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Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-11-20T17:20:35Z No. of bitstreams: 1 2017_DéboraTorresAlvesFigueirêdo.pdf: 4567085 bytes, checksum: 600eeba09f3a09b99f18e33d26f7735c (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-11-28T18:25:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_DéboraTorresAlvesFigueirêdo.pdf: 4567085 bytes, checksum: 600eeba09f3a09b99f18e33d26f7735c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-28T18:25:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_DéboraTorresAlvesFigueirêdo.pdf: 4567085 bytes, checksum: 600eeba09f3a09b99f18e33d26f7735c (MD5) Previous issue date: 2017-11-28 / A soja (Glycine max) é uma das principais comódites agrícola do mundo. Por conter um alto teor de óleo, a semente de soja é de grande interesse tanto para os programas de produção de biodiesel, como para a industria alimentícia. Sementes de soja apresentam um perfil de ácidos graxos composto principalmente de 13% de ácido palmítico (16:0), 4% de ácido esteárico (18:0), 18% de ácido oleico (18:1), 55% de ácido linoleico (18:2) e 10% de ácido linolênico (18:3). Assim, o óleo da semente de soja é rico em ácidos graxos poli-insaturados, o que contribui para a sua instabilidade oxidativa. Uma alternativa para o redução de teores de ácidos graxos poli-insaturados em semente de soja é a utilização da engenharia metabólica para diminuir a expressão dos genes FAD2. Durante a síntese dos ácidos graxos sabe-se que os genes FAD2-1A e FAD2-1B são importantes na conversão do óleo monoinsaturado (oleico) em óleo poli-insaturado (linoleico). Neste trabalho Transcription activator-like effector nucleases (TALENs) foram desenhados a fim de obter mutações nos genes FAD2-1A e FAD2- 1B utilizando um sítio-alvo conservado em ambos os genes. Três linhagens transgênicas de soja (57, 119 e 137) transformadas com os vetores TALEN, foram analisadas quanto ao seu perfil de óleos, mostrando aumento na concentração do óleo oleico (variação de 31-66%, contra 18% normalmente produzido pelo tipo selvagem). A região-alvo do TALEN foi sequenciada e deleções, inserções e mutações foram observadas, sendo também transmitidas para a próxima geração. Os genes da família FAD2 foram analisados como possíveis genes não alvos, já que os genes FAD2-1, FAD2-2, e FAD2-3 compartilham alta similaridade de sequências. Os candidatos não alvos apresentaram significativos índices de atividade do TALEN. Este trabalho foi importante para a consolidação da metodologia TALEN em plantas, e para avaliar os níveis de não alvo deste sistema. / Soybean is one of the most important agricultural commodities in the world. Because soybean seeds contain a high content of oil, they are of great interest as for biodiesel production programs as for the food industry. Soybean seeds have a fatty acid profile composed of 13% palmitic acid (16: 0), 4% stearic acid (18: 0), 18% oleic acid (18: 1), 55% linoleic acid (18 : 2) and 10% linolenic acid (18: 3). Thus, the soybean oil is rich in polyunsaturated fatty acids, which contributes to its oxidative instability. An alternative to reduce the levels of polyunsaturated fatty acids in soybean seeds is the use of metabolic engineering to reduce the FAD2 gene expression. During the synthesis of fatty acids it is known that FAD2-1A and FAD2-1B genes are important in the conversion of monounsaturated fats in polyunsaturated fats. In this work Transcription activator-like effector nucleases (TALENs) were designed in order to obtain mutations in FAD2-1A and FAD2-1B genes using a conserved target site in both genes. Three soybean lines (57, 119 and 137) transformed with TALEN vectors were analyzed, and the oil profile showed increases in oleic concentration (ranging from 31-66%, against 19% normally produced by the wild type). The target regions of TALEN were sequenced and deletions, insertions and mutations were observed, and mutations, which were also transmitted to the next generation. FAD2 gene family have been examined as possible off targets, since the genes FAD2-1, FAD2-2 and FAD2-3 sequences shares high similarity. The off-targets candidates were PCR amplified and their products were sequenced, showing significant off-target rates. This work was important for the consolidation of this system in plants, and to reevaluate its off-target range.

Made available in DSpace on 2015-04-17T15:02:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 715504 bytes, checksum: e007560a3456fe983ad12dbaa28ffeca (MD5) Previous issue date: 2012-02-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Goat milk is a high nutritional value food with an important economic potential. Its nutritional characteristics reveal some advantages over cow milk, as better digestibility and lower allergic potential. Among the compounds with potential benefit to human health present in goat milk, we can cite the conjugated linoleic acid (CLA). This fatty acid is found especially in dairy and meat products derived from ruminants. CLA has shown biological activities as reduction of fat and body weight, maintaining or increasing lean body mass, protection of cardiovascular function, improvement of insulin sensitivity and increase of calcium retention. With the great attention given to the compound, researchers have been developing methods to increase the amount of CLA in milk of ruminants. This study aimed to evaluate the effectiveness of a goat milk manipulated to have a greater amount of CLA in male Wistar rats. A total of 36 animals was divided into three groups, treated during ten weeks with a diet based on AIN-93, each group with different fat sources, was formed: soybean oil (control group - CON), coconut oil (CO) or goat milk fat with high content of CLA (CLArich). Weight and food intake were recorded weekly. At the end of this period, the animals were anesthetized and then sacrificed. Blood samples were collected and liver and intestine removed for histopathological evaluation. The weight had no significant difference among the three groups at the beginning or end of the experiment. However, CLA-rich group had higher weights from the second to the fifth weeks of the experiment, compared to the others groups. Groups CO and CLA-rich groups showed a trend to a higher feed intake, but not during all weeks. In the CLA-rich group was observed a reduction of serum triglycerides (TG) and TG / HDL ratio and increases of HDL and total cholesterol (TC). The serum glucose of CLA-rich group did not differed from the CON group, but was significantly higher compared to CO. Pathological changes were not found in the intestine, while livers of animals of all three groups showed hepatic steatosis. Such results show a possible beneficial effect of goat milk with high content of CLA on lipid profile in rats, with no significant change of serum glucose, suggesting a functional action to this food. However, further studies are needed. / O leite de cabra é um alimento de reconhecido valor nutricional e de importante potencial econômico. Suas características nutricionais revelam algumas vantagens sobre o leite de vaca, como melhor digestibilidade e menor potencial alérgico. Dentre os compostos com possível benéfico para a saúde humana presentes no leite de cabra, cita-se o ácido linoleico conjugado (CLA), ácido graxo encontrado, especialmente, nos produtos lácteos e cárneos oriundos de ruminantes. Ao CLA atribuem-se atividades biológicas como redução da gordura e peso corporal, com manutenção ou aumento da massa magra, proteção da função cardiovascular, melhora da sensibilidade à insulina e aumento da retenção de cálcio. Com a grande atenção dada ao composto, pesquisas vêm sendo desenvolvidas visando aumentar a quantidade de CLA no leite dos ruminantes. O intuito desta pesquisa foi avaliar a eficácia de um leite de cabra manipulado para ter maior quantidade de CLA em ratos Wistar machos. Um total de 36 animais foi dividido em três grupos, que receberam por dez semanas uma dieta baseada na AIN-93, cada grupo com diferente fonte de gordura, a saber: óleo de soja (grupo controle - CON), óleo de coco (OC) ou gordura do leite de cabra com alto teor de CLA (LC-CLA). O peso corporal e o consumo de ração foram registrados semanalmente, e ao final do período experimental os animais foram sacrificados, coletando-se amostras de sangue e removendo-se o fígado e o intestino para avaliação histopatológica. Com relação ao peso não foi verificada diferença entre os três grupos no início ou no final do experimento, sendo que, foi registrado para o grupo LC-CLA, os maiores pesos médios nas semanas iniciais do experimento. Os grupos OC e LC-CLA apresentaram uma tendência a um maior consumo de ração, não observada em todas as semanas. No grupo LC-CLA foi observada uma redução dos triglicerídeos séricos TG e da razão TG/HDL, e aumento do HDL e colesterol total (CT). A glicose sérica do grupo LC-CLA não diferiu do grupo CON, mas, foi significativamente maior em relação ao OC. Não foram encontradas alterações patológicas nas lâminas de intestino, sendo constatada esteatose hepática nos três grupos experimentais. Tais resultados mostram uma ação benéfica do leite de cabra com teor elevado de CLA sobre o perfil lipídico sérico em ratos, sem alteração significativa de glicemia, sugerindo uma provável ação funcional ao alimento. Entretanto, outros estudos ainda são necessários.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-09T13:26:46Z No. of bitstreams: 1 Patricia Lins Azevedo do Nascimento.pdf: 1605515 bytes, checksum: c69180b75b602482766b33b51613815b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T13:26:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Patricia Lins Azevedo do Nascimento.pdf: 1605515 bytes, checksum: c69180b75b602482766b33b51613815b (MD5) Previous issue date: 2013-02-14 / Pimenta malagueta (Capsicum frutescens) as it is known in Brazil, is one of the pepper species most used in cooking and in Brazilian folk medicine. Antioxidant and antimicrobial activities, total phenolic compounds and capsaicin, dihydrocapsaicin and crisoeriol content were analyzed. The content of capsaicin, dihydrocapsaicin and crisoeriol found was 9.2, 4.0 and 2.1 mg/g extract, respectively. The minimal inhibitory concentration was determined against six bacteria strains and Candida albicans but for all of them were necessary concentrations higher than 1000 μg/ml. The total phenolic content was 9.1 mg GAE/g extract. The ethanolic extract of C. frutescens had an effective DPPH and ABTS + scavenging (CE50 of 302.3 and 82.6 g/ml respectively) and percentage of antioxidant activity by β-carotene/linoleic acid assay that ranged from 15 to 47%. The main groups of compounds extracted from plants with biological properties are essential oils, alkaloids, glycosides, phenolic compounds, terpenoids and flavonoids. Our results suggest that C. frutescens contains a potential antimicrobial and antioxidant that can be associated with its phenolic, capsaicinoids and flavonoid contents. / Pimenta malagueta (Capsicum frutescens), como é conhecida no Brasil, é uma das espécies de pimenta mais usadas na culinária e na medicina popular brasileira. Foram analisadas as atividades antioxidante e antimicrobiana, o teor de fenólicos totais, capsaicina, dihidrocapsaicina e crisoeriol. O teor de capsaicina, dihidrocapsaicina e crisoeriol encontrado foi de 9,2, 4,0 e 2,1 mg/g de extrato respectivamente. A concentração inibidora mínima foi determinada frente seis linhagens de bactérias e da levedura Candida albicans, mas para todos os micro-organismos testados foram necessárias concentrações superiores a 1000 μg/mL. O teor de fenólicos totais foi de 9,1 mg equivalentes de ácido gálico/g de extrato. O extrato etanólico de C. frutescens apresentou atividade eficiente frente aos radicais DPPH e ABTS + (CE50 de 302,3 e 82,6 μg/mL, respectivamente) e porcentagem de atividade antioxidante pelo ensaio β-caroteno/ácido linoleico que variou de 15 a 47%. Os principais grupos de compostos extraídos de plantas com propriedades biológicas são os óleos essenciais, alcaloides, glicosídeos, compostos fenólicos, terpenoides e flavonoides. Os nossos resultados sugerem que C. frutescens contém um potencial antimicrobiano e antioxidante que pode estar associado com o seu teor de fenólicos, capsaicinoides e flavonoides.

Orientador: Admar Costa de Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-09T10:09:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_LiliaZagoFerreirados_D.pdf: 3274551 bytes, checksum: 903add15d9aa93e05454196d09939604 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Ácido linoléico conjugado (CLA) é um conjunto de isômeros geométricos e posicionais do ácido linoléico, encontrado no leite, carnes e seus respectivos derivados. Desde a sua identificação como um agente anticarcinogênico, muitos outros efeitos lhe foram atribuídos; dentre eles, o efeito antioxidante, efeito um tanto quanto intrigante ao considerar que o CLA é um dieno conjugado, ou seja, um ácido graxo em sua fase inicial de autoxidação, mas com uma de suas ligas duplas conjugadas na forma trans. O objetivo desta Tese foi avaliar o efeito da suplementação com CLA, com e sem a presença de antioxidante, sobre o processo de autoxidação dos lípides biológicos, o conteúdo de lípides totais e a morfologia hepática de ratos Wistar saudáveis em crescimento. Foi realizado um ensaio biológico onde sessenta ratos foram divididos em seis grupos (n=10): grupos C (controle), CE (controle + vitamina E), AE (AdvantEdge® CLA), AEE (AdvantEdge® CLA + Vitamina E), CO (CLA One®) e COE (CLA One® + vitamina E). Os grupos controle C e CE receberam ácido linoléico e os grupos suplementados AE, AEE, CO e COE receberam misturas comerciais de CLA distintas cujo conteúdo médio de CLA era de 76,17 % com proporções semelhantes entre os isômeros trans-10, cis-12 e cis-9, trans-11. As condições de suplementação foram padronizadas em ensaio preliminar cujos resultados permitiram concluir que a melhor concentração de CLA a ser administrada, levando em consideração os aspectos operacionais e a resposta biológica, era de 2 % em relação ao consumo de dieta. Sendo assim, os ratos foram suplementados com 2 % de CLA por meio de entubação orogástrica durante 42 dias. Para os animais que receberam vitamina E em associação com o CLA, utilizou-se acetato de a-tocoferol na concentração de 30 mg / dia. Foram determinados índice de peróxido (IP), malondialdeído (MDA), 8-iso-PGF2a isoprostana e atividade da catalase como indicadores da autoxidação lipídica. O conteúdo total de lípides do fígado foi determinado e a morfologia do órgão foi analisada por meio de microscopia eletrônica de transmissão (MET). Os resultados demonstraram que a influência do CLA sobre o processo de oxidação dos lípides biológicos depende do tipo do suplemento e do indicador utilizado e seu respectivo local de determinação (tecido ou fluído corporal). Os valores de MDA sérico (AE: 1,80±0,67 mg MDA / kg; CO: 2,43±0,61 mg MDA / kg) e a atividade sérica da catalase (AE: 4734,23±1078,93 kU / L; CO: 5916,06±2490,71 kU / L) foram significativamente menores (P £ 0,05) em comparação com o controle (MDA: 3,85±0,24 mg MDA / kg; catalase: 10496,52±5121,84 kU / L), já os valores de 8-iso-PGF2a isoprostana foram maiores (P £ 0,05) para o grupo AE (urina: 95,13±20,26 pg / mL; plasma: 18,86±3,41 pg / mL) em relação ao controle (urina: 69,46±16,65 pg / mL; plasma: 13,84±3,55 pg / mL). Quanto ao IP, este foi maior (P £ 0,05) no grupo CO (84,38±10,97mEq / kg) em comparação com o grupo controle (54,75±9,70 mEq / kg). Em ralação à associação do acetato de a-tocoferol à suplementação com CLA, esta influenciou a ação do CLA sobre a oxidação dos lípides biológicos para os indicadores catalase, MDA hepático e 8-iso-PGF2a isoprostana urinária, de forma a diminuí-la. O conteúdo dos lípides hepáticos totais não aumentou nos ratos que receberam CLA (C: 23,93±3,64 %; AE: 21,19±2,05 %; CO: 21,16±0,90 %), embora as imagens obtidas por MET tenham demonstrado que houve aumento dos glóbulos de gordura em número e tamanho, aumento esse que não alterou a morfologia do órgão, visto que tanto o citoplasma quanto as organelas celulares estavam íntegras. Esses achados permitiram concluir que a suplementação com 2 % das misturas comerciais de CLA durante 42 dias influenciou o processo de oxidação dos lípides biológicos, no entanto, não foi possível estabelecer um consenso sobre seu efeito antioxidante/pró-oxidante visto a divergência dos resultados. Quanto às imagens hepáticas obtidas por MET, essas caracterizaram uma informação de natureza qualitativa, mas não menos importante, pois permitiu concluir que esse protocolo de suplementação com CLA não promeveu danos morfológicos ao órgão visto a integridade dos hepatócitos / Abstract: Conjugated linoleic acid (CLA) is a set of geometrical and positional isomers of the linoleic acid, found in milk, meats and their products. Since its identification as an anticarcinogenic agent, other effects have been attributed to it since, among them an antioxidant action -- a rather intriguing claim in view of the fact that CLA is a conjugated diene, i.e., a fatty acid in an early stage of autoxidation, but with one of its conjugated double bonds in the trans form. The objective of this Thesis was to assess the effect of CLA supplementation, both in the presence and in the absence of an antioxidant, on: (a) the process of biological lipid autoxidation, (b) the total lipid content, and (c) the hepatic morphology of healthy growing Wistar rats. A biological assay on sixty rats divided into six groups (n=10) was realized: C (control), CE (control + vitamin E), AE (AdvantEdge® CLA), AEE (AdvantEdge® CLA + Vitamin E), CO (CLA One®), and COE (CLA One®+ vitamin E). Control groups C and CE received linoleic acid, and supplemented groups AE, AEE, CO and COE received commercial CLA mixtures with a mean CLA content 76.17% and similar proportions of trans-10, cis-12 and cis-9, trans-11 isomers. A preliminary assay was conducted in order to standardize supplementation conditions; its results indicated that the best CLA concentration for administration, taking into account operational aspects and biological response, was 2% of diet intake. Rats were supplemented with that concentration of CLA by orogastric intubation for 42 days. For animals receiving vitamin E in combination with CLA, alpha-tocopherol acetate in the concentration of 30 mg/day was used. Peroxide index (IP), malondialdehyde (MDA), 8-iso-PGF2 alpha isoprostane, and catalase activity were determined as lipid autoxidation indicators. Total liver lipid content was determined, and organ morphology was examined by transmission electronic microscopy (TEM). Results demonstrated that the influence of CLA on the process of biological lipid oxidation depends on supplement type, on the chosen indicator, and on whether it is determined in a tissue or in a body fluid. Serum values of MDA (AE: 1.80±0.67 mg MDA / kg; CO: 2.43±0.61 mg MDA / kg) and catalase serum activity (AE: 4734.23±107893 kU / L; CO: 5916.06±2490.71 kU / L) were significantly lower (P <0,05) than in the controls (MDA: 3.85±0.24 mg MDA / kg; catalase: 10496.52±5121.84 kU / L), whereas 8-iso-PGF2 alpha isoprostane were higher (P <0.05) for AE (urina: 95.13±20.26 pg / mL; plasma: 18.86±3.41 pg / mL) than in the controls (urina: 69.46±16.65 pg / mL; plasma: 13.84±3.55 pg / mL). IP values were higher (P<0,05) for CO (84,.38±1097mEq / kg) than in the control (54.75±9.70 mEq / kg). Regarding the combination of alpha-tocopherol acetate and CLA supplementation, the presence of this antioxidant influenced the action of CLA on biological lipid oxidation as indicated by catalase, hepatic MDA and urinary 8-iso-PGF2 alpha isoprostane. Total hepatic lipid content did not increase in rats receiving CLA (C: 23.93±3,.64 %; AE: 21.19±2.05 %; CO: 21.16±0.90 %), although TEM images showed an increase in size and amount of fat globules; this, however, did not change organ morphology, as indicated by the fact that cell cytoplasm and organelles were undamaged. These findings allowed to conclude that supplementation with 2% of commercial CLA mixtures for 42 days influenced the process of biological lipid oxidation. However, no conclusion could be reached as to its anti-oxidant or prooxidant effect, because of inconsistencies in the results. Hepatic TEM images, even being a qualitative information, were nevertheless important, as they allowed to conclude that this CLA supplementation protocol did not cause any morphological damage to the organ, as indicated by the integrity of hepatocytes / Doutorado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Doutor em Alimentos e Nutrição

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-06-06T14:10:39Z No. of bitstreams: 1 rosanafonsecagoncalves.pdf: 1148296 bytes, checksum: 6c2c2842741dbd36cfb959f0434b4b2f (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-07-02T13:26:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 rosanafonsecagoncalves.pdf: 1148296 bytes, checksum: 6c2c2842741dbd36cfb959f0434b4b2f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-02T13:26:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rosanafonsecagoncalves.pdf: 1148296 bytes, checksum: 6c2c2842741dbd36cfb959f0434b4b2f (MD5) Previous issue date: 2016-03-01 / Foi proposto para esse trabalho, obter leite enriquecido com CLA manipulando a dieta de vacas com adição de óleos vegetais ricos em ácido linoleicos e assim, fabricar queijo Minas Padrão, comparando-o com aquele produzido tradicionalmente. Os ácidos graxos foram quantificados por meio de análise por cromatografia gasosa, identificados pela comparação dos tempos de retenção do padrão fame-mix e demais padrões comerciais, foram obtidos 62 picos. Os resultados obtidos se mostraram satisfatórios, tanto para o aumento de CLA no leite, como também para sua presença sem alterações nos queijos, o teor de C18:1 trans-11 no leite apresentou em média, um aumento de 1,367g/100g de gordura (120,76%); e o CLA Cis-9 trans-11 apresentou em média um aumento de 0,535g/100g de gordura (95.36%). Durante o processo de maturação o teor de CLA não apresentou alterações. Foi realisada análise sensorial com 30 provadores não treinados/tratamento/repetição, de forma a comparar os queijos obtidos com e sem CLA e observou-se mesma aceitação entre tratamentos. Conseguiu-se obter um derivado do leite, queijo Minas Padrão dentro da classe de alimentos funcionais, o qual tem sido uma busca persistente do mercado consumidor que tem se mostrado exigente quanto à qualidade nutricional. / It has been proposed for this work to obtain milk enriched with CLA manipulating the diet of cows adding vegetable oils rich in linoleic acid and thus produce fresh cheese, comparing it to the one traditionally produced. Fatty acids were quantified through gas chromatographic analysis, identified by comparison between the retention time of fame-mix standard and other commercial standards, 62 peaks were obtained. The results obtained proved to be satisfactory, as much in the increase of CLA in milk, as on its presence without changes in the cheeses, the level of C18:1 trans-11 in milk showed an average increase of 1.367g/100g of fat (120.76%); and CLA Cis-9 trans-11 showed an average increase of 0.535g/100g of fat (95.36%). During the maturation process the level of CLA didn't present changes. A sensory analysis was performed with 30 untrained tasters/ treatment/ repetition, in order to compare the obtained cheeses with and without CLA and the same acceptance among treatments was observed. It was possible to obtain a dairy product, fresh cheese within the class of functional foods, which has been a persistent pursuit of the consumer market that has proven to be demanding regarding nutritional quality.

Orientador: Mário Roberto Maróstica Júnior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-21T19:40:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marques_AnneyCastro_D.pdf: 1629886 bytes, checksum: bb0b5aff44e4b4964882ed30eee5c23a (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: As mudanças no estilo de vida da população, tais como as alterações no hábito alimentar e o maior sedentarismo, levam ao aumento da prevalência de doenças crônicas não transmissíveis, entre as quais se destaca a obesidade. Com o intuito de controlar esse grande problema de saúde pública, vários compostos bioativos têm sido investigados. O ácido linoleico conjugado (CLA), família de isômeros do ácido linoleico, apresenta diversas funções biológicas positivas, tais como anticarcinogênico, imunomodulador e regulador do balanço energético e da composição corporal. Apesar de sua potencialidade na redução do peso corporal, o CLA também apresenta efeitos biológicos adversos (resistência à insulina e aumento da oxidação lipídica), os quais limitam sua utilização. Os fitosterois, lipídios encontrados em alimentos de origem vegetal, reduzem os níveis de colesterol sérico, a inflamação e o risco de doenças cardiovasculares. Por se tratarem de substâncias com comprovado efeito biológico, é possível que a interação entre CLA e fitosterois melhore ou potencialize seus efeitos. Este trabalho teve como objetivo investigar a ação destes compostos na prevenção da obesidade induzida por dieta rica em gordura. Quarenta camundongos Swiss machos receberam dietas hiperlipídicas suplementadas com CLA e/ou fitosterois, na concentração de 2%, por nove semanas. Foram avaliados ingestão energética, ganho de peso, composição corporal, perfil lipídico sérico (colesterol total, HDL-colesterol, triglicérides e ácidos graxos livres), leptina sérica, testes de tolerância à glicose e à insulina, via da insulina no fígado e no tecido adiposo (proteínas Akt, FoxO e JAK-2), inflamação no fígado, tecido adiposo e hipotálamo (JNK, IL-1?, IL-6, IL-10 e TNF-?), além da modulação dos receptores ativados por proliferadores peroxissômicos (PPARs) ? e ? no fígado, tecido adiposo e hipotálamo. Os dados paramétricos foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e os dados não paramétricos foram analisados pelo teste de Kruskal-Wallis. Quando aplicável (p < 0,05), foram realizados os respectivos testes post-hoc (Tukey ou Dunns). A suplementação concomitante de CLA e fitosterois não alterou a ingestão energética, mas reduziu significativamente o ganho de peso, e aumentou a concentração de massa magra e de minerais. Foram reduzidos os níveis de massa gorda, de leptina sérica e dos PPARs no fígado e no tecido adiposo dos animais. Neste grupo não se observou alteração no perfil lipídico. Apesar dos animais terem desenvolvido resistência à insulina, a utilização de CLA mais fitosterois apresentou efeito sinérgico, com redução da inflamação hepática e melhora na via insulínica no fígado e no tecido adiposo, em relação ao grupo obeso. A suplementação de CLA e fitosterois reduziu, em camundongos, os danos causados pela ingestão de dieta hiperlipídica, entretanto mais estudos são necessários para compreender os mecanismos de ação e definir as melhores doses / Abstract: The changes in the population lifestyle, such as bad eating habits and more sedentarism, led to increased prevalence of chronic diseases, including obesity. Various compounds have been investigated in order to control this major public health problem. Conjugated linoleic acid (CLA), a family of isomers of linoleic acid, has various positive biological functions, such as anticarcinogenic, immunomodulatory and energy balance and body composition regulations. Despite the potential in reducing body weight, CLA also has adverse biological effects (insulin resistance and increased fat oxidation), which limit it use. Phytosterols, lipids found in vegetable foods, reduce serum cholesterol levels, inflammation and cardiovascular disease risk. CLA and phytosterols are related to substances with proven biological effect. It is possible that the interaction between then improves and/or enhance these effects. This study aimed to investigate the action of these compounds in the prevention of obesity induced by high-fat diet. Forty male Swiss mice received a high-fat diet supplemented with CLA and/or phytosterols, at a concentration of 2%, for nine weeks. Energy intake, weight gain, body composition, serum lipid profile (total cholesterol, HDLcholesterol, triglycerides and free fatty acids), serum leptin, glucose and insulin tolerance tests, insulin pathway in liver and adipose tissue (Akt, FoxO and JAK-2 proteins), inflammation in liver, adipose tissue and hypothalamus (JNK, IL-1?, IL-6, IL-10 and TNF-?), and modulation of peroxisomal proliferator activated receptors (PPARs) ? and ? in liver, adipose tissue and hypothalamus were assessed. Parametric data were subjected to analysis of variance (ANOVA) and nonparametric data were analyzed by Kruskal-Wallis test. When applicable (p <0.05) were performed its post-hoc tests (Tukey or Dunns). Concomitant supplementation of phytosterols and CLA did not alter energy intake, but significantly reduced weight gain, and increased lean mass and minerals concentration. Fat mass, serum leptin and PPARs, in liver and adipose tissue, were reduced in the animals. In CLA plus phytosterols group there was no change in lipid profile. Although the animals have developed insulin resistance, the use of CLA plus phytosterols showed a synergistic effect, with reduction in hepatic inflammation and improvement in the insulin pathway in liver and adipose tissue, compared to the obese group. CLA and phytosterols supplementation reduced, in mice, the damage caused by the intake of high-fat diet, however, more studies are needed to understand the mechanisms of action and define the best doses / Doutorado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Doutora em Alimentos e Nutrição

Atualmente no Brasil mais da metade da população adulta tem excesso de peso e 21% estão obesos. A obesidade é uma doença que se encontra em evidente crescimento, sendo considerada a epidemia do século XXI. Como alternativa de tratamento e prevenção, o uso de ácidos graxos que possuem habilidade de induzir a expressão de genes com importante papel em modulações metabólicas e mitocondriais têm sido estudados. O ácido linoleico conjugado (CLA, 18:2) é da família ômega-6, descrito por sua propriedade antiobesidade relacionada à diminuição da adiposidade e ao aumento do metabolismo corporal. O óleo de peixe (OP) é uma mistura de ácidos graxos poli-insaturados eicosapentaenóico (EPA, 20:5) e docosahexaenóico (DHA, 22:6) da família ômega-3, conhecido por aumentar a sensibilidade à insulina, o colesterol-HDL, pelas suas propriedades antiinflamatórias e sua ação protetora sobre o sistema nervoso. O objetivo deste estudo foi verificar os efeitos da suplementação da dieta de camundongos C57BL6 com CLA em conjunto com OP durante 60 dias sobre aspectos bioquímicos, moleculares e fisiológicos do metabolismo mitocondrial e corporal. Verificamos que a suplementação da dieta com CLA e OP in vivo: aumenta o metabolismo corporal, efeito atribuído à ambos os óleos; prejudica o metabolismo da glicose circulante, proporcionado exclusivamente pelo CLA; reduz o nível de movimentação, proporcionado exclusivamente pelo OP. No fígado: aumenta a expressão de UCP2, a atividade de proteínas desacopladoras e a ?- oxidação, efeito atribuído à ambos os óleos; aumenta o número de mitocôndrias, proporcionado exclusivamente pelo OP. CLA aumenta a produção de espécies reativas de O2 (EROs) a qual é revertida pelo OP em conjunto. No músculo sóleo: aumenta a biogênese mitocondrial via PGC- 1? e a expressão de UCP2, proporcionados pelo OP. Por fim, no hipocampo: aumenta o número de mitocôndrias, estimulo dado por ambos os óleos; aumenta a atividade desacopladora e reduz a produção de EROs, proporcionados exclusivamente pelo CLA. Concluímos que na suplementação conjunta os efeitos do OP são predominantes nos metabolismos corporal, hepático e muscular, e na movimentação corporal, enquanto que o efeito predominante do CLA é a diminuição na sensibilidade à insulina. Já no cérebro, o OP potencializa os efeitos do CLA. / Currently in Brazil more than a half of adult population has overweight, and 21% are obese. This evident growing disease is considered the 21th century\'s epidemy. Some fatty acids have been considered an alternative treatment and prevention strategy for obesity due to their ability to stimulate gene expression with important role in cellular and mitochondrial metabolisms. Conjugated linoleic acid (CLA, 18:2) from omega-6 family, with anti-obesity properties related to diminution of adiposity and increments in body metabolism. The fish oil (FO) is a mixture of the poli-unsaturated fatty acids eicosapentaenoic (EPA, 20:5) and docosahexaenoic (DHA, 22:6) from omega-3 family, known for improving insulin sensibility and HDL-cholesterol, anti-inflammatory properties and protective action over the central nervous system. The objective of this study was to examine the effects of dietary supplementation of CLA in conjunction with FO during 60 days over biochemical, molecular and physiological aspects of mitochondrial and body metabolism in C57BL6 mice. Diet supplementation with CLA and FO in vivo: raise body metabolism, an effect attributed to both oils; affect glucose metabolism, exclusively proportionate by CLA; diminish the level of mice movement, exclusively proportionate by FO. In liver: increase UCP2 expression, uncoupling proteins activity and ?-oxidation, stimulated by both oils; increase mitochondrial density, exclusively proportionate by FO. CLA also raises the reactive oxygen species (ROS) production, which is reversed by FO in conjunction. In soleus muscle: increase mitochondrial biogenesis through PGC-1? and the UCP2 expression, exclusively proportionate by FO. Lastly, in hippocampus: increase mitochondrial density, stimulated by both oils; stimulate uncoupling activity and diminish ROS production, exclusively proportionate by CLA. In conclusion, in the dietary supplementation with CLA and FO in conjunction the FO effects are prevalent in metabolisms of body, liver and muscle, and in body movement, while the CLA effects are prevalent in decreasing insulin sensitivity. However in the brain, the FO potentiates the effects of CLA.

O óleo de semente de uva (OSU) caracteriza-se como um importante subproduto do processamento agroindustrial (vinicultura) que vem recebendo destaque como fonte alternativa de óleos vegetais. Os componentes químicos presentes nos óleos vegetais sofrem influência de fatores relacionados ao cultivo e ao processamento industrial. Esses componentes são capazes de modular importantes funções fisiológicas no organismo. Este trabalho objetivou avaliar a composição química de OSU brasileiros e sua influência em parâmetros bioquímicos, de estresse oxidativo e inflamatório sérico e tecidual em ratos. Inicialmente, sete diferentes marcas de OSU disponíveis no mercado brasileiro foram avaliadas e comparadas em relação a dois processos de extração, refino e prensagem a frio. As amostras prensadas a frio apresentaram concentrações significativamente maiores de compostos fenólicos, teores do isômero &#947;-tocotrienol da vitamina E, de fitosteróis, tendo como principal constituinte o &#946;-sitosterol, e diversos compostos voláteis característicos. Para a investigação biológica, ratos saudáveis da linhagem Wistar foram suplementados com OSU - amostra comercial que possuía maior teor do isômero &#947;-tocotrienol e compostos fenólicos; e com o óleo de soja (ODS) - óleo mais consumido no país, utilizado para efeito comparativo. Os dois óleos foram suplementados por intubação orogástrica nas concentrações de 3,0 e 6,0 mL/Kg de peso corpóreo, por 65 dias. Observou-se que os resultados da intervenção não foram dose-dependente para os dois óleos e, apesar do elevado teor de lipídios oferecido aos animais, estes não modificaram o padrão de ganho de peso. Porém, foram observados elevados teores de peroxidação lipídica sérica nos animais tratados com OSU, quando comparados aos tratados com ODS na menor dose administrada. Nos animais do grupo suplementado com OSU na maior dose, verificou-se aumento do peso do tecido adiposo retroperitoneal, caracterizado pela hipertrofia dos adipócitos. Em relação ao tecido hepático, houve maior incorporação do ácido linoleico, principal ácido graxo presente nos OSU e ODS e precursor do ácido araquidônico na cadeia dos eicosanoides, interferindo no aumento da razão das citocinas inflamatórias TNF-&#945;/IL- 4 e IL-6/IL-4, para todos os grupos suplementados com os dois óleos nas maiores concentrações. Quanto aos marcadores de estresse oxidativo no tecido cardíaco, pode-se verificar que os grupos administrados com OSU foram relacionados com a maior atividade das enzimas antioxidantes, acompanhado de maior peroxidação lipídica. Os resultados permitem concluir que os compostos bioativos presentes no OSU não ocasionaram a redução do estresse oxidativo causado pela alta presença do ácido linoleico, porém, os marcadores inflamatórios pouco se alteraram com o tratamento. / Grapeseed oil (GSO) is characterized as an important by-product of the agro-industry (winemaking) which has received attention as an alternative source of vegetable oils. Chemical compounds are influenced by cultivation and industrial processing, and these components modulate some important physiological functions in the body. This study aimed to evaluate the chemical composition of Brazilian GSO and its influence on biochemical parameters and inflammation in rats\' serum and tissue. Firstly, seven different GSO samples were obtained from Brazilian market and were evaluated and compared for two type of extraction processes, refining and cold pressing. Cold pressed samples showed high significant phenolic concentrations, &#947;-tocotrienol isomer content and phytosterols concentrations, and presence of several characteristic of volatiles compounds. For biological research, healthy Wistar rats were supplemented with GSO - commercial sample had higher levels of &#947;-tocotrienol isomer and phenolic compounds; and soybean oil (SBO) - the most consumed oil in the country, used for comparative purposes. Both oils were supplemented daily by orogastric intubation in concentrations of 3.0 and 6.0 mL/kg body weight for 65 days. After intervention was observed no dose dependency behavior for both oils, and despite high level of lipids provided to the animals, they did not change the pattern of the animals weight gain. However, high levels of lipid peroxidation were observed in the animal\'s serum within GSO treatment when compared to SBO. GSO6 group was an increase of final weight of retroperitoneal adipose tissue, characterized by hypertrophy of adipocytes. Regarding the hepatic tissue, it was observed that there was a greater uptake of linoleic acid, mainly fatty acids present in GSO and SBO and it is a precursor of arachidonic acid in eicosanoids chain, interfering with the ratio increase of the inflammatory cytokines TNF-&#945;/IL-4 and IL-6/IL-4 for all groups supplemented with both oils at higher concentrations. For the parameters of oxidative stress in the cardiac tissue, it can be seen that GSO groups were related to increased activity of the antioxidant enzymes, followed by an increase in TBARS content. The results suggest that the bioactive compounds present in the GSO caused the reduction of the oxidative stress caused by the high presence of linoleic acid, though, inflammatory markers present few changes within treatment.

Ácidos graxos conjugados (AGCs) é o termo geral para descrever os isômeros posicionais e geométricos dos ácidos graxos poliinsaturados com duplas ligações conjugadas. Inúmeros efeitos benéficos para a saúde como: anti-cancerígeno, anti-aterogênicos, anti-adipogênicos e anti-inflamatórios, tem sido atribuídos ao consumo dos AGCs. Entretanto, estudos sobre os efeitos dos AGCs no organismo ainda são inconclusivos e por isso o interesse em pesquisas visando a sua participação em processos fisiológicos. O objetivo deste estudo foi avaliar em ratos o efeito dos isômeros conjugados do ácido linoleico (9cis, 11trans e 10trans, 12cis) sobre o perfil lipídico tecidual e sua influência sobre parâmetros bioquímicos em processos oxidativos. Não foi possível detectar a atividade antioxidante in vitro dos CLAs. Os resultados obtidos demonstraram que o FFA-CLA foi capaz de reagir apenas com o radical DPPH. No experimento in vivo uma mistura comercial dos isômeros (9cis, 11trans e 10trans, 12 cis) foi utilizada como fonte de CLAs, e a influência da suplementação desses isômeros, foi avaliada e comparada com um grupo controle suplementado com água e com grupos experimentais suplementados com óleo de soja. O primeiro experimento foi realizado com animais Wistar saudáveis e teve duração de 40 dias, as amostras de ácidos graxos livres de CLAs, (FFACLAs) e óleo de soja foram fornecidas aos animais por meio de entubação orogástrica nas concentrações de 1%, 2% e 4% em relação ao consumo diário de dieta, o grupo controle recebeu 1% de água. A suplementação da dieta dos animais com os CLAs leva ao aumento nos níveis de triglicérides, mas não interfere nos parâmetros de estresse oxidativo, embora haja incorporação dose-dependente nos tecidos hepático, muscular e adiposo, não foram observadas alterações no volume das células adiposas, e na área e diâmetro do tecido muscular. No segundo experimento, com duração de 21 dias, ao avaliar o efeito da suplementação na dose de 2% de CLAs em ratos Wistar induzidos a peroxidação, pelo tratamento com tetracloreto de carbono. Pôde-se observar efeitos hepatoprotetor, dos CLAs atribuídos a sua prevenção na peroxidação lipídica e ao aumento da atividade das enzimas catalase (CAT), glutatina redutase (GR) e glutationa reduzida (GSH). / Conjugated fatty acids (CFAs) is the general term to describe positional and geometric isomers of polyunsaturated fatty acids with conjugated double bonds. Many beneficial health effects such as anti-cancer, anti-atherogenic, anti-adipogenic and anti-inflammatory, has been attributed to the consumption of the CFAs. However, studies on the effects of the CFAs in the body are still inconclusive and therefore the interest in research aimed at their participation in processes physiological. The objective of this study was to evaluate in rats the effect of conjugated linoleic acid isomers (9cis, 11trans and 10trans, 12cis) on lipid profile tissue and its effect on biochemical parameters in oxidative processes. It was not possible to detect the in vitro antioxidant activity of CLAs. The results showed that the free fatty acids of CLAs (FFA-CLAs) was able to react only with the DPPH radical. In in vivo experiment a commercial mixture of isomers (9cis, 11trans and 10trans, 12cis) was used as a source of CLAs and the influence of supplementation of these isomers was evaluated and compared with a control group supplemented with water and experimental groups supplemented with soybean oil. The first experiment was conducted with healthy Wistar and lasted 40 days, samples of FFA-CLA and soybean oil were delivered to animals via orogastric intubation at concentrations of 1%, 2 % and 4% in relation to daily diet, the control group received 1% water. Supplementing the diet with CLAs leads to increased levels of triglycerides, but does not interfere with oxidative stress parameters, although there is a dose-dependent incorporation into liver tissue, muscle and fat, no changes were observed in the volume of fat cells, and in the area and diameter of muscle tissue. In the second experiment, lasting 21 days, to evaluate the effect of supplementation at a dose of 2% of CLAs in Wistar, tha peroxidation induced by treatment with carbon tetrachloride. Could be observed hepatoprotective effects, attributed to the CLAs prevention lipid peroxidation and increased activity of the enzymes catalase (CAT), glutathione reductase (GR) and glutathione reduzida (GSH).