Orientador: Saulo Santesso Garrido / Coorientador: Marlus Chorilli / Banca: Fernando Rogério Pavan / Banca: Eduardo Festozo Vicente / Resumo: Atualmente aproximadamente 75-88% das infecções fúngicas são causadas por espécies de Candida, que geram um custo de 1,7 bilhões de dólares para a saúde pública, somente nos EUA. Candida albicans é o principal microrganismo causador da candidíase bucal, uma infecção da mucosa oral do organismo humano. A patogenicidade dessa espécie está relacionada com a formação de biofilmes, que agem como um revestimento impermeável e protetor, e tornam o microrganismo resistente a medicamentos convencionais. Neste caso, os antifúngicos mais comumente utilizados, não apresentam ação eficaz. Por esse motivo, a busca por novas opções de tratamento e por novos medicamentos está em constante desenvolvimento, principalmente na área da biotecnologia. Um exemplo disso são os peptídeos antifúngicos da família das Histatinas, entre eles a Histatina-5. Trata-se de um peptídeo naturalmente encontrado na saliva humana, mas que sofre rápida degradação quando presente na cavidade bucal, que é seu local de ação. Diante disto, o objetivo deste trabalho é o desenvolvimento de lipossomas de diferentes composições lipídicas, na intenção de proteger o peptídeo e melhorar sua ação, preservando seu potencial antifúngico. Para isso foi sintetizado o peptídeo 0WHistatina-5, um análogo do peptídeo Histatina-5, que contém o aminoácido triptofano em sua sequência. Foi utilizado o método de síntese em fase sólida, seguido de clivagem e purificação, com confirmação da massa molecular utilizando HPLC e ESI-MS. Os liposs... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Currently, approximately 75-88% of fungal infections are caused by Candida species, which generate a cost of $ 1.7 billion for public health in the US. Candida albicans is the main microorganism that causes oral candidiasis, an infection of the oral mucosa of the human organism. The pathogenicity of this species is related to the formation of biofilms, which act as an impermeable and protective coating, and make the microorganism resistant to conventional drugs. In this case, the most commonly used antifungals, have no effective action. For this reason, the search for new treatment options and new drugs is in constant development, especially in the biotechnology area. The antifungal peptides of the Histatin family, including Histatin-5, are an example. The Histatin-5 is a peptide naturally found in human saliva, but it undergoes rapid degradation when present in the oral cavity, which is its place of action. For this reason, this work aimed at developing liposomes of different lipid compositions, in order to protect the peptide, improve its action, and preserve its antifungal potential. For this, the peptide 0WHistatin-5, an analog of the peptide Histatin-5, was synthesized, which contains the amino acid tryptophan in its sequence. Therefore, the peptide was synthesized manually by the solid phase synthesis method, followed by cleavage and purification. The molecular weight was confirmed by using HPLC and ESI-MS. The liposomes were produced by the lipid film hydration method,... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-09-28T17:24:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Ércia Xavier Novais de Souza.pdf: 2662382 bytes, checksum: 27b9f8fef93d48f84e963a76177c7875 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-28T17:24:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Ércia Xavier Novais de Souza.pdf: 2662382 bytes, checksum: 27b9f8fef93d48f84e963a76177c7875 (MD5) / A vitivinicultura no Brasil é concentrada nas regiões Sul, Sudeste e Nordeste, sendo uma atividade consolidada e com significativa importância sócio-econômica. Na Bahia apresenta expressão econômica principalmente na região do Vale do São Francisco. As uvas são consideradas uma das maiores fontes de compostos fenólicos dentre os vegetais e frutas. A fabricação de vinhos e sucos gera grandes quantidades de resíduos sólidos, como o bagaço de uva, os quais são descartados ou subaproveitados. Esse resíduo apresenta uma composição rica e heterogênea de compostos fenólicos, o que é interessante do ponto de vista econômico. O desenvolvimento de sistemas emulsificados envolvendo nanoformulações é uma alternativa para melhorar a disponibilidade biológica de substâncias ativas. Estas vantagens podem ser empregadas na veiculação de bioativos em produtos farmacêuticos ou cosméticos, principalmente para os cuidados com a pele. O objetivo deste trabalho foi encapsular em lipossomas os extratos de uva in natura e residual com o intuito de determinar e comparar os efeitos do processamento e da natureza sobre a composição, estabilidade, propriedades organolépticas e atividade antioxidante entre as amostras obtidas. Os teores dos compostos fenólicos e flavonóides foram determinados por espectroscopia no ultravioleta visível (UV-VIS), bem como através de tratamento quimiométrico de análise de componentes principais (PCA). A atividade antioxidante (AA) foi avaliada pelo método de sequestro de radicais livres DPPH. Os lipossomas obtidos através da técnica de extrusão mostraram-se estáveis quanto às propriedades organolépticas (odor, cor, aspecto), físicas, físico química tanto para as amostras obtidas da uva in natura quanto para dos resíduos. As amostras apresentaram AA comparável ao padrão hidroxitolueno butilado (BHT), o lipossoma de uva in natura demonstrou o maior IC50. Os teores de compostos fenólicos e flavonóides foram maiores nas amostras derivadas do resíduo, tanto no extrato quanto nos lipossomas. Na PCA permitiu prever a similaridade e a preservação das características químicas nos lipossomas obtidos. Os resultados mostraram o potencial de aplicação dos extratos de uva in natura e residual no desenvolvimento de sistemas lipossomados com atividades antioxidantes em promissores produtos bioativos.

Submitted by Carolina Reis Zambom null (carolinarz@gmail.com) on 2018-03-20T17:16:52Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Carol_versão correçãotodos_versãofinalpósdefesa-edit.pdf: 2874016 bytes, checksum: 09ff8b1558d91035a2e106afc33f8bd8 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Carolina Gonçalves Bet null (abet@iq.unesp.br) on 2018-03-23T17:38:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 zambom_cr_me_araiq_int.pdf: 2737311 bytes, checksum: 4eca302db8e9f1efe9d15f6049d7aa9a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-23T17:38:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 zambom_cr_me_araiq_int.pdf: 2737311 bytes, checksum: 4eca302db8e9f1efe9d15f6049d7aa9a (MD5) Previous issue date: 2018-03-02 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Atualmente aproximadamente 75-88% das infecções fúngicas são causadas por espécies de Candida, que geram um custo de 1,7 bilhões de dólares para a saúde pública, somente nos EUA. Candida albicans é o principal microrganismo causador da candidíase bucal, uma infecção da mucosa oral do organismo humano. A patogenicidade dessa espécie está relacionada com a formação de biofilmes, que agem como um revestimento impermeável e protetor, e tornam o microrganismo resistente a medicamentos convencionais. Neste caso, os antifúngicos mais comumente utilizados, não apresentam ação eficaz. Por esse motivo, a busca por novas opções de tratamento e por novos medicamentos está em constante desenvolvimento, principalmente na área da biotecnologia. Um exemplo disso são os peptídeos antifúngicos da família das Histatinas, entre eles a Histatina-5. Trata-se de um peptídeo naturalmente encontrado na saliva humana, mas que sofre rápida degradação quando presente na cavidade bucal, que é seu local de ação. Diante disto, o objetivo deste trabalho é o desenvolvimento de lipossomas de diferentes composições lipídicas, na intenção de proteger o peptídeo e melhorar sua ação, preservando seu potencial antifúngico. Para isso foi sintetizado o peptídeo 0WHistatina-5, um análogo do peptídeo Histatina-5, que contém o aminoácido triptofano em sua sequência. Foi utilizado o método de síntese em fase sólida, seguido de clivagem e purificação, com confirmação da massa molecular utilizando HPLC e ESI-MS. Os lipossomas foram produzidos pelo método de hidratação do filme lipídico, em 3 composições lipídicas diferentes, denominadas de F1, F2 e F3. F1 possui somente DPPC e Chol em sua composição, F2 contém, além desses componentes, PEG e F3 contém DPPC, Chol e POPG. Os lipossomas foram submetidos a processo de extrusão e sonicação para padronização do tamanho das vesículas, e estudo da melhor técnica para sua produção. Os lipossomas foram caracterizados por espalhamento de luz dinâmico determinação da eficiência de encapsulação, cinética de liberação, estabilidade e avaliação da atividade antifúngica. O método de síntese do peptídeo 0WHistatina-5 foi adequado e o processo de purificação possibilitou a obtenção do peptídeo com alto grau de pureza. Os lipossomas obtidos por extrusão apresentaram tamanho médio na faixa de 100 nm, enquanto os lipossomas obtidos por sonicação apresentaram tamanho menor, na faixa de 90 nm. Os lipossomas contendo 0WHistatina-5, apresentaram aumento em seu tamanho médio, indicando que o peptídeo está contido no compartimento interno aquoso dos lipossomas. A eficiência de encapsulação foi maior para os lipossomas obtidos por sonicação, sendo de 34,5% para a formulação F1, que contém DPPC e Chol em sua composição. A composição lipídica dos lipossomas está relacionada com a sua eficiência de encapsulação, e a presença de colesterol dificultou a encapsulação do peptídeo. A estabilidade das formulações também está relacionada com sua composição, sendo a formulação F3, obtida por sonicação e com POPG em sua formulação, a que apresentou melhor estabilidade quando armazenada por 60 dias a temperatura de 4°C. As formulações desenvolvidas apresentaram capacidade de liberar o peptídeo pelo tempo total de 96 horas, com o primeiro pico de liberação após 5 horas, e novo aumento do conteúdo liberado após 30 horas. O ensaio antimicrobiano foi realizado utilizando C. albicans ATCC 10231, e demostrou que no tempo de 4 horas a inibição para F1 foi de 66,5%. Assim, este trabalho demonstrou que a utilização de sistemas nanoestruturados é de grande importância para viabilizar a aplicação do peptídeo Histatina-5 em estudos terapêuticos, e em estudos in vivo no futuro. / Currently, approximately 75-88% of fungal infections are caused by Candida species, which generate a cost of $ 1.7 billion for public health in the US. Candida albicans is the main microorganism that causes oral candidiasis, an infection of the oral mucosa of the human organism. The pathogenicity of this species is related to the formation of biofilms, which act as an impermeable and protective coating, and make the microorganism resistant to conventional drugs. In this case, the most commonly used antifungals, have no effective action. For this reason, the search for new treatment options and new drugs is in constant development, especially in the biotechnology area. The antifungal peptides of the Histatin family, including Histatin-5, are an example. The Histatin-5 is a peptide naturally found in human saliva, but it undergoes rapid degradation when present in the oral cavity, which is its place of action. For this reason, this work aimed at developing liposomes of different lipid compositions, in order to protect the peptide, improve its action, and preserve its antifungal potential. For this, the peptide 0WHistatin-5, an analog of the peptide Histatin-5, was synthesized, which contains the amino acid tryptophan in its sequence. Therefore, the peptide was synthesized manually by the solid phase synthesis method, followed by cleavage and purification. The molecular weight was confirmed by using HPLC and ESI-MS. The liposomes were produced by the lipid film hydration method, with three different lipid compositions, named F1, F2 and F3. F1 has only DPPC and Chol in its composition, F2 contains, in addition to these components, PEG and F3 contains DPPC, Chol and POPG. The liposomes were submitted to extrusion and sonication processes, in order to standardize their vesicle size, and determine the best technique for their production. The dynamic light scattering technique was used to characterize the liposomes, which were tested for encapsulation efficiency, release kinetics, stability and evaluation of the antifungal activity. The synthesis method of the Histatin-5 was adequate and the purification process allowed to obtain the peptide in high purity. The liposomes obtained by extrusion presented average size in the range of 100 nm, while the liposomes obtained by sonication presented a smaller size, in the range of 90 nm. Liposomes loaded with Histatin-5 showed an increase in their mean size, which indicated that the peptide was contained in the intern aqueous compartment of the liposomes. The encapsulation efficiency was higher for the liposomes obtained by sonication. The F1 formulation presented an encapsulation efficiency of 34.5%, which contains DPPC and Chol in its composition. The lipid composition of the liposomes was related to their encapsulation efficiency, and the presence of cholesterol hindered the encapsulation of the peptide. The stability of the formulations was also related to their compositions. The F3 formulation obtained by sonication and containing POPG presented a higher stability when stored for 60 days at 4°C. The formulations showed the ability to release the peptide in the total period of 96 hours. The first release peak was observed after 5 hours, and a further increase of the released content was verified after 30 hours. The antimicrobial assay was performed using C. albicans ATCC 10231. It demonstrated that the inhibition for F1 was 66.5% after four hours of incubation, and it was maintained at 30% until the end of the experiment. Thus, this work conclusions showed that the use of nanostructured systems is of great importance to enable the application of Histatin-5 in therapeutic studies, and in vivo studies in the future. / 132393/20166

Submitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2018-11-12T13:58:06Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Naiara Ieza Gallo de Magalhães Benedetti - 2017.pdf: 10506850 bytes, checksum: 857e24de3790c59fd1f7dbf3e08ee0f3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Rejected by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com), reason: A data da defesa, na citação, é 2017 e não 2018 on 2018-11-12T14:13:08Z (GMT) / Submitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2018-11-12T14:20:07Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Naiara Ieza Gallo de Magalhães Benedetti - 2017.pdf: 10506850 bytes, checksum: 857e24de3790c59fd1f7dbf3e08ee0f3 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-11-12T14:24:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Naiara Ieza Gallo de Magalhães Benedetti - 2017.pdf: 10506850 bytes, checksum: 857e24de3790c59fd1f7dbf3e08ee0f3 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-12T14:24:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Naiara Ieza Gallo de Magalhães Benedetti - 2017.pdf: 10506850 bytes, checksum: 857e24de3790c59fd1f7dbf3e08ee0f3 (MD5) Previous issue date: 2017-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Nanotechnology has grown in recent years, mainly in the pharmaceutical area, responsible for improving problems inherent to drugs and formulation limitations. Among the drug nanocarriers, liposomes are the most studied. They were discovered more than 50 years ago and are mostly produced by biodegradable and biocompatible materials, capable of encapsulating both hydrophilic and lipophilic drugs. Currently there are some liposomal formulations approved by regulatory agencies and available for several treatments. Voriconazole is a second generation triazole antifungal drug, with a broad spectrum of action. It is used primarily in cases of resistant fungal infections, although its conventional formulation comes with some problems, such as the use of SBECD. Therefore, the present work aimed to develop, characterize and evaluate the stability of liposomes containing voriconazole. Three production techniques and the highest drug concentration, capable of being encapsulated by the liposomes, were evaluated. The particles were characterized according to the liposomes guidelines, published by Food and Drug Administration, lyophilized and tested for stability at 4º, 25º and 40º C for 120 days. Particles of 100 nm diameter containing 2 mg/ml of voriconazole were developed and lyophilized using only 7% sucrose. A method was developed and validated by HPLC-ELSD to quantify the vesicles structural components and to monitor the degradation products during stability test. / Estudos farmacêuticos na área de nanotecnologia visando promover melhoras inerentes aos fármacos e às limitações das formulações vêm sendo desenvolvidos. Dentre os nanocarreadores de fármacos os lipossomas são os mais difundidos e estudados, foram descobertos há mais de 50 anos e são em sua maioria produzidos por material biodegradável e biocompatível, capazes de encapsular tanto substâncias hidrofílicas quanto lipofílicas. Atualmente já existem algumas formulações lipossomais aprovadas pelas agências regulatórias e disponíveis para os mais diversos tratamentos. O voriconazol é um antifúngico triazólico de segunda geração, com amplo espectro de ação. É utilizado principalmente em casos de infecções fúngicas resistentes, porém sua formulação convencional apresenta alguns problemas, como o uso da sulfobutil-éter ß-ciclodextrina sódica para aumentar sua solubilidade. Sendo assim, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver, caracterizar e avaliar a estabilidade de lipossomas contendo voriconazol. Foram avaliadas três técnicas de produção e a maior concentração de fármaco capaz de ser encapsulada pelo lipossoma. A partícula foi caracterizada conforme guia de produção de lipossomas publicado pela Food and Drug Administration, liofilizada e colocada em teste de estabilidade a 4º, 25º e 40º C durante 120 dias. Foram desenvolvidas partículas de ± 100 nm de diâmetro médio contendo 2 mg/ml de voriconazol, que foram liofilizadas utilizando apenas 7% de sacarose. Foi desenvolvido e validado método por HPLC-ELSD para quantificar os componentes estruturais das vesículas e acompanhar a formação de produtos de degradação durante teste de estabilidade.

A fosfoetanolamina sintética (FO-S), um fosfomonoéster, apresenta relevante atividade antitumoral. Contudo, a utilização de um carreador para encapsular a FO-S em lipossomas poderia favorecer a sua disponibilidade no microambiente tumoral, possibilitando o aumento da sua eficácia. Desta forma, o presente estudo avaliou a eficiência de encapsulamento da FO-S em lipossomas de DODAC e o seu potencial antitumoral. Os lipossomas foram preparados por ultrasonicação e caracterizados físicoquimicamente. A citotoxidade foi avaliada nas linhagens tumorais B16F10 (melanoma murino), Hepa1c1c7 (hepatocarcinoma murino) e Skmel-28 (melanoma humano) e nas células normais HUVEC, após o tratamento com diferentes concentrações dos lipossomas DODAC/FO-S, no tempo de 24 horas. A internalização dos lipossomas e o potencial elétrico mitocondrial foram analisados por microscopia confocal a laser. Adicionalmente, a expressão das proteínas caspases 3 e 8 ativas, receptor DR4, citocromo c, p53, p21, Bax, p27, CD44, CD90, Bcl-2 e ciclina D1 foi quantificada por citometria de fluxo. Para os estudos in vivo, os camundongos C57BL/6J portadores de hepatocarcinoma foram tratados com FO-S, DODAC/FO-S e DODAC, pelas vias intraperitoneal (IP) e intrahepática (IH), durante 20 dias. Os resultados demonstraram que os lipossomas apresentaram aspecto esférico e alta eficiência de encapsulação da FO-S, como também promoveram maior citotoxicidade nas linhagens tumorais estudadas, em comparação com FO-S. Além disto, nas células B16F10 e Hepa1c1c7, ocasionou parada nas fases S e G2/M do ciclo celular. A linhagem Hepa1c1c7 foi a mais sensível ao tratamento com os lipossomas DODAC/FO-S, os quais foram internalizados em até 6 horas e promoveram a diminuição de CD90, CD44, ciclina D1 e Bcl-2, o aumento de p53, p21, p27, Bax e caspases 8 e 3 ativas e a liberação do citocromo c. O aumento significativo das caspases 8 e 3 ativas, expressão do receptor DR4 e a liberação do citocromo c também ocorreu nas linhagens B16F10 e Skmel-28. Os resultados in vivo mostraram que os lipossomas DODAC/FO-S e a FO-S não induziram hepatotoxicidade, nefrotoxicidade e caquexia. Os lipossomas DODAC/FO-S não ocasionaram mielossupressão e hemólise, apresentando menor toxicidade em relação a FO-S, administrada pelas vias IP e IH. Além disto, os tratamentos com DODAC/FO-S (IH) e FO-S (IH e IP) foram efetivos em diminuir o número de células na fase S. Contudo, apenas os lipossomas DODAC/FO-S (IH) reduziram significamente os focos tumorais, aumentando as áreas de necrose, promovendo também o aumento da expressão gênica da p53, ciclina B1 e caspases 8 e 3. O conjunto dos resultados in vivo e in vitro demonstraram que a formulação lipossomal DODAC/FO-S foi capaz de maximizar os efeitos antitumorais da FO-S, ativando as vias intrínsecas e extrínsecas da apoptose / Synthetic phosphoethanolamine (PHO-S) - a phosphomonoester - has shown relevant anticancer effects. However, the utilization of a carrier to encapsulate the PHOS in liposomes can maximize its availability in the tumor microenvironment, allowing an increase in its effectiveness. Thus, the present study has evaluated efficiency of PHO-S encapsulation in DODAC liposomes and its antitumor potential. The liposomes were prepared by ultrasonication and physico-chemically characterized. The cytotoxic effects were evaluated on B16F10 cells (murine melanoma), Hepa1c1c7 cells (murine hepatocellular carcinoma), Skmel-28 (human melanoma) and in endothelial cells HUVEC, after treatment with DODAC/PHO-S liposomes at different concentrations for 24 hours. The internalization of the liposomes and mitochondrial electrical potential were analyzed by confocal laser microscopy. Additionally, the expression of active caspases 3 and 8, receptor DR4, cytochrome c, p53 p53, p21, Bax, p27, CD44, CD90, Bcl-2 and cyclin D1 proteins was quantified by flow cytometry. For in vivo studies, C57BL/6J mice with hepatocellular carcinoma were treated with PHO-S, DODAC/PHO-S and DODAC, by intraperitoneal (IP) and intratumoral (IT) routes for 20 days. The results demonstrated that liposomes presented spherical aspect and high PHO-S encapsulation efficiency, as also promoted high cytotoxic effect - compared with PHO-S. Furthermore, in B16F10 and Hepa1c1c7 cells, the liposomes induced S and G2/M cell cycle arrest. Hepa1c1c7 cells showed greater sensitivity to the DODAC/PHO-S formulation, which were internalized until 6 hours and promoted a decrease in the expression of CD90, CD44, cyclin D1 and Bcl-2, an increase of de p53, p21, p27, Bax and active caspases 8 and 3 and the liberation of cytochrome c. The significant increase in the expression of active caspases 3 and 8, DR4 receptor and liberation of cytochrome c also occurred in B16F10 and Skmel-28 cells. In vivo results showed that DODAC/PHO-S liposomes and PHO-S did not induce nephrotoxicity, hepatotoxicity and cachexia. DODAC/PHO-S liposomes did not cause myelosuppression and hemolysis, presenting lower toxicity in relation to PHO-S - when administered by IP and IT routes. Moreover, treatment with DODAC/PHO-S (IT) and PHO-S (IT and IP) effectively decreased the number of cells in S phase. However, only DODAC/PHO-S liposomes significantly reduced the number of tumor foci, increasing area of necrosis, and also promoting an increase in gene expression of p53, cyclin B1 and caspases 8 and 3. The set of in vitro and in vivo results demonstrated that DODAC/PHO-S liposomal formulation was capable of maximizing the PHO-S antitumor effects, activating the intrinsic and extrinsic pathways of the apoptosis

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:27:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1188_1.pdf: 3055696 bytes, checksum: 10e51846026e49abc9ed0c8b74439ed5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / A trans-desidrocrotonina (t-DCTN), um diterpeno do tipo 19-nor-clerodano, é o componente majoritário isolado da espécie Croton cajucara. A literatura relata várias atividades farmacológicas para a t-DCTN , dentre as quais a atividade antitumoral merece destaque. Entretanto, a sua baixa solubilidade em água e hepatotoxicidade restrigem a sua aplicação terapêutica. Uma alternativa bastante promissora para diminuir o efeito tóxico e otimizar a ação antitiumoral da t-DCTN é a encapsulação deste bioativo em lipossomas. No presente estudo, um método espectrofotométrico UV foi desenvolvido e validado de acordo com os parâmetros do ICH para determinação da t-DCTN em complexos de inclusão com hidroxipropil-β-ciclodextrina (t-DCTN:HPβCD). Lipossomas contendo a t-DCTN (LD) e o seu complexo de inclusão t-DCTN:HPβCD (LC) foram obtidos pelo método de formação do filme lipídico seguido de sonicação e submetidos a avaliações de estabilidade a curto e a longo prazo e estudos de cinética de liberação in vitro. A atividade antitumoral das duas formas lipossomais também foi avaliada contra o tumor ascítico Sarcoma 180 em camundongos Swiss. Além disso, análises histopatológicas e hematológicas foram efutuadas. A t-DCTN em acetonitrila exibiu um pico máximo de absorção (max) em 234 nm. A faixa de linearidade foi de 1 20 μg mL-1 e a equação de regressão da curva padrão foi A = -0.00147 + 0.04214C, com coeficiente de correlação ≥ 0.99987 (n = 6). O método foi robusto, preciso e exato. Após o processo de fabricação, todas as formulações lipossomais apresentaram-se homogêneas, esbranquiçadas, translúcidas com reflexo azulado. O tamanho médio das vesículas de LD e LC foi respectivamente 78,67 ± 6,51nm e 77,33 ± 3,00 nm. O índice de polidispersão de LD e LC foi de 0,30 e 0,33 respectivamente. Os potenciais zeta de LD e LC foram, na correspondente ordem, +39,94 ± 2,62 mV e +36,27 ± 1,98 mV. As quantidades t-DCTN e do complexo de inclusão t-DCTN:HPβCD encapsuladas foram equivalentes a 1 mg/mL do fármaco, a eficiência de encapsulação de LD foi de 95,0 ± 3,8 %, enquanto que a de LC foi de 91,1 ± 5,6%. Observou-se que as formulações LD e LC mantiveram-se estáveis após 120 dias e após serem submetidas aos testes de agitação mecânica e de centrifugação. No que se refere a cinética de liberação in vitro, os perfis apresentaram uma boa correlação com o modelo fickiano, indicando que a difusão está envolvida no mecanismo de liberação. Um efeito burst (25%), tanto para LD quanto para LC, ocorreu nas primeiras 2 h de liberação, seguida de uma liberação gradual constante nas primeiras 8 h, atingindo um máximo de fármaco liberado para t-DCTN de 95% e para t-DCTN:HPβCD de 98% dentro de 96 h. Em relação a inibição tumoral, LD e LC apresentaram as respectivas inibições tumorais de 79,4 ± 9,6% e 63,5 ± 5,5%. Na análise histopatológica, observou-se poucas alterações no fígado dos animais tratados com LD e com LC. Os achados hematológicos, por sua vez, não mostram qualquer efeito relacionado ao tratamento e não há diferença significativa em relação ao grupo controle. Os resultados mostram que o desenvolvimento das formulações lipossomais contendo a t-DCTN e o seu complexo de inclusão t-DCTN:HPβCD consiste num importante avanço na terapêutica deste fármaco, repercutindo em um impulso técnico-científico, podendo ser uma alternativa em potencial no combate ao câncer

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-22T18:10:08Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_IsabelRoggia_parcial.pdf: 2275089 bytes, checksum: 85859128d6658714abfc7173f2587948 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-22T18:10:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_IsabelRoggia_parcial.pdf: 2275089 bytes, checksum: 85859128d6658714abfc7173f2587948 (MD5) Previous issue date: 2018-03-26 / The Paullinia cupana var. sorbilis, popularly known as guarana, is one of the most promising compounds in Brazilian flora. The presence of methylxanthines (caffeine, theophylline and theobromine) and tannins (caffeine and catechin) in its composition make it a potent therapeutic compound. Stimulant, antifungal, antimicrobial, antiparasitic activities, among others, are described in the literature as potentiality of this compound. On the other hand, when the product is exposed to high temperatures, in the presence of moisture, oxygen and in direct contact with light or, when stored in inadequate packaging, the integrity of the active ingredient may be impaired and consequently, the decrease and/or loss of activity and onset of toxicity can be observed. With the intent of obtaining a more stable, effective and safe product, the objective of this work was to prepare and characterize a liposomal system containing guarana powder and to evaluate its safety "in vitro" through a study of cytotoxicity and genotoxicity. First, analytical methods for the quantification of markers present in guarana were developed and validated by ultraviolet derivative (UVD), for caffeine and catechin, and by high performance liquid chromatography (HPLC), for quantification of caffeine, theophylline, theobromine, catechin and epicatechin in samples of guarana powder and liposomes. The methods developed proved to be linear, specific, precise, accurate and robust for the simultaneous determination of the different markers in the guarana powder sample and in the liposomes. Through the forced degradation study it can be observed, in general, a reduction of polyphenols content (catechin and epicatechin), compared to basic (0.1 M NaOH) and photolytic (fluorescence UVC) conditions, both for the standards and for guarana and for liposomes. For the latter, a reduction in the content of active compounds was also observed against oxidative conditions (3% H2O2). It is believed that this change is related to the process of epimerization and photostability, already described for polyphenols when in contact with basic and photolytic solutions, respectively. After conducting a preformulation study it was observed that liposomes containing 1 mg.mL-1 guarana powder, prepared by the reverse phase evaporation method and the ethanol injection method presented adequate characteristics and remained more stable in relation to the formulations containing 10 and 5 mg.ml-1. After the physical-chemical characterization and stability study of these formulations, the reverse phase evaporation method was chosen as the best method for encapsulation of guarana. These systems remained stable under 10 refrigeration without significantly modifying their characteristics for 60 days. A toxicological evaluation of liposomes in different cell cultures (3T3, HaCaT, A549, HepG2 and THP1) and in different concentrations (3.91-500 μg.mL-1) showed that, in general, the liposomes do not present significant toxicity up to a concentration of 125 μg.mL-1 when analyzed by the neutral red technique (NRU). By the (3-(4,5- Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) technique (MTT), the viability reduction was observed from the concentration of 31.25 μg.mL-1 for the 3T3 and HepG2 cells and 62.5 μg.mL-1 for the A549 cell. Hemolysis, photohaemolysis, and hemoglobin oxidation tests showed that the liposomes, in the absence of guarana, caused damage to the eritrocytes and that guarana can reverse and/or protect the cells against this damage. It was also observed that this damage is possibly related to the presence of polysorbate 80 present in the formulations. When chlorpromazine was added to the experiments, it was observed that the guarana containing liposomes were able to protect the cells from the damage caused by that compound. Through the genotoxicity study it was possible to observe that guarana and liposomes did not cause DNA damage. The evaluation of the antioxidant activity by the DPPH technique proved the antioxidant effect, already described for guarana and, it was verified that this activity was maintained after the incorporation of guarana in the liposomes. This activity observed for all treatments was dose dependent of the concentration of guarana in the formulation. In this way, we can conclude that it was possible to develop a liposome system through the reverse phase evaporation method containing 1 mg.mL-1 of guarana powder, remaining stable for 60 days and showing safety against the different cell types tested. It is also worth noting the importance of new experiments, mainly the performance of the spray drying to improve the stability of the active ingredients and the characterization of these new systems formed, as well as additional tests regarding the safety profile. / A Paullinia cupana var. sorbilis, popularmente conhecida por guaraná é um dos compostos mais promissores da flora brasileira. A presença de metilxantinas (cafeína, teofilina e teobromina) e taninos (cafeína e catequina) em sua composição, fazem deste, um potente composto terapêutico. Atividades estimulante, antifúngica, antimicrobiana, antiparasitária, dentre outras, estão descritas na literatura como potencialidade deste composto. Em contra partida, quando o produto encontra-se exposto a temperaturas elevadas, na presença de umidade, oxigênio e em contato direto com a luz ou ainda, quando conservado em embalagens inadequadas, a integridade dos ativos pode ser prejudicada e consequentemente a diminuição e/ou perda da atividade e surgimento de toxicidade podem ser observadas. Com a proposta de obter um produto mais estável, eficaz e seguro, o objetivo deste trabalho foi preparar e caracterizar um sistema lipossomal contendo pó de guaraná, além de avaliar a sua segurança “in vitro” através de estudo de citotoxicidade e genotoxicidade. Primeiramente, métodos analíticos para quantificação dos marcadores presentes no guaraná foram desenvolvidos e validados por espectrofotometria ultravioleta derivada (UVD), para a cafeína e a catequina e por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para quantificação de cafeína, teofilina, teobromina, catequina e epicatequina em amostras de pó de guaraná e nos lipossomas. Os métodos desenvolvidos demostraram-se lineares, específicos, precisos, exatos e robustos para determinação simultânea dos diferentes marcadores em amostra de pó de guaraná e nos lipossomas. Através do estudo de degradação forçada pode-se observar, de forma geral, redução no teor dos polifenóis (catequina e epicatequina), frente a condições básicas (NaOH 0,1 M) e fotolíticas (UVC fluorescentes), tanto para os padrões, como para o guaraná e para os lipossomas. Para esse último, observou-se também redução no teor dos compostos ativo frente a condições oxidativas (H2O2 3%). Acredita-se que essa alteração esteja relacionada ao processo de epimerização e fotoinstabilidade, já descrito para os polifenóis quando em contato com soluções básicas e fotolíticas, respectivamente. Após a realização de um estudo de pré-formulação observou-se que os lipossomas contendo 1 mg/mL de pó de guaraná, preparados pelo método de evaporação em fase reversa e pelo método de injeção de etanol apresentaram características adequadas e mantiveram-se mais estáveis em relação as formulações contendo 10 e 5 mg/mL. Posteriormente a caracterização físico-química e o estudo de estabilidade destas formulações, o método de evaporação em fase reversa foi escolhido 8 como o melhor método para encapsulação do guaraná. Esses sistemas mantiveram-se estáveis sobre refrigeração, sem modificar de forma significativa, das suas características por 60 dias. A avaliação toxicológica dos lipossomas frente á diferentes culturas celulares (3T3, HaCaT, A549, HepG2 e THP1) em diferentes concentrações (3,91 – 500 μg/mL), mostrou que, de forma geral, os lipossomas não apresentam toxicidade significativa até a concentração de 125 μg/mL quando analisados pela técnica de vermelho neutro (NRU). Já pela técnica de brometo de 3-(4,5-dimetil-2- tiazolil)-2, 5-difenil-2H-tetrazólio (MTT) a redução da viabilidade foi observada a partir da concentração de 31,25 μg/mL para as células 3T3 e HepG2 e 62,5 μg/mL para a célula A549. Os testes de hemólise, fotohemólise e oxidação da hemoglobina mostraram que os lipossomas sem a presença do guaraná apresentaram dano aos eritrócitos e que o guaraná consegue reverter e/ou proteger as células contra esse dano. Observou-se também que esse dano, possivelmente esteja relacionado à presença do polissorbato 80 presente nas formulações. Quando foi adicionado a clorpromazina aos experimentos, observou-se que os lipossomas contendo guaraná conseguiram proteger as células do dado provocado por esse composto. Pelo estudo de genotoxicidade foi possível observar que o guaraná e os lipossomas contendo guaraná não ocasionaram dano ao DNA. A avaliação da atividade antioxidante pela técnica de DPPH comprovou o efeito antioxidante, já descrito para o guaraná, e ainda, verificou-se que essa atividade foi mantida após a incorporação do guaraná nos lipossomas. Essa atividade observada para todos os tratamentos foi dose dependente da concentração de guaraná na formulação. Desta forma, podemos concluir que foi possível desenvolver um sistema lipossomal através do método de evaporação em fase reversa contendo 1 mg/mL de pó de guaraná, mantendo-se estável por 60 dias e mostrando-se seguro frente os diferentes tipos celulares testados. Resalta-se ainda, a importância de novos experimentos, principalmente a realização da secagem por aspersão para melhorar a estabilidade dos ativos e a caracterização destes novos sistemas formados, além de testes adicionais quanto ao perfil de segurança.

Orientadores: Maria Helena Andrade Santana, Lucimara Gaziola de la Torre / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química / Made available in DSpace on 2018-08-16T11:16:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Trevisan_JuliaExaltacao_M.pdf: 7656590 bytes, checksum: c2da607d637d0d57546aa48d6017dcbe (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Este trabalho apresenta um estudo comparativo de processos escalonáveis dos tipos "top-down" (cominuição) e "bottom-up" (síntese), visando a produção de lipossomas funcionais para a vacinação gênica contra a tuberculose. Na abordagem "top-down" os lipossomas foram produzidos através da alimentação de uma dispersão de fosfolipídios em água e simultânea cominuição através de cisalhamento produzido por agitadores mecânicos dos tipos Caules (C) e Ultra-turrax® (U-T). Os lipossomas provenientes do U-T foram posteriormente submetidos a maiores níveis de cisalhamento, pela passagem através de microcanais tortuosos a pressões da ordem de 100 atm, em microfluidizador (M). A influência das variáveis operacionais sobre o diâmetro, polidispersidade e potencial zeta foi analisada através de planejamento estatístico fatorial e superfícies de resposta. Para C e U-T, os efeitos do cisalhamento prevaleceram em relação à vazão de alimentação. Para M, a pressão exerceu maior influência que o número de passagens. A taxa de cisalhamento aplicada variou na faixa de 102 a 7.106 s-1, produzindo diâmetros médios de 957 a 90 nm, polidispersidades de 0,60 a 0,25 e potenciais zeta de -60 a -44 mV. O diâmetro médio dos lipossomas variou com o inverso da raiz quadrada da taxa de cisalhamento. No processo "bottom-up" os lipossomas foram produzidos continuamente na interface etanol/fosfolipídio e água, formada por focalização hidrodinâmica em microcanal reto de 0,14 mm de largura. A velocidade de formação dos lipossomas variou com a razão água/etanol, concentração e composição lipídica. As propriedades físico-químicas originais dos lipossomas funcionais foram aproximadamente reproduzidas em ambos os processos escalonáveis. Comparativamente, o processo "top-down" é mais robusto, de fácil operação, permite utilizar altas concentrações lipídicas (400 mM), com obtenção de maior produtividade. Porém é descontínuo e requer maior consumo energético. O processo "bottom-up" é menos robusto, opera de forma estável a mais baixas concentrações lipídicas (100 mM), porém a produção é contínua e com menor consumo energético / Abstract: The work presents a comparative study of scalable process with a top-down (comminution) and bottom-up (synthesis) approach, aiming the production of functional liposomes for the genetic vaccination against tuberculosis. For the top-down approach, liposomes were produced through the feed of a phospholipid in water solution and simultaneous comminution by cowls (C) and Ultra-Turrax® (U-T) mechanical dispersers. The liposomes obtained by U-T were then submitted to greater levels of shear through the processing in tortuous microchannels under a pressure in the order of 100 atm, in a microfluidizer (M). The influence of the operational variables on the diameter, polydispersity and zeta potential was analyzed through statistics factorial planning and response surface. For C and U-T the effects of shear overcame the effects of feed flow rate, and for M the effects of shear had greater influence than the number of passes.The applied hear rate varied in the range of 102 a 7.106 s-1, resulting in liposomes with mean diameter of 957 to 90 nm, polydispersity of 0,60 to 0,25 and zeta potential of -60 to -44 mV. The mean diameter varied with the inverse of the square root of the shear rate applied. In the bottom-up process liposomes were produced continuously at the interface ethanol/phospholipid and water, formed by the hydrodynamic focusing in a straight microchannel with 0,14 mm of width. The liposome formation velocity varied with the ethanol/water flow ratio, the lipid concentration and composition. The original physico-chemical properties of the functional liposomes were approximately reproduced in both scalable approaches. Comparatively, the top-down approach was more robust, easy to operate and allows the use of high lipid concentration (400 mM), achieving a greater productivity. However, it is discontinuous and requires a higher energetic consumption. The bottom-up approach is less robust, is stably operated with lower lipid concentration (100 mM), but it is a continuous production with a low energetic consumption / Mestrado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Mestre em Engenharia Química

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:12:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Liliane Radoll Ribeiro.pdf: 85648 bytes, checksum: 100baebe5e75ae9143311e745c1f60d3 (MD5) Previous issue date: 2008-04-28 / Genistein is the most abundant isoflavone, displaying the largest number of biological activities. Most studies on genistein have been based on its antioxidant, estrogenic, tyrosine kinase and carcinogenesis inhibitor activities. Genistein is practically insoluble in water and oil in the active form of aglicone, which presents a technical difficulty. To circumvent this problem, the encapsulation of genistein in phosphatidylcholine liposomes seems an efficient alternative for the improvement of solubility. In this work, genistein was encapsulated in phosphatidylcholine liposomes and the drugphospholipid interactions were characterized. It was demonstrated that the interaction of genistein with this lipid membrane model lead to an increased membrane rigidity caused by a tighter packing of the phospholipid bilayer. Encapsulation efficiency for genistein in liposomes reached 99%, with a maximum loading efficiency at the molar ratio of 1:3 (genistein:phosphatidylcholine), resulting in an increase of 1000 times in the water solubility of genistein. Genistein was able to protect membrane phospholipids against CuSO4 induced peroxidation. The liposomal preparation remained stable for at least 40 days, showing its potential as a nanostructured delivery system for this isoflavone for therapeutic and cosmetic applications. / A genisteína é a isoflavona mais abundante e que exibe o maior número de atividades biológicas. A maioria dos estudos sobre a genisteína tem sido realizada com base nas suas atividades antioxidante, estrogênica, inibidora da tirosina quinase e inibidora da carcinogênese. No entanto, a genisteína possui uma dificuldade tecnológica: é pouco solúvel em água e óleo, quando na forma ativa de aglicona. Para contornar esse problema, a encapsulação da genisteína em lipossomas de fosfatidilcolina parece uma alternativa eficaz para a melhora da solubilidade. No presente trabalho, a genisteína foi encapsulada em lipossomas de fosfatidilcolina e as interações entre este fármaco e o fosfolipídeo foram caracterizadas. Foi possível demonstrar que as interações fármaco-lipídeo neste modelo aumentam a rigidez da membrana lipídica devido ao maior empacotamento dos fosfolipídeos na bicamada. A eficiência de encapsulação da genisteína em lipossomas foi elevada, chegando ao índice 99 %, com encapsulação máxima na razão molar de 1:3 (genisteína:fosfolipídeo), o que promove o aumento da solubilidade da genisteína na solução aquosa em cerca de 1000 vezes. Foi demonstrado o efeito protetor antioxidante da genisteína sobre os fosfolipídeos de membrana. A preparação lipossomal permaneceu estável por pelo menos 40 dias, evidenciando seu potencial como sistema carreador para esta isoflavona em aplicações terapêuticas e cosméticas.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-09-27T15:30:53Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Halanna Cristina Barbosa Silva - 2016.pdf: 1692105 bytes, checksum: 1a6dba862cc9e4e590269d62f3d72bca (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-09-27T15:31:19Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Halanna Cristina Barbosa Silva - 2016.pdf: 1692105 bytes, checksum: 1a6dba862cc9e4e590269d62f3d72bca (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-27T15:31:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Halanna Cristina Barbosa Silva - 2016.pdf: 1692105 bytes, checksum: 1a6dba862cc9e4e590269d62f3d72bca (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-29 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Bexarotene is an agonist to retinoid X receptors (RXR) clinically used in cutaneous T cell lymphoma (CTCL). The oral bexaroteno therapy results in disagreeable side effects related to lipid metabolism, such that topical administration presents as an alternative to bexaroteno use increasing the drug concentration at the target site. Nanostructured systems, such as the deformable liposomes can be an interesting alternative to facilitate or promote increased cutaneous permeation of bexarotene. So, the aim of this study was the development and characterization of deformable bexarotene liposomes. Three surfactants were evaluated for composition of deformable liposomes (Span 80, Tween 80 and Span 85) in different concentrations (5, 10 and 15%). Liposomes were evaluated for average diameter, PdI and elasticity. And then a full factorial design with 3² triplicate central point was applied to analyze the influence of variables ethanol concentration and surfactant in the elasticity of the vesicles. A global solution was proposed by analyzing the Statistica 7.0 software applying the desirability tool and the deformable liposomes encapsulating bexarotene were prepared from the obtained response. Deformable liposomes were prepared by lipid film hydration and extrusion polycarbonate membrane (200 and 100 nm). The desirability function provided a global solution with 5.25% (v / v) ethanol and 5% (w / v) Span 80. Deformable liposomes had encapsulation efficiency of 99.67±3.4%, diameter average of 93.69±1.95 nm and PDI 0.092±0.02. Lyophilized liposomes showed higher elasticity parameters than non-lyophilized formulations, with elasticity up to 215.5±5.5 (mg.s-1.cm-2) for formulations with sucrose and 22.13±1.04 (mg. s-1.cm-2) for conventional liposomes. EPR studies demonstrated that lyophilized formulations presented higher molecular dynamics of lipids regarding the non lyophilized in all formulations, while the formulations without BXT was most dynamic in formulations in which sucrose was used as cryoprotectant, in formulations with BXT occurs the oposite. In vitro skin permeation studies, BXT deformable liposomes had a penetration rate EC about 5 times greater than the conventional liposomes. Thus, the developed deformable liposomes present as bexarotene the potential permeation enhancer on the skin. / O bexaroteno é um agonista dos receptores retinoides X (RXR) clinicamente utilizado no tratamento de linfoma cutâneo de células T (LCCT). A terapia oral do bexaroteno resulta em efeitos colaterais desagradáveis relacionados ao metabolismo de lipídios, de forma que a via tópica se apresenta como alternativa para administração do bexaroteno, aumentando a concentração de fármaco no sítio alvo. O uso de sistemas nanoestruturados, como por exemplo, os lipossomas deformáveis, pode ser uma alternativa interessante para facilitar ou promover maior permeação cutânea do bexaroteno. Assim, o objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento e caracterização de lipossomas deformáveis de bexaroteno. Para selecionar os componentes da formulação foram avaliados três tensoativos (Span 80, Tween 80 e Span 85) em três concentrações diferentes (5, 10 e 15%). Os lipossomas foram avaliados quanto ao diâmetro médio, PdI e elasticidade. A seguir um planejamento fatorial completo 3² com triplicata do ponto central foi aplicado para analisar a influência das variáveis de concentração do etanol e do tensoativo na elasticidade das vesículas. Uma solução global foi proposta mediante análise pelo software Statistica 7.0 aplicando-se a ferramenta desejabilidade e, os lipossomas deformáveis encapsulando bexaroteno foram preparados a partir da resposta obtida. Lipossomas deformáveis foram preparados por hidratação do filme lipídico e extrusão em membrana de policarbonato (200 e 100 nm). A função desejabilidade ofereceu uma solução global com 5,25% (v/v) de etanol e 5% (p/v) de Span 80. Os lipossomas deformáveis obtidos apresentaram eficiência de encapsulação de 99,67±3,4 %, diâmetro médio de 93,69±1,95 nm e PdI 0,092±0,02. Os lipossomas liofilizados indicaram parâmetros de elasticidade superiores as formulações não liofilizadas, com elasticidade de até 215,5±5,5 (mg.s-1.cm-2) para formulações com sacarose e 22,13±1,04 (mg.s-1.cm-2) para lipossomas convencionais. Os estudos de RPE demonstraram que as formulações liofilizadas apresentaram maior dinâmica molecular dos lipídios em relação as não liofilizadas em todas as formulações, enquanto nas formulações sem BXT houve maior dinâmica nas formulações em que a sacarose foi utilizada como crioprotetor, nas formulações com BXT ocorre o contrário. Nos estudos de permeação cutânea in vitro, os lipossomas deformáveis de BXT tiveram uma taxa de penetração no EC cerca de 5 vezes superior aos lipossomas convencionais. Dessa forma, os lipossomas deformáveis desenvolvidos se apresentam como potencial promotor de permeação do bexaroteno na pele.