Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 431172.pdf: 1194899 bytes, checksum: 952b6d1718311a7687aedbe05f823d2b (MD5) Previous issue date: 2010-09-23 / O peixe zebra ? um dos modelos vertebrados mais importantes para estudos de gen?tica, biologia do desenvolvimento, neurofisiologia e biomedicina, sendo utilizado como um modelo de doen?as humanas e para triagem de novas drogas, tais como f?rmacos para o tratamento da doen?a de Alzheimer. A doen?a de Alzheimer ? uma doen?a neurodegenerativa que se caracteriza pela deposi??o de placas amil?ides, desenvolvimento de emaranhados de neurofibrilas, inflama??o e perda neuronal em diversas partes do c?rebro que contribuem para os d?ficits cognitivos caracter?sticos da doen?a. O sistema colin?rgico, o principal sistema envolvido nesta doen?a, apresenta a acetilcolina (ACh) como neurotransmissor e est? fortemente relacionado ? processos de aprendizado e forma??o da mem?ria. Al?m do sistema colin?rgico, outros sistemas, como o sistema purin?rgico, est?o envolvidos na patologia da doen?a de Alzheimer. Os nucleos?deos e nucleot?deos derivados de purinas exercem um papel de mol?culas sinalizadoras extracelulares em v?rios tecidos, atrav?s dos receptores purin?rgicos. O ATP tem seus n?veis extracelulares controlados por enzimas da fam?lia das ectonucleotidases, entre elas as ectonucleos?deo trifosfato difosfoidrolases (E-NTPDases) e a ecto-5?-nucleotidase, que realizam a degrada??o de nucleot?deos p?ricos at? adenosina, um nucleos?deo neuromodulador da homeostase celular. Os polifen?is, os quais s?o compostos derivados de plantas, podem atuar como moduladores da sinaliza??o purin?rgica e colin?rgica, al?m de apresentarem efeitos antioxidantes, com aus?ncia de efeitos colaterais severos, apresentando um grande potencial como tratamento para a doen?a de Alzheimer. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial neuroprotetor dos polifen?is quercetina e rutina na preven??o dos d?ficits cognitivos causados pela escopolamina, um antagonista colin?rgico muito utilizado para testes de novos f?rmacos facilitadores da capacidade cognitiva, bem como seus efeitos sobre as enzimas respons?veis pela modula??o dos n?veis dos neurotransmissores ATP e acetilcolina. Os resultados obtidos demonstram que a administra??o intraperitonial de quercetina ou rutina (50 mg/kg) em peixe zebra previniu o d?ficit cognitivo causado pela exposi??o ? escopolamina (200 μM), como demonstrado pelo aumento da lat?ncia para cruzar para o lado escuro do aparato da tarefa de esquiva inibit?ria. A exposi??o a estes compostos n?o promoveu altera??es na locomo??o dos animais. Al?m disso, foi observado que o tratamento com rutina seguido de exposi??o ? ?gua inibiu a hidr?lise de acetilcolina enquanto que o tratamento com rutina seguido pela exposi??o ? escopolamina diminuiu a hidr?lise de ATP. Com rela??o aos efeitos da quercetina, esta inibiu a hidr?lise de AMP quando sua administra??o foi seguida pela exposi??o ? ?gua ou escopolamina. Portanto, estes resultados demonstram que os polifen?is podem apresentar potencial protetor com rela??o ao preju?zo cognitivo induzido pela escopolamina. Al?m disso, nossos resultados demonstram que rutina e quercetina per se s?o capazes de modular os n?veis de acetilcolina, ATP e adenosina em enc?falo de peixe zebra. Estes resultados s?o promissores em rela??o ? possibilidade de terapia preventiva a ser realizada ao longo da vida, visando a n?o ocorr?ncia de decl?nio cognitivo associado ao envelhecimento

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 435930.pdf: 928390 bytes, checksum: 7d9c63e8c3ebdc0a8df50f72dcdee9ab (MD5) Previous issue date: 2011-08-26 / Nanocomposites derived from carbon atoms have been the focus of interest in various industrial fields such as electronic engineering, pharmaceuticals, medical devices, cosmetics, food packaging and other, since its discovery in 1985. Fullerene C60 is a nanocomposite with 60 carbon atoms, which has been the subject of numerous studies for its ability to store atoms in the interior and accept various structural modifications. The importance of understanding all the possible effects of exposure to fullerenes is very great, since its production and its use is growing every day increasing environmental exposure to this compound. The cholinergic system has as its main neurotransmitter acetylcholine (ACh). The acetylcholinesterase (AChE, EC3.1.1.7) is an important regulatory enzyme that controls the transmission of nerve impulses across cholinergic synapses by hydrolysis of the ACh. AChE levels are controlled by the interaction of ACh with its receptors, and when the interaction is enhanced, the levels of AChE are increased. Therefore, AChE can be used as a marker of cholinergic function. In this study our goal was to determine whether intraperitoneal injections of fullerene C60 at the doses of 7.5, 15 and 30 mg/kg and the time of 6h, 12h and 24h of exposure would cause a change in the modulation of the cholinergic system. We observed that the dose of 30 mg/kg in the exposure time of 24 hours showed a 84% increase in enzyme activity compared with the vehicle control group. These results suggest a possible neurotoxic effect. Further studies should be conducted to extend these findings. / Nanocompostos derivados de ?tomos de carbono t?m sido foco de interesse para aplica??es em v?rios campos industriais, tais como engenharia eletr?nica, produtos farmac?uticos, dispositivos m?dicos, cosm?ticos, embalagens de alimentos, entre outros, desde seu descobrimento em 1985. O fulereno C60 ? um nanocomposto com 60 ?tomos de carbono que tem sido alvo de in?meros estudos por suas propriedades como a capacidade de armazenar ?tomos em seu interior e aceitar diversas modifica??es estruturais. A import?ncia de entendermos todos os poss?veis efeitos de uma exposi??o aos fulerenos ? muito grande, j? que a sua produ??o e sua utiliza??o est?o crescendo a cada dia aumentando a exposi??o do meio ambiente a este composto. O sistema colin?rgico tem como principal neurotransmissor a acetilcolina (ACh). A acetilcolinesterase (AChE, E.C.3.1.1.7) ? uma importante enzima regulat?ria que controla a transmiss?o de impulsos nervosos atrav?s da sinapse colin?rgica pela hidr?lise da ACh. Os n?veis de AChE s?o controlados pela intera??o da ACh com seus receptores, sendo que quando a intera??o ? acentuada, aumentam os n?veis de AChE Portanto, a AChE pode ser usada como um marcador da fun??o colin?rgica. Neste estudo nosso objetivo foi verificar se inje??es intraperitoneais de fulereno C60 nas doses de 7,5; 15 e 30 mg/kg e nos tempos de 6h, 12h e 24h de exposi??o causaria alguma altera??o na modula??o do sistema colin?rgico. Observamos que a dose de 30 mg/kg, no tempo de exposi??o de 24h, apresentou um aumento de 84% na atividade enzim?tica quando comparado com o grupo controle-ve?culo. Estes resultados sugerem um poss?vel efeito neurot?xico, embora estudos adicionais devam ser realizados para estender estes achados.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 437833.pdf: 963349 bytes, checksum: 9fc7ce9b6fb62b2118fc694c4bf21677 (MD5) Previous issue date: 2012-03-02 / Hyperargininemia is a rare disease caused by an innate error of the metabolism (EIM) biochemically characterized by the accumulation of arginine in body tissues due to arginase deficits. Mental retardation and other neurological symptoms are common in hyperargininemic patients. Several mechanisms have been proposed to describe the neurotoxicity of hiperargininemia, such as changes in antioxidant enzyme systems and neurotransmission. The purinergic system is an important pathway for which uses extracellular nucleotides and nucleosides as signaling molecules. The extracellular ATP degradation and the consequent adenosine production are performed by a cellular surface enzyme family known as ectonucleotidases, which include the NTPDases (nucleoside triphosphate diphosphoohydrolases) and the ecto-5?-nucleotidase. Adenosine is a neuromodulator that acts through the activation of P1 metabotropic receptors (A1, A2A, A2B, A3) and plays a role as an endogenous neuroprotector. Thus, the NTPDase and ecto-51-nucleotidase control the levels of nucleotides and nucleosides, modulating the purinergic system. Whereas the zebrafish is an important tool for the study of developmental biology and the hiperargininemia is a disease that occurs in the early stages of development, the objective of this study was to evaluate the effects of arginine exposure in zebrafish larvae on different biochemical, behavioral, and molecular parameters. The results showed that exposure to arginine at a concentration of 0.1 mM in larvae of the zebrafish from to 7 days post-fertilization (dpf) was capable of changing ectonucleotidase activities, promoting an increase of ATP, ADP, and AMP hydrolysis and as causing morphological changes, such as larvae body size reduction, but did not alter the locomotor activity of animals. Acute arginine exposure (1h) in adult zebrafish was not able to alter the activity of ectonucleotidases. These data demonstrate that arginine can affect the ectonucleotidase activities and morphological parameters in zebrafish larvae, suggesting that the purinergic system is a target for neurotoxic effects induced by arginine in the early stages of developmental. / Hiperargininemia ? uma doen?a rara causada por um erro inato do metabolismo (EIM) bioquimicamente caracterizado pelo ac?mulo de arginina nos tecidos devido ? defici?ncia de arginase. Retardo mental e outras doen?as neurol?gicas s?o sintomas comuns em pacientes hiperarginin?micos. Diversos mecanismos foram propostos para descrever a neurotoxicidade da hiperargininemia, tais como, altera??es nos sistemas enzim?ticos antioxidantes e de neurotransmiss?o. O sistema purin?rgico ? uma importante rota de sinaliza??o celular que utiliza nucleot?deos e nucleos?deos extracelulares como mol?culas sinalizadoras. A degrada??o do ATP extracelular ? realizada por uma fam?lia de enzimas localizadas na superf?cie celular conhecidas como ectonucleotidases, que inclui as NTPDases (nucleos?deo trifosfato difosfoidrolases) e a ecto-5?-nucleotidase. A adenosina ? um neuromodulador que atua atrav?s da ativa??o de receptores metabotr?picos do tipo P1 (A1, A2A, A2B, A3) e pode agir como um neuroprotetor end?geno. As NTPDases hidrolisam nucleot?deos tri- e difosfatados originando a adenosina. Assim, as NTPDases e ecto-5 -nucleotidase controlam os n?veis de nucleot?deos e nucleos?deos, modulando o sistema purin?rgico. Considerando que o peixe-zebra ? uma importante ferramenta para o estudo da Biologia do Desenvolvimento e que a hiperargininemia ? uma doen?a que ocorre nas fases iniciais do desenvolvimento, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do tratamento com arginina em larvas de peixezebra em diferentes par?metros bioqu?micos, comportamentais e moleculares. Foram avaliados os efeitos da exposi??o in vivo de larvas e adultos de peixe-zebra na atividade das ectonucleotidases e na locomo??o. Os resultados obtidos demonstraram que a exposi??o ? arginina na concentra??o de 0.1 mM em larvas de peixe-zebra do 3? ao 7? dia p?s-fertiliza??o (dpf) foi capaz de alterar a atividade das ectonucleotidases, promovendo um aumento na hidr?lise de ATP, ADP e AMP, assim como causar altera??es moleculares e morfol?gicas, como diminui??o do tamanho corporal, por?m n?o alterou a atividade locomotora dos animais. A exposi??o aguda (1h) a arginina em peixes zebra adultos n?o foi capaz de alterar a atividade das ectonucleotidases. Esses dados demonstram que a arginina pode afetar a atividade das ectonucleotidases e par?metros morfol?gicos em larvas de peixe-zebra, sugerindo que o sistema purin?rgico ? um alvo para os efeitos neurot?xicos induzidos pela arginina, nas fases iniciais do desenvolvimento.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 438119.pdf: 1374944 bytes, checksum: ed0d2c4ba08c684fb0fe51136bb75979 (MD5) Previous issue date: 2012-02-27 / Endosulfan is a broad spectrum organochlorine pesticide that is still widely used in many developing countries. Following application endosulfan can get to watercourses through surface runoff from agricultural fields and disturb the nontarget aquatic animals including freshwater fish species. Given that the activity of the enzyme acetylcholinesterase (AChE) is one of the most recurrently used biomarkers of exposure to pesticides and there are controversial results concerning the effects of endosulfan exposure and AChE activity in fish, the aim of the present study was to evaluate the effects of endosulfan in brain AChE activity and its gene expression pattern using adult zebrafish (Danio rerio) as an animal model. Moreover, we have analyzed the effects of endosulfan exposure in different parameters of zebrafish swimming activity and in long-term memory formation. After 96 hours of exposition, fish in the 2.4 μg endosulfan/L group presented a significant decrease in AChE activity (9.44 ? 1.038 μmol SCh.h-1.mg protein-1; p = 0.0205) when compared to the control group (15.87 ? 1.768 μmol SCh.h-1.mg protein-1; p = 0.0205). The downregulation of brain AChE activity is not directly related with the transcriptional control as demonstrated by the RT-qPCR analysis. Our results reinforce AChE activity inhibition as a pathway of endosulfan-induced toxicity in brain of fish species. In addition, exposure to 2.4 μg endosulfan/L during 96 hours impaired all exploratory parameters evaluated: decreased line crossings (273.7 ? 28.12 number of line crossings compared to the control group 344.6 ? 21.30, p=0.0483), traveled distance (23.44 ? 2.127 meters compared to the control group 29.39 ? 1.585, p=0.0281), mean speed (0.03 ? 0.003 meters/seconds compared to the control group 0.04 ? 0.002, p=0.0275) and body turn angle (69,940 ? 4,871 absolute turn angle compared to the control group 88,010 ? 4,560 p=0.0114). These results suggest that endosulfan exposure significantly impairs animals' exploratory performance, and potentially compromises their ecological and interspecific interaction. Our results also showed that the same endusulfan exposure did not compromise animals' performance in the inhibitory avoidance apparatus. These findings provide further evidence of the deleterious effects of endosulfan exposure in the nervous system. / Endosulfan ? um pesticida organoclorado de amplo espectro ainda utilizado largamente em muitos pa?ses subdesenvolvidos. As aplica??es repetidas de endosulfan podem se incorporar aos cursos de ?gua por meio da lixivia??o dos solos das planta??es e atingir animais aqu?ticos, incluindo esp?cies de peixes. Dado que a atividade da enzima acetilcolinesterase (AChE) ? um dos biomarcadores de exposi??o aos pesticidas mais utilizados de forma recorrente e h? resultados controversos envolvendo os efeitos da exposi??o ao endosulfan e a atividade da AChE em peixes , o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do endosulfan na atividade da AChE cerebral e seu padr?o de express?o g?nica utilizando zebrafish adulto (Danio rerio) como modelo experimental. Al?m disso, n?s analisamos os efeitos da exposi??o ao endosulfan em diferentes par?metros de locomo??o do zebrafish e na forma??o da mem?ria de longo prazo. Ap?s 96h de exposi??o, os peixes do tempo com 2,4 μg/L de endosulfam apresentaram um decr?scimo significante na atividade da AChE (9.44 ? 1.038 μmol SCh.h-1.mg prote?na-1; p = 0.0205) quando comparados com o grupo controle (15.87 ? 1.768 μmol SCh.h-1.mg prote?na-1; p = 0.0205). A regula??o inibit?ria da atividade da AChE cerebral n?o est? diretamente relacionada com o controle transcricional como demostrado pela an?lise de RT-qPCR. Nossos resultados refor?am a inibi??o da atividade da AChE como via da toxicidade induzida pelo endosulfan em c?rebro de de peixe. Al?m disso, a exposi??o de 2,4 μg/L do endosulfan durante 96h prejudicou todos os par?metros explorat?rios avaliados: linhas cruzadas (273.7 ? 28.12 n?mero de linhas cruzadas em compara??o com o grupo controle: 344.6 ? 21.30, p=0.0483), dist?ncia viajada (23.44 ? 2.127 metros comparados com o grupo controle 29.39 ? 1.585, p=0.0281), velocidade m?dia (0.03 ? 0.003 metros/segundos comparados com o grupo controle 0.04 ? 0.002, p=0.0275) e mudan?as de ?ngulo (69,940 ? 4,871 mudan?as de ?ngulo absolutas comparadas com o grupo controle 88,010 ? 4,560 p=0.0114). Esses resultados sugerem que a exposi??o ao endosulfan prejudica significativamente a performance explorat?ria dos animais e, potencialmente, compromete suas intera??es interespec?ficas e ecol?gicas. Nossos resultados tamb?m demonstraram que a mesma exposi??o ao endosulfan n?o compromete a performance dos animais no aparato de esquiva inibit?ria. Esses achados fornecem evid?ncias adicionais de efeitos delet?rios da exposi??o ao endosulfan no sistema nervoso.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 440822.pdf: 1496271 bytes, checksum: ed1a67fe6439eb139b2edd2275228d18 (MD5) Previous issue date: 2012-01-27 / Cadmium is considered the seventh most dangerous substance in the environment and is classified as carcinogen type I, potentially affecting a wide range of living organisms, including humans. In addition to its wide systemic impact and potential lethality, cadmium has been associated to neurobehavioral defects that may also compromise animals ecological status and survival. Despite its potential impact, the comprehension of cellular and molecular mechanisms underlying cadmium deleterious effects on animals behavior is still scarce. This study aimed to evaluate the behavioral effects of cadmium for 1 or 7 days at environmentally relevant concentrations (10 μg/L, 100 μg/L and 1000 μg/L) on zebrafish and to analyze brain oxidative stress and apoptotic markers. Cadmium-exposed zebrafish exhibited a generalized increase in locomotor activity after 1 and 7 days of treatment at all doses in all parameters evaluated, including distance travelled in a 5-min. evaluation period, mean speed and mobile periods. This hyperlocomotory effect significantly compromised animals general performance in exploring a new environment, which was evident in all cadmium exposed animals decreased path efficiency and altered distribution on the water column. Additionally, our results confirmed previous reports of increased oxidative damage in fishes exposed to cadmium and specifically demonstrated higher levels of damaged proteins in brain samples of animals exposed to cadmium at 100 μg/L for 1 day and at 10 μg/L for 7 days when compared to their respective control groups. Lipid peroxidation was also significantly increased in animals brain after 1 day cadmium exposure at 100 μg/L. Real-Time PCR analysis of transcripts for p53 and bax were not altered after 1 day cadmium exposure, but significantly increased after 7 days. Our results present evidence of cadmium deleterious effects on zebrafish cognitive functions and raise attention to the fact that its manifestation appears already after a one day exposure to 10 μg/L, a concentration accepted by most international regulating agencies / O c?dmio ? considerado a s?tima subst?ncia mais perigosa presente no ambiente e ? classificado como carcinog?nico tipo I, potencialmente afetando uma grande quantidade de seres vivos, incluindo os humanos. Ademais, o c?dmio tem sido associado a defeitos neurocomportamentais que podem comprometer o status ecol?gico e a sobreviv?ncia de animais. Apesar do potencial impacto, a compreens?o dos mecanismos celulares e moleculares por tr?s de seus efeitos delet?rios no comportamento de animais ? ainda escassa. Este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos comportamentais do c?dmio por 1 e 7 dias a concentra??es relevantes no ambiente (10 μg/L, 100 μg/L and 1000 μg/L) em zebrafish e analisar o estresse oxidativo e marcadores de apoptose no enc?falo. Animais expostos ao c?dmio apresentaram aumento na atividade locomotora ap?s 1 e 7 dias de tratamento em todas as concentra??es e par?metros avaliados, incluindo dist?ncia percorrida num per?odo de 5 minutos, velocidade m?dia e per?odos m?veis. A hiperlocomo??o afetou significativamente o desempenho dos animais em explorar um novo ambiente em todos os grupos tratados, evidenciado por uma diminui??o na efici?ncia de percurso e alterada distribui??o na coluna d ?gua. Adicionalmente, nossos resultados confirmaram estudos pr?vios sobre aumento no dano oxidativo em peixes quando expostos ao c?dmio e especialmente demonstraram n?veis mais elevados de dano a prote?nas em amostras de enc?falo em animais tratados a 100 μg/L por 1 dia e a 10 μg/L por 7 dias quando comparados aos seus respectivos controles. Lipoperoxida??o aumentou significativamente no enc?falo de animais expostos por 1 dia a 100 μg/L. An?lises dos marcadores p53 e bax por Real-time PCR apresentaram nenhuma altera??o ap?s 1 dia de exposi??o, mas significativamente aumentaram ap?s 7 dias. Nossos resultados apresentam evid?ncias dos efeitos delet?rios do c?dmio no comportamento de zebrafish e chama aten??o para o fato de que a manifesta??o de seus efeitos aparece a partir de 1 dia de exposi??o a 10 μg/L, uma concentra??o aceita por muitas ag?ncias de regulamenta??o internacional

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 442629.pdf: 4545565 bytes, checksum: 75785599771804ca3f6535bc606e1454 (MD5) Previous issue date: 2012-08-09 / The clinical depression treatment faces serious obstacles as the disease mechanism is not fully elucidated. In addition, there are no effective means to predict and prevent depression as well as any biological method of diagnosis. The use of antidepressants is still the basis of the treatments for depression. Lithium has been used clinically as effective drug to treat all phases of bipolar disorder, including major depression. The Selective serotonin re-uptake inhibitors (SSRIs), such as fluoxetine and citalopram, and Tricyclic antidepressant (TCA) as clomipramine are drugs constantly used for depression treatment. Recent evidence has shown an involvement of adenosine and its receptors in the pathophysiology of depression. ATP can be stored and co-released with other neurotransmitters like serotonin and can be hydrolyzed by a cell-surface enzyme family known as ectonucleotidases. Among these members, we highlight the nucleoside triphosphate diphosphohtdrolases (NTPDases) and ecto-5'-nucleotidase. They are able to control the availability of ligands such as ATP and adenosine to its specific receptors. Adenosine deaminase (ADA) can promote the hydrolytic deamination of adenosine to inosine, modulating the extracellulr levels of this neuromodulator. In cholinergic signaling, after its release, acetylcholine (ACh) promotes the activation of specific muscarinic or nicotinic receptors and thus, it promotes diverse cellular responses. ACh is hydrolyzed by acetylcholinesterase (AChE) in acetate and choline in synaptic cleft. The zebrafish has been used in research behavioral neuroscience and is also a choice model for elucidating the development and function of neuronal circuitry. Considering the cholinergic and purinergic signaling are important participation in the CNS and these neurotransmitter pathways have been identified and characterized in zebrafish, the objective of this study was to evaluate the effect of antidepressants on ectonucleotidases, ADA and ACh activities, which are essential enzymes in the modulation of these signaling pathways in the zebrafish brain. We evaluated the ex vivo effects of fluoxetine (1-10 ?M), clomipramine (1-10 ?M), citalopram (70-300 ?M) on ectonucleotidases and ADA activities. It has been also analyzed the in vitro (1 to 1000 ?M) and ex vivo (1 to 10mg/L) effect of lithium on ectonucleotidases and AChE activities and gene expression. There was a significant inhibition of ADP hydrolysis after ex vivo exposure to lithium at 5 and 10 mg/L, whereas an inhibitory effect was observed for AMP hydrolysis only at 10 mg/L. The same treatment decreased the AChE activity in a concentration of 10mg/L. Lithium did not induce significant changes in the analysis of gene expression patterns in the concentrations tested. In vivo treatment, there were no significant changes inectonucleotidases and AChE activities. Treatment with clomipramine promotes an inhibition ecto-5'-nucleotidase activities at the concentration of 5?M when compared to the control group. For ADA activity, we also observed a significant inhibition in the treatment with clomipramine at concentrations of 5 and 10 ?M in membrane fractions of zebrafish brain. However, treatment with fluoxetine and citalopram did not alter ectonucleotidases and ADA activities in the zebrafish brain. Our findings may contribute to a better understanding of pharmacology of antidepressants and their interaction with the cholinergic and purinergic neurotransmission. / O tratamento cl?nico da depress?o enfrenta s?rios obst?culos j? que o mecanismo da doen?a n?o ? totalmente elucidado. Al?m disso, n?o existem meios eficazes para prever e prevenir a depress?o bem como nenhum m?todo biol?gico de diagn?stico. O uso de f?rmacos antidepressivos ainda ? a base dos tratamentos para depress?o. O l?tio tem sido usado clinicamente como f?rmaco eficaz para tratar todas as fases do transtorno bipolar, incluindo depress?o aguda. Os inibidores seletivos da recapta??o de serotonina (ISRSs), como fluoxetina e citalopram, e os antidepressivos tric?clicos (TCA), como a clomipramina, s?o f?rmacos constantemente utilizados para o tratamento da depress?o. Evid?ncias recentes mostram o envolvimento da adenosina e seus receptores na patofisiologia da depress?o. O ATP pode ser armazenado e co-liberado, juntamente com outros neurotransmissores, como serotonina e noradrenalina, e pode ser hidrolisado at? adenosina por uma fam?lia de enzimas de superf?cie celular, conhecidas como ectonucleotidases. Dentre elas, destacam-se as Nucleos?deo Trifosfato Difosfoidrolases (NTPDases) e a ecto-5?-nucleotidase, capazes de controlar a disponibilidade de ligantes como ATP e adenosina aos seus receptores espec?ficos. A Adenosina desaminase (ADA) pode promover a desamina??o hidrol?tica da adenosina em inosina, modulando os n?veis extracelulares deste neuromodulador. Na sinaliza??o colin?rgica, a acetilcolina (ACh), ap?s liberada, promove a ativa??o de receptores muscar?nicos ou nicot?nicos, e desta maneira a ACh promove diversas respostas celulares. A ACh que permanece na fenda sin?ptica ? hidrolisada pela acetilcolinesterase (AChE) em acetato e colina. O peixe-zebra tem sido utilizado na pesquisa da neuroci?ncia comportamental, sendo tamb?m um modelo de escolha para elucidar o desenvolvimento e a fun??o do circuito neuronal. Considerando que as sinaliza??es purin?rgica e colin?rgica t?m importante participa??o no sistema nervoso central e que essas vias de neurotransmiss?o j? est?o caracterizadas em peixe-zebra, o objetivo desse estudo foi avaliar o efeito de f?rmacos antidepressivos na atividade das ectonucleotidases, ADA e AChE, enzimas essenciais na modula??o destas vias de sinaliza??o em c?rebro de peixe-zebra. Foram avaliados os efeitos ex vivo da fluoxetina (1-10 ?M), clomipramina (1-10 ?M) e citalopram (70-300 ?M) na atividade das ectonucleotidases e ADA. Foi analisado tamb?m o efeito in vitro (1 a 1000 ?M) e ex vivo (1-10mg/L) do l?tio sobre a atividade e express?o g?nica das ectonucleotidases e AChE.A exposi??o ao l?tio inibiu a hidr?lise de ADP nas concentra??es de 5 e 10mg/L e inibiu a hidr?lise de AMP na concentra??o de 10mg/L quando comparado ao grupo controle. Este mesmo tratamento diminuiu a atividade da AChE na concentra??o de 10mg/L.O l?tio n?o induziu altera??es significativas na an?lise do padr?o de express?o g?nica. No tratamento in vitro, n?o foram observadas altera??es na atividade das ectonucleotidases e AChE. O tratamento com a clomipramina mostrou uma inibi??o na atividade da ecto-5?-nucleotidase na concentra??o de 5 ?M quando comparado ao grupo controle. Na atividade da ADA tamb?m observamos uma inibi??o significativa no tratamento com a clomipramina nas concentra??es de 5 e 10 ?M em fra??es de membrana de c?rebro de peixe-zebra. Entretanto, o tratamento com fluoxetina e citalopram n?o alterou a atividade das ectonucleotidases e ADA no c?rebro do peixe-zebra. Nossos resultados podem contribuir para uma melhor compreens?o da farmacologia dos f?rmacos antidepressivos e a sua intera??o com a neurotransmiss?o colin?rgica e purin?rgica.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-04-30T12:04:30Z No. of bitstreams: 1 467723 - Texto Completo.pdf: 2865101 bytes, checksum: b256a7dea256e368fcffefd24c5de3b4 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-30T12:04:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 467723 - Texto Completo.pdf: 2865101 bytes, checksum: b256a7dea256e368fcffefd24c5de3b4 (MD5) Previous issue date: 2015-03-20 / Gua?ba Lake, one of five biologically defined units of the Patos Lagoon system, is extremely important for its rich biodiversity and the numerous habitats distributed along its length. Due to the increase in both urbanization and industry on the shores of this environment, the characterization of the current habitat status of this ecosystem is essential for the implementation of effective conservation measures. Fish have been previously studied as indicators of environmental quality. Consequently, several parameters were utilized to determine the spatial distribution factors of species of Characiformes, one of the most representative orders of South America. Over a two year period (from February 2012 to February 2014), 59 surveys were completed at different locations within Gua?ba Lake - connection points with rivers, streams, margins and the pelagic region. At each point continuous and binary abiotic data (e.g. water parameters, characterization of sediment and landscape), were collected, in addition to biotic data (e.g. macroinvertebrate community composition). Ten species of Characiformes were identified from gillnets (mesh size 15-70 mm): Acestrorhynchus pantaneiro, Astyanax sp. aff. fasciatus, Astyanax jacuhiensis, Cyphocharax voga, Hoplias malabaricus, Leporinus obtusidens, Oligosarcus jenynsii, Oligosarcus robustus, Prochilodus lineatus and Schizodon jacuiensis. To quantify the influence of each variable in the distribution of fish population we generated Generalized Additive Models (GAM) in R Software. Due to the large number of descriptors, in this paper we present an unusual methodology, initially splitting all parameters into six functional groups (water, sediment 1 and 2, macroinvertebrates, macrohabitat and morphometric variables). Subsequently, we modelled the most important ones in two stages, leaving the most significant subset of descriptors that determine the distribution of each species. The distribution of the two most abundant species, A. sp. aff. fasciatus and C. voga, was determined by four distinct variables. The former, by riparian vegetation, Gastropoda, DO and margin; the latter, by particle size 0.25 and <0.63 mm, shoal and distance from the channel. O. jenynsii distribution was determined by one variable (temperature), O. robustus by seven variables (particle size 0.25 mm, Chironomidae, emergent, riparian and floating vegetation, pH and Patos), A. jacuhiensis by two variables (distance from the channel and stream), A. pantaneiro by three variables (average diameter of sediment particles, distance from the shore and Gua?ba) and finally H. malabaricus by five variables (average diameter of sediment particles, distance from the channel, floating vegetation, vegetated margin and particle size <0.63 mm). Insufficient numbers of the three least abundant species, P. lineatus, L. obtusidens and S. jacuiensis, were collected for analysis. / O Lago Gua?ba, uma das cinco unidades biol?gicas do Sistema Patos, ? de grande import?ncia por sua rica biodiversidade e pelos v?rios tipos de h?bitats compreendidos em sua extens?o. Devido ? crescente produ??o industrial e o aumento dos centros urbanos ?s margens deste ambiente, ? imprescind?vel a caracteriza??o do perfil atual deste ecossistema para a aplica??o de medidas eficazes de conserva??o. Como indicadores da qualidade ambiental, diversos estudos v?m utilizando peixes. Em vista disto, foram avaliados in?meros par?metros na busca dos fatores condicionantes da distribui??o das esp?cies da ordem Characiformes, uma das mais representativas da Am?rica do Sul. Ao longo de dois anos (de fevereiro de 2012 a fevereiro de 2014), foram realizadas 59 coletas contemplando os diferentes h?bitats do Lago Gua?ba ? pontos de conex?o com rios, em arroios, margens e regi?o pel?gica. Em cada ponto, al?m de dados abi?ticos cont?nuos e bin?rios, que inclu?am desde par?metros da ?gua, caracteriza??o do sedimento e paisagem, tamb?m foram coletados representantes da fauna de macroinvertebrados. Dez esp?cies de Characiformes foram identificadas durante as amostragens com redes de espera (15-70 mm entre n?s adjacentes): Acestrorhynchus pantaneiro, Astyanax sp. aff. fasciatus, Astyanax jacuhiensis, Cyphocharax voga, Hoplias malabaricus, Leporinus obtusidens, Oligosarcus jenynsii, Oligosarcus robustus, Prochilodus lineatus e Schizodon jacuiensis. Para quantifica??o da influ?ncia de cada vari?vel na distribui??o da ictiofauna foram gerados Modelos Aditivos Generalizados (GAM, em ingl?s) no software R. Devido ao grande n?mero de descritores, neste trabalho apresentamos uma metodologia n?o usual, reunindo, primeiramente, todos os par?metros em seis grupos considerados funcionais (?gua, Sedimento 1 e 2, Macroinvertebrados, Macro H?bitat e vari?veis Morfom?tricas). Posteriormente, modelamos em duas etapas seus constituintes mais importantes e significativos at? que restasse o subconjunto de descritores determinantes do padr?o de distribui??o de cada uma das esp?cies. As duas esp?cies mais abundantes, C. voga e A. sp. aff. fasciatus, tiveram sua distribui??o determinada por quatro vari?veis. A primeira, pela vegeta??o rip?ria, Gastropoda, OD e margem; a segunda, pelas granulometrias 0,25 e <0,63 mm, margem arenosa e dist?ncia de canal. Em seguida, O. jenynsii por uma vari?vel (temperatura da ?gua), O. robustus por sete vari?veis (granulometria 0,25 mm, Chironomidae, vegeta??es emergente, rip?ria e flutuante, pH e Patos), A. jacuhiensis por duas vari?veis (dist?ncia do canal e arroio), Acestrorhynchus pantaneiro por tr?s vari?veis (m?dia ponderada do di?metro das part?culas, dist?ncia da margem e Gua?ba) e, finalmente, H. malabaricus por cinco vari?veis (m?dia ponderada do di?metro das part?culas, dist?ncia do canal, vegeta??o flutuante, margem vegetada e granulometria <0,63 mm). As tr?s esp?cies menos abundantes, P. lineatus, L. obtusidens e S. jacuiensis n?o apresentaram n?mero de indiv?duos suficiente para a an?lise.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-06T16:55:06Z No. of bitstreams: 1 467931 - Texto Completo.pdf: 1649223 bytes, checksum: 97061538af6c3abdd1bf13692fc0be12 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-06T16:55:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 467931 - Texto Completo.pdf: 1649223 bytes, checksum: 97061538af6c3abdd1bf13692fc0be12 (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / Depression is a serious and recurrent disease characterized by anhedonia, loss of interest in daily activities, appetite, and sleep disturbances, reduced concentration and psychomotor agitation. Antidepressant drugs currently used have a very slow onset of action, with that comes the need for fast-acting treatments. Therefore, there is a growing interest in NMDA antagonists as a target for the development of new antidepressant drugs. Considering that the purinergic and dopaminergic systems are involved in anxiety, depression, and sleep, we characterize the role of these signaling pathways on antidepressant effects induced by MK-801 in zebrafish. The animals treated with MK-801 at 5, 10, 15, and 20 ?M during 15, 30, and 60 minutes showed higher permanence in the top area of the tank, in comparison with the control group, indicating an antidepressant effect induced by this drug. The animals treated with MK-801 remained within 2 hours in the top of the tank when treated with 5 ?M MK-801 and 4 hours when treated with 20 ?M MK-801, returning to basal levels 24 hours after exposure.The repeated treatment did not induce cumulative effects, since animals treated daily for seven days showed the same pattern of behavioral response observed from the first day until the 7th day. In order to investigate the action of agonists and antagonists of A1 and A2A receptors and the influence of modulation on adenosine levels in antidepressant effects induced by MK-801, animals were pretreated with Caffeine, DPCPX, CPA, ZM 241385, CGS 21680, AMPCP, EHNA, dipyridamole, and NBTI before the exposure to MK-801 for 30 minutes. The nonselective adenosine receptor antagonist Caffeine (50 mg/kg) and the selective A1 adenosine receptor antagonist DPCPX (15 mg/kg) blocked the behavioral changes induced by MK-801. Dipyridamole (10 mg/kg), a selective inhibitor of nucleoside transport (NT), exacerbates the behavioral changes induced by MK-801. Dopamine receptor antagonists (sulpiride and SCH23390) did not induce changes on the behavioral alterations induced by MK-801. Our results have shown that the antidepressant effects induced by MK-801 in zebrafish are mediated by the activation by A1 adenosine receptor. / A depress?o ? uma doen?a grave, recorrente, caracterizada por anedonia, perda de interesse em atividades di?rias, dist?rbios do apetite e do sono, concentra??o reduzida e agita??o psicomotora. Os f?rmacos antidepressivos utilizados atualmente t?m um in?cio de a??o muito lento, com isso, surge a necessidade de tratamentos de a??o r?pida. Portanto, h? um interesse crescente em antagonistas de receptores NMDA como um alvo para o desenvolvimento de novos f?rmacos antidepressivos. Considerando-se que os sistemas purin?rgicos e dopamin?rgicos est?o envolvidos na ansiedade, sono e depress?o, caracterizamos o papel destas vias de sinaliza??o sobre os efeitos antidepressivos induzidos por MK-801, um antagonista NMDA, em peixe-zebra. Os animais tratados com MK-801 em doses de 5, 10, 15 e 20 ?M durante 15, 30 e 60 minutos apresentaram maior perman?ncia na ?rea superior do aqu?rio, em compara??o com o grupo controle, indicando um efeito antidepressivo induzido por este composto.Os animais tratados com MK-801 permaneceram at? 2 horas na parte superior do aqu?rio quando tratados com 5 ?M de MK-801 e 4 horas quando tratados com 20 ?M MK-801, retornando aos par?metros basais ap?s 24 horas de exposi??o. O tratamento repetido n?o induziu efeitos cumulativos, uma vez que os animais tratados diariamente durante sete dias apresentaram o mesmo padr?o de resposta comportamental observada desde o primeiro at? o dia 7? dia. Com o objetivo de investigar a a??o dos agonistas e antagonistas dos receptores A1 e A2A e a influ?ncia da modula??o dos n?veis de adenosina nos efeitos antidepressivos induzidos por MK-801, os animais foram pr?-tradados com cafe?na, DPCPX, CPA, ZM 241385, CGS 21680, AMPCP, EHNA, Dipiridamol e NBTI por 30 minutos antes da exposi??o ao MK-801. O antagonista n?o seletivo de receptores de adenosina cafe?na (50 mg/kg) e o antagonista seletivo do receptor A1 DPCPX (15 mg/kg) bloquearam as altera??es comportamentais induzido pelo MK-801.O Dipiridamol (10 mg/kg), um inibidor n?o seletivo do transportador de nucleos?deo (NT), exacerbou as altera??es comportamentais induzidos pelo MK-801. Os antagonistas dos receptores de dopamina (sulpirida e SCH23390) n?o apresentaram modifica??es nas altera??es comportamentais induzidas por MK-801. Os nossos resultados sugerem que o efeito antidepressivo induzido por MK-801 em peixe-zebra ? mediado principalmente pela ativa??o do receptor de adenosina A1.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-18T11:58:07Z No. of bitstreams: 1 468720 - Texto Completo.pdf: 6747791 bytes, checksum: dc8f03c538738774e24f74700ad72365 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-18T11:58:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 468720 - Texto Completo.pdf: 6747791 bytes, checksum: dc8f03c538738774e24f74700ad72365 (MD5) Previous issue date: 2015-03-03 / New animal models for neurodegenerative diseases study are necessary for the knowledge of molecular mechanisms and behavioral patterns involved on the progression of dementias as Alzheimer?s Disease (AD) as well as for new therapies development. We characterized four neurodegenerative approaches including: (1) ?-amyloid(1-42) peptide injection, one of the hallmark proteins of patients with AD. In this model, we observed that intra-ventricular brain injection of ?-amyloid soluble oligomers in 24hpf embryos caused an increase in tau phosphorylation followed by cognitive deficits at 5dpf, both results being reversed by Lithium treatment, a tau kinase (GSK-3?) inhibitor. (2) The inhibition of exon 8 splicing of Presenilin-1, protein responsible for the Amyloid Precursor Protein (APP) cleavage, was achieved using Morpholino oligonucleotides. This approach caused a dysfunction of Presenilin-1, characteristic of patients with the familiar form of AD, that disturbed cognitive behavior and caused morphological phenotype similar to the ones observed by modifications of Notch pathway. We also developed two transgenic animals, (3) one overexpressing through a heat-shock promoter the ?-amyloid protein. These animals when exposed to a temperature of 37?C activate the heat-shock protein expression and as a consequence amyloid-? protein, one of the hallmark proteins of AD. The second transgenic animal (4) we knocked-out the Appb gene using TALEN as a genetic manipulation technic. This model will provide a better understanding of Appb function during animal development and AD progression. Those four animal models include features suggesting that, when used separately or in combination, can hereafter elucidate those pathways interactions and clarify the cellular and molecular mechanism associated with cognitive deficits during Alzheimer?s disease progression. With these models we were able to characterize zebrafish as a potential animal model, not just for understanding the role of those proteins over neurodegenerative process, but also on their normal functions in the system. Besides that, zebrafish have been used for a few years in pharmacological tests, and the development of animal models for Alzheimer?s disease as ours, make this animal a robust model for development of new treatments for this and other diseases. / Novos modelos para o estudo de doen?as neurodegenerativas s?o necess?rios para a caracteriza??o dos mecanismos moleculares e comportamentais envolvidos na progress?o de dem?ncias como a Doen?a de Alzheimer (DA), al?m de serem importantes para a identifica??o de novos alvos com potencial terap?utico. Aqui caracterizamos quatro abordagens neurodegenerativas incluindo: (1) A inje??o do pept?deo ?-amil?ide(1-42), uma dos principais pept?deos alterados em pacientes com DA. Neste modelo observamos que a inje??o de olig?meros sol?veis de ?-amil?ide no ventr?culo cerebral de embri?es de 24hpf causou um aumento na fosforila??o da prote?na tau em res?duos de est?gios iniciais da DA acompanhados por d?ficit cognitivo aos 5dpf, ambos revertidos pelo tratamento com L?tio, inibidor da enzima GSK-3? que fosforila tau. (2) Realizamos tamb?m a inibi??o do splicing do ?xon 8 da prote?na Presenilina-1, membro do complexo gama-secretase que ? respons?vel pela clivagem da Prote?na Precursora do Amil?ide (APP), atrav?s do bloqueio com oligonucleot?deos Morfolinos. Esta abordagem causou uma altera??o na funcionalidade da Presenilina-1, caracter?stica de pacientes com a forma familiar da DA, comprometendo a cogni??o dos animais e ocasionando altera??es morfol?gicas similares ?s causadas pela modifica??o da via Notch. Tamb?m realizamos a produ??o de dois animais transg?nicos, o primeiro (3), superexpressando a prote?na ?-amil?ide atrav?s de um promotor heat-shock. Estes animais quando expostos a uma temperatura de 37?C ativam a express?o das prote?nas heat-shock e por consequ?ncia a express?o da prote?na ?-amil?ide, que como dito anteriormente ? uma das principais altera??es em pacientes com a DA. O segundo (4), inibindo a express?o da APP atrav?s da t?cnica de manipula??o gen?tica utilizando TALEN. Este ultimo modelo ir? fornecer informa??es importantes sobre a participa??o desta prote?na durante desenvolvimento e a progress?o da DA. Estes quatro modelos abrangem caracter?sticas que sugerem que, quando usados separadamente ou em combina??o, poder?o contribuir tanto na elucida??o de mecanismos celulares e moleculares associados a d?ficits cognitivos quanto nas intera??es destas vias com a DA. A possibilidade de desenvolver modelos complementares com abordagens diversas em um mesmo organismo confirma o potencial do zebrafish n?o s? para o entendimento da participa??o destas prote?nas no processo neurodegenerativo mas tamb?m em suas fun??es normais no sistema nervoso.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-20T12:50:04Z No. of bitstreams: 1 469018 - Texto Completo.pdf: 1309740 bytes, checksum: 2aed89fbf06476e1b1522282c9325099 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-20T12:50:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 469018 - Texto Completo.pdf: 1309740 bytes, checksum: 2aed89fbf06476e1b1522282c9325099 (MD5) Previous issue date: 2015-02-18 / The ethanol exposure during early embryonic development can cause morphological and behavioral changes even when ingested in low doses. Growth retardation, microcephaly and mental retardation are some of the features observed in children with FAS (fetal alcohol syndrome) whose mothers ingested ethanol during pregnancy. The mechanisms by which ethanol affects embryonic development and cause such changes have not been fully elucidated. The increase in the extracellular adenosine levels after chronic and acute exposure to ethanol indicates that the purinergic system has an important role in this situation. Adenosine is a neuromodulator that acts through the activation of metabotropic receptors type P1 (A1, A2A, A2B and A3) and can act as an endogenous neuroprotector. In the extracellular space, adenosine can be produced by sequential hydrolysis of adenosine triphosphate (ATP) held by ectonucleotidases, a cascade of a family of enzymes located on the cell surface, which the key process to hydrolyze to adenosine is performed by ecto-5'-nucleotidase. The use of zebrafish in toxicology studies and development offers a number of advantages. Its size and breeding allow the maintenance of a large quantity of fish in a relatively small space. The production of a large number of eggs and the development occurs rapidly, and progresses through well-defined steps. Recent studies have employed the zebrafish as a model for fetal alcohol syndrome and demonstrated that embryonic exposure to ethanol results in phenotypes comparable to those observed in other vertebrate models. The objective of this study was to evaluate the role of adenosine metabolism in the morphological and locomotor parameters of zebrafish larvae exposed to ethanol. The results showed that in addition to morphological damage already known, there is a change in the enzymatic activity of ecto-5'-nucleotidase in larvae of seven days, in both treatments, acute and chronic, independent of gene expression form, which in time was not changed. Pre-treatment with AOPCP, an inhibitor of ecto-5'- nucleotidase, was unable to prevent the morphological damage in a relevant way, although statistically there was a slight prevention. Pre-treatment with dipyridamole, an adenosine transport blocker further worsened the effects caused by ethanol. Considering the changes that occur in extracellular levels of adenosine after exposure to ethanol and the involvement of the purinergic system in early stages of development, our results suggest that there is a combined action of the enzyme ecto-5'-nucleotidase and nucleoside transporters in this rising of extracellular adenosine levels, with emphasis on the inhibition of nucleoside transporters. Additionally, we can infer that there is a correlation between elevated levels of adenosine and morphological defects after exposure to ethanol. These results suggest that the purinergic system is a target for the toxic effects induced by ethanol in the early stages of development. / A exposi??o ao etanol durante as fases iniciais de desenvolvimento embrion?rio pode causar altera??es morfol?gicas e comportamentais, mesmo quando ingerido em baixas doses. Retardo no crescimento, microcefalia e retardo mental s?o algumas das caracter?sticas observadas em crian?as portadoras da SAF (s?ndrome alco?lica fetal), cujas m?es ingeriram etanol durante a gesta??o. Os mecanismos pelos quais o etanol afeta o desenvolvimento embrion?rio e causa tais altera??es ainda n?o foram completamente desvendados. O aumento extracelular da adenosina ap?s exposi??es cr?nicas e agudas ao etanol indica que o sistema purin?rgico tem um importante papel nesses mecanismos. A adenosina ? um neuromodulador que atua atrav?s da ativa??o de receptores metabotr?picos do tipo P1 (A1, A2A, A2B e A3) e pode agir como um neuroprotetor end?geno. No espa?o extracelular, a adenosina pode ser produzida pela hidr?lise sequencial da adenosina trifosfato (ATP) realizada pela cascata das ectonucleotidases, uma fam?lia de enzimas localizada na superf?cie celular, sendo o processo chave ? hidr?lise da adenosina monofosfato (AMP) ? adenosina ? realizada pela ecto-5?- nucleotidase. A utiliza??o do peixe-zebra em estudos toxicol?gicos e de desenvolvimento oferece uma s?rie de vantagens. Seu tamanho e a forma de cria??o permitem a manuten??o de uma grande quantidade de peixes em um espa?o relativamente pequeno. O cruzamento resulta em um grande n?mero de ovos e o desenvolvimento ocorre rapidamente, e progride atrav?s de etapas bem definidas. Estudos recentes t?m empregado o peixe-zebra como modelo para a s?ndrome alco?lica fetal e demonstrado que a exposi??o embrion?ria ao etanol resulta em fen?tipos compar?veis com aqueles observados em outros modelos vertebrados. O objetivo deste estudo foi avaliar o papel do metabolismo da adenosina nos par?metros morfol?gicos e locomotores de larvas de peixe-zebra expostas ao etanol. Os resultados obtidos demonstraram que al?m dos danos morfol?gicos j? conhecidos, h? altera??o na atividade enzim?tica da ecto- 5?-nucleotidase em larvas de 7 dias, em ambos os tratamentos, agudo e cr?nico, de uma forma independente da express?o g?nica, que por sua vez, n?o foi alterada. O tratamento pr?vio com AOPCP, um inibidor da ecto-5?-nucleotidase, n?o foi capaz de prevenir os danos morfol?gicos de forma relevante, embora estatisticamente verificou-se uma leve preven??o. O pr?-tratamento com dipiridamol, um bloqueador do transporte de adenosina, piorou ainda mais os efeitos causados pelo etanol. Considerando as mudan?as que ocorrem nos n?veis extracelulares de adenosina ap?s exposi??es ao etanol e o envolvimento do sistema purin?rgico em est?gios iniciais do desenvolvimento, nossos resultados sugerem que existe uma a??o combinada da enzima ecto-5?-nucleotidase e dos transportadores de nucleos?deos nesta eleva??o dos n?veis extarcelulares de adenosina, com ?nfase na inibi??o dos transportadores de nucleos?deos. Adicionalmente, podemos inferir que h? uma correla??o entre a eleva??o dos n?veis de adenosina e os defeitos morfol?gicos caracter?sticos da exposi??o ao etanol. Tais resultados sugerem que o sistema purin?rgico ? um alvo para os efeitos t?xicos induzidos pelo etanol nas fases iniciais do desenvolvimento.