Compara los valores absolutos y porcentuales de las células NKT en pacientes con VIH y controles normales, así como los otros conjuntos de linfocitos. Es un estudio de tipo descriptivo, observacional y de corte transversal realizado en los laboratorios de epidemiología molecular del Instituto de Medicina Tropical de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, con muestras recolectadas del Hospital Nacional Dos de Mayo. Las muestras de sangre total anticoagulada con EDTA pertenecen a una población mixta y sin rangos de edad, atendidos y diagnosticados con VIH en el servicio de infectología del Hospital Nacional Dos de Mayo y a una población control. Determina las células NKT, así como los demás subconjuntos celulares gracias a la técnica de citometría de flujo utilizando el reactivo MultiTEST CD3 FITC/CD16 + CD56 PE/CD45 PERCP/CD19 APC de BD y tubos Trucount para el recuento absoluto. Utiliza el software del equipo Accuri C6 para la adquisición y análisis de las muestras. El análisis estadístico se llevó a cabo utilizando STATA 10 donde se determinó la normalidad de las variables con la prueba de Shapiro-Wilk y se realizó la prueba de t de student para comparar medias. Encuentra que los recuentos absolutos de NKT en controles sanos son mayores que en pacientes infectados. Obtiene de medias 233.03 células/μL y 80.79 células/μL respectivamente, siendo las diferencias de estas estadísticamente significativas. Lo mismo ocurre con los valores porcentuales de este grupo celular. Del mismo modo se observa disminución en linfocitos totales y linfocitos CD3. Las células NK se mantienen en pacientes con VIH en este estudio. Concluye que las células NKT se ven disminuidas en pacientes recientemente infectados con VIH en comparación a un grupo control. No sucede lo mismo con células NK. Se recomienda que este estudio sea el primer paso a nuevos trabajos que involucre células NKT y VIH, así como su implicancia en la aparición de infecciones oportunistas en el Perú. / Tesis

Evalúa la efectividad del tratamiento antirretroviral en la transmisión vertical en embarazadas que asistieron al Hospital Martin Icaza en el año 2014. Tiene un enfoque cuantitativo, tipo observacional, de corte transversal y retro-prospectivo. Revisa sistemáticamente las historias clínicas de 40 gestantes con diagnóstico confirmativo de VIH con carga viral, recuento de CD4 atendidas. La seguridad del tratamiento se valora mediante las pruebas bioquímicas del perfil hepático y sanguíneo, la eficacia mediante las pruebas de determinación de carga viral para evidenciar la transmisión vertical. Para el análisis de datos demográficos se utiliza las estadísticas descriptivas y para determinar efectividad, seguridad y adherencia las pruebas no paramétrica de Rho Sperman, Kolmogorov-Smirnov, para el análisis se trabaja con un intervalo de confianza del 95%. Encuentra que 72% reportó valores de carga viral menor a 20 copias. El 63% de las gestantes presenta valores de CD4 mayor a 500. Todas recibieron TARGA en los dos esquemas; TENOFOVIR + ENTRACITAVINA + EFAVIRENZ en el 82.5%; mientras que con el esquema de inhibidores de proteasas son el 17.5%, durante el parto sólo una gestante no tuvo profilaxis con AZT. En la eficacia del TARGA no hubo transmisión vertical postparto. Los niños y niñas fueron normales física y clínicamente. La adherencia al TARGA categoriza a las gestantes en cumplidoras al 95% con una actitud positiva al medicamento. Concluye que la efectividad y seguridad del TARGA en la reducción del riesgo de transmisión vertical de las gestantes al producto fue del 100%, con una adherencia y cumplimiento del tratamiento del 95%, con una actitud positiva de beneficio para su bebe y para ellas. / Tesis

Evalúa la asociación estadística en un estudio caso-control entre dos SNPs rsβββ754γ y rs407γ del gen IL-8, con la presencia de PET en individuos portadores del virus HTLV-1. No se observan diferencias estadísticamente significativas en la distribución de las frecuencias genotípicas y haplotípicas entre los grupos control y PET. Sin embargo, el genotipo T/T de rsβββ754γ muestra una tendencia a un efecto de riesgo (OR=γ.40 [0.98 a 11.84], p-value=0.048), mientras que el genotipo T/A de rs407γ a un efecto protector (OR=0.67 [0.4γ a 1.06], p-value=0.084). Aunque no se evidencia una asociación estadísticamente significativa, se observan tendencias de ciertos genotipos para tener un efecto protector o de riesgo. / Tesis

Evalúa la asociación estadística en un estudio caso-control entre dos SNPs rsβββ754γ y rs407γ del gen IL-8, con la presencia de PET en individuos portadores del virus HTLV-1. No se observan diferencias estadísticamente significativas en la distribución de las frecuencias genotípicas y haplotípicas entre los grupos control y PET. Sin embargo, el genotipo T/T de rsβββ754γ muestra una tendencia a un efecto de riesgo (OR=γ.40 [0.98 a 11.84], p-value=0.048), mientras que el genotipo T/A de rs407γ a un efecto protector (OR=0.67 [0.4γ a 1.06], p-value=0.084). Aunque no se evidencia una asociación estadísticamente significativa, se observan tendencias de ciertos genotipos para tener un efecto protector o de riesgo. / Tesis

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / El documento digital no refiere asesor / Determina el riesgo de desarrollar enfermedad cardiovascular coronaria en pacientes VIH en tratamiento con Inhibidores de Proteasa usando del score de Framingham en el Hospital Nacional Hipólito Unanue. Se realizó un estudio observacional, transversal, de 245 pacientes con infección VIH que se encuentran con terapia antirretroviral con Inhibidor de Proteasa que son controlados en el Hospital Hipólito Unanue, en el periodo que correspondió al estudio. El 61.2% fueron pacientes del sexo masculino; siendo el 38.8% pacientes del sexo femenino. La media de la edad de los varones fue de 37+/-9.2 años, y de las mujeres fue de 37.6+/-9.6 años. La media global de la edad fue de 37.3+/-9.4 años, siendo la mínima de 17 y la máxima de 73 años. El 89.8% de los pacientes tiene riesgo bajo; para el desarrollo de enfermedad coronaria; el 4.9% tuvo riesgo ligero y un 5.3% tuvo riesgo moderado. La media del puntaje del score de los pacientes con bajo riesgo fue de 2.8. La media del puntaje del score de los pacientes con ligero riesgo fue de 10.9. La media del puntaje del score de los pacientes con moderado riesgo fue de 15.1. Hubo una diferencia estadísticamente significativa entre las medias de los pacientes de bajo riesgo con los de ligero y de moderado riesgo, es decir, observamos que a mayor edad, existe un mayor riesgo de enfermedad coronaria (P<0.05). No hubo una diferencia estadísticamente significativa entre las medias de los valores de HDL en los tres grupo de riesgo (P<0.05). Hubo una diferencia estadísticamente significativa entre las medias de los valores del colesterol total entre los de bajo y moderado riesgo, y de los de ligero y de moderado riesgo (P<0.05). El riesgo de desarrollar enfermedad cardiovascular coronaria en pacientes VIH en tratamiento TARGA usando del score de Framingham en el Hospital Nacional Hipólito Unanue es bajo en un 89.8%, riesgo ligero en un 4,9% y riesgo moderado en un 5.3%. A mayor edad, existe un mayor riesgo de desarrollar enfermedad cardiovascular coronaria en pacientes VIH en TARGA usando del score de Framingham. (P<0.05).Existe una asociación estadísticamente significativa de mayor riesgo de desarrollar enfermedad cardiovascular coronaria en pacientes del sexo masculino (P<0.05).No existe una diferencia estadísticamente significativa entre las medias de los valores de HDL en los tres grupo de riesgo encontrados (P<0.05).Existe una diferencia estadísticamente significativa entre las medias de los valores del colesterol total entre los de bajo y moderado riesgo. (P<0.05) / Trabajo de investigación

El fucoidan es un polisacárido extraído de algas pardas y ha sido ampliamente estudiado por sus propiedades anticoagulantes, antivirales, antiinflamatorias, antioxidantes, antitumorales, antiangiogénicas e inmunomoduladoras, que varían de acuerdo a la especie. Lessonia trabeculata es un alga parda del litoral peruano que se emplea en la industria alimentaria; sin embargo, tiene otros usos potenciales que deben ser investigados. El desarrollo de nuevos productos con actividad biológica a partir de estas algas requiere de evaluaciones in vitro e in vivo. El objetivo fue evaluar la producción de citoquinas de respuesta inmune celular: TNF-α, TNF-β, IFN-γ e IL-2, la producción de especies reactivas de oxígeno (ERO) y óxido nítrico (NO) en ratones inmunizados con glóbulos rojos de carnero (GRC) y tratados con diferentes concentraciones del extracto liofilizado rico en fucoidan de Lessonia trabeculata, empleándose como control fucoidan de Fucus vesiculosus. Los ratones fueron tratados durante 14 días por vía oral, para evaluar la respuesta inmune primaria (RIP), y durante 28 días, para la respuesta inmune secundaria (RIS). Las ERO se evaluaron mediante el ensayo de reducción de nitroazul de tetrazolio, y el NO por la reacción de Griess. La expresión génica y la presencia de citoquinas séricas se determinaron mediante PCR convencional y ELISA de tipo sándwich, respectivamente. Los resultados obtenidos demuestran que el extracto liofilizado rico en fucoidan de Lessonia trabeculata no influye en la producción de ERO ni NO, incrementa la expresión de TNF-α y la concentración en suero de TNF-α, IFN-γ e IL-2 e inhibe la expresión de TNF-β en RIP, promueve la expresión de TNF-β e IL-2, inhibe la expresión de TNF-α y reduce la concentración en suero de IL-2 en RIS. Se concluye que el extracto liofilizado rico en fucoidan de Lessonia trabeculata estimula la inmunidad celular en la respuesta primaria y secundaria, sin embargo, es necesario complementar estos resultados con posteriores investigaciones. / Perú. Ministerio de la Producción. Programa Nacional de Innovación para la Competitividad y Productividad (Innóvate Perú) / Universidad Nacional Mayor de San Marcos (Lima). Vicerrectorado de Investigación y Posgrado / Tesis

Estima la frecuencia de anticuerpos contra toxoplasma gondii y Neospora caninum en vicuñas de la provincia de Yauli–Junín, así como también determinar el grado de concordancia entre las pruebas de inmunofluorescencia indirecta (IFI) y ELISA indirecta. Se colectaron 79 muestras de sangre de vicuñas, obtenidas durante un “Chaku”, técnica ancestral de arreo que permite la captura de animales vivos para la esquila, realizado en el distrito de Paccha provincia de Yauli, ubicado en el departamento de Junín. Las muestras fueron trasladadas al laboratorio de Microbiología y Parasitología Sección Parasitología de la Facultad de Medicina Veterinaria de la UNMSM, para su posterior análisis. El diagnóstico para ambas enfermedades se realizó utilizando las pruebas de ELISA indirecta e IFI, en cada caso. La frecuencia hallada para Toxoplasma gondii fue de 5.06 y 3.08% por las pruebas de ELISA indirecta y la de IFI respectivamente; no encontrándose reacción seropositiva para Neospora caninum con las dos pruebas usadas. Con relación al grado de asociación, entre las dos pruebas usadas en el diagnóstico de Toxoplasma gondii se encontró un valor de kappa de 0.85, lo cual significa que la concordancia ofrecida por ambas pruebas es muy buena. / Tesis

La inflamación hepática crónica es un fenómeno crucial en la patogénesis del carcinoma hepatocelular (HCC). En los últimos años, el proceso inflamatorio desencadenado por la activación del complejo del inflamasoma se ha asociado con diferentes enfermedades hepáticas. Sin embargo, su papel en el desarrollo de HCC está prácticamente sin explorar. En esta tesis, se estudia y analiza el impacto de diferentes componentes del inflamasoma, incluyendo la proteína caspasa 1 y los receptores AIM2 (del inglés absent in melanoma 2) y NLRP3 (del inglés NOD-like receptor family pyrin domain containing 3), en el desarrollo de HCC inducido por dietilnitrosamina (DEN) en ratones. La inactivación genética de AIM2, pero no de NLRP3, reduce el daño hepático y el desarrollo de HCC en este modelo. La deficiencia de AIM2 está asociada a una disminución en la activación del inflamasoma, la inflamación hepática y la respuesta proliferativa durante la fase de iniciación del HCC. También se identificó que AIM2 está altamente expresado en células de Kupffer, y que la producción de interleucina (IL)-1β, mediada por AIM2, en estas células se ve aumentada tras el daño hepático inducido por DEN. Además, la inhibición de IL-1β resultó en menor daño hepático, inflamación y proliferación durante la fase inicial de hepatocarcinogénesis; sin embargo, esta inhibición no fue suficiente para frenar la progresión de tumores hepáticos ya establecidos. Así, los datos de esta tesis indican que AIM2 promueve el proceso inflamatorio durante el daño hepático carcinogénico, contribuyendo al desarrollo genotóxico de HCC en ratones y, por tanto, reconociendo AIM2 como una posible diana terapéutica en esta enfermedad.

El presente trabajo investigo la actividad antifúngica in vitro de doce extractos etanolicos correspondientes a diez plantas medicinales peruanas; Annona cherimolia Mill. (hojas), Annona muricata L. (corteza y hojas), Bidens pilosa L. (partes aéreas), Hypericum laricifolium L. (partes aéreas), Juglans neotropica Diels (corteza), Piper spp. (hojas), Plantago major L. (hojas), Psidium guajava L. (hojas), Schinus molle L. (corteza y hojas) y Spartium junceum L. (planta entera). Las especies fueron recolectadas en el departamento de Amazonas, excepto Schinus molle L. (Apurímac) y Annona muricata L. (Lima). La actividad antifúngica se evaluo mediante los métodos de difusión en agar y dilución en agar para la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI). Los microorganismos de prueba utilizados fueron las levaduras Candida albicans ATCC 10231 y Candida albicans cepa clínica, así como, el hongo filamentoso Aspergillus niger ATCC 16404; las cepas fueron proporcionadas por la Cátedra de Microbiología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. De doce extractos investigados, seis presentaron actividad antifúngica consistente con un diámetro de halos de inhibición ≥18mm (Prueba de Difusión en agar) frente a Candida albicans ATCC 10231. Ningún extracto mostró actividad consistente frente a la cepa clínica de Candida albicans y Aspergillus niger ATCC 16404. La CMI de los extractos que presentaron actividad consistente frente a Candida albicans ATCC 10231, fue de 250 µg/mL para Hypericum laricifolium L., Juglans neotropica Diels, Psidium guajava L. y Schinus molle L. (un extracto de corteza y uno de hojas) y de 500µg/mL para Piper spp. No se determino la CMI de los extractos (Juglans neotropica Diels y Psidium guajava L.) que presentaron halos frente al Aspergillus niger ATCC 16404 por considerarlos sin actividad significante (<18mm.). Los antifúngicos Nistatina y Fluconazol fueron incluidos en el estudio como controles positivos. -- Palabras clave: Actividad antifúngica, plantas medicinales, plantas del Perú, Amazonas, concentración mínima inhibitoria, Candida albicans, Aspergillus niger. / -- The present work investigated the antifungal activities in vitro of twelve ethanolic extracts corresponding to ten peruvian medicinal plants; Annona cherimolia Mill. (leaves), Annona muricata L. (bark and leaves), Bidens pilosa L. (aerial parts), Hypericum laricifolium L. (aerial parts), Juglans neotropica Diels (bark), Piper spp. (leaves), Plantago major L. (leaves), Psidium guajava L. (leaves), Schinus molle L. (bark and leaves) and Spartium junceum L. (whole plant). The plants were collected in the department of Amazonas, except Schinus molle L (Apurímac) and Annona muricata L. (Lima). The antifungal activities were determinated by the methods of agar diffusion and agar dilution for the determination of the Minimal Inhibitory Concentration (MIC). The used microorganisms of test were the yeasts Candida albicans ATCC 10231 and Candida albicans clinical isolate, as well as, the filamentous fungus Aspergillus niger ATCC 16404; the microorganism were provided by the Chair of Microbiology of Faculty of Pharmacy and Biochemistry of the Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Of twelve investigated extracts, six presented significant antifungal activity with a diameter of inhibition haloes ³18mm (Agar Diffusion) against Candida albicans ATCC 10231. No extract showed significant activity against to Candida albicans clinical isolate and Aspergillus niger ATCC 16404. The MIC of the extracts that presented significant activity against Candida albicans ATCC 10231, were of 250µg/mL for Hypericum laricifolium L., Juglans neotropica Diels, Psidium guajava L. and Schinus molle L.(bark and leaf extracts) and of 500µg/mL for Piper spp. We do not determine the MIC of the extracts (Juglans neotropica Diels and Psidium guajava L.) that presented haloes against Aspergillus niger ATCC 16404 for considering them without significant activity (<18mm.). The antifungal agents Nistatin and Fluconazole were included in the study as positive controls. -- Key words: Antifungal activity, medicinal plants, Peruvian plants, Amazonas, minimal inhibitory concentration, Candida albicans, Aspergillus niger. / Tesis

Inhibitor of Differentiation (ID) proteins are a family of four (ID1-4) bHLH transcription factors that lack the DNA binding domain. They act by forming dimers with other transcriptional regulators and inhibiting their interaction with DNA. They play a crucial role during embryonic development and later in the adulthood, their expression is mostly restricted to a few populations of stem cells. In the last decades, many authors have described their re-activation and participation in tumor development, angiogenesis and EMT although the results are still controversial. In the first chapter of this research work, the role of ID genes as prognostic markers in breast cancer was evaluated. We studied the mRNA expression of the four ID genes and four markers of EMT by qRT-PCR in a clinical series of 307 primary breast carcinomas previously stratified in immunophenotypes. In addition, the expression of all these genes was measured in breast cancer cell lines and mammospheres. Overexpression of at least one ID gene was found in 48.9% of the studied samples. ID1 and ID4 were overexpressed mostly in TNBL and HER2-enriched subtypes, whereas ID2 and ID3 were overexpressed more frequently in luminal tumors. High ID1 and ID4 was associated with larger tumor size, histological grade 3, presence of necrosis and vascular invasion, and poorer outcome. Multivariate analysis revealed that ID4 and vascular invasion were independent factors for DFS. Regarding EMT markers, high levels of SNAI1 were associated with the overexpression of the four ID genes. Additionally, ID1 overexpression was positively related to TWIST1, and the overexpression of ID2 and ID3 was more frequently paired with tumors that conserve CHD1 expression. In vitro studies showed high expression of the four ID genes in all cell lines. However, when mammospheres were formed, mRNA levels of ID genes decreased, in contrast to SNAI1 and TWIST1, which mostly increased. In the second chapter of this thesis, we aimed to (a) describe the mechanisms of action of a small molecule pan-ID antagonist, (b) define its main targets and (c) investigate potential pathways of acquire resistance. Treatment with AGX51 led to Id protein loss, increase in ROS accumulation, cell cycle arrest, and cell death in all tumor cell lines tested. Here, we used an antioxidant compound in different cell lines to demonstrate that ROS are the main responsible of cell death following treatment with AGX51. A model of cultured quiescent cells not expressing ID proteins served to show that the main target of AGX51 are these proteins. Experiments with AGX-derivatives also supported these results. Finally, three mutagenizing agents were used in order to generate mutations that confer resistance to treatment with AGX51. Treatment with ENU gave rise to two clones apparently resistant to AGX51 effects. Based on our in vitro and clinicopathological studies, we conclude that ID1 and ID4 may act as biomarkers of worse prognosis in patients with breast cancer, and seem to be involved in the initiation of EMT mechanism. Therefore, they are potential targets for the development of novel drugs. In line with this, AGX51 arises as a potent anti-ID compound that has anticancer effects.