Submitted by Nivaldo Melo (nivaldo.melo@ufvjm.edu.br) on 2015-11-30T16:45:15Z No. of bitstreams: 2 marcos_vinicius_barbosa.pdf: 2721412 bytes, checksum: 173504d75a25f2de0569ca85af50f0df (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-12-03T16:06:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 marcos_vinicius_barbosa.pdf: 2721412 bytes, checksum: 173504d75a25f2de0569ca85af50f0df (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-03T16:06:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 marcos_vinicius_barbosa.pdf: 2721412 bytes, checksum: 173504d75a25f2de0569ca85af50f0df (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2014 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Rede Mineira de Pesquisas em Nanobiotecnologia (Nanobiomg) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (Capes) / O paclitaxel (PTX) ? um agente quimioter?pico usado no tratamento de v?rios tipos de tumores s?lidos como c?ncer de pr?stata, mama e ov?rio. Devido a sua baixa solubilidade aquosa, o PTX (Taxol?) ? formulado em um ve?culo constitu?do por Cremophor EL? e ?lcool desidratado. No entanto, rea??es de hipersensibilidade aguda, nefrotoxicidade e neurotoxicidade, al?m de problemas de instabilidade f?sico-qu?mica t?m sido relatados com o uso do Taxol?. Diante disso, o objetivo desse estudo foi desenvolver um novo sistema lipossomal multifuncionalizado para veicular o PTX e avaliar a citotoxicidade em linhagens tumorais de c?ncer de mama (MCF-7 e MDA-MB-231). Inicialmente foi desenvolvido e validado um m?todo anal?tico para quantifica??o do PTX por espectrofotometria derivada no ultravioleta. O m?todo apresentou linearidade adequada e permitiu a quantifica??o do PTX na formula??o com adequada precis?o, exatid?o e especificidade. As formula??es propostas foram compostas por dioleilfosfatidiletanolamina (DOPE), hemisuccinato de colesterila (CHEMS), e diestearoilfosfatidiletanolamina associado ao polietilenoglicol 2000 (DSPE-PEG2000); ou por fosfatidilcolina de soja (SPC), DOPE, CHEMS e DSPE-PEG e preparadas pelo m?todo de hidrata??o do filme lip?dico. A influ?ncia da composi??o lip?dica qualitativa e quantitativa (10 e 20 mM) e da concentra??o do PTX (0,5; 1,0 ou 20 mg/mL) nas caracter?sticas f?sico-qu?micas dos lipossomas foi avaliada. Uma redu??o no teor de encapsula??o foi verificada na formula??o composta por DOPE:CHEMS:DSPE-PEG a medida que a concentra??o de PTX foi aumentada (p<0,05), rela??o que n?o foi observada para a formula??o com SPC. A associa??o com o PTX promoveu aumento significativo no di?metro m?dio das ves?culas em compara??o com a formula??o sem PTX e o aumento na concentra??o do f?rmaco tamb?m levou a um aumento no di?metro. O potencial zeta de todas as formula??es apresentou valores pr?ximos da neutralidade. Essa prepara??o apresentou boa estabilidade, com manuten??o do di?metro m?dio, teor de encapsula??o e potencial zeta durante 100 dias de armazenamento. Modifica??es da organiza??o supramolecular da DOPE indicativas de mudan?as de fase lamelar para n?o-lamelar em fun??o da redu??o do pH foram observadas nas prepara??es compostas por DOPE:CHEMS:DSPE-PEG. A inclus?o da SPC na bicamada, alterou a pH-sensibilidade do sistema e maior reten??o do PTX foi observada em pH mais ?cido quando comparada ? formula??o sem a SPC (p<0,05). A an?lise morfol?gica demonstrou a exist?ncia de part?culas esf?ricas regulares com di?metros heterog?neos para as formula??es contendo ou n?o PTX. A atividade citot?xica in vitro mostrou que o PTX associado aos lipossomas com folato (LpHSF-PTX) foi mais ativo que o PTX encapsulado nos lipossomas sem associa??o ao folato (LpHS-PTX) e que o PTX livre. Em suma, esses resultados sugerem que os LpHSF-PTX representam uma alternativa promissora para entrega intracelular do PTX no tratamento do c?ncer de mama. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014. / ABSTRACT Paclitaxel (PTX) is a chemotherapeutic agent used in the treatment against various solid tumors such as prostate cancer, breast and epithelial ovarian carcinoma. Due to its low aqueous solubility, PTX is prepared in a vehicle composed of Cremophor EL? and dehydrated ethanol (Taxol?). However, acute hypersensitivity reactions, nephrotoxicity and neurotoxicity, as well as problems of physical-chemical instability have been reported with use of Taxol?. Thus, the purpose of this study was to develop a multifunctional liposomal system to carrier PTX, and to evaluate its cytotoxicity in tumor cell lines breast cancer (MCF-7 and MDA-MB-231). Firstly, an analytical method for quantification of PTX by derivative ultraviolet spectrophotometry was developed and validated. The method showed adequate linearity and allowed the quantification of PTX formulation with adequate precision, accuracy and sensitivity. The proposed formulations were composed by dioleoylphosphatidylethanolamine (DOPE), cholesteryl hemisuccinate (CHEMS) and distearoylphosphatidylethanolamine-polyethyleneglycol 2000 (DSPE-PEG) or soy phosphatidylcholine (SPC), DOPE, CHEMS and DSPE-PEG and prepared by lipid film hydration method. The influence of the qualitative and quantitative lipid composition (10 and 20mM), and the PTX concentration (0.5, 1.0 and 2.0 mg/mL) on the physicochemical characteristics of liposomes was evaluated. A decrease in the encapsulation percentage was observed in formulation composed DOPE:CHEMS:DSPE-PEG as the PTX concentration was increased (p<0,05), however, this relation was not observed for formulations with SPC. The PTX association caused a significant increase in the mean diameter of the vesicle compared to the formulation without PTX and the increase in drug concentration also led to an increase in mean diameter. The zeta potential for all formulations showed values near neutrality. This preparation showed good stability, maintaining the average diameter, encapsulating percentage and zeta potential over 100 days of storage. Alterations in the supramolecular organization of DOPE indicative of changes in lamellar to non-lamellar phase due to pH reduction in formulation made up DOPE:CHEMS:DSPE-PEG could be observed. The inclusion of SPC in the bilayer decreased the pH sensitivity of this system and increased of PTX retention in more acidic pH was observed as compared to the formulation without SPC (p<0,05). Morphological analysis evidenced the existence of regular spherical vesicles with heterogeneous diameters in formulations with and without PTX. The in vitro cytotoxicity assay showed the PTX associated with liposomes folate-targeted (LpHSF-PTX) was more active in PTX encapsulated than in non-targeted liposomes (LpHS-PTX) and PTX free. These results suggest that the LpHSF-PTX represent a promising alternative for intracellular PTX delivery in the treatment of breast cancer.

Submitted by Programa de Pós-graduação em Biotecnologia (mebiotec.ufba@gmail.com) on 2017-09-13T11:46:21Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Final - Èrcia Xavier.pdf: 2662420 bytes, checksum: fd6d9a9947d26b8d8052875ef6977e70 (MD5) / Approved for entry into archive by Edvaldo Souza (edvaldosouza@ufba.br) on 2017-10-02T18:46:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Final - Èrcia Xavier.pdf: 2662420 bytes, checksum: fd6d9a9947d26b8d8052875ef6977e70 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-02T18:46:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Final - Èrcia Xavier.pdf: 2662420 bytes, checksum: fd6d9a9947d26b8d8052875ef6977e70 (MD5) / Capes / A vitivinicultura no Brasil é concentrada nas regiões Sul, Sudeste e Nordeste, sendo uma atividade consolidada e com significativa importância sócio-econômica. Na Bahia apresenta expressão econômica principalmente na região do Vale do São Francisco. As uvas são consideradas uma das maiores fontes de compostos fenólicos dentre os vegetais e frutas. A fabricação de vinhos e sucos gera grandes quantidades de resíduos sólidos, como o bagaço de uva, os quais são descartados ou subaproveitados. Esse resíduo apresenta uma composição rica e heterogênea de compostos fenólicos, o que é interessante do ponto de vista econômico. O desenvolvimento de sistemas emulsificados envolvendo nanoformulações é uma alternativa para melhorar a disponibilidade biológica de substâncias ativas. Estas vantagens podem ser empregadas na veiculação de bioativos em produtos farmacêuticos ou cosméticos, principalmente para os cuidados com a pele. O objetivo deste trabalho foi encapsular em lipossomas os extratos de uva in natura e residual com o intuito de determinar e comparar os efeitos do processamento e da natureza sobre a composição, estabilidade, propriedades organolépticas e atividade antioxidante entre as amostras obtidas. Os teores dos compostos fenólicos e flavonóides foram determinados por espectroscopia no ultravioleta visível (UV-VIS), bem como através de tratamento quimiométrico de análise de componentes principais (PCA). A atividade antioxidante (AA) foi avaliada pelo método de sequestro de radicais livres DPPH. Os lipossomas obtidos através da técnica de extrusão mostraram-se estáveis quanto às propriedades organolépticas (odor, cor, aspecto), físicas, físico química tanto para as amostras obtidas da uva in natura quanto para dos resíduos. As amostras apresentaram AA comparável ao padrão hidroxitolueno butilado (BHT), o lipossoma de uva in natura demonstrou o maior IC50. Os teores de compostos fenólicos e flavonóides foram maiores nas amostras derivadas do resíduo, tanto no extrato quanto nos lipossomas. Na PCA permitiu prever a similaridade e a preservação das características químicas nos lipossomas obtidos. Os resultados mostraram o potencial de aplicação dos extratos de uva in natura e residual no desenvolvimento de sistemas lipossomados com atividades antioxidantes em promissores produtos bioativos.

Orientador: Fernando Rogério Pavan / Resumo: A Tuberculose é uma doença infecto contagiosa causada pelo agente etiológico Mycobacterium tuberculosis, sendo este a causa de 1,3 milhões de mortes ao redor do mundo no ano de 2018. O tratamento preconizado pela Organização Mundial da Saúde é eficaz para cepas sensíveis, porém os efeitos adversos dos fármacos levam muitos pacientes ao abandono da terapia e consequente surgimento de resistência micobacteriana. Dentro desse contexto e mediante o reduzido número de fármacos disponíveis para o tratamento se faz necessário o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas. Bacteriófagos, vírus que infectam bactérias, têm sido sugeridos como importantes agentes terapêuticos no combate a bactérias multirresistentes, os quais podem ser encapsulados em lipossoma objetivando a proteção contra a degradação pelo sistema imune. O objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil do micobacteriófago D29 livre e encapsulado em lipossoma frente a cepa padrão de M. tuberculosis (H37Rv). Os lipossomas apresentaram tamanho, PDI e valores de potencial zeta pelo DLS (Dynamic Light Scaterring). De acordo com imagens obtidas por microscopia de transmissão, foram classificados com vesículas unilamelares gigantes com uma eficiência de encapsulação fágica de 9,4 % ± 0,023. Para garantir mais de 50 % em viabilidade celular, com a linhagem MRC-5 e J774A.1, respectivamente o volume máximo de 80% e 60% das amostras (tampão de fago, micobacteriófago D29, micobacteriófago D29 encapsulado em lipossoma e lipos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química. / Made available in DSpace on 2013-07-16T00:43:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 214407.pdf: 1725207 bytes, checksum: c5d876102dcc4555b925b6ee7116acb2 (MD5) / A lipoperoxidação (LPO) induzida por espécies reativas de oxigênio (EROs) e de nitrogênio (ERNs), e o efeito antioxidante de compostos naturais foram estudados em lipossomas de diversas composições, que incluem misturas de ácido fosfatídico e fosfatidilcolina (AF:PC), e em microssomas. Os níveis de LPO foram obtidos por detecção espectrofotométrica de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico. O comportamento termodinâmico de lipossomas contendo AF:PC foi analisado por calorimetria exploratória diferencial. A distribuição lipossomal de AF:PC foi avaliada por ressonância magnética nuclear. Os níveis de LPO variaram em função das espécies reativas, antioxidantes e composição das membranas. Razões molares crescentes de AF:PC reduziram os níveis de LPO induzida pelas espécies reativas testadas, e os valores de DH nas membranas, sugerindo um ordenamento de suas cadeias apolares. Os ensaios de distribuição lipídica de AF:PC indicaram a viabilidade do uso de ânion ferrocianeto como reagente de deslocamento em membranas. Uma caracterização pioneira foi realizada sobre o efeito protetor de vitamina B6 contra a LPO induzida por ERNs em membranas. Os fatores determinantes para o favorecimento ou inibição da LPO induzida por EROs e ERNs, em diversas membranas, foram discutidos de forma a contribuir na prevenção e terapia de doenças associadas ao estresse oxidativo, como o câncer e AIDS.

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-11T14:29:38Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Talita Gomes Calaça Menezes.pdf: 1231976 bytes, checksum: 91cc807014e048a87337c8b9ec973630 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T14:29:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Talita Gomes Calaça Menezes.pdf: 1231976 bytes, checksum: 91cc807014e048a87337c8b9ec973630 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-03-17 / O surgimento e disseminação de bactérias multirresistentes consistem em relevantes problemas de saúde pública. Infecções ocasionadas por Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA) multirresistente podem apresentar elevada morbimortalidade. Considerando que a vancomicina consiste no fármaco referência da terapêutica de infecções por MRSA multirresistentes, ela deve ser alvo de estudos que visem a melhoria da sua eficácia. Nesse âmbito, moléculas de origem naturais como o ácido úsnico (AU) e a β-lapachona (β-lap) possuem ação antimicrobiana frente a S. aureus. Por outro lado, a encapsulação de fármacos em sistemas nanoestruturados apresenta diversas vantagens decorrentes da liberação controlada do fármaco, dentre as quais aumento da eficácia e diminuição de toxicidade. O objetivo deste estudo consistiu em formular e caracterizar lipossomas contendo vancomicina (VAN-lipo), avaliar a atividade antimicrobiana frente a isolados clínicos de MRSA e verificar o sinergismo com AU e β-lap. Os lipossomas contendo vancomicina foram obtidos pelo método modificado de desidratação-reidratação. Os ensaios de susceptibilidade microbiana foram realizados por microdiluição em caldo de acordo com o Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Para avaliar o sinergismo entre as moléculas livres e os lipossomas foram utilizados o método checkerboard e o teste epsilométrico modificado (E-test). Os VAN-lipo apresentaram tamanho de partícula de 136 ± 0,246 nm e eficiência de encapsulação de 36,15 %. Os resultados obtidos sugerem que a interação in vitro entre VAN e AU é do tipo aditiva (FICI = 0,515), porém, a encapsulação do AU em lipossomas (AU-lipo) acarretou em sinergismo com a VAN (FICI = 0,276). A interação entre VAN e β-lap foi sinérgica (FICI = 0,453) e a encapsulação da β-lap em lipossomas melhorou o nível da interação com VAN (FICI = 0,358). β-lap e AU também apresentaram interação do tipo sinérgica. Os ensaios de sinergismo empregando o método E-test reproduziram os resultados obtidos com o método checkerboard em cerca de 82% dos ensaios. O presente estudo demonstrou que a VAN combinada com AU-lipo ou com β-lap ou β-lap-lipo inibe sinergicamente isolados MRSA multirresistentes. Diante disto, conclui-se que a β-lap e o AU, assim como os lipossomas contendo estas moléculas, podem ser importantes promotores da melhoria da atividade antibacteriana da vancomicina, com potencial aplicação na terapêutica de infecções por MRSA multirresistentes.

Submitted by Eduarda Figueiredo (eduarda.ffigueiredo@ufpe.br) on 2015-03-13T15:17:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE_Isabella_Macário_PPGCB..pdf: 6388985 bytes, checksum: 6a3fd45291a73e75d7f24cad53932d31 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T15:17:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE_Isabella_Macário_PPGCB..pdf: 6388985 bytes, checksum: 6a3fd45291a73e75d7f24cad53932d31 (MD5) Previous issue date: 2012-09 / CNPq e PROPESQ / O presente estudo objetivou desenvolver e avaliar a atividade antimicrobiana e antiproliferativa de lipossomas convencionais e furtivos contendo β-lapachona (β-lap) ou complexos de inclusão β-lapachona:2-hidroxipropil-β-ciclodextrina (β-lap:HPβ-CD). Os lipossomas foram preparados através da técnica de hidratação do filme lipídico seguida de sonicação. A cinética de liberação in vitro foi realizada pelo método da diálise. A atividade antimicrobiana in vitro das formulações frente à Staphylococcus aureus resistente à meticilina/oxacilina (MRSA ATCC 33591), S. aureus sensível à meticilina/oxacilina (MSSA ATCC 29213), cepa hospitalar de S. aureus resistente à meticilina/oxacilina (MRSA), cepa comunitária de S. aureus resistente à meticilina/oxacilina (MRSA) e Cryptococcus neoformans foi determinada pelo método da microdiluição de acordo com o Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Ademais, a citotoxicidade dos lipossomas desenvolvidos foi avaliada frente a células de carcinoma de próstata (DU-145) utilizando o método do MTT, assim como as possíveis alterações celulares foram avaliadas através da microscopia confocal. Os lipossomas convencionais e furtivos contendo β-lap ou β-lap:HPβ-CD apresentaram tamanho médio de partículas variando de 88,7 ± 1,5 nm a 132,6 ± 3,3 nm, índice de polidispersão variando de 0,255 a 0,340 e eficiência de encapsulação variando de 97,4 ± 0,3 % a 99,2 ± 0,2 %. A cinética de liberação in vitro mostrou que as formulações neutras furtivas e as formulações convencionais contendo estearilamina encapsulando β-lap ou β-lap:HPβ-CD apresentaram um perfil de liberação semelhante, com efeitos burst em torno de 40% nas primeiras 4 h e velocidades de liberação em torno de 200 μg/h. Na atividade antimicrobiana evidenciou-se que a β-lap e β-lap:HPβ-CD apresentaram a mesma atividade com MIC variando de 1-2 mg/L e MBC variando de 1-16 mg/L frente às bactérias e MIC < 2 mg/L e MFC < 4 mg/L frente ao Cryptococcus neoformans. As formulações convencionais neutras mostraram-se inativas ou menos eficazes quando comparadas às demais formulações desenvolvidas. No estudo de citotoxicidade foi possível observar que a β-lap livre apresentou IC70 de 2,5 μM e os lipossomas apresentaram IC70 igual ou superior ao da molécula livre (2,5 μM, 3,3 μM ou 4,6 μM). A microscopia confocal revelou que a linhagem celular DU-145 exposta a β-lap apresentou alterações morfológicas como, por exemplo, figuras de mitose, condensação de cromatina, fragmentação nuclear, corpos apoptóticos e células gigantes. Neste contexto, a encapsulação de β-lap e complexo de inclusão β-lap:HPβ-CD em lipossomas pode futuramente permitir a utilização deste composto na terapia antibacteriana e antitumoral.

Submitted by Chaylane Marques (chaylane.marques@ufpe.br) on 2015-03-13T19:54:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 2012-Tese-IsabellaMacárioCavalcanti.pdf: 6443769 bytes, checksum: 35aa6520fbd61ba6ff2cc345144b62e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T19:54:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 2012-Tese-IsabellaMacárioCavalcanti.pdf: 6443769 bytes, checksum: 35aa6520fbd61ba6ff2cc345144b62e9 (MD5) Previous issue date: 2012-09 / CNPQ; PROPESQ - UFPE / O presente estudo objetivou desenvolver e avaliar a atividade antimicrobiana e antiproliferativa de lipossomas convencionais e furtivos contendo β-lapachona (β-lap) ou complexos de inclusão β-lapachona:2-hidroxipropil-β-ciclodextrina (β-lap:HPβ-CD). Os lipossomas foram preparados através da técnica de hidratação do filme lipídico seguida de sonicação. A cinética de liberação in vitro foi realizada pelo método da diálise. A atividade antimicrobiana in vitro das formulações frente à Staphylococcus aureus resistente à meticilina/oxacilina (MRSA ATCC 33591), S. aureus sensível à meticilina/oxacilina (MSSA ATCC 29213), cepa hospitalar de S. aureus resistente à meticilina/oxacilina (MRSA), cepa comunitária de S. aureus resistente à meticilina/oxacilina (MRSA) e Cryptococcus neoformans foi determinada pelo método da microdiluição de acordo com o Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Ademais, a citotoxicidade dos lipossomas desenvolvidos foi avaliada frente a células de carcinoma de próstata (DU-145) utilizando o método do MTT, assim como as possíveis alterações celulares foram avaliadas através da microscopia confocal. Os lipossomas convencionais e furtivos contendo β-lap ou β-lap:HPβ-CD apresentaram tamanho médio de partículas variando de 88,7 ± 1,5 nm a 132,6 ± 3,3 nm, índice de polidispersão variando de 0,255 a 0,340 e eficiência de encapsulação variando de 97,4 ± 0,3 % a 99,2 ± 0,2 %. A cinética de liberação in vitro mostrou que as formulações neutras furtivas e as formulações convencionais contendo estearilamina encapsulando β-lap ou β-lap:HPβ-CD apresentaram um perfil de liberação semelhante, com efeitos burst em torno de 40% nas primeiras 4 h e velocidades de liberação em torno de 200 μg/h. Na atividade antimicrobiana evidenciou-se que a β-lap e β-lap:HPβ-CD apresentaram a mesma atividade com MIC variando de 1-2 mg/L e MBC variando de 1-16 mg/L frente às bactérias e MIC < 2 mg/L e MFC < 4 mg/L frente ao Cryptococcus neoformans. As formulações convencionais neutras mostraram-se inativas ou menos eficazes quando comparadas às demais formulações desenvolvidas. No estudo de citotoxicidade foi possível observar que a β-lap livre apresentou IC70 de 2,5 μM e os lipossomas apresentaram IC70 igual ou superior ao da molécula livre (2,5 μM, 3,3 μM ou 4,6 μM). A microscopia confocal revelou que a linhagem celular DU-145 exposta a β-lap apresentou alterações morfológicas como, por exemplo, figuras de mitose, condensação de cromatina, fragmentação nuclear, corpos apoptóticos e células gigantes. Neste contexto, a encapsulação de β-lap e complexo de inclusão β-lap:HPβ-CD em lipossomas pode futuramente permitir a utilização deste composto na terapia antibacteriana e antitumoral.

Submitted by Luiz Felipe Barbosa (luiz.fbabreu2@ufpe.br) on 2015-04-17T14:37:07Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Isabella Macário.pdf: 3015806 bytes, checksum: 63e6ff18236b7e7305ce748227c373b9 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T14:37:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Isabella Macário.pdf: 3015806 bytes, checksum: 63e6ff18236b7e7305ce748227c373b9 (MD5) Previous issue date: 2013 / CNPq PROPESQ-UFPE / O presente estudo objetivou desenvolver e avaliar a atividade antimicrobiana e antiproliferativa de lipossomas convencionais e furtivos contendo β-lapachona (β-lap) ou complexos de inclusão β-lapachona:2-hidroxipropil-β-ciclodextrina (β-lap:HPβ-CD). Os lipossomas foram preparados através da técnica de hidratação do filme lipídico seguida de sonicação. A cinética de liberação in vitro foi realizada pelo método da diálise. A atividade antimicrobiana in vitro das formulações frente à Staphylococcus aureus resistente à meticilina/oxacilina (MRSA ATCC 33591), S. aureus sensível à meticilina/oxacilina (MSSA ATCC 29213), cepa hospitalar de S. aureus resistente à meticilina/oxacilina (MRSA), cepa comunitária de S. aureus resistente à meticilina/oxacilina (MRSA) e Cryptococcus neoformans foi determinada pelo método da microdiluição de acordo com o Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Ademais, a citotoxicidade dos lipossomas desenvolvidos foi avaliada frente a células de carcinoma de próstata (DU-145) utilizando o método do MTT, assim como as possíveis alterações celulares foram avaliadas através da microscopia confocal. Os lipossomas convencionais e furtivos contendo β-lap ou β-lap:HPβ-CD apresentaram tamanho médio de partículas variando de 88,7 ± 1,5 nm a 132,6 ± 3,3 nm, índice de polidispersão variando de 0,255 a 0,340 e eficiência de encapsulação variando de 97,4 ± 0,3 % a 99,2 ± 0,2 %. A cinética de liberação in vitro mostrou que as formulações neutras furtivas e as formulações convencionais contendo estearilamina encapsulando β-lap ou β-lap:HPβ-CD apresentaram um perfil de liberação semelhante, com efeitos burst em torno de 40% nas primeiras 4 h e velocidades de liberação em torno de 200 μg/h. Na atividade antimicrobiana evidenciou-se que a β-lap e β-lap:HPβ-CD apresentaram a mesma atividade com MIC variando de 1-2 mg/L e MBC variando de 1-16 mg/L frente às bactérias e MIC < 2 mg/L e MFC < 4 mg/L frente ao Cryptococcus neoformans. As formulações convencionais neutras mostraram-se inativas ou menos eficazes quando comparadas às demais formulações desenvolvidas. No estudo de citotoxicidade foi possível observar que a β-lap livre apresentou IC70 de 2,5 μM e os lipossomas apresentaram IC70 igual ou superior ao da molécula livre (2,5 μM, 3,3 μM ou 4,6 μM). A microscopia confocal revelou que a linhagem celular DU-145 exposta a β-lap apresentou alterações morfológicas como, por exemplo, figuras de mitose, condensação de cromatina, fragmentação nuclear, corpos apoptóticos e células gigantes. Neste contexto, a encapsulação de β-lap e complexo de inclusão β-lap:HPβ-CD em lipossomas pode futuramente permitir a utilização deste composto na terapia antibacteriana e antitumoral.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:51:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2772_1.pdf: 1233578 bytes, checksum: c5d72353d4447caaefbfcfee0bbe95be (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os derivados acridínicos têm despertado a atenção de vários pesquisadores por apresentarem um amplo espectro de atividades biológicas, como atividade antibacteriana, antimalárica, antitripanossômica, leishmanicida, antiviral e mais recentemente por sua atividade antitumoral. O LPSF/AC-04 é um derivado tiazacridínico e caracteriza-se por ser um pó amorfo, amarelo-esverdeado, de peso molecular 410 g/mol, com ponto de fusão igual a 199°C e uma baixa solubilidade em água, característica essa que dificulta sua utilização terapêutica. Sendo assim, a incorporação deste fármaco em sistemas de liberação controlada, tais como, os lipossomas, torna-se uma alternativa viável para sua utilização. O controle de qualidade de fármacos puros e em formas farmacêuticas é realizado por métodos oficiais ou validado. A espectrofotometria é uma técnica analítica bastante conveniente, muito utilizada em laboratórios de controle de qualidade, devido à sua simplicidade, baixo custo e larga disponibilidade. Assim, o presente estudo visou o desenvolvimento de um método analítico, para a quantificação do LPSF/AC-04 por espectrofotometria-UV, aplicado ao fármaco e dele nanoencapsulado em lipossomas. Inicialmente, um método espectrofotométrico UV para o doseamento do LPSF/AC-04 em lipossomas foi desenvolvido avaliando os seguintes parâmetros preconizados pelo ICH: linearidade, precisão, exatidão, robustez e limites de detecção e quantificação. O LPSF/AC-04 foi determinado em metanol a 250 nm, onde o coeficiente de absortividade (&#949;) encontrado foi 7,60 × 104 L.mol&#8722;1.cm&#8722;1. O método espectrofotométrico para determinação do LPSF/AC-04 em lipossomas foi linear na faixa de concentração de 0,3 a 2 &#956;g/mL Absorbância = 0,18068 x [LPSF/AC-04] (&#956;g/mL) + 0,00348 e o coeficiente de regressão encontrado foi (r2 = 0,9995). O método proposto foi sensível para os limites de detecção e quantificação foram de 0,047 e 0,143 &#956;g/mL, respectivamente. O método se mostrou preciso, já que todas as amostras analisadas apresentaram coeficiente de variação menor que 5 % e estatisticamente não houve diferença entre as concentrações teóricas e práticas. O método se apresentou robusto, sem diferenças estatisticamente significativas frente à variação do fabricante do solvente e da temperatura. Na exatidão foi possível observar a recuperação do fármaco que variou entre 99,4 ± 0,67 % a 100,5 ± 1,91% estando dentro dos limites recomendados. O teor e a eficiência de encapsulação do LPSF/AC-04 em lipossomas foi de 104,44 ± 1,56% e de 99,68 ± 0,24%, respectivamente. O método analítico proposto mostrou-se, portanto, simples, rápido, exato, preciso e de baixo custo podendo ser utilizado para análises de rotina do LPSF/AC-04 matéria prima e em formulações farmacêuticas, como por exemplo, os lipossomas

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:53:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5166_1.pdf: 1713007 bytes, checksum: 77d8ae84cbc92d3cb44120576648c8fa (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / Lipossomas são vesículas aquosas formadas por bicamadas de fosfolipídios e constituem excelentesformas farmacêuticas de liberação controlada de fármacos devido à sua flexibilidade estrutural em termos de tamanho, composição, fluidez da bicamada lipídica e capacidade para incorporar tanto compostos hidrofílicos quanto lipofílicos. As lectinas, proteínas de reconhecimento a carboidratos com capacidade para ligar-se a glicoconjugados de membranas biológicas, podem ser utilizadas como moléculas sinalizadoras na superfície de lipossomas tornando-os sítio-específicos (lipossomas lectina-conjugada). O objetivo desta tese foi desenvolver lipossomas lectina-conjugada e lipossomas convencionais para o direcionamento de fármacos anticancerígenos à células antitumorais. A doxorrubicina (DOX) e o ácido úsnico (AU), um antitumoral de origem liquênica, foram utilizados como fármacos modelos a serem nanoencapsulados em lipossomas. A lectina Concanavalina A (Con A) foi conjugada a lipossomas contendo DOX (Con A-lipossomas) para liberação sítio-específica do fármaco. Adicionalmente, o AU foi encapsulado em lipossomas convencionais. Con Alipossomas foram preparados por incubação da lectina modificada (SATA-Con A) com DOXlipossomas (DPPE-MBS lipossomas) previamente preparados. A atividade biológica da lectina foi monitorada antes e após conjugação aos lipossomas por ensaio de hemaglutinação. Lipossomas contendo AU foram preparados pelo método de hidratação do filme lipídico seguido de sonicação. As propriedades físico-químicas e a estabilidade dos lipossomas foram avaliadas. A citotoxicidade de DOX encapsulada em Con A-lipossomas e do AU lipossomal foi avaliada em termos de inibição da proliferação celular em linhagens humanas NCI-H292 e HEp-2 utilizando o método do MTT. A citotoxicidade dos fármacos encapsulados foi comparada com aquela dos fármacos nas suas formas livres em solução. Lipossomas sítioespecíficos contendo DOX (1 mg/ml), com superfície modificada pela Con A, foram obtidoscom tamanho de partículas de 172,6 ± 12,7 nm e com atividade hemaglutinante parcialmente preservada. A encapsulação de DOX em Con A-lipossomas promoveu uma inibição de aproximadamente 70% da proliferação das células HEp-2 nas concentrações testadas (0,63-5 mg/ml). Uma inibição de 50% da proliferação das células NCI-H292 foi observada para a concentração de 1,25 mg/ml (CI50), enquanto que a DOX livre apresentou uma CI50 de 5 mg/ml. DOX em solução foi capaz de inibir apenas 20% da proliferação das células HEp-2. Con A-lipossomas não carregados com fármaco não apresentaram citotoxicidade em nenhuma das células testadas. Lipossomas (42 &#956;mol/10&#956;l) contendo 1,5 mg/ml de AU foram obtidos e a formulação mais resistente permaneceu estável por mais de 100 dias em suspensão. A citotoxicidade do AU livre e encapsulado em células HEp-2 foi de 20 e 5 &#956;g/ml, respectivamente, e de 20 &#956;g/ml para ambas as formas livre e encapsulada testadas em células NCI-H292. A encapsulação de DOX em Con A-lipossomas levou a um melhoramento na penetração do fármaco nas células, e como conseqüência ao aumento da citotoxicidade, especialmente em células HEp-2. A nanoencapsulação de fármacos anticancerígenos em lipossomas convencionais ou sítio-específico promove um aumento na eficácia do fármaco constituindo, portanto, uma forma potencial de administração de tais fármacos