Submitted by Luiza Maria Pereira de Oliveira (luiza.oliveira@ufpe.br) on 2015-05-18T14:57:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_Ciria Vieira Barbosa.pdf: 1682880 bytes, checksum: 405863d4d293c22faf7b3cadd39e3e25 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-18T14:57:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_Ciria Vieira Barbosa.pdf: 1682880 bytes, checksum: 405863d4d293c22faf7b3cadd39e3e25 (MD5) Previous issue date: 2015-04-06 / A alopecia androgênica (AGA) é a mais comum das doenças crônicas dermatológicas e, entre os tratamentos utilizados para esta disfunção, o minoxidil (MNX) a 2% e 5% em soluções hidroalcoólicas tópicas apresenta sintomas relacionados à absorção sistêmica do fármaco, irritação do couro cabeludo devido ao álcool contido na formulação e retorno dos sintomas após interrupção do tratamento. O objetivo deste trabalho foi preparar, caracterizar e avaliar o perfil de liberação, a retenção no estrato córneo (EC) e nos folículos pilosos do MNX em lipossomas (LMNX) e destes lipossomas incorporados ao gel de hidroxipropilmetilcelulose (LMNX/HPMC). Estudos de estabilidade, difração de Raios-X (DR-X), espectroscopia no infravermelho (FTIR) e calorimetria diferencial exploratória (DSC) foram realizados para LMNX/HPMC (4 mg/mL). O perfil de liberação in vitro, retenção e permeação foi realizado em células de difusão de Franz, comparando-se às formulações LMNX e LMNX/HPMC a solução hidroalcoólica de MNX (20 mg/mL). A atividade promotora de crescimento capilar in vivo de LMNX/HPMC foi avaliada em ratos Wistar tratados por via tópica com os LMNX/HPMC e medicamento referência (Regaine®) a 2%. Análises de DR-X, FTIR e DSC sugerem interação fármaco-lipossoma e lipossoma-hidrogel. Porém, nos resultados da liberação in vitro, os coeficientes de difusão do MNX a partir de LMNX (D×10-6 = 4,8205±0,0451 cm2/s) e a partir de LMNX/HPMC (D×10-6 = 4,5900±0,0451 cm2/s) são semelhantes (p > 0,05) indicando que HPMC não interfere na liberação do fármaco. A retenção no EC in vitro apresentou-se na seguinte ordem decrescente: MNX em solução (19,05±1,58 μg/cm2) > LMNX (8,65±2,15 μg/cm2) > LMNX/HPMC (4,08±0,70 μg/cm2). Contudo, a retenção in vitro de MNX nos folículos a partir de LMNX/HPMC (2,42±0,77 μg/cm2) foi semelhante à obtida a partir da solução de MNX (4,40±2,81 μg/cm2) e significativamente menor que a obtida a partir de LMNX (14,60±4,47μg/cm2), possivelmente devido à maior habilidade de formulações lipossomais promoverem depósito folicular. Ao contrário do observado para o MNX em solução, a partir das formulações lipossomais, não foi detectada a presença de MNX no meio receptor. Nos estudos in vivo, o número de folículos por milímetro linear de pele apresentou-se na seguinte ordem decrescente: grupo referência (25,82±1,04) > LMNX/HPMC (20,97±0,46) > controle (11,79±0,25), indicando a grande eficiência de LMNX/HPMC, que apesar de possuir uma concentração de MNX vinte vezes menor que o medicamento referência, sua atividade foi apenas 19% inferior à deste. LMNX/HPMC foi capaz de prolongar a fase anágena de folículos dos animais, desde a primeira semana de tratamento (100% de folículos em fase anágena) e apresentou o menor tempo entre início e final do crescimento de novos pelos comparado ao produto referência e ao grupo controle. Portanto, conclui-se que o sistema lipossomal foi capaz de evitar a penetração de MNX através da pele, mostrou-se hábil em promover depósito folicular e que sua incorporação ao gel de HPMC não influenciou na liberação do fármaco, constituindo-se assim em formulações adequadas ao uso tópico do minoxidil.

Orientador: Francisco Benedito Teixeira Pessine / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-07T11:44:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Calderini_Adriana_M.pdf: 3626167 bytes, checksum: 65a0e866a04669d0055a59e424f4d2c5 (MD5) Previous issue date: 2006 / Mestrado / Físico-Química / Mestre em Química

Orientador: Juliano Vilaverde Schmitt / Resumo: Fundamentos: As unhas são anexos cutâneos queratinizados tendo um ritmo de crescimento de até 3 mm/mês nos quirodáctilos. Biotina é vitamina hidrossolúvel de fonte exógena, que provou aumentar a espessura da lâmina ungueal, sob regime de 2,5mg oral por 6-15 meses. O minoxidil tópico 5% 2x/dia, que tem ação comprovada no folículo piloso, foi pouco estudado na velocidade do crescimento ungueal. Não há estudos comparativos com biotina oral, ou de sua associação ao minoxidil tópico. Este estudo objetiva avaliar a eficácia do minoxidil tópico e biotina oral no aumento da velocidade de crescimento das unhas das mãos. Casuística e métodos: Ensaio clínico quasi-experimental com desenho fatorial, aberto e paralelo, envolvendo 37 voluntários adultos saudáveis, alocados em 4 grupos: controle, minoxidil 5% tópico 2x ao dia exclusivo, biotina 2,5mg oral exclusiva e uso combinado, que foram comparados quanto à velocidade do crescimento ungueal do 2o e 4o quirodáctilos, quanto ao status basal, após 14 e 28 dias de tratamento. Todos os indivíduos foram observados, sem intervenções, 14 dias após a inclusão, iniciando o tratamento após esse período, com duração de 28 dias, e reavaliações em 28 e 42 dias após a inclusão no estudo. A idade, sexo, dominância da mão, onicofagia dos pacientes foram levados em conta para comparação da velocidade de crescimento ungueal nos períodos de tratamento e no período sem intervenção, durante todo o estudo. Pré-tratamento, evidenciou-se crescimento basal mais ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Background: The nails are keratinized cutaneous attachments, their growth rate reaches up to 3 mm / month in the chirodactyls. Biotin is a water-soluble vitamin from an exogenous source that has been shown to increase the thickness of the nail plate under oral 2.5mg regimen for 6-15 months. Similarly to topical minoxidil 5% 2x / day, with proven action on the hair follicle, which has been poorly studied at the rate of nail growth. There are no comparative studies with oral biotin, or its association with other treatments. This study aims to evaluate the efficacy of topical minoxidil and oral biotin in increasing the growth velocity of fingernails. Methods: Quasi-experimental, factorial, open and parallel clinical trial involving 37 healthy adult volunteers, allocated into 4 groups: control, minoxidil 5% topical 2x daily exclusive, oral 2.5mg exclusive oral and combined use, which were compared for nail growth velocity of the 2nd and 4th chirodactyls, as to basal status, after 14 and 28 days of treatment. All subjects were observed without intervention for 14 days after inclusion, starting treatment after this period, lasting 28 days, and reassessments at 28 and 42 days after inclusion in the study. Patients' age, gender, hand dominance, onychophagy were taken into account when comparing nail growth velocity in the treatment and non-intervention periods throughout the study. Results: Pretreatment showed more pronounced basal growth in the dominant hands and among the onychopha... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-17T12:31:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-17T12:31:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-17T12:32:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-17T12:32:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2017-03-30 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The topical treatment usually used to combat hair loss is the daily application of minoxidil lotion (MX) (2 to 5%) directly to the scalp. However, pruritus, dryness, scaling of the scalp and contact dermatitis are adverse effects caused by the presence of propylene glycol and ethanol, constituents of the topical MX solution. The objective of this study was to develop and characterize microemulsion systems containing MX in concentrations equal and superior to those available in the market, free of ethanol and propylene glycol. The selection of the oil phase to compose the microemulsion systems occurred by quantifying the solubilized minoxidil in each oil by UV-vis spectrophotometry. For the selection of the surfactant, cosurfactant and the cosurfactant / surfactant ratio (C / T), it was necessary to construct pseudoternary phase diagrams by the titration method. In the selection of the diagram and the points for the preparation of the formulations, it was prioritized to obtain oil-in-water (O / W) type systems with the lowest possible surfactant / cosurfactant amounts. Another determining factor was the amount of MX incorporated. Each formulation was prepared by adding powdered MX to the microemulsion (ME). All formulations were characterized as droplet size, polydispersity index (PDI), transmittance, pH, zeta potential, refractive index (IR), conductivity, viscosity and amount of drug incorporated. The oleic acid was the oil phase that presented the highest amount of solubilized MX (211 ± 3.57 mg / mL) and was therefore chosen for the construction of the pseudoternary phase diagrams. After the construction and analysis of the diagrams, the Tween® 20 surfactant together with the 1,2-hexanediol co-surfactant were selected in the 1: 1 C / T ratio. In total, six formulations were prepared containing 2, 5, 8, 9 and 10% MX. The droplet size in these formulations ranged from 25.33 to 151.63 nm. The PDI is 0.256 to 0.398, indicating that the droplet distribution is monodisperse. The transmittance varied between 96.8 and 99.6%, and the refractive index, from 1.403 to 1.4551, evidencing the transparent nature of these formulations. The measured pH was between 5.3 and 5.89, compatible with the pH of the scalp and the stability of the MX. The MEs exhibited Newtonian flow with low viscosity average, between 23.27 and 95.16 cP, characteristic of these systems. The use of a nonionic surfactant resulted in a zeta potential near zero (-1.08 to 0.023). Considering that the MEs were obtained with the use of a predominantly hydrophilic surfactant and water content higher than that of oil, all developed formulations were considered as water in oil (A / O) (conductivity 29.8 to 91.8 μS / Cm). The drug content in the formulations ranged from 96.10 to 101.31%, confirming that the MX added to each formulation was effectively solubilized by the microemulsified system. The amount of drug dosed in the formulations was 20.80 to 100.44 mg / mL, which is equivalent respectively to the nominal value of 2 and 5%, which is the concentration of minoxidil found in the commercial formulations, and higher, To 10%. Thanks to the introduction of MX in oleic acid, the removal of propylene glycol and ethanol was possible. The development of formulations without these adjuvants are of great importance for the adhesion of patients who abandon treatment due to the appearance of adverse reactions to these constituents. / O tratamento tópico usualmente empregado para o combate à queda de cabelos é a aplicação diária de loção de minoxidil (MX) (2 a 5%) diretamente no couro cabeludo. Entretanto, prurido, ressecamento, descamação do couro cabeludo e dermatite de contato são efeitos adversos ocasionados pela presença de propilenoglicol e etanol, constituintes da solução tópica de MX. O objetivo deste estudo foi desenvolver e caracterizar sistemas microemulsionados contendo MX em concentrações iguais e superiores às disponíveis em mercado, livres de etanol e propilenoglicol. A seleção da fase oleosa para compor os sistemas microemulsionados ocorreu mediante a quantificação do minoxidil solubilizado em cada óleo, por espectrofotometria UV-vis. Para a seleção do tensoativo, cotensoativo e da razão cotensoativo/tensoativo (C/T) foi necessária a construção de diagramas de fases pseudoternários, pelo método de titulação. Na seleção do diagrama e dos pontos para o preparo das formulações foi priorizada a obtenção de sistemas do tipo óleo em água (O/A) com quantidades de tensoativo/cotensoativo mais baixas possíveis. Outro fator determinante foi a quantidade de MX incorporada. Cada formulação foi preparada pela adição do MX em pó à microemulsão (ME). Todas as formulações foram caracterizadas quanto tamanho de gotícula, índice de polidispersão (PDI), transmitância, pH, potencial zeta, índice de refração (IR), condutividade, viscosidade e quantidade de fármaco incorporada. O ácido oleico foi a fase oleosa que apresentou a maior quantidade de MX solubilizado (211 ± 3,57 mg/mL) sendo, por este motivo, escolhido para a construção dos diagramas de fases pseudoternários. Após a construção e análise dos diagramas, o tensoativo Tween® 20 juntamente com o cotensoativo 1,2-hexanediol foram selecionados, na razão C/T 1:1. Ao total, seis formulações foram preparadas contendo 2, 5, 8, 9 e 10% de MX. O tamanho de gotícula nestas formulações variou de 25,33 a 151,63 nm. O PDI, de 0,256 a 0,398, indicando que a distribuição de gotículas é monodispersa. A transmitância variou entre 96,8 e 99,6%, e o índice de refração, de 1,403 a 1,4551, evidenciando a natureza transparente destas formulações. O pH medido ficou entre 5,3 e 5,89, compatível com o pH do couro cabeludo e o de estabilidade do MX. As MEs exibiram fluxo newtoniano com média de viscosidade baixa, entre 23,27 a 95,16 cP, característica destes sistemas. O uso de um tensoativo não-iônico resultou em um potencial zeta próximo de zero (-1,08 a 0,023). Considerando que as MEs foram obtidas com o uso de um tensoativo predominantemente hidrofílico e teor de água superior ao de óleo, todas as formulações desenvolvidas foram consideradas do tipo água em óleo (A/O) (condutividade 29,8 a 91,8 μS/cm). O teor de fármaco nas formulações variou de 96,10 a 101,31%, confirmando que o MX acrescido a cada formulação foi efetivamente solubilizado pelo sistema microemulsionado. A quantidade de fármaco doseada nas formulações foi de 20,80 a 100,44 mg/mL, o que equivale, respectivamente, ao valor nominal de 2 e 5%, que é a concentração de minoxidil encontrada nas formulações comerciais, e superiores, 8 a 10%. Graças a veiculação do MX no ácido oleico, a retirada do propilenoglicol e etanol foi possível. O desenvolvimento de formulações sem estes adjuvantes são de suma importância para a adesão de pacientes que abandonam o tratamento em decorrência do surgimento de reações adversas a estes constituintes.

In dieser Arbeit wurden die histologischen und immunhistologischen Auswirkungen der Kombination aus Inhibition des PD-1/PD-1L-Checkpoints und PLOD-2-Blockade untersucht. Es konnte festgestellt werden, dass die Immuntherapie anschlägt und dabei als Monotherapie die stärksten Tumornekrosen induzierte. Das Ansprechen auf die Immuntherapie mit BMS-1166 war jedoch sehr unterschiedlich. In der Kombination mit dem PLOD-2-Inhibitor Minoxidil wurden hingegen einheitlichere, aber auch geringere Nekroseanteile festgestellt. Dabei muss jedoch beachtet werden, dass die Kombinationsbehandlung die stärkste Auswirkung auf das Tumorwachstum hatte. So waren diese Tumore die kleinsten und leichtesten, was in Zusammenhang mit dem ausgeprägten kollagenen Netzwerk dieser Gruppe stehen könnte. Die Kombination zeigte keine Auswirkung auf die Tumorvaskularisierung und die Zellteilungsaktivität, sowie auch keine Auffälligkeiten bezüglich der Infiltration mit Immunzellen. Lungenmetastasen kamen in allen Behandlungsgruppen vor. Bei der Kombinationsbehandlung waren jedoch die durchschnittlich größten Lungenmetastasen festzustellen. In dieser Arbeit konnte keine klare signifikante Verbesserung der Brustkrebstherapie durch die Kombination von Inhibition der Kollagensynthese durch PLOD-2-Blockade und Inhibierung des PD-1/PD-1L-Checkpoints aufgezeigt werden. Das kollagene Netzwerk war auffällig und sollte genauer untersucht werden. Es lohnt sich weiter an Kombinationen aus Immuntherapeutikum und EZM-Destabilisierung zu arbeiten. Die TME muss dabei weiterhin Ansatzpunkt der Forschung bleiben, um eine erleichterte Penetration der Medikamente in den Tumor zu erzielen. Hier ist der Austausch des Medikaments zur EZM-Destabilisierung empfehlenswert. Die LOX-Inhibierung hat sich bereits in Kombination mit Chemotherapie als vorteilhaft erwiesen (Rossow et al., 2018) und sollte nachfolgend in einem ähnlichen Versuchsaufbau mit dem Immuntherapeutikum BMS-1166 ausprobiert werden. / In this thesis, the histological and immunohistological effects of the combination of PD-1/PD-1L checkpoint inhibition and PLOD-2 blockade were investigated. It was found, that the immunotherapy was effective and induced the strongest tumor necrosis as monotherapy. The response to immunotherapy with BMS-1166 was highly variable. In combination with the PLOD-2 inhibitor minoxidil, more uniform but also lower levels of necrosis proportions were observed. It must be noted, that the combination treatment had the strongest effect on tumor growth. Thus tumors were the smallest and lightest, which may be related to the pronounced collagenous network of this group. The combination showed no effect on tumor vascularization and cell division activity, as well as no abnormalities regarding infiltration with immune cells. Lung metastases occurred in all treatment groups. However, in the combination treatment group were observed the largest lung metastases. In this thesis, no clear significant improvement of breast cancer therapy could be shown with the combination of inhibition of collagen synthesis by PLOD-2 blockade and inhibition of the PD-1/PD-1L checkpoint. The collagen network was conspicuous and should be investigated further. It is worthwhile to further investigate combinations of immunotherapeutic agents and ECM destabilization. The TME must remain the starting point of research to facilitate drug penetration into the tumor. Here, the replacement of the Drug for ECM destabilization is recommended. LOX inhibition has already been shown to be beneficial in combination with chemotherapy (Rossow et al., 2018) and should be subsequently tested in a similar experimental setting with the immunotherapeutic BMS-1166.

Les fibres élastiques, constituées essentiellement d'élastine (90%), procurent aux vaisseaux sanguins leurs propriétés d'élasticité et de résilience. L'élastine est synthétisée a partir d'un précurseur –la tropoélastine- seulement depuis la grossesse jusqu'à la fin de la puberté. Au cours du vieillissement physiologique, l'augmentation de l'expression des enzymes élastolytiques, la calcification aortique ainsi que la glycation des protéines constituent les principaux mécanismes biologiques de la dégradation du stock non-renouvelable des fibres élastiques et, par conséquence, de la rigidité artérielle. Dans ce travail de thèse, nous avons étudié l'impact du traitement chronique (3 mois) par le minoxidil (120 mg/L) ou par un extrait de graines d'aneth (5% ou 10 % v/v) -dans l'eau de boisson- sur la production d'élastine in vivo et sur le fonctionnement et la structure des artères élastiques (aorte abdominale ou ascendante) des souris adultes (6 mois) et âgées (24 mois) des deux sexes. Le traitement par l'extrait d'aneth a ré-induit la synthèse des fibres élastiques chez les souris adultes et âgées, alors que, chez les souris traitées par le minoxidil, nous avons observé l'apparition de ces néo-fibres seulement chez les souris âgées. D'autre part, les deux traitements ont préservé l'intégrité des lames élastiques en diminuant nettement leur taux de ruptures lié à l'âge. Le dosage des protéines de la matrice extracellulaire a révélé que le traitement par l'extrait d'aneth ou par le minoxidil augmente la quantité de desmosine (élastine) dans la paroi artérielle des souris femelles, alors que, chez les souris males, seulement l'extrait d'aneth a induit une faible augmentation de cette protéine. L'étude biomécanique de l'aorte a montré que les deux traitements améliorent significativement la distensibilité de l'aorte, surtout chez les souris femelles. En outre, le traitement par l'extrait d'aneth a réversé l'hypertrophie cardiaque lié à l'âge seulement chez les souris males âgées. Nos résultats montrent que l'extrait d'aneth et le minoxidil possèdent des potentialités anti-vieillissement cardiovasculaire chez la souris. Ces deux produits pourraient faire l'objet des études cliniques ultérieures pour confirmer leurs effets chez l'Homme. / Elastic fibers, primarily composed of elastin (90%), endow the blood vessels with the mechanical properties of elasticity and resilience, which are essential to their function. Elastin is synthesized as a precursor, tropoelastin, only from the late stages of gestation until late childhood. During physiological aging, increased elastolytic activity, aortic calcification and protein glycation are the main mechanisms of elastic fibers degradation and, thereafter, arterial rigidity. In this work, we investigated the impact of chronic treatment (3 months) with dill extract (5% or 10% v/v) or with minoxidil (120 mg/L) -in drinking water- on elastin production in vivo and structure and function of elastic arteries (abdominal and ascending aorta) of adult (6-month-old) and aged (24-month-old) male and female mice. Treatment with dill extract re-induced the elastic fiber formation in both adult and aged mice. However, treatment with minoxidil induced elastic fiber formation in aged mice only. Both treatments preserved elastic lamella integrity by reducing their age-related disruptions. Extracellular matrix protein quantification revealed that chronic treatment with dill extract or minoxidil increase desmosine (elastin) levels in the arterial wall of female mice, whereas in male mice, only dill extract slightly increases the desmosine level. Regarding the blood vessel biomechanics, both treatments enhanced aortic distensibility, especially in female mice. Moreover, treatment with dill extract reversed the age-related cardiac hypertrophy only in male mice. Our results suggest that dill extract and minoxidil have potential anti-aging effects on the cardiovascular system. Both products may be of interest to subsequent clinical trials to confirm their effects in human beings.

Diante da hipótese de que micropartículas poliméricas podem atravessar a barreira epidérmica através da rota transfolicular, e baseado na evidência de que a iontoforese é um método que consegue direcionar a liberação de fármacos para os folículos pilosos, este trabalho teve como objetivo estudar in vitro a permeação cutânea do minoxidil sulfato (MXS), fármaco utilizado no tratamento da alopecia androgênica, tanto em sua forma microencapsulada como não encapsulada utilizando ou não a iontoforese, na tentativa de aumentar, controlar e direcionar a sua liberação tópica para o folículo piloso. O MXS foi primeiramente incorporado em um gel hidrofílico contendo 2,0% (m/m) do ativo e sua permeação e retenção cutânea in vitro verificada com e sem a presença de corrente elétrica durante 6 h, utilizando células de difusão e pele de orelha de porco. A quantidade de MXS retida no EC da pele foi determinada e diferenciada daquela retida nos folículos pilosos utilizando-se a técnica denominada tape stripping diferencial. Foi observado que o fluxo passivo de fármaco através da pele aumentou 150 vezes com aplicação de iontoforese anódica e que o aumento do pH da formulação de 3,5 para 5,5 restringiu 3 vezes essa permeação iontoforética e aumentou a retenção do MXS no EC e folículos pilosos. Estes resultados mostram que a iontoforese do MXS nestas condições é capaz de promover a liberação folicular do fármaco de maneira bastante significativa. Uma série de micropartículas de quitosana contendo MXS foi obtida por spray drying modificando quantidades e proporções de polímero e fármaco. O sistema selecionado para estudo foi obtido a partir de 1,50 g de polímero e 0,75 g de MXS, e apresentou alta eficiência de encapsulação (~82%), diâmetro médio igual a 3,05 µm, morfologia esférica e sem porosidades, e potencial zeta igual a + 5,87 mV. Quando incorporadas a uma formulação hidroalcoólica, essas micropartículas sofreram intumescimento, aumentando 1,5 vezes o seu diâmetro médio, mas não tiveram sua morfologia esférica alterada. Experimentos de liberação in vitro mostraram que as micropartículas obtidas foram capazes de sustentar 3,5 vezes a liberação do MXS. As micropartículas ainda restringiram a permeação passiva do fármaco, reduzindo 2 vezes seu fluxo de permeação e aumentando em 5 vezes a retenção de fármaco na região folicular, apesar das partículas em si não penetrarem a pele após administração passiva. Assim, este sistema foi capaz de promover uma liberação mais sustentada do fármaco, o que deve reduzir o número de aplicações do produto pelo paciente ao longo do dia, e garantiu a entrada de grandes quantidades do fármaco nos folículos pilosos, seu alvo de ação. A iontoforese dessas micropartículas, apesar de também não fazê-las penetrar a pele, conseguiu direcioná-las mais rapidamente para as aberturas foliculares, como mostrou os estudos de microscopia confocal de varredura a laser das micropartículas marcadas. Adicionalmente, a iontoforese aumentou 6 vezes a quantidade de MXS retida nos folículos já nas primeiras 3 h de aplicação, garantindo assim que grandes quantidades do fármaco atingissem seu local de ação mais rapidamente que quando as partículas foram aplicadas passivamente sobre a pele. / Given the hypothesis that polymeric microparticles can penetrate the skin barrier along the transfollicular route, and based on the evidence that iontophoresis is a method that can direct the delivery of drugs to the hair follicles, this work aimed to study the in vitro skin permeation of minoxidil sulfate (MXS), a drug used to treat androgenic alopecia, both in its micro-encapsulated and non-encapsulated form, using or not iontophoresis, in an attempt to increase, control and direct its topical delivery to the hair follicle. The MXS was first incorporated in a hydrophilic gel containing 2.0% (w/w) MXS and its skin permeation and retention was in vitro observed with and without the presence of electric current for 6 h, using diffusion cells and skin of porcine\'s ears. The amount of MXS retained in EC was determined and differentiated from that retained in the hair follicles using the technique called differential tape stripping. It was observed that the passive flux of drug through the skin was increased 150-fold with the application of anodal iontophoresis and, by increasing the pH of the formulation from 3.5 to 5.5, iontophoretic permeation of MXS was 3-fold restricted, whereas it increased its retention in stratum corneum and hair follicles. These results show that iontophoresis of MXS in these conditions can promote the follicular delivery of the drug quite significantly. A series of chitosan microparticles containing MXS was obtained by spray drying, modifying quantities and proportions of polymer and drug. The system selected for study was obtained from 1.50 g of polymer and 0.75 g of MXS, and showed high encapsulation efficiency (~ 82%), mean diameter of 3.05 µm, spherical morphology without porosities, and zeta potential equal to + 5.87 mV. When incorporated into a hydro ethanolic formulation, these microparticles suffered swelling, increasing 1.5 times its diameter, but their spherical morphology was not modified. Permeation experiments showed in vitro that the microparticles obtained were able to sustain 3.5 times the release of MXS. The microparticles also restricted the passive permeation of the drug, reducing 2-fold its permeation flux and increasing by 5-fold the retention of drug in the follicular region, although the microparticles themselves did not penetrate the skin after passive administration. Thus, this system was able to promote a more sustained release of the drug, which must reduce the number of product applications by the patient throughout the day, and ensured the entry of large amounts of drug in hair follicles, their target. Iontophoresis of microparticles, although not making them penetrate the skin either, was able to direct them quickly to the follicular openings, as shown by laser confocal scanning microscopy studies of the labeled microparticles. In addition, iontophoresis increased 6-fold the amount of MXS retained in the follicles within the first 3 h of application, thereby ensuring that large quantities of the drug achieved its site of action more quickly than when the particles were applied passively to the skin.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1421.pdf: 745167 bytes, checksum: 22ae6edd66dd06f360360df924ce1905 (MD5) Previous issue date: 2005-07-25 / Universidade Federal de Sao Carlos / Methods for the determination of minoxidil in commercial samples are presented. The minoxidil is a pharmaceutical whose dilation blood vessel property is used in the treatment of the Arterial Hypertension and in the treatment of the Alopecia Areata. Two commercial samples were analyzed, the Regaine® (Pharmacia, U.S.A.) and the Neoxidil® (Galderma, Brazil) both are solutions of topical use containing 2% of minoxidil (20 mg mL-1) in a mixture of ethanol and propilenoglicol as vehicle. Four proposals for the determination of minoxidil in commercial samples were considered. The first one was the titrimetric determination of minoxidil in pharmaceutical formulations using potassium permanganate in which it was possible to quantify the amount of minoxidil in the commercial samples by classical titration. In other method it was used a spectrophotometric titration for the determination of minoxidil in pharmaceutical formulations using potassium permanganate, in which the decrease in the absorbance at 550 nm. The third method was the use of the flow injection analysis (FIA) for the determination of minoxidil in pharmaceutical formulations using potassium permanganate as redox reagent, in which the decrease of the absorbance of the carrying potassium permanganate solution in acidic media was monitored spectrophotometricaly at 550 nm under controlled temperature at 50 OC. Finally it was considered a method that consists in a potenciometric titration of minoxidil with potassium dichromate, in which the potential difference between is monitored a platinum electrode (working) and a saturated calomel electrode (reference) at 60 OC. / No presente trabalho são apresentados métodos para a determinação minoxidil em amostras comercias. O minoxidil é um fármaco que, devido à sua propriedade vasodilatadora é usado no tratamento da Hipertensão Arterial e no tratamento da Alopécia Areata. Foram analisadas duas amostras comerciais, o Regaine® (Pharmacia, EUA) e o Neoxidil® (Galderma, Brasil), sendo ambos soluções de uso tópico contendo 2% de minoxidil m/v (20 mg mL-1), em uma mistura de etanol e propilenoglicol como veículo. Foram propostos quatro métodos para a determinação do analito em amostras comerciais. O primeiro foi a determinação titrimétrica de minoxidil em formulações farmacêuticas usando permanganato de potássio na qual foi possível quantificar o minoxidil presente nas amostras comerciais por volumetria, apresentando como resultado do teste de adição e recuperação os valores de 94,5 e 95,3 % para o Neoxidil® e o Regaine® respectivamente. O segundo método foi o emprego da titulação espectrofotométrica para a determinação de minoxidil em formulações farmacêuticas usando permanganato de potássio, no qual foi usado um espectrofotômetro para acompanhar o decréscimo da absorbância em 550 nm, apresentando 102,8 % para o Neoxidil® e 101,0 % para o Regaine® resultados obtidos no teste de adição e recuperação. O terceiro método foi o uso de da xi análise por injeção em fluxo (FIA) para a determinação de minoxidil em formulações farmacêuticas usando permanganato de potássio como reagente redox, no qual foi monitorado o decréscimo da absorbância da solução transportadora de permanganato de potássio em maio ácido por um espectrofotômetro em 550 nm, com temperatura controlada em 50 OC, freqüência de amostragem de 32 determinações/hora, limite de detecção de 8,95 x 10-6 mol L-1 e adição e recuperação de 104,7 a 106,4 % para o Neoxidil® e o Regaine® respectivamente. Para finalizar foi proposto um quarto método que consiste na determinação titrimétrica com detecção potenciométrica de minoxidil usando dicromato de potássio como reagente, no qual foi medido o potencial no ponto final da titulação por um eletrodo de platina (trabalho) e por um eletrodo de calomelano saturado empregado como referência a 60 OC e adição e recuperação de 98,7 a 97,4 % para o Neoxidil® e o Regaine® respectivamente.

Diante da hipótese de que micropartículas poliméricas podem atravessar a barreira epidérmica através da rota transfolicular, e baseado na evidência de que a iontoforese é um método que consegue direcionar a liberação de fármacos para os folículos pilosos, este trabalho teve como objetivo estudar in vitro a permeação cutânea do minoxidil sulfato (MXS), fármaco utilizado no tratamento da alopecia androgênica, tanto em sua forma microencapsulada como não encapsulada utilizando ou não a iontoforese, na tentativa de aumentar, controlar e direcionar a sua liberação tópica para o folículo piloso. O MXS foi primeiramente incorporado em um gel hidrofílico contendo 2,0% (m/m) do ativo e sua permeação e retenção cutânea in vitro verificada com e sem a presença de corrente elétrica durante 6 h, utilizando células de difusão e pele de orelha de porco. A quantidade de MXS retida no EC da pele foi determinada e diferenciada daquela retida nos folículos pilosos utilizando-se a técnica denominada tape stripping diferencial. Foi observado que o fluxo passivo de fármaco através da pele aumentou 150 vezes com aplicação de iontoforese anódica e que o aumento do pH da formulação de 3,5 para 5,5 restringiu 3 vezes essa permeação iontoforética e aumentou a retenção do MXS no EC e folículos pilosos. Estes resultados mostram que a iontoforese do MXS nestas condições é capaz de promover a liberação folicular do fármaco de maneira bastante significativa. Uma série de micropartículas de quitosana contendo MXS foi obtida por spray drying modificando quantidades e proporções de polímero e fármaco. O sistema selecionado para estudo foi obtido a partir de 1,50 g de polímero e 0,75 g de MXS, e apresentou alta eficiência de encapsulação (~82%), diâmetro médio igual a 3,05 µm, morfologia esférica e sem porosidades, e potencial zeta igual a + 5,87 mV. Quando incorporadas a uma formulação hidroalcoólica, essas micropartículas sofreram intumescimento, aumentando 1,5 vezes o seu diâmetro médio, mas não tiveram sua morfologia esférica alterada. Experimentos de liberação in vitro mostraram que as micropartículas obtidas foram capazes de sustentar 3,5 vezes a liberação do MXS. As micropartículas ainda restringiram a permeação passiva do fármaco, reduzindo 2 vezes seu fluxo de permeação e aumentando em 5 vezes a retenção de fármaco na região folicular, apesar das partículas em si não penetrarem a pele após administração passiva. Assim, este sistema foi capaz de promover uma liberação mais sustentada do fármaco, o que deve reduzir o número de aplicações do produto pelo paciente ao longo do dia, e garantiu a entrada de grandes quantidades do fármaco nos folículos pilosos, seu alvo de ação. A iontoforese dessas micropartículas, apesar de também não fazê-las penetrar a pele, conseguiu direcioná-las mais rapidamente para as aberturas foliculares, como mostrou os estudos de microscopia confocal de varredura a laser das micropartículas marcadas. Adicionalmente, a iontoforese aumentou 6 vezes a quantidade de MXS retida nos folículos já nas primeiras 3 h de aplicação, garantindo assim que grandes quantidades do fármaco atingissem seu local de ação mais rapidamente que quando as partículas foram aplicadas passivamente sobre a pele. / Given the hypothesis that polymeric microparticles can penetrate the skin barrier along the transfollicular route, and based on the evidence that iontophoresis is a method that can direct the delivery of drugs to the hair follicles, this work aimed to study the in vitro skin permeation of minoxidil sulfate (MXS), a drug used to treat androgenic alopecia, both in its micro-encapsulated and non-encapsulated form, using or not iontophoresis, in an attempt to increase, control and direct its topical delivery to the hair follicle. The MXS was first incorporated in a hydrophilic gel containing 2.0% (w/w) MXS and its skin permeation and retention was in vitro observed with and without the presence of electric current for 6 h, using diffusion cells and skin of porcine\'s ears. The amount of MXS retained in EC was determined and differentiated from that retained in the hair follicles using the technique called differential tape stripping. It was observed that the passive flux of drug through the skin was increased 150-fold with the application of anodal iontophoresis and, by increasing the pH of the formulation from 3.5 to 5.5, iontophoretic permeation of MXS was 3-fold restricted, whereas it increased its retention in stratum corneum and hair follicles. These results show that iontophoresis of MXS in these conditions can promote the follicular delivery of the drug quite significantly. A series of chitosan microparticles containing MXS was obtained by spray drying, modifying quantities and proportions of polymer and drug. The system selected for study was obtained from 1.50 g of polymer and 0.75 g of MXS, and showed high encapsulation efficiency (~ 82%), mean diameter of 3.05 µm, spherical morphology without porosities, and zeta potential equal to + 5.87 mV. When incorporated into a hydro ethanolic formulation, these microparticles suffered swelling, increasing 1.5 times its diameter, but their spherical morphology was not modified. Permeation experiments showed in vitro that the microparticles obtained were able to sustain 3.5 times the release of MXS. The microparticles also restricted the passive permeation of the drug, reducing 2-fold its permeation flux and increasing by 5-fold the retention of drug in the follicular region, although the microparticles themselves did not penetrate the skin after passive administration. Thus, this system was able to promote a more sustained release of the drug, which must reduce the number of product applications by the patient throughout the day, and ensured the entry of large amounts of drug in hair follicles, their target. Iontophoresis of microparticles, although not making them penetrate the skin either, was able to direct them quickly to the follicular openings, as shown by laser confocal scanning microscopy studies of the labeled microparticles. In addition, iontophoresis increased 6-fold the amount of MXS retained in the follicles within the first 3 h of application, thereby ensuring that large quantities of the drug achieved its site of action more quickly than when the particles were applied passively to the skin.

Hair disorders cause significant distress. The main, but limited, treatment for hair loss is minoxidil, an ATP-­sensitive potassium (KATP) channel opener whose mechanism of stimulation is unclear. The regulatory component of KATP channels has three forms: SUR1, SUR2A and SUR2B which all respond to different molecules. Minoxidil only opens SUR2B channels, though SUR1 and SUR2B are present in human hair follicles. To expand our understanding, the red deer hair follicle model was used initially. Deer follicles expressed the same KATP channel genes as human follicles when growing (anagen), but no channels were detected in resting follicles. This reinforces the importance of KATP channels in active hair growth and the usefulness of the deer model. To assess whether SUR1 KATP channels are actually involved in human hair growth, the effects of a selective SUR1 channel opener, NNC55-­9216, on scalp follicle growth in organ culture was examined. NNC55-­9216 stimulated anagen; its effect was augmented by minoxidil. This creates the potential for more effective pharmaceuticals to treat hair loss via SUR1 channels, either alone or in combination with minoxidil. The dermal papilla plays a crucial regulatory role in hair follicle activity determining the type of hair produced. Minoxidil had no effect on dermal papilla cell proliferation, but altered the profile of proteins produced when assessed by proteomics. Further research into the roles of KATP channels and greater understanding of the significance of these protein changes should enhance our knowledge of hair biology and help the development of new, improved therapies for hair pathologies.