Submitted by Gabriela Lopes (gmachadolopesufpel@gmail.com) on 2016-09-23T15:04:33Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_FRANCIS_RADAEL_TATTO.pdf: 2522380 bytes, checksum: 0fa38f8ca66c36244e31f2f284e7c984 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-23T15:04:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_FRANCIS_RADAEL_TATTO.pdf: 2522380 bytes, checksum: 0fa38f8ca66c36244e31f2f284e7c984 (MD5) Previous issue date: 2016-02-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A cana-de-açúcar possui grande importância no estado do Rio Grande do Sul por estar associada às atividades desenvolvidas pela agricultura familiar, sendo utilizada para produção de cachaça, açúcar mascavo, melado, rapadura bem como para alimentação animal. O estado é considerado uma nova fronteira agrícola de cultivo e por estar incluída no Zoneamento Agroclimático, carece da obtenção de cultivares modernos, produtivos, com características de tolerância ao frio, a seca. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar, caracterizar e selecionar clones de cana-de-açúcar da Série RB12. Para isto foram realizados ensaios experimentais em Paranavaí, PR e Pelotas, RS, onde foram avaliadas as variáveis Brix (°Brix), número de colmos por metro (NCM), tonelada de colmos ha-1 (TCH), tonelada Brix ha-1 (TBH), a tolerância as principais doenças e a maturação dos clones. A Análise de Variância (ANOVA) mostrou a existência de interação G x A entre os clones e os ambientes, bem como variabilidade para ciclo de maturação, sendo que Paranavaí obteve melhor desempenho agronômico em relação a Pelotas. Os clones apresentaram teor de Brix favoráveis ao cultivo, produtividade de colmos e de açúcar maiores em Paranavaí em relação a Pelotas. Quanto a sanidade os clones avaliados apresentaram tolerância a ferrugem marrom e alaranjada, carvão e manchas foliares. No tocante ao ciclo de maturação, os clones promissores puderam ser agrupados em precoces, médios-tardios e tardios. / Sugarcane is of great importance to Rio Grande do Sul State for being associated with family farming activities. Sugarcane is used for the production of cane brandy, brown sugar, molasses, “rapadura” (candy of the juice of sugar cane) and animal feed. RS state is considered the new agricultural frontier for sugarcane being included in the Agroclimatic zoning. For that reason it is important to obtain modern and productive cultivars with cold and drought tolerance characteristics. Therefore, the objective of this work was to evaluate, characterize and select sugarcane clones of the RB12 series. Experiments were carried out in Paranavaí, PR and Pelotas, RS. The following variables were evaluated Total Soluble Solids (°Brix), number of stalks per meter (NCM), tons of stalks per hectare (TCH), tons of Brix per hectare (TBH), tolerance to the main diseases and maturation. Variance analysis (ANOVA) showed interaction G x E among clones and environment, as well as variability concerning the maturation cycle. Paranavaí obtained superior agronomic performance when compared to Pelotas. The clones showed Brix content, stalk and sugar productivity greater in Paranavaí. Clones showed tolerance to brown and orange rust, charcoal and leaf spots. Regarding the maturity cycle, clones were grouped in early, mid-late and late cycles.

Orientador: Roberto Herminio Moretti / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-04T02:32:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BenassiJunior_Mario_D.pdf: 1676376 bytes, checksum: f60c2e75a305891a4245bfd284c43500 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Foram formuladas três tipos de bebidas cítricas: Refrigerante, Refresco e Energético, e avaliada a influência do nível de maturação do suco na qualidade final dessas formulações. O Refrigerante foi formulado com 10 % de suco, em 5 diferentes níveis de maturação, com relação Brix/Acidez (¿Ratio¿) de: 8, 10, 12, 14 e 17. Os Refrescos foram formulados com 30 % de suco, oriundo de níveis de ¿Ratio¿ 10 e 17, e com três diferentes níveis de acidez (ácido cítrico): 0,75%, 0.55%, 0,35%, gerando bebidas com níveis finais de ¿Ratio¿ de 14, 19 e 30, totalizando seis tratamentos. Os Energéticos foram formulados com 2 % de suco, em níveis de ¿Ratio¿ de 10 e 17, e três níveis de estabilizante (goma xanthana) 0,04%, 0,05% e 0,06%, totalizando seis tratamentos. Nessas bebidas, e no suco concentrado utilizado como matéria prima, foram realizadas as seguintes determinações físico-químicas: viscosidade, cor (Hunter -L, a, b), opacidade, ácido ascórbico, pH, pectina, prolina, atividade de pectinesterase, cinzas, e minerais (N, P, K, Ca, Mg, S, B, Cu, Fe, Mn, Zn, Na, Al), em triplicata, além disso as bebidas foram avaliadas através de análise sensorial, composta de um teste de aceitação, com escala não estruturada de 0 a 9 (desgostei muitíssimo, gostei muitíssimo), para os atributos: aroma, acidez, sabor, doçura, viscosidade e impressão global. Tanto as análises físicvo-químicas como a sensorial foram realizadas no momento da produção para todas as bebidas, após 180 dias nos Refrigerantes, e após 120 dias nos Energéticos e Refrescos. O Refrigerante não foi influenciado pelo nível de maturação do suco, apresentando menores: viscosidade, opacidade e teor de pectina, e maiores: pH, teor de ferro e cor, dentre as bebidas, sendo a bebida com a melhor avaliação sensorial. O Refresco foi influenciado pelo nível de maturação do suco na formulação, onde os Refrescos formulados com suco de ¿Ratio¿ 10, apresentaram a menor viscosidade, a maior opacidade e o maior teor de ácido ascórbico, enquanto que os Refrescos formulados com suco de ¿Ratio¿ 17 apresentaram cor mais clara e alaranjada, e maiores teores de prolina, cinzas e minerais, mas a pior avaliação sensorial dentre as bebidas. O Energético (2% de suco) também sofreu influência da maturação com os energéticos formulados com suco de ¿Ratio¿ 10, apresentando maiores: opacidade e teor de ácido ascórbico e os Energéticos formulados com ¿Ratio¿ 17, maior teor de cinzas, sendo esses as bebidas com a maior viscosidade, menor teor de minerais, e avaliação sensorial intermediária entre Refrigerantes e Refrescos / Abstract: Three different citrus juice drinks have been prepared: a soft drink (10 % of juice), an ade (30% of juice) and a sherbet (2 % of juice), all this beverages have been evaluated considering the influence provided by the maturation level of the juice used in the formulation. The soft drink has been formulated with 10 % of orange juice in five different levels of Brix/acid ratio of 8, 10, 12, 14 and 17. The orange ades have been formulated with 30 % of orange juice in two leves of brix/acid ratio: 10 and 17, and three different levels of acidity (citric acid): 0.75%, 0.55% and 0.25%, producing beverages with final brix/acid ratio of 14, 19 and 30. The sherbets have been formulated with 2 % of orange juice with two levels of brix/acid ratio 10 and 17, and three levels of texturizers (Xanthan gum): 0.04%, 0.05% and 0.06%. All this beverages, have been submitted to the folowing physicochemical determinations: viscosity, color (Hunter L, a, b), opacity, ascorbic acid, pH, total pectin, proline, pectin esterase activity, ashes and mineral content (N, P, K, Ca, Mg, S, B, Cu, Fe, Mn, Zn, Na, Al), realized in three repetitions. Besides that, a sensory evaluation was carried out in a acceptance test with a non-structured category scale form 0 to 9 (dislike extremely, like extremely), considering the following atributtes: flavor, acidity, taste, sweetness, viscosity and global impression. Each one of this evaluations have been realized just after the processing of the beverege and 180 days after it for the soft drink and 120 days after, for both orange ade and sherbet. The soft drink had been not affected by the maturation level of the juice, instead of it showed the lowest level of viscosity, opacity, pectin, and the highest levels of pH, Iron content and color, considering all the three beverages, and still has been achieved the best sensory evaluation among the beverages. The orange ade, however has been influenced by the maturation level of the orange juice, with the ones formulated in a brix/acid ratio of 10, achieving the lowest viscosity, but the higest opacity and ascorbic acid content, while the orange ades formulated with the orange juice in a brix/acid ratio of 17, achieveing more orange and bright color and the higest: prolin, ash and mineral content, on the other hand, showing the worst sensory evaluation among the beverges. The sherbet has been influenced by the maturation level, with the ones formulated with orange juice in a brix/acid ratio of 10, achieving highest opacity and ascorbic acid and the sherbets formulated with orange juice in a brix/acid ratio of 17, presenting the highest ash content. Therefore, these sherbets reached out the highest viscosity among the beverages and have been evaluated to an intermediate position between the soft drink and the orange ade, considering the sensory test / Doutorado / Tecnologia de Alimentos / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Antonio Carlos de Moraes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação Física / Made available in DSpace on 2018-08-26T13:31:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Altimari_JulianaMelo_D.pdf: 4168069 bytes, checksum: 9a5c69f9799e5872527fea8bf96b37fd (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Este estudo analisou o efeito da idade relativa (EIR) sobre características antropométricas e desempenho motor de jovens jogadores de futebol. Para tanto, foram conduzidos dois estudos. No estudo 1 a amostra foi composta de 400 jogadores de futebol (15,4 ± 0,4 anos) da categoria Sub-15 que participaram da 10° Copa Brasil de Futebol Sub-15. As datas de nascimento, bem como as medidas antropométricas massa corporal (MC), estatura (ET), foram obtidas a partir de dados relatados pelas equipes na ficha de inscrição de cada atleta à organização do evento e a CBF. No estudo 2 a amostra foi composta de 146 jogadores de futebol das categorias Sub-13 (n = 50; 13,6 ± 0,3 anos), Sub-15 (n = 50; 15,5 ± 0,4 anos) e Sub-17 (n = 46; 17,7 ± 0,3 anos). Os sujeitos foram submetidos a diferentes situações experimentais de forma transversal: 1) mensurações antropométricas MC, ET, massa magra (MM) e gordura relativa (%G); 2) avaliação da idade óssea (IO); 3) testes motores para avaliação da resistência aeróbia (RA), velocidade (VL10m e VL30m), força de membros inferiores a partir de salto vertical (SV, SVCSMS e SVCCMS), resistência de velocidade (RSA) e índice de fadiga obtido a partir do teste de RSA (IFRSA). Em ambos os estudos os jogadores foram separados de acordo com a categorização de idade cronológica por quadrimestres, 1? quadrimestre (1? QDT), jovens nascidos entre janeiro e abril; 2? quadrimestre (2? QDT), jovens nascidos entre maio e agosto e 3? quadrimestre (3? QDT), jovens nascidos entre setembro e dezembro. Para o tratamento estatístico foram empregados teste não paramétrico do qui-quadrado (X2), análise de variância (ANOVA) two-way, seguido pelo teste Post-hoc de Scheffé. As correlações entre os parâmetros analisados foram estabelecidas pelo coeficiente de correlação de Pearson. O nível de significância adotado para todas as análises foi de 5%. Os resultados do primeiro estudo demonstram um maior número jogadores nascidos nos primeiros meses do ano (1? QDT > 2? QDT > 3º QDT, P<0,05). Da mesma forma, constatou-se valores significativamente maiores para as variáveis ET e MC dos jogadores nascidos nos primeiros meses do ano (1? QDT > 2? QDT > 3º QDT, P<0,05). No segundo estudo observou-se que as variáveis MC, ET e RSA apresentaram diferenças significativas entre o 1? QDT e 3? QDT, nas categorias Sub-13 e Sub-15 (P<0,05). Enquanto que para a variável MM diferenças significativas foram observadas apenas entre 1? QDT e 3? QDT da categoria Sub-13 (P<0,05). Por outro lado, nenhuma diferença significativa para a variáveis %G, SV, SVCSMS, SVCCMS, RA, VL10 m, VL30 m e IFRSA entre o 1? QDT, 2? QDT e 3? QDT foram observadas em todas as categoria analisadas (P>0,05). Ressalta-se que os valores das variáveis MC, ET, MM, SV, SVCSMS, SVCCMS, RA, RSA, VL10 m, VL30 m, foram significativamente diferentes entre os jogadores da categoria Sub-13 e Sub-17 nos diferentes quadrimestres (P<0,05). Constatou-se também que os jogadores da categoria Sub-13 apresentaram menores valores de estatura, massa corporal e massa magra, em relação aos jogadores da categoria Sub-15 e Sub-17 nos diferentes quadrimestres (P<0,05). Observou-se nas três categorias analisadas, a prevalência de jogadores apresentando estado de maturidade normal nos três quadrimestres (Sub-13 = 72,0%; Sub-15 = 78,0%; Sub-17 = 95,0%). Os achados do primeiro estudo sugerem que o ERI exerce influência na seleção de jovens jogadores brasileiros de elite e que este efeito está associado as características antropométricas estatura e massa corporal. Corroborando com esses achados, os resultados do segundo estudo apontam para influência do ERI nas categorias Sub-13 e Sub-15 para as variáveis massa corporal, estatura e resistência de velocidade, enquanto que para a variável massa muscular isso ocorreu apenas na categoria Sub-13, possibilitando aos jogadores nascidos no 1? QDT (Jan-Abr) dessas categorias vantagens em relação aos nascidos no 3? QDT (Set-Dez) / Abstract: This study examined the effect of relative age (ERA) on anthropometric characteristics and motor performance of young soccer players. To this end, two studies were conducted. In the study, a sample composed of 400 soccer players (15.4 ± 0.4 years) of the U-15 category who participated in the 10th World Cup Football Brazil U-15. Dates of birth and anthropometric measures body mass (BM) and height (H) were obtained from data reported by the teams on the registration form for each athlete to the event organization and CBF. The second study sample was composed of 146 soccer players in the categories U-13 (n = 50, 13.6 ± 0.3 years), U-15 (n = 50, 15.5 ± 0.4 years) and U-17 (n = 46, 17.7 ± 0.3 years). The subjects were submitted to different experimental situations across the board: 1) anthropometric measurements BM, H, lean mass (LM) and fat percent (BF%), 2) assessment of bone age (BA) and 3) motor tests to evaluate aerobic endurance (AE), speed (S10 m and S30 m), lower limb strength from vertical jump (VJ, VJCWUL and VJ SVCAUL), repeated sprint ability (RSA) and fatigue index obtained from the RSA test (FIRSA). In both studies the players were separated according to the categorization of chronological age by four, quarter 1? (1? QT ), young people born between January and April; quarter 2? (2? QT), young people born between May and August and 3? quarter (3? QT), young people born between September and December. For statistical treatment nonparametric chi-square (X2) analysis of variance (ANOVA) two-way, followed by posthoc Scheffé test were used. Correlations between parameters were established by Pearson's correlation coefficient. The significance level for all analyzes was 5%. The results of the first study show a greater number of players born in the first months of the year (1? QT > 2? QT > 3? QT, P<0.05). Likewise, we found significantly higher values for the variables BM and H players born in the first months of the year (1? QT > 2? QT > 3? QT, P< 0.05). In the second study, it was observed that the BM, H and RSA variables showed significant differences between the 1? QT and 3? QT in categories U-13 and U-15 (P<0.05). While for the variable LM significant differences were found between 1? QT and 3? QT category U- 13 (P<0.05). On the other hand, no significant difference for the variables BF%, VJ, VJCWUL, VJ SVCAUL, AE, S10 m, S30 m and IFRSA me between 1? QT, 2? QT and 3? were observed in every category analyzed (P>0.05). It is noteworthy that the values of BM, H and RSA LM, VJ, VJCWUL, VJ SVCAUL, AE, RSA, S10 m, S30 m, variables were significantly different between the players of the category U-13 and U-17 in different quarters (P< 0.05). It was also found that the players of U-13 category had significantly lower height, body mass and lean mass in relation to the category of players U-15 and U-17 in different quarters (P< 0.05). Observed in the three categories analyzed, the prevalence of players showing normal state of maturity in each four (U-13 = 72.0 %, U-15 = 78.0 %, U- 17 = 95.0 %). The findings of the first study suggest that the ERA influences the selection of young Brazilian elite players and that this effect is associated with anthropometric characteristics height and body mass. Corroborating these findings, the results of the second study indicate influence of ERA in categories U-13 and U-15 for the variables body mass, height and repeated sprint ability, while for muscle mass this variable occurred only in the U-13, allowing players born in 1? QDT (Jan-Apr) of these categories advantages compared to those born at 3? QDT (Sep-Dec) / Doutorado / Biodinamica do Movimento e Esporte / Doutora em Educação Física

Orientador: Marcos Omir Marques / Banca: Teresa Cristina Tarlé Pissarra / Banca: Fábio Olivieri de Nóbile / Resumo: Os diversos cultivares de cana-de-açúcar criados a partir de melhoramentos genéticos apresentam diferentes aspectos agroindustriais, gerando além de diferentes remunerações, produtos com qualidades diferenciadas na unidade industrial. Desta maneira, o presente trabalho foi conduzido com o objetivo de comparar cultivares de cana-de-açúcar quanto às suas variáveis tecnológicas, atividades enzimáticas e teores de fosfatos. As amostragens dos colmos de cana foram coletadas nas parcelas experimentais instaladas na Fazenda de Ensino Pesquisa e Extensão da FCAV/UNESP- Jaboticabal, SP. As análises foram realizadas no Laboratório de Tecnologia do Açúcar e Etanol do departamento de Tecnologia. Os cultivares apresentaram diferença em relação aos teores enzimáticos, níveis de fosfatos inorgânicos e características tecnológicas. O cultivar RB867515 obteve os resultados mais satisfatórios do estudo, excetuando-se pela atividade enzimática, onde o cultivar SP81-3250 destacou-se. Todos os genótipos apresentaram teores adequados de fósforo inorgânico para um eficiente processo de clarificação / Abstract: The different cultivars of sugarcane created from genetic improvements have different agroaspects, generating besides different remuneration, products with differentiated qualities in the industrial unit. Thus, this study was conducted in order to compare cultivars of sugarcane as will their technological variables, enzimatic activity and phosphate levels. Sampling of cane stems occurred in Farm Research Education and Extension FCAV / UNESP- Jaboticabal, SP. Analyses were performed in the Sugar and Ethanol Technology Laboratory in technology department of the same university. The cultivars showed differentiation from enzyme levels, inorganic phosphate levels and technological characteristics. The cultivar RB867515 obtained the most satisfactory results of the study, except it is the enzymatic activity, where the SP81-3250 stood out. All genotypes showed inorganic phosphorus levels appropriate for efficient clarification process / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-17Bitstream added on 2014-06-13T21:02:02Z : No. of bitstreams: 1 barros_jjc_dr_sjrp.pdf: 1863620 bytes, checksum: cab2458b2bd6a8385a6f3450d30d3398 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O uso de culturas de L. helveticus isoladas de soro-fermento na fabricação do queijo Parmesão pode representar a preservação da biodiversidade, e também uma alternativa na redução de custos dos laticínios. Esta economia, combinada com a melhoria da qualidade tecnológica pode representar produtos com melhor aroma, textura e sabor e menor custo aos consumidores. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de culturas autóctones isoladas de soro-fermento na fabricação do queijo Parmesão. Os queijos foram produzidos com Lactobacillus helveticus com perfil autolítico elevado (Cc1, E5) e perfil autolítico intermediário (A, D1) maturados a 18 oC durante 180 dias. Mensalmente, foram avaliados a qualidade sanitária, viabilidade de bactérias láticas, perfil físico-químico, atividade da lactato desidrogenase (LDH), perfil eletroforético e análise da microestrutura por microscopia eletrônica de transmissão (MET). A microestrutura do queijo E5 maturado por 30 e 60 dias foi avaliada também em microscopia eletrônica de varredura (MEV). A presença de compostos aromáticos foi avaliada no queijo maturado por 60, 120 e 180 dias usando cromatógrafo gasoso, após prévia concentração das substâncias voláteis por headspace. Análise descritiva quantitativa (ADQ) foi empregada nas amostras maturadas por 90 a 180 dias. Todas as amostras de leite e queijo Parmesão atenderam aos padrões legais quanto aos bioindicadores de contaminação avaliados. Bactérias láticas apresentaram redução a partir de 90 dias de maturação. Houve aumento significativo nos teores de acidez, nitrogênio solúvel em pH 4,6 (NSpH4,6) e nitrogênio solúvel em ácido tricloroacético (NSTCA12%) em todas as amostras de queijo Parmesão ao longo de 180 dias de maturação. A maior hidrólise da caseína e liberação dos aminoácidos tirosina e triptofano foi obtida quando os queijos... / The use of cultures of L. helveticus isolated from natural whey starter in the production of Parmesan cheese can represent biodiversity preservation, and also an alternative in reducing costs to the dairy industry. These savings, combined with the improved technological quality may represent products with a better aroma, texture and taste and lower cost to consumers. This study aimed to evaluate the effect of autochthonous cultures isolated from natural whey starter in the production of Parmesan cheese. The cheeses were produced with added Lactobacillus helveticus with high autolitic profile (CC1, E5) and intermediary autolitic profile (A, D1) and ripened at 18oC during 180 days. Once a month, the sanitary quality, viability of lactic acid bacteria, physicochemical profile, the activity of lactate dehydrogenase (LDH), electrophoretic profile and transmission electronic microstructure (TEM) were analysed. The microstructure of cheese sample E5 ripened during 30 and 60 days was also evaluated using scanning electronic microstructure (SEM). The presence of aromatic compounds was evaluated in the ripened cheese at 60, 120 and 180 days using gas chromatography, after prior concentration of volatile compounds by head-space. Quantitative Descriptive Analysis (QDA) was applied in ripened samples at 90 and 180 days. All samples of milk and Parmesan cheese were in accordance to the legal standards of bioindicators of contamination. Lactic acid bacteria population was reduced after 90 days of ripening. There was a significant increase in acidity, soluble nitrogen in pH 4.6 (NSpH4,6) and soluble nitrogen in trichloroacetic acid (NSTCA12%) contents in all samples of Parmesan cheese during 180 days of ripening. The higher hydrolysis of casein and release of tyrosine and tryptophan amino acids were higher in cheese produced with the D1 and E5 cultures added. In these cheeses, the LDH activity... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV13MA126.pdf: 1438995 bytes, checksum: 92c38a9e65801fc815fae80c57176981 (MD5) Previous issue date: 2013-08-27 / The Mixed Rain Forest, popularly known as Araucaria Forest, is being deforested. From its original surface only approximately 1% remains. This study aimed to contribute to the restoration /recovery process of this vegetation type through studies on seeds of three native species of trees and bushes, based on harvest, overcome of possible dormancy and seed processing. The species explored in this study were: Miconia cinerascens Miq. var. Cinerascens, Vernonanthura discolor (Spreng.) H. Rob and Sapium glandulosum (L.) Morong. The ideal time to harvest for all these species was defined, considering morphological maturation parameters. Fruit harvest was performed in two remnants of Araucaria Forest (Rio Rufino and Lages, both in Santa Catarina) in 2012 and 2013, where the matrices were selected. After harvest, the seeds were extracted manually and dry matter, moisture level, germination and seed vigor were evaluated. Germination tests were conducted in germinators of B.O.D type, where conditions were controlled according to each species involved. Gerbox was used and blotting paper worked as substrate for M. cinerascens var. cinerascens and V. discolor and sand used for S. glandulosum - all moistened whenever necessary. In seeds of M. cinerascens var. cinerascens were tested lighting conditions (constant light, alternation with 12 hours photoperiod and dark) and methods for overcoming seed dormancy (sulphuric acid for five minutes, gibberellic acid (GA3) at 0.2% for 12 hours, combination of sulphuric acid for five minutes and GA3 at 0.2% for 12 hours) were tested. To evaluate the germination of V. discolor, the experiment followed a factorial 2 x 2 format, consisting of two stages of maturation and two methods of processing the seeds (with and without blower). In the seeds of S. glandulosum, the experiment was in factorial 2 X 2 X 4, with two stages of maturation; seeds with and without pressure; and four methods of scarification: alternating temperature of 15/30 oC and GA3 at 0.2% for 24 hours; alternating temperature of 20/30 oC and GA3 at 0.2% for 24 hours, plus control. The evaluations were conducted every two days, when the seed that sprouted the first pair of cotyledons was considered germinated. The experiments were conducted from randomized design, with four replicates of 25 seeds per treatment. Data was evaluated at a significance level &#945; = 0.05. It can be concluded that the fruit of M. cinerascens var. cinerascens should be picked in their ripe stage and their seeds germinated under constant light after being soaked in GA3 at 0.2% for 24 hours. The ideal time to harvest the fruit of the V. discolor is when their achenes are immature with green coloration; however, the use of the blower is not efficient for processing. As for S. glandulosum, the ideal time to harvest is when the fruit is open, with the aril of seeds red, and they should be germinated after pressure and use of GA3 for 24 hours at alternating temperatures of 15/30 ºC under constant light / A Floresta Ombrófila Mista, popularmente conhecida como Floresta das Araucárias, está em processo de desmatamento, restando da sua superfície original aproximadamente 1%. Este estudo visou contribuir no processo de restauração/recuperação desta fitofisionomia, ofertando tecnologia na germinação de sementes de três espécies arbóreo-arbustivas nativas, tendo como princípio a colheita na época ideal, a superação da possível dormência e o beneficiamento das sementes. As espécies alvo deste trabalho foram a Miconia cinerascens Miq. var. cinerascens, a Vernonanthura discolor (Spreng.) H. Rob e o Sapium glandulosum (L.) Morong. Para essas espécies citadas foram definidos estádios de maturação para proceder à colheita de frutos na melhor época possível, tendo como referência parâmetros de maturação. As colheitas dos frutos foram realizadas em dois remanescentes de Floresta Ombrófila Mista (Rio Rufino, SC e Lages, SC), em 2012 e 2013. Após a colheita dos frutos, as sementes foram extraídas de forma manual para todas as espécies. Foram avaliados a massa seca, o teor de água, a germinação e o vigor das sementes recém-colhidas. Os testes de germinação foram conduzidos em germinadores tipo B.O.D, em condições controladas de acordo com a espécie. Utilizou-se gerbox e como substrato papel mata-borão para a M. cinerascens var. cinerascens e para a V. discolor e areia para o S. glandulosum, umedecidos quando necessário. Em sementes de M. cinerascens var. cinerascens, foram testadas condições de luminosidade (luz constante, alternância com fotoperíodo de 12 horas e escuro) e métodos para superação da dormência das sementes (ácido sulfúrico por cinco minutos, ácido giberélico (GA3) a 0,2% por 12 horas, combinação de ácido sulfúrico por cinco minutos e GA3 a 0,2% por 12 horas). Para avaliar a germinação das sementes de V. discolor o experimento seguiu em esquema fatorial 2 X 2, constituído de dois estádios de maturação e dois métodos de beneficiamento das sementes (com soprador e sem de soprador). Nas sementes de S. glandulosum, o experimento definitivo seguiu em esquema fatorial de 2 X 2 X 4 (dois estádios de maturação; sementes com e sem pressão; e quatro métodos de superação de dormência: temperatura alternada de 15/30 oC e GA3 a 0,2% por 24 horas; temperatura alternada de 20/30 oC e ácido giberélico GA3 a 0,2% por 24 horas, além da testemunha em ambas as temperaturas alternadas. As avaliações foram realizadas a cada dois dias, onde se considerou germinada a semente que emitiu o primeiro par de cotilédones. Os experimentos foram instalados a partir do delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições de 25 sementes por tratamento. Os dados foram avaliados a um nível de significância &#945; = 0,05. Foi concluído que os frutos de M. cinerascens var. cinerascens devem ser colhidos no seu estádio maduro e as suas sementes colocadas para germinar sob luz constante após imersão em GA3 a 0,2% por 24 horas. A época ideal para realizar as colheitas dos frutos de V. discolor é quando seus aquênios estiverem imaturos com coloração verde, no entanto o uso do soprador não foi eficiente. Já para o S. glandulosum, o momento ideal de colheita é quando o fruto estiver aberto, com o arilo das sementes vermelho, e colocadas para germinar após pressão e com uso de GA3 por 24 horas a uma temperatura alternada de 15/30 ºC sob luz constante

Submitted by Giovana Barros Nunes (giovanabnunes@hotmail.com) on 2018-04-12T15:28:06Z No. of bitstreams: 1 GBN VERSÃO FINAL DISSERTAÇÃO P IMPRESSÃO.pdf: 1111649 bytes, checksum: f77c4c688d28fc8ca13182c8832085f8 (MD5) / Rejected by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: No arquivo submetido ao repositório deve estar inserido o certificado de aprovação (documento obrigatório). A informação sobre a lombada não precisa conter no arquivo pdf inserido. Favor inserir o certificado de aprovação e submeter novamente a sua dissertação no repositório. Agradecemos a compreensão on 2018-04-13T11:25:20Z (GMT) / Submitted by Giovana Barros Nunes (giovanabnunes@hotmail.com) on 2018-04-13T14:08:12Z No. of bitstreams: 1 Dissertação GIOVANA BARROS NUNES VERSÃO DEFINITIVA Repositório.pdf: 1276204 bytes, checksum: 3aba64a51e863966cadeab46cfa01561 (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2018-04-13T17:17:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nunes_gb_me_jabo.pdf: 1276204 bytes, checksum: 3aba64a51e863966cadeab46cfa01561 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-13T17:17:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nunes_gb_me_jabo.pdf: 1276204 bytes, checksum: 3aba64a51e863966cadeab46cfa01561 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este estudo foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o efeito do precursor do peptídeo natriurético tipo C (NPPC) durante o cultivo de pré-maturação in vitro (pré-MIV) de oócitos bovinos sobre: 1) a progressão da maturação nuclear; 2) a expressão gênica das células do cumulus e 3) a aquisição da competência do oócito para o desenvolvimento embrionário in vitro. Os complexos cumulus-oócito (CCOs) foram pré-MIV com 100 nM NPPC por 8 horas (grupo NPPC) e, ao final do período, foram lavados para completa remoção do NPPC e submetidos à MIV por 22h. Após 8h de pré-MIV e após 8h de pré-MIV seguidas de 22h de MIV (duração total do cultivo = 30h) foram avaliadas a progressão da maturação nuclear e a expressão relativa de mRNA nas células do cumulus. O grupo controle (C) foi maturado na ausência de NPPC por até 30h, e as mesmas avaliações anteriores foram realizadas imediatamente após a remoção do ambiente folicular (C0), após 8h de cultivo (C8), após 22h de cultivo (C22) e após 30h de cultivo (C30). Em outro experimento, cujos tratamentos foram idênticos aos supramencionados, os oócitos foram fecundados ao término da MIV e foi avaliado o desenvolvimento embrionário até a fase de blastocistos. Após 8h de cultivo de pré-MIV, a análise da progressão da meiose demonstrou que o grupo C0 apresentou 58,9% de estruturas com configuração de GV1, enquanto que o grupo C8 apresentou apenas 13,9% de estruturas nesta configuração (P<0,05). A proporção de GV1 no grupo NPPC foi semelhante a ambos estes grupos (22,8%; P>0,05). Por outro lado, o grupo C8 apresentou maior taxa de GV3 em relação ao C0 (53,1% vs. 3,62%; P<0,05), sem diferenças com o grupo NPPC (38,7%; P>0,05). Ao final do cultivo de MIV, não foi observada diferença entre os grupos (C22 vs. NPPC vs. C30) com relação à maturação nuclear, todavia, houve maior taxa de oócitos degenerados no C30 em comparação com C22 (11,4% vs. 2,8%; P<0,05). A análise da expressão relativa de genes das células do cumulus após 8h de pré-MIV com NPPC evidenciou aumento (P<0,05) na expressão de genes relacionados à expansão destas células (GREM1, PTGS2/COX2, PTX3, TNFAIP6 e VCAN), à maturação oocitária (BDNF, EGFR, NOS3, PDE5A, PRKCD e STAT3) e ao desenvolvimento embrionário (IGF1R, KRT8 e LUM). Ao final do cultivo de MIV, observou-se no grupo NPPC que o gene PTX3, relacionado à expansão das células do cumulus, além dos genes AREG e BDNF, relacionados à maturação oocitária, e o gene LUM, relacionado ao desenvolvimento embrionário estavam mais expressos em comparação com o grupo C30 (P<0,05). Com relação ao desenvolvimento embrionário, os grupos experimentais não apresentaram diferença (P>0,05) quanto à taxa de clivagem (média de 73,22%). Embora o grupo NPPC não tenha diferido (P>0,05) de C22 e C30 quanto à taxa de blastocistos, houve diferença entre C22 e C30 (69,3 vs. 37,4; P<0,05). Todavia, não houve diferença entre os grupos com relação ao número de células totais (blastômeros) e apoptóticas (P>0,05). Em conclusão, o cultivo de pré-MIV de oócitos bovinos por 8h com 100nM NPPC não bloqueou a retomada da meiose, mas a progressão da meiose ocorreu de forma mais lenta e impediu o envelhecimento e degeneração dos oócitos. O cultivo de oócitos por tempo prolongado (30h) na ausência de NPPC foi prejudicial para o desenvolvimento embrionário, mas o tratamento com NPPC (8h pré-MIV+22h MIV = duração total de 30h) reverteu parcialmente este índice. / The aim of this study was to evaluate the effect of the C-type natriuretic peptide precursor (NPPC) during pre in vitro maturation culture (pre-IVM) of bovine oocytes on: 1) nuclear maturation progress; 2) gene expression in cumulus cells and 3) acquisition of competence for in vitro embryo development. Cumulus oocyte complexes (COCs) were pre-IVM with 100 nM NPPC for 8 hours (NPPC group) and then were washed for the complete removal of NPPC and submitted to IVM for 22h. After 8h pre-IVM followed by 22h IVM (total culture time = 30h) oocytes were evaluated for nuclear maturation progress and cumulus cells for relative mRNA expression. Control group (C) was IVM in the absence of NPPC for up to 30h and the same evaluations were made immediately after follicle removal (C0) and after 8h (C8), 22h (C22) and after 30h of culture (C30). In another experiment with the same treatment, the oocytes were fertilized at the end of IVM and embryo development to the blastocyst stage was evaluated. After 8 hours of pre-IVM culture, meiosis progression analysis showed 58.9% of oocytes in GV1 configuration in C0, while C8 had only 13.9% (P<0.05). The GV1 rates in NPPC did not differ from any group (22.8%; P>0.05). On the other hand, C8 showed higher rates of GV3 in comparison with C0 (53.1% vs. 3.62%; p<0.05) and no differences compared to NPPC (38.7%; P<0.05). At the end of IVM culture, no differences between groups (C22 vs. NPPC vs. C30) were observed in nuclear maturation, however, higher rates of degenerated oocytes were observed in C30 in comparison with C22 (11.4% vs. 2.8%; P<0.05). The relative gene expression analysis in cumulus cells after 8h pre-IVM with NPPC showed an up-regulation in genes related to cumulus cells expansion (GREM1, PTGS2/COX2, PTX3, TNFAIP6 and VCAN), oocyte maturation (BDNF, EGFR, NOS3, PDE5A, PRKCD e STAT3) and embryo development (IGF1R, KRT8 and LUM). At the end of IVM culture, the cumulus cells expansion related gene, PTX3, the oocyte maturation genes, AREG and BDNF, and the embryo development gene, LUM, were up-regulated in NPPC in comparison with C30 (p<0.05). Regarding embryo development, the cleavage rates did not differ in experimental groups (mean around 73,22%). Besides, blastocyst rates did not differ between NPPC (P>0.05) and the other groups, but there was a difference between C22 and C30 (69.3 vs. 37.4%; P<0.05). There was no difference between the groups in total cell number (blastomeres) and apoptotic cells (P<0.05). In conclusion, the pre-IVM culture of bovine oocytes for 8h with 100nM NPPC did not block meiosis resumption, but meiosis progression occurred more slowly and prevented aging and degeneration of the oocytes. The prolonged time of oocyte culture (30h) in the absence of NPPC was detrimental to embryo development, but NPPC treatment (8h pre-IVM + 22h IVM = total duration of 30h) partially reversed this effect.

As técnicas de cultivo de folículos e oócitos in vitro, com o objetivo de se obter oócitos maduros para procedimentos de Reprodução Assistida (RA), têm sido aplicadas em diferentes contextos. O sucesso destes procedimentos está diretamente relacionado ao sistema de cultivo utilizado. A utilização de células da granulosa (CG) humanas cultivadas in vitro como um suporte para o co-cultivo destes oócitos imaturos e folículos tem sido descrita por alguns autores. A criopreservação destas células, considerando-se o contexto de sua obtenção em procedimentos de RA, permitiria a viabilização da aplicação destas células na prática clínica diária. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi padronizar o congelamento de células da granulosa (CG) humanas para aplicação em sistemas de co-cultivos de folículos e oócitos imaturos. Foram obtidas CG de 20 voluntárias em tratamento de reprodução assistida, células de 10 voluntárias foram cultivadas em meio ?-MEM suplementado para interrupção da luteinização e congeladas após 48 horas em container \"Cryostep\" (grupo 2C- 2 cultivos) (etapa 2) e células de 10 voluntárias foram congeladas em container \"Cryostep\" sem cultivo prévio (grupo CD- congelamento direto) (etapa 3). Após o descongelamento estas células foram (re)cultivadas por 144 horas, com troca de meio em 48, 96 e 144 horas para avaliações da produção de estradiol (E2) e progesterona (P4) (ng/mL). Verificamos redução na contagem celular e na viabilidade celular tanto no método de congelamento direto (CD) quanto no método com dois cultivos (2C) após o descongelamento (p<0,05), e isso se refletiu na produção de estradiol e progesterona que foi maior nas culturas de células frescas em relação às células criopreservadas (p<0,05). Porém, a relação de E2/célula foi mantida após o descongelamento, sugerindo que esta redução na produção se deve à redução no número de células, as que sobrevivem se mantém normofuncionantes (p=0,23).O CD foi mais eficiente pois permitiu uma maior recuperação celular e uma melhor viabilidade quando comparado ao grupo 2C. A relação estradiol/progesterona foi mantida em todos os tempos de cultivo, fresco, CD e 2C (p>0,05), indicando que a característica funcional destas células foi preservada após o descongelamento. Concluímos que a criopreservação de CG humanas obtidas durante a captação de oócitos compromete a contagem celular e a viabilidade geral da cultura, entretanto, a capacidade funcional e a característica destas células se mantêm preservadas (manutenção das relações E2/célula e E2/P4) / Follicle and oocyte in vitro culture techniques, aiming to obtain mature oocytes for Assisted Reproductive Treatments (ART), have been applied to different contexts. The success of these procedures depends on the culture system used. The use of human granulosa cells (GC) in co-culture systems for follicle and oocyte maturation have been described by some authors. The cryopreservation of these cells, considering the context in which they are obtained during ART, would enable the usage of these cells in such procedures in daily clinical practice. Thus, the objective of this study was to standardize the freezing protocol for human granulosa cells (GC) for future applications in co-culture systems for follicle and oocyte maturation. Twenty volunteers submitted to ART donated their granulosa cells after oocyte retrieval, 10 were cultivated previously in order to interrupt the luteinization process and then frozen \"Cryostep\" container (group 2C- two cultures) (step 2) and 10 were directly frozen with no previous culture in the \"Cryostep\" container (group DF- direct freeze) (step 3). After thawing these cells were (re)cultured for 144 hours, with medium exchange at 48, 96 and 144 hours to evaluate the estradiol (E2) and progesterone (P4) production (ng/mL). After thawing, there was a reduction in the cell number (p<0,05) and cell viability in both methods, the direct freezing (DF) and the two cultures (2C) (p<0,05); this had an impact in the production of estradiol and progesterone, which were higher in fresh cultures than in the frozen ones (p<0,05). However, the E2/cell ratio was maintained after thawing (p=0.23), suggesting that this impairment in steroid production was probably due to the reduction in the cell count. The cells that survive remain functionally normal. The DF was more efficient since it allowed greater cell recovery and better viability when compared to 2C. The estradiol/progesterone ratio was maintained in all culture times, in the fresh, DF or 2C groups (p>0.05), indicating that the functional characteristic of these cells was preserved post-thawing. We conclude that cryopreservation of human GC obtained during oocyte retrieval compromises the cell count and the overall viability of the culture; however, the functional capacity and the characteristic of these cells are preserved (maintenance of E2/cell and E2/P4 relations)

Até o momento a literatura não determinou qual o melhor estadio de maturação (imaturo ou maduro) para que o oocito mantenha sua competência para o desenvolvimento reprodutivo após a criopreservação. O objetivo deste estudo foi determinar em qual estadio meiótico (imaturo -VG (vesícula germinativa) ou maduro- MII (metáfase II)) o oócito é menos susceptível ao dano na criopreservação, utilizando modelo experimental bovino. Foram utilizados ovários de vacas abatidas em matadouro, após a aspiração dos folículos, os oócitos imaturos (VG) foram selecionados para a maturação in vitro e vitrificação, e foram divididos em três grupos: 1) oócitos maturados in vitro e não submetidos à vitrificação (CONTROLE); 2) oócitos vitrificados imaturos (VG), descongelados e submetidos à maturação in vitro (CRIO-MIV); 3) oócitos maturados in vitro (MII), vitrificados e descongelados (MIV-CRIO). Os oócitos foram avaliados quanto a: a)maturação nuclear pela técnica de orceína acética; b) integridade da zona pelúcida (ZP) através de microscopia de polarização; c) viabilidade oocitária pela técnica de DEAD-LIVE; d) desenvolvimento embrionário (taxa de clivagem, produção e eclosão de blastocistos) através da fertilização in vitro (FIV) e ativação partenogenética (AT). Não houve diferença na capacidade de maturação nuclear entre os oócitos frescos e descongelados no grupo CRIO-MIV (p=0,23). Em relação à zona pelúcida a totalidade dos oócitos (100%) nos três grupos apresentou leitura de zona pelúcida positiva, não havendo correlação com evolução embrionária posterior. Na análise de viabilidade celular pelo DEAD-LIVE verificou-se que houve redução da viabilidade do grupo MIV-CRIO (27%) quando comparado com controle (84%) (p<0,0001). Na análise do potencial de desenvolvimento embrionário o grupo controle apresentou melhores taxas de clivagem após FIV (80%) e AT (58%), do que os grupos CRIO-MIV (28%; p<0,0001; 28%; p=0,0002, respectivamente) e MIV-CRIO (26%; p<0,0001; 22%, p<0,0001,respectivamente). As taxas de formação de blastocisto e eclosão após FIV nos grupos CRIO-MIV, MIV-CRIO e após AT no grupo MIV-CRIO foram nulas. Houve a produção e eclosão de apenas um blastocisto no grupo CRIO-MIV após AT. No modelo experimental utilizado, o procedimento de vitrificação comprometeu parcialmente a viabilidade dos oócitos medida pela técnica de DEAD- LIVE e completamente o desenvolvimento embrionário subseqüente, independente do estadio de maturação meiótica (VG ou MII) durante a criopreservação. No entanto, oócitos vitrificados em estadio de VG e submetidos à MIV foram meioticamente competentes e progrediram até o estadio de MII, sugerindo que o dano não compromete a capacidade de maturação nuclear do oócito. Este estudo não conseguiu determinar qual o melhor estadio meiótico oocitário para criopreservação, já que os dois estadios meióticos (VG e MII) se mostraram igualmente prejudicados pela criopreservação em relação à capacidade reprodutiva. / Until the present literature has not achieved a consensus regarding the best maturation stage for oocyte to maintain their reproductive capacity after cryopreservation. The aim of this study was to determine, using an experimental bovine model, in which stage of development (VG stage, immature, or MII stage, post-maturation in vitro) the oocyte is less susceptible to damage during cryopreservation. Immature oocytes (VG) from the ovaries of slaughtered cows were selected for in vitro maturation or vitrification and divided into three groups. The first group (CONTROL) consisted of immature oocytes, matured in vitro without vitrification; the second group (CRYO-IVM) consisted of vitrified immature oocytes thawed and submitted to in vitro maturation; and the third group (IVM-CRYO) consisted of matured in vitro oocytes submitted to vitrification and thawing. The oocytes were evaluated for: nuclear maturation by acetic orcein staining; integrity of the zona pellucida using a polarized microscope; cell viability by the Dead-Live technique; and embryo development (cleavage, production and hatching rate) by in vitro fertilization and parthenogenetic activation. There was no difference in capacity of nuclear maturation between fresh and thawed oocytes (p=0.23). Regarding the zona pellucida (ZP), all oocytes (100%) of all three groups (control, CRYO-IVM and IVMCRYO) presented a positive ZP reading, with no correlation with later embryo evolution. DEAD-LIVE analysis of cell viability revealed reduction of viability in the IVM-CRYO group (27%) compared to control (84%) (p<0.0001) and to the CRYO-IVM group (56%) (p=0.017), with no difference between the last two groups (p=0.055). Analysis of the potential for embryo development by means of in vitro fertilization showed that the control group presented better cleavage and blastocyst formation rates than the CRYO-IVM (p<0.0001 and p<0.0001, respectively) and the IVM-CRYO (p<0.0001 and p=0.0004, respectively) groups. Analyzing the potential for embryo development the control group presented better cleavage by means of in vitro fertilization (80%) and parthenogenetic activation (58%) than the CRYOIVM (28%; p<0,0001; 28%; p=0,0002, respectively) and the IVM-CRYO groups (26%; p<0,0001; 22%, p<0,0001,respectively) Analysis of blastocyst formation rates and hatching after FIV and AT in CRYO-IVM and IVM-CRYO groups were null. Vitrification of bovine oocytes causes great impairment of their reproductive capacity regardless of the stage of maturation at the time of freezing. However the vitrified immature oocytes submitted to IVM maintained their capacity of nuclear maturation, as they achieved MII stage. This study was not able to determine which stage was better in reducing crio damage, as both stages (VG and MII) presented equally impaired by the process.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA15MA161.pdf: 119035 bytes, checksum: a5dfaf04161545272882e1423c258dc0 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The in vitro embryo production has a strong commercial and preservationist impact in Brazil. However, there are still barriers to be overcome, since the in vitro maturation does not mimic the in vivo maturation. The maturation optimization increases the embryo competence and quality, making them more cryotolerants. The meiotic blockage, after oocytes removal from their follicular environment, may be a good alternative. Three experiments (n = 2848) evaluated the Cordicepim as a meiotic blocker in bovine oocytes in different culture media, and its influence on embryonic development. Follicles 3-8 mm diameter, were punctured from abattoir ovaries and allocated into 4 groups: Control (TCM-199 + pyruvate, FSH, LH and SFB); MIVCord (TCM-199 + Pyruvate, FH, LH, FCS, Cordicepim); TCMCor (TCM-199 + Cordicepim) and TCMCont (TCM-199), followed by standard maturation (IVM) for 20 or 24 h. The effect of meiosis blockage in embryo production was assessed by cleavage and blastocyst rate, and total number of cells assessed. To evaluate the stage of maturation, oocytes were stained with Hoechst and evaluated by microscopy. Quantitative data were analyzed by ANOVA and Tukey test and the qualitative data by chi-square, with 5% significance. Cordicepim did not affect cleavage (60.7 vs. 56.4%) and blastocysts (30.7 vs. 24.8%) rates when added to supplemented medium (MIVCord). However, there was a reduction in cleavage (42%) and blastocysts (12.1%) rates when added to a medium without supplements (TCMCord). On the kinetics of maturation after 6 hours of pre culture, only TCMCord group maintained most oocytes blocked. Cell density of the produced embryos (26 h maturation) in MIVcont groups (189.2 ± 11.4), MIVCord (187.1 ± 12.1) and TCMCont (171.2 ± 10.4) did not differ and were higher than TCMCord group (119.7 ± 11.4). Already, with 30 h maturation cell density was similar between embryos from control group (224.2 ± 17.5) and TCMCord group (240.1 ± 10.4). However, even with 30 h maturation, only 64.8% of the oocytes completed maturation in TCMCord group, while 100% maturated in Control group. We conclude that 6 h of culture in cordicepim in the absence of gonadotropins, partially inhibits the meiosis in oocytes, and this inhibition is not successfully reversed even after 24 hours of maturation pattern in the absence of cordicepim. The cordicepim reduces embryo production when in vitro maturation is performed for 26 h. However, within 30 h maturation time, the Cordicepim does not affect embryo production rate. Yet, the cordicepim prevents the cumulus cells expansion in an irreversible manner / A produção in vitro de embriões tem um forte impacto comercial e preservacionista no Brasil. Entretanto ainda existem barreiras a serem superadas, já que a maturação in vivo não é totalmente mimetizada pela maturação in vitro. A otimização da maturação pode aumentar a competência e a qualidade embrionária, tornando-os mais criotolerantes. Uma boa alternativa pode ser o bloqueio meiótico reversível. Três experimentos (n = 2848) avaliaram o Cordicepim como bloqueador meiótico para oócitos bovinos, em diferentes meios de cultivo e sua influência no desenvolvimento embrionário. Folículos de 3-8 mm, obtidos por aspiração de ovários de frigorífico foram distribuídos em 4 grupos: Controle (TCM-199 + piruvato, FSH, LH e SFB) MIVCord (TCM-199 +Piruvato, FH, LH, SFB, Cordicepim) TCMCor (TCM-199 + Cordicepim) e TCMCont (TCM-199), seguido de maturação padrão (MIV) por 20 ou 24 horas. O efeito do bloqueio meiótico na produção de embriões foi avaliado pela taxa de clivagem, blastocisto e número total de células. Para avaliação do estágio de maturação, os oócitos foram corados com Hoechst e avaliados por microscopia. Os dados quantitativos foram submetidos à ANOVA e teste de Tukey e os qualitativos ao qui-quadrado, com 5% de significância. O Cordicepim não influenciou as taxas de clivagem (60,7 vs 56,4%) e blastocistos (30,7 vs 24,8%), quando empregado em meio suplementado (MIVCord). Porém, houve uma redução na taxa de clivagem (42%) e blastocistos (12,1%), quando empregado em meio sem suplementos (TCMCord). Na cinética de maturação nuclear após 6 horas de pré-maturação, apenas o grupo TCMCord manteve a maioria dos oócitos bloqueados (67%). A densidade celular dos embriões produzidos (26 h maturação) nos grupos controle (189,2 ± 11,4), MIVCord (187,1 ± 12,1) e TCMCont (171,2 ± 10,4) não diferiram entre si e foram superiores ao grupo TCMCord (119,7 ± 11,4). Já com 30 h de maturação a densidade celular dos embriões foi semelhante entre os grupos controle 30 (224,2 ± 17,5) e TCMCord 30 (240,1 ± 10,4). Porém, mesmo com 24 h de maturação padrão, apenas 64,8% dos oócitos do grupo TCMCord 30 completaram a maturação, enquanto no grupo controle 100% maturaram. Conclui-se que 6 h de pré-maturação em cordicepim, na ausência de suplementos, inibe parcialmente a meiose em oócitos bovinos, porém esta inibição não é revertida com êxito mesmo após 24 horas de maturação padrão na ausência de cordicepim. O cordicepim reduz a produção de embriões in vitro com 26 h de maturação. Já com 30 h de maturação, o Cordicepim não influencia a taxa de produção embrionária. Ainda, o cordicepim impede de forma irreversível a expansão das células do cumulus