Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2015. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-05-07T16:22:11Z No. of bitstreams: 1 2015_MateusNunesDiogenes.pdf: 1103328 bytes, checksum: 8cd40e41b96f59fa3592a60611351199 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2015-05-12T15:14:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_MateusNunesDiogenes.pdf: 1103328 bytes, checksum: 8cd40e41b96f59fa3592a60611351199 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-12T15:14:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_MateusNunesDiogenes.pdf: 1103328 bytes, checksum: 8cd40e41b96f59fa3592a60611351199 (MD5) / O presente estudo visou avaliar o efeito do FGF10 durante a pré-maturação e/ou maturação in vitro (MIV) de ovócitos na produção in vitro de embriões bovinos. No primeiro experimento, os ovócitos foram maturados na presença ou não de FGF10. No segundo experimento, foi avaliado o efeito da suplementação de FGF10 durante a pré-maturação e/ou maturação, utilizando cinco grupos: T1: ovócitos maturados por 22h (controle); T2: ovócitos pré-maturados por 22h e maturados por 22h; T3: ovócitos pré-maturados por 22h e maturados por 22h com FGF10; T4: ovócitos pré-maturados por 22h com FGF10 e maturados por 22h; T5: pré-maturados por 22h com FGF10 e maturados por 22h com FGF10. Em ambos os experimentos foram avaliadas a maturação nuclear, a expansão das células do cumulus, a produção embrionária e a expressão dos genes: KRT8, PLAC8, CD9, PAG2, HSPB1 e MSH6 em embriões no D7 (experimento 1) ou D8 (experimento 2). Os dados de maturação nuclear e desenvolvimento embrionário foram analisados pelo teste do Qui-quadrado, e os da expansão das células do cumulus e expressão gênica por análise de variância, sendo P<0,05 considerado significativo. No primeiro experimento, a suplementação com FGF10 durante a MIV não afetou (P>0,05) nenhum dos parâmetros avaliados. No segundo experimento, após a maturação, a expansão em todos os tratamentos submetidos à pré-maturação, independente da presença de FGF10 (P<0,05), foi menor do que no grupo controle. A presença de FGF10 na pré-maturação/maturação não aumentou a quantidade de embriões sendo a taxa de blastocisto em D7 similar (P>0,05) entre T2 (43,7%), T3 (38,7%), T4 (39,6%) e T5 (47,3%). Entretanto, nos grupos T2 e T5 a taxa de blastocisto no D7 foi similar ao controle (53,4%). Todos os grupos apresentaram taxas de embriões eclodidos do D8 semelhantes. O nível de transcritos para o PLAC8 foi superior no grupo T4 quando comparado ao T1, os demais grupos foram iguais entre si. Já para o gene MSH6, somente foi detecta diferença no nível de transcritos entre os grupos T5 e T1, sendo inferior no T5. Conclui-se que a presença de FGF10 durante a MIV e/ou pré-MIV não tem efeito benéfico na produção e a qualidade dos embriões. Da mesma forma, a pré-maturação, independente da presença do FGF10, afeta a expansão das célullas do cumulus mas não tem efeito na produção embrionária. ________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This study aimed to evaluate the effect of FGF10 during pre-maturation and in vitro maturation (IVM) of bovine oocytes on in vitro embryo production (IVP). In the first experiment oocytes were matured in the presence or not of FGF10. In the second experiment, the effect of FGF10 during prematuration and/or maturation was evaluated using 5 experimental groups: T1: oocytes matured for 22h (control); T2: oocytes prematured for 22h and matured for 22h; T3: oocytes prematured for 22h and matured for 22h with FGF10; T4: oocytes prematured with FGF10 for 22h and matured for 22h; T5: oocytes prematured for 22h with FGF10 and matured for matured 22h with FGF10. In both experiments, nuclear maturation, cumulus cells expansion, embryo production and the relative expression of genes: KRT8, PLAC8, CD9, PAGE2, HSPB1 and MSH6 were evaluated. Data of nuclear maturation and embryo development were analyzed by chi-square test and those of cumulus cells expansion and gene expression by analysis of variance. P <0.05 was considered statistically significant. There was no effect of FGF10 supplementation during IVM on any of the parameters evaluated in the first experiment. On the second experiment after maturation a lower cumulus expansion was observed in all treatments submitted to prematuration, irrespective of FGF10 presence, than the control. The supplementation of prematuration or maturation medium with FGF10 did not cause an increase in embryo production on D7, being the blastocyst rate similar among T2 (43.7%), T3 (38.7%), T4 (39.6%) e T5 (47.3%). However, blastocyst rate was similar between T2, T5 and control (53, 4%). All groups had similar hatching rates on D8. Transcripts level for PLAC8 was higher on T4 compared to T1, and similar for the other groups. For MSH6 gene, differences in transcripts level were only observed between T5 and T1. It can be concluded that presence of FGF10 during IVM and/or prematuration have not affected embryo production or quality. Prematuration, regardless presence of FGF10, affected cumulus expansion but not embryo production.

Orientador : Roberto Rodrigues Paes / Tese (Doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação Fisica / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:47:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bergamo_VagnerRoberto_D.pdf: 3983267 bytes, checksum: 3ed4e3f85eeb12b69ca8db45b6560836 (MD5) Previous issue date: 2003 / Doutorado

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:04:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8959_1.pdf: 3211666 bytes, checksum: f74a515847685e5e6593e1aa3f8276e7 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 1998 / Neste trabalho foram investigadas, em ratos, as repercussões do tratamento com inibidor seletivo de serotonina (ISRS) sobre a ontogênese de reflexos, a maturação somática e sensório-motora e o consumo alimentar no animal adulto. Para isso, ratos Wistar machos foram divididos em grupos recebendo diariamente, do 1o ao 21o dia de vida os seguintes tratamentos s.c. Ingênuo (Ing; n=26), sem tratamento; Salina (Sal; n=24), NaCl a 0,9% (2ml/kg) e; citalopram (Cit) nas doses: 5 mg/kg (Cit5, n=10); 10 mg/kg (Cit10, n=10), ou 20 mg/kg (Cit20, n=26). Foram realizadas diariamente, do 1o ao 21o e, a cada 3 dias, do 24o ao 60o dia pós-natal, as seguintes avaliações murinométricas: peso corporal (PC), comprimento da cauda (CC), eixos do crânio látero-lateral e ântero-posterior (ELLC e EAPC). Registrou-se o dia de aparecimento das seguintes características físicas: abertura do pavilhão auditivo (APA), abertura do conduto auditivo (ACA), irrupção dos incisivos (III) e abertura dos olhos (AO). Foram avaliados diariamente os seguintes reflexos: preensão palmar (PP), aversão ao precipício (AP), geotaxia negativa (GN), resposta ao susto (RS), colocação pelas vibrissas (CV), aceleração (A). Aos 70-80 dias de idade, os animais foram submetidos, durante 7 dias, a estudo de consumo alimentar, através da avaliação de parâmetros, tais como: peso corporal absoluto (PCA), variação do peso absoluto e relativo (VPA; VPR), consumo alimentar absoluto e relativo (CAA; CAR), consumo hídrico absoluto e relativo (CHA; CHR), excreção fecal absoluta e relativa (EFA; EFR), excreção urinária absoluta e relativa (EUR; EUA) e a razão CHA/EUA. Após sacrifício (110-120 dias de idade), foi realizado estudo dos órgãos, obtendo-se os seguintes parâmetros de peso: do encéfalo, úmido absoluto e relativo (PEUA; PEUR), seco absoluto e relativo (PESA; PESR); do cerebelo, úmido absoluto e relativo (PCUA; PCUR), seco absoluto e relativo (PCSA; PCSR); do fígado, úmido absoluto e relativo (PFUA; PFSR), seco absoluto e relativo (PFSA; PFSR). Utilizou-se para a análise estatística, ANOVA seguido do teste de Tukey para dados paramétricos, Kruskal-Wallis seguido de Mann-Whitney para dados não paramétricos. Não houve diferença entre Ing e Sal em todos os parâmetros analisados; o grupo salina foi então escolhido como controle. Avaliações murinométricas Comparado ao Sal, durante o aleitamento, houve redução (p<0,01): do PC de Cit10, a partir do 15o dia, e de Cit20, a partir do 6o dia; do CC de Cit20, a partir do 9o dia; do ELLC de Cit10, a partir do 15o dia, e de Cit20, a partir do 9o dia; do EAPC de Cit20, a partir do 15o dia. Durante o período do 24o ao 60o dia pós-natal, quando comparados ao Sal, houve redução (p<0,01): do PC de Cit10, do 48o ao 60o dia, e de Cit20, do 24o ao 60o dia; do CC de Cit20 a partir do 24o dia; do ELLC de Cit10, do 24o ao 44o dia; e de Cit20 do 24o ao 60o; do EAPC de Cit20 do 34o ao 60o dia. Entretanto, o PC de Cit5 foi maior do que o do Sal do 45o ao 60o dia de vida. Maturação de características físicas Comparados ao Sal, houve retardo em: ACA em Cit5 e Cit20 (p<0,05) e; a III atrasou em Cit5 e Cit10 (p<0,05). Desenvolvimento sensório-motor Comparados a Sal houve retardo (p<0,01): de PP, RD, CV e A em todos os grupos tratados com Cit; de RS, no Cit5, Cit10 e Cit20; de AP no Cit20; de GN no Cit5, Cit10 e Cit20. Consumo alimentar Comparados ao grupo Sal houve redução (p<0,01): do PCA no Cit20; CAA no Cit5, Cit10 e Cit20; do CHA no cit10 e no Cit20; da EFA no Cit 10 e Cit20; da EUA em Cit20. Todavia, comparado ao Sal, houve aumento (p<0,01) do CHR e do CHA/EUA no Cit20. Não houve diferenças da VPA; da VPR, do CAR e da EFR de cada um dos grupos comparados ao Sal. Peso dos órgãos Comparados ao Sal, houve redução (p<0,01): do peso encefálico úmido absoluto(PEUA), do peso do encéfalo seco absoluto (PESA) e do peso do cerebelo úmido absoluto (PCUA) em Cit20. Entretanto, o peso do encéfalo seco relativo (PESR) e o peso do encéfalo úmido relativo (PEUR) foram maiores no Cit20 comparado a Sal. Quanto ao fígado, comparados ao grupo Sal demonstraram redução: do peso do fígado úmido absoluto (PFUA), o Cit10 e o Cit20; do peso do fígado seco absoluto (PFSA) o Cit10 e o Cit20. O tratamento crônico com ISRS, durante o aleitamento, retarda a ontogênese de reflexos e altera a maturação somática em ratos. Além disso, é observada também alteração da evolução ponderal até a idade adulta. Nesta fase seqüelas observadas no peso corporal e nos pesos de órgãos parecem também estar associadas à manipulação do sistema serotoninérgico. Entretanto, não se descarta aqui efeitos inespecíficos do ISRS empregado. Na dose adulta foram registradas alterações de alguns parâmetros do consumo alimentar. As alterações encontradas se manifestam de maneira distinta, na dependência da dose empregada. Isto sugere a participação de diferentes tipos de receptores serotoninérgicos. Estudos envolvendo manipulação farmacológica com agonistas ou antagonistas serotoninérgicos específicos ainda são necessários. Contudo, os resultados parecem confirmar o papel importante do sistema da 5-HT no desenvolvimento somático e sensório-motor e no padrão adulto do consumo alimentar

Cardiovascular diseases are responsible for almost one third of all global deaths yearly, and therefore are largely studied. Cardiomyocytes derived from human induced pluripotent stem cells (hiPSC-CM) have emerged as an exciting technology for cardiac disease modelling and personalised therapy. Nevertheless, issues concerning functional and molecular maturation are still faced. In addition to this, differentiation protocols generally yield a heterogeneous mixed population comprised of nodal, atrial and ventricular-like subtypes, being unsuitable for therapeutic purposes. Bradykinin (BK) is a vasoactive peptide which exerts important physiological roles in the cardiovascular system, having been previously described as important for cellular, keratinocyte and skeletal muscle differentiation. This project performed in cooperation with PluriCell Biotech, a startup specialized in the production and differentiation of hiPSC-CM, has sought (1) characterizing gene and protein expression of molecular markers of maturation and of subtype specification throughout of differentiation; (2) Assessing the electrical functionality of hiPSC-CM through the characterization of subtype-specific action potentials (APs) and (3) Investigating whether the progress of hiPSCCM maturation is regulated by BK through kinin-B2 receptors (B2R). Our results have validated the model that proposes a developmental-dependent switch between skeletal (ssTnI) and cardiac (cTnI) isoforms of troponin I as differentiation progresses, at least to some extent. Furthermore, prolonged time in culture has resulted in higher levels of expression of the ventricular marker MLC2v and in increased rates of ventricular-like action APs. Electrophysiological analysis of hiPSC-CM reveals a mixed population with AP morphologies correspondent to nodal, atrial and ventricular subtypes, all showing pronounced automaticity as well as other features of immature cardiomyocytes, such as low amplitude and depolarization velocity. Such findings are coherent with those from other groups who have attempted to differentiate mature native-like cardiac cells from pluripotent stem cells sources, without fully succeeding. After showing that differentiating hiPSC-CM express a functional and responsive B2R, the receptor was subjected to chronic activation with 10µM BK and 1µM BK or inhibition with 5µM Firazyr+BK. Even though B2R modulation has not interfered negatively with differentiation yields nor cell morphology, analysis of gene andprotein expression of ssTnI or cTnI and of the ventricular marker MLC2v, have revealed no significant results in comparison to untreated controls. This suggests that BK does not interfere on hiPSC-CM maturation nor subtype specification, although we cannot rule out that it could be leading to other unexplored effects. We recommend a closer look into which intracellular signalling pathways become active upon B2R stimulation in hiPSC-CM, in order to narrow down cellular processes for further investigation. / Doenças cardiovasculares são responsáveis por quase um terço de todas as mortes globais anualmente, e por isto o sistema cardiovascular é amplamente estudado. Cardiomiócitos derivados a partir de células-tronco pluripotentes induzidas humanas (hiPSCCM) emergiram como uma promissora tecnologia para modelagem de doenças cardíacas e terapia personalizada. No entanto, desafios acerca de sua maturação funcional e molecular ainda são enfrentados. Além disso, protocolos de diferenciação geralmente levam à obtenção de populações heterogêneas contendo células com fenótipos similares aos de cardiomiócitos nodais, atriais e ventriculares sendo, portanto, inapropriadas para fins terapêuticos. A bradicinina (BK) é um peptídio vasoativo que exerce importantes papeis fisiológicos no sistema cardiovascular, além de ter sido previamente descrita como importante para a diferenciação neuronal, de queratinócitos e de músculo esquelético. Este projeto foi realizado em colaboração com a empresa PluriCell Biotech, uma startup especializada na produção e diferenciação de hiPSC-CM, e buscou (1) caracterizar a expressão gênica e proteíca de marcadores moleculares de maturação e de especificação de subtipos cardíacos durante a diferenciação; (2) avaliar a funcionalidade elétrica de hiPSC-CM por meio da caracterização de seus potenciais de ação (PAs) e (3) Investigar se o progresso da diferenciação de hiPSCCM é regulado por bradicinina por meio do receptor B2 (B2R). Nossos resultados validaram o modelo que propõe um switch na expressão das isoformas funcionais de troponina I esquelética (ssTnI) e cardíaca (cTnI), durante o desenvolvimento e diferenciação celular, pelo menos parcialmente. Além disso, tempo prolongado em cultura resultou em maiores níveis de expressão do marcador ventricular MLC2v, assim como maiores frequências de PAs com morfologias similares a de cardiomiócitos ventriculares. Análise eletrofisiológica de hiPSCCM revelam a existência de uma população mista contendo PAs correspondentes aos subtipos nodais, atriais e ventriculares, assim como pronunciada automaticidade e outros atributos típicos de cardiomiócitos imaturos, como baixa amplitude e devagar velocidade de despolarização. Estes resultados são coerentes com os de outros grupos que ainda não foram totalmente bem-sucedidos em diferenciar células cardíacas maduras similares acardiomiócitos nativos a partir de células-troncos pluripotentes. Após mostrar que as hiPSCCM expressam receptores B2 funcionais e responsivos, submetemos o receptor a uma ativação crônica com BK 10µM e BK 1µM ou inibição crônica com Firazyr 5µM + BK. Apesar da modulação do B2R não ter interferido de forma negativa no rendimento da diferenciação ou na morfologia celular, análise de expressão gênica e proteica de ssTnI e cTnI e do marcador ventricular MLC2v não revelou resultados significativos em comparação aos controles não-tratados. Isto sugere que a BK não interfere na maturação e especificação de subtipos cardíacos em hiPSC-CM, apesar de não podermos ignorar o fato de que ela poderia estar desencadeando outros efeitos inexplorados. Nós recomendamos um estudo mais aprofundado acerca de quais vias de sinalização se tornam ativas após estimulação do receptor B2 em hiPSC-CM, com o objetivo de afunilar quais processos celulares poderiam ser investigados em uma próxima etapa deste estudo.

Cardiovascular diseases are responsible for almost one third of all global deaths yearly, and therefore are largely studied. Cardiomyocytes derived from human induced pluripotent stem cells (hiPSC-CM) have emerged as an exciting technology for cardiac disease modelling and personalised therapy. Nevertheless, issues concerning functional and molecular maturation are still faced. In addition to this, differentiation protocols generally yield a heterogeneous mixed population comprised of nodal, atrial and ventricular-like subtypes, being unsuitable for therapeutic purposes. Bradykinin (BK) is a vasoactive peptide which exerts important physiological roles in the cardiovascular system, having been previously described as important for cellular, keratinocyte and skeletal muscle differentiation. This project performed in cooperation with PluriCell Biotech, a startup specialized in the production and differentiation of hiPSC-CM, has sought (1) characterizing gene and protein expression of molecular markers of maturation and of subtype specification throughout of differentiation; (2) Assessing the electrical functionality of hiPSC-CM through the characterization of subtype-specific action potentials (APs) and (3) Investigating whether the progress of hiPSCCM maturation is regulated by BK through kinin-B2 receptors (B2R). Our results have validated the model that proposes a developmental-dependent switch between skeletal (ssTnI) and cardiac (cTnI) isoforms of troponin I as differentiation progresses, at least to some extent. Furthermore, prolonged time in culture has resulted in higher levels of expression of the ventricular marker MLC2v and in increased rates of ventricular-like action APs. Electrophysiological analysis of hiPSC-CM reveals a mixed population with AP morphologies correspondent to nodal, atrial and ventricular subtypes, all showing pronounced automaticity as well as other features of immature cardiomyocytes, such as low amplitude and depolarization velocity. Such findings are coherent with those from other groups who have attempted to differentiate mature native-like cardiac cells from pluripotent stem cells sources, without fully succeeding. After showing that differentiating hiPSC-CM express a functional and responsive B2R, the receptor was subjected to chronic activation with 10µM BK and 1µM BK or inhibition with 5µM Firazyr+BK. Even though B2R modulation has not interfered negatively with differentiation yields nor cell morphology, analysis of gene andprotein expression of ssTnI or cTnI and of the ventricular marker MLC2v, have revealed no significant results in comparison to untreated controls. This suggests that BK does not interfere on hiPSC-CM maturation nor subtype specification, although we cannot rule out that it could be leading to other unexplored effects. We recommend a closer look into which intracellular signalling pathways become active upon B2R stimulation in hiPSC-CM, in order to narrow down cellular processes for further investigation. / Doenças cardiovasculares são responsáveis por quase um terço de todas as mortes globais anualmente, e por isto o sistema cardiovascular é amplamente estudado. Cardiomiócitos derivados a partir de células-tronco pluripotentes induzidas humanas (hiPSCCM) emergiram como uma promissora tecnologia para modelagem de doenças cardíacas e terapia personalizada. No entanto, desafios acerca de sua maturação funcional e molecular ainda são enfrentados. Além disso, protocolos de diferenciação geralmente levam à obtenção de populações heterogêneas contendo células com fenótipos similares aos de cardiomiócitos nodais, atriais e ventriculares sendo, portanto, inapropriadas para fins terapêuticos. A bradicinina (BK) é um peptídio vasoativo que exerce importantes papeis fisiológicos no sistema cardiovascular, além de ter sido previamente descrita como importante para a diferenciação neuronal, de queratinócitos e de músculo esquelético. Este projeto foi realizado em colaboração com a empresa PluriCell Biotech, uma startup especializada na produção e diferenciação de hiPSC-CM, e buscou (1) caracterizar a expressão gênica e proteíca de marcadores moleculares de maturação e de especificação de subtipos cardíacos durante a diferenciação; (2) avaliar a funcionalidade elétrica de hiPSC-CM por meio da caracterização de seus potenciais de ação (PAs) e (3) Investigar se o progresso da diferenciação de hiPSCCM é regulado por bradicinina por meio do receptor B2 (B2R). Nossos resultados validaram o modelo que propõe um switch na expressão das isoformas funcionais de troponina I esquelética (ssTnI) e cardíaca (cTnI), durante o desenvolvimento e diferenciação celular, pelo menos parcialmente. Além disso, tempo prolongado em cultura resultou em maiores níveis de expressão do marcador ventricular MLC2v, assim como maiores frequências de PAs com morfologias similares a de cardiomiócitos ventriculares. Análise eletrofisiológica de hiPSCCM revelam a existência de uma população mista contendo PAs correspondentes aos subtipos nodais, atriais e ventriculares, assim como pronunciada automaticidade e outros atributos típicos de cardiomiócitos imaturos, como baixa amplitude e devagar velocidade de despolarização. Estes resultados são coerentes com os de outros grupos que ainda não foram totalmente bem-sucedidos em diferenciar células cardíacas maduras similares acardiomiócitos nativos a partir de células-troncos pluripotentes. Após mostrar que as hiPSCCM expressam receptores B2 funcionais e responsivos, submetemos o receptor a uma ativação crônica com BK 10µM e BK 1µM ou inibição crônica com Firazyr 5µM + BK. 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Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-06-20Bitstream added on 2014-06-13T18:48:47Z : No. of bitstreams: 1 leite_ghp_me_botfca.pdf: 653749 bytes, checksum: d0d894254b462b26f17369f46012f018 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O projeto de pesquisa teve por objetivo avaliar as alterações fisiológicas na cana-de-açúcar decorrente da aplicação de maturadores químicos com diferentes mecanismos de ação e os reflexos na produtividade e qualidade tecnológica. Dessa forma foram instalados e conduzidos dois experimentos em cana soca nas Fazendas São Joaquim e Bosque, situadas no município de Igaraçú do Tietê, Estado de São Paulo, pertencentes ao Grupo COSAN - Unidade Barra (Usina da Barra). O delineamento experimental utilizado foi o em blocos casualizados com cinco repetições. No experimento 1 (Fazenda São Joaquim) utilizou-se a variedade de cana-de-açúcar RB855453 e no Experimento 2 (Fazenda Bosque) a variedade SP80-3280. Os tratamentos consistiram na aplicação de sete maturadores químicos (KNO3 (p.c. Krista Kana), Etil-trinexapac (p.c. Moddus), Sulfometuron metil (p.c. Curavial), Etefon (p.c. Ethrel), KNO3 + boro (p.c. Krista Kana Plus), Glifosato (p.c. Roundup) e Compostos de radicais carboxílicos orgânicos + Glifosato (p.c. MTD + Roundup)) e uma testemunha, maturação natural. As doses empregadas foram, respectivamente: 3 kg p.c. ha-1, 0,8 L p.c. ha-1, 20 g p.c. ha-1, 2 L p.c. ha-1, 3,0 kg p.c. ha-1, 0,4 L p.c. ha-1 e 1,0 L p.c. ha-1 + 0,15 L p.c. ha-1. A aplicação dos maturadores ocorreu nos meses de março (Experimento 1) e maio (Experimento 2) de 2004, utilizando-se equipamento costal pressurizado (CO2). As parcelas foram constituídas de 8 linhas de 10m de comprimento com espaçamento de 1,5m. Foram avaliados os seguintes parâmetros bioquímicos, biométricos e tecnológicos: atividade das enzimas invertases ácida solúvel e neutra em caldo de cana; altura de plantas, diâmetro dos colmos, número de colmos, rebrota, florescimento, chochamento, brotação lateral, produtividade de colmos e açúcar; pH, acidez, pol, pureza... / The purpose of research was to evaluate physiological alterations in sugarcane due to the application of chemical compounds with different actions and its reflects in the productivity and technological quality. Two experiments were carried out in ratoon cane in São Joaquim Farm and Bosque Farm, in Igaraçú do Tietê, São Paulo State, Brazil, belonging to Grupo COSAN - Unidade Barra (Usina da Barra). The experimental design used was random blocks with five repetitions. In experiment one (São Joaquim Farm) sigarcane RB855453 was used, and in experiment two (Bosque Farm) sugarcane SP80-3280. The treatments consisted of seven chemical compounds (potassium nitrate (trademark Krista Kana), Ethyl-trinexapac (trademark Moddus), Sulfometuron methil (trademark Curavial), Ethephon (trademark Ethrel), potassium nitrate + boron (trademark Krista Kana Plus), Glyphosate (trademark Roundup) and compounds of organic carboxilic radicals + Glyphosate (trademark MTD + Roundup)), and one control. The doses were, respectively: 3.0 kg ha-1 Potassium nitrate, 0.8 L ha-1 Ethyl-trinexapac, 20 g ha-1 Sulfometuron methil, 2.0 L ha-1 Ethephon, 3.0 kg ha-1 KNO3 + Boro, 0.4 L ha-1 Glyphosate, 1.0 L ha-1 Comp. carboxílicos + 0.15 ha-1 Glyphosate. The applications of chemicals were performed in March (Experiment one) and in May (Experiment two) in 2004, with constant spraying pressure... (Complete abstract, click electronic address below)

Orientador: Maurício Dutra Zanotto / Coorietador: Edvaldo Aparecido Amaral da Silva / Banca: Sergio Gonçalves Dutra / Banca: Pedro Bento da Silva / Banca: Marcelo de Almeida Silva / Banca: João Teixeira Whitaker / Resumo: O cártamo é uma planta oleaginosa cultivada em vários países do mundo devido ao grande uso de diferentes partes da planta, principalmente na produção de óleo de ótima qualidade para consumo humano. Entretanto, há carências de informações sobre o manejo da cultura e ao sistema de produção de sementes. Neste contexto, apesar de haver crescente interesse pela a cultura devido a sua rusticidade e para produção de biodiesel, as pesquisas sobre maturação de sementes ainda são escassas. Portanto, objetivou-se avaliar o ponto ideal de colheita de sementes e potencial produtivo em três acessos de cártamo colhidas em diferentes estádios de maturação. Os experimentos foram conduzidos na Fazenda Experimental Lageado, pertencente à Faculdade de Ciências Agronômicas - UNESP, localizada no município de Botucatu - SP. Foram utilizadas sementes de três acessos de cártamo (2106, 7329 e S-325) obtidos junto ao Instituto Matogrossense do Algodão (IMA-MT). Os experimentos tiveram início em Abril de 2016 e 2017, sendo que nos ensaios foi adotado delineamento experimental em blocos casualizados, com seis repetições para o primeiro experimento e sete para o segundo. Para a caracterização dos estádios reprodutivos, a etiquetagem foi realizada quando 50% das plantas da parcela estavam no estádio de florescimento pleno, assim as colheitas dos capítulos, em intervalos de quatro dias após a primeira colheita, foram iniciadas com 16 dias após o florescimento (DAF) e finalizadas com 52 DAF quando os capítu... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Safflower is an oleaginous plant cultivated in several countries of the world due to its great use of different parts of the plant, mainly in the oil production of great quality for human consumption. However, there is a lack of informations about crop management and the seed production system. In this context, despite there is growing interest for the crop, due to its rusticity and for biodiesel production, researches on seed maturation are still scarce. The aim of this study was to evaluate the ideal seed harvesting point and productive potential in three accessions of safflower harvested at different maturation stages. The experiments were conducted at the Lageado Experimental Farm, belonging to the Faculty of Agronomic Sciences - UNESP, located in the city of Botucatu - SP. Seeds of three safflower accessions (2106, 7329 and S-325) were used, obtained from the Instituto Matogrossense do Algodão (IMA-MT). The experiments started in April 2016 and 2017, and for the assays was adopted a randomized block experimental design, with six replicates for the first experiment and seven for the second. For the characterization of the reproductive stages, the labeling was performed when 50% of the plants in the plot were in the full flowering stage, so the chapters harvesting happened at intervals of four days after the first harvest, starting with 16 days after flowering (DAF) and finished with 52 DAF when the chapters were completely senesced, totalizing ten harvests. The water content, dry and fresh seed mass, first germination count and percentage of germination were determined. In the second experiment, at the end of the crop cycle, the production components and seed and oil productivity were evaluated. The water content of the seeds starts high and with the progress of the stages of maturation, a gradual decrease occurs in both accessions. The access 2106 obtained the maximum germination at ... / Doutor

Resumo: Este estudo visou avaliar e comparar a eficiência e reversibilidade da inibição meiótica promovida pela roscovitina e ciclohexemida nos COCs de ovinos cultivados in vitro, assim como analisar o efeitos desses inibidores da meiose sobre a ultraestrutura dos COCs e expansão das células do cumulus. Para isto, COCs grau 1 e 2 recuperados de ovários de ovelhas, obtidos em frigoríficos, foram cultivados, por 24 horas a 38,5ºC e atmosfera com 5% de CO2, em meio de maturação constituído por TCM 199 suplementado com 0,1UI/mL de FSH; 0,1UI/mL de LH; 0,3mM de piruvato; 75µg/mL de penicilina/estreptomicina; 10% SFB e 100µM/mL de cisteamina (Grupo Controle) acrescido de 100μM de roscovitina ou 1μg/mL de ciclohexemida (Grupos Tratamentos). Para retomada e progressão da maturação nuclear, os COCs foram cultivados por mais 22 horas em meio de maturação livre de inibidores da meiose, nas mesmas condições acima descritas. Após 24 e 46 horas de cultivo in vitro, os COCs foram avaliados quanto à expansão das células cumulus em estereomicroscópio, quanto à maturação nuclear em microscópio de fluorescência e quanto à maturação citoplasmática, em microscópio eletrônico de transmissão. Foi constatado adequado bloqueio meiótico em 53,07% e 89,67% dos COCs tratados com roscovitina e ciclohexemida, respectivamente. Em ambos os tratamentos, o bloqueio meiótico foi reversível, com aproximadamente 60% dos oócitos em MII ao final de 46 horas de cultivo in vitro. No entanto, o tratamento com roscovitina inibiu de maneira irreversível a expansão do cumulus em aproximadamente 90% dos COCs e também afetou a ultraestrutura oocitária. Em contrapartida, no tratamento com ciclohexemida, 84,23% dos COCs apresentaram expansão total do cumulus ao final de 46 horas de cultivo in vitro, e houve adequada progressão da maturação citoplasmática, o que denota que a ciclohexemida confirmou a hipótese proposta no presente estudo / Abstract: This study aimed to evaluate and compare the efficiency and reversibility of meiotic inhibition promoted bv roscovitine and cycloheximide in ovine COCs in vitro cultured, as well as, to assess the effects of these inhibitors on the ultrastructure of COCs and on the cumulus cells expansion. To this, grades I and II COCs recovered from ovines ovaries, obtained from slaughterhouse, were cultured, for 24 hours at 38.5ºC in a 5% CO2 humidified air atmosphere, in a specific maturation medium consisting of TCM 199 supplemented with 0,1UI/mL FSH, 0,1UI/mL LH, 1µg/mL estradiol, 0,3mM sodium pyruvate, 75µg/mL penicillin/ streptomycin, 10% FBS and 100µM/mL cysteamine (Control Group) plus 100 μM roscovitine or 1μg/ml cycloheximide (Treatment Groups). For the resumption and progression of nuclear maturation, COCs were cultured for another 22 hours in maturation medium free of meiosis inhibitors in the same conditions (as described before). After 24 and 46 hours of in vitro culture, COCs were evaluated according to cumulus cells expansion under stereomicroscope, to nuclear maturation under fluorescence microscope and to cytoplasmic maturation under electronic transmission microscope. There was adequate meiotic arrest in 53,07% and 89,67% of COCs treated with roscovitine and cycloheximide, respectively. In both treatments, the meiotic arrest was reversible, with approximately 60% MII oocytes at the end of 46 hours of in vitro culture. However, treatment with roscovitine irreversibly inhibited the cumulus expansion by approximately 90% of COCs and also affected the ultrastructure of COC. In contrast, in the treatment with cycloheximide, 84,23% of COCs showed total cumulus expansion at the end of 46 hours of in vitro culture, and there was adequate progression of cytoplasmic maturation, which indicates that the cycloheximide confirmed the hypothesis proposed in this study / Orientador: Sony Dimas Bicudo / Coorientador: Fernanda da Cruz Landim e Alvarenga / Banca: Maria Denise Lopes / Banca: Yeda Fumie Watanabe / Mestre

Orientador: Marcelo de Almeida Silva / Banca: Caio Antonio Carbonari / Banca: Carlos Gilberto Raetano / Banca: Pedro Jacob Christoffoleti / Banca: Henrique Coutinho Junqueira Franco / Resumo: A cana-de-açúcar é uma cultura de grande importância econômica no Brasil, tanto pela produção de açúcar e etanol quanto pela produção de diversos subprodutos. Nas diferentes fases fenológicas da cultura, a fase de maturação é de alta importância em variedades de maturação precoce no início da safra, onde a cultura depende das condições climáticas, podendo, em condições desfavoráveis, proporcionar baixo teor de açúcar, acarretando em prejuízos quantitativos e qualitativos da matéria-prima. Deste modo, o uso de maturadores torna-se estratégia fundamental de manejo para atingir rendimentos satisfatórios. No presente estudo, objetivou-se avaliar a eficácia de maturadores na qualidade tecnológica, bioenergética, enzimática e fisiológica, além dos efeitos residuais na planta e soqueira. O estudo foi realizado com a variedade RB966928 (precoce), em cana-planta (2014/2015) e cana-soca (2015/2016), em Igaraçu do Tietê-SP. Os tratamentos foram os seguintes: glifosato, nas doses de 0,35; 0,45; 0,50 e 1,00 L ha-1 de produto comercial (PC) (0,126; 0,162; 0,240 e 0,480 kg de equivalente ácido (ea), respectivamente); trinexapaque-etílico, nas doses de 0,60; 0,80; 1,00 e 1,20 L ha-1 de PC, equivalente a 0,150; 0,200; 0,250 e 0,300 L i.a., respectivamente; sulfometurom-metílico, na dose de 0,02 kg ha-1 de PC ou 0,015 kg de i.a.; e testemunha sem aplicação de maturadores. Os tratamentos foram aplicados 60, 45, 30 e 15 dias antes da colheita (DAC), no período de março a maio (safra 2014/2015). ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Sugarcane is a crop of great economic importance in Brazil, both for the production of sugar and ethanol and for the production of various by-products. In the different phenological stages of the crop, the maturation stage is of high importance in early maturing varieties at the beginning of the harvest, where the crop depends on the climatic conditions, and can under favorable conditions, provide low sugar content, leading to quantitative losses and quality of the raw material. In this way, the use of ripeners becomes a fundamental management strategy to achieve satisfactory yields. In the present study, the objective of this study was to evaluate the efficacy of ripeners in the technological, bioenergetic, enzymatic and physiological quality, as well as the residual effects on plant and ratoon. The study was carried out with the variety RB966928 (early), in sugarcane cane-plant (2014/2015) and sugarcane ratoon-cane (2015/2016), in Igaraçu do Tietê-SP. Treatments were as follows: glyphosate at the doses of 0.35; 0.45; 0.50 and 1.00 L ha-1 of commercial product (PC) (0.126, 0.162, 0.240 and 0.480 kg of acid equivalent (ea), respectively); trinexapac-ethyl, at doses of 0.60; 0.80; 1.00 and 1.20 L ha-1 of PC, equivalent to 0.150; 0.200; 0.250 and 0.300 L i.a., respectively; sulfometurom-methyl, at a dose of 0.02 kg ha-1 PC or 0.015 kg a.i. and control without application of maturators. The treatments were applied at 60, 45, 30 and 15 days before harvest (DBH), from March to May (harvest 2014/2015). The pre-harvest results allowed us to conclude that, regardless of the ripener and the dose, all of them altered the quality of the raw material, where the higher DBH provided greater accumulation of sucrose. Glyphosate increased the sucrose content as the dose increased, impairing stem yield (TCH), pol (TPH) and sugar per ha (TAH) in sugarcane. Glyphosate at 0.35 L ha-1 did not impair TCH by DBH, and increased TPH and TAH at 45 DBH. However, ... / Doutor

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-20T14:24:52Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 19081875 bytes, checksum: 43d1d213dd735f8db041a89d34aa2613 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-20T14:24:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 19081875 bytes, checksum: 43d1d213dd735f8db041a89d34aa2613 (MD5) Previous issue date: 1992-02-19 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O crescimento do cultivar de milho BR 201, nas densidades de plantio de 40.000, 60.000 e 80.000 plantas/ha, foi avaliado por técnicas de análise de crescimento, com base em dados como altura da planta, peso seco, índice de área foliar, taxa de crescimento relativo, razão de área foliar, taxa de crescimento da cultura e taxa de assimilação líquida. O número de dias, após a emergência, exigido pelo cultivar BR 201 para atingir a maturação fisiológica variou de 129 dias na parcela com 40.000 plantas/ha a 141 dias na parcela com 80.000 plantas/ha. As exigências de graus-dias para esse cultivar completar seu ciclo variaram de 1.745 na parcela com 40.000 plantas/ha a 1.895 na parcela com 80.000 plantas/ha. A altura das plantas despendoadas variou com a densidade de parcelas com 80.000 e 40.000 plantas/ha, respectivamente. Os valores máximos de peso seco total, em ordem decrescente de densidade de plantio, foram 2,27, 2,03 e 1,57 kgm^-2, e os de índice de área foliar, em ordem decrescente de densidade de plantio, foram 6,7, 5,3 e 4,3. 0 tempo de ocorrência dos valores máximos de índice de área foliar também variou com a densidade de plantio, isto é, 77, 84 e 83 dias após a emergência, em ordem decrescente de densidade de plantio. As taxas de crescimento relativo, taxas de crescimento da cultura e taxas de assimilação líquida foram, em média, superiores na parcela com maior densidade de plantio. A caracterização do regime de radiação na cultura foi estabelecido com base nas medições da radiação solar global e radiação fotossinteticamente ativa, medidas acima da cultura e em três níveis do dossel vegetativo. Médias diárias de albedo para cada densidade de plantio foram obtidas e determinada a relação de dependência entre o albedo e o ângulo de elevação solar. Os valores médios diários de albedo, em ordem decrescente de densidade de Plantio, foram 0,23, 0,82 e 0,21. A influência da radiação solar sobre o crescimento do cultivar BR201 foi baseada na variação do coeficiente de extinção da radiação solar global e da radiação fotossinteticamente ativa, em Função do índice de área foliar. A maior atenuação da radiação fotossinteticamente ativa ocorreu na parcela com maior densidade de plantio.