Orientador: Alberto José Cavalheiro / Banca: Cíntia Duarte de Freitas Milagre / Banca: Mara Cristina Pinto / Banca: Reinaldo Otávio Alvarenga Alves de Brito / Banca: Miguel Francisco de Souza Filho / Resumo: As variedades de manga (Mangifera indica L.) mais produzidas comercialmente são suscetíveis às pragas comumente denominadas moscas-dasfrutas, principalmente a espécie Anastrepha obliqua, o que leva a necessidade de emprego de defensivos químicos, onerando a produção e gerando problemas ambientais com resíduos químicos. Algumas variedades de manga são totalmente resistentes às moscas-das-frutas e, portanto, possuem fatores que a diferenciam das suscetíveis. O objetivo deste trabalho foi executar prospecção de compostos e características na busca da identificação dos referidos fatores químicos e/ou físicoquímicos de resistência e/ou atração. Para tanto foram analisadas características de cascas, látex e comparados os compostos identificados e obtidos por micro-extração em fase sólida (SPME) in situ em frutos de variedades resistentes e suscetíveis. Identificados os compostos voláteis, realizaram-se testes eletroantenográficos e testes de atração em túnel de vento com blends sintéticos baseados na proporção dos principais compostos emitidos pelos frutos. Os resultados revelaram maior densidade de dutos lactíferos em variedade resistente e diferenças nos perfis de compostos voláteis de látex e de frutos, assim como nos diferentes estágios de maturação. Frutos verdes não apresentaram ésteres, que por sua vez passaram a integrar os principais compostos na fase madura, principalmente octanoato de etila e octanoato de metila. Os principais compostos encontrados em maior quantidade na condição de resistência foram limoneno, a-pineno, mirceno e humuleno, enquanto os que marcaram a condição de suscetibilidade foram octanoato de etila, octanoato de metila, δ-3-careno e aloaromadendreno. Os compostos α-copaeno, α-gurjuneno e β-selineno aparentam possível papel na repelência nos frutos ainda verdes, inclusive possivelmente funcionando como marcadores deste estágio... / Abstract: Many commercial varieties of mango (Mangifera indica L.) are susceptible to pests called fruit flies, as Anastrepha obliqua, an important specie. This leads to the need of the use of chemical pesticides, burdening the production and generating environmental problems. Some mango varieties are resistant to fruit flies and therefore having factors that differentiate it when comparing to the susceptible. The objective of this study was to perform exploration of compounds and to identify factors of resistance and/or attraction. Peel characteristics were analyzed and volatile compounds obtained by solid phase micro extraction (SPME) in situ were identified and compared in the latex (sap) and fruits from resistant and susceptible varieties. This technique is useful to reveal the compounds really liberated on orchard, avoiding artefacts formation and the losing of compounds. Electroantenongraphic and wind tunnel attraction tests were performed using the proportion of the major compounds emitted by mango fruits. The results showed higher density of lactiferous ducts in the resistant variety and differences of latex and fruit volatile compounds profiles, as well as in different stages of ripening. Green fruits showed no esters, which became part of the main compounds in the total ripe stage, mainly ethyl octanoate and methyl octanoate. The α-copaene, α-gurjunene and β-selinene compounds seem possible role in repellency in unripe fruits, including possibly functioning as green stage markers, since their levels fall with maturation while its esters have increased. The compounds found in greater quantity in the condition of resistance were limonene, a- pinene, myrcene and humulene, while the condition of susceptibility were marked by ethyl octanoate, methyl octanoate, δ-3-carene and aloaromadendreno. The synthetic blend based on nine main compounds of the variety 'Palmer' proved attractive to Anastrepha... / Doutor

As moscas-das-frutas são pragas de importância quarentenária, entre as quais se destacam as espécies do gênero Anastrepha. Apesar de muito estudada, a taxonomia de alguns grupos do gênero ainda não está adequadamente resolvida. A correta identificação do grupo fraterculus exige prática/conhecimento e a utilização de uma série de técnicas. Assim, o presente estudo propõe testar a eficiência de duas técnicas na identificação de três espécies (A. fraterculus, A. obliqua e A. sororcula) e na identificação de espécimes de A. fraterculus em relação a três hospedeiros (goiaba, nêspera e pêssego). Foram testadas as técnicas de análises de imagens, pela primeira vez em moscas-das-frutas, e de morfometria (multivariada para os acúleos e geométrica para as asas). Pela análise de imagens, obtiveram-se acurácias bastante altas na identificação das espécies, tanto por meio das imagens de asas quanto dos acúleos, com médias de acerto de 87,8% e 90,6%, respectivamente. Em relação à associação de A. fraterculus com os hospedeiros, também foram obtidos resultados positivos com a análise de imagens (médias de 85,3% de acerto nas imagens de asas e de 88,3% nas imagens de acúleos). A morfometria geométrica das asas, utilizando 17 marcos, indicou diferenças na forma das asas dos indivíduos de cada espécie, separando-os com sucesso em grupos distintos. Em relação à associação de A. fraterculus com seus hospedeiros, os grupos formados não foram muito distintos, principalmente em relação aos indivíduos provenientes de pêssego. A análise de morfometria multivariada de sete medidas dos ápices dos acúleos, por meio da análise discriminante linear (ADL), também indicou diferenças entre as espécies, separando-as em três grupos. Por meio da análise de cluster (UPGMA), verificou-se que A. fraterculus e A. obliqua formam um grupo e A. sororcula fica isolada, indicando que as medidas que mais influenciaram o agrupamento das espécies, foram o comprimento da serra (L3 e L7). Na associação com hospedeiros, foram obtidos resultados positivos com a ADL, entretanto, não foi possível separar as populações de um mesmo hospedeiro por meio da UPGMA. As duas técnicas foram eficientes na separação das espécies e na associação de A. fraterculus com seus hospedeiros, mostrando que o fruto hospedeiro pode influenciar na coloração e forma da asa e no formato do acúleo nas três espécies do grupo fraterculus. / The fruit flies are pests of quarantine importance, among which stand out the genus Anastrepha. Despite of many study, the taxonomy of some groups of the genus is still not adequately resolved. The correct identification of fraterculus group requires practice/knowledge and the use of a number of techniques. Thus, this study proposes to test the efficiency of two techniques in the identification of three species (A. fraterculus, A. obliqua e A. sororcula) and in the identification of A. fraterculus specimens related to three hosts (guava, loquat and peach). Were tested the techniques of image analysis, for the fists time in fruit flies, and of morphometry (conventional for the aculeus and geometric for the wings). By image analysis, very high accuracies were obtained for species identification, both by the images of the wings and aculeus, with average accuracy of 87,8% and 90,6%, respectively. Regarding the association of A. fraterculus with the hosts, also were obtained positive results with image analysis (means of 85,3% of accuracy on images of wings and 88,3% on images of aculeus). The geometric morphometric of wings, using 17 landmarks, indicated differences in the wings shape of the individuals of each species, separating them into distinct groups successfully. Regarding the association of A. fraterculus with the hosts, the groups obtained were not very distinct, specially in relation to individuals from peach. The multivariate morphometric of seven measures of the aculeus tip, by linear discriminant analysis (LDA), also indicated differences in the species, separating them in three groups. By cluster analysis (UPGMA), was noted that A, fraterculus and A. obliqua form a group and A. soroscula is isolated, suggesting that the measures that most influenced the grouping of the species were the length of the serrate part (L3 and L7). In the host association, were obtained positives results with LDA, however, was not possible separate the populations of the same host by UPGMA. Both techniques were effectives in separating the species and in the association of A. fraterculus with their hosts, showing that the host fruit can influence in the color and shape of the wing and in the shape of the aculeus in the three species of the group fraterculus.

As moscas-das-frutas são pragas de importância quarentenária, entre as quais se destacam as espécies do gênero Anastrepha. Apesar de muito estudada, a taxonomia de alguns grupos do gênero ainda não está adequadamente resolvida. A correta identificação do grupo fraterculus exige prática/conhecimento e a utilização de uma série de técnicas. Assim, o presente estudo propõe testar a eficiência de duas técnicas na identificação de três espécies (A. fraterculus, A. obliqua e A. sororcula) e na identificação de espécimes de A. fraterculus em relação a três hospedeiros (goiaba, nêspera e pêssego). Foram testadas as técnicas de análises de imagens, pela primeira vez em moscas-das-frutas, e de morfometria (multivariada para os acúleos e geométrica para as asas). Pela análise de imagens, obtiveram-se acurácias bastante altas na identificação das espécies, tanto por meio das imagens de asas quanto dos acúleos, com médias de acerto de 87,8% e 90,6%, respectivamente. Em relação à associação de A. fraterculus com os hospedeiros, também foram obtidos resultados positivos com a análise de imagens (médias de 85,3% de acerto nas imagens de asas e de 88,3% nas imagens de acúleos). A morfometria geométrica das asas, utilizando 17 marcos, indicou diferenças na forma das asas dos indivíduos de cada espécie, separando-os com sucesso em grupos distintos. Em relação à associação de A. fraterculus com seus hospedeiros, os grupos formados não foram muito distintos, principalmente em relação aos indivíduos provenientes de pêssego. A análise de morfometria multivariada de sete medidas dos ápices dos acúleos, por meio da análise discriminante linear (ADL), também indicou diferenças entre as espécies, separando-as em três grupos. Por meio da análise de cluster (UPGMA), verificou-se que A. fraterculus e A. obliqua formam um grupo e A. sororcula fica isolada, indicando que as medidas que mais influenciaram o agrupamento das espécies, foram o comprimento da serra (L3 e L7). Na associação com hospedeiros, foram obtidos resultados positivos com a ADL, entretanto, não foi possível separar as populações de um mesmo hospedeiro por meio da UPGMA. As duas técnicas foram eficientes na separação das espécies e na associação de A. fraterculus com seus hospedeiros, mostrando que o fruto hospedeiro pode influenciar na coloração e forma da asa e no formato do acúleo nas três espécies do grupo fraterculus. / The fruit flies are pests of quarantine importance, among which stand out the genus Anastrepha. Despite of many study, the taxonomy of some groups of the genus is still not adequately resolved. The correct identification of fraterculus group requires practice/knowledge and the use of a number of techniques. Thus, this study proposes to test the efficiency of two techniques in the identification of three species (A. fraterculus, A. obliqua e A. sororcula) and in the identification of A. fraterculus specimens related to three hosts (guava, loquat and peach). Were tested the techniques of image analysis, for the fists time in fruit flies, and of morphometry (conventional for the aculeus and geometric for the wings). By image analysis, very high accuracies were obtained for species identification, both by the images of the wings and aculeus, with average accuracy of 87,8% and 90,6%, respectively. Regarding the association of A. fraterculus with the hosts, also were obtained positive results with image analysis (means of 85,3% of accuracy on images of wings and 88,3% on images of aculeus). The geometric morphometric of wings, using 17 landmarks, indicated differences in the wings shape of the individuals of each species, separating them into distinct groups successfully. Regarding the association of A. fraterculus with the hosts, the groups obtained were not very distinct, specially in relation to individuals from peach. The multivariate morphometric of seven measures of the aculeus tip, by linear discriminant analysis (LDA), also indicated differences in the species, separating them in three groups. By cluster analysis (UPGMA), was noted that A, fraterculus and A. obliqua form a group and A. soroscula is isolated, suggesting that the measures that most influenced the grouping of the species were the length of the serrate part (L3 and L7). In the host association, were obtained positives results with LDA, however, was not possible separate the populations of the same host by UPGMA. Both techniques were effectives in separating the species and in the association of A. fraterculus with their hosts, showing that the host fruit can influence in the color and shape of the wing and in the shape of the aculeus in the three species of the group fraterculus.

Las Moscas de la Fruta en especial la Ceratitis capitata Wiedemann es una de las plagas más dañinas del mundo, ataca a más de 250 especies frutícolas y hortalizas, constituyendo la principal restricción fitosanitarias para su exportación. El Organismo Internacional de Energía Atómica dentro del PROYECTO RLA/5/043 (ARCAL XXXIII) “REGLAMENTO CUARENTENARIO ARMONIZADO PARA LA IRRADIACIÓN DE FRUTAS FRESCAS” y la participación de Argentina, Brasil, Cuba, Chile, México, Perú y Venezuela inician investigaciones para demostrar la viabilidad y validar la irradiación como tratamiento cuarentenario. Perú inicia las investigaciones a través del Instituto Peruano de Energía Nuclear, dando lugar a esta investigación, realizado en el Centro de Producción de Moscas de la Fruta Estériles del SENASA y el laboratorio de la PIMU supervisado por el experto del OIEA Ing. Guy Hallman. La investigación consistió en dos etapas: 1° determinar la dosis mínima efectiva de irradiación a la cual no haya emergencia de mosca adulta (prueba de bioensayo), 2° la evaluación de 30000 individuos a la dosis mínima efectiva, que proporciona datos estadísticamente confiables (prueba confirmatoria); confirmándose que a 0,1kGy no hay emergencia; de la evaluación química y organoléptica se determinó que no existe diferencia significativa frente a los mangos que no fueron tratados. / -- Tephritidae fruit flies are among the most damaging pests of fruit crops worldwide. Ceratitis capitata wiedemann, for instance, can infest more than 250 fruit and vegetable crop species, and constitutes the main phytosanitary constrain for export purposes. The International Atomic Energy Agency through the Project RLA/5/043 (ARCAL XXXIII) “ARMONIZED QUARANTINE REGULATION FOR THE IRRADIATION OF FRESH FRUITS”, along with Argentina, Brazil, Cuba, Chile, Mexico, Peru, and Venezuela, initiated investigations to demonstrate viability of irradiation as a quarantine treatment and to validate it as such. Besides, Peru began investigations through the Peruvian Institute of Nuclear Energy by carrying out a research at both SENASA’s Production Center of Sterile Fruit Flies and PIMU’s laboratory; it was supervised by Dr. Guy Hallman, an OIEA’s irradiation expert. This research comprised two stages: 1) Determine the minimum irradiation dose to avoid emergence of fruit fly adults (bioassay test), and 2) Evaluate 30,000 individuals (having been exposed to the minimum effective dose) to provide statistically reliable data (confirmatory test). It was confirmed that no adult emergence occurred at 0.1 kGy, and no significant differences were found between treated and non-treated mangoes when both chemical and organoleptic tests were applied. / Tesis

El empleo de microavispas como parasitoides de estado pupal de Musca domestica surge como una alternativa importante de control biológico que podría resultar efectiva. En el presente trabajo, se realizó un estudio comparativo de la actividad parasitaria de Spalangía endius y Muscídifurax sp. sobre pupas de M. domestica en bioensayos de laboratorio en condiciones controladas de temperatura (según ensayo), humedad relativa (75 ± 3%) y oscuridad. Se observó la influencia de la temperatura en el ciclo biológico y en la longevidad de ambos parasitoides para lo cual se trabajó a 5 temperaturas diferentes (15 ºC, 20 ºC, 250 ºC y 28 ºC) resultando 25 ºC la temperatura óptima para la crianza. A esta temperatura, se observó que la duración del ciclo biológico fue mayor en S. endius (22,6 días) que en Musidiífurax sp. (14,8 días) y que está inversamente relacionada con la temperatura, siendo rnayor en las hembras que en los machos. La longevidad fue similar para ambas especies (20,70 días en S. endius y 18,60 en Muscidifurax sp) siendo siempre mayor en las hembras que en los machos. Se determinó la capacidad de oviposición de las microavispas a 25ºC con 20 pupas como población constante de hospedero, obteniéndose para S. endius 15 días de oviposición con un promedio de 175 pupas parasitadas, promedio mayor que el de Muscidifurax sp. que parasitó 140 pupas en 16 días. Para ambas especies la mayor oviposíción ocurrió al tercer dia. Se determinó el estado fenológico de maduración de las pupas de M. domestica susceptibles de ser parasitadas, a 25ºC en grupos de 50 pupas con edades de 1, 2, 3 y 4 días, siendo las pupas de dos días de maduración, las más parasitadas, obteniéndose 66,4 % de parasitismo efectivo por S. endius y 60,2 % por Muscidifuraxsp. Se determinó el número óptimo de pupas de M. domestica para ser expuestas a ambos parasitoides; de las nueve relaciones de parasitación con que se trabajó el número óptimo de pupas fue 10 (relación 1:10). En condiciones de laboratorio, S. endius resultó más efectivo en comparación con Muscidifurax sp. por lo que puede considerarse como un eficiente controlador biológico de pupas de M. domestica. / ---- The employment of parasitoid microwasps of pupae state of Musca domestica emerge as an important alternative of biological control which could result effective. In the current research, a comparative study of the parasitical activity of Spalangia endiuus and Muscidifurax sp. over pupae of Musca domestica in laboratory bioassays was performed, under controlled condition of temperature (accordíng to each assay), relative humidity (75 ± 3 %) and darkness. The temperature (15ºC, 20ºC, 25 ºC and 28 ºC) influence on biological cycle and longevity of both parasitoids was analyzed, being 25 ºC., the optimal temperature of breeding. At this temperature, the biological cycle duration of S. endius (22.6 days) was greater in comparison to Muscídifurax sp. (14,8 days). The biological cycle length was in inverse relation with temperature, being higher in females than in males for both species. The longevity in both species was statistically the same for both species (20.7) days for S. endius and 18.6 days for Muscidifurax sp.), being always higher in females than in males. The oviposition capacity at 25 ºC with 20 pupae as constant host population was analyzed, obtaining for S. endius, 15 days of oviposítion with 175 parasitized pupae in total, by contrast Muscidifurax sp. parasítized 140 pupae in 16 days. The highest oviposition for both species was the third day. The phenological state of maturation over susceptible pupae of M. domestica to be parasitized was determined, at 25 ºC in groups of 50 pupae of 1, 2, 3 and 4 days old. The pupae of two days of maturation, were the most parasitized obtaining 66.4 % of effective parasitism for S. endius and 60.2% for Muscidifurax sp. Moreover, the optimal number of pupae of housefly to be expose to both parasitoid species was determined; of the nine relations of parasitism performed (1:5 to 1:50), the optimal number of pupae was the relation 1:10. Finally, in laboratory conditions, the microwasp S. endius resulted being the parasitoid more effective in comparison to Muscidifurax sp. and could be considerate an efficient biological control of pupae of M. domestica. / Tesis

El empleo de microavispas como parasitoides de estado pupal de Musca domestica surge como una alternativa importante de control biológico que podría resultar efectiva. En el presente trabajo, se realizó un estudio comparativo de la actividad parasitaria de Spalangía endius y Muscídifurax sp. sobre pupas de M. domestica en bioensayos de laboratorio en condiciones controladas de temperatura (según ensayo), humedad relativa (75 ± 3%) y oscuridad. Se observó la influencia de la temperatura en el ciclo biológico y en la longevidad de ambos parasitoides para lo cual se trabajó a 5 temperaturas diferentes (15 ºC, 20 ºC, 250 ºC y 28 ºC) resultando 25 ºC la temperatura óptima para la crianza. A esta temperatura, se observó que la duración del ciclo biológico fue mayor en S. endius (22,6 días) que en Musidiífurax sp. (14,8 días) y que está inversamente relacionada con la temperatura, siendo rnayor en las hembras que en los machos. La longevidad fue similar para ambas especies (20,70 días en S. endius y 18,60 en Muscidifurax sp) siendo siempre mayor en las hembras que en los machos. Se determinó la capacidad de oviposición de las microavispas a 25ºC con 20 pupas como población constante de hospedero, obteniéndose para S. endius 15 días de oviposición con un promedio de 175 pupas parasitadas, promedio mayor que el de Muscidifurax sp. que parasitó 140 pupas en 16 días. Para ambas especies la mayor oviposíción ocurrió al tercer dia. Se determinó el estado fenológico de maduración de las pupas de M. domestica susceptibles de ser parasitadas, a 25ºC en grupos de 50 pupas con edades de 1, 2, 3 y 4 días, siendo las pupas de dos días de maduración, las más parasitadas, obteniéndose 66,4 % de parasitismo efectivo por S. endius y 60,2 % por Muscidifuraxsp. Se determinó el número óptimo de pupas de M. domestica para ser expuestas a ambos parasitoides; de las nueve relaciones de parasitación con que se trabajó el número óptimo de pupas fue 10 (relación 1:10). En condiciones de laboratorio, S. endius resultó más efectivo en comparación con Muscidifurax sp. por lo que puede considerarse como un eficiente controlador biológico de pupas de M. domestica. / The employment of parasitoid microwasps of pupae state of Musca domestica emerge as an important alternative of biological control which could result effective. In the current research, a comparative study of the parasitical activity of Spalangia endiuus and Muscidifurax sp. over pupae of Musca domestica in laboratory bioassays was performed, under controlled condition of temperature (accordíng to each assay), relative humidity (75 ± 3 %) and darkness. The temperature (15ºC, 20ºC, 25 ºC and 28 ºC) influence on biological cycle and longevity of both parasitoids was analyzed, being 25 ºC., the optimal temperature of breeding. At this temperature, the biological cycle duration of S. endius (22.6 days) was greater in comparison to Muscídifurax sp. (14,8 days). The biological cycle length was in inverse relation with temperature, being higher in females than in males for both species. The longevity in both species was statistically the same for both species (20.7) days for S. endius and 18.6 days for Muscidifurax sp.), being always higher in females than in males. The oviposition capacity at 25 ºC with 20 pupae as constant host population was analyzed, obtaining for S. endius, 15 days of oviposítion with 175 parasitized pupae in total, by contrast Muscidifurax sp. parasítized 140 pupae in 16 days. The highest oviposition for both species was the third day. The phenological state of maturation over susceptible pupae of M. domestica to be parasitized was determined, at 25 ºC in groups of 50 pupae of 1, 2, 3 and 4 days old. The pupae of two days of maturation, were the most parasitized obtaining 66.4 % of effective parasitism for S. endius and 60.2% for Muscidifurax sp. Moreover, the optimal number of pupae of housefly to be expose to both parasitoid species was determined; of the nine relations of parasitism performed (1:5 to 1:50), the optimal number of pupae was the relation 1:10. Finally, in laboratory conditions, the microwasp S. endius resulted being the parasitoid more effective in comparison to Muscidifurax sp. and could be considerate an efficient biological control of pupae of M. domestica.

Las Moscas de la Fruta en especial la Ceratitis capitata Wiedemann es una de las plagas más dañinas del mundo, ataca a más de 250 especies frutícolas y hortalizas, constituyendo la principal restricción fitosanitarias para su exportación. El Organismo Internacional de Energía Atómica dentro del PROYECTO RLA/5/043 (ARCAL XXXIII) “REGLAMENTO CUARENTENARIO ARMONIZADO PARA LA IRRADIACIÓN DE FRUTAS FRESCAS” y la participación de Argentina, Brasil, Cuba, Chile, México, Perú y Venezuela inician investigaciones para demostrar la viabilidad y validar la irradiación como tratamiento cuarentenario. Perú inicia las investigaciones a través del Instituto Peruano de Energía Nuclear, dando lugar a esta investigación, realizado en el Centro de Producción de Moscas de la Fruta Estériles del SENASA y el laboratorio de la PIMU supervisado por el experto del OIEA Ing. Guy Hallman. La investigación consistió en dos etapas: 1° determinar la dosis mínima efectiva de irradiación a la cual no haya emergencia de mosca adulta (prueba de bioensayo), 2° la evaluación de 30000 individuos a la dosis mínima efectiva, que proporciona datos estadísticamente confiables (prueba confirmatoria); confirmándose que a 0,1kGy no hay emergencia; de la evaluación química y organoléptica se determinó que no existe diferencia significativa frente a los mangos que no fueron tratados. / Tephritidae fruit flies are among the most damaging pests of fruit crops worldwide. Ceratitis capitata wiedemann, for instance, can infest more than 250 fruit and vegetable crop species, and constitutes the main phytosanitary constrain for export purposes. The International Atomic Energy Agency through the Project RLA/5/043 (ARCAL XXXIII) “ARMONIZED QUARANTINE REGULATION FOR THE IRRADIATION OF FRESH FRUITS”, along with Argentina, Brazil, Cuba, Chile, Mexico, Peru, and Venezuela, initiated investigations to demonstrate viability of irradiation as a quarantine treatment and to validate it as such. Besides, Peru began investigations through the Peruvian Institute of Nuclear Energy by carrying out a research at both SENASA’s Production Center of Sterile Fruit Flies and PIMU’s laboratory; it was supervised by Dr. Guy Hallman, an OIEA’s irradiation expert. This research comprised two stages: 1) Determine the minimum irradiation dose to avoid emergence of fruit fly adults (bioassay test), and 2) Evaluate 30,000 individuals (having been exposed to the minimum effective dose) to provide statistically reliable data (confirmatory test). It was confirmed that no adult emergence occurred at 0.1 kGy, and no significant differences were found between treated and non-treated mangoes when both chemical and organoleptic tests were applied.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-04-19T16:46:45Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 385661 bytes, checksum: 55eb8c44e850fa392f30872f56003036 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-19T16:46:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 385661 bytes, checksum: 55eb8c44e850fa392f30872f56003036 (MD5) Previous issue date: 2014-01-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As moscas minadoras (Diptera: Agromyzidae) são importantes pragas em cultivos de diversas plantas no mundo. Estes insetos causam danos a diversos hospedeiros por confeccionarem minas serpenteadas nas folhas, reduzindo área fotossintética e favorecendo a entrada de microrganismos fitopatogêncicos nas plantas. Apesar da importância das moscas minadoras pouco se conhece sobre as espécies que ocorrem na região tropical. Assim, este trabalho teve como objetivo identificar morfologicamente e molecularmente, utilizando o gene citocromo c oxidase subunidade I, as espécies de mosca minadora de ocorrência em diferentes cultivos e regiões brasileiras. Foram coletados espécimes de mosca minadora nos estados de Minas Gerais, São Paulo, Rio de Janeiro, Espirito Santo, Bahia e Pernambuco. Foram identificadas oito espécies de moscas minadoras: Calycomyza malvae, Liriomyza brassicae, Liriomyza sp. 1, Liriomyza sp. 2, Liriomyza huidobrensis, Liriomyza sabaziae, Liriomyza sativae e Liriomyza trifolli presentes no Brasil. De acordo com a análise dos componentes principais, as espécies L. sp. 2, L. huidobrensis e L. brassicae tenderam a ocorrer em locais de baixa ocorrência de chuvas. As espécies L. sp. 1, L. sabaziae e L. trifolli tenderam a ocorrer em locais de temperatura mais amena e de maior ocorrência de chuvas. A espécie Calycomyza malvae foi pouco influenciada pelos elementos climáticos. / The leafminers (Diptera: Agromyzidae) are important pests on crops of various plants in the world. These insects cause damage to several hosts to make serpentine mines on leaves, reducing photosynthetic area and favoring the entry of phytopathogenic microorganisms on plants. Despite the importance of leafminers little is known about the species that occur in tropical regions. This study aimed to identify morphologically and molecularly, using cytochrome c oxidase subunit I gene, leafminer species occurrence in different crops and regions. Leafminer specimens were collected in the states of Minas Gerais, São Paulo, Rio de Janeiro, Espirito Santo, Bahia and Pernambuco. Eight species of leafminers were identified: Calycomyza malvae, Liriomyza brassicae, Liriomyza sp. 1, Liriomyza sp. 2, Liriomyza huidobrensis, Liriomyza sabaziae, Liriomyza sativae and Liriomyza trifolli present in Brazil. According to main component analysis, the species L. sp. 2, L. huidobrensis and L. brassicae tended to occur in areas of low rainfall. The species L. sp. 1, L. sabaziae and L. trifolli tended to occur in areas of milder temperatures and higher rainfall. The Calycomyza malvae specie was little influenced by climatic factors. / Lattes não encontrado.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The cardini group is part of the genus Drosophila and has its geographical distribution in the Neotropics. Some previous studies revealed the high variability in species of this group of flies. Transposable elements are recognized as capable of high potential for generation of genetic variability in the genomes of the organisms where they are present. Considering such assumptions, the present study has the objective to contribute with the molecular, ecological e evolutionary studies of the transposable elements in the cardini group of Drosophila and in the Drosophilidae family, to such, identifying the presence/absence and the patterns of distribution of the retroelements micropia and gypsy in sixteen natural populations of: Drosophila cardinoides (02), D. neocardini (05) and D. polymorpha (09) in the Brazilian States of Santa Catarina and Rio Grande do Sul. Aiming to identify the presence of the retroelement micropia in the genome of these populations, a fragment isolated from the genome of D. hydei was used as probe. We verified that all populations here studied of the cardini group of Drosophila present strong signal of hybridization, indicating that possibly they have sequences very similar to the probe used in their genomes. The analysis of a part of the micropia s reverse transcriptase sequence by the PCR technique shows that almost all the populations have sequences highly similar to the primers used, showing the expected fragment of 812pb. Although the populations of D. polymorpha presented a fragment slightly smaller than those from D. neocardini and D. cardinoides showing differences at the nucleotide level between the sequences. In the analyze of the presence of gypsy element isolated from D. melanogaster s genome, it was observed that all studied populations have DNA sequence homologies with the probe used. Drosophila cardinoides presented six to seven hybridization bands visible in the blots, D. neocardini presented four to five bands and D. polymorpha presented only one or two bands. When the probe used was a part of the env gene of the element gypsy isolated of D. polymorpha, the populations of D. polymorpha present a sole band in the blots, the populations of D. neocardini present three bands, and the populations of D. cardinoides only present very weak bands, but under exposition by a higher time, three to four bands appeared. From all populations of D. neocardini it was obtained bands with very faint signals. When hybridized with this second probe, indicating high nucleotide divergence between the probe isolated from D. polymorpha and the sequences present in the genome of D. neocardini. For all three probes used in this study: gypsy isolated from D. melanogaster, part of the gene env isolated of the element gypsy from D. polymorpha, and the element micropia isolated from D. hydei, we verified the existence of variability in the banding patterns revealed by Southern Blot between the species. For micropia, this variability was verified among the different populations of the same species. / O grupo cardini faz parte do gênero Drosophila e tem sua distribuição descrita para a região dos Neotrópicos. Alguns estudos foram realizados com espécies deste grupo evidenciando a alta variabilidade encontrada nestas moscas. Por sua vez, os elementos de transposição possuem grande potencial para geração de variabilidade genética nos organismos em que estão presentes. Considerando estas afirmativas, este trabalho tem o objetivo de contribuir com os estudos moleculares, ecológicos e evolutivos dos elementos de transposição no grupo cardini e na família Drosophilidae; portanto, identificando a presença/ausência e analisando o padrão de distribuição dos retroelementos micropia e gypsy em dezesseis populações naturais de: Drosophila cardinoides (02), D. neocardini (05) e D. polymorpha (09) distribuídas nos Estados de Santa Catarina e Rio Grande do Sul. Visando a busca por seqüências similares ao retroelemento micropia no genoma das populações, foi utilizado como sonda o elemento isolado de D. hydei. Verificou-se que o DNA de todas as populações analisadas apresentam forte sinal de hibridação, indicando que possivelmente as populações possuem seqüências muito similares à seqüência utilizada como sonda. A análise de parte da seqüência da transcriptase reversa do elemento micropia, através da técnica de PCR, nos indicou que todas as populações apresentam seqüências altamente similares ao par de primers utilizados, entretanto as populações de D. polymorpha aparentemente possuem seqüências ligeiramente inferiores ao tamanho esperado de 812pb, indicando que existem diferenças ao nível nucleotídico entre as seqüências presentes nas três espécies. Na análise de presença de seqüências similares ao elemento gypsy isolado de D. melanogaster foi verificado que todas as populações apresentam seqüências que hibridaram com a sonda utilizada. Drosophila cardinoides apresentou de seis a sete bandas visíveis nos blots, D. neocardini apresentou de quatro a cinco bandas e D. polymorpha apresentou de uma a duas bandas. Quando foi utilizada a sonda referente à parte do gene env do elemento gypsy isolado de D. polymorpha, as populações de D. polymorpha apresentaram uma única banda nos blots, as populações de D. neocardini apresentaram três bandas e as populações de D. cardinoides apresentaram bandas muito fracas, mas utilizando maior tempo de exposição dos blots, as populações desta espécie mostraram ter de três a quatro bandas. De todas as populações de D. neocardini, foram obtidas bandas com sinais muito fracos quando hibridados com esta segunda sonda, o que indica um alto grau de divergência nucleotídica entre a sonda isolada de D. polymorpha e as seqüências existentes em D. neocardini. Para as três sondas utilizadas neste trabalho: gypsy isolado de D. melanogaster, parte do gene env isolado do elemento gypsy de D. polymorpha e o elemento micropia isolado de D. hydei, verificamos a existência de variabilidade no padrão de bandas apresentado pelas diferentes populações. Para o elemento micropia verificamos também a existência de variabilidade no padrão de bandas entre as diferentes populações de mesma espécie.

Orientador: Celso Luis Marino / Banca: Maoel Victor Franco Lemos / Banca: Carlos Frederico Wilcken / Resumo: Wolbachia é uma bactéria endossimbionte comumente encontrada nos tecidos reprodutores de invertebrados, sendo herdada vertical e horizontalmente. Esta bactéria é desencadeadora de inúmeras alterações reprodutivas, dentre elas a incompatibilidade citoplasmática. Bactéria Wolbachia apresenta oito diferentes tipos de genoma, identificados de A a H. Dentre os hospedeiros da Wolbachia estão as moscas-das-frutas do gênero Anastrepha, que são um importante inseto-praga causador de inúmeras perdas na fruticultura de vários países na América. Neste estudo, foram utilizados os primers 16S rDNA, ftsZ e wsp na detecção da Wolbachia e identificação do supergrupo em três populações de Anastrepha do complexo fraterculus, de diferentes regiões do estado de São Paulo. Em todas as amostras de moscas foi detectada a presença da Wolbachia do supergrupo A, através da utilização dos primers 16S rDNA e wsp, visto que o ftsZ apresentou baixa sensibilidade na detecção desta bactéria em Anastrepha. Comparações das sequências do gene wsp dos 62 indivíduos no Genebank possibilitaram a identificação de duas linhagens de Wolbachia, uma pertencente a Anastrepha sp. 2 (wAsp2B) e a outra ao nematóide Brugia pahangi (Bp-1-1001). Com isso, sugere-se a ocorrência de transferência horizontal da linhagem Bp-1-1001 em Anastrepha através das vespas parasitas de dípteros. A partir de comparações entre as sequências geradas com o gene wsp, observou-se a ocorrência de quatro diferentes sequências pertencentes a novas linhagens de Wolbachia, denominadas wAsc, wAnc, wBjc e wBsp. Essas linhagens estão distribuídas nas diferentes populações de moscas-das-frutas do gênero Anastrepha / Abstract: Wolbachia is a endosymbiont bacteria commonly found in reproducer tissue of invertebrates, being vertically and horizontally inherited. This bacteria cause innumerable reproductive alterations, among them a cytoplasmic incompatibility. Wolbachia have eight different types of genome, designated from A to H. Among Wolbachia host there are the fruit flies of genus Anastrepha. These arthropods are important pest insect that causes many losses in fruit production of many countries of America. In this work, were used the primers 16S rDNA, ftsZ and wsp to detect Wolbachia and to identify the supergroups of three Anastrepha populations the different regions of São Paulo state, Brazil. In all fruit flies samples, it was detected the presence of Wolbachia of the A supergroup, through the use of primers 16S rDNA and wsp, since ftsZ has low sensitivity in detecting this bacteria in Anastrepha. Comparisons of the wsp gene sequences of 62 samples in GeneBank, allowed the identification of two Wolbachia lineages, one relating to Anastrepha sp. 2 (wAsp2B) and other in Brugia pahangi nematode (Bp-1-1001). Therefore it is propose the occurrence the horizontal transference of Wolbachia lineages Bp-1- 1001 into Anastrepha through the did parasite wasps of dipterous. The comparisons among the wsp gene sequences showed the occurrence of four different sequences, possibly belonging to the news lineages of Wolbachia, which were named wAsc, wAnc, wBjc and wBsp. These lineages are distributed in different fruit flies of populations of the Anastrepha genus / Mestre