antes mencionada tendência de hibridação. No quarto e último capítulo, a abordagem, primeiro, investe sobre o Parecer/CRJ/Nº 492/2011, analisando a higidez de suas proposições, tocando em específico, depois, seu tema central: quais, e de que forma, as decisões do Supremo Tribunal Federal que se mostram aptas a suplantar o regime firmado em sentença transitada em julgado disciplinadora de relação jurídica de trato continuado?
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Anestesia e hibridação experimental em laboratório de espécies do gênero Crassostrea (Bivalvia: Ostreidae)

Legat, Angela Puchnick January 2015 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aqüicultura, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-04-19T04:10:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337924.pdf: 1247978 bytes, checksum: 75421c2bb77e141dc6233de0c3339f4c (MD5) Previous issue date: 2015 / Com o objetivo de contribuir com conhecimentos sobre a reprodução em laboratório de ostras nativas do gênero Crassostrea e estudar as possíveis interações entre as espécies cultivadas no Brasil, o presente trabalho avaliou: 1) um método de anestesia e amostragem de tecido gonádico sem sacrifício de animais para a análise do estado de desenvolvimento sexual; 2) a hibridação entre a espécie de ostra do Pacífico, Crassostrea gigas, e as espécies nativas, C. rhizophorae e C. gasar; e 3) o uso de marcadores de DNA mitocondrial e nuclear para a identificação de híbridos. Como resultados, o uso de Cloreto de Magnésio (50 g.L-1), aplicado à água do mar, promoveu o relaxamento muscular e a abertura das valvas nas três espécies de ostras estudadas, permitindo biópsias de tecido gonádico com seringas e agulhas e a determinação do sexo dos animais. Os procedimentos de anestesia e amostragem de tecido não causaram mortalidade nestes indivíduos que apresentaram 100% de sobrevivência após 10 dias. Após o uso do anestésico, também não foram observadas alterações na atividade reprodutiva e na geração de larvas-D de C. gigas. A partir dos cruzamentos recíprocos entre C. gigas, C. rhizophorae e C. gasar, houve sucesso assimétrico na fecundação de oócitos de C. rhizophorae (R) com espermatozoides de C. gigas (G), oócitos de C. gasar (B) com espermatozoides de C. gigas (G) e oócitos de C. rhizophorae (R) com espermatozoides de C. gasar (B). A compatibilidade unidirecional de gametas entre as três espécies resultou na formação de larvas híbridas que apresentaram crescimento similar à espécie materna até sete dias de idade. Após este período, as larvas pararam de crescer e morreram. As análises de marcadores moleculares confirmaram que as progênies RG eram híbridos verdadeiros e continham o DNA de ambas as espécies parentais em seu genoma. A inviabilidade no desenvolvimento de larvas híbridas interespecíficas em laboratório sugere que a incompatibilidade genômica é suficiente para evitar o risco de hibridação natural entre C. gigas e as espécies nativas C. rhizophorae e C. gasar.
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Estudos citogeneticos em pacientes com sindrome de Kallmann

Trarbach, Ericka Barbosa 26 July 2018 (has links)
Orientador: Christine Hackel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T18:41:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Trarbach_ErickaBarbosa_M.pdf: 4080246 bytes, checksum: 998bdd8892b57caadd7f3f64956e4f43 (MD5) Previous issue date: 2000 / Mestrado

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