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Influências do envelhecimento e do ambiente sobre a progressão da encefalite experimental por arbovírus Piry em modelo murino: mudanças morfológicas microgliais e alterações comportamentaisSOUSA, Aline Andrade de 03 October 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014 / O enriquecimento ambiental e os efeitos do envelhecimento sobre as alterações morfológicas das micróglias e no comportamento foram investigados em modelo murino de encefalite sub-letal por arbovírus. Para medir possíveis influências da idade e do ambiente sobre a progressão da encefalite, camundongos suíços albinos fêmeas de 2 meses de idade foram mantidos em Ambiente Padrão (AP) ou em Ambiente Enriquecido (AE), durante: 6 meses (Adulto - A) e 16 meses (Senil –S). Após os testes comportamentais, os camundongos A e S foram inoculados intranasalmente com igual volume de homogenado de cérebro de camundongo infectado pelo vírus Piry (Py) ou homogenado de cérebro de camundongo normal. Oito dias após a inoculação (8DPI), quando os primeiros testes comportamentais revelaram as alterações relacionadas à doença, os cérebros foram seccionados e inumomarcados seletivamente para IBA-1 e antígenos virais. Aos 20 ou 40DPI, os animais restantes foram testados comportamentalmente e processados para os mesmos marcadores e nenhum sinal neuropatológico foi detectado. Em camundongos adultos infectados o ambiente padrão (APPyA), a atividade de burrowing diminuiu e se recuperou rapidamente (8-10DPI), a atividade de campo aberto (20-40DPI), mas manteve-se inalterado em animais da mesma idade e de ambiente enriquecido (AEPyA). Em contraste animais senis tanto de ambiente enriquecido (AEPyS) quanto de ambiente empobrecido (APPyS) reduzem significativamente a atividade de burrowing em todas janelas. A encefalite causada pelo virus Piry, induziu perdas olfativas transitórias em animais APPyA e AEPyA, mas permanents em APPyS e AEPyS. A imunomarcação para os antígenos viral do Piry atingiram seu pico no parênquima do SNC aos 5 e 6DPI e desapareceu aos 8DPI. Todas as reconstruções tridimensionais das micróglias, foram realizadas aos 8DPI. Mudanças Microgliais foram significativamente mais graves em camundongos adultos do que em camundongos senis, mas os animais AE parecem recuperar a morfologia microglia homeostática mais cedo do que os animais de AP. Os efeitos benéficos do AE foram menores em camundongos envelhecidos. / Environmental enrichment and aging effects on behavioral and microglial morphological changes were investigated in a murine model of sub-lethal arbovirus encephalitis. To that end two-months-old female albino Swiss mice were raised in impoverished (IE) or in enriched environments (EE) during 6 (young - Y) or 16 (aged - A) months. After behavioral tests, Y and A mice were nasally instilled with an equal volume of Piry virus infected (Py) or normal brain homogenates. Eight days post-infection (DPI), when behavioral tests first revealed sickness changes, mice brains sections were immunoreacted with anti-IBA1 and anti-Piry virus antibodies. At 20 and 40 dpi, the remaining infected animals were behaviorally re-tested, and processed for the same markers. In infected young mice from impoverished environment (IYPy), burrowing activity decreased and recovered earlier (8–10 dpi) than open field activity (20–40 dpi) but remained unaltered in age-matched mice from enriched environment (EYPy). In contrast, aged infected mice, both from enriched (EAPy) and impoverished (IAPy) environments, reduced significantly burrowing activity at all-time windows. Piry virus encephalitis induced transitory olfactory losses in IYPy and EYPy but permanent in IAPy and EAPy. Piry virus antigens immunolabeling reached a peak in CNS parenchyma at 5 and 6dpi and disappeared at 8dpi. All microglia three-dimensional reconstructions were done at 8dpi. Microglial changes were significantly more severe in young adult than in aged mice but EY mice seem to recover to the microglial homeostatic morphology earlier than IY. EE beneficial effects were smaller in aged mice.
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Alterações da morfologia da micróglia do septo lateral e comportamento semelhante ao ansioso em um modelo murino de inoculação sequencial de VDEN1 e VDEN4: influência do enriquecimento ambientalGOMES, Giovanni Freitas 05 May 2016 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-03-27T13:52:48Z
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Previous issue date: 2016-05-05 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A infecção por dengue é a maior causa de mortes por infecções por arbovírus no Brasil. A despeito de sua importância epidemiológica e um século de estudos sistemáticos dedicados aos mecanismos patogênicos da doença eles permanecem mal compreendidos. No continente americano, as epidemias parecem associadas ao fato de que múltiplos sorotipos circulam de forma simultânea, mas pouco se sabe sobre as alterações que ela é capaz de induzir no sistema nervoso central. O objetivo do presente trabalho foi o de avaliar possível influência do enriquecimento ambiental sobre as manifestações do comportamento e da morfologia microglial no septo lateral associadas à inoculação sequencial alternada de diferentes sorotipos do vírus da dengue (VDEN1 e VDEN4). Para esse fim, foram usadas fêmeas adultas de 10 meses de idade de camundongos imunocompetentes da variedade suíça albina, mantidas em ambiente padrão ou enriquecido. Foi feita uma única infecção intraperitoneal com homogenado cerebral infectado com VDEN1 seguida 28 dias após, por infecção com homogenado cerebral infectado com VDEN4. Com o intuito de acentuar os sintomas clínicos, foi implantado nos últimos sete dias a contar do 29º dia após a primeira infecção, um regime de infecções múltiplas alternadas de VDEN1 e VDEN4 acentuadas por anticorpo heterólogo anti-VDEN3. Animais controles receberam igual regime de inoculações e volumes de homogenado cerebral não-infectado. A avaliação comportamental, feita por meio da atividade exploratória do campo aberto (CA) e do labirinto em cruz elevado (LCE), mostrou que animais infectados de ambiente padrão apresentaram redução do tempo de permanência na periferia do CA e no braço fechado do LCE, sendo esse o único grupo experimental que apresentou tal modificação do comportamento. Para avaliar possíveis alterações da morfologia microglial nesses grupos experimentais, foram sacrificados para análise neuropatológica de 5 indivíduos em função das janelas de infecção. Para imunomarcação seletiva da micróglia, utilizamos anticorpo anti-IBA-1 e o método de reconstrução tridimensional para a análise morfométrica. De forma geral, células obtidas a partir de animais infectados de ambiente padrão, quando comparados aos não-infectados, apresentaram alterações significativas, com aumento significativo da complexidade, K-Dim, número e densidade de segmentos e comprimento dos ramos. Animais de ambiente enriquecido não apresentaram a mesma alteração. Além disso, testamos a hipótese de que as micróglias do septo lateral encontram-se divididas em subtipos e que essa conformação também poderia ser alterada pela infecção. Notamos que, em estado fisiológico, micróglias do septo lateral de animais de ambiente padrão ou enriquecido apresentam-se subdivididas em três subpopulações, uma mais complexa, uma menos complexa e uma intermediária. Após a infecção por VDEN1 ou por VDEN4, houve alteração desse padrão na população de micróglias do septo lateral do animais de ambiente padrão, com surgimento de um subtipo de alta complexidade e aumento do percentual de células mais complexas, porém não em animais de ambiente enriquecido. Baseado nessas evidências sugerimos que as micróglias do septo lateral apresentam um padrão morfológico heterogêneo e que a infecção pelos sorotipos 1 e 4 da dengue é capaz de induzir alterações na morfologia da micróglia e no padrão de subdivisão dessas células, associado ao aumento do percentual de células de alta complexidade, além de induzir alterações comportamentais importantes detectadas no CA e no LCE, e que o enriquecimento ambiental parece proteger os animais contra as alterações comportamentais e da morfologia da micróglia do septo lateral no presente modelo de infecção. / Dengue disease is the major cause of deaths by arbovirus infections in Brazil. In the American Continent, the epidemics seem to be associated to the fact that multiple dengue virus (VDEN) serotypes circulate simultaneously. Despite its epidemiological importance and a century of systematic studies dedicated to understand the disease, its detailed pathogenic mechanisms remain poorly understood. The objective of this study was to evaluate possible influence of environmental enrichment on behavioral changes and microglial morphology alterations in the lateral septum after sequential VDEN1 and VDEN4 intraperitoneal inoculations of infected brain homogenates. To that end, we used adult females ten months old of an immunocompetent albino Swiss mouse strain housed in standard or enriched cages. A single intraperitoneal infection of VDEN1 was followed after 28 days by another inoculation of VDEN4. To enhance clinical signs, a regimen of daily alternated injections of VDEN1 or VDEN4 followed 24 hours later by anti-VDEN2 antibody was applied in the last 7 days. Control animals received equal volumes and regime of inoculation of uninfected brain homogenate. We assessed the behavioral changes using the open field exploratory (OF) and elevated plus-maze (EPM). Infected animals housed in standard cages showed significant decrease in time of exploration of the periphery in the OF and in the time of exploration of enclosed arm in the EPM. Uninfected mice housed in standard cages and animal housed in enriched cages did not show same changes. To check how possible microglial changes could be influenced by acute DENV1 infection, secondary DENV4 infection or the passive anti-DENV4 inoculation, we decided to sacrifice groups of animals after which point of inoculation. To evaluate microglial changes, we did selective immunohistochemistry for microglia and macrophages using anti-IBA-1 antibody (Wako, Japan) and we used tri-dimensional reconstruction to morphometric evaluation. Compared to uninfected, infected mice from standard cages showed significant changes in microglial morphology. We also tested the hypothesis that septal microglia is clustered in subtypes and that DENV infection could change this pattern. We noticed microglia is subdivided in three subgroups in physiological conditions, a more complex pattern, a less complex pattern and an intermediate. After DENV1 or DENV4 infection, we observed changes in this pattern, including the appearance of a high complexity cell, increasing the percentage of complexes microglia. We observed these changes in animals from standard cages, but not in animals from enriched cages. Another interesting data is that environmental enrichment appears to reduce this morphometric changes. Based on the evidences, we suggest that sequential infection with VDEN1/VDEN4 in murine model induced behavioral changes and microglial changes in the lateral septum and EA appears to protect animals against these alterations. Based on these evidences, we suggest that microglial from lateral septum present a heterogeneous pattern of morphology and that DENV infection can induce morphological changes, and alterations in the pattern of subdivision, associated with the increase in the percentage of high complexity cells. In addition, infection can induces behavioral changes detected by EPM and OF tests and environmental enrichment seems to protect against microglial and behavioral changes.
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Glifosato e seus efeitos sobre duas espécies de anfíbios nativos da América do Sul Physalaemus cuvieri e Physalaemus gracilisHerek, Jéssica Samara 29 January 2018 (has links)
Submitted by Tania Ivani Rokohl (tania.rokohl@uffs.edu.br) on 2018-03-12T17:58:08Z
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Previous issue date: 2018-01-29 / A expansão agrícola e o consumo de agrotóxicos em especial do herbicida Glifosato têm aumentado em valores alarmantes no Brasil e mundo. Em relação a isso surge uma grande preocupação sobre como animais não alvo são afetados por esses químicos. Dentre os vertebrados que mais tem sido ameaçados pelos agrotóxicos, estão os anfíbios, que devido a sua fisiologia e hábitos de vida são suscetíveis a contaminação aquática, e vêm enfrentando declínio no número de espécies nas últimas décadas. O presente estudo avaliou os efeitos agudos e crônicos (tóxicos e genotóxicos) de uma formulação comercial de Glifosato sobre girinos de duas espécies de anfíbios anuros nativos da América do Sul Physalaemus cuvieri e Physalaemus gracilis. Os girinos foram submetidos a concentrações ambientalmente relevantes e permitidas pela legislação brasileira. A partir de análises morfológicas constatou-se que o Glifosato causou alterações morfológicas principalemente na boca, intestino, cauda e membros, além de problemas no desenvolvimento dos girinos, como girinos menores e com atrasos de metamorfose. No ensaio de genotoxicidade, ocorreu alteração na frequência de aparecimento ou formação de Micronúcleos e outras anormalidades nucleares eritrocíticas (ENAs) significativas em relação ao controle, indicando danos genotóxicos. Este estudo mostrou que concentrações ambientalmente relevantes de Glifosato (65, 144, 280, 500, 700 e 1000μg/L) em períodos curtos de tempo foram capazes de causar anormalidades morfológicas e eritrocitárias em girinos das duas espécies estudadas. / Agricultural expansion and consumption of agrochemicals in particular of the herbicide Glyphosate have increased in alarming values in Brazil and worldwide. In relation to this arises a great concern about how non-target animals are affected by these chemicals. Among the vertebrates that have been most threatened by agrochemicals are amphibians, which due to their physiology and life habits are susceptible to aquatic contamination, and have been facing decline in the number of species in the last decades. The present study evaluated the acute and chronic effects (toxic and genotoxic) of a commercial formulation of Glyphosate on two species of tadpole of native anuran amphibians from South America Physalaemus cuvieri and Physalaemus gracilis. The tadpoles were submitted to concentrations that are environmentally relevant and allowed by Brazilian legislation. From morphological analyzes it was verified that Glyphosate caused morphological changes mainly in the mouth, intestine, tail, limbs, besides problems in the development of the tadpoles, as minor tadpoles and with metamorphosis delays. In the genotoxicity test, the caused a change in the frequency of formation of Micronuclei and other significant Erythrocyte Nuclear Abnormalities (ENAs) compared to the control, indicating genotoxic damages. This study shows that environmentally relevant concentrations of glyphosate in short periods of time are capable of causing morphological and erythrocyte abnormalities in both species studied.
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Eficácia e seletividade de herbicidas aplicados em pós-emergência em soja convencional e transgênicaCorrêa, Maria José Pinheiro [UNESP] 13 February 2009 (has links) (PDF)
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correa_mjp_dr_jabo.pdf: 913272 bytes, checksum: 5000bc011ba683f81e165123412cb4d8 (MD5) / Uema-Universidade Estadual do Maranhao / O presente estudo teve por objetivo avaliar a eficácia e seletividade de herbicidas aplicados em pós-emergência, isolados e em misturas, para o controle de plantas daninhas e os efeitos sobre o crescimento e o desenvolvimento da soja convencional (M-SOY 8001) e transgênica (M-SOY 7908 RR). Também foram estudados os efeitos dos produtos sobre a atividade fotossintética e nas características morfológicas externas e internas das plantas. Foram conduzidos dois experimentos, no ano agrícola 2006/2007 e repetido em 2007/2008, em condições de campo, na Fazenda de Ensino, Pesquisa e Produção da UNESP, Câmpus de Jaboticabal, SP. O delineamento experimental utilizado foi em blocos ao acaso com quatro repetições. Os tratamentos constaram da aplicação de herbicidas isolados e em misturas: lactofen (168 g ha- 1), glyphosate (1080 g ha-1), lactofen + chlorimuron-ethyl (96 + 10 g ha-1), chlorimuron-ethyl + imazethapyr (10 + 70 g ha-1), chlorimuron-ethyl + bentazon (10 + 600 g ha-1), glyphosate + imazethapyr (900 + 70 g ha-1), lactofen + chlorimuronethyl + imazethapyr (96 + 10 + 70 g ha-1) e lactofen + chlorimuron-ethyl + imazethapyr/haloxyfop-methyl (96 + 10 + 70 / 60 g ha-1). Além disso, foram mantidas duas testemunhas sem aplicação de herbicida (capinada e mantida infestada). Concluiu-se que os herbicidas utilizados foram seletivos para a soja; exceção dos tratamentos com glyphosate na soja M-SOY 8001. Na condição de baixa infestação de plantas daninhas, os herbicidas aplicados foram eficazes no controle destas. Na área com maior infestação de plantas daninhas, a aplicação de glyphosate isolado ou em mistura com imazethapyr proporcionou melhor controle das plantas infestantes. Quanto a eficiência fotossintética máxima, apenas o cultivar convencional foi suscetível à aplicação dos herbicidas, principalmente às misturas contendo lactofen + chlorimuron-ethyl... / This research was carried out to evaluate the efficiency and selectivity postemergence herbicides applied alone and in mixtures to the weed control and the effects on the growth and the development transgenic (M-SOY 7908 RR) and conventional (M-SOY 8001) soybean. The effects of the products on the photosynthetic activity and the external and internal morphologic characteristics of the plants, also it studied. Two experiments were carried out from 2006/2007 and 2007/2008 under field conditions on Education, Research and Production Farm of UNESP in Jaboticabal, SP, Brazil. A randomized complete block experimental design with four replications was used. Herbicide treatments consisted lactofen (168 g ha-1), glyphosate (1080 g ha-1), lactofen + chlorimuronethyl (96 + 10 g ha-1), chlorimuron-ethyl + imazethapyr (10 + 70 g ha-1), chlorimuron-ethyl + bentazon (10 + 600 g ha-1), glyphosate + imazethapyr (900 g + 70 g ha-1), lactofen + chlorimuron-ethyl + imazethapyr (96 + 10 + 70 g ha-1) and lactofen + chlorimuron-ethyl + imazethapyr/haloxyfop-methyl (96 + 10 + 70 + 60 g ha-1). The tests included two nontreated (no hand weeded and hand weeded). The herbicides were selective for the soybean; exception of the treatments glyphosate applied in the M-SOY 8001 soybean. Under low weed condition, the herbicides applied were effective in the weed control. In the area with larger weed condition, glyphosate applied alone and glyphosate plus imazethapyr caused better control the weeds compared other herbicides. With respect to maximum photosynthetic efficiency response, just conventional soybean was susceptible the herbicides applied, mainly the mixtures containing lactofen + chlorimuron-ethyl and lactofen + chlorimuron-ethyl + imazethapyr / haloxifop-methyl. For total chlorophyll response, the varieties presented susceptibility to the lactofen alone and in mixture with chlorimuron-ethyl, imazethapyr... (Complete abstract click electronic access below)
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Cobertura morta no cultivo do Feijão-caupiRocha, Vilson de Souza, 55-92991-1139 27 April 2018 (has links)
Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-06-13T19:35:04Z
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Previous issue date: 2018-04-27 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The mulch, constituted by vegetal residues, plays an important role in the success of several agricultural crops, serves as an insulating layer, protecting the soil from the daytime thermal amplitudes, keeping it moist and rich in organic matter. Cowpea is a source of protein, carbohydrates, vitamins and minerals. Its importance for the North, Northeast and Center-West regions is related to economic and social aspects, as it is an important food for low income populations, meeting their nutritional needs. This study was carried out in Manaus, Amazonas, under greenhouse conditions, with the objective of evaluating the effect of different dead coverages on the agronomic characteristics of cowpea cultivars. The design was completely randomized in a 4x4 factorial arrangement. The treatments applied were four cultivars of cowpea (BRS Caldeirão, BRS Tumucumaque, BRS Guariba and BRS Tracuateua) and three cover crop species (Brachiaria decumbens, Brachiaria ruziziensis and Mucuna pruriens) and another control treatment, without soil cover, totaling 16 treatments, with four replicates and two plants per experimental unit. The data were submitted to analysis of variance, and the means, compared by the Scott-Knott test, at 5% probability. The following characteristics were evaluated: number of pods per plant, pod length, number of grains per pod, weight of dry shoot mass, and yield. BRS Tumucumaque presented higher pod length. BRS Caldeirão stood out with the best results for number of pods per plant and also, together with BRS Guariba, the highest number of beans per pod. The cultivars with the highest dry weight of shoot were BRS Caldeirão, BRS Tumucumaque and BRS Guariba. The highest grain yields were recorded for BRS Caldeirão and BRS Guariba (977.32 kg ha-1, 952.73 kg ha-1), respectively. The dead cover on the soil provided better results in all traits evaluated for all cultivars when compared to the control. / A cobertura morta, constituída por resíduos vegetais, desempenha importante papel no sucesso de diversas culturas agrícolas, servindo como camada isolante, protegendo o solo das amplitudes térmicas diurnas, mantendo-o úmido e rico em matéria orgânica. O feijão-caupi é fonte de proteínas, carboidratos, vitaminas e minerais. Sua importância para as regiões Norte, Nordeste e Centro-Oeste está relacionada aos aspectos econômicos e sociais, por ser um alimento importante para as populações de baixa renda, atendendo suas necessidades nutricionais. Esse estudo foi realizado em condições de casa de vegetação, em Manaus, Estado do Amazonas, com o objetivo de avaliar o efeito de diferentes coberturas mortas nas características agronômicas de cultivares de feijão-caupi. O delineamento adotado foi inteiramente casualizado em arranjo fatorial 4x4. Os tratamentos aplicados foram quatro cultivares de feijão-caupi (BRS Caldeirão, BRS Tumucumaque, BRS Guariba e BRS Tracuateua) e três espécies de plantas de cobertura (Brachiaria decumbens, Brachiaria ruziziensis e Mucuna pruriens) e mais um tratamento controle, sem cobertura do solo, totalizando 16 tratamentos, com quatro repetições e duas plantas por unidade experimental. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância, e as médias, comparadas pelo teste de Scott-Knott, a 5% de probabilidade. Foram avaliadas as seguintes características: número de vagens por planta, comprimento de vagem, número de grãos por vagem, peso de massa seca da parte aérea, e a produtividade. BRS Tumucumaque apresentou maior comprimento de vagens. BRS Caldeirão se destacou com os melhores resultados para número de vagens por planta e, juntamente com BRS Guariba, apresentou o maior número de grãos por vagem. As cultivares com maior peso de massa seca da parte aérea foram BRS Caldeirão, BRS Tumucumaque e BRS Guariba. As maiores produtividades de grãos foram registradas para BRS Caldeirão e BRS Guariba (977,32 kg ha-1, 952,73 kg ha-1), respectivamente. As coberturas mortas sobre o solo proporcionaram melhores resultados em todas as características avaliadas para todas as cultivares, quando comparado ao controle.
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Parâmetros fisiológicos e moleculares da resposta de Bacteroides fragilis a concentrações subinibitórias de antimicrobianos e avaliação de aspectos da interação bactéria-hospedeiro após infecção experimentalFreitas, Michele Cristine Ribeiro de 14 May 2010 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-06-21T17:57:41Z
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Previous issue date: 2010-05-14 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A espécie Bacteroides fragilis é um anaeróbio Gram negativo membro da microbiota indígena do trato gastrintestinal, e é comumente isolado de infecções clínicas. À medida que as drogas antimicrobianas são introduzidas no ambiente, os microrganismos respondem, tornando-se resistentes, podendo gerar alterações na fisiologia celular, e que podem interferir na relação bactéria-hospedeiro. Nosso objetivo foi investigar alterações em B . fragilis após exposição a concentrações subinibitórias de ampicilina (AMP), ampicilina/sulbactam (AMS), clindamicina (CLI) e cloranfenicol (CLO); e investigar aspectos da relação droga-bactéria-hospedeiro, após desafio experimental em camundongos. Foram obtidas 4 linhagens bacterianas: BfAMP, BfAMS, BFCLI e BfCLO. Alterações na morfologia, padrões de crescimento, habilidades bioquímicas e fisiológicas, perfis de expressão protéica e semelhança genética foram avaliadas comparativamente entre as linhagens obtidas e a linhagem Bf parental ATCC 25285. Infecção experimental foi realizada em camundongos convencionais, desafiados intraperitonealmente. Histologia de baço e fígado, além de dosagem das citocinas TNF-α, IL-6, IL-10, IL-17 e IFN-γ no intestino, foram realizadas. Ampicilina e ampicilina/sulbactam induziram alterações morfológicas significativas nas células bacterianas na primeira exposição. Foi verificada diminuição da sensibilidade aos antimicrobianos em todas as linhagens selecionadas. Além disso, a exposição aos antimicrobianos foi capaz de induzir alterações nos padrões bioquímico-fisiológicos bacterianos, se comparado com a amostra parental. Em relação à capacidade de formação de biofilme, observou-se alteração em todas as linhagens, quando comparadas à parental, sendo que as linhagens selecionadas pela exposição aos antimicrobianos tiveram capacidade de aderência diminuída. A identidade genética das linhagens bacterianas obtidas foi confirmada e não foram detectados fragmentos de DNA polimórfico. Variações nos perfis de citocinas foram verificadas nos animais desafiados com a linhagem BfAMS. Alterações histopatológicas também foram observadas no baço e fígado dos animais desafiados com as linhagens de B . fragilis selecionadas por exposição aos antimicrobianos. Nossos resultados permitem sugerir fenômenos relacionados à regulação da expressão gênica como uma resposta momentânea ou evolutiva dos microrganismos. Estes resultados podem ainda sugerir que essas drogas tem diferentes interações com a célula bacteriana, que podem ser prejudiciais para a interação bactéria-hospedeiro. Assim, nossos resultados chamam a atenção para o risco de terapia antimicrobiana inadequada, mesmo com baixas concentrações de fármacos, que poderiam alterar os níveis de expressão gênica de uma bactéria e modular sua patogenicidade. / Bacteroides fragilis is an anaerobic Gram negative rod member of resident gut microbiota, isolated from clinical infections due in part to its potent virulence factors. As antimicrobial drugs are introduced into the environment, microorganisms respond by becoming resistant and may cause changes in cell physiology. These changes can interfere with the bacterium-host relationship. The aim of this study was to investigate changes in B . fragilis after exposure to ampicillin (AMP), ampicillin/sulbactam (AMS), clindamycin (CLI) and chloramphenicol (CLO); and to investigate changes in host-bacteria relationships after experimental challenge in mice. Four bacterial strains were obtained: BfAMP, BfAMS, BFCLI e BfCLO. Morphological changes, growth patterns, biochemical and physiological abilities, protein expression profile and genetic relationships were comparatively evaluated among the drug-selected strains and Bf parent ATCC 25285. Experimental infection was performed intraperitoneally in conventional mice. Liver and spleen histology, besides cytokines determinations were performed in the intestines. Ampicillin and ampicillin/sulbactam induced the highest significant morphological alterations in the bacterial cells after the initial drug exposure. Decreased sensitivity to all antimicrobials was observed for all drug-selected bacteria strains. Furthermore, drug-exposure was able to induce changes in biochemical pathways and bacterial physiology, if compared with the Bf parent strain. Regarding the ability of biofilm formation, alterations in adherence properties were observed for all drug-selected bacteria, being this characteristic down regulated. The genetic identities were confirmed for the selected strains and no DNA polymorphisms were detected. The cytokine patterns in the intestines from mice challenged with drug-selected bacteria were highly altered, mainly considering the BfAMS strain, as well as the histological aspect concerning the liver and the spleen excised from the experimentally challenged animals. Our results may suggest phenomena related to the gene expression regulation, as a microbial momentary or evolutionary response to the selective pressure of the antimicrobial drugs. These results may also suggest that these drugs have different interactions with the bacterial cell which can be harmful to the host-bacteria relationships. In this way, the data ask for attention regarding the risks of inappropriate chemotherapy, even with low concentrations of the antimicrobial drugs, which might the bacteria genetic expression levels and modulate their pathogenicity
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Últimos levelings: conceitos, propriedades, algoritmos e aplicações em processamento e análise de imagens / Ultimate levelings: concepts, properties, algorithms and applications for image processing and analysisWonder Alexandre Luz Alves 06 August 2015 (has links)
Em Morfologia Matemática diversos operadores são definidos pela diferença entre outros dois operadores, como por exemplo, o gradiente morfológico, definido como a diferença entre a dilatação e a erosão. Estes operadores são denominados operadores residuais, sendo alguns deles definidos por valores residuais extraídos de famílias indexadas de operadores, como por exemplo, o esqueleto por discos maximais e a última abertura. Neste sentido, visa-se neste trabalho investigar a extração de informações residuais em famílias indexadas de operadores. Mais precisamente, em famílias de operadores conexos conhecidos como levelings. Os levelings são operadores que não criam novas estruturas (contornos e extremos regionais) e seus valores são limitados pelos valores da imagem de referência. Assim, é apresentada nesta tese uma classe de operadores residuais denominada últimos levelings, a qual consiste de poderosos operadores residuais definidos a partir de resíduos gerados por operadores consecutivos de um espaço de escala baseado em levelings. Dessa forma, objetos contrastantes podem ser detectados se relevantes resíduos são gerados quando eles são filtrados por um desses levelings. Os valores residuais revelam importantes informações sobre contrastes presentes em uma imagem. Além dos valores residuais, outras informações associadas com eles podem ser obtidas no momento da extração residual, tais como os índices dos operadores que produziram os valores residuais. Com base nessas considerações, as principais contribuições originais desta pesquisa, incluem: (i) demonstrar que árvores construídas a partir de conjuntos de níveis representam espaços de escalas baseados em levelings; (ii) introduzir a classe dos últimos levelings, passando por definições, conceitos, algoritmos, propriedades e relações com outros operadores conhecidos na literatura; (iii) apresentar estratégias para construção de operadores últimos levelings. Por fim, são apresentadas aplicações dos últimos levelings em problemas de análise e processamento de imagens. / In Mathematical Morphology several operators are defined by the difference between two operators, such as morphological gradient, defined as the difference between the dilation and erosion. These operators are called residual operators, being that some are defined by the extracted residual values from of an indexed family of operators, for example, the skeleton by maximal discs and the ultimate opening. In this sense, we intend to investigate the extraction of residual information in families of operators. More precisely, in families of connected operators known as levelings. The levelings are operators that do not create new structures (contours and regional extremes) and their values are limited by the values of the reference image. Thus, we present in this thesis a class of residual operators named ultimate levelings, which consist of powerful residual operators defined from a scale space based on levelings. With a multi-scale approach, these operators analyze an image under a series of levelings. Thus, contrasted objects can be detected if a relevant residue is generated when they are filtered out by one of these levelings. The residual values reveal important informations about contrasts present in an image. In addition of residual values, other information associated with them can be obtained at the time of extraction residual, such as the indexes of operators who produced the residual values. Based on these considerations, the main original contributions of this research include: (i) demonstrate that the trees constructed from level sets represent an scale space based on levelings; (ii) introduce the class of levelings ultimate, passing by definitions, concepts, algorithms, properties and relationships with other known operators in the literature; (iii) show some strategies for building levelings ultimate operators. Finally, we present applications of levelings ultimate in problem of image processing and analysis.
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Classificação de espécies arbóreas em função da tolerância ao alagamento e preparo de solo para restauração de florestas paludosas / Tree species classification based on flooding tolerance and soil preparation for the restoration of wetlandsBettinardi, Mariana Luzia 22 April 2014 (has links)
A água é um bem necessário a toda a humanidade, à agricultura e às indústrias. É o bem mais escasso atualmente e será muito mais nos próximos anos. A proteção dos recursos hídricos para garantia do bem-estar da humanidade torna-se essencial e com isto a restauração florestal de nascentes e áreas ciliares é alvo de projetos em todo o mundo. As áreas hidrologicamente sensíveis (AHS) dentro da bacia hidrográfica são as porções mais importantes neste contexto, no entanto, devido à saturação hídrica do solo ocasionada pela dinâmica do lençol freático, a sua recuperação é dificultada desestimulando pesquisas e ações de restauração. Diante desta lacuna, este estudo teve o objetivo de buscar estratégias para a restauração florestal de AHS. Para isso foi testado em viveiro a tolerância a diferentes níveis de saturação hídrica de 15 espécies típicas de ambientes alagados e uma espécie não típica como controle. As espécies foram avaliadas quanto ao crescimento em altura, diâmetro à altura do solo, sobrevivência, desenvolvimento de respostas morfológicas e possível associação destas com as taxas de crescimento. Foi feita uma análise de agrupamento que classificou e agrupou as espécies de acordo com cinco níveis de tolerância ao alagamento, identificando que para a maioria das espécies quanto maior o nível de saturação hídrica menor é a tolerância a este estresse. A análise de variância e o teste de Tukey identificaram quais espécies apresentaram características morfológicas (hipertrofia de lenticelas e raízes adventícias) e os indicadores morfológicos foram comparados nos grupos constituídos da análise de agrupamento que revelou que estas respostas estão associadas à adaptação quanto ao crescimento e sobrevivência das espécies. Dois experimentos em campo também foram realizados visando testar métodos de preparo de solo que mais favorecessem o estabelecimento e o crescimento inicial das espécies. Foi feita uma análise de variância e teste de Tukey para testar se o método de preparo de solo tem efeito sobre o crescimento em altura e diâmetro e o tempo de sobrevivência para as espécies e uma análise de agrupamento para definir grupos de espécies com características funcionais que favoreçam os projetos de restauração. Verificou-se que os métodos de preparo de solo não foram determinantes para o estabelecimento e desenvolvimento das espécies típicas de AHS em pequenas escalas e que a escolha das espécies mais tolerantes à saturação hídrica em diferentes níveis é o fator mais importante na restauração desses ambientes. Desta forma, em projetos de restauração de florestas brejosas, a seleção de espécies adaptadas a estas condições é mais importante do que os métodos de preparo do solo, e futuros estudos deveriam focar em identificar grupos funcionais de espécies que possam ser usadas nestes projetos. / From agriculture to the industry, water is an essential resource for humanity. It is also the scarcest resource at the present time and it will be scarcer in the next years. The protection of water resources is of most importance to ensure humanity\'s well-being. Thus, projects aiming at the restoration of springs and riparian forests are being carried out around the world. In this context, hydrologically sensitive areas (HSA) of the river basins are the most important sites for water resources provision. However, water table dynamics causes water saturation of the soil in these areas, imposing barriers to recuperation and discouraging restoration practice and research. In this context, this study aims to analyze strategies for the ecological restoration of HSA. We carried out nursery tests to assess the hydrological saturation tolerance of 15 tree species typical from wetlands and used a non-typical species as control. Species were evaluated based on height and diameter at soil height increase, survival, development of morphological responses and the possible relation of the latter with growth rates. The cluster analysis classified species in groups based on five hydrological saturation tolerance levels, pointing that, for most species, higher hydrological saturation levels results in lower tolerance to this stress. An analysis of variance and Tukey test identified which species presented morphological characteristics (lenticels hypertrophy and adventitious roots) and the morphological indicators were compared among the clustered groups; this analysis demonstrated that such morphological responses are associated to the species adaptation for both survival and growth in saturated conditions. Two field experiments were also carried out aiming to test soil preparation that could favor seedling establishment and growth. An analysis of variance and Tukey test was carried out to test the effects of soil preparation on seedling height and diameter at soil height growth and survival. Additionally, we carried out a cluster analysis to separate species into groups containing functional characteristics that may favor restoration projects. We observed that soil preparation techniques, in small scale, had no influence on the establishment and development of seedlings typical of HSA and that the selection of species that are tolerant to hydrological saturation at different levels is the most important factor for restoration of these environments. Thus, restoration projects in wetlands should give special attention for the selection of species adapted to these conditions, which is more determinant for restoration success than soil preparation. Future studies should focus in identifying species functional groups that could be used to restore these areas.
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MEV - Avaliação morfológica do ápice radicular em dentes decíduos de humanos, com diferentes graus de patologia pulpar e periapical / SEM - Morphological evaluation of the root apex in human primary teeth with different degrees of pulpal and periapical pathologyFernandes, Patrícia Motta 03 July 2007 (has links)
O objetivo deste estudo foi avaliar a morfologia da superfície externa de ápices radiculares de dentes decíduos de humanos com necrose pulpar, com e sem lesão periapical visível radiograficamente, e de dentes com vitalidade pulpar, por meio da microscopia eletrônica de varredura (MEV). Dezenove dentes foram extraídos sendo cinco dentes com vitalidade pulpar (Grupo I), seis com necrose pulpar sem lesão periapical (Grupo II) e oito com necrose pulpar e lesão periapical (Grupo III). Os dentes (incisivos e molares) foram lavados com solução salina e imersos em solução de tripsina 0,03g/mL por 20 minutos. Decorrido esse período, os dentes foram lavados com solução tampão de cacodilato de sódio 0,1M e armazenados em solução de Karnovsky modificada. Após 5 dias, os ápices radiculares foram seccionados, desidratados em série crescente de etanol, submetidos à secagem pelo método do ponto crítico com dióxido de carbono, fixados em \"stubs\" e metalizados com ouro puro para análise em MEV. A superfície do ápice radicular foi avaliada com relação à presença de fibras e áreas de reabsorção dentinária e cementária. Na superfície radicular apical dos dentes com vitalidade pulpar e com necrose pulpar sem lesão periapical foi observada a presença de fibras e ausência de reabsorção em todos os casos (100%). Por outro lado, todos os espécimes (100%) com necrose pulpar e presença de lesão periapical apresentaram ausência total de fibras e áreas de reabsorção cementária. Áreas de reabsorção dentinária foram observadas em 2 espécimes. Os resultados obtidos demonstraram a presença de diferenças morfológicas na região apical de dentes decíduos com diferentes graus de patologia pulpar e periapical. A presença de áreas de reabsorção cementária e ausência de fibras nos dentes decíduos com lesão periapical indicam a necessidade da aplicação de medidas terapêuticas específicas. / The objective of this study was to evaluate, by scanning electron microscopy (SEM), the morphology of the outer surface of root apexes of human primary teeth with pulp vitality and teeth with pulp necrosis, with and without radiographically visible periapical lesion. Nineteen teeth were extracted, being five teeth with pulp vitality (Group I), six with pulp necrosis without periapical lesion (Group II) and eight with pulp necrosis and periapical lesion (Group III). The teeth (incisors and molars) were washed in saline and immersed in 0.03 g/mL trypsin solution during 20 minutes. After this period, the teeth were washed in 0.1 M sodium cacodylate buffer solution and stored in modified Karnovsky\'s solution. After 5 days, the root apexes were sectioned, dehydrated in an ascending ethanol series, critical-point dried with CO2, mounted on stubs, and sputter-coated with gold for SEM analysis. The root apex surface was examined with respect to the presence of fibers and areas of dentinal and cemental resorption. In the apical root surface of the teeth with pulp vitality and teeth with pulp necrosis without periapical lesion presence of fibers and absence of resorption were observed in all cases (100%). On the other hand, all specimens (100%) with pulp necrosis and periapical lesion showed total absence of fibers and areas of cemental resorption. The results of this study demonstrated the existence of morphological differences in the apical region of primary teeth with different degrees of pulpal and periapical pathology. The presence of areas of cemental resorption and absence of fibers in the primary teeth with periapical lesion indicate the need for application of specific therapeutic measures.
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Qualidade fisiológica de sementes de Jatropha curcas L.: efeito de embalagens, ambientes e períodos de armazenamento / Physiological quality of seeds of Jatropha curcas L.: effects of containers, environment and storage periodPinto Junior, Artur Soares 26 February 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-02-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Seeds of physic nut (Jatropha curcas L.) have characteristics Orthodox and require knowledge about the factors that affect the maintenance of their physiological quality. The objective of this study was to evaluate and identify the suitable condition for the storage of seeds of physic nut (J. curcas L.). The seeds were stored for periods of 90 and 180 days in packages consisting of different materials: transparent plastic of low density, with 0.06 mm thick Kraft paper bags, natural 40 g m-2, and packaging glass with a capacity of 500 mL. These were kept in three different environments: laboratory, without control of environmental conditions (10 to 29 ° C, 50 to 98% relative humidity.), Refrigerator (4 to 6 ° C, 35 to 43% RH) and air chilled (14 to 16 ° C and 75 to 80% relative humidity), obtained with use of an air conditioner and a dehumidifier. For the experiment, based on a combination of treatments provided, we used a completely randomized design with four replications in a factorial (3x3 +1), and the factors consisting of three packs, three environments and initial assessment of material under study (control). At the beginning and after periods of storage the seeds were tested for moisture content, germination, first count, germination and tetrazolium test in the laboratory. Also evaluated in a greenhouse environment (50% shading) the germination rate and speed of germination and after 45 days of onset of seedling emergence were performed morphological destructive. The average values for moisture content, first count, germination and tetrazolium test differ in the respect of packaging and storage environments. The same was true for tests for the index rate of emergence, germination, dry masses of root, shoot and total root / shoot, plant height and basal diameter and Quality Index Dickson. However, seeds stored in a glass container and refrigerator environment showed better maintenance of their physiological characteristics and quality and can be stored for a period of six months without a reduction of the physiological quality / Sementes de pinhão manso (Jatropha curcas L.) possuem características ortodoxas e requerem conhecimento sobre os fatores que afetam a manutenção de sua qualidade fisiológica. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar e identificar a condição adequada para o armazenamento de sementes de pinhão manso (J. curcas L.). As sementes foram armazenadas pelos períodos de 90 e 180 dias em embalagens constituídas de diferentes materiais: saco de polietileno transparente de baixa densidade, com 0,06 mm de espessura; saco de papel Kraft natural, com 40 g m-2; e embalagem de vidro com capacidade para 500 mL. Estas foram mantidas em três diferentes ambientes: laboratório, sem controle de condições ambientais (10 a 29°C; 50 a 98% de umidade relativa.); geladeira (4 a 6°C; 35 a 43% de umidade relativa) e câmara refrigerada (14 a 16°C; 75 a 80% de umidade relativa), obtida com uso de um condicionador de ar e de um desumidificador. Para a condução do experimento, baseando-se na combinação de tratamentos apresentada, utilizou-se delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições, em esquema fatorial (3x3+1), sendo, os fatores constituídos por três embalagens, três ambientes e avaliação inicial do material em estudo (tratamento controle). No início e após os períodos de armazenamento as sementes foram submetidas aos testes de grau de umidade, germinação em primeira contagem, porcentagem de germinação e ao teste de tetrazólio em laboratório. Também se avaliou em ambiente de telado (50% de sombreamento) a germinação e índice de velocidade de emergência das sementes e após 45 dias do início da emergência das plântulas foram realizadas análises morfológicas destrutivas. Os valores médios para grau de umidade, primeira contagem, porcentagem de germinação e teste de tetrazólio deferiram em relação às embalagens e ambientes de armazenamento. O mesmo ocorreu para os testes de índice de velocidade de emergência, porcentagem de germinação, massas secas de raiz, parte aérea e total, relação raiz/parte aérea, altura de planta e diâmetro basal e Índice de Qualidade de Dickson. Todavia, as sementes armazenadas em recipiente de vidro e ambiente de geladeira apresentaram melhor manutenção de suas características e qualidade fisiológica, podendo ser armazenadas pelo período de seis meses sem que ocorra redução de sua qualidade fisiológica
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