A maturação in vitro (MIV) de oócitos é uma técnica de Reprodução Assistida (RA) que apresenta inúmeras vantagens e aplicabilidades. No entanto, a qualidade dos gametas imaturos que são destinados a ela é bastante divergente, tornando-se necessário o desenvolvimento de técnicas que auxiliem na seleção dos gametas competentes, ou seja, aptos à MIV. A partir do conhecimento de que oócitos em fase de crescimento apresentam alta atividade específica da enzima glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH), e que oócitos que finalizaram seu crescimento apresentam baixa atividade específica dessa enzima, foi proposta a coloração dos gametas com o corante Azul Cresil Brilhante (BCB) como método de seleção dos oócitos competentes. Esse corante é capaz de ser metabolizado pela G6PDH, resultando na coloração dos gametas capacitados (classificados como BCB positivo), mas não dos gametas que ainda estão em fase de crescimento, que permanecem incolores e são classificados como BCB negativo. Em animais, foi demonstrado que essa técnica permite selecionar melhor os gametas e, consequentemente, aumentar não só as taxas de maturação oocitária nuclear e citoplasmática, como também as taxas de fertilização, de formação de blastocisto e de nascidos vivos. No entanto, apenas modelos animais foram utilizados até o presente momento. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência e a segurança da exposição de gametas humanos ao BCB como método de seleção de gametas competentes antes da MIV. Para isso, três diferentes perfis de pacientes tiveram seus oócitos imaturos incluídos no estudo: 6 pacientes cuja ovulação foi induzida e gametas imaturos foram captados (17 oócitos); 3 pacientes ooforectomizadas (20 oócitos recuperados); e 32 gestantes cujos oócitos foram captados durante a cesareana (92 oócitos recuperados). Os oócitos imaturos foram divididos em dois grupos: controle (colocado imediatamente para MIV) e tratado – exposto a 26 μM de BCB por 60 minutos. Após coloração, de acordo com a coloração do citoplasma, o grupo tratado foi classificado em BCB positivo ou negativo e destinado à MIV. Após 24 e 48 horas de MIV, foi avaliado o grau de maturação nuclear. A taxa de MIV dos oócitos recuperados de pacientes estimuladas e ooforectomizadas foi igual entre os grupos após 24 e 48 horas. No entanto, a taxa de MIV foi significativamente superior no grupo BCB positivo quando comparado com o grupo BCB negativo, tanto para os oócitos de todas as pacientes (P = 0,024 e P = 0,015) como quando os oócitos das gestantes (P = 0,004 e P = 0,032) foram avaliados separadamente, após 24 e 48 horas de MIV, respectivamente. O grupo controle foi similar ao grupo BCB positivo. A taxa de retomada de meiose (ausência de vesícula germinativa) após 24 horas foi igual entre os grupos, independente da fonte de recuperação dos gametas. Contudo, ao avaliar todos os gametas após 48 horas de MIV, a taxa de retomada de meiose foi superior no grupo BCB positivo, quando comparado com os demais grupos (P = 0,035). Quando os oócitos foram avaliados em conjunto, o grupo BCB positivo apresentou as menores taxas de degeneração (P = 0,002). Tendo em vista os resultados obtidos, podemos concluir que o BCB pode ser um bom marcador na seleção de oócitos humanos competentes e não é tóxico para o gameta humano. / The in vitro maturation (IVM) is an Assisted Reproduction Technique (ART) that presents many advantages. However, the quality of immature oocytes destined to IVM is very divergent. That’s why pre-selection procedures of developmentally competent oocytes are important. Growing oocytes synthesize glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH), but this enzyme is inactivated in oocytes that have completed their growth phase. Once Brilliant Cresyl Blue (BCB) can be reduced by G6PDH, it is suggested that BCB staining can select fully grown oocytes, when exposed to BCB – the cytoplasm of these eggs will appear blue, being classified as BCB positive, whereas oocytes still in growth phase will not be stained (cytoplasm will appear colourless, being classified as BCB negative). It has been already demonstrated that this selection can improve not only nuclear and cytoplasmic oocyte maturation, but also fertilization and blastocyst rates. However, only animal models were utilized until the present. Consequently, the aim of the experiment was to evaluate the efficiency and safety of BCB staining as a selection of developmentally competent immature human oocytes before IVM. Three kinds of patients were included in the study: 6 hormonal stimulated patients with immature oocytes at retrieval (17 oocytes); 3 ooforectomized patients (20 oocytes recovered); and 32 pregnant patients during cesarean section (92 oocytes recovered). Immature oocytes were divided into groups: control (disposed directly to IVM) and treated - exposed to BCB 26μM during 60 minutes. After staining, treated group was classified as cytoplasm coloration, BCB positive or negative, and then disposed to IVM. After 24 and 48 hours of IVM, nuclear status was checked. The IVM rate of immature oocytes recovered from stimulated and ooforectomized patients was equal among groups either after 24 or 48 hours of IVM. Nevertheless, IVM was higher in BCB positive compared to BCB negative after 24 and 48 hours of IVM analyzing oocytes recovered from all patients (P = 0.024 and P = 0.015), and from cesarean patients (P = 0.004 and P = 0.032). The control group was equal to BCB positive. The meiosis resumption rate (absence of germinal vesicle) after 24 hours of IVM was equal among groups, but higher in BCB positive compared to other groups after 48 hours when all gametes were analyzed jointly (P = 0.035). Degeneration rate was lower in BCB positive compared to their counterparts when oocytes were analyzed jointly (P = 0.002). In conclusion, BCB test can be a good marker in pre-selection procedures of developmentally competent human oocytes and, apparently, it is not toxic to the gamete.

Orientador: Marcelo de Almeida Silva / Banca: Dirceu Maximino Fernandes / Banca: Paulo Alexandre Monteiro de Figueiredo / Resumo: Com a finalidade de melhorar a qualidade da matéria-prima da cana-de-açúcar é recomendado o uso de produtos químicos como maturadores, os quais podem acelerar o processo de maturação e inibir o florescimento. Com a busca de uma agricultura mais sustentável, ocorreu uma mudança na prática da colheita, passando de colheita com queima prévia da cana-de-açúcar para colheita sem queima. Devido a essa mudança, houve aumento nas quantidades de palha e de ponteiro da canade-açúcar deixadas na superfície do solo, as quais podem trazer benefícios para o ecossistema, destacando-se a reciclagem dos nutrientes. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a aplicação de diferentes produtos químicos como maturadores e seus efeitos na composição nutricional em diferentes porções da parte aérea remanescentes da colheita. A variedade utilizada foi a RB966928, e o delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados com quatro repetições. Os tratamentos foram constituídos de testemunha, dose de 0,5 L ha-1 de glifosato, 0,02 kg ha-1 de sulfometurom-metílico e 0,80 L ha-1 de trinexapaque-etílico. As amostras foram separadas em folha +1, copa foliar e ponteiro, sendo realizada a análise química para se determinar os teores dos nutrientes. As variáveis nutricionais foram avaliadas em função do tempo, aos 0, 15, 30, 45 e 60 dias após a aplicação dos tratamentos até a colheita. Tanto para os macro quanto para os micronutrientes o trinexapaque-etílico manteve o teor da maioria dos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In order to improve the quality of the raw material of sugarcane, it is recommended to use chemical products as ripeners, which can accelerate the ripeness process and inhibit flowering. With the search for a more sustainable agriculture, a change occurred in the practice of the harvest, passing from harvest with previous burning of the sugarcane to harvest without burning. Due to this change, there was an increase in the amount of sugarcane straw and pointer left on the soil surface, which can bring benefits to the ecosystem, with emphasis on recycling of nutrients. The objective of this work was to evaluate the application of different chemical products as ripeners and their effects on nutritional composition in different portions of the remaining shoots of the harvest. The variety used was RB966928, and the experimental design was a randomized block with four replicates. The treatments consisted of control, dose of 0.5 L ha-1 glyphosate, 0.02 kg ha-1 of sulfometuron-methyl and 0.80 L ha-1 of trinexapac-ethyl. The samples were separated in leaf +1, leaf canopy and pointer, being carried out the chemical analysis to determine the contents of the nutrients. The nutritional variables were evaluated as a function of time after application of the treatments until harvest at 0, 15, 30, 45 and 60 days. For both macro and micronutrients, trinexapac-ethyl kept the content of most nutrients close or even higher than the control. In general, the best performance was trinexapac-ethyl, followed by sulfometuron-methyl and glyphosate, in the analyzes of leaf +1. In relation to leaf canopy and pointer, treatments with ripeners altered the nutritional composition in the evaluated components, in which it is possible to observe values significantly higher in the leaf canopy than in the pointer. The use of trinexapac-ethyl is indicated for the maintenance of macronutrient contents, and in some cases glyphosate can be used. However... / Mestre

Objetivou-se avaliar a influência da condição sexual sobre o desempenho, características de carcaça e qualidade da carne de bovinos Angus x Nelore, terminados em confinamento. Foram utilizados 176 bovinos, com idade média de 20 meses, pertencentes ao Programa Brasileiro de Carne Angus Certificada, divididos em quatro condições sexuais (CS): 32 machos não castrados (NC), 48 machos castrados cirurgicamente (CC), 48 machos imunocastrados (IM) e 48 fêmeas (F). Para a imunocastração dos bovinos, foram utilizadas três doses de uma vacina anti-GnRH. Os animais foram confinados durante 190 dias, com a mesma dieta, composta de 80% de concentrado e 20% de volumoso na matéria seca. Ao final deste período, os bovinos foram abatidos. Durante o abate, foi calculado o rendimento de carcaça quente (RCQ) e avaliado o pH. Na desossa, foi avaliada no m. Longissimus a área de olho de lombo (AOL), espessura de gordura subcutânea (EGS) entre a 12ª e 13ª costelas, marmorização, cor e pH. Foram coletadas amostras de 2,54 cm de espessura do m. Longissimus, embaladas a vácuo e maturadas por zero (sem maturação), 7 e 14 dias, a 2°C para análises de maciez objetiva (FC) e subjetiva, perdas por cocção (PPC), teor de extrato etéreo (EE) e perfil de ácidos graxos. Utilizou-se o procedimento MIXED do programa SAS® e a significância foi declarada quando P ≤ 0,05. Os machos NC apresentaram maior peso vivo final, ganho de peso médio diário, AOL e maiores valores de pH em relação às demais condições sexuais (P < 0,01). Para PCQ, os machos NC e IM apresentaram valores mais elevados do que machos CC e fêmeas (P < 0,01). Por outro lado, as fêmeas apresentaram maior EGS em relação às demais categorias (P < 0,01). O escore de marmorização foi maior na carne das fêmeas e machos CC do que dos machos NC e IM (P < 0,01), no entanto, a carne dos machos CC apresentou maior escore de gordura intramuscular Prime do que a carne das fêmeas. Para RCQ não houve diferença entre as CS. Houve maior PPC na carne dos machos CC (P < 0,01) e a carne das fêmeas apresentou maior teor de EE em relação às demais categorias (P = 0,0248). Houve interação entre CS e dias de maturação para os valores de FC (P = 0,0002) e para os valores de L* (P = 0,0118) e b* (P = 0,0113). A maturação influenciou a cor da carne, em função da CS e ambas favoreceram a maciez da carne de todas as CS avaliadas, especialmente de machos NC e fêmeas. A CS influenciou todos os atributos avaliados na análise sensorial (P < 0,05). A carne de fêmeas e animais castrados, sejam imunocastrados ou castrados por método cirúrgico, apresentaram melhor aceitação pelos consumidores na análise. Adicionalmente, a carne das fêmeas apresentou PAG mais favorável à saúde humana, enquanto a carne dos machos NC apresentou um perfil de AG menos saudável (P < 0,05). A imunocastração pode ser uma alternativa à castração cirúrgica, pois os resultados associados à melhoria na qualidade da carne de bovinos cruzados Angus x Nelore, são similares aos encontrados para os machos CC. Entretanto, vale ressaltar que os bovinos CC produzem carne com maior deposição de gordura intramuscular do que os IM e que os custos financeiros da imunocastração devem ser levados em consideração para a produção da carne. Ainda, as diferenças no perfil de ácidos graxos podem indicar que a CS pode impactar o valor nutricional da carne em termos de saúde humana. / The goal of this work was to evaluate sexual condition effects on performance, carcass traits, and meat quality of a feedlot Angus x Nellore cattle. Were used 176 cattle, 20 months of age, from the Brazilian Certified Angus Beef Program, assigned into four sexual conditions: 32 bulls, 48 steers, 48 immunocastrated, and 48 heifers. The immunocastrated were obtained by vaccinating three times with anti-GnRH vaccine. Animals were fed ad libitum with a highgrain diet containing 80% concentrate. At the end of the experimental period (190 days) the animals were harvested. At the slaughter were collected data related to the carcass yield and pH values. After slaughter, were evaluated in Longissimus muscle, the rib eye area, and subcutaneous fat thickness between the 12th and 13th ribs, marbling score, color, and pH. Vacuum packaged steaks (2.54 cm thick) from the Longissimus muscle were collected, aging for zero, 7, and 14 days at 2°C and stored at -18°C until analysis of meat quality. Statistical analyzes were performed using the proc MIXED SAS® program (version 9.2). Bulls presented increased final body weight, average daily gain, rib eye area, and pH values when compared with the other sexual conditions (P < 0.01). For hot carcass weight, bulls and immunocastrated had higher values compared to steers and heifers (P < 0.01). Interestingly, heifers presented higher subcutaneous fat thickness compared to the other categories (P < 0.01). Heifers and steers presented increased intramuscular fat scores compared to the bulls and immunocastrated; however, beef from steers presented higher marbling Prime scores when compared with beef from heifers. Beef from steers had higher cooking loss (P < 0.01) and beef from heifers presented higher ether extract content when compared with other sexual conditions (P = 0.0248). There was interaction between sexual condition and aging time for Warner Bratzler Shear Force (WBSF) values (P = 0.0002), L* (P = 0.0118) and b* (P = 0.0113) values. The period of aging affected beef color, depending of the sexual condition. In addition, all cattle categories evaluated had beef tenderness improved by the aging process and sexual condition, especially beef from bulls and heifers. Sexual condition had main influence in all beef sensorial attributes (P < 0.05). Beef from heifers, steers, and immunocastrated cattle had better consumer´s acceptability in sensory analysis then the beef from bulls. Additionally, beef from heifers presented favorable fatty acid profile for human healthy, while beef from bulls had an unfavorable fatty acid profile (P < 0.05). In conclusion, immunocastration can be an alternative to surgical castration, since it improves meat quality with results like those for Angus x Nellore steers. However, it is important to highlight that the steers produce high intramuscular fat deposition then the immunocastrated, and the cost of immunocastration should be taken into consideration for the beef cattle production. Additionally, the difference on fatty acid profile can indicate that the sexual condition can impact the nutrition values of the meat.

Orientador: Antonio Ismael Inácio Cardoso / Banca: Marcelo de Almeida Silva / Banca: João Nakagawa / Banca: Felipe Oliveira Magro / Banca: Pamela Gomes Nakada Freitas / Resumo: As constantes alterações durante o processo de maturação afetam a qualidade das sementes. Objetivou-se com este trabalho avaliar a qualidade fisiológica, enzimas antioxidantes e teores de macronutrientes em sementes de berinjela em função de idades e tempos de repouso pós-colheita dos frutos. Para isto, foram colhidos frutos aos 40, 50, 60 e 70 dias após a antese (DAA) e mantidos com 0, 10 e 20 dias de repouso pós-colheita. Foram avaliadas as seguintes características nas sementes: porcentagem de sementes beneficiadas, massa de mil sementes, germinação, primeira contagem no teste de germinação, índice de velocidade de germinação (IVG), concentração de proteínas solúveis totais, atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e peroxidase (POX), massa seca de mil sementes e os teores dos macronutrientes das sementes. Os resultados foram submetidos à análise de variância e de regressão para verificar o efeito da idade do fruto nas características avaliadas. Para a comparação dos tempos de repouso pós-colheita foi utilizado o teste de Tukey a 5% de probabilidade. O repouso pós-colheita (RPC) dos frutos aumenta a qualidade fisiológica (germinação e vigor) de sementes de frutos imaturos, mas não afeta a qualidade de sementes de frutos maduros com 60 DAA. A atividade enzimática da SOD, CAT e POX das sementes diminui com a idade do fruto. O período de repouso pós-colheita de frutos interfere na atividade enzimática (SOD, CAT e POX). O teor de nitrogêni... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The constant changes during the maturation process affect the quality of the seeds. The objective of this work was to evaluate the physiological quality, enzymatic activity and macronutrient contents in eggplant seeds obtained from fruits harvested with different ages and post-harvest rest periods. For this, fruits were harvested at 40, 50, 60 and 70 days after anthesis (DAA), with 0, 10 and 20 days of post-harvest rest. The following characteristics were evaluated in the seeds: percentage of seeds processed, weight of one thousand seeds, germination, first count in the germination test, germination speed index (GSI), total soluble protein concentration, activity of the antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and peroxidase (POX), dry weight of one thousand seeds and the contents of the macronutrients of the seeds. The results were submitted to analysis of variance and regression to verify the effect of fruit age on the evaluated characteristics. For the comparison of the post-harvest rest times, the Tukey test at 5% of probability was used. The post-harvest rest (PHR) of the fruits increases the physiological quality (germination and vigor) of seeds of immature fruits, but does not affect the quality of seeds of mature fruits with 60 DAA. Enzyme activity of SOD, CAT and POX of seeds decreases with fruit age. The PHR period of fruits does interfere in the enzymatic activity (SOD, CAT and POX). The nitrogen content in seeds decreased with increasing fruit age, however, the PHR did not affect the nitrogen content. The contents of K, Mg, S and Ca present an interaction between the age and the PHR of the fruits, but, on average, it was observed that the contents of these nutrients decreased with the increase of the age of the fruit and with the PHR. The decreasing order of macronutrient contents in the seeds was N> K> P> Mg> S> Ca ... / Doutor

Orientador: Gisele Zoccal Mingoti / Resumo: O receptor do fator de crescimento epidermal (EGFR) está relacionado com a retomada da meiose induzida por estímulo gonadotrófico. Nós utilizamos um inibidor do EGFR (AG1478) para inibir a retomada da meiose durante a pré-maturação (PMIV). No experimento I, foi avaliada a maturação oocitária, a expansão das células do cumulus, a funcionalidade das junções gap, a distribuição dos microfilamentos de actina e o conteúdo lipídico em oócitos e, a expressão gênica nas células do cumulus. No experimento II, foi avaliado o desenvolvimento embrionário, a taxa de eclosão, o número total de células, a taxa de apoptose, o conteúdo lipídico e expressão gênica nos embriões. No experimento I, os COC foram PMIV por 8h em meio com 1 μM de AG1478, inibidor do EGFR, (EGFR-_PreIVM), em seguida foram MIV por 22h (EGFR-_IVM); foram feitos 4 grupos controle: oócitos imaturos imediatamente após sua remoção do folículo (Control_Immat), oócitos MIV por 8h (Control_PreIVM), por 22h (Control_IVM_22h) e por 30h (Control_IVM_30h). No experimento II, os COC foram PMIV por 8h em meio com 1 μM do inibidor do EGFR, em seguida foram MIV por 22h (EGFR-); os COC do grupo controle foram MIV por 22h (Control). Em seguida, os oócitos foram FIV e cultivados por até 9 dias. No experimento I, o grupo EGFR-_PreIVM apresentou 53,1% dos oócitos em GV, com a maioria em GV1 (42,9%; P>0,05) ou em GV3 [28,6%, semelhante ao grupo Control_Immat (P>0,05) e menor que o grupo Control_PreIVM (P<0,05)]; após a MIV não foram encontr... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Epidermal growth factor receptor (EGFR) is related with meiosis resumption by gonadotropic stimulus. We used an EGFR inhibitor (AG1478) to block meiosis resumption during prematuration (PIVM). In experiment I, was evaluated oocyte maturation, cumulus cells expansion, gap junctions functionality, microfilaments distribution and lipid content in oocytes and, gene expression in cumulus cells. In experiment II, was assessed embryo development, hatching rates, total cell number, apoptosis, lipid content and gene expression in embryos. For experiment I, COC were PIVM for 8h in medium supplemented with 1μM of AG1478, an EGFR inhibitor, (EGFR-_PreIVM), followed by 22h IVM (EGFR-_IVM); four control groups were evaluated: immature oocytes immediately after follicle removal (Control_Immat), oocytes IVM for 8h (Control_PreIVM), oocytes IVM for 22h (Control_IVM_22h) and oocytes IVM for 30h (Control_IVM_30h). For experiment II, COC were PIVM for 8h in medium supplemented with 1μM of EGFR inhibitor, followed by 22h IVM (EGFR-); COC from control group were matured for 22h (Control). After that, oocytes were IVF and zygotes were cultured up to 9 days. In experiment I, EGFR-_PreIVM group had 53.1% of the oocytes blocked in GV, the majority in GV1 (42.9%; P>0.05) or in GV3 [28.6%, similar to Control_Immat (P>0.05) and lower than Control_PreIVM (P<0.05)]. After IVM, no differences (P>0.05) were found between groups in MII rates, but Control_IMV_30h (9.1%) had higher (P<0.05) rates of degenerated... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Marcelo Fábio Gouveia Nogueira / Co-orientadora: Mariana Fernandes Machado / Banca: Marcelo Marcondes Seneda / Banca: Claudia Lima Verde Leal / Resumo: Em camundongo, estudos recentes demonstraram que o precursor do peptídeo natriurético tipo C (NPPC) e o seu receptor do tipo 2 (NPR2) são essenciais para a manutenção do bloqueio da meiose I no oócito. Além disso, fatores parácrinos secretados pelo oócito, como a proteína morfogenética óssea (BMP15), podem modular esse bloqueio pelo estímulo da expressão do gene NPR2 nas células do cumulus de camundongos. Em recente estudo na espécie bovina, o fluido folicular bovino (FFb), quando adicionado ao meio de maturação, interferiu na maturação nuclear do oócito e, como resultado, melhorou a produção in vitro de embriões. Contudo, não são conhecidos quais os fatores, presentes no FFb, que são responsáveis por esse efeito podendo inclusive haver participação das microvesículas presentes neste. Além de ser um componente do FFb, foi demonstrado que o estradiol pode participar diretamente da estimulação do NPR2. Portanto, os objetivos gerais do presente trabalho envolvem a elucidação do sistema NPPC-NPR2 no ovário bovino e a investigação da influência do NPPC exógeno, do estradiol e das vesículas extracelulares sobre a expressão do gene da PDE3 no oócito bovino e sobre a concentração de nucleotídeos cíclicos nos complexos cumulus-oócito. Foram realizado s quatro experimentos: 1) Ensaio imunoenzimático (ELISA) para investigar a presença e a concentração do NPPC no fluido folicular, no lisado de células da granulosa mural e nas vesículas extracelulares, de acordo com a classe de diâmetro folicular (3 a 6 mm; 6 a 8 mm e >8 mm); 2) Imunolocalização do receptor NPR2 no folículo antral bovino; 3) Expressão do gene da PDE3 no oócito bovino, mediante RT - PCR em tempo real, em CCOs im aturos e maturados in vitro por 6 horas com NPPC exógeno, estradiol e vesículas extracelulares; 4) Mensuração da concentração de AMPc e GMPc, em oócitos e células... / Abstract: In mice, recent studies have demonstrated that the natriuretic peptide precursor C (NPPC) and its type - 2 - receptor (NPR2) are essential for the maintenance of meiosis I arrest in the oocyte. Moreover, paracrine factors secreted by the oocyte such as bone mo rphogenetic protein 15 (BMP15) can modulate this arrest through the expression of the NPR2 gene in cumulus cells of mice. In a recent study in cattle, the bovine follicular fluid (bFF) added to the maturation medium was able to interfere with the oocyte nu clear maturation resulting in higher embryo yield in vitro . However, it is not known what factors present in bFF might be responsible for this effect and one candidate could be the presence of microvesicles in the bFF. Additionally, the estradiol hormone i s component of the bFF and was demonstrated to directly stimulate NPR2 expression. Therefore, the objectives of this work includes the investigation of the NPPC - NPR2 system in the bovine ovary and the assessment of the effects of exogenous NPPC, estradiol and extracellular vesicles on the expression of the PDE3 gene in bovine oocytes and the concentrations of cyclic - nucleotides in cumulus - oocyte complexes. We designed four experiments: 1) enzyme - linked immunosorbent assay (ELISA) for the presence and concen tration of the NPPC in follicular fluid, in the lysate of mural granulosa cells and in the extracellular vesicles, according to follicular diameter (3 to 6 mm, 6 to 8 mm, >8 mm); 2) Immunolocalization of NPR2 receptor in bovine antral follicles; 3) PDE3 ge ne expression in bovine oocyte by RT - PCR in real time, in immature COCs and in COCs in vitro matured for 6 h with exogenous NPPC, estradiol and extracellular vesicles; 4) Measurement of the concentration of cAMP and cGMP in oocytes and cumulus cells, respectively, either immature or matured in vitro for 6 h with exogenous NPPC or extracellular vesicles through specific... / Mestre

Orientador: Américo Garcia da Silva Sobrinho / Banca: Hirasilva Borba / Banca: Josiane Fonseca lage / Banca: Arlindo Saran Netto / Banca: Wignez Henrique / Resumo: Com objetivo de avaliar a qualidade da carne de cordeiros alimentados com coprodutos do biodiesel e do amendoim, 40 cordeiros Ile de France (17,15 ± 1,56 kg de peso corporal) foram alimentados com 40% de silagem de milho e 60% dos concentrados: padrão (C), com 20% de farelo de amendoim (FA), com 25% de glicerina (G) e com 10% de farelo de amendoim e 12,5% de glicerina (FAG) baseado na matéria seca. O músculo semimembranosus foi avaliado fresco e maturado, e o músculo longissimus lumborum fresco. Adotou-se delineamento inteiramente casualizado; para o músculo semimembranosus esquema fatorial 4 x 2, utilizou-se o teste de Tukey a 5%. Os cordeiros foram e abatidos aos 32 kg. As dietas e a maturação não favoreceram o desenvolvimento de microrganismos na carne. A carne fresca dos animais alimentados com a dieta G foi mais clara (P<0,05) e com a dieta FAG mais escura (luminosidade de 38,45 e 39,40 respectivamente). A maturação elevou (P<0,05) a intensidade de vermelho (15,12 para 15,93), intensidade de amarelo (2,48 para 3,42) e perda de peso a cocção (23,84 para 32,59%). Reduziu (P<0,05) o pH (5,66 para 5,45) e força de cisalhamento (22,60 para 16,95 N). No músculo longissimus lumborum só o perfil de ácidos graxos foi influenciado (P<0,05) pelas dietas. As carnes dos animais alimentados com as dietas G e FAG tiveram maiores concentrações (P<0,05) de ácidos graxos insaturados (48,50 e 46,99 %), maiores relações ácidos graxos monoinsaturados:saturados (1,04 a 1,02), maiores concentr... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: With the objective to evaluate the meat quality of lambs fed with by-products of biodiesel and of peanut, 40 Ile de France lambs (17.15±1.56 kg body weight) were fed with 40% of corn silage and 60% of concentrates: standard (C), with 20% peanut meal (PM), with 25% glycerin (G) and with 10% peanut meal and 12.5% glycerin (PMG) based In dry matter. The semimembranosus muscle was evaluated fresh and aged, and the longissimus lumborum muscle fresh. A completely randomized design was adopted; for the semimembranosus muscle factorial scheme 4 x 2, the Tukey test was used at 5%. The lambs were slaughtered at 32 kg. The fresh meat from animals fed G was lighter (color) compared with the meat from those consuming PMG, which was darker (lightness of 38.45 and 39.40, respectively). Aging increased red intensity (15.12 to 15.93), yellow intensity (2.48 to 3.42), and cooking loss (23.84 to 32.59%), while pH (5.66 to 5.45), and shear force (22.60 to 16.95 N) were reduced. In the longissimus lumborum muscle only the fatty acid profile was influenced (P<0.05) by the diets. The meat of the animals fed the G and PMG diets had higher concentrations (P<0.05) of unsaturated fatty acids (48.50 and 46.99%), higher monounsaturated:saturated fatty acids (1.04 to 1.02), higher concentrations of hypocholesterolemic fatty acids (47.66 and 48.48%) and lower (P=0.05) n-6:n-3 (13.56 and 11.93) ratios. Biodiesel and peanut byproducts can be used as alternative sources of energy and protein in the diet of la... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Carlos Alexandre Costa Crusciol / Banca: João Domingos Rodrigues / Banca: Godofredo Cesar Vitti / Banca: Gaspar Henrique Korndorfer / Banca: Rafaella Rossetto / Resumo: Objetivou-se, mediante o presente estudo, avaliar a eficácia da aplicação foliar de boro (B) associado, ou não, aos maturadores etil-trinexapac, etefon e sulfometuron metil na pré colheita da cana-de-açúcar, as alterações fisiológicas e suas implicações na qualidade e produtividade de colmos. O presente projeto foi composto de três subprojetos, sendo o primeiro abordando o uso de B associado ao etil-trinexapac, o segundo ao etefon e o terceiro ao sulfometuron metil. Para cada subprojeto foram conduzidos 4 experimentos em início e 4 em final de safra (2 locais e 2 anos), totalizando 12 experimentos em início de safra e 12 em final de safra, ou seja, 24 experimentos. Nos experimentos em início de safra, foi utilizada a variedade de cana-de-açúcar RB855453 (maturação precoce) nos dois locais e em final de safra foi utilizada a variedade SP80-3280 (maturação tardia) no Grupo Raízen e a variedade RB867515 (maturação média-tardia) no Grupo Tereos. Os tratamentos foram constituídos da aplicação dos maturadores etil-trinexapac, etefon, sulfometuron metil e do controle (maturação natural), associados à aplicação de B foliar. As doses empregadas foram, respectivamente, 200 g i.a. ha-1 (0,8 L p.c. Moddus ha-1), 480 g i.a. ha-1 (0,66 L p.c. Ethrel ha-1), 0,15 g i.a. ha-1 (0,20 g p.c. Curavial ha-1) e para o B, a dose foi 0,18 kg ha-1 (1060 g ácido bórico ha-1). Foram avaliados os parâmetros bioquímicos, biométricos, tecnológicos e nutricionais. Concluiu-se que a deficiência de B limita o acúmulo de sacarose em início e final de safra; a aplicação de maturadores em início de safra, isoladamente ou em associação ao B, possibilitou antecipação no corte da matéria-prima em cerca de 15 dias e o B aplicado isoladamente foi ainda mais eficiente, antecipando a maturação em cerca de 18 dias; em final de ... / Abstract: The aim, through this study, was to evaluate the effectiveness of foliar application of boron (B), associated or not to the ripeners trinexapac-ethyl, ethephon and sulfometuron methyl in pre harvest of sugarcane, the physiological changes and their implications on quality and stalk yield. This project was composed of three subprojects, the first evaluating the use of B associated with trinexapac-ethyl, the second to ethephon and the third to sulfometuron methyl. For each subproject 4 experiments were carried out at the early and at the late season (2 places and 2 years), so were 12 experiments at early season and 12 at late season, totaling 24 experiments. In the experiments at early season, was used the variety of sugarcane RB855453 (early ripening) in both locations and at late season was used the variety SP80-3280 (late ripening) in Raízen Group and variety RB867515 (middle-late season) in Tereos group. The treatments consisted in the application of the ripeners trinexapac-ethyl, ethephon, sulfometuron methyl and control (natural ripening) associated with the application of B. The doses used were, respectively, 200 g i.e. ha-1 (0,8 L c.p. Moddus ha-1), 480 g i.e. ha-1 (0,66 L c.p. Ethrel ha-1), 0,15 g i.e. ha-1 (0,20 g c.p. Curavial ha-1) and for B the dose was 0,18 kg ha-1 (1060 g boric acid ha-1). Biochemical, biometric, technological and nutritional parameters were evaluated. It was concluded that B deficiency in pre-harvest of sugarcane limits the accumulation of sucrose at early and at late season; at early season the ripeners applied alone or in association with B enabled anticipation in the raw material harvesting in about 15 days and B applied alone was even more efficient, anticipating in about 18 days; at late season the ripeners were effective in maintaining the high sucrose concentration longer than control treatment, as well as B applied alone or in association with ... / Doutor

Orientador: Edvaldo Aparecido Amaral da Silva / Coorientador: Olivier Leprince / Banca: Julia Buitink / Banca: Thierry Joet / Banca: José Baldin Pinheiro / Resumo: The stable production of high vigorous seeds regardless of the environment is a key lever to increase crop production. Seed vigor is defined as the sum of the physiological properties that lead to homogenous and vigorous seedling establishment. It includes longevity, defined as the capacity to remain viable for long periods during dry storage and the capacity to elongate after germination. However, how these traits are acquired during seed development and how the environment impacts their acquisition remain poorly understood. Yet this information is important to determine the harvest stage corresponding to maximum vigor. Using agronomy and physiological approaches on soybean and Medicago truncatula, we confirm that longevity is progressively acquired during seed maturation. In soybean, our data suggest that the climate influenced longevity whereas in Medicago, heat applied during seed maturation had no significant impact. This work also showed that HEAT SHOCK FACTOR A2.2, a homologue of HSFA9 and hub gene involved in seed maturation does not play a role in seed longevity but acts as negative regulator of embryonic dormancy. Longevity is evaluated by the ability to germinate after storage, which represents only a part of the success of crop establishment. How seed maturation affects the loss of seedling establishment capacity during storage was evaluated in soybean using an experimental system set up to assess elongation capacity. The pattern of acquisition of elongation capac... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Resumo: La production de semences vigoureuses est un levier pour augmenter les rendements. La vigueur est définie comme la somme des propriétés physiologiques conduisant à l'établissement homogène et vigoureux du peuplement végétal. Elle comprend la longévité, définie comme la capacité à rester viable pendant le stockage et la capacité de la plantule à s'allonger après germination. Cependant, comment ces caractéristiques sont acquises au cours du développement de la graine et comment l'environnement influence leur acquisition restent mal compris. Ces informations sont importantes pour déterminer le stade de récolte correspondant à une vigueur maximale. En utilisant des approches agronomique et physiologique sur le soja et Medicago truncatula, nous montrons que la longévité est progressivement acquise au cours de la maturation. Chez le soja, le climat influence la longévité de manière complexe alors que chez Medicago, la chaleur pendant la maturation ne l'impacte pas significativement. Nous montrons également que HEAT SHOCK FACTOR A2.2, un homologue de HSFA9 impliqué dans la survie à l'état sec ne joue pas de rôle dans la longévité chez Medicago mais agit comme régulateur négatif de la dormance. La longévité se mesure par la perte de la germination pendant le stockage et ne représente qu'une partie du succès de l'établissement de la culture. Donc, l'influence de la maturation sur la perte de capacité d'établir une plantule lors du stockage a été évaluée chez le soja. L'acquisition de la capacité d'élongation pendant la maturation varie entre les années de culture et selon les conditions de croissance des plantules. Le temps nécessaire pour diminuer la capacité d'élongation de 50% pendant le stockage augmente constamment pendant la maturation après la maturité de masse. Ceci démontre l'importance des phases tardives de la maturation dans ... / Doutor

Submitted by Programa de Pós-graduação em Biotecnologia (mebiotec.ufba@gmail.com) on 2017-04-04T13:35:47Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Paulo_Teixeira.pdf: 5196941 bytes, checksum: 5f169d111dd41c2034826870deb144a2 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-07-03T15:30:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_Paulo_Teixeira.pdf: 5196941 bytes, checksum: 5f169d111dd41c2034826870deb144a2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-03T15:30:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_Paulo_Teixeira.pdf: 5196941 bytes, checksum: 5f169d111dd41c2034826870deb144a2 (MD5) / CAPES / A mamoneira (Ricinus communis L.) é uma espécie que apresenta destaque no cenário das oleaginosas, principalmente pela composição química e qualidade do óleo extraído de suas sementes como fonte de matéria prima para a produção de biodiesel. Além das vantagens de ser uma cultura de fácil manejo, e com ampla faixa de adaptação e tolerância podendo ser cultivada em ambientes desfavoráveis e baixos custos de produção. Devido a estes fatores, criaram-se incentivos e perspectivas de expansão do seu cultivo pela agricultura familiar no semiárido nordestino, região caracterizada pela escassez de chuvas e frequentes secas. O objetivo deste trabalho consistiu em caracterizar o processo de formação da semente de Mamona da cultivar MPA 11 e analisar funcionalmente os eventos do ciclo celular e eventos fisiológicos durante o desenvolvimento e maturação das sementes, bem como durante a germinação das sementes embebidas sob condições de restrição hídrica por meio de osmocondicionamento. Como material biológico foi utilizado sementes do cultivar MPA11 produzida pela Empresa Baiana de Desenvolvimento Agrícola (EBDA) cultivadas na Fazenda Experimental da UFBA (São Gonçalo dos Campos-BA). Foram realizadas visitas semanais para colheita de frutos a cada sete dias até o 63° dia após a marcação (DAM), os quais passaram por análises biométricas, sendo medidos largura e comprimento de frutos; largura, comprimento e espessura de sementes, teor de umidade e conteúdo de matéria seca das sementes. As sementes colhidas aos 63 DAM foram submetidas à secagem e osmocondicionamento, e subsequente teste de germinação, conduzido em quatro repetições de 25 sementes por tratamento, sendo o delineamento experimental inteiramente casualizado em esquema fatorial de 2 x 2. Para o estudo do ciclo celular durante o desenvolvimento foram utilizados embriões de sementes com 28, 35, 42, 49, 56 e 63 DAM para análise de conteúdo de DNA por citometria de fluxo, tubulina por western blotting e microtúbulos por microscopia de imunofluorescência. Para estudo do ciclo celular durante a germinação, foram extraídos os eixos embrionários nos períodos de 0, 24, 48, 72 e 96 h das sementes embebidas em água, sendo realizadas análises de tubulina e microtúbulos. A cultivar MPA11 apresenta ciclo precoce, com suas sementes alcançando a maturidade fisiológica aos 35 DAM estando às mesmas maduras aos 56 DAM, sendo esta uma variedade promissora para o semiárido nordestino. Para os tratamentos de secagem aplicados às sementes maduras, não houve diferenças significativas. No entanto, o osmocondicionamento permitiu às sementes iniciar etapas do processo de germinação, o que melhorou a velocidade de germinação após embebição em água. Neste estudo, um modelo de desenvolvimento e germinação de sementes de mamona da cultivar MPA11 da EBDA é proposto, o que representa um avanço na compreensão do desenvolvimento e germinação de sementes de mamona. / The castor bean (Ricinus communis L.) is a species that has featured in the scenario of oilseeds, mainly by the chemical composition and quality of the oil extracted from its seeds as a source of raw material for the production of biodiesel. Besides the advantages of being a culture of easy handling and wide range of adaptation and tolerance can be grown on low costs and unfavorable production environments. Due to these factors, it created incentives and opportunities for expansion of its cultivation on family farms in the northeastern semi-arid region characterized by low rainfall and frequent droughts. The aim of this study was to characterize the process of formation of Castor seed cultivar MPA11 and functionally analyze the cell cycle events and physiological events during development and maturation of seeds and during germination of seeds soaked under constraint conditions water through priming. As biological material MPA11 seeds of cultivar produced by the Bahia Agricultural Development Company (EBDA) grown at the Experimental Farm UFBa (São Gonçalo dos Campos-BA) were used. Weekly visits to harvest fruit were taken every seven days until the 63 th day after (DAM) marking, which passed through biometric analysis, being measured width and fruit length; width, length and thickness of seed moisture content and dry matter content of the seeds. Seeds harvested at 63 DAM were dried and priming, and subsequent germination test conducted in four replicates of 25 seeds per treatment, the completely randomized design in a factorial 2 x 2 To study the cell cycle during developing embryos of seeds with 28, 35, 42, 49, 56 and 63 DMA analysis of DNA content by flow cytometry, western blotting for tubulin and microtubules by immunofluorescence microscopy. To study the cell cycle during germination the embryonic axes to periods of 0, 24, 48, 72 and 96 h of seeds soaked in water, the analysis being performed tubulin and microtubules were extracted. Cultivar MPA11 presents early cycle with its seeds reach physiological maturity at 35 to being mature same at 56 DAM, which is a promising variety for the semi-arid northeast. For the drying treatments applied to mature seeds, there were no significant differences. However, osmopriming allowed the seeds start germinating stages of the process, which improved the germination rate after soaking in water. In this study, a model of development and germination of castor bean cultivar MPA11 EBDA is proposed, representing a breakthrough in understanding the development and germination of castor seeds.