Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-31. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:16Z : No. of bitstreams: 1 000868765.pdf: 2521331 bytes, checksum: 991fffa9898ac1fb4f910430954d436c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Bolsa Estágio de Pesquisa no Exterior (BEPE) / A invasão da glândula salivar pela forma de esporozoítos do gênero Plasmodium é um passo crucial para o ciclo de vida nos mosquitos do gênero Anopheles, e um passo obrigatório para que a transmissão da malária ocorra. A TRAP domínio-A, uma proteína de esporozoítos que é secretada na face anterior do parasita quando em contato com a glândula salivar, interage com a saglin, proteína majoritária da glândula. Esta interação é fundamental para que ocorra a invasão. Este processo ocorre em Anopheles gambiae infectado com Plasmodium0berghei ou Plasmodium0 falciparum. No Brasil, o Anopheles darlingi é o principal veto do parasita da malária. Aproximadamente 80% dos!casos de malária são!causados por Plasmodium vivax, anualmente e aproximadamente 20% por Plasmodium falciparum. Em um estudo prévio de nosso grupo, foi observado! 80% de infecção por P. 0falciparum nos An. darlingi coletados em Rondônia, Porto Velho. Isto pode ser provavelmente porque o An. darlingi pode se infectar facilmente com P. falciparum, mas não o transmite de uma maneira eficiente. Comparamos a sequência da saglin de An. gambiae com sequências!de An. darlingi, e SG1 e SG1B foram as sequências mais relacionadas, com 27% de similaridade. Sequenciamos isolados de P alciparum!brasileiros, e!aminoácidos chave no!processo de invasão da glândula se apresentaram conservados. Caracterizamos, pela primeira vez, a região da saglin de An. gambiae, responsável pela interação com o domínio-A da TRAP, e observamos que esta sequência nao encontra homologia com sequências de An. darlingi. Anofelinos!da espécie An.gambiae e An. darlingi, divergiram há aproximadamente 79 milhões de anos, e o processo de especiação provocou o surgimento de algumas barreiras para o desenvolvimento de espécies de Plasmodium, que habitam regiões geográficas distintas. Parasitas da espécie P. falciparum chegaram no Brasil a aproximadamente 500 anos junto... / Salivary!gland!invasion!by!sporozoites!of!Plasmodium!genus!is!a!crucial!step! to! life! cycle! in! mosquitoes! of! Anopheles! genus, and! an! obligate! step! to! malaria! transmission! occurs.! TRAP! A! domain,! a! sporozoite! protein! that! is! secreted! on! anterior! tip! of! parasite! upon! contact! with! salivary! glands,! interacts! with! saglin,! a! major!gland!protein.!This!interaction!is!fundamental!to!gland!invasion.!This!process! occurs! in! Anopheles0 gambiae! infected! with! Plasmodium0 berghei! or! Plasmodium0 falciparum.!In!Brazil,!Anopheles0darlingi!is!the!main!vector!of!malaria!parasite.!Near! 80%! of!malaria! cases! are! due! Plasmodium0vivax,! annually,! and! about! 20%! due! to! Plasmodium0falciparum.! In! previous! studies! of! our! lab,! it!was! observed! 80%! of! P.! falciparum! infection! in! An.0 darlingi! collected! in! Rondonia,! Porto! Velho.! This! probably!happens!because!An.0darlingi!can!be!easily!infected!with!P.0falciparum,!but! can!not!efficiently!transmit!them.!We!compare!An.0gambiae!saglin!sequence!with0An.0 darlingi0sequences,!and!SG1!and!SG1B!were!the!most!related!sequences,!with!27%! of!similarity.!Brazilian!P.0falciparum!isolated!were!sequenced,!and!key!amino!acids! related!to!salivary!gland!invasion,!are!preserved.!We!characterize!for!the!first!time,! An.0gambiae! saglin! region! responsible! to! interact!with! A!domain!of!TRAP,! and!we! observed!that!these!sequences!have!no!homology!with!An.0darling!ones.!An.gambiae... / FAPESP: 2011/09400-6 / Bolsa Estágio de Pesquisa no Exterior (BEPE): 2012/16103-0

Orientador: Paulo Eduardo Martins Ribolla / Coorientador: Débora Colombi / Banca: Maria Anice Sallum Mured / Banca: Marcelo Urbano Ferreira / Banca: Marcos Fontes / Banca: Valber de Albuquerque Pedrosa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho", Instituto de Biociências de Botucatu / Resumo: A invasão da glândula salivar pela forma de esporozoítos do gênero Plasmodium é um passo crucial para o ciclo de vida nos mosquitos do gênero Anopheles, e um passo obrigatório para que a transmissão da malária ocorra. A TRAP domínio-A, uma proteína de esporozoítos que é secretada na face anterior do parasita quando em contato com a glândula salivar, interage com a saglin, proteína majoritária da glândula. Esta interação é fundamental para que ocorra a invasão. Este processo ocorre em Anopheles gambiae infectado com Plasmodium0berghei ou Plasmodium0 falciparum. No Brasil, o Anopheles darlingi é o principal veto do parasita da malária. Aproximadamente 80% dos!casos de malária são!causados por Plasmodium vivax, anualmente e aproximadamente 20% por Plasmodium falciparum. Em um estudo prévio de nosso grupo, foi observado! 80% de infecção por P. 0falciparum nos An. darlingi coletados em Rondônia, Porto Velho. Isto pode ser provavelmente porque o An. darlingi pode se infectar facilmente com P. falciparum, mas não o transmite de uma maneira eficiente. Comparamos a sequência da saglin de An. gambiae com sequências!de An. darlingi, e SG1 e SG1B foram as sequências mais relacionadas, com 27% de similaridade. Sequenciamos isolados de P alciparum!brasileiros, e!aminoácidos chave no!processo de invasão da glândula se apresentaram conservados. Caracterizamos, pela primeira vez, a região da saglin de An. gambiae, responsável pela interação com o domínio-A da TRAP, e observamos que esta sequência nao encontra homologia com sequências de An. darlingi. Anofelinos!da espécie An.gambiae e An. darlingi, divergiram há aproximadamente 79 milhões de anos, e o processo de especiação provocou o surgimento de algumas barreiras para o desenvolvimento de espécies de Plasmodium, que habitam regiões geográficas distintas. Parasitas da espécie P. falciparum chegaram no Brasil a aproximadamente 500 anos junto... / Abstract: Salivary!gland!invasion!by!sporozoites!of!Plasmodium!genus!is!a!crucial!step! to! life! cycle! in! mosquitoes! of! Anopheles! genus, and! an! obligate! step! to! malaria! transmission! occurs.! TRAP! A! domain,! a! sporozoite! protein! that! is! secreted! on! anterior! tip! of! parasite! upon! contact! with! salivary! glands,! interacts! with! saglin,! a! major!gland!protein.!This!interaction!is!fundamental!to!gland!invasion.!This!process! occurs! in! Anopheles0 gambiae! infected! with! Plasmodium0 berghei! or! Plasmodium0 falciparum.!In!Brazil,!Anopheles0darlingi!is!the!main!vector!of!malaria!parasite.!Near! 80%! of!malaria! cases! are! due! Plasmodium0vivax,! annually,! and! about! 20%! due! to! Plasmodium0falciparum.! In! previous! studies! of! our! lab,! it!was! observed! 80%! of! P.! falciparum! infection! in! An.0 darlingi! collected! in! Rondonia,! Porto! Velho.! This! probably!happens!because!An.0darlingi!can!be!easily!infected!with!P.0falciparum,!but! can!not!efficiently!transmit!them.!We!compare!An.0gambiae!saglin!sequence!with0An.0 darlingi0sequences,!and!SG1!and!SG1B!were!the!most!related!sequences,!with!27%! of!similarity.!Brazilian!P.0falciparum!isolated!were!sequenced,!and!key!amino!acids! related!to!salivary!gland!invasion,!are!preserved.!We!characterize!for!the!first!time,! An.0gambiae! saglin! region! responsible! to! interact!with! A!domain!of!TRAP,! and!we! observed!that!these!sequences!have!no!homology!with!An.0darling!ones.!An.gambiae... / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-09-25T13:06:25Z No. of bitstreams: 1 2012_AnaRaquelLiraVieira.pdf: 7254071 bytes, checksum: 5f843bedd6da32272d943d126dadc5b3 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2012-09-28T12:05:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_AnaRaquelLiraVieira.pdf: 7254071 bytes, checksum: 5f843bedd6da32272d943d126dadc5b3 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-28T12:05:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_AnaRaquelLiraVieira.pdf: 7254071 bytes, checksum: 5f843bedd6da32272d943d126dadc5b3 (MD5) / A febre amarela (FA) é uma doença infecciosa de transmissão vetorial, que se mantem endêmica ou enzoótica na África e Américas do Sul e Central. A veiculação do vírus da FA está associada a insetos hematófagos da família Culicidae. No continente americano, os principais vetores desta arbovirose pertencem aos gêneros Haemagogus e Sabethes. O Parque Nacional de Brasília (PNB) é um ponto turístico, situado a 10km do centro da cidade e a 2km do Setor Habitacional Noroeste. No parque estão presentes primatas não-humanos (PNH) e mosquitos Haemagogus e Sabethes. Durante o surto de FA ocorrido no Distrito Federal (DF) entre dezembro de 2007 e março de 2008 foram registradas mortes de PNH no PNB. Estes elementos sinalizam para o risco de transmissão do vírus amarílico neste local. Com isso, dá-se a importância de se conhecer as espécies de culicídeos no PNB, bem como identificar precocemente a circulação do vírus amarílico nesta unidade de conservação. Os objetivos do trabalho foram: 1) analisar a riqueza e abundância das espécies de culicídeos capturadas em diferentes estratos da mata de galeria e entre as estações climáticas no PNB, com ênfase aos potenciais vetores de FA; 2) Verificar, dentre os mosquitos capturados, o percentual de infectados pelo vírus amarílico. Entre setembro de 2010 e agosto de 2011, culicídeos foram capturados, mensalmente, durante cinco dias consecutivos, entre 9 e 15 horas em solo e copa das árvores. Os mosquitos foram examinados para verificar infecção por flavivirus pela técnica de isolamento em células de Aedes albopictus, seguida por imunofluorescência indireta. Foram identificados 2677 culicídeos, distribuídos em 29 espécies. A maioria dos mosquitos foi capturada ao nível do solo (69%) e na estação chuvosa (86%). Dentre as espécies identificadas neste estudo, 11 já foram encontradas naturalmente infectadas com o vírus da FA. As espécies mais abundantes foram Sabethes albiprivus, Limatus durhamii, Haemagogus leucocelaenus, Haemagogus janthinomys, Aedes scapularis, Psorophora ferox e Aedes serratus. Hg. janthinomys, Li. durhamii, Ps. ferox, Ae. scapularis e Ae. serratus apresentaram diferenças significativas (p<0,05) quanto ao uso do habitat. Hg. janthinomys foi mais capturado em copa, ao contrário das demais espécies. Na estação chuvosa, as espécies mais abundantes foram Sa. albiprivus, Hg. leucocelanus e Hg. janthinomys. Na estação seca, os potenciais vetores de FA apresentaram baixa frequência e abundância, exceto Ae. scapularis e Ae. serratus. Apesar do flavivirus não ter sido detectado nos 2677 mosquitos examinados, recomenda-se a continuação do monitoramento entomológico no parque e em outras áreas vulneráveis à transmissão da FA no DF. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The yellow fever (YF) is an infectious disease transmission vector that keeps endemic or enzootic in Africa and South and Central Americas. The transmission of YF virus is associated with hematophagus insects of the family Culicidae. In the American continent, the main vectors of arbovirus belonging to the genera Haemagogus and Sabethes. The Brasilia National Park (BNP) is a tourist place, located 10km from the city center and 2km Northwest Housing Sector. Are present in the park nonhuman primates (NHP) and mosquitoes Haemagogus e Sabethes. During the outbreak of YF occurred in Distrito Federal (DF) between december 2007 and march 2008 deaths were recorded from NHP in the BNP. These elements point to the risk of transmission of YF virus in this location. Thus, there is the importance of knowing the species of mosquitoes in the park, as well as early identification of YF virus circulation in BNP. The objectives were: 1) to analyze the richness and abundance of species was captured in different strata of gallery forest and between seasons in park, with emphasis on potential vectors of YF; 2) verify, among captured mosquitoes, the percentage of mosquitoes infected with YF virus. Between september 2010 and august 2011, mosquitoes were captured monthly for five consecutive days, from 9 to 15 hours in ground and treetops. Mosquitoes were examined to verify the natural infection with flavivirus by the technique of isolation in Aedes albopictus cells, followed by indirect immunofluorescence. We identified 2677 culicids distributed in 29 species. Most mosquitoes were captured at ground level (69%) and in the rainy season (86%). Among the species identified in this study, 11 have been found naturally infected with YF virus. The most abundant species were Sabethes albiprivus, Limatus durhamii, Haemagogus leucocelaenus, Haemagogus janthinomys, Aedes scapularis, Psorophora ferox and Aedes serratus. Hg. janthinomys, Li. durhamii, Ps. ferox, Ae. scapularis and Ae. serratus showed significant differences (p<0.05) for habitat use. Hg. janthinomys was more caught in canopy, unlike the other species. In the rainy season the most abundant species were Sa. albiprivus, Hg. leucocelaenus and Hg. janthinomys. In the dry season the potential vectors of YF showed a very low frequency and abundance, except Ae. scapularis and Ae. serratus. Despite the flavivirus was not detected in 2677 mosquitoes examined, it is recommended the continuation of entomological monitoring in the park, and other areas vulnerable to the transmission of YF in DF.

Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-13T11:52:32Z No. of bitstreams: 2 TESE Afonso Cordeiro Agra Neto.pdf: 5198552 bytes, checksum: d837f12bcd56eb1a44a2ba8b0ab315cf (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T11:52:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Afonso Cordeiro Agra Neto.pdf: 5198552 bytes, checksum: d837f12bcd56eb1a44a2ba8b0ab315cf (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014 / Algumas espécies de insetos podem atuar como vetores de doenças ou pragas agrícolas. O mosquito Aedes aegypti é o vetor da dengue e o besouro Sitophilus zeamais (gorgulho do milho) ataca diversos tipos de grãos armazenados. O surgimento de populações de insetos resistentes em decorrência da utilização de inseticidas sintéticos tem estimulado a busca por inseticidas naturais, incluindo as lectinas (proteínas que reconhecem especificamente carboidratos). Sementes de Moringa oleifera contêm as lectinas inseticidas cMoL (do inglês coagulant M. oleifera lectin) e WSMoL (do inglês water-soluble M. oleifera lectin). Para o isolamento de WSMoL, o extratoem água destilada de sementes de M. oleifera(EA) foi obtido e tratado com sulfato de amônio (60% de saturação) obtendo-se uma fração rica em lectina (FL), a qual foi aplicada em coluna de quitina. Já para o isolamento de cMoL, o extrato em NaCl 0,15 M foi obtido pela homogeneização das sementes em NaCl 0,15 M tratado com sulfato de amônio (60% de saturação) e cromatografado em coluna de gel de guar. Em seguida, o efeito das lectinasna sobrevivência e nas atividades de enzimas detoxificantes e digestivas de larvas de A. aegypti no quarto estágio das linhagens Rockefeller (susceptível ao organofosfato temefós) e Rec-R (resistente ao organofosfato temefós)foi avaliado. Investigou-se também os efeitos de EA, FL e WSMoLna sobrevivência e na atividade da tripsina de S. zeamais. WSMoL (0,197 mg/ml) matou as larvas Rockefeller (51,6%±2,8), enquanto cMoL não interferiu na sobrevivência dessas larvas. WSMoL e cMoL não apresentaram atividade larvicida contra Rec-R. WSMoL estimulou as atividades de proteases, tripsina e α-amilase das larvas Rockefeller, enquanto cMoL inibiu essas enzimas. WSMoL não interferiu na atividade de tripsina de larvas Rec-R, mas inibiu as atividades de protease e α-amilase. Dentre as atividades de enzimas digestivas de Rec-R, cMoLapenas inibiu a atividade de tripsina. cMoL inibiu fortemente a atividade de superóxido dismutase das larvas Rockefeller e Rec-R e WSMoL inibiu a atividade de β-esterase de larvas Rockefeller. As lectinas afetaramlevemente as atividades de α-esterase de ambas as linhagens. EA (58 à 145mg/g ) apresentou toxicidade aguda para S. zeamais (taxas de mortalidade variando de 21,7 a 50%), enquanto FL não matou os insetos. WSMoL causou apenas baixa mortalidade (12,0%±2,7) na concentração de 60 mg/g (mg de lectina por g de farinha de trigo). A ingestão de EA reduziu a taxa de consumo relativo, sendo observado efeito deterrente moderado a forte. FL e WSMoL reduziram a taxa de ganho relativo de biomassa e a eficiência na conversão do alimento ingerido, mas não exerceram ação deterrente. Apenas WSMoLaumentou a atividade de enzimas tripsina do intestino de S. zeamais. A presente tese apresenta ainda um capítulo contendo uma revisão bibliográfica que contempla características da biologia e ecologia de insetos praga de grãos armazenados, bem como informações sobre danos causados por eles na agricultura. As principais estratégias de controle e o uso de inseticidas naturais como alternativa de combate a estas pragas são também discutidos. Em conclusão: (1) WSMoL, embora seja capaz de matar larvas de A. aegypti susceptíveis a organofosfato (Rockefeller), não promoveu mortalidade de larvas resistentes (Rec-R); (2) os efeitos opostos de WSMoL na sobrevivência de larvas Rockefeller e Rec-R podem indicar que estas populações são fisiologicamente distintas em outros aspectos além da resistência a temefós; (3) os efeitos distintos de WSMoL e cMoL sobre as enzimas digestivas de larvas Rockefeller e Rec-R indicam a expressão de diferentes formas de enzimas entre essas linhagens; (4) o mecanismo de atividade larvicida de WSMoL para larvas Rockefeller pode envolver a estimulação de enzimas digestivas (proteases, tripsina e α-amilase) e inibição da atividade de β-esterase; (5) cMoL pode ser avaliada, no futuro, como um agente sinérgico para aumentar a susceptibilidade de larvas de A. aegypti com atividade aumentada de superóxido dismutase; (6) a toxicidade de EA para S. zeamais adultos pode resultar do seu efeito deterrente de alimentação; e (7) os danos na fisiologia nutricional de S. zeamais causados por WSMoL provavelmente envolvem um desequilíbrio do processo de digestão devido ao aumento da atividade de enzimas tripsina.

Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-03-26T12:40:52Z No. of bitstreams: 2 DISSERTACAO_ANA_PATRICIA IMPRIMIR OK 21 set.pdf: 882347 bytes, checksum: 3d3a08a765d53fef71a8057d31dd434e (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-26T12:40:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTACAO_ANA_PATRICIA IMPRIMIR OK 21 set.pdf: 882347 bytes, checksum: 3d3a08a765d53fef71a8057d31dd434e (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-07-22 / Sementes de Moringa oleifera possuem elevado conteúdo de óleo (27–40%), o qual é utilizado na produção de biocombustível. A torta de sementes corresponde ao material residual obtido após o processo de extração do óleo. As sementes de moringa contêm as lectinas WSMoL (do inglês water-soluble M. oleifera lectin) e cMoL (do inglês coagulant M. oleifera lectin). WSMoL possui atividade larvicida (CL50 de 0,197 mg/mL) contra Aedes aegypti, mosquito vetor da dengue. Diferentemente, cMoL não possui ação larvicida. O presente trabalho descreve a torta de moringa obtida após extração do óleo com solvente orgânico como fonte de lectinas e outros compostos com efeitos deletérios sobre larvas de A. aegypti. A torta foi obtida após extração do óleo das sementes de moringa com n-hexano durante 6 h, utilizando extrator do tipo Soxhlet. Suspensões aquosas à base da torta (CS, do inglês cake suspensions) foram obtidas a partir da adição de 0,2, 0,6, 1,2 ou 3,0 g do pó da torta a água destilada (1 L), seguida de rápida agitação manual por 3 min, repouso por 30 min e filtração em papel de filtro. As suspensões foram avaliadas quanto à atividade hemaglutinante, concentração de proteínas e efeito sobre o desenvolvimento larval. Para purificação de lectinas, extrato aquoso foi obtido através da homogeneização do pó da torta (10 g) em água destilada (100 mL) por 16 h a 4 °C, seguida de centrifugação (9.000 g, 15 min). O extrato foi tratado com sulfato de amônio a 60% e a fração de proteínas precipitadas, enriquecida em lectinas, foi dialisada contra NaCl 0,15 M e cromatografada em coluna de quitina equilibrada com NaCl 0,15 M. As proteínas adsorvidas na coluna foram eluídas com ácido acético 1,0 M e, após diálise contra água destilada, as frações que apresentaram atividade hemaglutinante foram reunidas (MoCL, M. oleifera cake lectins). MoCL foi avaliada quanto ao perfil eletroforético em SDS-PAGE e inibição da atividade hemaglutinante por carboidratos e glicoproteínas. Atividade larvicida do extrato de torta, fração enriquecida em lectinas e MoCL foi avaliada contra larvas de A. aegypti no quarto estágio. As suspensões à base da torta promoveram atraso no desenvolvimento larval. Dentre as larvas incubadas com CS1,2 e CS3,0, 50% e 60% não ultrapassaram o segundo estágio, respectivamente. Nenhuma das suspensões apresentou atividade hemaglutinante nem causou mortalidade das larvas. O extrato de torta e a fração enriquecida em lectinas apresentaram atividade hemaglutinante específica de 26,2 e 39,5, revelando que lectinas de sementes de moringa resistiram ao tratamento com n-hexano. MoCL apresentou atividade hemaglutinante específica de 93.622 (fator de purificação: 3.573) e três bandas polipeptídicas em SDS-PAGE de massas moleculares 10, 15 e 27 kDa. Esses resultados sugerem que MoCL consiste em uma mistura de WSMoL (que se apresenta com polipeptídeos de 10 e 15 kDa em SDS-PAGE) e cMoL (um polipeptídeo de 26,5 kDa em SDS-PAGE). Atividade hemaglutinante de MoCL foi inibida pelos monossacarídeos frutose, glicose, manose, galactose e N-acetilglicosamina, bem como pelas glicoproteínas asialofetuína, caseína e tiroglobulina. Extrato, fração e MoCL apresentaram atividade larvicida, com CL50 de 2,98, 0,95 e 0,89 mg/mL de proteínas, respectivamente. MoCL foi menos ativa que WSMoL obtida a partir de sementes inteiras, provavelmente devido à presença de cMoL na preparação. Em conclusão, torta de sementes de M. oleifera contém lectinas com ação larvicida e compostos capazes de atrasar o desenvolvimento de larvas de A. aegypti. Os resultados obtidos no presente trabalho agregam novos valores à torta de moringa como recurso biotecnológico, bem como a toda a cadeia de produção de biocombustível a partir da moringa.

Submitted by MARCOS LEANDRO TEIXEIRA DE OLIVEIRA (marcosteixeira@ufv.br) on 2018-11-09T10:37:11Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1627530 bytes, checksum: d83ec7a0fb0846b06086026059e722b5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-09T10:37:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1627530 bytes, checksum: d83ec7a0fb0846b06086026059e722b5 (MD5) Previous issue date: 2018-07-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O sistema circulatório de insetos é aberto, nele a hemolinfa circula principalmente em decorrência da atividade contrátil do coração.Esse órgão está associado a células pericardiais (CP) e músculos alares (MA). O coração desempenha um importante papel do ponto de vista imunológico, uma vez que hemócitos são bombeados em decorrência da atividade cardíaca. Apesar dessa importância, ainda são escassos os trabalhos sobre a morfologia e ultraestrutura do coração e dos tecidos associados em mosquitos. Por meio de diferentes técnicas de microscopia foi analisado, de maneira comparativa, aspectos do coração, CP e MA em adultos de mosquitos hematófagos Aedes aegypti, Anopheles aquasalis e Culex quinquefasciatus e do fitófago Toxorhynchites theobaldi. O coração das espécies analisadas está na região dorsal mediana de todo o abdômen. Eles são formados por fibras musculares circulares que formam um órgão tubular e estriado. As estrias correspondem a miofibrilas. Em todas as espécies analisadas, os núcleos e mitocôndrias estão posicionados na região periférica. Entre a região de transição dos segmentos abdominais 1 a 8 foram observadas óstias incurrentes, enquanto que no cone terminal foi observado uma abertura excurrente. As CP localizam-se nas laterais do coração em regiões correspondentes aos intersegmentos abdominais. O citoplasma dessas células possui inclusões citoplasmáticas que correspondem a lisossomos e vacúolos. Em An. aquasalis e em T. theobaldi, as CP são mais numerosas e formam um cordão de células, semelhante a um sincício. Em Ae. aegypti e C. quinquefasciatus, as CP ocorrem aos pares, sendo dois ou quatro pares de CP por região intersegmentar. Os AM são polinucleados e se ligam por meio de suas ramificações à parede do coração. Em T. theobaldi os MA se ligam em todas as regiões do coração, enquanto que nos outros mosquitos eles se ligam apenas nas regiões do órgão localizados nas regiões intersegmentais. A morfologia e ultraestrutura do coração é conservada entre as espécies de mosquitos adultos de diferentes gêneros e hábitos alimentares. Entretanto, as espécies apresentam diferenças quanto à morfologia das CP e disposição dos MA, que provavelmente refletem diferenças evolutivas e fisiológicas do sistema circulatório de mosquitos. / In the opened circulatory system of insects, the hemolymph circulates mainly through of the contractile activity of a tubular-shaped heart. The heart is associated with pericardial cells (PC) and alary muscles (AM). The heart also plays an important immunological role, since hemocytes are propelled by the organ activity. Despite this importance, works dedicated to the morphology and ultrastructure of the heart and associated tissues in mosquitoes are still scarce. In the present work, the morphology of the heart, PC and AM in adults of hematophagous mosquitoes Aedes aegypti, Anopheles aquasalis and Culex quinquefasciatus and of the phytophagous Toxorhynchites theobaldi were compared by means of different microscopy techniques. The hearts of mosquitos are located in the median dorsal region of the entire abdomen. They are formed by circular muscle fibers that form a tubular and striated structure. Nuclei and mitochondria are positioned in the peripheral region of muscle fibers. Paired openings of the heart wall or ostia are located in the intersegmental regions of the abdomen from abdominal segments 1 to 8. These ostia are of the incurrent type, while in the terminal cone an excurrent opening was observed. PC are located on the sides of the heart and the cytoplasm of PC has structures that correspond to lysosomes and vacuoles. PCs are more numerous in An. aquasalis and T. theobaldi and form a cord of cells, resembling a syncytium. In Ae. aegypti and C. quinquefasciatus, PC occur in pairs, with two or four PC pairs per intersegmental region. AM are multinucleated and bind through their branches to the heart wall. In T. theobaldi AM binds in all regions of the heart, whereas in other mosquitoes they bind only in the intersegmental regions. The morphology and ultrastructure of the heart is conserved among adult mosquito species of different genera and feeding habits. However, the species present differences regarding the morphology of PC and of AM. These differences seems to be related to evolutionary and physiological differences in the circulatory system of mosquitoes.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-16T17:19:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Leandro Pereira França.pdf: 3150633 bytes, checksum: 8826767a3427a3422b7430b1330c09d0 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-16T17:20:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Leandro Pereira França.pdf: 3150633 bytes, checksum: 8826767a3427a3422b7430b1330c09d0 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-16T17:20:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Leandro Pereira França.pdf: 3150633 bytes, checksum: 8826767a3427a3422b7430b1330c09d0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-16T17:20:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Leandro Pereira França.pdf: 3150633 bytes, checksum: 8826767a3427a3422b7430b1330c09d0 (MD5) Previous issue date: 2015-09-04 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Mosquitoes are responsible for serious problems of global public health. The Aedes aegypti and Anopheles are important vectors in the transmission of dengue and malaria in Brazil. As there is no vaccine available, the main way to reduce dengue indices and malaria is controlling the proliferation of the insect vector that is based on vector control through the application of chemical insecticides that allow contamination of the environment and resistance selection in populations of mosquitoes as a result of intense application. The use of plant extracts has been gaining attention as an alternative in vector control, especially in the Amazon environment, since the plant employees have chemical compounds with larvicidal activity and insecticide. This study aimed to carry out phytochemical prospecting and evaluation of larvicidal activity of essential extracts and oil P. capitarianum for controlling A. aegypti and Anopheles sp. under laboratory conditions. A. aegypti eggs were collected in two neighborhoods of Manaus, and the larvae of Anopheles were obtained in the breeding of Puraquequera neighborhood. Bioassays were prepared with the extracts, oil and distilled water at the following concentrations: 500, 250, 100, 50, 25 mg / ml, positive control (temephos) and negative control (DMSO, H2O and Tween), tested at Rockefeller A. aegypti and Anopheles which were evaluated by observing the mortality of larvae at 24, 48 and 72 hours of exposure. The hexane extracts, methanolic and aqueous were prepared by Soxhlet system, infusion method and the essential oil was extracted by hydrodistillation and analyzed by GC-MS. The extracts were submitted to phytochemical screening, which was analyzed by thin layer chromatography (TLC), using specific developers. The phytochemical study of the extracts revealed the presence of chemical classes anthraquinones, flavonoids, terpenes, alkaloids and steroids. In the essential oil were identified as major constituents, the β-caryophyllene (34.08%), β-myrcene (13.77%) and α-humulene (13.32%), respectively. Hexane and methanolic extracts of the flowers and essential oil of P. capitarianum showed larvicidal activity in the two higher concentrations (500 and 250 mg / mL), with 100% mortality of A. aegypti and Anopheles sp, After 72 hours exposure, It is proving to be a viable alternative for the control of vectors. / Os mosquitos são responsáveis por sérios problemas de saúde pública mundial. O Aedes aegypti e Anopheles são importantes vetores na transmissão da dengue e malária no Brasil. Como não existe vacina disponível, a principal forma de reduzir os índices de dengue e malária é controlando a proliferação dos insetos vetores que se baseia no controle vetorial através da aplicação de inseticidas químicos que possibilitam a contaminação ao meio ambiente e seleção de resistência em populações de mosquitos em decorrência da intensa aplicação. O uso de extrato de plantas vem ganhando destaque como alternativa no controle de vetores, especialmente no ambiente amazônico, já que os vegetais empregados apresentam compostos químicos com atividade larvicida e inseticida. Este trabalho tem como objetivo realizar a prospecção fitoquímica e avaliar a atividade larvicida dos extratos e do óleo essencial de P. capitarianum para o controle de A. aegypti e Anopheles sp em condições de laboratório. Os ovos de A. aegypti foram coletados em dois bairros de Manaus, e as larvas de anofelinos foram obtidas nos criadouros do bairro Puraquequera. Os bioensaios foram preparados com os extratos, óleo e água destilada nas seguintes concentrações: 500, 250, 100, 50, 25 mg/mL, controle positivo (temefós) e o controle negativo (DMSO, H2O e Tween), testados com Rockfeller, A. aegypti e Anopheles que foram avaliada através da observação da mortalidade das larvas em 24 , 48 e 72 horas de exposição. Os extratos hexânicos, metanólicos e aquoso foram preparados pelo sistema Soxhlet, método de infusão e o óleo essencial foi extraído por hidrodestilação e analisados em CG-EM. Os extratos foram submetidos à prospecção fitoquímica, onde foi analisada em cromatografia camada delgada (CCD), utilizando reveladores específicos. O estudo fitoquímico dos extratos revelou a presença das classes químicas antraquinonas, flavonóides, terpenos, alcalóides e esteróides. No óleo essencial foram identificados como constituintes majoritários, o β-cariofileno (34,08%), β-mirceno (13,77%) e o α-humuleno (13,32%), respectivamente. Os extratos hexânicos e metanólicos das inflorescências e óleo essencial de P. capitarianum, apresentaram atividade larvicida nas duas maiores concentrações (500 e 250 μg /mL), com mortalidade de 100% sobre A. aegypti e Anopheles sp, após 72 horas exposição, demonstrando ser uma alternativa viável no controle dos vetores.

Au cours des dernières années, de nombreuses épidémies ont emergé ou ré émergé, et sont causées par des arbovirus (arthropod-borne viruses), des virus transmis à des vertébrés par des insectes piqueurs vecteurs. Avec l'augmentation de la densité humaine dans certaines zones géographiques et le réchauffement climatique qui contribuent à l'expansion géographique des vecteurs, les maladies induites par ces virus (arboviroses) ont un impact de plus en plus important sur la santé humaine et l'économie mondiale. Il est donc déterminant d'augmenter nos connaissances sur les systèmes mis en jeux pour garantir la sécurité sanitaire des populations exposées. Les enjeux actuels reposent aussi bien sur la compréhension des virus que sur la compréhension de l'alternance d'hôtes, directement responsables de l'émergence et la dissémination des agents infectieux. Les moustiques sont des vecteurs majeurs des arbovirus comme la dengue (genre Flavivirus) et le Chikungunya (genre Alphavirus). Transmis par les mêmes moustiques Aedes aegypti et Aedes albopictus, le virus de la Dengue (DENV) est responsable de la plus importante arbovirose en zone tropicale, et le virus Chikungunya (CHIKV) est responsable dans le monde entier de centaines de milliers de cas d'infection, et les épidémies récentes ont touché les pays européens. Ainsi, il a été observé que le moustique Ae. albopictus pouvait porter simultanément CHIKV et DENV, et des cas de co-infections humaines ont été observés en Afrique. Toutefois, bien qu'en théorie les deux virus soient capables d'infecter les mêmes cellules chez l'insecte ou l'homme, il n'y a aucune étude détaillée sur les interactions au niveau cellulaire entre CHIKV et DENV lors de la co-infection d'une cellule. C'est pourquoi il est indispensable d'accroitre nos connaissances sur l'interférence éventuelle entre les virus Chikungunya et Dengue pour l'utilisation de voies cellulaires communes chez les insectes vecteurs et l'hôte humain lors de co-infection / Emergence and geographical extension of dengue (DENV), Zika (ZIKV) and chikungunya (CHIKV) viruses increase simultaneous outbreak in an increasing number of countries. To date, no vaccine or cure have yet been developed against these diseases those cause a tremendous impact on human health and in the economy worldwide. During recent simultaneous outbreaks, up to 12% of patients have been diagnosed to be co-infected by CHIKV and DENV. In addition, it was shown that the mosquitoes Aedes albopictus could carry and transmit simultaneously CHIKV and DENV. However, the pathology, as well as the epidemiology of a pathogen, relies on the interactions between several infectious agents present within an organism or a community in the environment. It is crucial to consider to which extent a host infected by a first microorganism is modified and whether its reaction to the infection by a second microorganism is consequently altered. However, there is no extensive report of Alphavirus-Flavivirus or Flavivirus- Flavivirus interactions. Our global objective is to characterize these co-infections in both mosquitoes and humans, at the cell and molecular level. To this aim, we started this project by performing sequential co- infection in different cell lines from Aedes albopictus and Aedes aegypti. We found that the permissiveness and production of DENV is enhanced in presence of CHIKV. On the contrary, there is no effect of DENV pre-infection on subsequent CHIKV co-infection. We generalized the synergistic phenomena and we showed that CHIKV pre-infection also increased the infection by DENV-1, DENV-3 and DENV-4, but also by two others re-emerging Flaviviruses, the Yellow Fever Virus (YFV), and the Zika Virus (ZIKV). Remarkably, we succeeded to establish a mosquito model of co-infection of Aedes aegypti mosquito after by different two feedings at 4 days interval. Using this sequential co-infection, we were able to show that a pre-infection of Aedes aegypti by CHIKV increase the level of DENV-2 RNA in salivary glands compare to mono-infected mosquitos. This phenotype is reminiscent of the phenotype we observed in vitro during successive infections. Altogether, our study paves the way to the characterization of molecular interaction between Flaviviruses and Alphaviruses in mosquito in vitro and in vivo. This study can be crucial for a better understanding of disease and epidemiology during simultaneous outbreaks

Within this thesis, I performed a systematic review of approaches to broad-scale modelling of disease vector distributions and determined the most widely used methods predict current species niches and project the models forward under future climate scenarios without temporal validation. I then provided a forward-looking summary of emerging techniques to improve the reliability and transferability of those models, including historical calibration. I then predicted Anopheles mosquito distributions across Tanzania in 2001 (before large-scale ITN distributions) and compared this model with countrywide ITN use by 2012 to assess where the most suitable mosquito habitats were located and whether ITN rollouts in Tanzania ensured coverage of such areas. I concluded that ITNs in Tanzania did not optimally target areas most at risk of malaria. In doing so, I provided a new approach to monitoring and evaluating vector control interventions across large spatial scales.

Weekly collections were conducted from May to December, 2007 (153 trap nights, total) in Denton, Texas, in and around large storm drains and overpass drainage facilities in residential and non-residential areas, using Centers for Disease Control (CDC) light traps and gravid traps. A total of 1964 mosquitoes were collected, representing 24 species within 6 genera: Aedes, Anopheles, Culiseta, Culex, Psorophora, and Uranotaenia. Culex was the most abundant genus, representing 75% of all mosquitoes collected; Aedes was the second most abundant, representing 12 % of all mosquitoes collected. Cx. quinquefasciatus was the dominant species collected via gravid traps; Cx. (Melanoconion) species were the dominant species collected via CDC light traps. Data of gravid traps and light traps were analyzed separately using nonparametric correlation analysis, comparing environmental data and physical characteristics to total abundance of mosquitoes. There was no significant correlation found when comparing the three dominant species collected in light traps (unidentified Cx. (Melanoconion) sp, Cx. quinquefasciatus, and Ae. vexans) to environmental characteristics and physical characteristics. Analysis of Cx. quinquefasciatus collected in gravid traps indicated no significant correlation between abundance, environmental data, and physical characteristics. Linear regression models were analyzed to determine if either environmental variables or physical characteristics of the drainage system explained the species abundance collected; no individual variable showed an association of significance. Analysis of Cx. quinquefasciatus collected in storm drains via gravid traps determined temperature to be the most important variable in determining population abundance and explained 99% of the population variability.