O desenvolvimento da técnica de transferência embrionária no oviduto mediante videolaparoscopia e a avaliação de produtividade da punção folicular laparoscópica (LOPU) associada à transferência embrionária laparoscópica e/ou por laparotomia videoassistida, ambas no oviduto, foram os objetivos do presente trabalho. Foram utilizados 53 animais, sendo as punções foliculares para obtenção dos oócitos realizadas em 9 ovelhas adultas estimuladas hormonalmente, chamadas doadoras. Os oócitos foram obtidos através de LOPU repetidamente com intervalo mínimo de um mês entre os procedimentos nas mesmas doadoras. Os oócitos puncionados foram maturados, fertilizados e mantidos em cultivo por até três. Os embriões clivados foram transferidos no segundo dia após a fertilização in vitro (FIV) em ovelhas receptoras com cio sincronizado. A transferência dos embriões (TE) foi realizada primeiramente em 10 receptoras por laparoscopia e em 34 receptoras por laparotomia videoassistida, sendo esta última dividida em duas etapas cronológicas. Para a realização da TE por videolaparoscopia, foi introduzido, inicialmente, um trocarte de 5 mm na linha média ventral próximo à glândula mamária para passagem da óptica. Um segundo portal, crânio-lateral ao primeiro, foi criado para introdução de pinça de manipulação de ovário. Confirmada a existência de corpo lúteo (CL) em um dos ovários, um trocarte foi inserido no lado oposto a esse para passagem de cateter de Foley. Sua função foi auxiliar na exposição e abertura da fímbria. Um cateter urinário, contendo os embriões foi então introduzido na porção inicial do oviduto para deposição dos mesmos. Obteve-se 8 fetos resultantes da transferência por laparoscopia (10 receptoras), 10 fetos resultantes da primeira etapa da transferência por laparotomia (14 receptoras) e 30 fetos resultantes da segunda etapa da laparotomia (20 receptoras). A média de fetos por sessão de LOPU foi de 1 para transferência laparoscópica, 1,3 na primeira etapa da transferência por laparotomia e 3,3 na segunda etapa de laparotomia. A transferência embrionária videolaparoscópica de embriões clivados no oviduto mostrou resultado positivo na produção de fetos, podendo ser considerada técnica promissora. Quando associada à LOPU, a transferência embrionária no oviduto por laparoscopia / laparotomia videoassistida, apresentou resultados superiores aos relatados na literatura com a transferência intra-uterina de embriões FIV. / The development of the technique of embryo transfer in oviduct through video-assisted laparoscopy and the demonstration of productive association between laparoscopic follicle aspiration (LOPU) and embryonic transfer laparoscopy and / or open surgery (video-assisted laparotomy)both in oviduct was the goal of the work. From the 53 animals used in the study, follicular puncture was used to obtain oocytes from 9 adult ewes for super-ovulated with hormonally stimulation, referred to as the donors. The oocytes were obtained through repeated LOPU with minimum intervals of one month from the same donor. The retrieved oocytes were matured, fertilized with frozen semen and cultured in vitro for up to two days after IVF. The cleaved embryos were transferred on the second day after IVF into synchronized receptor ewes. The transfer of embryos was first done in 10 receptors through laparoscopy and then in 34 receptors through video-assisted laparotomy, the latter being divided into two chronological stages. For the development of ET by video-assisted laparoscopy, a 5mm trocar was initially introduced ventral midline near the mammary gland for passage of the laparoscope. A second portal, in a craniolateral position was used for passage of another 5 mm trocar for introduction of forceps to manipulate the ovary. After confirming the existence of CL in one of the ovaries, a trocar was inserted on the opposite side for passage of the Foley catheter, to assist in the exposure and opening of the fimbria. A urinary catheter, containing the embryo, was then introduced into the initial portion of the oviduct for deposition of the embryos. There were 8 fetuses resulting from the transfer by laparoscopy (10 receptors), 10 fetuses resulting from the first stage of the transfer by laparotomy (14 receptors) and 30 fetuses resulting from the second stage of the laparotomy (20 receptors). The average number of fetuses per session of LOPU was 1 for laparoscopic transfer, 1.3 for the first stage of the transfer by laparotomy and 3.3 in the second stage of laparotomy. The technique of embryo transfer through video-assisted laparoscopy with cleaved embryos in oviduct was thus shown to a positive fetus\'s result of production, and will be promising. When associated with LOPU, the transfer of embryos in oviduct by laparoscopy / video-assisted laparotomy presented better results then other authors when compare intrauterine IVF embryo transfer.

Magistro darbe tiriami tuopų genties medžių tarprūšiniai hibridai, jų morfologiniai ir genotipiniai skirtumai. Darbo objektas. Tuopų genties hibridinių medžių: Populus alba x Populus tremula (Nr. 21), P. tremuloides x P. tremula (Nr.3) bendri palikuonys. Darbo tikslas. Atlikti tuopų genties tarprūšinių hibridų palikuonių pirminį įvertinimą. Darbo metodai: hibridizacijos, audinių kultūrų, DNR žymenų, statistiniai, tyrimo duomenų analizės, testavimo, skaičiavimo. Darbo metodika. Hibridizacija atlikta laboratorijos sąlygomis – mot. P. alba × P. tremula × tėv. P. tremuloides × P. tremula. Mezginės su nesubrendusiais gemalais subrandinamos ir sudaiginamos naudojant 3 skirtingus maitinamųjų terpių variantus. Užauginami hibridų mikroūgliai ir adaptuojami aplinkos sąlygoms specialioje patalpoje (pirminė adaptacija). Po 6 mėnesių įvertinami adaptuotų hibridų kiekybiniai požymiai. Hibridiniai medeliai perkeliami auginti į medelyną lauko sąlygomis (antrinė adaptacija) ir po metų atliekamas fenotipinių požymių įvertinimas. Darbo rezultatai ir išvados. Gauti rezultatai rodo, kad didesnė koncentracija citokininų klasės fitohormono slopino gemalų organogenezę, kai tuo tarpu maitinamoji terpė be fitohormonų sudarė palankiausias sąlygas augalų pilnam išsivystymui pirmame kultivavimo etape. Tolimesni tyrimai parodė, kad 0,5 mg/l BA( Benzyladenino) teigiamai veikė gemalų ( nesudygusių pirmame etape) organogenezę tolimesniuose kultivavimo etapuose. Atlikti regenerantų aukščio matavimai, kurių... [toliau žr. visą tekstą] / In this research work the morphologic and genotypic differences of s were investigated. Research object. The common offsprings of hybrid poplar trees: Populus alba x Populus tremula (No. 21) and P. tremuloides x P. tremula (No. 3). Research aim. Primary assessment of the offsprings obtained after crossing of interspecific Populus hybrids. Research methods: hybridization, tissue culture, DNA markers, statistics, analysis of research data, testing, computation. Research proceedings. Hybridization of P. alba x P. tremula (maternal tree) x P. tremuloides x P. tremula (paternal tree) was done under laboratory conditions. The ovaries with immature embryos were maturated and germinated using 3 different variants of nutrient medium. The hybrid microshoots were grown and later adapted under environmental conditions in the special room (primary adaptation). After 6 months the quantitive features of adopted hybrids were estimated. Young hybrid trees were transferred to the nursery for cultivation under nature conditions. (secondary adaptation). A year later the estimation of phenotypic features was done. Research results and conclusions. The obtained results indicate that higher concentration of cytokinin class phytohormone repressed organogenesis of the embryos, whereas nutrient medium without phytohormones provided the most favourable conditions for the full plant development during the first cultivation stage. The invetigations during following cultivation stages revealed that 0,5... [to full text]

Darbo objektas – alksnio genties medžiai (juodalksnis (Alnus glutinosa L.), baltalksnis (Alnus incana L.) ir hibridinis (gauruotasis) alksnis (Alnus x hybrida A. Braun ex Rcchb). Darbo tikslas – ištirti hibridinio alksnio (Alnus x hybrida A. Braun ex Rcchb) mikrodauginimo audinių kultūroje sąlygas ir išauginti augalus – regenerantus. Darbo metodai – šiame darbe pasirinktas informacijos rinkimo metodas – eksperimentinis tyrimas. Eksperimentinio tyrimo etapai: 1. eksplantų paruošimas sterilinimui ir sterilinimas; 2. maitinamosios terpės ruošimas; 3. augalų regenerantų kultivavimas; 4. duomenų rinkimas, apdorojimas ir rezultatų analizė. Darbo rezultatai: Dauginamosios medžiagos sterilinimui tinkamiausias yra aseptikas „ACE“ ir sidabro nitratas AgNO3, nes priklausomai nuo genotipo, 89–93 procentai eksplantų išliko be užkrato. Nepaisant genotipo kalius 100 procentų susidarė ant visų mikroūglių, skyrėsi tik jo susidarymo laikas. Nustatyta, kad tinkamiausias mikroūglių regeneracijai yra BAP (citokininas) augimo reguliatorius. Hibridinis alksnis mikroūglių skaičiumi aplenkė juodalksnį ir baltalksnį. Didžiausias dauginimo galimybes turi alksnio hibridas, nes iš vieno kaliaus išaugusių mikroūglių skaičius buvo didžiausias. / Final work of University Postgraduate Studies studied the hybrid alder tissue culture and micropropagation of plants–regenerants grown. Research subject – genus alder trees (alder (Alnus glutinosa L.), gray alder (Alnus incana L.) and hybrid (Woolly) alder (Alnus x hybrida A. Braun ex Rcchb). Research aim – to investigate the hybrid alder (Alnus x hybrida A. Braun ex Rcchb) micropropagation conditions in the culture of tissue and to grow crops–regenerants. The experimental phases of the study: 1. the preparation to sterilized explants and sterilization; 2. the preparation of nutrient medium; 3. the cultivation of regenerants–plants; 4. collection, processing of data and analysis of the results. The results – The aseptic „ACE“ and silver nitrate AgNO3 is the most suitable for the sterilization, because depending on the genotype, 89-93 percent of the explants remained free of infection. Despite of genotype callus formed 100 percent on the every microshoots, only in the different time of life. It was found out the best growth regulator of microshoots regeneration is BAP (cytokinin). Hybrid alder by the number of microshoots outsriped alder and gray alder. The biggest opportunities of propagation has hybrid alder because the biggest number of microshoots grown from a single callus.

Darbo tikslas: įvertinti gamybinėse vaistinėse pagamintų tepalų su salicilo rūgštimi kokybę nustatant veikliosios medžiagos atpalaidavimą in vitro ir pasiūlyti alternatyvios sudėties ir gamybos technologijos puskietes sistemas, pasižyminčias ne mažesniu salicilo rūgšties atpalaidavimu in vitro. Darbo uždaviniai: 1. Parinkti ir pritaikyti salicilo rūgšties kiekybinės analizės metodiką; 2. Parinkti tinkamas sąlygas salicilo rūgšties atpalaidavimo iš tepalų tyrimams in vitro; 3. Ištirti salicilo rūgšties atpalaidavimą in vitro iš Lietuvos vaistinėse pagamintų tepalų; 4. Sumodeliuoti alternatyvios sudėties puskietes sistemas su salicilo rūgštimi, jas pagaminti ir įvertinti jų kokybę; 5. Ištirti salicilo rūgšties atpalaidavimą in vitro iš sumodeliuotų puskiečių sistemų bei palyginti gautus atpalaidavimo rezultatus su vaistinėse pagamintų tepalų atpalaidavimo rezultatais. Metodai: Salicilo rūgšties išsiskyrimas iš puskiečių sistemų tirtas naudojant modifikuotas Franz tipo celes. Salicilo rūgštis kiekybiškai nustatyta spektrofotometrijos metodu naudojant spektrofotometrą Agilent 8453, bangos ilgis 296 nm. Kalibracinio grafiko koncentracija ribose 0,005-0,03 mg/ml. Tepalų kokybė nustatyta vertinant tepalo pH ir dinaminę klampą. Rezultatai: po 4 h 5 % salicilo rūgšties tepalai atpalaidavo salicilo rūgšties: LSMU vaistinės- 3,36±0,16 %, “Ąžuolyno” vaistinės- 2,54±0,12 %, UAB “VJV“- 2,71±0,20 %, eksperimentinis 1,89±0,14 %, tepalai, pagaminti sudėtines medžiagas sumaišius grūstuvėje... [toliau žr. visą tekstą] / Objective of work: to evaluate quality of salicylic acid ointments manufactured by pharmacies by assessing release of salicylic acid in vitro and suggest alternative composition and technique semi- solid preparation, characterized by the same or better release of salicylic acid. Main tasks: 1. To select and adapt a suitable method for quantity analysis for salicylic acid; 2. To select appropriate conditions for salicylic acid release in vitro from semi- solid preparation; 3. To research release of salicylic acid in vitro from semi-solid preparations made by Lithuanian pharmacies; 4. To formulate semi- solid preparations containing salicylic acid and evaluate quality; 5. To research release of salicylic acid in vitro from formulated semi- solid preparations and compare release results with release results of semi- solid preparations made by Lithuanian pharmacies. Methods: release of salicylic acid from semi- solid preparations executed by using modificated vertical diffusion Franz cells. The quantity analysis executed by using spectrophotometric methods. UV- Vis spectrophotometer Agilent 8453, wavelength 296 nm, calibration curve within 0,005- 0,03 mg/ml. Ointments quality evaluated by pH and dynamic viscosity. Results: after 4 h 5 % salicylic acid ointments released salicylic acid: LSMU pharmacy‘s ointment- 3,36 %, “Ąžuolyno” pharmacy‘s ointment- 2,54 %, UAB “VJV“ ointment- 2,71 %, experimental ointment- 1,89 %; ointments made by mixing in mortar with glycerol- 2,27 %... [to full text]

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-12-05T18:04:29Z No. of bitstreams: 1 Marcelo Dos Santos Teixeira Obtencao de celulas... 2003.pdf: 28318419 bytes, checksum: a1e439159f78f314897b74a003f09de9 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-05T18:04:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcelo Dos Santos Teixeira Obtencao de celulas... 2003.pdf: 28318419 bytes, checksum: a1e439159f78f314897b74a003f09de9 (MD5) Previous issue date: 2003 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil

A regeneração de plantas de Eucalyptus viminalis Labill. Foi obtida através da micropropagação de segmentos nodais de mudas. O desenvolvimento da técnica consistiu da adequação das fases de desinfestação dos explantes e multiplicação, alongamento e enraizamento de brotações sob condições assépticas e controladas de incubação. O meio de cultura básico foi o de MURASHIGE & SKOOG (MS), suplementado com 2% (P/V) de sacarose e solidificado com 0,8 % (P/V) de ágar , além das vitaminas descritas por GAMBORG & WETTER. Segmentos modais com aproximadamente 1 cm de comprimento, obtidos de mudas de 1 ano, foram desinfestados em solução de 1 ou 2% de hipoclorito de sódio durante 5, 10 ou 15 minutos. Tais explantes foram cultivados em meio MS com metade da concentração sais, com adição de BAP e ANA, ambos na concentração de 0,1 mg.l-1 . Na multiplicação empregou-se a combinação de BAP e ANA. Na fase de alongamento, efetuou-se a combinação de concentrações de sais no meio de cultura com adição suplementar de nitrogênio e regimes de luz, além da combinação de carvão ativado com GA3 e AIB. No enraizamento, empregaram-se diferentes concentrações de AIB combinadas com cinetina, em meio MS ou MS/2. Explantes tratados com solução de 1% de hipoclorito de sódio por 10 min. Apresentaram menores taxas de contaminação e oxidação e maior sobrevivência em relação aos demais tratamentos. Múltiplas brotações foram induzidas pela adição de 0,2 mg.l-1 de BAP e 0,1 mg.l-1 de ANA ao meio MS. No alongamento, o uso do carvão ativado, isoladamente, no meio MS, resultou no maior crescimento em altura das brotações. O uso do GA3 mostrou-se detrimental para o alongamento. O melhor enraizamento foi obtido no meio MS/2 suplementado com 0,5 mg.l-1 de AIB. Nesta fase, o meio MS/2 foi mais eficaz que o MS na formação das raízes. Na micropropagação de Eucalyptus viminalis a máxima taxa de multiplicação obtida foi de 5 a 6 brotações por explante, a cada 8 semanas, com percentagem de enraizamento de 66,6 %. Considerando-se o aspecto das brotações, a taxa ótima de multiplicação foi de 4,6 brotações por explante.

Orientador: Rejane Maria Tommasini Grotto / Resumo: Embora as células alvo do Vírus da Hepatite C (VHC) sejam hepatócitos, o RNA do vírus já foi descrito em outros compartimentos extra-hepáticos como células dendríticas, linfócitos, macrófagos e plaquetas. Estas últimas, são responsáveis pelo carreamento do vírus no paciente infectado, e apesar da ausência do principal receptor associado à entrada do vírus nas células alvo, o CD81, o VHC é capaz de interagir com plaquetas depois de incubação in vitro. Ainda, o vírus carreado pela plaqueta apresenta uma maior estabilidade quando comparado ao vírus circulante no plasma, o que faz com que o vírus presente na plaqueta adquira considerável importância no curso da Hepatite C crônica, podendo funcionar como reservatório para o vírus. No entanto, pouco se conhece se a presença do vírus em plaquetas pode advir de uma prévia interação do vírus com as células precursoras da plaqueta na medula óssea, os megacariócitos. Assim, o presente estudo avaliou a presença do VHC em megacariócitos expostos, in vitro, ao VHC. Material excedente de doadores voluntários e saudáveis de medula óssea foi utilizado como fonte para o isolamento dos megacariócitos, os quais, foram incubados in vitro com 100.000UI/mL de VHC de genótipo 1 (39 horas; 5% de emissão de CO2; homogeinização 3x/dia no mesmo horário). Depois da incubação, os megacariócitos foram isolados e submetidos a análise qualitativa e quantitativa buscando a presença do vírus. Os resultados do presente estudo demonstraram que o VHC pode interag... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Visando o desenvolvimento de um protocolo para a regeneração dos genótipos superiores da Araucaria angustífolia (Bert) O. Ktze, procurou-se verificar os aspectos básicos envolvidos e o comportamento da espécie quanto à micropropagação, através do cultivo dos segmentos caulinares de mudas de 30 a 60 dias, com a obtenção de brotos axilares ortotrópicos. Dos oito a 10 meristemas axilares presentes nestes segmentos, em cultivos no meio MS/2, desenvolveram-se em média dois a três brotos, dos quais, um a dois dominantes. Das citocininas utilizadas para a obtenção de maior número de brotos, verificou-se que a espécie é sensível à zeatina, mas em combinação com o meio MCM. As gemas apicais e os brotos dominados somente cresceram no meio básico MS/2, com o acréscimo de carvão ativado (5g, lOg ou 20 gil), e ácido giberélico (2 mg/l). O enraizamento (60% a 80%) dos brotos dominantes, foi obtido mediante o tratamento indutivo prévio por seis ou 12 dias, com o ácido indol-3-butírico (6 e 12 mg/I) em meio básico simples, contendo somente 30 g/l de sacarose e 6 g/l de ágar. A emergência e o desenvolvimento das raizes ocorreram nos meios MS/2 ou M514, com duas fases: uma superior com vermiculita e 4,5 g/l de ágar, na qual foram inseridas as bases dos brotos, e a inferior com 6 g/l de ágar, sem vermiculita. Embriões maduros da espécie não mostraram competência para a organogênese, face aos tratamentos testados, mas mostraram que é possível a multiplicação do meristema apical, por meio de tratamentos citocininicos indutivos com altas concentrações e curto prazo (duas-três horas). Para se contornar a limitação da pesquisa a três-quatro meses por ano, imposta pela periodicidade da frutificação, foram testados, com sucesso, dois tipos de armazenamento a frio: o dos pinhões, a -2°C, com 80% de germinação após seis meses; das mudas de 30 a 60 dias, a 4°C, com inibição total do crescimento; também por seis meses. Verificou-se ser viável o rejuvenescimento ex vitro dos indivíduos adultos da espécie, mediante enxertias sucessivas em mudas de 4-6 cm de altura, e em condições ambientais controladas (17 °C ± 2 °C, 60 a 90% de umidade relativa). Os estudos anatômicos mostraram que a Araucária tem grande poder de regeneração, pela rapidez (15 dias) da organização dos meristemas axilares em brotos; capacidade de desdiferenciação das células parenquimáticas do córtex, para a formação do tecido pró-vascular para a conexão dos brotos e segmento caulinar de origem e formação das raizes a partir de células pró-vasculares do calo basal dos brotos. As raízes formadas provaram ser funcionais pela boa sobrevivência das mudas obtidas e transplantadas para o solo. O desenvolvimento do protocolo da multiplicação da espécie via microestacas de mudas é possível, havendo no entanto a necessidade de se ampliar os estudos relativos à obtenção de brotos multiplos a partir dos meristemas axilares do caule.

Submitted by LEONARDO DE FREITAS SILVA null (leonardofreitas86@gmail.com) on 2016-10-20T13:26:49Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de mestrado- reapresentação 1.pdf: 1472109 bytes, checksum: e157f95a9ba34bce0469c51f091af276 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-10-26T17:52:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_lf_me_arafo.pdf: 1472109 bytes, checksum: e157f95a9ba34bce0469c51f091af276 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-26T17:52:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_lf_me_arafo.pdf: 1472109 bytes, checksum: e157f95a9ba34bce0469c51f091af276 (MD5) Previous issue date: 2016-10-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A estabilidade primária de implantes dentários corresponde a um fenômeno mecânico relativo à qualidade ou quantidade óssea, ao tipo de implante e a técnica de instalação. O objetivo deste trabalho foi avaliar o tempo de fresagem, aquecimento dos sítios fresados e a estabilidade dos implantes instalados em cavidades realizadas com ultrassom cirúrgico e instrumentos rotatórios. Foram realizadas 64 cavidades em 04 blocos de poliuretano simulando as densidades de ossos tipo I, II, III e IV. A temperatura da superfície do bloco nos leitos foi medida durante a fresagem. A estabilidade dos implantes foi mensurada por meio do torque de inserção, de remoção e frequência de ressonância. O implante cilíndrico TitaOss 3,75 x 11 mm foi instalado em todas as cavidades. Os resultados mostraram maior tempo e temperatura para o grupo em que foi usado o ultrassom. Quanto à estabilidade primária não houve diferença significante entre os grupos estudados. Pôde-se concluir que a estabilidade primária dos implantes não foi influenciada pelos métodos de fresagem utilizados e que o ultrassom cirúrgico necessitou de mais tempo e gerou mais calor do que o instrumento rotatório para o preparo das cavidades. / The primary stability of dental implants corresponds to a mechanical phenomenon related to bone quality or quantity, type of implant and installation technique. The objective of this study was to evaluate the time of drilling, heating drilled sites and stability of implants placed in cavities made with piezosurgery and rotary instruments. Polyurethane blocks were used simulating the densities of bone type I, II, III and IV. The surface temperature of the block was measured in the cavity during drilling, and recorded the highest temperature variation. The stability of the implants was measured with a torque insertion, torque of removal and resonance frequency. The cylindrical implant TitaOss 3.75 x 11 mm was used in all cavities. The results showed greater time and temperature for the group that was used piezosurgery. The primary stability was no significant difference between groups. It could be concluded that implant primary stability was not influenced by the used methods and piezosurgery took more time and generated more heat than the conventional rotatory instruments to prepare the cavities.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-30Bitstream added on 2014-06-13T20:38:41Z : No. of bitstreams: 1 cruz_mhc_me_jabo.pdf: 449643 bytes, checksum: 0e9dfaf9ccce6d16d2b674ee50050873 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este estudo objetivou avaliar a influência do fluido folicular (FF) e da proteína recombinante humana GDF9 adicionados ao meio de maturação sobre a qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro. Foram realizados três experimentos utilizando o meio TCM199 como meio básico de maturação. No primeiro experimento, os oócitos foram maturados em cinco diferentes meios (0%, 25%, 50%, 75% ou 100% de FF) em quatro tempos de maturação (22, 24, 26 ou 28 h). No segundo experimento, os oócitos foram maturados nos mesmos meios utilizados no primeiro experimento e fecundados em três diferentes tempos (24, 26 ou 28 h). No terceiro experimento, foram utilizados dois meios: controle (sem FF) ou com 25% de FF e quatro níveis de suplementação (0, 25, 100 ou 200 ng/mL) com GDF9. O FF promoveu retardo da progressão meiótica, afetando a maturação nuclear e a migração de grânulos corticais para a periferia dos oócitos. O FF em altas concentrações influenciou negativamente as taxas de clivagem e de blastocisto. O GDF9, com (25%) ou sem FF, não influenciou as taxas de clivagem e de blastocisto, no entanto, interferiu positivamente sobre o percentual de embriões considerados superiores. O percentual mais elevado (82,22%) de embriões classificados como superiores foi obtido com o uso de 200 ng de GDF9 em meio de maturação acrescido de 25% de FF. Em conclusão, a adição do fluido folicular (75% e 100%) ao meio de maturação in vitro retarda a progressão meiótica, sincronizando a maturação nuclear com a citoplasmática e a suplementação do meio de maturação com proteína recombinante humana GDF9 melhora a qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro, baseando-se na avaliação da proporção do número de células da massa celular interna (MCI) em relação ao número total de células / This study aimed to evaluate the effects of follicular fluid (FF) and recombinant human GDF9 added to the maturation media on the quality of in vitro produced bovine embryos. Three experiments using TCM199 medium as basic maturation media were performed. In the first experiment oocytes were matured in five different media (0%, 25%, 50%, 75% or 100% of FF) during four maturation times (22, 24, 26 or 28 h). In the second experiment, the oocytes were matured in the same five media used in the first experiment and fertilized at three different times (24, 26 or 28 h). In the third experiment were used two media: control (without FF) or with 25% FF combined with four levels of supplementation (0, 25, 100 or 200ng/mL) with GDF9. The FF promoted delay of the meiotic progression, affecting nuclear maturation and cortical granules migration to the oocyte periphery. In addition FF influenced the cleavage and blastocyst rates. GDF9, without or added to FF did not affect the cleavage and blastocyst rates, however, a positive influence on the percentage of embryos considered superior was observed. The highest percentage (82.22%) of embryos considered superior was obtained with maturation media added with 25% of FF and supplemented with 200 ng of GDF9. In conclusion, addition follicular fluid (75% and 100%) to the in vitro maturation media delays meiotic progression, synchronizing nuclear to cytoplasmic maturation, and supplementation of maturation media with recombinant human GDF9 improves the quality of bovine embryos in vitro produced, based on inner cell mass cells (ICM) proportion, relative to the total cell number