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Desempenho e comportamento de coelhos em crescimento em gaiolas enriquecidasBarros, Thaís Freitas Marques de [UNESP] 11 November 2011 (has links) (PDF)
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barros_tfm_me_botfmvz.pdf: 355685 bytes, checksum: d0bdb5b474f7d736413cb296b0689549 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo foi avaliar o efeito do enriquecimento da gaiola sobre o comportamento e desempenho de coelhos em crescimento, com diferentes formações de grupos sociais. O experimento, conduzido em duas etapas, teve inicio na desmama, com cinco semanas, e finalizou com 11 semanas de idade. Em cada etapa foram utilizados 72 coelhos do grupo genético Botucatu, 36 machos e 36 fêmeas, alojados em 12 gaiolas de arame galvanizado, seis animais por gaiola. Os animais foram distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, com arranjo fatorial de 2 x 3 (com e sem enriquecimento e em três tipos de grupos sociais – fêmeas, machos e misto), totalizando 6 tratamentos com 2 repetições em cada etapa. Dois pedaços de eucalipto (15 x 3 x 3 cm), usados como enriquecimento, foram dependurados com arame no teto da gaiola e posicionados entre 20 e 30 cm do piso. Seis câmeras foram usadas para registrar imagens do comportamento dos animais por 24h contínuas, uma vez por semana, na 7ª, 10ª e 11ª semanas. Quatro pontos de luz negra foram acionados no período noturno. Foram efetuados registros pontuais dos comportamentos: lúdico, exploratório, agressivo, estereotipado, interação com o enriquecimento, interação social e cecotrofia. Para avaliação do bem-estar foram utilizadas as frequências dos comportamentos lúdico e estereotipado, além da interação com o enriquecimento. Aos 77 dias foi registrado o número de lesões cutâneas nas orelhas e em outras partes do corpo, que pudessem ter sido ocasionadas por brigas. Em seguida, os animais foram abatidos e o peso dos órgãos, incluindo o cérebro, da carcaça e de seus cortes foram coletados. Não houve diferença no desempenho entre os tratamentos. O efeito da interação enriquecimento x grupo social revelou que os machos com enriquecimento... / The objective was to evaluate the effect of cage enrichment on the behavior and welfare of growing rabbits in different social groups. The experiment, carried out in two phases, was initiated at weaning with five weeks of age and ended at 11 weeks of age. Seventy-two rabbits from the Botucatu genetic group, 36 males and 36 females, were housed in 12 wire cages, six per cage, in each phase. The animals were assigned to a completely randomized design with a 2 x 3 factorial arrangement (with or without enrichment and in three types of social groups – females, males, and mixed) comprising six treatments with two replicates in each phase. Two eucalyptus sticks (15 x 3 x 3 cm) were hung from the cage ceiling with wires to be positioned at 20 to 30 cm from the cage floor. Six cameras were used to record the animals’ behavior continuously for 24 hours, once a week on weeks 7, 10 and 11. Four black light bulbs were turned on during the night. The following behavior activities were scored as they occurred: ludic, exploratory, agressive, stereotypes, interaction with the enrichment, social interaction, and cecotrophy. The frequencies of ludic and stereotyped activities were used to evaluate welfare in addition to interaction with the enrichment. At 77 days of age the number of skin lesions in the ears and other parts of the body, that could have been caused by fights among animals, were recorded and the animals were slaughtered. The weight of organs, including the brain, carcass and carcass parts were registered. No difference in growth performance was detected among treatments. An enrichment x social group interaction effect... (Complete abstract click electronic access below)
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Perfil de proteases e avaliação histopatológicas de lesões cutâneas em camundongos tratadas com a lectina isolada das sementes da Canavalia brasiliensisSILVA, Flávio Oliveira 05 February 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-02-05 / Lectins, carbohydrate binding proteins of non immune origin, agglutinate cells and glycoconjugates. Some proteins as the lectins from the Diocleinae tribe have described as pharmacological active molecules. Lectins form an important class of carbohydrate-binding proteins. Canavalia brasiliensis (ConBr) is a sugar-binding specificity [D-mannose (Dglucose)] protein. The aim of this study was evaluate the proteins profile and to evaluate histhopathologically treated wounds with ConBr seeds lectins. Surgical wounds were produced in the dorsal region in albino Swiss mice. Each wound was daily treated topically along 11 days, as follow: ConBr (10μg), ConBr/Manose (10μg in manose 0,1M), manose (0,1M) and NaCl (150mM). Protein profile has done through SDS-PAGE and showed proteins with molecular weight between 30 and 70KDa, suggesting the presence of metalloproteinases in the homogenates gotten from the cutaneous injuries. In 2nd day of postoperative (PO), the ConBr/Manose group was what it presented the highest proteolitic activity, in 7th day of P.O., the highest activity was observed in the ConBr and NaCl groups. Finally, in 12th day of PO ConBr/manose group showed a maxim proteolitic activity. ConBr group showed flogistic signs less intense than others groups, had presented contraction percentile superior during the fibroplasia phase. In the first 48 hours it was observed, in all the studied groups, the presence of polymorphonuclear leukocyte infiltrate, crust and angiogenesis. At 7th day there was presence of fibrovascular (manose, ConBr Manose and ConBr) and vascular granulation tissue (NaCl) in studied groups. Finally, at 12th day, wounds showed reepithelization. In ConBr/manose group there was presence of fibrovascular granulation tissue with more organized collagen network. Results suggests that wound healing it was better in ConBr group, having presented one better effect when used in association with manose. / Lectinas são proteínas de origem não imune que se ligam a carboidratos, podendo aglutinar células e glicoconjugados. Algumas dessas lectinas, como as obtidas de leguminosas da tribo Diocleinae possuem atividade farmacológica, a exemplo da Canavalia brasiliensis (ConBr) a qual exibe especificidade de ligação D-manose/D-glicose. O objetivo desse estudo foi determinar o perfil de proteases e avaliar clínica e histopalogicamente o efeito do tratamento tópico de feridas cutâneas com a ConBr livre e conjugada com o seu açúcar específico. Para isso, lesões cirúrgicas foram produzidas na região dorsal de camundongos, divididos em grupos, de acordo com o tratamento que se segue: NaCl (150mM), manose (0,1M), ConBr (10μg) e ConBr/manose (10μg em solução fisiológioca com manose 0,1M). O perfil das proteínas realizado através de eletroforese SDS-PAGE demonstrou a presença de proteínas com peso molecular compreendidos na faixa de 30 a 67 kDa, sugerindo a presença de metaloproteinases nos homogenatos obtidos a partir das lesões cutâneas. No 2º dia de pósoperatório (P.O.), o grupo ConBr/Manose foi o que apresentou a maior atividade proteolítica, no 7º dia de P.O., a maior atividade foi observada nos grupos ConBr e NaCl, finalmente, no 12º dia de P.O. a maior atividade proteolítica foi observada no grupo ConBr/manose. Na avaliação clínica observou-se que o grupo ConBr apresentou sinais inflamatórios menos intensos que os outros grupos avaliados, tendo evoluído com maior percentual de contração durante a fase de fibroplasia. Nas análises histopatógicas visualizou-se no 2º dia de P.O., a presença de crosta, infitrado polimorfonuclear e neoangiogênese em todos os grupos estudados. No 7º dia de P.O., os grupos Manose, ConBr/Manose e ConBr apresentaram tecido de granulação com padrão fibrovascular enquanto no grupo NaCl foi visualizado tecido de granulação com padrão vascular. No 12º dia todos os grupos apresentaram reepitelização, porém o grupo ConBr/Manose apresentou melhor padrão de organização das fibras colágenas. A lectina isolada das sementes da Canavalia brasiliensis favoreceu o processo cicatricial das lesões cutâneas experimentais, tendo apresentado um melhor efeito sob o ponto de vista histopatológico quando usada em associação com a manose.
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Efeitos do laser de baixa potência na leishmaniose experimental: avaliação sobre a lesão cutânea (in vivo) e efeitos sobre leishmânia (in vitro) / Low power laser effects in experimental leishmaniasis: evaluation about skin injury (in vivo) and effects on leishmania (in vitro)Rocha, Jhonathan Gonçalves da 01 September 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-09-01 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Leishmaniasis is neglected infectious and parasitic diseases caused by protozoa of the genus Leishmania, having different clinical forms according to the type of host-parasite relationship established, the main ones being: Leishmaniasis Visceral and Cutaneous Leishmaniasis, object of this study. The fact that conventional treatments present limitations and difficulties for patients coupled with increasing use of low level laser therapy in the treatment of skin lesions of various etiologies, specifically with Low power laser, led us to evaluate the possible consequences of such treatment in American cutaneous leishmaniasis in both murine experimental models (in vivo), with the aim of evaluating the dynamics of healing of ulcerated lesions, as in cultured parasites (in vitro), with the use of techniques that allowed us to evaluate the interference of therapy in cultures of the parasites isolated from the MAB-6 Leishmania (Leishmania) amazonensis Leishmanias belonging to the Bank of the Midwest, with regard to the ability to multiply, viability, integrity and infective capacity. The tests "in vivo" concluded that the use of low-power laser is an interesting tool in the treatment of ulcerative lesions caused by cutaneous leishmaniasis since it leads to decreased edema, stimulates microbicidal action of macrophages and promotes the maturation of collagen. Already in essays "in vitro", it was found that the action of the treatment leads to a static effect on the growth curve of the parasites. The viability tests showed a small increase in the number of parasites killed after treatment and reduction in mitochondrial activity. The low level laser therapy proved incapable of promoting the apoptotic process and modify the composition of the plasma membrane of the parasite, which suggests that the laser treatment did not affect the ability of infection. Instead, there was a rise in titers of viable parasites present in the paws of mice infected with Leishmania treated. / As leishmanioses são doenças infecto-parasitárias negligenciadas, causadas por protozoários do gênero Leishmania, possuindo diferentes formas clínicas de acordo com o tipo de relação parasito-hospedeiro estabelecida, sendo as principais: Leishmaniose Visceral e Leishmaniose Tegumentar Americana, objeto deste estudo. O fato dos tratamentos convencionais apresentarem limitações e dificuldades aos pacientes aliado ao crescente uso da laserterapia de baixa potência no tratamento de lesões dermatológicas de diferentes etiologias, especificamente com o Laser de baixa potência, levou-nos à avaliação das possíveis consequências deste tipo de tratamento na leishmaniose tegumentar americana, tanto em modelos experimentais murinos (in vivo), com o objetivo de avaliar a dinâmica da cicatrização das lesões ulceradas, quanto em culturas de parasitos (in vitro), com o emprego de técnicas que permitiram avaliar a interferência da terapia nas culturas dos parasitos provenientes do isolado MAB-¨6 de Leishmania (Leishmania) amazonensis pertencentes ao Banco de Leishmanias do Centro-Oeste, no que se refere à capacidade de multiplicação, viabilidade, integridade e capacidade infectante. Os ensaios “in vivo” permitiram concluir que o uso do laser de baixa potência é uma interessante ferramenta no tratamento das lesões ulceradas provocadas pela leishmaniose tegumentar americana uma vez que leva à diminuição do edema, estimula a ação microbicida dos macrófagos e favorece a maturação do colágeno. Já nos ensaios “in vitro”, foi verificado que a ação do tratamento leva a um efeito estático sobre a curva de crescimento dos parasitos. Os testes de viabilidade mostraram um pequeno aumento no número de parasitos mortos após o tratamento e na atividade redutora mitocondrial. A laserterapia de baixa potência mostrou-se incapaz de favorecer o processo apoptótico e de modificar a composição da membrana plasmática do parasito, o que permite supor que tratamento com o laser não prejudica a capacidade de infecção. Ao invés disso, verificou-se uma elevação nos títulos de parasitos viáveis presentes nas patas dos camundongos infectados com leishmânias tratadas.
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Avaliação do tratamento tópico de lesões cutâneas com filmes obtidos do polissacarídeo da goma do cajueiro (Anacardium occidentale L .)MONTEIRO, Flaviane Maria Florêncio 07 March 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006-03-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The effect of the treatment of the polimeric film preparation with the extracted polyssacharíd of the gum of the Anacardium occidentale L. was evaluated in excisionals cutaneous injuries in mice albinic Swiss, through the accompaniment of the evolution of the healing cutaneous process, under the clinical and histopathological aspects. After the accomplishment of the surgical procedure, 5 groups (n=15/grupo) had been formed in accordance with the employed treatment: 1. NaCl (NaCl 0,15M); 2. AA (acetic acid 4% v/v); 3. POLICAJU/AA (polimeric film I containig acetic POLICAJU 10% m/v in acid 4% v/v) and 4, POLICAJU/NaCl (polimeric film I containing POLICAJU 10% m/v in NaCl 0,15M). Tissue samples had been fixed and staining (Tricrômicro de Masson) and analyzed in 2nd, 7th and 12th pos-surgical (P.S.) days. In group POLICAJU/AA it was observed reduction of the flogistics signals represented by presence of edema, crust and exudate. Histopathological point of view, the groups treatment with POLICAJU had presented partial reepitelization and soft granulation tissue, specially in the POLICAJU/NaCl group. Thus, it is concluded that the polímeric films I containing POLICAJU, applied as oclusive dressings, had been efficient in the process of cutaneous tecidual repair. The use of films obtained of the POLICAJU for tripsina immobilization (DEI), by entrepment, and its application as dressing in cutaneous injuries was evaluated. DEI it demonstrated it to a constant release of the trypsin optimal pH and temperature of 8,6 and 55°C, in the analyzed conditions and revealed stability stored in the conditions retained about 80% (28 days 25°C) of its initial activity. The wound treatment withDEI it had more presented organized morphologic standard when compared with the controls (NaCl 0,15M and acetic acid 4% v/v). These results demonstrate that the POLICAJU can be used as matrix for trypsin immobilization and a biomaterial potential. An experimental design (2) was applied for determination of the best conditions of entrapment of the trypsin in POLICAJU films. For this study the effect of the concentration of trypsin and the temperature on its activity had been analyzed. It was observed that of the analyzed parameters the lesser concentration of trypsin (100ug/mL) was the best condition of immobilization. This system was evaluated how much it influences enviromental (pH and temperature) and topic application. The best values of pH and the temperature had been 9,0 and 55C, demonstrating to stability the range of temperature (25-65C), how much to the storage DEI it retained 30% of its activity (28 days). The results of the hystopathological evaluations had demonstrated an acceleration of the healing process. From the results of the immobilization of trypsin entrappment in POLICAJU/NaCl and POLICAJU/AA, DEI it was applied as oclusive dressing in the treatment of cutaneous wounds being evaluated its effect under the clinical aspects and histopathology. After the surgical procedure 5 groups had been formed in accordance with the type of treatment (n=15/grupo): 1. NaCl; 2. AA; 3. AAT; 4. POLICAJUT/AA and 5, POLICAJUT/NaCl. Tissue samples had been fixed and staining(Tricrômicro of Masson) in the 2nd, 7th and 12th days after the surgery. The wound treatment with POLICAJUT/NaCl how much to the clinical and histopathology parameters they had presented one better when comparative evolution to the too much groups. The results gotten from all the studies of immobilization and biological application demonstrate the effectiveness of the POLICAJUT/NaCl film with oclusive dressing. / Os efeitos do tratamento do filme polimérico preparado com o polissacarídeo extraído da goma do Anacardium occidentale L. foram avaliados em lesões cutâneas excisionais em camundongos albino Swiss, através do acompanhamento da evolução do processo cicatricial cutâneo, sob os aspectos clínicos e histopatológicos. Após a realização do procedimento cirúrgico, 4 grupos (n=15/grupo) foram formados de acordo com o tratamento empregado: 1, NaCl (NaCl 0,15M); 2, AA (ácido acético 4% v/v); 3, POLICAJU/AA (filme polimérico contendo POLICAJU 10% m/v em ácido acético 4% v/v) e 4, POLICAJU/NaCl (filme polimérico contendo POLICAJU 10% m/v em NaCl 0,15M). Amostras de tecido foram fixadas e coradas (Tricrômicro de Masson) e analisada no 2o, 7o e 12o dias P.O.. No grupo POLICAJU/AA foi observado diminuição dos sinais flogísticos representados por presença de edema, crosta e exsudato. Do ponto de vista histopatológico, os grupos tratados com POLICAJU apresentaram reepitelização parcial e tecido de granulação fibroso, especialmente no grupo POLICAJU/NaCl. Assim, conclui-se que os filmes polímericos contendo POLICAJU, aplicados como curativos oclusivos, foram eficazes no processo de reparo tecidual cutâneo. A utilização de filmes obtidos do POLICAJU como matriz para imobilização de tripsina (DEI), por enclausuramento, e sua aplicação como curativo em lesões cutâneas foi avaliada. O DEI demonstrou uma liberação constante da tripsina, pH e temperatura ótimos de 8,6 e 55°C, nas condições analisadas e mostrou-se estável nas condições do meio, retendo cerca de 80% (28 dias a 25°C) da sua atividade inicial. As lesões tratadas com o DEI apresentaram padrão morfológico mais organizado quando comparado aos controles (NaCl 0,15M e ácido acético 4% v/v). Estes resultados demonstram que o POLICAJU pode ser utilizado como matriz para imobilização de tripsina e um potencial biomaterial. Um planejamento experimental (22) foi aplicado para determinação das melhores condições de enclausuramento da tripsina em filmes de POLICAJU. Para esse estudo foram analisados os efeitos da concentração de tripsina e da temperatura sobre sua atividade. Observou-se que dos parâmetros analisados a menor concentração de tripsina (100μg/mL) foi a melhor condição de imobilização. Este sistema foi avaliado quanto a influência do meio (pH e temperatura) e aplicação tópica. Os valores ótimos de pH e a temperatura foram 9,0 e 55oC, demonstrando estabilidade a ampla faixa de temperatura (25-65oC), quanto ao armazenamento o DEI reteve cerca de 30% de sua atividade (28 dias). Os resultados das avaliações histopatológicas demonstraram uma aceleração do processo cicatricial. A partir dos resultados da imobilização de tripsina enclausurada em POLICAJU/NaCl e POLICAJU/AA, o DEI foi aplicado como curativo oclusivo no tratamento de lesões cutâneas sendo avaliado seus efeitos sob os aspectos clínicos e histopatológico. Após o procedimento cirúrgico 5 grupos foram formados de acordo com o tipo de tratamento (n=15/grupo): 1, NaCl; 2, AA; 3, AAT; 4, POLICAJUT/AA e 5, POLICAJUT/NaCl. Amostras de tecido foram fixadas e coradas (Tricrômicro de Masson) nos 2o, 7o e 12o dias após a cirurgia. As lesões tratadas com POLICAJUT/NaCl quanto aos parâmetros clínicos e histopatológicos apresentaram uma melhor evolução quando comparado aos demais grupos. Os resultados obtidos a partir de todos os estudos de imobilização e aplicação biologica demonstram a eficácia do filme POLICAJUT/NaCl com curativo oclusivo.
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Papel dos receptores β-adrenérgicos no reparo cutâneo de lesões crônicas em camundongos: modelo não invasivo de lesão por isquemia e reperfusão / Role of β-adrenergic in mice chronic wound repair: non invasive model induced by ischemia and reperfusionThatiana Luiza Assis de Brito Carvalho 24 February 2014 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os receptores β1- e β2-adrenérgicos estão presentes em inúmeras células que participam do processo de reparo como fibroblastos, queratinócitos, células inflamatórias e células endoteliais. Diversos trabalhos demonstram que estes receptores modulam o processo de reparo tecidual. Entretanto, nenhum trabalho demonstrou se o bloqueio destes receptores compromete o reparo de úlceras de pressão. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos no reparo de úlceras de pressão em camundongos, para isto utilizamos um modelo não invasivo de lesão por isquemia e reperfusão. No presente estudo, utilizamos animais que foram tratados por gavagem com propranolol (um antagonista não seletivo dos receptores β1- e β2-adrenérgicos). A administração do antagonista teve início um dia antes do início dos ciclos de isquemia e reperfusão e se manteve diariamente até a eutanásia. Para desenvolver a úlcera de pressão, um par de magnetos foi aplicado no dorso dos animais previamente depilado. O período de permanência do magneto é caracterizado como período de isquemia, enquanto sua retirada é caracterizada como período de reperfusão. Os ciclos de isquemia e reperfusão foram repetidos duas vezes, e ao final do último ciclo, duas úlceras circulares foram criadas no dorso dos animais. Os animais foram mortos 3, 7, 14 e 21 dias após a lesão. Após o último ciclo de isquemia, o fluxo sanguíneo da área comprimida foi nulo, 7 horas após a compressão o fluxo sanguíneo estava elevado, com níveis superiores ao da pele normal. Após 24 e 48 horas, o fluxo sanguíneo estava reduzido e abaixo dos níveis da pele normal. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou os níveis de peróxidos lipídicos 3 dias após a lesão, comprometeu a migração dos queratinócitos, levando a um aumento da proliferação epitelial, resultando em uma re-epitelização atrasada. O retardo na formação da neo-epiderme induzido pelo bloqueio destes receptores prejudicou a remoção do tecido necrótico. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou o número de células inflamatórias (neutrófilos e macrófagos), os níveis proteicos de elastase neutrofílica 3 dias após a lesão e reduziu os níveis proteicos de MCP-1 3 dias após a lesão e os níveis proteicos de MMP-12 7 dias após a lesão. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou a proliferação celular e apoptose no tecido conjuntivo 7 dias após a lesão e aumentou a densidade de vasos sanguíneos 14 e 21 dias após a lesão. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos retardou a diferenciação miofibroblástica e reduziu os níveis proteicos de TGF-β 1/2/3 3 dias após a lesão e a contração da lesão. Vinte e um dias após a lesão, o bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou a espessura da neo-epiderme e a expressão de tenascina-C em fibroblastos e reduziu a deposição de colágeno. Em conclusão, o bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos atrasa o reparo tecidual em úlceras de pressão. / β1- and β2-adrenergic receptors are present in several cells that participate in tissue repair such as fibroblasts, keratinocytes, inflammatory cells and endothelial cells. Several studies demonstrate that these receptors modulate cutaneous wound healing. However, neither study demonstrated if the blockade of theses receptors compromises the cutaneous wound healing of pressure ulcers. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of blockade of β1- and β2-adrenergic receptors in wound healing of pressure ulcer in mice using a noninvasive model of lesion induced by ischemia and reperfusion. In this study, animals were also treated with propranolol (a nonselective antagonist of β1- and β2-adrenergic receptors). Antagonism administration began one day before ischemia-reperfusion cycles and daily maintained until euthanasia. In order to develop a pressure ulcer, a shaved skin was placed between a pair of magnet disks. The period of magnet placement is characterized as ischemia period, whereas release period as reperfusion period. Two cycles of ischemia and reperfusion were performed, and after last cycle, two circular ulcers per animal were created in the animal dorsum. Animals were killed 3, 7, 14 and 21 days after wounding. After last ischemia cycle, blood flow of compressed area was nulled, 7 hours after compressed area underwent reperfusion during subsequent hours reaching blood flow 98% superior of normal skin. After 24 and 48 hours, blood flow of compressed area was again reduced when compared with normal skin. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors increased the levels of lipid peroxydes 3 days after wounding, compromised keratinocyte migration leading to an increase epithelial proliferation and impairment in the re-epithelialization. The impairment in the neo-epidermis formation induced by β1- and β2-adrenergic receptor blockade delayed the necrotic tissue loss. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors increased the inflammatory cell number (macrophages and neutrophils), protein levels of neutrophil elastase 3 days after wounding and reduced protein levels of MCP-1 3 days after wounding and protein levels of MMP-12 7 days after wounding. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors increased cell proliferation and apoptosis in connective tissue 7 days after wounding and blood vessel density 14 and 21 days after wounding. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors impaired myofibroblastic differentiation and reduced protein levels of TGF-β 1/2/3 3 days after wounding and lesion contraction. Twenty-one days after wounding, β1- and β2-adrenergic receptor blockade increased neo-epidermis thickness and tenascin-C-positive fibroblast number and reduced collagen deposition. In conclusion, blockade of β1- and β2-adrenergic receptors delays cutaneous wound healing of pressure ulcers.
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Papel dos receptores β-adrenérgicos no reparo cutâneo de lesões crônicas em camundongos: modelo não invasivo de lesão por isquemia e reperfusão / Role of β-adrenergic in mice chronic wound repair: non invasive model induced by ischemia and reperfusionThatiana Luiza Assis de Brito Carvalho 24 February 2014 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os receptores β1- e β2-adrenérgicos estão presentes em inúmeras células que participam do processo de reparo como fibroblastos, queratinócitos, células inflamatórias e células endoteliais. Diversos trabalhos demonstram que estes receptores modulam o processo de reparo tecidual. Entretanto, nenhum trabalho demonstrou se o bloqueio destes receptores compromete o reparo de úlceras de pressão. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos no reparo de úlceras de pressão em camundongos, para isto utilizamos um modelo não invasivo de lesão por isquemia e reperfusão. No presente estudo, utilizamos animais que foram tratados por gavagem com propranolol (um antagonista não seletivo dos receptores β1- e β2-adrenérgicos). A administração do antagonista teve início um dia antes do início dos ciclos de isquemia e reperfusão e se manteve diariamente até a eutanásia. Para desenvolver a úlcera de pressão, um par de magnetos foi aplicado no dorso dos animais previamente depilado. O período de permanência do magneto é caracterizado como período de isquemia, enquanto sua retirada é caracterizada como período de reperfusão. Os ciclos de isquemia e reperfusão foram repetidos duas vezes, e ao final do último ciclo, duas úlceras circulares foram criadas no dorso dos animais. Os animais foram mortos 3, 7, 14 e 21 dias após a lesão. Após o último ciclo de isquemia, o fluxo sanguíneo da área comprimida foi nulo, 7 horas após a compressão o fluxo sanguíneo estava elevado, com níveis superiores ao da pele normal. Após 24 e 48 horas, o fluxo sanguíneo estava reduzido e abaixo dos níveis da pele normal. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou os níveis de peróxidos lipídicos 3 dias após a lesão, comprometeu a migração dos queratinócitos, levando a um aumento da proliferação epitelial, resultando em uma re-epitelização atrasada. O retardo na formação da neo-epiderme induzido pelo bloqueio destes receptores prejudicou a remoção do tecido necrótico. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou o número de células inflamatórias (neutrófilos e macrófagos), os níveis proteicos de elastase neutrofílica 3 dias após a lesão e reduziu os níveis proteicos de MCP-1 3 dias após a lesão e os níveis proteicos de MMP-12 7 dias após a lesão. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou a proliferação celular e apoptose no tecido conjuntivo 7 dias após a lesão e aumentou a densidade de vasos sanguíneos 14 e 21 dias após a lesão. O bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos retardou a diferenciação miofibroblástica e reduziu os níveis proteicos de TGF-β 1/2/3 3 dias após a lesão e a contração da lesão. Vinte e um dias após a lesão, o bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos aumentou a espessura da neo-epiderme e a expressão de tenascina-C em fibroblastos e reduziu a deposição de colágeno. Em conclusão, o bloqueio dos receptores β1- e β2-adrenérgicos atrasa o reparo tecidual em úlceras de pressão. / β1- and β2-adrenergic receptors are present in several cells that participate in tissue repair such as fibroblasts, keratinocytes, inflammatory cells and endothelial cells. Several studies demonstrate that these receptors modulate cutaneous wound healing. However, neither study demonstrated if the blockade of theses receptors compromises the cutaneous wound healing of pressure ulcers. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of blockade of β1- and β2-adrenergic receptors in wound healing of pressure ulcer in mice using a noninvasive model of lesion induced by ischemia and reperfusion. In this study, animals were also treated with propranolol (a nonselective antagonist of β1- and β2-adrenergic receptors). Antagonism administration began one day before ischemia-reperfusion cycles and daily maintained until euthanasia. In order to develop a pressure ulcer, a shaved skin was placed between a pair of magnet disks. The period of magnet placement is characterized as ischemia period, whereas release period as reperfusion period. Two cycles of ischemia and reperfusion were performed, and after last cycle, two circular ulcers per animal were created in the animal dorsum. Animals were killed 3, 7, 14 and 21 days after wounding. After last ischemia cycle, blood flow of compressed area was nulled, 7 hours after compressed area underwent reperfusion during subsequent hours reaching blood flow 98% superior of normal skin. After 24 and 48 hours, blood flow of compressed area was again reduced when compared with normal skin. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors increased the levels of lipid peroxydes 3 days after wounding, compromised keratinocyte migration leading to an increase epithelial proliferation and impairment in the re-epithelialization. The impairment in the neo-epidermis formation induced by β1- and β2-adrenergic receptor blockade delayed the necrotic tissue loss. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors increased the inflammatory cell number (macrophages and neutrophils), protein levels of neutrophil elastase 3 days after wounding and reduced protein levels of MCP-1 3 days after wounding and protein levels of MMP-12 7 days after wounding. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors increased cell proliferation and apoptosis in connective tissue 7 days after wounding and blood vessel density 14 and 21 days after wounding. Blockade of β1- and β2-adrenergic receptors impaired myofibroblastic differentiation and reduced protein levels of TGF-β 1/2/3 3 days after wounding and lesion contraction. Twenty-one days after wounding, β1- and β2-adrenergic receptor blockade increased neo-epidermis thickness and tenascin-C-positive fibroblast number and reduced collagen deposition. In conclusion, blockade of β1- and β2-adrenergic receptors delays cutaneous wound healing of pressure ulcers.
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