Introdução: O Hormônio Concentrador de Melanina (MCH) apresenta a maior expressão de seu RNA mensageiro (RNAm) no período final da lactação (19º dia) em áreas inusitadas no sistema nervoso central (SNC) de roedor, como a área pré-óptica medial (MPOA). Após esse período não encontramos mais o RNAm e a proteína na MPOA, e há descrições de flutuações no nível sérico do MCH, o que sugere uma possível função do MCH no período final da lactação. Foi descrita a presença de MCH em diversos órgãos como: pulmão, tiróide, baço, trato gastrintestinal e em destaque no SNC que é responsável pela expressão de 98% do peptídeo. Foram descritos dois receptores: MCHR1 e MCHR2. No entanto, não há descrição da presença do MCHR1 em tecido mamário, embora evidências sustentem uma possível relação do MCH e o período de lactação. Objetivos: 1) investigar a presença do MCHR1 em tecido mamário de ratas lactantes e ratas em diestro; 2) seqüenciar o receptor encontrado em tecido mamário para compará-lo com o receptor expresso no SNC e, 3) estabelecer o tipo celular reativo ao MCHR1 em tecido mamário de ratas lactantes e ratas em diestro. Material e Métodos: tecido mamário e do SNC de ratas Long-Evans lactantes e não-lactantes foram submetidos às técnicas de hibridização in situ, RT-PCR e RT-qPCR (com tecidos controles periféricos). Cortes do SNC de ratas Long-Evans (19º dia de lactação) foram submetidos à técnica RNAscope. Sequenciamento gênico foi realizado em amostras de tecidos mamários e hipocampo de rata lactante. Tecidos mamários de ratas lactantes foram submetidos às técnicas de imuno-histoquímica (fosfatase alcalina e imunofluorescência indireta) e western blot. Resultados: 1) pela técnica de hibridização in situ pudemos descrever a presença do Mchr1 em tecido mamário e do SNC (12º, 19º dias de lactação e diestro); em tecido mamário de ratas lactantes o Mchr1 se encontra em células na epiderme, derme, estroma e parênquima, e em ratas não-lactantes apenas na epiderme e derme. A técnica RNAscope confirmou a presença do Mchr1 no SNC de rata lactante. Por RT-PCR e RT-qPCR confirmou-se a presença do Mchr1 em tecidos mamários e controles de ratas lactantes e não-lactantes, com aumento da expressão gênica no hipocampo de ratas no 19º dia lactação. Por western blot, o MCHR1 encontra-se aumentado em hipocampo de ratas lactantes (12º dia); 2) o sequenciamento gênico identificou 100% de identidade da sequência do Mchr1 do tecido mamário (com pele e sem pele) com a do SNC; 3) células MCHR1-ir foram identificadas na epiderme, derme, estroma e parênquima de glândulas mamárias (ratas lactantes). Conclusão: podemos inferir, de forma inédita, que o Mchr1 é expresso no tecido mamário de ratas lactantes e nãolactantes, apresenta 100% de identidade com a sequência do SNC, a expressão varia por setor mamário, e é mais expresso no hipocampo (19º dia lactação) indicando possível neurogênese hipocampal no final da lactação e, que o MCHR1 está mais presente no tecido mamário de ratas lactantes no 12º dia lactação. Todos esses resultados sugerem um possível envolvimento do MCH no controle da lactação / Introduction: The melanin-concentrating hormone (MCH) mRNA shows the higher expression during lactation final period (around 19th day) in novel sites of central nervous system (CNS) of rodents, such as the ventral part of medial preoptic area (MPOAv). Thereafter, mRNA and protein are not found in the MPOAv and, there are seric alterations of MCH suggesting a possible function in the lactation final period. MCH is present peripheral tissues: lung, thyroid, spleen, gastrointestinal tract and the CNS is responsible for 98% of expression. The MCH has two receptors: MCHR1 and MCHR2. However, there are no descriptions of MCHR1 expression in the mammary glands of non-lactating or lactating dams albeit evidence support a possible relationship between MCH and lactation. Objective: 1) investigate the presence of MCHR1 in mammary tissue, 2) sequencing the receptor present in the mammary tissue of female rats to verify the homology to compare with central Mchr1 and 3) identify the cellular type that express the mRNA of Mchr1 and, the protein MCHR1 and. Material and Methods: mammary gland and brain tissue of Long-Evans rats (lactating and no-lactating) were submitted to in situ hibridization, RT-PCR and qRT-PCR (with peripheral control tissues). Sample of CNS Long-Evans rats (19th day lactation) was submitted to RNAscope technique. Sequencing was performed in mammary gland tissue and hippocampus of lactating rat. Mammary gland tissue of lactating rats was submitted to immunohistochemistry (alcaline phosphatase and indirect immunofluorescence) and western blot. Results: 1) Mchr1 was detected by in situ hibridization in mammary gland and CNS tissue (12th, 19th days of lactation and diestrus phase). In mammary gland of lactating rats Mchr1 was found in cells of epidermis, dermis, stroma and parenchyma, and in no-lactating rats only in the epidermis and dermis. RNAscope confirmed the presence of Mchr1 in the CNS of lactating rats. By RT-PCR and qRT-PCR, Mchr1 was detected in mammary gland and controls tissues of lactating and no-lactating rats, with higher expression in hippocampus on the 19th day lactating rats. By western blot, MCHR1 is increased in hippocampus of lactating rats (12th day); 2) the gene sequencing confirmed 100% identity os Mchr1 sequence of mammary tissue (with and without skin) compared to CNS; 3) MCHR1-ir cells were detected in epidermis, dermis, stroma and parenchyma (lactating rats). Conclusion: we can infer, in an unprecedented manner, the Mchr1 is expressed in mammary tissue of lactating and non-lactating rats, presents 100% identity with the sequence of the CNS, expression varies by mammary sector, and is best expressed in the hippocampus (19th day lactation) indicating possible hippocampal neurogenesis at the end of lactation and the MCHR1 is more present in the breast tissue of lactating rats on the 12th day lactation. All these results suggest a possible involvement of MCH in the control of lactation

O objetivo do presente trabalho foi investigar a relação do núcleo pré-mamilar ventral (PMV): 1) na regulação do sistema reprodutivo em fêmeas, 2) como mediador dos efeitos da leptina e 3) na resposta à estimulação feromonal. Para tanto, induzimos lesão bilateral do PMV em ratas. Foi observado que a lesão do PMV promove: alteração no ciclo estral e da histologia ovariana; redução dos níveis de estradiol e LH; e supressão de vias neurais que controlam o eixo reprodutivo. Além disso, a lesão do PMV impediu que a administração central de leptina induzisse secreção de LH durante o jejum. Em outros experimentos, realizados em ratos machos, verificou-se que neurônios que sintetizam óxido nítrico no PMV e no núcleo medial da amígdala são ativados em resposta ao odor de conspecíficos, em especial o de fêmeas. Assim, foi demonstrado que o PMV exerce papel relevante na regulação do sistema reprodutivo e media a ação estimulatória da leptina na secreção do LH. Além disso, o PMV faz parte do circuito neural relacionado com a resposta aos feromônios. / The objective of this study was to assess the role played by the ventral premammillary nucleus (PMV): 1) in the regulation of the female reproductive system, 2) as a mediator of the effects of leptin and 3) in response to pheromonal stimulation. For this purpose, we produced bilateral PMV lesions in female rats. We observed that PMV lesion: disrupted the estrous cycle and altered the number of ovarian antral follicles; reduced the estradiol and LH levels; and suppressed neural pathways that control the reproductive axis. We found that lesions of the PMV blocked leptin stimulation of LH secretion during fasting. In another experiment using male rats, we showed that nitric oxide synthesizing neurons in the PMV and medial nucleus of amygdala are activated by conspecific odors, especially female odors. Thus, we showed that PMV plays an important role in the control of females reproductive system and mediates the stimulatory effects of leptin on LH secretion. Also, PMV is part of the neural circuitry related to pheromonal responses.

A manipulação neonatal promove alterações neuroendócrinas e comportamentais em ratos. Os efeitos conhecidos deste procedimento não são observáveis após gonadectomia neonatal e antes da instalação da puberdade, sugerindo que os hormônios esteróides gonadais modulam os efeitos da manipulação neonatal. Este trabalho teve como objetivo investigar uma possível modulação dos efeitos da manipulação neonatal sobre comportamentos e a resposta ao estresse da PRL e do LH. O efeito da manipulação neonatal sobre a atividade noradrenérgica no PVN induzida por estresse também foi avaliada. A manipulação neonatal consistiu em manipular os filhotes do 1° ao 10° dia de vida. Os animais foram estudados na idade adulta. No experimento 1, o comportamento no campo aberto e as respostas da PRL e do LH ao estresse por contenção foram analisados em ratos e ratas nas fases do diestro, proestro e estro. No experimento 2, os animais nãomanipulados e manipulados foram submetidos à gonadectomia fictícia, gonadectomia e gonadectomia seguida de reposição hormonal de testosterona nos machos e estradiol nas fêmeas. Três semanas após as cirurgias, o comportamento no campo aberto e as respostas da PRL e do LH ao estresse foram realizados. No experimento 3 ratos machos e fêmeas em diestro foram subdivididos em basal e estresse. As concentrações plasmáticas de PRL foram determinadas por radioimunoensaio e os conteúdos de NA e MHPG foram determinados através de detecção eletroquímica. Ratos machos manipulados permaneceram mais tempo nos quadrantes centrais e ratas apresentaram aumento da duração de locomoção no campo aberto ao longo do ciclo estral. A gonadectomia em ratos machos e fêmeas manipulados reduziu a duração de locomoção no campo aberto e em ratas reduziu a freqüência de entrada nos quadrantes centrais. A manipulação neonatal reduziu a resposta da PRL e do LH ao estresse em ratos machos. Em ratas na fase do estro foi observada uma menor resposta da PRL ao estresse quando comparadas às ratas nãomanipuladas na fase do estro. O mesmo ocorreu com a resposta do LH ao estresse em ratas manipuladas nas fases do proestro e do estro. A redução da resposta da PRL ao estresse em ratas manipuladas foi observada apenas em ratas submetidas à ovariectomia fictícia. Ratas manipuladas não apresentaram aumento da razão MHPG/NA no PVN após aplicação do estresse. Os efeitos da manipulação neonatal sobre comportamentos em ratos machos e fêmeas e sobre a resposta da PRL ao estresse em fêmeas parecem depender da presença de hormônios esteróides gonadais. A ciclicidade dos hormônios esteróides gonadais durante o ciclo estral influencia os efeitos da manipulação neonatal sobre a resposta da PRL e do LH ao estresse em ratas. A manipulação neonatal reduz a responsividade do sistema noradrenérgico ao estresse em fêmeas. / Neonatal handling promotes neuroendocrine and behavioral changes in rats. Known effects of this procedure are not perceived after neonatal gonadectomy and before puberty, suggesting that gonadal steroids hormones modulate the effects of neonatal handling. The objective of this work is to investigate a possible modulation of the neonatal handling effects in behaviors and the stress response of PRL and LH. The neonatal handling effect over noradrenergic activity in PVN induced by stress was also evaluated. Neonatal handling consisted in handling pups from the 1º to the 10º day of life. Animals were studied in adult age. In experiment 1, the behavior in open field and the PRL and LH responses to stress through restraint were analised in male and female rats in diestrus, proestrus and estrus phases. In experiment 2, non-handled and handled animals were submitted to sham gonadectomy, gonadectomy and gonadectomy followed by testosterone hormonal replacement in males and estradiol hormonal replacement in females. Three weeks after surgery, open field behavior and PRL and LH responses to stress were conducted. In experiment 3 male and female rats in diestrus were grouped in basal and stress. PRL plasm levels were determined through radioimmunoassay and NA and MHPG contents were determined through electrochemical detection. Handled male rats remained more time in central squares and female rats showed an increase in locomotion duration in open field through estral cycle. Gonadectomy in male rats and handled females reduced locomotion duration in open field and in female rats reduced the frequency in central squares. Neonatal handling reduced PRL and LH response to stress in male rats. In the estrus phase of female rats was observed a lower PRL response to stress when compared to non-handled female rats in estrus phase. The same happened with LH response to stress in female handled rats in proestrus and estrus phases. The reduction in PRL response to stress in handled female rats was observed only in female rats submitted to sham ovariectomy. Handled female rats do not showed increase in MHPG/NA quocient in PVN after stress application. Neonatal handling effects over behaviors seems to depend of the gonadal steroids hormones presence. The cycling of gonadal steroids hormones during estral cycle influences the effects of neonatal handling over PRL and LH response to stress in female rats. Neonatal handling reduces the responsivity of the noradrenergic system to stress.

A manipulação neonatal promove alterações neuroendócrinas e comportamentais em ratos. Os efeitos conhecidos deste procedimento não são observáveis após gonadectomia neonatal e antes da instalação da puberdade, sugerindo que os hormônios esteróides gonadais modulam os efeitos da manipulação neonatal. Este trabalho teve como objetivo investigar uma possível modulação dos efeitos da manipulação neonatal sobre comportamentos e a resposta ao estresse da PRL e do LH. O efeito da manipulação neonatal sobre a atividade noradrenérgica no PVN induzida por estresse também foi avaliada. A manipulação neonatal consistiu em manipular os filhotes do 1° ao 10° dia de vida. Os animais foram estudados na idade adulta. No experimento 1, o comportamento no campo aberto e as respostas da PRL e do LH ao estresse por contenção foram analisados em ratos e ratas nas fases do diestro, proestro e estro. No experimento 2, os animais nãomanipulados e manipulados foram submetidos à gonadectomia fictícia, gonadectomia e gonadectomia seguida de reposição hormonal de testosterona nos machos e estradiol nas fêmeas. Três semanas após as cirurgias, o comportamento no campo aberto e as respostas da PRL e do LH ao estresse foram realizados. No experimento 3 ratos machos e fêmeas em diestro foram subdivididos em basal e estresse. As concentrações plasmáticas de PRL foram determinadas por radioimunoensaio e os conteúdos de NA e MHPG foram determinados através de detecção eletroquímica. Ratos machos manipulados permaneceram mais tempo nos quadrantes centrais e ratas apresentaram aumento da duração de locomoção no campo aberto ao longo do ciclo estral. A gonadectomia em ratos machos e fêmeas manipulados reduziu a duração de locomoção no campo aberto e em ratas reduziu a freqüência de entrada nos quadrantes centrais. A manipulação neonatal reduziu a resposta da PRL e do LH ao estresse em ratos machos. Em ratas na fase do estro foi observada uma menor resposta da PRL ao estresse quando comparadas às ratas nãomanipuladas na fase do estro. O mesmo ocorreu com a resposta do LH ao estresse em ratas manipuladas nas fases do proestro e do estro. A redução da resposta da PRL ao estresse em ratas manipuladas foi observada apenas em ratas submetidas à ovariectomia fictícia. Ratas manipuladas não apresentaram aumento da razão MHPG/NA no PVN após aplicação do estresse. Os efeitos da manipulação neonatal sobre comportamentos em ratos machos e fêmeas e sobre a resposta da PRL ao estresse em fêmeas parecem depender da presença de hormônios esteróides gonadais. A ciclicidade dos hormônios esteróides gonadais durante o ciclo estral influencia os efeitos da manipulação neonatal sobre a resposta da PRL e do LH ao estresse em ratas. A manipulação neonatal reduz a responsividade do sistema noradrenérgico ao estresse em fêmeas. / Neonatal handling promotes neuroendocrine and behavioral changes in rats. Known effects of this procedure are not perceived after neonatal gonadectomy and before puberty, suggesting that gonadal steroids hormones modulate the effects of neonatal handling. The objective of this work is to investigate a possible modulation of the neonatal handling effects in behaviors and the stress response of PRL and LH. The neonatal handling effect over noradrenergic activity in PVN induced by stress was also evaluated. Neonatal handling consisted in handling pups from the 1º to the 10º day of life. Animals were studied in adult age. In experiment 1, the behavior in open field and the PRL and LH responses to stress through restraint were analised in male and female rats in diestrus, proestrus and estrus phases. In experiment 2, non-handled and handled animals were submitted to sham gonadectomy, gonadectomy and gonadectomy followed by testosterone hormonal replacement in males and estradiol hormonal replacement in females. Three weeks after surgery, open field behavior and PRL and LH responses to stress were conducted. In experiment 3 male and female rats in diestrus were grouped in basal and stress. PRL plasm levels were determined through radioimmunoassay and NA and MHPG contents were determined through electrochemical detection. Handled male rats remained more time in central squares and female rats showed an increase in locomotion duration in open field through estral cycle. Gonadectomy in male rats and handled females reduced locomotion duration in open field and in female rats reduced the frequency in central squares. Neonatal handling reduced PRL and LH response to stress in male rats. In the estrus phase of female rats was observed a lower PRL response to stress when compared to non-handled female rats in estrus phase. The same happened with LH response to stress in female handled rats in proestrus and estrus phases. The reduction in PRL response to stress in handled female rats was observed only in female rats submitted to sham ovariectomy. Handled female rats do not showed increase in MHPG/NA quocient in PVN after stress application. Neonatal handling effects over behaviors seems to depend of the gonadal steroids hormones presence. The cycling of gonadal steroids hormones during estral cycle influences the effects of neonatal handling over PRL and LH response to stress in female rats. Neonatal handling reduces the responsivity of the noradrenergic system to stress.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:11:34Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_mcc_me_jabo.pdf: 558441 bytes, checksum: 1f19229a70e14421627c50f9da6bc34f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A obesidade é hoje um dos grandes desafios na medicina veterinária, sua incidência nos animais de companhia vem aumentando gradativamente. Devido à freqüência com que se observa a ocorrência da obesidade e suas conseqüências sobre a saúde e qualidade de vida dos animais, o manejo nutricional torna-se uma ferramenta importante para a sua prevenção e tratamento. Os nutrientes presentes na dieta, como fibras e proteínas, podem interferir na saciedade e alterar o consumo de alimentos, modificando os teores plasmáticos de hormônios liberados no trato gastrintestinal e que influenciam os mecanismos centrais envolvidos na regulação do balaço energético, através de caminhos neuronais tais como leptina e GLP-1, além de modular as resposta glicêmicas e insulínicas pós-prandiais dos animais. Neste estudo avaliou-se os efeitos da adição de diferentes concentrações de fibra dietética e proteína em dietas secas extrusadas para gatos sobre a digestibilidade dos nutrientes, saciedade, saciação, comportamento alimentar, glicemia e insulinemia pós-prandiais, concentrações séricas de leptina e GLP-1. Foi adotado um delineamento em blocos casualizados, com 40 gatos distribuídos em quatro blocos de 10 animais, totalizando oito repetições por tratamento. Não houve variação no consumo de MS e o peso corporal se manteve constante. Os coeficientes de digestibilidade aparente da matéria seca e da matéria orgânica foram mais baixos nas dietas contendo alta fibra e houve diminuição da digestibilidade aparente da gordura nas rações com alta inclusão de fibra. As dietas suplementadas com fibra solúvel e insolúvel levaram a diminuição das concentrações plasmáticas máximas de glicose e do incremento máximo de glicose. Verificou-se, também que as dietas contendo alta fibra provocaram uma elevação nas concentrações... / Obesity is now one of the greatest challenges in veterinary medicine. It´s incidence in pets is increasing. Due to the frequency in which we observe the occurrence of obesity and its consequences on health and quality of life of animals, the nutritional management becomes an important tool for its prevention and treatment. Nutrients in the diet, such as fiber and protein, can interfere with satiety and food intake by modifying the plasma levels of hormones that act in the regulation of energy consumption, such as leptin and GLP-1 and modulate glucose and insulin postprandial responses in animals. The nutrient in the diet such as fiber and protein, can interfere with satiety and food intake, modifying the plasma levels of hormones released in the gastrintestinal tract which influence the central mechansim involved in regulating energy balance through neural pathways such as leptin and GLP-1, besides modulating glucose and insulinic post-prandial responses in animals. This study evaluated the effects of adding different concentration of dietary fiber and protein in extruded dry diets for cats on the digestibility, glucose and insulin post-prandial responses, serum concentration of leptin and GLP-1 and the body composition of cats. It was adopted a randomized block design, with 40 cats divided into four blocks of 10 animals, a total of eight replicates per treatment. There was no variation in dry matter consumption and body weight was Constant. The digestibility coefficient of dry matter and organic matter were lower in diets with high fiber and there was a decrease in apparent digestibility of fat in diets with high fiber inclusion. Diets supplemented with soluble and insoluble fiber decreased maximum plasmatic concentration of glucose and maximum increment of plasmatic concentration of glucose. Diets containing high fiber caused an increasing... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Aulus Cavalieri Carciofi / Banca: Márcio Antonio Brunetto / Banca: Ricardo Souza Vasconcellos / Resumo: A obesidade é hoje um dos grandes desafios na medicina veterinária, sua incidência nos animais de companhia vem aumentando gradativamente. Devido à freqüência com que se observa a ocorrência da obesidade e suas conseqüências sobre a saúde e qualidade de vida dos animais, o manejo nutricional torna-se uma ferramenta importante para a sua prevenção e tratamento. Os nutrientes presentes na dieta, como fibras e proteínas, podem interferir na saciedade e alterar o consumo de alimentos, modificando os teores plasmáticos de hormônios liberados no trato gastrintestinal e que influenciam os mecanismos centrais envolvidos na regulação do balaço energético, através de caminhos neuronais tais como leptina e GLP-1, além de modular as resposta glicêmicas e insulínicas pós-prandiais dos animais. Neste estudo avaliou-se os efeitos da adição de diferentes concentrações de fibra dietética e proteína em dietas secas extrusadas para gatos sobre a digestibilidade dos nutrientes, saciedade, saciação, comportamento alimentar, glicemia e insulinemia pós-prandiais, concentrações séricas de leptina e GLP-1. Foi adotado um delineamento em blocos casualizados, com 40 gatos distribuídos em quatro blocos de 10 animais, totalizando oito repetições por tratamento. Não houve variação no consumo de MS e o peso corporal se manteve constante. Os coeficientes de digestibilidade aparente da matéria seca e da matéria orgânica foram mais baixos nas dietas contendo alta fibra e houve diminuição da digestibilidade aparente da gordura nas rações com alta inclusão de fibra. As dietas suplementadas com fibra solúvel e insolúvel levaram a diminuição das concentrações plasmáticas máximas de glicose e do incremento máximo de glicose. Verificou-se, também que as dietas contendo alta fibra provocaram uma elevação nas concentrações... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Obesity is now one of the greatest challenges in veterinary medicine. It's incidence in pets is increasing. Due to the frequency in which we observe the occurrence of obesity and its consequences on health and quality of life of animals, the nutritional management becomes an important tool for its prevention and treatment. Nutrients in the diet, such as fiber and protein, can interfere with satiety and food intake by modifying the plasma levels of hormones that act in the regulation of energy consumption, such as leptin and GLP-1 and modulate glucose and insulin postprandial responses in animals. The nutrient in the diet such as fiber and protein, can interfere with satiety and food intake, modifying the plasma levels of hormones released in the gastrintestinal tract which influence the central mechansim involved in regulating energy balance through neural pathways such as leptin and GLP-1, besides modulating glucose and insulinic post-prandial responses in animals. This study evaluated the effects of adding different concentration of dietary fiber and protein in extruded dry diets for cats on the digestibility, glucose and insulin post-prandial responses, serum concentration of leptin and GLP-1 and the body composition of cats. It was adopted a randomized block design, with 40 cats divided into four blocks of 10 animals, a total of eight replicates per treatment. There was no variation in dry matter consumption and body weight was Constant. The digestibility coefficient of dry matter and organic matter were lower in diets with high fiber and there was a decrease in apparent digestibility of fat in diets with high fiber inclusion. Diets supplemented with soluble and insoluble fiber decreased maximum plasmatic concentration of glucose and maximum increment of plasmatic concentration of glucose. Diets containing high fiber caused an increasing... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A manipulação neonatal promove alterações neuroendócrinas e comportamentais em ratos. Os efeitos conhecidos deste procedimento não são observáveis após gonadectomia neonatal e antes da instalação da puberdade, sugerindo que os hormônios esteróides gonadais modulam os efeitos da manipulação neonatal. Este trabalho teve como objetivo investigar uma possível modulação dos efeitos da manipulação neonatal sobre comportamentos e a resposta ao estresse da PRL e do LH. O efeito da manipulação neonatal sobre a atividade noradrenérgica no PVN induzida por estresse também foi avaliada. A manipulação neonatal consistiu em manipular os filhotes do 1° ao 10° dia de vida. Os animais foram estudados na idade adulta. No experimento 1, o comportamento no campo aberto e as respostas da PRL e do LH ao estresse por contenção foram analisados em ratos e ratas nas fases do diestro, proestro e estro. No experimento 2, os animais nãomanipulados e manipulados foram submetidos à gonadectomia fictícia, gonadectomia e gonadectomia seguida de reposição hormonal de testosterona nos machos e estradiol nas fêmeas. Três semanas após as cirurgias, o comportamento no campo aberto e as respostas da PRL e do LH ao estresse foram realizados. No experimento 3 ratos machos e fêmeas em diestro foram subdivididos em basal e estresse. As concentrações plasmáticas de PRL foram determinadas por radioimunoensaio e os conteúdos de NA e MHPG foram determinados através de detecção eletroquímica. Ratos machos manipulados permaneceram mais tempo nos quadrantes centrais e ratas apresentaram aumento da duração de locomoção no campo aberto ao longo do ciclo estral. A gonadectomia em ratos machos e fêmeas manipulados reduziu a duração de locomoção no campo aberto e em ratas reduziu a freqüência de entrada nos quadrantes centrais. A manipulação neonatal reduziu a resposta da PRL e do LH ao estresse em ratos machos. Em ratas na fase do estro foi observada uma menor resposta da PRL ao estresse quando comparadas às ratas nãomanipuladas na fase do estro. O mesmo ocorreu com a resposta do LH ao estresse em ratas manipuladas nas fases do proestro e do estro. A redução da resposta da PRL ao estresse em ratas manipuladas foi observada apenas em ratas submetidas à ovariectomia fictícia. Ratas manipuladas não apresentaram aumento da razão MHPG/NA no PVN após aplicação do estresse. Os efeitos da manipulação neonatal sobre comportamentos em ratos machos e fêmeas e sobre a resposta da PRL ao estresse em fêmeas parecem depender da presença de hormônios esteróides gonadais. A ciclicidade dos hormônios esteróides gonadais durante o ciclo estral influencia os efeitos da manipulação neonatal sobre a resposta da PRL e do LH ao estresse em ratas. A manipulação neonatal reduz a responsividade do sistema noradrenérgico ao estresse em fêmeas. / Neonatal handling promotes neuroendocrine and behavioral changes in rats. Known effects of this procedure are not perceived after neonatal gonadectomy and before puberty, suggesting that gonadal steroids hormones modulate the effects of neonatal handling. The objective of this work is to investigate a possible modulation of the neonatal handling effects in behaviors and the stress response of PRL and LH. The neonatal handling effect over noradrenergic activity in PVN induced by stress was also evaluated. Neonatal handling consisted in handling pups from the 1º to the 10º day of life. Animals were studied in adult age. In experiment 1, the behavior in open field and the PRL and LH responses to stress through restraint were analised in male and female rats in diestrus, proestrus and estrus phases. In experiment 2, non-handled and handled animals were submitted to sham gonadectomy, gonadectomy and gonadectomy followed by testosterone hormonal replacement in males and estradiol hormonal replacement in females. Three weeks after surgery, open field behavior and PRL and LH responses to stress were conducted. In experiment 3 male and female rats in diestrus were grouped in basal and stress. PRL plasm levels were determined through radioimmunoassay and NA and MHPG contents were determined through electrochemical detection. Handled male rats remained more time in central squares and female rats showed an increase in locomotion duration in open field through estral cycle. Gonadectomy in male rats and handled females reduced locomotion duration in open field and in female rats reduced the frequency in central squares. Neonatal handling reduced PRL and LH response to stress in male rats. In the estrus phase of female rats was observed a lower PRL response to stress when compared to non-handled female rats in estrus phase. The same happened with LH response to stress in female handled rats in proestrus and estrus phases. The reduction in PRL response to stress in handled female rats was observed only in female rats submitted to sham ovariectomy. Handled female rats do not showed increase in MHPG/NA quocient in PVN after stress application. Neonatal handling effects over behaviors seems to depend of the gonadal steroids hormones presence. The cycling of gonadal steroids hormones during estral cycle influences the effects of neonatal handling over PRL and LH response to stress in female rats. Neonatal handling reduces the responsivity of the noradrenergic system to stress.

O objetivo do presente trabalho foi investigar a relação do núcleo pré-mamilar ventral (PMV): 1) na regulação do sistema reprodutivo em fêmeas, 2) como mediador dos efeitos da leptina e 3) na resposta à estimulação feromonal. Para tanto, induzimos lesão bilateral do PMV em ratas. Foi observado que a lesão do PMV promove: alteração no ciclo estral e da histologia ovariana; redução dos níveis de estradiol e LH; e supressão de vias neurais que controlam o eixo reprodutivo. Além disso, a lesão do PMV impediu que a administração central de leptina induzisse secreção de LH durante o jejum. Em outros experimentos, realizados em ratos machos, verificou-se que neurônios que sintetizam óxido nítrico no PMV e no núcleo medial da amígdala são ativados em resposta ao odor de conspecíficos, em especial o de fêmeas. Assim, foi demonstrado que o PMV exerce papel relevante na regulação do sistema reprodutivo e media a ação estimulatória da leptina na secreção do LH. Além disso, o PMV faz parte do circuito neural relacionado com a resposta aos feromônios. / The objective of this study was to assess the role played by the ventral premammillary nucleus (PMV): 1) in the regulation of the female reproductive system, 2) as a mediator of the effects of leptin and 3) in response to pheromonal stimulation. For this purpose, we produced bilateral PMV lesions in female rats. We observed that PMV lesion: disrupted the estrous cycle and altered the number of ovarian antral follicles; reduced the estradiol and LH levels; and suppressed neural pathways that control the reproductive axis. We found that lesions of the PMV blocked leptin stimulation of LH secretion during fasting. In another experiment using male rats, we showed that nitric oxide synthesizing neurons in the PMV and medial nucleus of amygdala are activated by conspecific odors, especially female odors. Thus, we showed that PMV plays an important role in the control of females reproductive system and mediates the stimulatory effects of leptin on LH secretion. Also, PMV is part of the neural circuitry related to pheromonal responses.

Diversos procedimentos são capazes de induzir a recuperação de memórias traumáticas (RecMem). Técnicas de psicoterapia têm sido usadas para reduzir a resposta emocional às memórias traumáticas, através de processos de re-estruturação e re-significação das vivências, baseados na resiliência dos sujeitos. Durante a RecMem podem ocorrer sinais clínicos de ativação autonômica que não são reações devidas a estressores externos. Pelo contrário, constituem o resultado de estímulos de natureza psíquica gerados internamente. Assim, é possível se especular se eles podem funcionar como estressores puramente psicológicos e, como tais, induzir respostas autonômicas e neuroendócrinas. O objetivo deste trabalho é o de se determinar se estas respostas ocorrem, assim como o de identificar suas características qualitativas e quantitativas. Seis voluntários de ambos os sexos, previamente selecionados e avaliados por testes psicológicos (SICD, Hamilton e BDI) e de cronotipagem, foram submetidos a duas condições: 1. condição controle (CC), e 2. condição de recuperação (CR). Em ambas as condições, os sujeitos foram colocados em ambiente controlado, com coleta de material destinado a dosagens de ACTH, adrenalina, cortisol, prolactina, TSH e GH (hormônios envolvidos com as respostas ao estresse), a cada 15 minutos, por 2 horas, com a primeira coleta 30 minutos antes do início dos procedimentos. Em ambas as condições, os sujeitos repousaram durante estes 30 minutos. Na CC os sujeitos permaneceram em repouso e na CR foram submetidos aos processos de RecMem, com seguimento psicoterapêutico subseqüente. Os dados obtidos foram avaliados quanto ao perfil das curvas tempo e resposta para cada hormônio e submetidos a testes estatísticos de comparação da secreção hormonal em ambas as condições. Concluímos que existiram respostas autonômicas e neuroendócrinas compatíveis com estresse psicológico que não são constantes em todos os sujeitos, onde se ressalta a variabilidade das respostas individuais obtidas. / Several procedures are capable to induce retrieval of traumatic memories (RecMem). Psychotherapy techniques have been used to reduce the traumatic memories emotional response through rebuilding and re-meaning of the traumatic memories based on the subject´s resilience. Clinical signs of autonomic activation may be seen during RecMem, not representing reactions to external stressors. On the contrary, they are the result of psychic inputs internally generated. Therefore, it is possible to speculate that they can act as pure psychological stressors and, as such, able to induce autonomic and neuroendocrine responses. The aim of the present report is to determine whether these responses actually happen, as well as to determine their qualitative and quantitative characteristics. Six volunteers of both sexes, previously selected, and submitted to psychological testing (SCID, Hamilton and BDI) as well as chronotype determination, were submitted to two conditions: 1. Control condition (CC) and 2. Retrieval condition (CR). The subjects were placed in a controlled environment in both conditions, with ACTH, cortisol, adrenalin, prolactin, TSH and GH (stress related hormones) blood testing at every 15 minutes, for 2 hours; the first sample was obtained 30 minutes before the beginning of the procedures. In both conditions the subjects rested during these 30 minutes. In the CC the subjects remained resting, and in the CR were submitted to RecMem procedures followed by psychotherapeutic support. The resulting data were analyzed in their time-response curve profiles as well as were submitted to hormonal secretion statistical evaluation in both conditions. We conclude for autonomic and neuroendocrine responses compatible with psychological stress, that are not the same in all subjects, high lightening the variability of individual obtained responses.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 431890.pdf: 1738256 bytes, checksum: 1de40e064eb7209fe3bee4e61b0b071b (MD5) Previous issue date: 2011-03-28 / INTRODU??O: Sabe-se que experi?ncias traum?ticas na inf?ncia podem levar ao surgimento de dist?rbios psiqui?tricos na vida adulta, incluindo a depress?o maior (DM). Contudo, ainda se desconhece o grau de altera??es biol?gicas que eventos estressores traum?ticos vivenciados na inf?ncia podem produzir em indiv?duos com depress?o. OBJETIVOS: Investigar par?metros neuroend?crinos e imunol?gicos em mulheres adultas deprimidas, com sintomas de Estresse P?s- Traum?tico (TEPT) e hist?ria de abuso e neglig?ncia infantil (ANI). M?TODOS: Trinta e oito mulheres com DM com ou sem hist?ria de abuso e neglig?ncia infantil e sintomas de TEPT e 19 mulheres saud?veis fizeram parte da coleta de dados desta tese. Os resultados deste trabalho foram divididos em 3 artigos cient?ficos originais e uma revis?o do tema. As avalia??es inclu?ram dosagens de n?veis salivares de cortisol e de sulfato de dehidroepiandrosterona (DHEAS) por radioimunoensaio; a mitog?nese induzida de linf?citos T de sangue perif?rico foi avaliada por ensaio colorim?trico, bem como a sensibilidade de linf?citos T a moduladores sint?ticos (dexametasona) e naturais (epinefrina e sulfato de dehidroepiandrosterona); a secre??o de citocinas de perfis Th1/Th2 (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-a, IFN-g) por c?lulas mononucleares foi identificada por citometria de fluxo; e os n?veis plasm?ticos de BDNF, al?m de TNF-a e seus receptores sol?veis (sTNFR1 e sTNFR2), foram identificados por ELISA. RESULTADOS: Pacientes deprimidas com ou sem trauma infantil apresentaram n?veis reduzidos e semelhantes de cortisol salivar e DHEAS em paralelo com prolifera??o reduzida de linf?citos T. As c?lulas mononucleares de sangue perif?rico das pacientes deprimidas foram menos sens?veis ? dexametasona (DEX) ou epinefrina (EPI) e produziram n?veis significativamente reduzidos de IL-2, IL-4 e TNF-a quando comparadas ao grupo de controles. As pacientes deprimidas apresentaram ainda n?veis plasm?ticos elevados de sTNFR1 e sTNFR2, al?m de redu??o dos 6 n?veis de BDNF. CONCLUS?ES: Embora muitas altera??es biol?gicas tenham sido identificadas nas mulheres com DM em rela??o ao grupo de mulheres saud?veis, poucas foram correlacionadas com hist?ria de abuso e neglig?ncia na inf?ncia. Sendo assim, de uma forma geral, conclui-se que a hist?ria de abuso e neglig?ncia na inf?ncia n?o impacta significativamente as altera??es neuroend?crinas e imunol?gicas apresentadas por pacientes com depress?o maior