Made available in DSpace on 2014-06-12T15:55:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9506_1.pdf: 7017684 bytes, checksum: aff515c7450e1ff68320e1a2966f015c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Várias moléculas naturais são agentes potenciais para o tratamento da obesidade e outras doenças relacionadas ao acúmulo de gordura subcutânea, sendo o desoxicolato de sódio (SDC ou DCA) bastante usado desde 2001. Outras moléculas de origem natural também foram descobertas com efeitos sobre a inibição da adipogênese em pré-adipócitos e indução de apoptose em adipócitos maduros. Recentemente descobriu-se que flavonoides como a quercetina (QUE) e resveratrol (RES) apresentam esta desejada ação apoptótica e antiadipogênica em tecido adiposo comprovado por estudos in vitro em células humanas. Entretanto estas moléculas podem apresentar elevada toxicidade como o SDC e baixa biodisponibilidade devido ao caráter hidrofóbico como QUE e RES. Diante do exposto a nanotecnologia farmacêutica, através de lipossomas, pode apresentar-se como uma alternativa para superar estas limitações. Esta Tese tem por objetivo a obtenção de um produto à base de uma formulação lipossomal em escala nanométrica para administração por via subcutânea contendo desoxicolato de sódio, quercetina e resveratrol livres e/ou complexados a ciclodextrinas. Um método de complexação de sais biliares, como o SDC e o ácido ursodesoxicólico (UDCA), em ciclodextrinas foi desenvolvido e usado na determinação destas substâncias. O SDC também foi usado como um dos constituintes de lipossomas elásticos para a nanoencapsulação de QUE e RES. O aumento da temperatura causou variações nas absorbâncias em todos os complexos de inclusão, entretanto, 20-30 °C foi encontrado o melhor intervalo para a determinação dos ácidos biliares. A temperatura causou um efeito negativo na constante de equilíbrio resultando em valores altamente negativos de entalpia (β-CD-DCA: -10,25 ± 1,48 e β-CD-UDCA: -12,47 ± 0,96 kJ.mol-1) e valores positivos de entropia (β-CD-DCA: 50,31 ± 4,74 e β-CD-UDCA: 43,42 ± 3,12 J.mol-1). Em todos os casos, as reações de complexação competitiva foram espontâneas. Os complexos de inclusão foram estáveis por 12 dias tendo um tempo de meia vida de 68,71 dias para o DCA e 294,71 dias para a determinação do UDCA. O método foi validado pela metodologia da ANVISA e EMEA apresentando limites de detecção e de quantificação de 3,94x10-5mol.L-1 e 1,31x10-4mol.L-1 para o DCA e 4,08x10-5mol.L-1 e 1,36x10-4mol.L-1 para o UDCA, respectivamente. Amostras dos ácidos biliares foram determinadas em formulações farmacêuticas com variação de 4% para o DCA e 1% para o UDCA. A reação de complexação competitiva também foi aplicada na construção de sensores químicos. A melhor formulação lipossomal produzida reduziu o uso de fosfatidilcolina e colesterol em 17,7% e 68,4%, respectivamente, em relação às primeiras formulações produzidas. Os lipossomas tiveram um diâmetro médio de 149 nm com índice de polidispersão de 0,3. O potencial zeta dos lipossomas foi negativo (-13,1 mV) devido à presença do SDC na bicamada lipídica. A eficiência de encapsulação de QUE e RES nos lipossomas foi maior que 97%. A cinética de liberação de QUE e RES a partir dos lipossomas também foi estudada havendo liberação controlada por mais de 50 h e liberação máxima de 96% para QUE e RES. Foi possível nanoencapsular 23 vezes (4620 μM) mais flavonoides que a concentração (100 μM) reportada na literatura que apresenta efeitos apoptóticos e antiadipogênicos. Podemos concluir que as formulações lipossomais elásticas produzidas são adequadas para a injeção subcutânea, podendo proporcionar uma nova estratégia para redução de gordura subcutânea

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:32:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6393_1.pdf: 1620391 bytes, checksum: 42e4e7d3fae1c9e6b0237b3a000800e0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / O ácido úsnico é conhecido mundialmente por suas diversas atividades biológicas; no entanto, sua utilização na terapêutica ainda é limitada por apresentar baixa hidrofilicidade e elevada hepatotoxicidade. Ciclodextrinas são oligossacarídeos cíclicos que podem formar complexos de inclusão com diversos compostos hidrofóbicos. Lipossomas são sistemas de liberação controlada de fármacos, formados por bicamadas de fosfolipídios e têm a capacidade de incorporar compostos hidrofílicos ou hidrofóbicos. O objetivo deste trabalho foi aumentar a solubilidade do ácido úsnico obtendo complexos de inclusão ácido úsnico:b-ciclodextrina (AU:bCD) e nanoencapsular os complexos em lipossomas para obter sistemas de liberação controlada. Os complexos AU:bCD foram preparados por diferentes metodologias e caracterizados por análise térmica (DSC), difratometria de raios- X, infravermelho, RMNH1 e 2D ROESY, solubilidade de fases e teste de dissolução. A atividade antimicrobiana foi realizada para avaliar se a complexação com a b-ciclodextrina interferiu na atividade biológica do ácido. Os lipossomas foram preparados utilizando-se a técnica de hidratação do filme lipídico seguido de sonicação. As preparações foram avaliadas por estudos de estabilidade e pela cinética de liberação in vitro. As modificações nos espectros dos complexos de inclusão mostraram interação entre o ácido úsnico e a bciclodextrina, observando-se também um aumento na solubilidade do ácido na forma complexada. Lipossomas contendo o complexo foram preparados e permaneceram, em média, estáveis na forma de suspensão por 4 meses. O doseamento e a taxa de encapsulação foram de 100,85 ± 5,97% e 99,5 ± 0,2 %, respectivamente. Houve uma liberação mais lenta do ácido úsnico nas formulações contendo o complexo quando comparadas às formulações contendo ácido úsnico encapsulado. A encapsulação de complexos de inclusção entre o ácido úsnico e a b-ciclodextrina em lipossomas pode ser uma alternativa para superar tanto a baixa solubilidade em água do ácido como sua hepatotoxicidade

Orientador: Francisco Benedito Teixeira Pessine / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-14T22:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brescansin_EdeilzaGomes_D.pdf: 1646931 bytes, checksum: 9e5e045b99495a199511f36621650953 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: No presente trabalho, buscamos desenvolver formulação lipossomal sistêmica de nistatina (NYS) com o propósito de aplicações futuras na terapêutica de micoses sistêmicas, que tanto afligem indivíduos imunodeprimidos. Na primeira parte do projeto caracterizamos o fármaco através de análises térmicas (TGA e DSC), análises espectroscópicas (IV, UV e fluorescência), teste de solubilidade, avaliação da umidade segundo o método de Karl-Fischer e coeficiente de partição octanol/meio aquoso. Na segunda parte do trabalho procuramos desenvolver e otimizar formulações lipossomais, onde o fármaco apresentasse maior estabilidade química. Foram preparadas formulações lipossomais pelo método do filme lipídico que foram analisadas por HPLC. As preparações passaram por processo de diminuição de tamanho e separação entre fármaco livre e encapsulado. A terceira e última fase do projeto consistiu da caracterização de duas preparações, através de análises do raio hidrodinâmico, determinação da carga de superfície das partículas (potencial zeta), teor de fosfolipídios totais (teor de fosfato), eficiência e avaliação da encapsulação por análises de HPLC, anisotropia e supressão de fluorescência. Ainda na fase de caracterização investigamos a atividade biológica in vitro, destas formulações, pelo teste de susceptibilidade. As preparações foram desafiadas contra leveduras e dermatófitos. Pela seleção e otimização das formulações desenvolvidas concluímos que a melhor formulação foi a que apresenta uma composição de 70 % de Epikuron 200 SH; 20 % de Colesterol; 10 % de Diestearoilfosfatidilglicerol, 1,3 % de 2,6 - bis (1,1-dimetil) - 4 - metil fenol (BHT) e 7 % de NYS. Duas preparações foram caracterizadas L1 (hidratada a 55°C) e L2 (hidratada a 60°C). Os resultados para anisotropia e supressão de fluorescência evidenciam a encapsulação do fármaco nas preparações estudadas, tanto na bicamada lipídica quanto na superfície dos lipossomas. Verificamos também que L2 apresentou menor polidisperdidade de seu raio hidrodinâmico, maior carga de superfície e maior eficiência de encapsulação, evidenciando ser L2 a preparação, físico-quimicamente, mais estável. Todavia, a preparação L1 mostrou, após sonicação, atividade biológica in vitro maior que L2. Estes resultados podem refletir a possível degradação do fármaco, quando aquecido a 60°C. / Abstract: This study was designed to develop liposomal formulations containing Nystatin (NYS), looking forward its future applications in systemic mycosis therapy, which often affect immunodepressed individuals. In the first part of the project, the drug was characterized by means of thermal analyses (TGA and DSC), IR, UV/V and fluorescence spectroscopies, solubility tests, humidity contents evaluation (Karl-Fischer method) and octanol-water partition coefficient. In the second part of the study, liposomal formulations were developed and optimized, in which the drug presented improved chemical stability. Liposomal formulations were prepared by the dry lipid film hydration method and were analyzed by HPLC. The vesicles were submitted to the processes of size reduction and separation of non encapsulated drug. The last part of the project consisted in the characterization of the two formulations by means of analysis of the is hydrodynamic radius; determination of the particles superficial charge (zeta-potential); total phospholipids content (phosphate); degree of NYS with encapsulation by HPLC; degree of anisotropy and fluorescence quenching of NYS. Still during the characterization phase, the in vitro biological activity of the formulations was investigated by means of susceptibility tests. The formulations were challenged against some yeasts and filamentous fungi. Conclusions pointed that the best formulation was the one which presented in its compositions 70% Epikuron 200 SH, 20% Cholesterol, 10 % Distearoylphosphatidylglycerol, 1.3 % 2,6 - bis (1,1-dimethylethyl) - 4 - methylphenol (BHT) and 7 % NYS. Two formulations were characterized: L1 (hydrates at 55°C) and L2 (hydrated at 60°C). Results regarding the degree of anisotropy and fluorescence quenching evidenced by NYS encapsulation at the liposomal lipid bilayers. Moreover, it was observed that L2 presented lower polydispersity in size distribution, higher superficial load and higher encapsulation effectiveness, i.e. L2 presented higher physico-chemical stability. Nevertheless the L1 preparation showed, after sonication, higher biological activity in vitro than L2, which might reflect possible thermal degradation of NYS when heated to 60°C. / Doutorado / Físico-Química / Doutor em Ciências

Orientadores: Francisco Carlos Groppo, Eneida de Paula, Maria Cristina Volpato / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-15T13:13:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Berto_LucianaAranha_M.pdf: 906309 bytes, checksum: 403019290dd30869537a79a4ff2e7c34 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O presente estudo teve como objetivo avaliar a eficácia anestésica de duas formulações lipossomais injetáveis de articaína (3% e 4%), em dois modelos animais: bloqueio do nervo infra-orbital (BNIO) e bloqueio do nervo alveolar inferior (BNAI). Para cada experimento, 48 animais foram divididos em 6 grupos (n=8), que receberam a injeção de uma das seguintes formulações, no lado direito: Grupo 1: articaína 4% com epinefrina 1:100,000; Grupo 2: articaína 3% lipossomal; Grupo 3: articaína 4% lipossomal; Grupo 4: articaína 4%; Grupo 5: articaína 3% e Grupo 6: lipossomas 4mM sem anestésico local. O lado contralateral recebeu NaCl 0,9% (controle). Para BNIO, 0,1 mL da preparação foi injetado próximo ao forame infra-orbitário. Foi avaliada a duração da anestesia em tecido mole por pinçamento vigoroso do lábio superior, a cada 5 minutos, até que fosse obtido o primeiro sinal de resposta aversiva, indicando o final da anestesia. Para BNAI, 0,2 mL da preparação foi depositado próximo ao forame mandibular e os parâmetros latência e duração da anestesia pulpar foram avaliados por estímulo elétrico. Os dados foram submetidos ao teste de ANOVA, com nível de significância 5%. Para duração de anestesia em tecido mole, os grupos 1, 2 e 3 não diferiram entre si (p>0,05) e promoveram duração maior que os grupos 4 e 5 (p<0,05). O grupo 1 obteve menor latência da anestesia pulpar que os grupos 2, 3, 4 e 5 (p<0,05), que não diferiram entre si (p>0,05). O grupo 1 apresentou a maior duração de anestesia pulpar, seguido pelos grupos 2 e 3. Com relação à duração da anestesia pulpar, não houve diferença entre os grupos 2 e 3 e entre os grupos 4 e 5 (p>0,05). Grupo 6 não obteve efeito anestésico. A encapsulação em lipossomas permitiu aumento na duração da anestesia da articaína quando comparada à solução pura. Entretanto, a solução de articaína 4% com epinefrina promoveu maior duração de anestesia pulpar que as formulações lipossomais. / Abstract: Liposome encapsulation has been found to enhance the clinical efficacy of local anesthetics. This study evaluated the anesthetic efficacy of two liposomal formulations of articaine (3% and 4%) by means of two animal models: infraorbital nerve block (IONB) and inferior alveolar nerve block (IANB) in rats. For each experiment, 48 animals were divided in 6 groups (n=8), which received the injection of one of the following formulations, in the right side: Group 1: 4% articaine with 1:100,000 epinephrine; Group 2: 4% liposomal articaine; Group 3: 3% liposomal articaine; Group 4: 4% articaine; Group 5: 3% articaine and Group 6: 4mM liposome. The left side received NaCl 0.9% (control). For the IONB, 0.1 mL of the tested formulation was injected near the rat infraorbital foramen. The duration of soft tissue anesthesia was evaluated by pinching the upper lip, every 5 minutes, until the first sign of aversive response was observed. For the IANB, 0.2 mL of the tested formulations was injected near the rat mandible foramen and the parameters onset and duration of pulpal anesthesia were evaluated by means of an electrical pulp tester. Data were submitted to ANOVA test and significance level was set at 5%. Concerning soft tissue anesthesia, groups 1, 2 and 3 showed similar duration (p>0.05) which were longer than that of the groups 4 and 5 (p<0.05). Group 1 showed the shortest onset of pulpal anesthesia (p<0.05) and there was no difference among groups 2, 3, 4 and 5 (p>0.05). Group 1 promoted longer duration of pulpal anesthesia (p<0.05) followed by groups 2 and 3. Concerning duration of pulpal anesthesia, no significant difference was found between groups 2 and 3 and groups 4 and 5 (p>0.05). Liposome encapsulation prolonged anesthetic effects of articaine when compared to plain solution. However, the epinephrine-containing solution showed longer pulpal anesthesia duration than liposomal formulations. / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Orientadores: Francisco Carlos Groppo, Maria Cristina Volpato / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-20T03:45:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nolasco_FabianaPinchetti_M.pdf: 1683899 bytes, checksum: b9140ed1fab0d06207e5a084fc6ea01e (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O presente estudo avaliou a eficácia anestésica das formulações: prilocaína 3% encapsulada em lipossomas unilamelares (Prilo-LUV, concentração lipídica 4mM), prilocaína 3% encapsulada em lipossomas multilamelares (Prilo-MLV, concentração lipídica 8mM) e prilocaína 3% com felipressina 0,03UI/mL (Prilo-Feli), em três modelos, bloqueio do nervo infraorbital (BNIO), bloqueio do nervo alveolar inferior (BNAI) e infiltração subcutânea em ferida cirúrgica (ISFC). Foram usadas como controle formulações lipossomais unilamelar e multilamelar sem anestésico e solução de NaCl 0,9%. No BNIO e BNAI as formulações anestésicas foram injetadas do lado direito e os controles no esquerdo. Para o BNIO, 30 ratos (10 animais/grupo) receberam 0,1 mL de uma das formulações próximo ao forame infraorbital. Foi avaliada a duração da anestesia por pinçamento do lábio superior, a cada 5 minutos. Para o BNAI 45 ratos (15 animais/grupo) receberam 0,2 mL das formulações próximo ao forame mandibular. Foram avaliados sucesso, latência e duração da anestesia pulpar com estímulo elétrico ("pulp tester"). Para a ISFC 36 ratos (6 animais/grupo) foram submetidos à incisão na pata traseira direita e 24 horas após, receberam 0,1 mL das formulações nas duas patas traseiras (com e sem incisão); a anestesia foi avaliada pelo analgesímetro de von Frey. Os resultados foram submetidos aos testes de Log-Rank, Kruskal-Wallis, Student-Newman-Keuls e Friedman (?= 5%). No BNIO, a Prilo-Feli proporcionou duração de anestesia maior que a Prilo-LUV (p<0,05); Prilo-MLV não diferiu das demais (p>0,05). A Prilo-Feli proporcionou maior sucesso de anestesia (p<0,05) que a Prilo-LUV e Prilo-MLV, sem diferença entre estas (p>0,05). Para o BNAI Prilo-Feli proporcionou maior sucesso e duração de anestesia que as formulações lipossomais (p<0,05); Prilo-MLV apresentou maior sucesso de anestesia que Prilo-LUV (p<0,05), mas não diferiu desta com relação à duração da anestesia (p>0,05). Não houve diferenças entre formulações com relação à latência (p>0,05). Para a ISFC, nas patas com hipernocicepção Prilo-Feli proporcionou maior duração de anestesia que Prilo-LUV e Prilo-MLV (p<0,05), sem diferença entre estas (p>0,05); nas patas sem hipernocicepção não houve diferenças entre as formulações (p>0,05). Com relação ao sucesso da anestesia, em ambas as condições, com e sem hipernocicepção, Prilo-Feli mostrou maior sucesso que Prilo-LUV e Prilo-MLV (p<0,05), sem diferença entre estas (p>0,05). Conclui-se que a encapsulação da prilocaína em lipossomas unilamelares e multilamelares resultou em menor eficácia anestésica em comparação á solução de prilocaína com felipressina nos modelos avaliados / Abstract: The present study assessed the anesthetic efficacy of the following formulations: 3% prilocaine with 0.03 UI/mL felypressin (Prilo-Fely), 3% prilocaine encapsulated in unillamellar liposomes (Prilo-LUV, 4 mM lipid concentration) and 3% prilocaine encapsulated in multillamelar liposomes (Prilo-MLV, 8 mM lipid concentration) in three models, in rats: infraorbital nerve block (IONB), inferior alveolar nerve block (IANB), and subcutaneous infiltration in surgical wound (SISW). The following were used as controls: unillamelar liposomal suspension, multillamelar liposomal suspension and 0.9% NaCl solution. For IONB and IANB the anesthetic formulations were injected in the right side and the respective controls in the left side. For IONB, 30 rats (10 animals per group) received 0.1mL of the anesthetic formulations near the infraorbital foramen. The duration of anesthesia was assessed by upper lip pinching every 5 minutes. For IANB, 45 rats (15 animals per group) received 0.2mL of the anesthetic formulations near the right mandibular foramen. The success, onset and duration of pulpal anesthesia were assessed by electric pulp tester. For SISW, 36 animals (6 animals per group) were submitted to incision in the right hind paw and 24h after they received 0.1mL of the formulations in both hind paws (with and without incision). Anesthesia was evaluated with von Frey anesthesiometer. Data were submitted to Log-Rank, Kruskal-Wallis, Student-Newman-Keuls and Friedman tests (?= 5%). For IONB Prilo-Fely presented longer anesthesia duration than Prilo-LUV (p<0.05); Prilo-MLV did not differ from the others (p>0.05). Prilo-Fely promoted higher anesthesia success (p<0.05) than Prilo-LUV and Prilo-MLV, with no difference between these two formulations (p>0.05). For IANB Prilo-Fely provided higher success and duration of anesthesia than the liposomal formulations (p<0.05); Prilo-MLV presented higher anesthesia success than Prilo-LUV (p<0.05), but did not differ from the latter concerning anesthesia duration (p>0.05). No differences among the formulations were observed for BNAI anesthesia onset (p>0.05). For SISW in the hypernociceptive paws, Prilo-Fely provided longer anesthesia duration than Prilo-LUV and Prilo-MLV (p<0.05), with no difference between these two formulations (p>0.05); in the non hypernociceptive paws no differences were observed among the formulations (p>0.05). In both conditions, with and without hypernociception, Prilo-Fely presented higher anesthesia success (p<0.05) than Prilo-LUV e Prilo-MLV, whith no difference between these two formulations (p>0.05). It can be concluded that the encapsulation of prilocaine in unillamelar and multillamelar liposomes provided lower anesthetic efficacy when compared to prilocaine with feypressin in the evaluated models / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:13:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2937_1.pdf: 1527194 bytes, checksum: a4cd5029b12948ef0b79dc7b52e1c591 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / O presente estudo objetivou a preparação e caracterização de lipossomas contendo &#946;-lapachona (&#946;-lap) ou complexo de inclusão &#946;-lap:2-hidroxipropil-&#946;-ciclodextrina (&#946;-lap:HP&#946;-CD) visando aumentar a solubilidade da &#946;-lap e obter um sistema de liberação controlada. Inicialmente ensaios de solubilidade de fases de &#946;-lap em HP&#946;-CD foram realizados. O complexo de inclusão &#946;-lap:HP&#946;-CD foi preparado pelo método de liofilização (freeze-drying) e caracterizado por espectroscopia de ressonância magnética nuclear de prótons (RMN H1), análise termogravimétrica (TG), calorimetria exploratória diferencial (DSC), espectroscopia de infravermelho (IV) e espectroscopia Raman. A modelagem molecular dos complexos &#946;-lap:HP&#946;-CD também foi realizada. Os lipossomas foram preparados utilizando a técnica de hidratação do filme lipídico e as estabilidades acelerada e a longo prazo foram avaliadas. A cinética de liberação in vitro da &#946;-lap a partir dos lipossomas foi avaliada pelo método de diálise. No estudo de solubilidade de fases um aumento de 302 vezes na solubilidade da &#946;-lap em água foi alcançado na presença de HP&#946;-CD e a constante de associação foi calculada (K1:1 = 961 M-1). Os termogramas da TG e DSC de &#946;-lap:HP&#946;-CD mostraram a ausência do pico correspondente ao ponto de fusão do &#946;-lap (128 oC). O perfil das bandas Raman demonstrou um indício de uma mudança no ambiente molecular da &#946;-lap no complexo de inclusão. Sobre o RMN H1 pode ser observado que os prótons Hc da &#946;-lap interagem com os dois prótons da cavidade da HP&#946;-CD (H3 e H5). A energia de interação do complexo de inclusão &#946;-lap:HP&#946;-CD foi -23,67 kJ.mol-1. Estes resultados sugerem que a &#946;-lap está incluída na cavidade da HP&#946;-CD, resultado este confirmado por estudos de modelagem molecular, onde foram revelados os mais importantes aspectos moleculares envolvidos com a estabilidade do complexo de inclusão &#946;-lap:HP&#946;-CD. Os lipossomas contendo &#946;-lap apresentaram tamanho de partícula de 104,35 ± 2,33 nm, potencial zeta de +21,03 ± 4,64 mV e eficiência de encapsulação de 97,09 ± 0,02 %. Enquanto que, lipossomas contendo &#946;-lap:HP&#946;-CD apresentaram tamanho de partícula de 112,3 ± 1,49 nm, potencial zeta de +23,22 ± 1,90 mV e eficiência de encapsulação 93,56 ± 0,04 %. Na cinética de liberação foi observado que os lipossomas contendo &#946;-lap:HP&#946;-CD apresentaram uma maior velocidade de liberação de &#946;-lap (216,25 ± 2,34 &#956;g/h) comparado aos lipossomas contendo apenas o fármaco (183,95 ± 1,82 &#956;g/h). A encapsulação de &#946;-lap e complexo de inclusão &#946;-lap:HP&#946;-CD em lipossomas pode ser uma alternativa para aumentar a solubilidade da &#946;-lap e, em conseqüência, viabilizar sua utilização na terapêutica do câncer

Submitted by Nayara Passos (nayara.passos@ufpe.br) on 2015-03-04T11:59:53Z No. of bitstreams: 2 2012-Dissertacao-AnaKarina-Pereira.pdf: 1701318 bytes, checksum: 441acaeece317d63724810b05bbaef11 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T11:59:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 2012-Dissertacao-AnaKarina-Pereira.pdf: 1701318 bytes, checksum: 441acaeece317d63724810b05bbaef11 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-11 / Reuni/Propesq / Este estudo relata o desenvolvimento e caracterização de uma formulação lipossomal contendo o anestésico local tetracaína, visto que o emprego de lipossomas na área farmacêutica tem encontrado ampla aceitação, não somente na terapia clínica como no segmento da cosmética, podendo atuar veiculando os princípios ativos no organismo, tecidos ou células e aumentando sua eficácia terapêutica. O presente estudo teve como objetivo a incorporação do fármaco tetracaína em lipossomas e a caracterização das formulações lipossomais obtidas. Os lipossomas foram preparados utilizando a técnica de hidratação do filme seco de lipídios seguida de sonicação, sendo compostos pelo fosfolipídio lecitina de soja. Inicialmente foi realizado um planejamento experimental do tipo DCCR (Delineamento Composto Central Rotacional) visando otimizar as condições de sonicação das partículas contendo 100% de lipídio. A determinação do raio hidrodinâmico e distribuição do tamanho das vesículas foi realizada por meio de espalhamento de luz a laser, sendo a condição ótima de sonicação estabelecida a uma potência de 16 KHz e tempo de 3 minutos, obtendo-se tamanhos menores que 800 nm. Em seguida, as formulações lipossomais foram realizadas de duas formas: incorporando-se o fármaco na fase hidrofílica ou na fase lipofílica. Em ambos os casos, foram realizados planejamentos experimentais do tipo DCCR, tendo como variáveis investigadas a relação lipídio/colesterol e a concentração de tetracaína, e como variáveis resposta a eficiência de encapsulação e o diâmetro médio das vesículas. A eficiência de encapsulação foi avaliada por meio da técnica de ultracentrifugação a 30.000 rpm por duas horas (10 oC), sendo a concentração de tetracaína determinada por espectrofotometria a 310 nm. A máxima eficiência de encapsulação (39,7%) foi obtida na fase hidrofílica para uma concentração de tetracaína de 8,37 mg/mL e relação lipídio/colesterol de 79,5:20,5 %. Os lipossomas contendo tetracaína apresentaram estabilidade de aproximadamente 30 dias quando armazenados em suspensão a 4o C, sem alterações nos aspectos macro e microscópico.

Submitted by Nayara Passos (nayara.passos@ufpe.br) on 2015-03-05T11:53:16Z No. of bitstreams: 2 2012-Dissertação-Thiers-Campos.pdf: 1989878 bytes, checksum: 9bd37a681bf84e240269b1dde13589d3 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T11:53:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 2012-Dissertação-Thiers-Campos.pdf: 1989878 bytes, checksum: 9bd37a681bf84e240269b1dde13589d3 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / CAPES / Isolado da Cladonia verticillaris, o ácido fumarprotocetrárico (AF) apresenta diversas propriedades biológicas. O seu uso terapêutico ainda é limitado devido a sua baixa hidrofilicidade. As ciclodextrinas são oligossacarídeos cíclicos que podem formar complexos de inclusão com compostos lipofílicos, aumentando a hidrossolubilidade. Os lipossomas vêm se destacando nas pesquisas por incorporar uma variedade de compostos com características fisco-química desfavoráveis. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e caracterizar complexos de inclusão ácido fumarprotocetrárico:2-hidroxipropil-β-ciclodextrina e incorporar em lipossomas. Os parâmetros de validação foram estudados segundo as exigências da Conferência Internacional de Padronização de Uso Humano (ICH). Os complexos de inclusão foram preparados por liofilização e caracterizados físicoquimicamente. Os lipossomas contendo o AF ou complexo de inclusão AF:HPβCD foram preparados pelo método de hidratação do filme lipídico, submetidos a ensaios de estabilidade e consequentemente a avaliação do perfil cinético de liberação in vitro. A linearidade foi determinada através da equação da reta Absorvância = 0,1119x[AF]+ 0,0071(r2=0,999). A exatidão foi atestada na recuperação do AF no complexo de inclusão. Os coeficientes de variação nos ensaios de precisão intermediária e robustez apresentaram valores inferiores a 5%, caracterizando o método como preciso e robusto. Os limites de detecção e quantificação do AF foram de 0,24 e 0,74 mg.mL-1, respectivamente. O método também demonstrou ser reprodutível, simples e específico. O diagrama de solubilidade de fases de AF:HPβCD apresentou uma curva do tipo AL, com K1:1 = 58 M-1. Na presença de 300 mM de HPβCD, a solubilidade do AF aumentou 19 vezes. O complexo de inclusão AF:HPβCD apresentou modificações no IV, RMN 1H, difração de raios-X, microscopia e DSC, sugerindo a formação do complexo de inclusão. Após o processo de preparação, as formulações lipo-AF e lipo-AF:HPβCD demonstraram-se homogêneas com efeito tyndall. O diâmetro médio e o índice de polidispersão das vesículas foram 85,8 ± 4,5 nm e 0,41 ± 0,14 para lipo-AF e; 86,5 ± 1,41 nm e 0,24 ± 0,05, para lipo-AF:HPβCD. As formulações lipo- AF:HPβCD mantiveram-se estáveis após 60 dias quando as suspensões são armazenadas a 4ºC. Avaliando o perfil cinético de liberação in vitro do AF a partir dos complexos AF:HPβCD e lipo-AF:HPβCD observou-se uma liberação lenta e controlada entre 4 h e 12 h, respectivamente. Estes resultados demonstram que a complexação do AF a ciclodextrina, e sua incorporação em lipossomas, proporcionou uma melhoria na estabilidade e hidrossolubilidade do composto, viabilizando, portanto, seu uso terapêutico.

Orientador: Eneida de Paula, Cíntia Maria Saia Cereda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T20:14:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_CamilaMoraisGoncalvesda_D.pdf: 5133404 bytes, checksum: 75be40905019d4e0f33087ae6cd585d4 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A ropivacaína (RVC) é um anestésico local largamente utilizado em procedimentos cirúrgicos. Estudos com ropivacaína lipossomal ou complexada em ciclodextrinas apresentaram bons resultados, porém, anestesia ainda mais prolongada é necessária em procedimentos cirúrgicos de longa duração, no caso de dores crônicas ou no pós-operatório. Este estudo teve como objetivo aumentar a encapsulação da RVC em lipossomas, prolongar ainda mais o seu efeito anestésico e reduzir a sua citotoxicidade. Para isso, foram preparadas formulações lipossomais em pH 7,4: i) com diferentes composições lipídicas (fosfatidilcolina de soja/colesterol/?-tocoferol 2:1:0,07 mol%, fosfatidilcolina de ovo/colesterol/?-tocoferol 4:3:0,07 mol% e fosfatidilcolina de soja hidrogenada (HSPC)/colesterol 2:1 mol%); ii) de diferentes tipos (lipossomas unilamelares, multilamelares e multivesiculares); iii) contendo diferentes gradientes iônicos - composição interna das vesículas: pH 7,4 + sulfato de amônio, pH 5,5, pH 5,5 + sulfato de amônio ou pH 5,5 + citrato de sódio. As formulações preparadas foram caracterizadas quanto à morfologia, tamanho, potencial zeta, polidispersão, eficiência de encapsulação (%EE), cinética de liberação in vitro, permeabilidade do fármaco e grau de empacotamento da camada lipídica. Com o auxílio da quimiometria foram selecionadas as melhores formulações para as análises de estabilidade físico-química, citotoxicidade e efeito anestésico. A formulação de RVC a 0,75% em lipossomas multivesiculares de fosfatidilcolina de soja hidrogenada/colesterol com pH interno de 5,5 + 300 mM de citrato de sódio apresentou os melhores resultados: %EE de 62,5% e citotoxicidade reduzida, além de promover analgesia significativamente (p<0,05) mais prolongada (8 h) em camundongos pelo teste de Von Frey, em relação à RVC em solução (4 h) ou às demais formulações (6 h). Em um segundo momento, os lipossomas combinados (doadores-aceptores) de HSPC/colesterol com gradiente iônico foram preparados e caracterizados: vesículas doadoras multivesiculares, com pH interno 7,4 + sulfato de amônio contendo RVC e vesículas aceptoras unilamelares, com pH interno 5,5. O perfil de toxicidade sobre as células 3T3 em cultura foi: RVC em sistema combinado < RVC em lipossomas (doadores ou aceptores) < RVC em lipossomas convencionais, sem gradiente < RVC em solução. O efeito analgésico da formulação combinada foi significativamente (p<0,05) mais prolongado (7 e 9 h, com 0,75% e 2% de RVC, respectivamente), que com os lipossomas doador ou aceptor separadamente (6 e 7 h) ou com RVC em solução (4 e 5 h). Os resultados obtidos abrem perspectivas para o uso clínico dessas formulações em procedimentos cirúrgicos, para dores crônicas ou no pós-operatório / Abstract: Ropivacaine (RVC) is a local anesthetic that is widely used in surgical procedures. Drug delivery systems based on liposomes or cyclodextrins for RVC have shown good results, although greater duration of anesthesia is required for lengthy surgical procedures, chronic pain or during the postoperative period. The main goal of this study was to improve the encapsulation of RVC in liposomes, to extend the duration of its anesthetic effect, and to reduce its cytotoxicity. To this end, liposomal formulations were prepared at pH 7.4: i) with different lipid compositions (soy phosphatidylcholine/cholesterol/?-tocopherol at 2:1:0.07 mol%, egg phosphatidylcholine/cholesterol/?-tocopherol at 4:3:0.07 mol%, and hydrogenated soy phosphatidylcholine (HSPC)/cholesterol at 2:1 mol%); ii) with different types of liposomes (unilamellar, multilamellar, and multivesicular); iii) containing different ionic gradients ¿ internal composition of the vesicles: pH 7.4 + ammonium sulfate, pH 5.5, pH 5.5 + ammonium sulfate, and pH 5.5 + sodium citrate. The formulations were characterized in terms of morphology, particle size, zeta potential, polydispersion, encapsulation efficiency (%EE), in vitro release kinetics, drug permeability, and degree of packing of the lipid layer. Chemometrics was used to select the best formulations for analyses of physicochemical stability, cytotoxicity and anesthetic effect. The formulation using RVC at 0.75% in multivesicular liposomes of hydrogenated soy phosphatidylcholine/cholesterol with internal pH 5.5 + 300 mM of sodium citrate presented the best results: %EE of 62.5% and reduced cytotoxicity. This formulation also promoted significantly (p<0.05) prolonged analgesia (8 h) in mice compared to RVC in solution (4 h) or the other formulations (6 h). In a second step, the combined (donor-acceptor) liposomes composed of HSPC/cholesterol with ionic gradient were prepared and characterized: multivesicular donor vesicles with internal pH 7.4 + ammonium sulfate with RVC, and unilamellar acceptor vesicles with internal pH 5.5. The order of toxicity to 3T3 cells in culture was: RVC in the combined system < RVC in donor or acceptor liposomes < RVC in conventional liposomes, without gradient < RVC in solution. The analgesic effect of the combined formulation was significantly (p<0.05) longer (7 and 9 h, using 0.75 and 2% RVC, respectively) than donor or acceptor liposomes used separately (6 and 7 h), or RVC in solution (4 and 5 h). The results obtained open perspectives for the clinical use of these formulations in surgical procedures, chronic pain or during the postoperative period / Doutorado / Bioquimica / Doutora em Biologia Funcional e Molecular

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