A dislipidemia é geralmente caracterizada pela presença de níveis alterados e/ou elevados de colesterol total plasmático, LDL, triglicerídeos e de HDL. Em muitos casos, a dislipidemia está também associada à obesidade, embora o indivíduo possa apresentar alterações de colesterol sem ser obeso. São encontrados na literatura trabalhos clínicos que mostram uma clara relação entre doença periodontal e dislipidemia, sendo essa relação também demonstrada em outras situações de inflamação e infecção. No entanto, embora existam sugestões de que a relação inversa também possa ser verdade, algumas limitações observadas nos estudos não nos permitem assegurar que a doença sistêmica (dislipidemia) poderia estar alterando a resposta inflamatória (doença periodontal). Sendo assim o objetivo do presente trabalho foi avaliar o comportamento do epitélio gengival e a resposta inflamatória em ratos wistar, em condição de dislipidemia experimental. A dislipidemia foi induzida pela adição de colesterol à ração dos animais, e a inflamação local induzida por aplicação de LPS (lipopolissacarídeo bacteriano- E. coli). Foram avaliados fatores locais (infiltrado inflamatório na região gengival) e aspectos sistêmicos (níveis séricos de mediadores da resposta inflamatória IL-6, IL-1β e TNF-α, e proteínas envolvidas na regulação da resposta inflamatória: SLPI e leptina). Nos animais com dislipidemia os resultados da análise histológica mostraram um aumento dos parâmetros inflamatórios (edema, infiltrado inflamatório, pavimentação leucocitária e hiperemia), principalmente na 4°semana de aplicação do LPS. As citocinas analisadas e a leptina, moléculas pró-inflamatórias, estavam mais elevadas nos animais com dislipidemia, já o SLPI, envolvido na redução do dano causado pela inflamação, estava reduzida nesses animais em relação aos animais sem dislipidemia que também receberam aplicações de LPS. Diante de nossos resultados, concluímos que a dislipidemia pode alterar a resposta inflamatória à infecção. / Dyslipidemia is characterized by elevated or altered levels of plasma total cholesterol, LDL, HDL and triglycerides. In many cases, dyslipidemia is associated with obesity, although individuals may present altered levels of cholesterol without being obese. Studies have shown an interrelationship between periodontal disease and dyslipidemia. There are, in the literature studies showing a clear relationship between periodontal disease and dyslipidemia, which is also demonstrated in other situations of inflammation and infection. However, although there are suggestions that the inverse relationship can also be true, some limitations observed in the studies did not allow us to ensure that systemic alteration (dyslipidemia) could be influencing the inflammatory response (periodontal disease). Therefore, the objective of this study was to evaluate the behavior of the gingival epithelium and inflammatory response in wistar rats under conditions of experimental dyslipidemia. Dyslipidemia was induced by increasing the amount of cholesterol in the diet of animals, and local inflammation was induced by the application of LPS (E-coli lipopolissacarídeo). We assessed local factors (inflammatory infiltrate in the gingival area), and systemic aspects (inflammatory mediators levels as IL-6, IL-1β and TNF-α) and the plasma levels of proteins involved in the regulation of inflammatory response (SLPI and leptin). In animals with dyslipidemia histopathological analysis showed an increased level of inflammatory parameters (edema, inflammatory infiltrate, leukocyte margination and hyperemia), particularly in the 4th week after LPS application. Cytokines and leptin presented higher plasma levels in animals with dyslipidemia, but SLPI, considered a molecule involved in tissue protection, mostly in situations of inflammation or infection, was reduced in these animals compared to their controls. Our results allow us to conclude that dyslipidemia may alter the inflammatory response to infection.

Os tecidos periodontais estão em confronto contínuo com microrganismos capazes de disparar mecanismos da resposta imune inata, dando origem ao infiltrado inflamatório neutrofílico. A participação dos receptores tipo Toll (TLRs) na resposta de neutrófilos frente à periodontopatógenos associados à doença periodontal precisam ser determinados. Nesse estudo procuramos caracterizar o infiltrado inflamatório presente no peritônio de animais deficientes de TLR2-/-, avaliar a atividade fagocítica, bem como a produção de óxido nítrico (NO) e a atividade de mieloperoxidase (MPO) no curso da infecção por Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa). Os resultados revelaram um menor recrutamento de leucócitos para o peritônio de animais deficientes de TLR2 (TLR2-/-), com predomínio de macrófagos no exsudato peritoneal tanto de animais selvagens (WTTLR2-/-) como nos animais nocautes. A análise da atividade fagocítica revelou uma menor taxa de fagocitose pelas células do exsudato de animais TLR2-/- e, ainda, a deficiência do receptor TLR2 inibiu a produção de NO (óxido nítrico) e aatividade de MPO (mieloperoxidase). Adicionalmente, são apresentados os resultados referentes ao protocolo de doença periodontal experimentalmente induzida (DPEI) com Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) em camundongos deficientes de TLR2. Os resultados mostraram que 100% dos animais deficientes de TLR2 sobreviveram à infecção durante o período de observação. Em relação à análise de perda óssea os dados revelaram uma maior perda progressiva de osso alveolar na região dos molares de animais deficientes de TLR2. A ausência do receptor interferiu com a disseminação da bactéria, uma vez que se observou um grande número de bacilos no linfonodo e baço dos animais que não expressaram TLR2, diferente do observado para os animais selvagens (WTTLR2-/-). Os resultados indicam a importância da sinalização via TLR2 durante a resposta imune contra Aggregatibacter actinomycetemcomitans. / Polymorphonuclear leukocytes (PMNs) are the first line of defense against bacterial infections. PMNs express a numerous pattern-recognition receptors (PRR) that facilitate identification of invading microorganisms. Toll-like receptors (TLRs) represent the main class of PRR involved to a recognize pathogenic microorganism. However, the role played by TLR-2 in the recognition and killing of Aggregatibacter actinomycentemcomitans by PMNs is unknown. Thus, we investigated the ability of TLR-2 to mediate neutrophil phagocytosis and bactericidal activity. To determine the role of A. actinomycentemcomitans in triggering neutrophil infiltration, TLR2-/- mice were infected intraperitoneally (2x109 bacteria) and sacrificed after 24 hours. Peritoneal inflammatory cells were isolated and analyzed by optical microscopy. Examination of local inflammatory infiltrates revealed that neutrophil influx into peritoneal cavity of TLR2-/- mice was similar than that observed into their littermate controls wild type C57BL/6 mice (WT). A. actinomycentemcomitans was detected in the spleen of the TLR2-/- mice but not in WT. In the phagocytic assays, TLR2-/- presented minor number of ingested inflammatory cells than WT. Peritoneal cells were stimulated with A. actinomycetemcomitans antigens, and NO and myeloperoxidase was measured after 48 hours; results showed that TLR2-/- cells produce less NO and MPO than WT. In addition, TLR2-/- deficient mice presented higher bone loss following oral infection with A. actinomycetemcomitans when compared with WT and higher tissue destruction.

Orientador: Jose Francisco Hofling / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-05T03:02:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barros_LetiziaMonteiro_D.pdf: 1457309 bytes, checksum: df3cfd98d740cdfc928e9c7b1e4a3c89 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Candida spp. são leveduras oportunistas, que habitam a cavidade bucal de uma proporção significativa da população saudável. Entretanto, sob condições predisponentes, podem provocar candidose bucal. Foram avaliados 53 pacientes com diagnóstico de periodontite, porém saudáveis sistemicamente, com o objetivo de verificar a ocorrência destes microrganismos em 3 sítios distintos: bolsa periodontal, sulco gengival e mucosa bucal. As amostras foram semeadas em meio cromogênico seletivo, e a identificação de C. albicans e C. dubliniensis foi feita por PCR. Vinte e um pacientes (39,6%) foram positivos para Candida spp. Não houve diferença significativa na freqüência de colonização entre os gêneros (teste , p= 0,5922), ou entre os sítios (teste , p= 0,1287). Entretanto, as bolsas periodontais foram mais densamente povoadas (UFC/mL) do que os outros sítios (teste ANOVA, p=0,0319), podendo ser consideradas, assim, um bom reservatório para estas leveduras. C. albicans, foi a espécie prevalente, em relação às demais (teste exato de Fischer; p=0,0088). C. dubliniensis ocorreu em um paciente, nas bolsas periodontais. A diversidade genética de C. albicans e C. dubliniensis foi analisada pelo método de RAPD, utilizando dois primers arbitrários (OPA-03 e AP-03), sendo detectados 16 tipos eletroforéticos distintos entre os 156 isolados de C. albicans e de um tipo eletroforético entre os três isolados de C. dubliniensis. Não houve diferença significativa entre os sítios (teste ANOVA, p=0,6431), nem entre os gêneros (teste t de student, p=0,892), quanto à diversidade genotípica de C. albicans. Todos os isolados apresentaram atividade enzimática de aspartil proteinases (Saps) e de fosfolipases, podendo ser considerados, portanto, potencialmente patogênicos. A propagação sistêmica de linhagens potencialmente patogênicas de C. albicans e C. dubliniensis, assim como de outras espécies do gênero, poderia ser favorecida em determinados grupos populacionais, especialmente quando as bolsas periodontais se apresentassem densamente colonizadas. Estudos longitudinais seriam necessários, para acessar o grau de manutenção dessas linhagens, em diferentes populações, incluindo a avaliação dos fatores de virulência e da susceptibilidade a agentes antifúngicos, bem como verificar a eficácia da terapia periodontal no controle e/ou eliminação dessas espécies da cavidade bucal / Abstract: Candida spp. are opportunistic yeasts that are able to inhabit the oral cavity of a high proportion of the healthy people. However, under predisponent condictions, Candida species are associated many forms of oral candidoses. A total of 53 patients with periodontitis, without systemic disease, were evaluated to verify the occurrence of this microorganism in three different sites: periodontal pocket, gingival sulci and oral mucosa. The samples were plated on chromogenic medium, and C. albicans and C. dubliniensis were identified by PCR Twenty-one volunteers (39.6%) were positive to Candida spp. in one or more sites. No statistical differences were detected between the genders, male or female ( , p= 0.5922), or sites ( , p= 0.1287). Periodontal pockets were more heavily populated (CFU/ml) than other sites (ANOVA, p=0.0319), so may be considered a yeast reservoir. It was found a higher prevalence of C. albicans compared to other species (Fischer test, p=0.0088). C. dubliniensis were recovered from the periodontal pocket from one patient. The genotypic diversity of Candida albicans and C. dubliniensis were analyzed by RAPD, using two arbitrarily primers (OPA-03 and AP-03), and 16 electrophoretic types were detected among 156 isolates of C. albicans and one electrophoretic type among three isolates of C. dubliniensis. There was no statistical difference among the analyzed sites (ANOVA, p=0.6431), neither between of gender (student t test, p=0.892) related with the genotypic diversity of C. albicans. All isolates showed enzymatic activity of aspartil proteinase (Saps) and phospholipase, so may be considered potentially pathogenic. Systemic propagation of commensal C. albicans, C. dublinienesis, and other species, would be favor in some population, especially in heavily populated periodontal pockets with Candida spp. Longitudinal studies must be done to establish the lineage maintenance in a different population and forms of periodontal disease, including the evaluation of virulence factors, antifungal susceptibility, and to assess the efficacy of different periodontal treatment to eliminate this species from the oral cavity / Doutorado / Microbiologia e Imunologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

Orientadores: Norair Salviano dos Reis, Antonio de Azevedo Barros Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T02:20:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guilherme_ArmandoJoseVenturi_M.pdf: 3870471 bytes, checksum: a528b13bc51100e1fb5739da61756961 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Objetivo ¿ Avaliar o ligamento periodontal sob o efeito do hipotireoidismo induzido agudamente. Métodos ¿ Foram utilizados 40 ratos wistar, que foram divididos em 2 grupos de 20 animais cada. O primeiro grupo denominado tratado, ou seja, foi induzido ao hipotireoidismo pela administração de metimazol 5 mg/100ml na água de bebida à vontade e o segundo de controle, onde não foi administrado o metimazol. A condição da tiróide foi avaliada por dosagens de T4 no plasma, pelo método de eletroquimioluminescência, de sangue colhido da veia da cauda. Cada grupo foi subdividido em impedido e desimpedido quanto ao processo de erupção e novamente subdivido, em relação a eutanásia e coleta do material, em 21 e 28 dias. Como o rato, apresenta o crescimento contínuo dos incisivos inferiores, o desimpedimento foi efetuado sob efeito anestésico através do corte do incisivo inferior esquerdo em nível da papila interdental a cada dois dias, esse processo de corte leva a erupção acelerada do dente. No 21º e 28º dia procedeu-se a eutanásia por indução anestésica e a coleta de material para análise histológica qualitativa e quantitativa onde foram tomados como parâmetros a celularidade; quantidade e aspectos das fibras colágenas e espaços vazios. Resultados ¿ A análise qualitativa do material histológico revelou diferenças entre todos os grupos. Com relação a análise quantitativa, houve diferença estatisticamente significativa com relação ao número de fibroblastos na região 5 entre os grupos controle impedido e tratado desimpedido, com relação ao espaço vazio, a diferença ocorreu entre grupos controle desimpedido e tratado desimpedido. Quando avaliada a condição de erupção acelerada foram encontradas diferenças significativas entre os grupos controle impedido e controle desimpedido, e não foram encontradas diferenças entre os grupos tratado impedido e tratado desimpedido, demonstrando assim que o hipotireoidismo é uma condição sistêmica que inibe ou minimiza os efeitos do desimpedimento na aceleração da erupção dental. Conclusão - Todos os grupos apresentaram diferenças morfológicas quando observados à microscopia. As alterações encontradas são mais dependentes da capacidade funcional das células envolvidas do que do aumento ou diminuição das mesmas. Os efeitos do hipotireoidismo parecem impedir ou minimizar os efeitos do desimpedimento no estímulo do aumento de velocidade de erupção dental / Abstract: Objective ¿ Evaluate the periodontal ligament under the effect of the acutely induced hypothyroidism. Methods ¿ It was used 40 Wistar rats, which were separated in 2 groups of 20 animals each. The first group called 'treated¿, that is, was induced to the hypothyroidism by the administration of methymazole 5 mg/100ml in the drinking water at will and the second one called 'control¿ in which it was not administered the methymazole. The thyroid condition has been evaluated by dosages of T4 in plasma, by the method of electrochemoluminescence of blood collected from the tail¿s vain. Each group has been subdivided in impeded and unimpeded in relation to the eruption process and again subdivided, in relation to the euthanasia and collection of the material, in 21 and 28 days. As the rat presents the continuous grouth of the inferior incisors, the umpededing has been done under anesthetic effect by the cut of the left inferior incisor at the level of the interdental papillae each two days, this process of cut takes to the accelerated eruption of the tooth. In the 21st and 28th days it was done the euthanasia by anesthetic induction and the collection of material qualitative and quantitative histological analysis in which it was taken as parameters the cellularity; quantity and aspects of the collagen fibers and empty spaces. Results ¿ The qualitative analysis of the histological material has revealed differences among all the groups. Concerning to the quantitative analysis, there was difference statistically significant in relation to the number of the fibroblasts in region 5 between the impeded control and unimpeded treated groups, concerning to the empty space, the difference happened between the impeded control and unimpeded treated groups. When evaluated the condition of accelerated eruption it was found significant differences between the impeded control and unimpeded control groups, and it was not found differences between the impeded treated and unimpeded treated groups, showing this way that the hypothyroidism is a systemic condition that inhibits or minimizes the effects of the unimpeded in the acceleration of the dental eruption. Conclusion - All the groups have presented morphological differences when observed the microscopy. The alterations found are more dependent of the functional capacity of the involved cells than the increase or decrease of them. The effects of the hypothyroidism seem to inhibit or minimize the effects of the unimpeded in the stimulus of the increase of dental eruption speed. / Mestrado / Pediatria / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Orientadores: Pedro Duarte Novaes, Marcelo Rocha Marques / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-13T11:15:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vasconcelos_DanielFernandoPereira_D.pdf: 3147772 bytes, checksum: f14ddeae900959b567ea4b605c927b8b (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A administração intermitente de hormônio paratireóideo (PTH) é capaz de promover anabolismo ósseo, favorecendo a neoformação óssea em condições como osteoporose e reparo de fraturas. Sabendo-se que tanto os tecidos ósseos mandibulares e alveolares como os tecidos periodontais podem responder à administração de PTH de forma intermitente, o objetivo deste estudo foi avaliar histomorfometricamente o efeito da administração de PTH (1-34) em um modelo de defeito periodontal, do tipo fenestrado, na mandíbula de ratos. Foram utilizados neste estudo 32 ratos Wistar machos, com o objetivo de expor a região vestibular da raiz distal do primeiro molar inferior direito. A criação do defeito possibilitou a remoção parcial de ligamento periodontal e do cemento dentário. Após a cirurgia os animais foram separados aleatoriamente em 4 grupos (n=8): Grupo C14: administração intermitente (3 vezes por semana) do veículo de diluição do PTH por 14 dias; Grupo P14: administração intermitente de PTH (1-34) por 14 dias; Grupo C21: injeções intermitentes do veículo de diluição do PTH por 21 dias; Grupo P21: injeções intermitentes de PTH por 21 dias. Os animais foram mortos e preparados para avaliação histomorfométrica dos seguintes parâmetros: I - extensão inicial do defeito, II - extensão do defeito remanescente, III - área do defeito ósseo remanescente, IV - densidade do osso neoformado, V - área do calo formado e marcação para TRAP, VI - área do cemento neoformado, VII - análise do retardo óptico (birrefringência) do ligamento periodontal reinserido sobre a raiz operada. A análise intergrupo demonstrou que os defeitos tinham tamanhos similares inicialmente e que a administração de PTH reduziu significativamente (p<0,05) a extensão e a área do defeito remanescente. Além disso, o PTH aumentou significativamente (p<0,05) a densidade do osso neoformado, a área do calo, o número de osteoclastos presentes no calo formado, a área de cemento neoformado e a birrefringência do ligamento periodontal reinserido. Conclui-se que a administração intermitente de PTH (1-34), em modelo experimental de reparo em de ratos, pode influenciar positivamente o processo de reparação óssea e periodontal. / Abstract: The intermittent PTH administration is known to contribute to bone formation in cases of osteoporosis and bone fractures. Also, it has been reported to reduce periodontitis-related bone loss. The aim of this study was to evaluate the effect of anabolic PTH on periodontal repair and mandibular bone defect in rats. Fenestration defects were created unilaterally at the buccal surface of distal roots of lower first molars in Wistar rats (n=32), and both periodontal ligament and cementum were removed. Animals were then assigned to 4 groups (n=8): 1) C14 - placebo administration for 14 days; 2) P14 - PTH administration for 14 days; 3) C21 - placebo administration for 21 days; and 4) P21 - PTH administration for 21 days. All groups were treated intermittently (3 times a week). All animals were killed and prepared to histomorphometric analysis considering the following parameters: I - extension of the initial defect; II - extension of the remaining defect; III - area of the remaining defect; IV - density of neoformed bone; V - total callus area and staining for tartrate-resistant acidic phosphatase (TRAP); VI - area of the neoformed cementum; VII - polarized light microscopic analysis of root periodontal ligament reattachment. Intergroup analysis showed that the bone defects were initially similar in size (p>0.05). The intermittent PTH administration decreased (p<0.05) both extension and area of the remaining defect, and increased (p<0.05) the neoformed bone density and the total callus area. An increase in TRAP-positive cells was observed in the PTH treated groups (p<0.05). The area of the neoformed cementum and reattachment of the periodontal ligament were also observed to increase concerning PTH-treated groups (p<0.05). Data analysis suggests that the intermittent PTH administration might contribute to bone and periodontal repair in rats. / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

A biomodificação radicular empregando ácido cítrico tem sido utilizada visando à reinserção dos tecidos periodontais a raízes expostas à doença periodontal. Entretanto, a grande diversidade metodológica entre os estudos ainda não possibilitou o estabelecimento de um protocolo amplamente aceito quanto à concentração e tempo de aplicação do ácido. Assim, 32 dentes extraídos por doença periodontal avançada forneceram 63 fragmentos radiculares que, após raspagem manual, foram divididos nos seguintes grupos de tratamento: Grupo AC-10-90: desmineralização com ácido cítrico a 10% em pH 1, durante 90 segundos; Grupo AC-10-120: desmineralização com ácido cítrico a 10% em pH 1, durante 120 segundos; Grupo AC-10-180: desmineralização com ácido cítrico a 10% em pH 1, durante 180 segundos; Grupo AC-50-90: desmineralização com ácido cítrico a 50% em pH 1, durante 90 segundos; Grupo AC-50-120: desmineralização com ácido cítrico a 50% em pH 1, durante 120 segundos; Grupo AC-50-180: desmineralização com ácido cítrico a 50% em pH 1, durante 180 segundos; Grupo C (controle): lavagem com soro fisiológico. Sobre as superfícies tratadas foram cultivados fibroblastos do ligamento periodontal humano por 24, 48 e 72 horas. A ampliação dos túbulos dentinários, morfologia celular e a porcentagem das superfícies radiculares recobertas por células foram avaliadas em microscopia eletrônica de varredura. As imagens microscópicas das superfícies recobertas por células foram comparadas pelo teste não paramétrico de Kruskal-Wallis seguido pelo teste de Dunn e na ampliação dos túbulos pelo teste de variância a dois critérios (ANOVA) complementado pelo teste de Tukey, em 5% de significância, ambos realizados por um programa computadorizado comparando os resultados entre os grupos. A Com exceção do grupo C, em todos os grupos houve aumento crescente da cobertura da superfície radicular por fibroblastos com o tempo. A maior área de cobertura foi apresentada pelo grupo AC-10-90 (98,82±2,57%) às 24 horas e essa diferença foi significante (p<0,001) em comparação aos grupos AC-50-90 (64,94±20,60%), AC-50-180 (56,59±35,42%) e C (0,06±0,24%). Nas demais comparações de tempo de aplicação e tempo de cultura, predominou a superioridade dos grupos tratados por ácido cítrico a 10% sobre os de 50%, porém, sem significância estatística. Todos os grupos teste foram significantemente superiores aos controle em todos os tempos de cultura. O menor valor médio para o diâmetro dos túbulos dentinários expostos pelos tratamentos foi apresentado pelo grupo AC-10-90 (4,55±0,69 &#x3BC;m) que diferiu significantemente (p<0,001) dos grupos AC-10-120 (5,33±0,95 &#x3BC;m), AC-10-180 (5,54±1,56 &#x3BC;m) e AC-50-180 (5,56±1,22 &#x3BC;m). Esse último apresentou a maior ampliação, porém sem diferença significante em relação aos demais grupos. Os fibroblastos apresentaram-se mais espalhados, achatados e com menor definição de limites nos grupos tratados com ácido cítrico a 10% do que nos de 50%, cujas células apresentavamse fusiformes e arredondadas. Concluiu-se que o ácido cítrico a 10% por 90 segundos produziu superfície mais favorável à proliferação celular com características morfológicas de estágios mais avançados de diferenciação e área de cobertura superficial por fibroblastos mais extensa no período inicial de cultura do que na concentração de 50%. A ampliação dos túbulos dentinários pareceu não influenciar a cobertura superficial por fibroblastos. Estudos subsequentes devem investigar a influência das propriedades químicas do agente biomodificador radicular para contribuir para a elucidação das diferenças produzidas no comportamento celular. / The root biomodification employing citric acid has been used in order to reattach periodontal tissues to root surface exposed to periodontal disease. However, the methodological diversity among studies has not allowed the establishment of a widely accepted protocol as the concentration and time of acid application. Thus, 32 teeth were extracted due to advanced periodontal disease, so that 63 root fragments were provided. After scaling and root planning, the fragments were divided into the following treatment groups : AC-10-90 group: demineralization with 10% citric acid at pH 1 for 90 seconds; AC-10-120 group: demineralization with 10% citric acid at pH 1 for 120 seconds; AC-10-180 group: demineralization with 10% citric acid at pH 1 for 180 seconds; AC-50-90 group: demineralization with 50% citric acid at pH 1 for 90 seconds; AC-50-120 group: demineralization with 50% citric acid at pH 1 for 120 seconds; AC-50-180 group: demineralization with 50% citric acid at pH 1 for 180 seconds; group C (control) : rinsing with saline solution. On the treated surfaces, fibroblasts from human periodontal ligament were cultured by 24, 48 and 72 hours. The enlargement of the dentinal tubules, cell morphology and the percentage of root surface covered by cells were evaluated by scanning electron microscopy. Those microscopic images from the root surfaces covered by cells were compared by the nonparametric Kruskal-Wallis test followed by Dunn\'s test and the enlargement of tubules by two variance (ANOVA) complemented by the Tukey test, both performed by a computer program comparing the results between the groups, at 5% significance. With the exception of group C, all groups showed increasing coverage of the root surface by fibroblasts over time. The largest area of coverage was presented by AC-10-90 (98.82±2.57%) at 24 hours and this difference was significant (p <0.001) compared to AC-50-90 (64.94±20.60%), AC-50-180 (56.59±35.42%) and C (0.06±0.24%). In other comparisons the application time and culture time groups treated with citric acid at 10% were superior to groups of 50%, without statistical significance. All test groups were significantly better than the control ones at all times of culture. The shortest average diameter of dentinal tubules exposed by the treatments was presented by AC-10-90 (4.55±0.69 &#x3BC;m) group that differed significantly (p<0,001) from AC-10-120 (5 groups 33±0.95 &#x3BC;m), AC-10-180 (5.54±1.56 &#x3BC;m) and AC-50-180 (5.56±1.22 &#x3BC;m). This last showed the highest enlargement, but without significant difference compared to the other groups. The fibroblasts were more spread, flattened and had less identifiable limits in the groups treated with citric acid 10% than those in 50% which cells had become rounded and spindle. It was concluded that the demineralization with 10% citric acid for 90 seconds produced more favorable surface to cell proliferation, more morphological characteristics of later stages of differentiation and larger surface area coverage by fibroblasts in the initial periods of culture than any of the groups treated with 50% citric acid. The enlargement of dentinal tubules did not seem to influence the surface coverage by fibroblasts. Subsequent studies should investigate the influence of the chemical properties of the root conditioner agent on the root surfaces in order to contribute to the elucidation of the differences produced in the cell behavior.

A periodontite é uma doença bucal infecto-inflamatória resultante da quebra da homeostase entre biofilme dentário e o hospedeiro. Diversos estudos tem mostrado que a obesidade e o sobrepeso são importantes fatores de risco para o desenvolvimento da doença periodontal. O tecido adiposo representa um reservatório de mediadores inflamatórios. A chemerin é uma adipocina secretada pelo tecido adiposo e atua em numerosos processos fisiológicos, como metabolismo, proliferação e diferenciação celular. Levando em consideração que alterações de adiposidade, observadas por medidas antropométricas, estão relacionadas com maior incidência de periodontite, e que chemerin, uma citocina produzida por adipócitos, está envolvida na resposta inflamatória, nota-se uma lacuna na literatura que correlacione o papel de chemerin na progressão da doença periodontal. Portanto, o presente projeto tem como objetivo avaliar a participação da adipocina chemerin no desenvolvimento da doença periodontal em camundongos hiperlipidêmicos e avaliar o efeito desta adipocina sobre a diferenciação e ativação de células ósseas. No estudo in vivo, os animais foram submetidos ao modelo experimental de hiperlipidemia e/ou periodontite e divididos em 4 grupos: Grupo I: camundongos controle. Grupo II: camundongos controle infectados pela Porphyromonas gingivalis (Pg). Grupo III: camundongos hiperlipidêmicos não infectados. Grupo IV: camundongos hiperlipidêmicos infectados pela Pg. As amostras foram coletadas depois de 15, 30 e 60 dias. No estudo in vivo, o modelo de dieta hiperlipidêmica adotado foi eficaz em aumentar os níveis circulantes de colesterol e chemerin, embora não tenha alterado o peso dos animais. Observa-se ainda maior adiposidade corporal mostrada pelo aumento de peso dos tecidos adiposos retroperitoneal e epididimal dos animais hiperlipidêmicos. Na análise morfométrica foi observada uma maior perda óssea no grupo hiperlipidêmico quando comparado ao controle e essa perda óssea foi semelhante ao observado no animal infectado por Pg. Foi observado que a expressão de chemerin na gengiva e plasma se correlacionam com marcadores de osteoclastos no tecido gengival e com a reabsorção alveolar. No estudo in vitro, foi observado que chemerin leva à maior formação de depósitos mineralizados em cultura de osteoblastos e maior reabsorção óssea em cultura de osteoclastos. Conclui-se que a hiperlipidemia provoca reabsorção óssea alveolar semelhante ao observado com infecção oral com P. gingivalis. Chemerin participa da reabsorção óssea alveolar visto que os níveis desta adipocina na gengiva e plasma se correlacionam com marcadores de osteoclastos no tecido gengival e com a reabsorção alveolar. Chemerin aumenta atividade de osteoblastos e osteoclastos in vitro. / Periodontitis is an infectious inflammatory oral disease resultant from the breaking of homeostasis between biofilm and the host. Several studies have shown that overweight and obesity are major risk factors for the development of periodontal disease. Adipose tissue is a reservoir of inflammatory mediators. The chemerin is an adipokine secreted by adipose tissue and acts in numerous physiological processes, such as metabolism, proliferation and differentiation. Considering that adiposity changes, observed by anthropometric measurements, are related to higher incidence of periodontitis, and chemerin, a cytokine produced by adipocytes, is involved in the inflammatory response, there is a gap in the literature that correlates the paper chemerin in the progression of periodontal disease. Therefore, this project aims to evaluate the participation of chemerin adipokine in the development of periodontal disease in hyperlipidemic mice and evaluate the effect of this adipokine on the differentiation and activation of bone cells. In the in vivo study, the animals underwent to the experimental model of hyperlipidemia and / or periodontitis and divided into 4 groups: Group I: control mice. Group II: control mice infected with Porphyromonas gingivalis (Pg). Group III: hyperlipidemic mice not infected. Group IV: hyperlipidemic mice infected by Pg. Samples were collected after 15, 30 and 60 days. In the in vivo study, the model of hyperlipidemic diet adopted was effective in increasing circulating levels of cholesterol and chemerin, although it has not changed the weight of the animals. Greater body adiposity shown by the increased weight of the retroperitoneal and epididymal adipose tissues of hyperlipidemic animals was observed. In morphometric analysis, we observed an increased bone loss in hyperlipidemic group compared to the control and that this bone loss was similar to the observed in animals infected with Pg. It was observed that the gum chemerin expression and plasma correlate with markers of osteoclast in the gingival tissue and alveolar resorption. In the in vitro study, it was observed that chemerin leads to increased formation of mineralized deposits in cultured osteoblasts and increased bone resorption in osteoclast culture. It concludes that hyperlipidemia causes alveolar bone resorption similar to that observed on oral infection with P. gingivalis. Chemerin participates in alveolar bone resorption, at the levels of this adipokine gum and plasma correlate with osteoclast markers in gingival tissue and alveolar resorption. Chemerin increases osteoblast activity and osteoclasts in vitro.

Orientador: Pedro Duarte Novaes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-19T03:52:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Omar_NadiaFayez_D.pdf: 1979982 bytes, checksum: 2ca79a3afb3b73396fe8807889683960 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O ligamento periodontal (LP) é um tecido conjuntivo que ocupa o espaço entre o dente e seu alvéolo, e tem a função principal de ancoragem e suporte dos dentes. Baseados em dados na literatura que mostram que dentes em hipofunção são mais facilmente extraídos, investigamos qual(is) fatores e/ou moléculas poderiam ter relação com esse enfraquecimento da ancoragem do dente no osso por meio do LP. Dentre eles, investigamos a expressão de MMPs e TIMP-2, e organização do colágeno no LP, além da resistência que o LP oferece ao movimento eruptivo nos incisivos de ratos. Para isso, produzimos alteração na erupção de incisivos inferiores de ratos, durante períodos experimentais diferentes, produzindo hipofunção, hiperfunção e contenção do processo eruptivo, além da erupção normal; fazendo a medição da taxa de erupção em todos os grupos ao longo do período experimental. Os resultados mostraram que no grupo hipofuncional a atividade de MMP-2 e a desorganização do colágeno aumentaram, contribuindo para a diminuição da força de resistência ao movimento eruptivo e para o aumento da taxa de erupção neste grupo. No grupo contido, a erupção dos incisivos foi interrompida, porém a atividade de MMP-2 aumentou em níveis variados ao longo do período experimental, enquanto a organização do colágeno e, consequentemente, a força de resistência do LP ao movimento eruptivo foram levemente menores. Por outro lado no grupo hiperfuncional a taxa de erupção não sofreu alteração, mas a atividade de MMP-2 estava aumentada, juntamente com a força de resistência do LP ao movimento eruptivo, com leve desorganização do colágeno indicando, portanto, possíveis alterações em outras moléculas envolvidas no processo de remodelação da matriz extracelular no ligamento periodontal. As análises de MT1-MMP e TIMP-2, nas condições deste estudo, não mostraram diferenças estatísticas entre os grupos e períodos estudados. Esses dados sugerem papel da MMP-2 na remodelação do ligamento periodontal de incisivos de ratos, durante alterações na erupção, atuando diretamente sobre a degradação do colágeno, o que leva à alterações na resistência do ligamento ao movimento eruptivo, principalmente em hipofunção; e que MT1- MMP e TIMP-2 podem ter participação secundária neste processo / Abstract: The periodontal ligament (PL) is a tissue that occupies the space between tooth and its socket, and has main function to anchor and support the teeth. Based on published datas showing that hypofunctional teeth are more easily extracted, we investigated which one(s) factors and/or molecules could be related to the weakening of the periodontal ligament anchoring. We investigated the expression of MMPs and TIMP-2, collagen organization in the PL, and the resistance that the PL offers to the eruptive movement in rat incisors. Therefore, we altered the eruption of rat incisors, during different experimental periods, producing hypofunction, hyperfunction and restrain of the eruptive process, beyond the normal eruption, measuring the eruption rate, in all groups, throughout the experimental period. The results showed that in the hypofunctional group the MMP-2 activity and collagen disorganization increased, contributing to the decrease in the resistance strength to the eruptive movement and increased eruption rate in this group. In the restrain group, the incisor eruption was interrupted, but the MMP-2 activity increased, to varying degrees, throughout the experimental period, while the collagen organization and, thus, the resistance strength to the eruptive movement of the PL were slightly lower. On the other hand, in the hyperfunctional group the eruption rate did not change, but MMP-2 activity and PL resistance strength to eruptive movement were increased, with a slight collagen disorganization, indicating, therefore, possible changes in other molecules involved in the periodontal ligament extracellular matrix remodeling. Analyses of MT1-MMP and TIMP-2, under the conditions of this study, showed no statistical differences between groups and experimental periods. These data suggest the role of MMP-2 in periodontal ligament remodeling of rat incisors, during altered eruption, acting directly on collagen degradation, which leads to changes in PL resistance to the eruptive movement, in hypofunction condition, and MT1- MMP and TIMP-2 may have secondary participation in this process / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

Orientadores: Marcio Zaffalon Casati, Sergio de Toledo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T05:18:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zanatta_GuilhermeMenegaz_M.pdf: 1445889 bytes, checksum: 0fedbc30f301f1ad577e7698631e8f8d (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar um protocolo de tratamento periodontal, baseado no debridamento periodontal boca toda em estágio único, com ultra-som, associado ou não ao iodo polivinilpirrolidona (pvp-i). Foram utilizados 40 pacientes, de ambos os sexos, com pelo menos 8 dentes, distribuídos nas duas arcadas, com profundidade de sondagem maior ou igual a 5mm e presença de sangramento após a sondagem. Os pacientes foram divididos aleatoriamente em 3 grupos, com 15 pacientes, que receberam os seguintes tratamentos: grupo Tc = raspagem e alisamento radicular realizado por arcada, com curetas convencionais, sem limite de tempo, associado ao ultra-som e solução refrigerante de Cloreto de Sódio (NaCl) 0,9%; grupo Di = debridamento periodontal boca toda em estágio único, num tempo máximo de 45 minutos, com ultra-som, tendo como solução refrigerante pvp-i à 0,5% de iodo ativo; grupo D = debridamento periodontal boca toda em estágio único, num tempo máximo de 45 minutos, com ultra-som, tendo como substância refrigerante NaCl 0,9%. Na reavaliação de 3 meses, a redução média da profundidade de sondagem no grupo D foi de 2,58mm ± 0,6, no grupo Di foi de 2,54mm ± 0,50 e no grupo Tc ficou em 2,50mm ± 0,52. Na avaliação do nível clínico de inserção observou-se um ganho de 1,86mm ± 0,56 no grupo Tc, 1,95mm ± 0,70 no grupo Di e 2,00mm ± 0,92 no grupo D. Não houve diferença estatística, na análise intergrupo dos parâmetros clínicos, aos 3 meses de acompanhamento (p>0,05). Durante a análise da recessão gengival não se observou diferença significativa entre os grupos, apenas em relação aos períodos avaliados. A avaliação da atividade tipo tripsina do biofilme apresentou uma redução significativa apenas no primeiro mês (Tc= 4,03 ± 5,43; Di= 6,51 ± 4,83; D= 7,98 ± 5,97), não houve diferença intragrupo aos 3 meses (p=0,80). Esses achados revelaram que o debridamento periodontal boca toda em estágio único, com ultra-som, associado ou não ao pvp-i, mostrou ser capaz de restabelecer a saúde periodontal de pacientes portadores de periodontite crônica / Abstract: The aim of the present study was to evaluate the clinical effects of a single course of full mouth debridement with ultrasound associated to irrigation with 0.5% pvp-iodine in chronic periodontitis patients. Forty patients were randomly assigned into three groups: The CG group received quadrant root planning at intervals of one week over four consecutive sessions; the PD-PIG group received full mouth debridement with ultrasound associated to 0.5% pvp-iodine irrigation in 45 min; and the PDG group received full mouth debridement with ultrasound associated to NaCl irrigation in 45 min. At 3 month¿s reevaluation the mean PD reduction in CG group was 2.51 mm ± 0.52, 2.53 mm ± 0.50 in PD-PIG group and 2.58 mm ± 0.60 in PDG group. The CAL analysis showed a gain of 1.87 mm ± 0.56 (CG), 1.94 mm ± 0.70 (PD-PIG) and 1.99 mm ± 0.92 (PDG). When comparing baseline to 3-month reevaluation statistically significance was observed in PD reduction and CAL gains (p<0.05). BAPNA test did not show any statistically difference in plaque samples at 3 months when compared to baseline (p=0.80). These findings suggest that one-stage full-mouth debridement can obtain beneficial effects instead of short time treatment / Mestrado / Periodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Abstract In this study, associations between periodontitis expression, serum levels of inflammatory markers and genetic factors were investigated. The periodontal status of 56 subjects with chronic periodontitis, 28 control subjects and 80 subjects with type I diabetes mellitus (DM) was examined. In addition, a reference group (n=178) with genetic but not with periodontal health data was included. The single nucleotide polymorphisms of CD14 -260, IL-6 -174, TNF-α -308, IL-10 -1082, IL-1A -889, IL-1B +3954, and TLR4 +896 were determined using PCR with RFLP or allele-specific primers, and comparisons of the genotype frequencies were made between the study groups and reference subjects. The serum concentrations of IL-6 and sCD14 were assayed using ELISA. The distributions of all the studied genotypes were similar in the periodontitis and the reference subjects. However, in the periodontitis group, the carriage of the T-containing genotype of the CD14 -260 and the GG genotype of the IL-6 -174 associated significantly with the extent of periodontitis, indicating that genetic factors play a role in the pathogenesis of the disease. Both the extent of periodontal infection and the IL-6 -174 genotype were significant determinants for the serum IL-6 level, subjects carrying the GG genotype having significantly higher serum IL-6 levels than those carrying the CC/CG genotype. The serum level of sCD14 was significantly higher in subjects carrying the T-containing than the CC genotype of the CD14 -260 in the control group but not in the periodontitis group, suggesting that severe periodontal infection overshadows the influence of the genotype on serum sCD14 level. Overall, the serum studies indicated that periodontal infection is associated with a low-grade systemic inflammatory response. Type 1 DM subjects carrying the GG genotype of the IL-6 -174 had a higher extent of periodontitis when compared with those carrying the CG/CC genotype. Our results also suggest that the IL-6 -174 genotype is a more significant determinant of the extent of periodontitis in type 1 DM than glycemic control.