Nas últimas décadas uma série de experimentos realizados em vertebrados tem demonstrado a capacidade que alguns destes possuem de discriminar a luz ultravioleta, ao contrário do acreditado anteriormente. O peixe dourado (Carassius auratus), um bom modelo experimental para pesquisas sobre visão, apresentou em experimentos comportamentais altos níveis de discriminação de cor nas regiões espectrais do azul e do violeta, o que só seria possível com a existência de um receptor adicional para o ultravioleta (Neumeyer, 1985; Hawryshyn & Beauchamp, 1985; Neumeyer & Arnold, 1989; Neumeyer, 1992; Fratzer, Dörr & Neumeyer, 1994). Estes resultados foram confirmados pela determinação microespectrofotométrica (Bowmaker, Thorpe & Douglas, 1991) e eletrofisiológica (Palacios et al., 1998) da existência de cones com pigmentos específicos para luz ultravioleta, sem haver entretanto um estudo da codificação dessa entrada em neurônios de segunda ordem até o momento. Além disso, permanece ainda em discussão na literatura o papel das células horizontais retinianas no processamento cromático. O presente projeto teve por objetivo investigar qual a contribuição da entrada do receptor UV para os perfis de resposta eletrofisiológica das células horizontais e quais tipos celulares da retina externa do Carassius auratus são subjacentes à discriminação observada comportamentalmente. Para tanto, registros intracelulares de células horizontais e bipolares foram obtidos sob estimulaçãomonocromática de diferentes intensidades, ) diâmetros e comprimentos de onda, com o intuito de determinar suas respostas espectrais, bem como o campo receptivo e as possíveis interações entre estas e os cones. As células horizontais mono-, bi- e trifásica apenas hiperpolarizam na região do UV, não havendo oponência cromática entre as regiões do UV e do azul em nenhum destes tipos celulares; tampouco encontramos uma célula horizontal tetrafásica. Através de adaptações cromáticas, observamos serem as respostas eletrofisiológicas à luz das células horizontais mono- e bifásicas resultado de interações entre os sistemas de cones vermelho,verde e azul, não tendo sido identificada nenhuma entrada UV significativa nessas células. Por fim, encontramos uma célula bipolar oponente entre as regiões espectrais do UV e do azul, o que constitui uma base neural compatível com a discriminação comportamentalmente observada. Uma vez que canais oponentes são necessários para a discriminação de cor, e essa oponência não foi encontrada nas células horizontais, mais sim nas bipolares, acreditamos ser esse um indício de que as células horizontais não participam diretamente da codificação da informação UV na retina do Carassius auratus. Essa idéia está de acordo com dados recentes da literatura, que atribuem às células horizontais papel relacionado aos mecanismos de constância e contraste simultâneo de cor, deixando para as células bipolares a função de codificar cores para os neurôniossubseqüentes (Kamermans, Kraaij & Spekreijse, 1998) / In the last decades a number of experiments in vertebrates has demonstrated the ability of some of these animals to discriminate ultraviolet light. Among them, the goldfish (Carassius auratus), considered a good model in vision research, presented in behavioural experiments high discrimination rates in the violet and blue spectral regions, which could only be accomplished through an additional UV receptor (Neumeyer, 1985; Hawryshyn & Beauchamp, 1985; Neumeyer & Arnold, 1989; Neumeyer, 1992; Fratzer, Dörr & Neumeyer, 1994). These results were confirmed by microspectrophotometrical (Bowmaker, Thorpe & Douglas, 1991) and electrophysiological (Palacios et al., 1998) determinations of the existence of cones with specific photopigments with a maximum in the UV region of the light spectrum. However, to date there are no data concerning the spectral coding of this input in second order neurons. Furthermore, the role of the retinal horizontal cells in chromatic processing remains under debate. The present study aimed at investigating the contribution of the UV input to the electrophysiological response profiles of the cone-driven horizontal cells, as well as determining which neurons in the outer retina of the goldfish could subserve vision in the UV range, as observed behaviourally. For that purpose, intracellular recordings of horizontal and bipolar cells under monochromatic stimuli of different intensities, diameters and wavelengths were obtained in order to determinetheir action spectra, receptive field sizes and characteristics as well as the possible interactions between them and the different cone systems. Mono-, bi- and triphasic horizontal cells always hyperpolarised in the UV spectral range: there was no chromatic opponency between the UV and the blue zones in any of these cell types. We have also failed to find a tetraphasic horizontal cell. We observed through chromatic adaptation experiments that the electrophysiological responses recorded from mono- and biphasic horizontal cells are the result of interactions between the red, green and blue cone systems. No relevant UV input to these cells could be found. Finally, we found a bipolar cell type with spectral opponency between the UV and blue regions, which could be the neural basis of the discrimination observed behaviourally. Colour-opponent channels are thought to be necessary for colour discrimination, and the absence of a horizontal cell type with opponency between the UV and blue spectral regions provides further evidence that this cell type might not play a major role in the chromatic processing in the goldfish retina. Since this opponency pattern was found in a bipolar cell, we think that this cell type, and not the horizontal cells, might underlie the coding of the UV information in this animal. This idea is in good agreement with some recent literature data that ascribe the horizontal cells a role in colour constancy and simultaneous colour contrast phenomena,leaving the function of colour codification to the bipolar cells (Kamermans, Kraaij & Spekreijse, 1998)

Durante várias décadas a região do Alto Vale do Ribeira (SP PR) esteve sob influência das atividades de mineração de chumbo e de usinas de refino e beneficiamento dos minérios produzidos nas minas da região. A partir de 1996, todas essas atividades cessaram, mas deixaram às margens do rio Ribeira, pilhas de rejeitos e de escória provenientes das atividades das refinarias. O presente trabalho teve por objetivo investigar os níveis de concentrações do metaloide arsênio (As) e dos metais, cádmio (Cd) e chumbo (Pb) na água, sedimento e na biota (sangue de peixe) do sistema aquático do rio Ribeira do Iguape e afluentes. As coletas ocorreram em 8 pontos de amostragem e os peixes foram capturados por rede de espera e a coleta do sangue, realizada em campo. Para a determinação de As, Cd e Pb utilizou-se a técnica de Espectrometria de Absorção Atômica em Forno de Grafite (GF AAS). As amostras de sedimento foram analisadas também pela técnica de Análise por Ativação Neutrônica (NAA) e os seguintes elementos foram determinados: maiores (Ca, Fe, K e Na), traço (As, Ba, Br, Co, Cs, Hf, Rb, Sb, Ta, Th, U, Zn) e terras raras (La, Ce, Eu, Nd, Sm, Lu, Tb, Yb e Sc). A validação das metodologias, em termos de precisão e exatidão, foi realizada por meio da análise de materiais de referência certificados. Os resultados obtidos para As, Cd e Pb no sedimento foram comparados com os valores guia do Canadian Council of Ministers of the Environment (CCME), TEL (Threshold Effect Level) e PEL (Probable Effect Level) adotados pela CETESB e pela Resolução CONAMA 454/2012. Os resultados obtidos para As, Cd e Pb, nas amostras de água, foram inferiores ao LQ da técnica utilizada, caracterizando que estes elementos não estão em concentrações que afetem os padrões de qualidade da água, estabelecidos pelo CONAMA 357/2005. O dados obtidos para o sangue dos peixes e sedimentos, exibiram uma forte tendência de contaminação por Cd e Pb para a maioria dos pontos avaliados. A maior concentração de Cd em sangue de peixe foi de 24,3 μg L-1, no ponto 2. Para Pb, o maior teor em sangue foi de 118 μg L-1, no ponto 5. Os valores de As foram inferiores ao LQ (30,0 μg L-1) do método para o sangue de todas as espécies de peixes capturadas. No sedimento do ponto 5, os valores de As (72,1 mg kg-1) e Pb (474 mg kg-1) foram muito superiores aos valores de PEL, sendo classificado como de péssima qualidade. Verificou-se uma forte correlação entre os metais nos sedimentos e no sangue dos peixes. Os resultados obtidos pela técnica de NAA nos sedimentos foram avaliados pelas ferramentas, fator de enriquecimento (FE) e índice de geoacumulação (Igeo), usadas para avaliar o grau de contaminação por metais em sedimentos. Novamente o ponto 5 foi o que apresentou os maiores valores de FE e IGeo e considerado altamente poluído para As e poluído para Sb e Zn. O ponto 7, foi considerado moderadamente poluído para As, Br e Sb. Concluiu-se, finalmente, que embora as operações de mineração tenham cessado em 1996 na região, os efeitos deletérios ao meio ambiente estão ainda presentes. / During several decades the Alto Vale of Ribeira region (SP-PR) was under influence of lead mining activities, refined and processed in the mines of the region. Since 1996, all such activities ceased, however, leaving behind a huge amount of environmental liabilities. This study aimed to investigate the presence and concentration levels of metals cadmium (Cd) and lead (Pb) and metalloid arsenic (As) in the water, sediment and biota (fish blood) in the aquatic systems of Ribeira do Iguape River and its tributaries, for an environmental assessment and monitoring of the region. The sampling collection occurred in 8 sites and fish samples were caught by fishing nets and blood sampling was done in the site. The determination of these elements was carried out by atomic absorption spectrometry with graphite furnace electro thermal heating (GF AAS). This study also assessed the occurrence of some major (Ca, Fe, K and Na), trace (As, Ba, Br, Co, Cs, Hf, Rb, Sb, Sc, Se, Ta, Th, U, Zn) and rare earth elements (La, Ce, Eu, Nd, Sm, Lu, Tb and Yb) by Neutron Activation Analysis (NAA). Validation of both methodologies, regarding precision and accuracy, was done by reference material analyses. The results obtained for As, Cd and Pb in the sediment were compared to the Canadian Council of Ministers of the Environment (CCME), TEL (Threshold Effect Level) e PEL (Probable Effect Level) adopted by CETESB and CONAMA 454/2012 Resolution. The results for As, Cd and Pb in water samples were below the QL of the analytical technique used, indicating that these elements are in concentration levels that do not affect the water quality standard established by CONAMA 357/2005. On the other hand, the concentration values for these elements in fish blood and sediment samples showed a strong contamination tendency for Cd and Pb most of the sampling points assessed. The highest Cd concentration in fish blood was 24.3 μg L-1, at site 2. For Pb, the highest concentration value was 118 μg L-1, at site 5. The concentration values for As were lower than QL (30 μg L-1) of the method for all fish blood analyzed. The sediment of site 5 presented values of 72.1 mg kg-1 for As and 474 mg kg-1 for Pb and both were well above the PEL limits, being classified as Bad quality. A strong correlation between metals in sediments and blood fish samples was verified. The results obtained by INAA in the sediment samples were assessed by geochemical tools, Enrichment Factor (EF) and Geoaccumulation Index (Igeo), to evaluate the extent of metal pollution in sediments. Again site 5 presented the highest EF and IGeo values and it was considered highly polluted for As and polluted for Sb and Zn. Site 7, was considered moderately polluted for As, Br and Sb. Although all mining operations have long ceased the deleterious effects on the environment are still present.

A reprodução em peixes é controlada pelo eixo hipotálamo-hipófise-gônadas e os fatores que alteram o funcionamento adequado deste eixo são chamados de disruptores endócrinos. Muitos metais têm o papel de disruptores endócrinos e dentre eles destaca-se o alumínio que, além de afetar o sistema endócrino de algumas espécies de peixes, pode alterar a deposição e/ou mobilização de substratos energéticos nestes animais. Sabe-se que o pH pode modular em muitos casos as respostas fisiológicas decorrentes da exposição de peixes a alguns metais, como é o caso do alumínio. Desta forma, o presente trabalho objetiva avaliar as possíveis alterações na fisiologia reprodutiva de duas espécies de peixes teleósteos continentais quando os mesmos são expostos às altas concentrações de alumínio e em pH ácido. Para avaliar estes efeitos foram conduzidos 2 tipos de experimentos: um crônico, realizado com fêmeas de uma espécie de desova total (sincrônica em grupo), Astyanax fasciatus (lambari), durante a sua fase reprodutiva, pelo período de 14 dias; e outro agudo, pelo período de 96 horas, com fêmeas de Oreochromis niloticus (tilápia), espécie de desova parcelada (assincrônica) também em fase reprodutiva. Foram determinadas as concentrações plasmáticas de hormônios esteróides como o cortisol, o estradiol e a 17 α OHP utilizando-se kits de elisaimunoensaio; substratos energéticos, como proteínas e lipídios, no fígado, plasma e gônadas, assim como os principais íons plasmáticos (cálcio, potássio, cloro, magnésio e sódio) também foram analisados. Análises histológicas das gônadas, fígado e brânquias foram conduzidas com a finalidade de avaliar o efeito do alumínio e do pH ácido nestes tecidos. Os resultados do presente trabalho evidenciam que o alumínio e o pH ácido afetam a fisiologia reprodutiva de peixes teleósteos, mas o efeito deste metal está relacionado à estratégia reprodutiva dos animais. Os dados mostram que em peixes de desova total, como o lambari, os efeitos do alumínio são mais evidentes na fase de vitelogênese, alterando a ação dos estrógenos e os processos de mobilização de lipídios e proteínas em uma fase anterior à maturação final. Já na tilápia, os efeitos do alumínio e do pH ácido são mais evidentes na fase de maturação final e ovulação, uma vez que alterações foram observadas na concentração do progestágeno 17 α OHP, precursor do MIS em peixes teleósteos. / Fish reproduction is controlled by the hypothalamic-pituitary-gonad axis and factors that alter the normal function of this axis are known as endocrine disrupters. Many metals act as endocrine disrupters, including aluminium, a metal that affects endocrine and metabolic parameters in fish. It is also known that the pH can alter the endocrine disruptor effect of metals such as aluminium in fish. Considering that, this work aims to analyze the alterations in the reproductive physiology of two freshwater teleosts exposed to high aluminium concentrations in an acidic pH environment. To evaluate these effects, two experiments were conducted: the first experiment was designed to evaluate chronic effects by using mature Astyanax fasciatus females, a group synchronic species over a 14 day period; the second experiment was aimed to assess acute effects over a 96 hour period using Oreochromis niloticus mature females, an asynchronous species. The plasma profile of the steroids hormones, cortisol, estradiol and 17 α OHP were analyzed using EIA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) kits. Metabolic substrates as protein and lipids were analyzed in liver, gonads and plasma and the main plasmatic ions (potassium, sodium, chloride, magnesium and calcium) were also determined. Histological analyses were performed in liver, gonads and gills to evaluate the influence of aluminium on these organs. The results showed that aluminium as well as the acidic pH affects the reproductive physiology of the analyzed species, but the effects were different, according to the reproductive strategy of the respective species. Group synchronic species suffer from the aluminium effects in vitellogenic events, such as estradiol, lipid and protein concentrations in a period prior to final maturation. In contrast, the effects of aluminium and pH in tilapia were more evident in final maturation/ovulation processes than in vitellogenesis, as a result of alteration in the 17 α OHP concentration, the MIS (maturation induction steroid) precursor in teleosts.

Metais como o alumínio (Al) e o manganês (Mn) são encontrados na natureza como também em efluentes industriais, e podem ser tóxicos para a biota aquática, apresentando efeitos de desregulação endócrina, por exemplo, para os peixes, podendo afetar o desempenho reprodutivo de uma espécie. Rios e tributários do Estado de São Paulo, mesmo em áreas teoricamente conservadas, têm demonstrado um aumento no aporte destes metais, em concentrações superiores ao permitido pela legislação, e a consequência disso para os peixes é pouco conhecida. Neste estudo foram delineados ensaios de toxicidade para exposição aquática aguda (96 horas) ao Al e ao Mn, de forma isolada e sincrônica, em fêmeas vitelogênicas do teleósteo Astyanax bimaculatus. Este período de exposição foi seguido de um período em água limpa (96 horas) para avaliar a possibilidade de recuperação dos efeitos tóxicos promovidos por estes metais, avaliando-se os seguintes parâmetros: a fecundidade relativa (FR), potencial de bioconcentração destes metais, concentração plasmática de Estradiol (E2), 17α hidroxiprogesterona (17α- OHP), Cortisol (CT), Triiodotironina (T3), Tiroxina (T4) e a expressão do mRNA do βFSH e βLH. Foram estabelecidos cinco grupos experimentais: Controle em pH neutro, pH ácido, Al, Mn e exposição Sincrônica ao Al e ao Mn. Os resultados demonstraram que o pH ácido e o Al reduziram a FR sem efeito de recuperação. O Al se bioconcentrou principalmente nas brânquias, fígado e encéfalo, enquanto que o Mn se bioconcentrou principalmente nas brânquias, mas em menor intensidade que o Al. Quando expostos sincronicamente, o Mn potencializou os efeitos de bioconcentração do Al, causando a redução na concentração plasmática de E2 e 17α-OHP, para este progestágeno apenas na exposição ao Mn, tanto isolada quanto em exposição sincrônica. Contudo não foi observada recuperação na concentração de E2. Ambos os metais, em exposição isolada, causaram redução na concentração plasmática de CT, todavia nenhuma alteração foi registrada na exposição sincrônica. Da mesma forma, ambos os metais causaram redução na concentração plasmática de T4, inclusive a exposição sincrônica, enquanto que o T3 se alterou diferentemente em cada grupo de exposição metálica. Possivelmente os efeitos sobre os hormônios tireoidianos tenham refletido uma resposta de modulação endócrina, enquanto que sobre os esteroides foram efeitos de desregulação endócrina, em uma via anti-esteroidogênica. Nenhum efeito foi observado na expressão gênica do mRNA βLH e não foi possível obter resultado sobre o βFSH, embora os primers tenham sido desenhados especialmente para A. bimaculatus e tenham funcionado corretamente na elaboração da curva padrão para o qRT - PCR. Os resultados encontrados em fêmeas vitelogênicas de A. bimaculatus podem ser relacionados ao tipo de exposição e a interação / Metals such as Aluminum (Al) and Manganese (Mn) are found in nature as well as in industrial effluents, and can be toxic to aquatic biota, with endocrine disrupting effects, e.g. for fish, which can affect the reproductive performance of a species. Rivers and tributaries of São Paulo State, even in theoretically preserved areas, have shown an increase in the supply of these metals in concentrations greater than allowed by law, and the consequence for the fish is poorly understood. In this study, toxicity tests were designed for acute aquatic exposure (96 hours) to Al and Mn, in isolated and synchronous forms, in vitellogenic females of Astyanax bimaculatus, a teleost fish species. This exposure period was followed by a period in clean water (96 hours) to assess the possibility of recovery of toxic effects promoted by these metals, evaluating the following parameters: relative fecundity (FR), bioconcentration potential of these metals, plasma concentration of Estradiol (E2), 17α hydroxyprogesterone (17α -OHP), Cortisol (CT), triiodothyronine (T3), thyroxine (T4) and mRNA gene expression of βFSH and βLH. Five experimental groups were established: Control at neutral pH, acidic pH, Al, Mn and synchronic exposure to Al and Mn. The results showed that acidic pH and Al reduced FR with no recovery effect. Al was mainly bioconcentrate in gills, liver and brain, whereas Mn was mainly bioconcentrate in gills, but with less intensity than Al. When exposed synchronously, Mn potentiated the effects of Al bioconcentration, causing a reduction in the plasma levels of E2 and 17α-OHP, for this progestogen only to Mn exposure, both, in isolated and synchronous exposure. But recovery was not observed in E2 levels. Both metals, in isolated exposure caused a reduction in plasma CT, but no change was recorded in synchronous exposure. Likewise, both metals induced reduction in plasma T4 levels, including synchronous exposure, whereas T3 levels were differently altered in each metal exposure group. Possibly the effects on thyroid hormones have reflected a response to endocrine modulation, whereas steroids showed endocrine disrupting effects in na antiesteroidogenic way. No effects were observed in mRNA βLH gene expression and it was not possible to achieve βFSH results, although the primers were designed especially for A. bimaculatus and have worked properly in the preparation of the standard curve for qRT - PCR. The results found in vitellogenic A. bimaculatus females may be related to the type of exposure and interaction, which were variable between Al and Mn ions.

O presente experimento teve como objetivo retomar o problema do efeito de diferentes intensidades de choque na aquisição de uma resposta de esquiva no peixe dourado (Carassius auratus). Usando 36 sujeitos divididos em nove grupos, foram estudadas as seguintes intensidades: - 1,4ma. 1,6 ma., 1,8 ma., 2,O ma., 2,2 ma., 2,4 ma, 2,7 ma., 3,1 ma.e 3,7 ma. Os sujeitos foram treinados numa situação de esquiva sinalizada, em esquema de atraso, onde, um estimulo luminoso (CS) de 20 segundos de duração sinalizava o choque. Este podia ser evitado por uma resposta de esquiva, ou terminado por uma resposta de fuga; se nenhuma destas respostas ocorresse o choque teria uma duração máxima de 10 segundos, sendo então desligado. Os resultados mostraram uma maior aquisição da resposte de esquiva à medida\' que aumentava a intensidade do choque. Estes resultados foram medidos através da freqüência bem como da latência da resposta de esquiva. Nas intensidades intermediárias a função descrita apresentou alguma variabilidade. Esta pareceu ser resultado de diferenças na rapidez de aquisição do animal para animal. As respostas de fuga, sua freqüência e latência, apresentaram resultados condizentes com os acima descritos. / The present study was aimed at the functional analysis of the relationships between shock intensities and acquisition of discriminated avoidance responses in the goldenfish (Carassius auratus). Using 36 subjects nine shock intensities, were studied, that is, intensities of - 1.4, 1.6, 1.8, 2.0, 2.2, 2.4, 2.7, 3.1, and 3.7 ma. The discriminated contingency involved a delayed procedure with a 20 sec. CS (light).- Shock could be avoided or escaped; if no responses were omitted, shock lasted up to 10 sec. Results showed a positive function relating acquisition and shock intensity. Measures were taken of per cent of avoidance response, as well. as its latency. At the intermediate intensity values the function exhibited some oscillations; further analysis showed that they could be accounted for by differences in rate of acquisition among subjects. Escape responses trends were the same as those above.

A temperatura é um fator abiótico fundamental que influencia diretamente o comportamento e a sobrevivência dos organismos, incluindo peixes. Por serem ectotérmicos, peixes respondem diretamente à variação de temperatura. Eles possuem mecanismos celulares de termoestabilidade, com diferentes expressões, ajustados evolutivamente às condições do meio. O presente trabalho tem como objetivo estudar os efeitos do aumento gradual da temperatura (2°C/h) a partir da temperatura ambiente de inverno (22°C) até 26, 30, 32, 34 e 36°C e temperatura crítica de sobrevivência (TCS) em peixes pampo, Trachinotus carolinus. Analisou-se o comportamento a partir de vídeos; a expressão das proteínas relacionadas à hipóxia tecidual HIF-1~a e VEGF em músculo e fígado através da técnica de imuno-histoquímica; e análises celulares através da quantificação de mitocôndrias e mensuração de sua área. Os resultados mostraram que o comportamento dos pampos é alterado com o aumento da temperatura, apresentando um padrão definido. As maiores expressões proteicas foram em temperaturas elevadas, a 34°C no caso do VEGF e a 36°C no caso do HIF-1 ~a. Houve aumento no número de mitocôndrias e queda em sua área conforme o aumento da temperatura. Portanto, a temperatura tem influência em todos os níveis de organização estudados, ou seja, celular, tecidual e do organismo / Temperature is an important abiotic factor that influences directly the behavior and survival of organisms, including fish. Fishes are ectothermic, and respond directly to temperature variation. They have cellular mechanisms of thermostability that were adjusted during evolution to environmental conditions. The present work aims to study the effects of the gradual increase in temperature (2°C / h) from the winter temperature (22°C) to 26, 30, 32, 34 and 36°C and critical survival temperature (TCS) in fish pompano, Trachinotus carolinus. We analyzed the behavior out of vídeos; the expression of proteins related to tissue hypoxia HIF-1 ~a and VEGF in muscle and liver through the technique of immunohistochemistry; and determined the number and the área of cellular mitochondria. The results showed that the behavior of pampano changes with increasing temperature, in a gradual scale pattern. The protein expressions were higher at elevated temperatures, at 34°C in the case of VEGF and at 36°C in the case of HIF-1 ~a. An increase in the number of mitochondria, and a decrease in their area were observed with increasing temperature. Therefore, temperature had measurable effects at all levels of organization studied, i.e., cellular, tissular and organismic

Em exposições especificamente relacionadas ao metilmercúrio (MeHg), o principal órgão alvo é o Sistema Nervoso Central (SNC). Os efeitos morfológicos do metilmercúrio nos fotorreceptores da retina de Hoplias malabaricus, traíra, foram investigados através de técnicas histopatológicas. Os exemplares de traíra foram distribuídos em três grupos: um grupo controle e dois grupos expostos ao MeHg. A contaminação trófica e subcrônica foi realizada através de exemplares vivos de Astyanax sp os quais receberam intraperitonealmente um volume de solução aquosa de MeHg correspondente a (0,075µg/g de traíra) ou (0,75µg/g de traíra). Quinze peixes por condição experimental foram sacrificados após 70 dias de exposição e os olhos foram coletados para as análises de microscopia de luz, microscopia eletrônica de transmissão e microscopia eletrônica de varredura. Através de análises químicas quantificamos o mercúrio em músculo e observamos em ambas as doses um acúmulo do metal. Para a maior dose do metal (0,75µg/g), as análises histopatológicas revelaram alterações nas membranas que unem os dois elementos de um cone pareado, degeneração da camada dos fotorreceptores e alterações morfológicas no segmento interno e segmento externo dos bastonetes. As análises também demonstraram alterações estruturais na membrana plasmática do segmento externo e alterações no processo de eliminação dos discos membranosos dos fotorreceptores. No momento da eliminação dos discos antigos foi observada a formação de vacúolos e também uma anormal eliminação dos discos membranosos pelas partes laterais do segmento externo. Para a menor dose do metal (0,075µg/g) além da alteração observada nas membranas que unem os cones pareados e da degeneração celular na camada dos fotorreceptores, observamos uma descontinuidade estrutural dos discos membranosos do segmento externo dos fotorreceptores. Todas estas alterações histopatológicas nos levam a concluir que o metilmercúrio induz alterações histopatológicas nas células da camada dos fotorreceptores podendo consequentemente trazer danos fisiológicos para toda a retina. / In exposures specifically related to methylmercury (MeHg), the main target organ is the Central Nervous System (CNS). In this study, morphological effects of methylmercury in retinal photoreceptors of Hoplias malabaricus, trahira, through histopathological techniques were investigated. Some mature fish were divided in three groups - one control group and the other two which were exposed to MeHg. The trophic and subchronic contamination was performed by live specimen of Astyanax sp which received a volume of aqueous solution of MeHg corresponding to (0,075µg /g trahira) or (0,75µg /g trahira). In an experimental condition, fifteen fish were sacrificed after 70 days of exposure and their eyes were collected for analysis of light microscopy, electron transmission microscopy and scanning electron microscopy. Through chemical analysis the amount of mercury found in muscle was quantified. In both doses an accumulation of the metal in the muscle of these animals was observed. For the highest dose of metal (0,75µg /g), the histopathological analysis revealed changes in the membrane that connects the two elements of a paired cone, cellular degeneration in the layer of photoreceptors and morphological changes in the internal and outer rod segments. The analysis also showed structural changes in the plasma membrane of the outer segment and changes in the process of removal of membranous discs in the apical region of a photoreceptor. At the time of disposal of old discs, the formation of vacuoles and also an abnormal membranous discs removal through the sides of the outer segment were observed. For the smallest dose of the metal (0,075µg/g) besides the morphological changes observed in the membrane which unites the paired cones and cellular degeneration throughout the layer of photoreceptors, a structural discontinuity of the membranous discs of the outer segment were observed in radial sections of rods. All these histopathological changes lead us to conclude that methylmercury induces morphological changes in cells of the layer of photoreceptors, and therefore causing physiological damage to the smooth functioning of the retina.

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Essa redução é realizada por enzimas bacterianas (nitrato redutase) que estão presentes em espécies contaminantes que podem proliferar nesse tipo de alimento. Tais alimentos conservados em sal, como o pirarucu (entre outros peixes), camarão e charque, estão incorporados há muitos anos no padrão alimentar do estado do Pará e de outras áreas da região amazônica. Durante o processo de salga, o tempo, as condições de processamento, de armazenamento e da comercialização do alimento estão diretamente relacionados com a qualidade destes produtos, por este motivo, ressalta-se a importância de estudos que avaliem condições alternativas de processamento, como o uso da refrigeração, visando atenuar a produção de componentes nocivos a saúde humana. No presente estudo, investigamos a composição bacteriana em diferentes processos de salga destes alimentos, por meio de isolamento bacteriano e metagenômica. Amostras de pirarucu fresco evidenciaram crescimento de E. coli, indicando contaminação microbiana de origem fecal, o que não foi percebido nas amostras submetidas a salga. A partir das análises metagenômicas pode-se observar uma abundância do gênero Staphylococcus nas amostras de peixes salgados, principalmente naqueles mantidos expostos em temperatura ambiente. Esse gênero contém espécies que causam toxinfecções e possuem a enzima nitrato redutase. A contaminação do pirarucu por essas espécies bacterianas leva a produção de nitrito, que quando consumidos originam a formação de agentes carcinógenos envolvidos na formação de mutações, podendo desencadear as neoplasias gástricas. Embora a refrigeração tenha amenizado o quantitativo bacteriano, o efeito bacterioestático ou bactericida do processo de salga não foi suficiente para manter a qualidade do pescado salgado em níveis adequados para consumo, assim, o consumo do mesmo pode trazer malefícios a saúde da população e estar relacionado com os altos índices de CG na população de Belém e da região Norte. / In the North region, gastric cancer (GC) ranks second of the most frequent types of tumors in men and fourth in women. For 2016, were estimated 690 new cases in the state of Pará, 260 cases in the capital. GC has a multifactorial etiology, resulting from the interaction of genetic (endogenous) and environmental (exogenous) factors. Epidemiological studies have shown a clear association between the excessive consumption of salt-preserved foods and the occurrence of GC, this is mainly due to the carcinogenic action of N-nitroses compounds resulting from the union of Nitrate reduction pathway (from salting) products and of organic compounds present in the stomach region. This reduction is performed by bacterial enzymes (nitrate reductase) that are present in contaminating species that can proliferate in this type of food. Such salt-preserved foods, such as pirarucu (among other fish), shrimp and charque, have been incorporated for many years into the food pattern of the state of Pará and other areas of the Amazon region. This reduction is performed by bacterial enzymes (nitrate reductase) present in contaminating species that can proliferate in this type of food. Salt-preserved foods, such as pirarucu (among other fish), shrimp and charque, have been incorporated for many years into the food pattern of the state of Pará and other areas of the Amazon region. During the salting process, the time and conditions of processing, storage and commercialization of the food are directly related to the quality of these products. For this reason, the importance of studies that evaluate alternative processing conditions, such as use of refrigeration, in order to mitigate the production of components harmful to human health. In the present study, we investigated the bacterial composition in different salting processes of these foods, through bacterial and metagenomic isolation. Samples of fresh pirarucu evidenced growth of E. coli, indicating microbial contamination of fecal origin, which was not noticed in the samples submitted to salting. From the metagenomic analyzes we can observe an abundance of the genus Staphylococcus in the samples of salted fish, especially in those kept exposed at room temperature. This genus contains species that cause toxinfections and have the enzyme nitrate reductase. The contamination of pirarucu by these bacterial species leads to the production of nitrite, which when consumed lead to the formation of carcinogens involved in the formation of mutations, which may trigger gastric neoplasms. Although refrigeration has diminished the bacterial quantitative, the bacteriostatic or bactericidal effect of the salting process was not sufficient to maintain the quality of the salted fish in levels suitable for consumption, therefore, the consumption of the fish can be harmful to the health of the population and be related with high GC rates in the population of Belém and the North region.

Submitted by Mariana Dornelles Vargas (marianadv) on 2015-03-18T13:43:18Z No. of bitstreams: 1 uso_assembleia.pdf: 3872403 bytes, checksum: fd9c8055becd08ba193b54a30db28df5 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-18T13:43:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 uso_assembleia.pdf: 3872403 bytes, checksum: fd9c8055becd08ba193b54a30db28df5 (MD5) Previous issue date: 2011-08 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O crescimento populacional tem sido um dos fatores que mais tem gerado uso dos recursos naturais. No Brasil as ameaças aos sistemas hídricos são principalmente ocasionadas pelo uso da água para agricultura e irrigação, levando a alterações do ambiente e por conseqüência da biota. Estudos de Integridade Biótica, utilizando-se da comunidade de peixes tem obtido boas respostas quanto a avaliação do estado da qualidade dos recursos hídricos. O Índice de Integridade Biótica (IBI), definido por KARR como integrador dos fatores ecológicos e ambientais, tem demonstrado capacidade de avaliar a dimensão das perturbações sofridas, e aos poucos as pesquisas adaptaram-se e se propagaram para comunidades em ambientes muito distintos, como por exemplo, lagos, estuários e recifes. Os trabalhos de IBIs aplicados até o momento normalmente avaliam trechos de um rio ou locais muito distintos, e adaptam métricas que consideram apropriadas a cada caso. Neste estudo avaliaram-se 27 pontos amostrados para conhecimento da estrutura da comunidade e espécies ocorrentes e adaptou-se um IBI padronizado com intuito de avaliar distintos ambientes. Foram registrados 62141 indivíduos, de 95 espécies, sendo a espécie mais abundante Hyphessbrycon luetkenii. Inicialmente foram sugeridas 19 métricas, que passaram por um processo seletivo e de avaliação de sensibilidade, que gerou um protocolo padrão de 8 métricas de avaliação do Índice de Integridade Biótica. / Population growth has led to an increased use of natural resources. In Brazil, the threats to water systems are mostly caused by the use of water in agriculture and irrigation, leading to environmental, and, thus, biota changes. Studies on the Index of Biotic Integrity (IBI) using fish communities have helped clarify the status of the quality of water resources. The Index of Biotic Integrity (IBI), defined by KARR as an integrator of ecological and environmental factors has been successfully used to assess the size of the disruption in the environment, and in subsequent studies the IBI was adapted to fish communities in very different environments, such as lakes, estuaries and reefs. The studies conducted so far using protocols for IBI have usually assessed sections of a river or very different sites, and the metrics are adapted according to the case. In the present study, 27 points sampled for the knowledge of the structure of the fish community and the species occurring there were assessed, and a standard IBI was adapted with the purpose of assessing different sites. 62,141 individuals of 95 species were recorded, with Hyphessbrycon luetkenii being the most abundant species. At first, 19 metrics were suggested, which have undergone a process of selection and evaluation of sensitiveness. A standard protocol of eight final metrics for inclusion in the Index of Biotic Integrity was then generated.

Algumas doenças associadas à piscicultura de tilápias trazem enormes prejuízos aos criadores, resultando em expressivos coeficientes de morbidade e mortalidade entre animais de todas as idades. Nesse sentido, exigências para o aprimoramento do diagnóstico laboratorial de doenças de natureza infecto-contagiosa tornaram-se constantes, face às perdas vinculadas. Os Ranavirus são vírus que infectam vertebrados ectotérmicos causando necrose generalizada, hemorragias focais e apoptose celular nos animais infectados. O presente estudo objetivou a realização de infecções experimentais em larvas e alevinos de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), através de 3 diferentes modelos de infecção, utilizando estirpe de Ranavirus Frog vírus 3-like; recentemente detectada e isolada no Brasil, para avaliação das patologias associadas, incluindo o sequenciamento e análise do genoma da cepa viral. Vários sinais clínicos macroscópicos e microscópicos foram observados, hemólise, hemácias com anisocitose e policromasia, alterações relacionadas a média dos volumes das hemácias e hemoglobina, índices hepato-somáticos e espleno-somáticos com interações estatisticamente significantes, linfócitos reativos, alterações nos níveis das enzimas alanina aminotransferase e corpúsculos de inclusão basofílicos em diferentes tecidos dos animais experimentados com Ranavirus FV3-like foram observados dentro do período de 60 dias pós-infecção. Além disso, animais experimentalmente infectados foram positivos ao Ranavirus através de qPCR. O genoma de cepa brasileira de Ranavirus FV3-like apresentou 105 kilobases, contendo 54,98% de guanina + citosina, sendo 94 potenciais ORFs anotadas. A reconstrução filogenética, baseada em sequencias nucleotídicas, agrupou a amostra brasileira de Ranavirus no clado dos Frog vírus 3-like e as maiores identidades do genoma se deram com cepas norte-americanas de FV3-like. Doze potenciais eventos de recombinação, estatisticamente significantes (p < 0,05), foram identificados entre a cepa brasileira e amostras de referência de Ranavirus FV3-like. Nesse sentido, o presente trabalho contribui para o melhor entendimento da infecção causada por estirpe brasileira de Ranavirus FV3-like em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus). Além disso, adiciona e reforça a potencial recombinação entre diferentes estirpes de Ranavirus, colaborando para uma melhor compreensão das características de agentes virais associados a graves surtos em vertebrados ectotérmicos no país. / Some diseases associated with tilapia fish farming cause enormous losses to breeders, resulting in significant morbidity and mortality rates among animals of all ages. In this sense, requirements for the improvement of the laboratory diagnosis of diseases of infectious-contagious nature, became constant, in view of the related losses. Ranaviruses are viruses that infect ectothermal vertebrates causing widespread necrosis, focal haemorrhages and cell apoptosis in infected animals. The present study aimed to perform experimental infections in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) fry and larvae through 3 different infection models, using Ranavirus Frog virus 3-like strain recently detected and isolated in Brazil, to evaluate the associated pathologies, including sequencing and genome analysis of the viral strain. Several macroscopic and microscopic clinical signs were observed, hemolysis, red blood cells presenting anisocytosis and polychromasia, alterations related to the mean red blood cell volumes and hemoglobin present in the red blood cells, hepato-somatic and spleno-somatic indexes showing statistically significant interactions, reactive lymphocytes, alterations in the levels of the enzymes alanine aminotransferase and basophilic inclusion corpuscles in different tissues of animals tested with Ranavirus FV3-like were observed within the 60-day post-infection period. In addition, experimentally infected animals were positive to Ranavirus through qPCR. The genome of the Ranavirus FV3-like Brazilian strain presented 105 kilobases, containing 54.98% of guanine + cytosine, with 94 potential ORFs annotated. The phylogenetic reconstruction, based on nucleotide sequences, grouped the Brazilian sample of Ranavirus in the clade of Frog virus 3-like, the greater identities of the genome were with North American strains of FV3-like. Twelve potential recombination events, statistically significant (p <0.05), were identified between the Brazilian strain and reference samples of Ranavirus FV3-like. The present work contributes to a better understanding of the infection caused by the Brazilian strain of Ranavirus FV3-like in Nile tilapia (Oreochromis niloticus). In addition, it adds and reinforces the potential recombination between different strains of Ranavirus, contributing to a better understanding of the characteristics of viral agents associated with severe outbreaks in ectothermic vertebrates.