Orientador: Maria Heloisa Souza Lima Blotta / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:34:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mamoni_RoneiLuciano_D.pdf: 2710116 bytes, checksum: 0509d4df3007265d7ee581ed17507d5e (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A paracoccidioidomicose (PCM) pode ser classificada em três grupos principais: PCM-infecção (PI); forma adulta (FA) e forma juvenil (FJ). O presente trabalho teve como objetivo comparar a resposta imunológica nesses diferentes grupos, por meio da análise da cinética da expressão do RNA mensageiro (RNAm) de citocinas e quimiocinas (IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IFN-g, TGF-b, TNF-a, CXCL8, CXCL9, CXCL10) por RT-PCR, e caracterizar fenotipicamente as células produtoras dessas citocinas por citometria de fluxo. Como resultado obtivemos que indivíduos do grupo PI expressam precocemente maior quantidade de RNAm para IFN-g, TNF-a, CXCL9 e CXCL10, quando comparados aos pacientes com a FJ da PCM, e níveis similares de CXCL10 e IFN-g e aumentados de CXCL9 e TNF-a quando comparados aos pacientes com a FA. A expressão do RNAm para citocinas Th2 (IL-4, IL-10, IL-5 e TGF-b), de maneira geral, foi maior e mais precoce em indivíduos com a FA ou FJ, quando comparados aos indivíduos do grupo PI. Em relação a expressão proteica, observamos que indivíduos do grupo PI apresentam um número maior de células produtoras de IFN-g, TNF-a, IL-2, CXCL9 e CXCL10 quando comparados aos dois grupos de pacientes. A produção de IFN-g foi observada principalmente em células CD3+CD8+, enquanto que IL-2 e TNF-a foram detectados principalmente em células CD3+CD4+. Em relação à expressão de moléculas de superfície, observamos que monócitos de indivíduos do grupo PI apresentam maior expressão de CD80 e menor expressão de CD86 e CD54, quando comparados aos indivíduos com a FA ou FJ, e maior expressão de HLA-DR e CD11a quando comparados aos indivíduos com a FJ da PCM. Nossos resultados indicam que a cinética diferencial de produção de RNAm para citocinas do tipo Th1 ou Th2 pelos grupos estudados pode direcionar a resposta imunológica após a infecção, originando as diferenças clínicas observadas / Abstract: Paracoccidioidomycosis (PCM) presents three major forms: PCM-infection (PI); adult form (AF) and juvenile form (JF). The aim of this study was to compare the immunological response in these groups through the analysis of the kinectics of mRNA expression of some cytokines and chemokines (IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-lO, IFN-y, TGF p, TNF-a, CXCLS, CXCL9 and CXCLlO) by RT-PCR, as well as, to characterize the phenotype of the cytokines producing cells by flow cytometry. The results showed that PI individuaIs express earlier and higher levels of mRNA for IFN-y, TNF-a, CXCL9 and CXCLIO when compared to JF patients and similar levels of CXCLlO and IFN-y and higher levels of CXCL9 and TNF -a when compared to AF ones. On the other hand, the mRNA expression ofTh2 cytokines (IL-4, IL-IO, IL-5 and TGF-P) was higher and earlier in JF and AF groups when compared to PI individuaIs. In relation to protein expression, we observed that PI group presents a higher percentage of cells producing IFN-y, TNF-a, IL-2, CXCL9 and CXCLIO when compared to both groups ofpatients. The production ofIFN-y was predominantIy done by CD3+CDS+ T cells, whereas IL-2 and TNF-a production was higher in CD3+CD4+ cells. Monocytes ofPI individuaIs also presented higher expression of CDSO and lower expression of CDS6 and CD54 when compared to JF and AF patients, and higher expression of HLA-DR and CDIIa only when compared to JF patients. These results indicate that the differential kinetic of mRNA expression of ThI or Th2 cytokines observed in the different forms of PCM may modulate the immunological response resulting in the different outcomes observed in this disease / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-18Bitstream added on 2014-06-13T20:17:30Z : No. of bitstreams: 1 bachiega_tf_me_botfm.pdf: 459615 bytes, checksum: ade6efe273ffa9cabd596ec413f8732b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Nosso grupo tem se dedicado à investigação das ações biológicas da própolis, alecrim-do-campo, capim-limão e cravo-da-Índia. A própolis tem despertado a atenção dos pesquisadores em virtude de suas inúmeras propriedades biológicas, e o alecrim-do-campo é uma das principais fontes deste apiterápico em nossa região. Já o capim-limão e o cravo-da-Índia têm sido pouco avaliados no tocante à sua ação imunomoduladora. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito imunomodulador do extrato e respectivos compostos isolados da: própolis (ácidos cumárico e cinâmico), do alecrim-do campo (ácido cafeico), do cravo-da-Índia (eugenol) e do capim-limão (citral) sobre a produção de citocinas (IL-1, IL-6 e IL-10) por macrófagos peritoneais de camundongos BALB/c. Em protocolos com LPS, macrófagos foram incubados ora com os produtos naturais supracitados em diferentes concentrações e posteriormente desafiados com LPS; ora desafiados com LPS e posteriormente incubados com os produtos naturais. A dosagem das citocinas foi realizada através da técnica de ELISA. A própolis exerceu ação moduladora sobre a resposta imune e inflamatória, e os ácidos cinâmico e cumárico podem estar envolvidos em sua ação imunomoduladora. O alecrim-do-campo e o ácido cafeico também demonstraram efeito imunomodulador quanto à produção de citocinas. O capim-limão exerceu efeito inibitório sobre a produção de citocinas, sendo este efeito mais pronunciado em ensaios com o citral. Resultados semelhantes foram observados com o cravo-da-Índia e o eugenol. Nossos resultados sugerem que o potencial imunomodulador dos produtos naturais merece ser melhor explorado em futuras investigações, avaliando sua eficiência em doenças inflamatórias / Our group has been investigating the biological action of propolis, “alecrim-do-campo”, lemongrass and clove. Propolis has attracted the researchers’ attention due to its several biological properties, and “alecrim-do-campo” is its main vegetal source in our region. However, little is known concerning lemongrass and clove immunomodulatory action. The goal of this work was to evaluate the immunomodulatory effect of the following extracts and isolated compounds: propolis (coumaric and cinnamic acids), “alecrim-do-campo” (caffeic acid), clove (eugenol) and lemongrass (citral) on cytokines production (IL-1, IL-6 and IL-10) by peritoneal macrophages of BALB/c mice. In LPS protocols, macrophages were incubated either with natural products in different concentrations and then challenged with LPS; or with LPS and then incubated with the natural products. Cytokine concentrations were measured by ELISA. Propolis exerted a modulatory action on the immune and inflammatory response and cinnamic and coumaric acids may be involved in its immunomodulatory action. “Alecrim-do-campo” and caffeic acid also exerted an immunomodulatory action on cytokines production. Lemongrass showed an inhibitory action on cytokines production, mainly in the assays with citral. Similar results were found using clove and eugenol. Our results suggest that the immunomodulatory potential of the natural products should be investigated in further studies, evaluating their efficacy in inflammatory diseases

A ativação dos fagócitos é crítica para a defesa contra vários patógenos, por isso a importância de estudos que desenvolvam alternativas para a ativação dessas células. Nosso estudo visou investigar os efeitos do BAY 41-2272 na ativação de fagócitos. Para este propósito avaliamos a fagocitose, liberação de superóxido e atividade microbicida. Foram usados PBMC, neutrófilos e a linhagem celular THP-1, cultivadas na presença ou ausência de BAY 41-2272 (1mM ou 3mM) por 1h ou 48h a 37°C. A liberação de superóxido foi avaliada pelo ensaio da redução do citocromo c inibido especificamente pela superóxido dismutase; a fagocitose foi analisada através da co-cultura com partículas de Zymosan e contagem das células com partículas englobadas; e a atividade microbicida foi mensurada por meio da co-cultura com E. coli enteropatogênica seguida pela contagem das CFU formadas pelas bactérias recuperadas dos fagócitos. Além disso, fizemos a dosagem de IL-12, IFN-g e TNF-a e a análise da expressão gênica do gene CYBB. Todos os tipos celulares responderam aos tratamentos. Os PBMC, neutrófilos e THP-1 tratados com BAY 41-2272 produziram significativamente mais superóxido (cerca de 50% mais), e apresentaram significativamente maior atividade fagocítica (cerca de 54% mais), microbicida (cerca do dobro) comparados ao grupo controle não tratado, além de produzir TNFa. Ainda, o tratamento com o fármaco aumentou a expressão do gene da gp91phox nas THP-1 e PBMC. BAY 41-2272, especialmente na dose de 3mM, mostrou um grande potencial na ativação dos fagócitos em vários aspectos. Este potencial pode ser explorado na busca por novas terapias destinadas ao controle de infecções, principalmente no caso das imunodeficiências. / Phagocyte activation is critical role for host defense against several pathogens, so that studies developing alternatives for activating these cell are very important. We investigated the effects of BAY 41-2272 on phagocytes activation. For this purpose we evaluated several aspects indicating cellular activation, as phagocytosis, superoxide release and microbicidal activity. We used PBMC, neutrophils and THP-1 cell lineage cultured or not with BAY 41-2272 (1mM and 3mM) for 1h or 48h at 37°C. Superoxide release was tested by superoxide dismutase-inhibitable cytochrome c reduction assay; phagocytosis was evaluated through co-culture with zymosan particles and counting of ingested particles; and microbicidal activity was measured through co-incubation with enteropathogenic E. coli followed by counting of CFU from recovered bacteria from phagocytes. We analyzed the IL-12, IFN-g and TNF-a cytokine production and gp91phox gene expression. All cell types showed a response to treatments. PBMC, PMN and THP-1 treated with BAY 41-2272 produced significantly more superoxide (about 50% more), and presented significantly more phagocytic (about 54% more), microbicidal (about twice) activity than control group and production more TNF-a than control group. The expression of CYBB gene was more expressed on treated cells than control. BAY 41-2272, especially at 3mM, showed a great potential in activation of phagocytes in several aspects. This potential should be investigated at the light of new therapies seeking infection control, mainly in immunodeficiency.

O Paracoccidioides brasiliensis (Pb) é o agente etiológico causador da Paracoccidioidomicose (PCM), uma micose sistêmica endêmica de maior prevalência na America Latina e no Brasil. Através do estudo de modelo experimental, foi possível estabelecer uma comparação e classificar diversas linhagens de camundongos isogênicos infectados com Pb como resistentes e susceptíveis e o entendimento dos mecanismos de resposta imune envolvidos na doença. Uma vez infectado, o sistema imune do hospedeiro se dispõe de diversos mecanismos, tanto da imunidade inata quanto da adaptativa para conter a infecção. Os fagócitos, como macrófagos e polimorfonucleares neutrófilos (PMN), desempenham um papel central na resposta imune contra o fungo. Além de ser o elo entre imunidade inata e adquirida, os PMN são eficazes na defesa do hospedeiro contra o Pb, pois estas células ficam restritas ao local da lesão causada pelo fungo. Nesta perspectiva, a terapia utilizando laser terapia de baixa potência (LLLT) com raios infravermelhos surge como um método capaz de estimular a atividade desempenhada pelas células imunes, como PMN, sem alterar sua função, por ser descrito como um método modulador de células imunológicas. A LLLT foi aplicada com uma potência de 50mW e comprimento de onde de 780nm em dois pontos de cada pata traseira de camundongos infectados com Pb18 ou inoculados com Zymosan pelo método de bolsa de ar subcutâneo. No grupo de animais irradiados e não irradiados, foram avaliados o efeito da LLLT in vivo na produção de proteínas totais, capacidade de produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) e capacidade fungicida de PMN recém-isolados do local de infecção. Os resultados demonstraram que a LLLT ativa os PMNs, pois nos grupos de camundongos irradiados independentemente do estímulo para a inflamação, houve aumento na produção de proteínas totais, na capacidade fungicida e produção de ERO, em comparação com o grupo controle. Apesar do laser ter diminuído o número total de PMN colhidos de camundongos infectados com Pb18, a viabilidade destas células de todos os grupos experimentais permaneceram altamente viáveis. Os resultados demonstraram que a LLLT ativa os PMNs, o que resultou numa maior capacidade fungicida, sugerindo que o laser possa ser utilizado como terapia adicional no tratamento da PCM. / Paracoccidioides brasiliensis (Pb) is the etiologic agent of Paracoccidioidomycosis (PCM), an endemic systemic mycosis most prevalent in Latin America and Brazil. Through the study of experimental model, it was possible to make a comparison and classify different strains of inbred mice infected with Pb as resistant or susceptible and the understanding the mechanisms of immune response involved in the disease. Once infected, the host immune system has several mechanisms both the innate to adaptive immunity to contain the infection. Phagocytes, such as macrophages and polymorphonuclear neutrophils (PMN) play a central role in the immune response against the fungus. Besides being the link between innate and acquired immunity, the PMN are effective in host defense against Pb because are restricted to the site of injury caused by fungus. In this perspective, therapy using Low Level Light Therapy (LLLT) with infrared laser in vivo emerges as a method to stimulate the activity stimulated by immune cells such as PMN, without changing its function, to be described as a method of modulating immune cells. LLLt was applied ate two points of paw hind mouse, a power of 50 mW and a wavelength of 780nm, mice infected with Pb18 or inoculated with Zymosan by method air pouch. On irradiated and non-irradiated animals, we assessed the effect of LLLT in vivo production of total protein production capacity of reactive oxygen species (ERO) and freshly isolated PMN fungicidal capacity of the site of infection. The results showed that the active LLLT PMNs, for groups of irradiated mice regardless of the stimulus for inflammation, there was an increase in the production of total proteins, the ability fungicide and ROS production compared with the control group. Although the laser has decreased the total number of PMNs collected from mice infected with Pb18, the viability of the cells in all experimental groups remained highly viable. The results showed that the active LLLT PMNs, resulting in a greater capacity fungicide, suggesting that the laser can be used as adjunctive therapy in the treatment of PCM. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A imunidade inata mostra-se importante na defesa do hospedeiro contra a infecção por fungos, e dentro desse contexto macrófagos e neutrófilos (PMN) desempenham papel central na paracoccidioidomicose. O tratamento desta doença inclui o uso de antifúngicos que, além do prolongado tempo de administração, podem ter diversos efeitos colaterais. A laserterapia de baixa potência (LLLT- low level laser therapy) vem sendo utlizada como tratamento adjuvante para muitas enfermidades, e já foi demonstrado seu efeito ativador em neutrófilos, se fazendo necessário compreender melhor os mecanismos imunológicos envolvidos nesse processo. Neste trabalho avaliamos os efeitos da LLLT aplicada in vivo nas patas traseiras de camundongos, infectados pela via ―air pouch‖ subcutânea com a cepa virulenta do P. brasiliensis Pb18 ou a cepa de baixa virulência Pb265, visando atingir células em formação na medula. Grupos de animais não irradiados foram utilizados como controle. Após 8 dias de infecção as células da ―air pouch‖ foram coletadas e analisadas quanto ao número, concentração proteica, liberação de espécies reativas de oxigênio (ERO), atividade mitocondrial de PMN e perfil de migração e secreção das citocinas (GM-CSF, IFN- γ, IL-12, IL-4, IL-10 e IL-17) pelo exsudato celular. O tratamento de animais com LLLT aumentou a atividade mitocondrial, o conteúdo de proteínas e a liberação de ERO por parte dos PMN e diminuiu a secreção da IL-10 pelas células do exsudato na infecção com a cepa virulenta Pb18. Por sua vez, a infecção com a cepa de baixa virulência Pb265 também levou a um aumento na atividade mitocondrial, mas houve diminuição no conteúdo de proteínas e a liberação de ERO foi semelhante ao controle não irradiado. Não foi observada diferença na secreção das citocinas GM-CSF, IFN-γ, IL-12, IL-4 e IL-17 pelas células do exsudato estimuladas por ambas às cepas. Quanto à migração celular, os PMN constituem o principal tipo celular encontrado no local do inóculo, seguido pelos linfócitos e monócitos. O número de PMN foi diminuído no tratamento com LLLT quando o estímulo foi o Pb18 e aumentado quando foi o Pb265. Para os linfócitos ocorreu o inverso, no grupo estimulado com Pb18 o laser atuou aumentando esse tipo celular, e diminuindo quando o estímulo foi o Pb265. Já para os monócitos não houve alteração quando o estimulo foi o Pb18 e houve uma diminuição quando o estímulo foi o Pb265 no grupo tratado com LLLT. Os resultados sugerem que o tratamento com LLLT confere um potencial fungicida aos neutrófilos e uma maior resolução da infecção causada pela cepa virulenta Pb18. / Innate immunity is an important component of host defense against fungi, and in this context machophages and neutrophils (PMN) play a central role in paracoccidioidomycosis. The treatment of this disease includes the use of antifungals, which in addition to the prolonged administration time needed may cause many side effects. Low level laser therapy (LLLT) has been used as an adjuvant treatment for many ailments and its modulating effect on neutrophils has already been demonstrated; however it is necessary to better understand the mechanisms involved in this process. In this work, we evaluated the effects of LLLT applied ―in vivo‖ at the hind paws in mice, aiming the bone marrow. These mice were infected in the subcutaneous air pouch with Pb18 or Pb265 P. brasiliensis isolates. Unirradiated animals were used as controls. After 8 days of infection the cells of air pouch were collected and analyzed for the number, protein concentration and release of ROS, mitochondrial activity of PMN and migration profile and secretion of cytokines (GM-CSF, IFN-γ, IL-12, IL- 4, IL-10 and IL-17) by the cells present in the exudate. LLLT-treated animals showed increased mitochondrial activity, protein content and release of ROS by PMN and in the number of cells and decreased the secretion of IL-10 exudate cells obtained after inoculation with the virulent strain Pb18. In turn, the infection with the low virulence strain Pb265 also led to an increase in mitochondrial activity, but there was a decrease in protein concentration and the release of ROS was similar to that of the unirradiated controls.. No differences were observed in the secretion of the GM-CSF, IFN-γ, IL-12, IL-4 and IL-17 cytokines by exudate cells stimulated by any of the strains. Regarding cell migration, PMN are the main cell type found at the inoculum site, followed by lymphocytes and monocytes. The number of PMN was decreased in the treatment with LLLT when the stimulus was Pb18 and increased when it was Pb265. For the lymphocytes the reverse occurred, in the group stimulated with Pb18 the laser acted increasing this cellular type, and decreasing when the stimulus was the Pb265. For monocytes, there was no change when the stimulus was Pb18 and there was a decrease when the stimulus was Pb265 in the group treated with LLLT. The results suggest that treatment with LLLT elicits a fungicidal activity to the PMN and higher resolution of the infection caused by the virulent Pb18 strain. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

O processo de morte por apoptose pode ser dividido em duas vias: intrínseca e extrínseca. A sinalização via FAS (extrínseca) pode ocorrer independente (células Tipo I) ou dependente da mitocôndria (células Tipo II). É importante considerar que: 1) Resultados prévios mostraram que doses subletais de CHX foram capazes de sensibilizar células Tipo I e Tipo II à apoptose e de converter células Tipo II em Tipo I; 2) Um dos mecanismos envolvidos pode ser o recrutamento de FAS para as \"balsas lipídicas\"; 3) A PGE2 ativa PKA pelo aumento de cAMP via EP2 e EP4, que fosforila ezrina, envolvida nesse processo; 4) A PGE2 pode induzir apoptose em linhagens celulares e sensibilizá-las a esse processo. Assim, formulamos a hipótese de que a PGE2 poderia, assim como a CHX, sensibilizar certas células à apoptose e converter células Tipo II em Tipo I. Esse efeito não foi observado em células DO11.10 nas quais a apoptose foi induzida por CD95L solúvel e em células Tipo I e Tipo II, nas quais a apoptose foi induzida pelo anticorpo agonista anti-FAS. / The death process by apoptosis can be divided into two pathways: intrinsic and extrinsic. The signaling by FAS (extrinsic) may occur in a mitochondrial independent (Type I cells) or dependent (Type II cells) manner. It is important to consider that: 1) Previous results demonstrated that sub-lethal doses of CHX were able to sensitize type I and type II cells to apoptosis and to convert type II cells into type I; 2) One of the mechanisms involved can be FAS recruitment to \"lipid rafts\"; 3) PGE2 activates PKA by increasing cAMP via EP2 and EP4, which phosphorylates of Ezrin, involved in this process; 4) PGE2 can induces apoptosis in cell lines and can to sensitize them to this process. So, we hypothesized that PGE2 could, similarly to CHX, sensitize certain cells to apoptosis and convert type II cells into type I. This effect was not observed in DO11.10 cells in which apoptosis was induced by soluble CD95L and in type I and type II cells, in which apoptosis was induced by agonist anti-FAS antibody.

A Via Alternativa é a principal via de ativação do sistema complemento (SC), sendo o Fator H (FH) um de seus principais reguladores. No presente estudo, nós investigamos os mecanismos moleculares pelo qual o paciente com a mutação Arg127His no FH possui deficiência do SC. Para isto, utilizamos fibroblastos de paciente e individuo normal estimulados com IFN-<font face=\"Symbol\">g e verificamos que as células do paciente eram capazes de produzir FH, contudo a maior parte das proteínas estava retida no retículo endoplasmático (RE). Em paralelo, transfectamos células Cos-7 com plasmídeos contendo a mutação CG453T<font face=\"Symbol\">&#174; CA453T e observamos que a mutação foi responsável pelo retardo na secreção de FH. Apesar da mutação reduzir a secreção de FH, observamos que a capacidade de FH atuar como co-factor não foi afetada. Assim, avaliamos se o uso de chaperonas químicas poderia induzir a secreção da proteína e observamos que houve aumento na secreção de FH nos fibroblastos. Desta forma, propomos o uso desses fármacos como alternativa de tratamento para melhorar a sobrevida do paciente. / Factor H (FH) is one of the most important regulatory proteins of the alternative pathway of the complement system (CS). In this study, we investigated the consequences of FH Arg127His mutation to the secretion ratio of this protein by skin fibroblasts in vitro. We stimulated the FH synthesis from patient and normal control with IFN<font face=\"Symbol\">g when we observed that the patient cells were able to synthetize FH, however this mutant protein was mainly retained at the endoplasmic reticulum. In parallel, we transfected Cos-7 cells with plasmids containing CG453T<font face=\"Symbol\">&#174; CA453T mutation and observed that the mutation was responsible for the delay in the FH secretion. Although the mutation reduced the FH secretion, we observed that the FH function was not affected. Thus, we evaluated whether the treatment with chemical chaperones could release FH to the culture supernant. We observed that patients fibroblasts treated increased the secretion of FH. In conclusion, we suggest the use of these chemical chaperones as a potential alternative therapeutic to improve the patients survival.

Orientador: José Maurício Sforcin / Banca: Anderson de Sá-Nunes / Banca: Sueli Aparecida Calvi / Resumo: Nosso grupo tem se dedicado à investigação das ações biológicas da própolis, alecrim-do-campo, capim-limão e cravo-da-Índia. A própolis tem despertado a atenção dos pesquisadores em virtude de suas inúmeras propriedades biológicas, e o alecrim-do-campo é uma das principais fontes deste apiterápico em nossa região. Já o capim-limão e o cravo-da-Índia têm sido pouco avaliados no tocante à sua ação imunomoduladora. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito imunomodulador do extrato e respectivos compostos isolados da: própolis (ácidos cumárico e cinâmico), do alecrim-do campo (ácido cafeico), do cravo-da-Índia (eugenol) e do capim-limão (citral) sobre a produção de citocinas (IL-1, IL-6 e IL-10) por macrófagos peritoneais de camundongos BALB/c. Em protocolos com LPS, macrófagos foram incubados ora com os produtos naturais supracitados em diferentes concentrações e posteriormente desafiados com LPS; ora desafiados com LPS e posteriormente incubados com os produtos naturais. A dosagem das citocinas foi realizada através da técnica de ELISA. A própolis exerceu ação moduladora sobre a resposta imune e inflamatória, e os ácidos cinâmico e cumárico podem estar envolvidos em sua ação imunomoduladora. O alecrim-do-campo e o ácido cafeico também demonstraram efeito imunomodulador quanto à produção de citocinas. O capim-limão exerceu efeito inibitório sobre a produção de citocinas, sendo este efeito mais pronunciado em ensaios com o citral. Resultados semelhantes foram observados com o cravo-da-Índia e o eugenol. Nossos resultados sugerem que o potencial imunomodulador dos produtos naturais merece ser melhor explorado em futuras investigações, avaliando sua eficiência em doenças inflamatórias / Abstract: Our group has been investigating the biological action of propolis, "alecrim-do-campo", lemongrass and clove. Propolis has attracted the researchers' attention due to its several biological properties, and "alecrim-do-campo" is its main vegetal source in our region. However, little is known concerning lemongrass and clove immunomodulatory action. The goal of this work was to evaluate the immunomodulatory effect of the following extracts and isolated compounds: propolis (coumaric and cinnamic acids), "alecrim-do-campo" (caffeic acid), clove (eugenol) and lemongrass (citral) on cytokines production (IL-1, IL-6 and IL-10) by peritoneal macrophages of BALB/c mice. In LPS protocols, macrophages were incubated either with natural products in different concentrations and then challenged with LPS; or with LPS and then incubated with the natural products. Cytokine concentrations were measured by ELISA. Propolis exerted a modulatory action on the immune and inflammatory response and cinnamic and coumaric acids may be involved in its immunomodulatory action. "Alecrim-do-campo" and caffeic acid also exerted an immunomodulatory action on cytokines production. Lemongrass showed an inhibitory action on cytokines production, mainly in the assays with citral. Similar results were found using clove and eugenol. Our results suggest that the immunomodulatory potential of the natural products should be investigated in further studies, evaluating their efficacy in inflammatory diseases / Mestre

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-07-27T15:42:04Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Ana Luiza Dias Angelo.pdf: 1143787 bytes, checksum: 4f198dcfcd707a8f0ed1c85f8673c9cc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-27T15:42:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Ana Luiza Dias Angelo.pdf: 1143787 bytes, checksum: 4f198dcfcd707a8f0ed1c85f8673c9cc (MD5) / CAPES / A contagem de células T CD4+ é o principal marcador imunológico usado para definir o momento adequado para início da terapia antiretroviral e profilaxia para infecções oportunistas em pacientes portadores do vírus HIV. Seu alto custo limita o uso desta técnica em muitos locais no mundo. O objetivo deste estudo foi avaliar a utilidade da TLC em substituir a contagem de células T CD4+ como marcador imunológico para detectar os pacientes com necessidade de profilaxia contra infecções oportunistas (CD4 < 200 cel/mm3), e aqueles com CD4 < 350 cel/mm3 (limite brasileiro que define AIDS). Nós analisamos a TLC e contagem de células T CD4 de 1174 pacientes infectados pelo HIV provenientes do HUPES durante o período de maio/2003 a setembro/2004. A contagem de células T CD4+ foi realizada por citometria de fluxo e a contagem total de linfócitos por contador hematológico automatizado. Foram analisadas um total de 1510 amostras. A contagem de células T CD4+ teve valor mínimo de 4 cel/mm3 e valor máximo de 2531 cel/mm3, TLC teve mínimo de 300 cel/mm3 e máximo de 6200 cel/mm3. O melhor valor de TLC, capaz de predizer CD4 < 200 cel/mm3, foi ≤ 1700 cel/mm3 (SE=76,3%; SPE=65,2%, NPV=93,1%), mas PPV de somente 31,1%. Resultados semelhantes foram encontrados para contagem de células T CD4+ < 350 cel/mm3, entretanto observou-se menor sensibilidade (SE= 59,4%, SPE=96,6%, PPV= 57,3% e NPV= 79,4%). Estes resultados indicam que apesar da forte associação existente entre TLC e contagem de células T CD4+, a contagem total de linfócitos não é um bom indicador da contagem de células T CD4+ em pacientes portadores do vírus HIV, mas pode ser um útil indicador para dispensar a realização da contagem de células T CD4+.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-12-05T18:04:29Z No. of bitstreams: 1 Marcelo Dos Santos Teixeira Obtencao de celulas... 2003.pdf: 28318419 bytes, checksum: a1e439159f78f314897b74a003f09de9 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-05T18:04:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcelo Dos Santos Teixeira Obtencao de celulas... 2003.pdf: 28318419 bytes, checksum: a1e439159f78f314897b74a003f09de9 (MD5) Previous issue date: 2003 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil