Submitted by MARIANE MAFFEI AZUMA null (mariane_azuma@hotmail.com) on 2017-10-17T00:34:59Z No. of bitstreams: 1 16-10-17 TESE-Mariane.pdf: 56309410 bytes, checksum: 029a387b6b6982b449c514285f1d5efc (MD5) / Approved for entry into archive by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com) on 2017-10-18T19:09:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 azuma_mm_dr_araca.pdf: 56309410 bytes, checksum: 029a387b6b6982b449c514285f1d5efc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-18T19:09:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 azuma_mm_dr_araca.pdf: 56309410 bytes, checksum: 029a387b6b6982b449c514285f1d5efc (MD5) Previous issue date: 2017-08-25 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da suplementação alimentar com os ácidos graxos ômega-3 no processo inflamatório local e sistêmico de ratos com periodontite apical (PA). Foram utilizados 40 ratos da linhagem Wistar distribuídos em quatro grupos (n= 10): ratos controle (C); ratos suplementados com ômega-3 (C-O); ratos com PA induzida (PA); ratos com PA induzida suplementados com ômega-3 (PA-O). Para a indução da PA, as polpas dentárias foram expostas ao meio bucal durante 30 dias. O ômega-3 foi administrado pelo método gavage, uma vez ao dia, 15 dias antes da exposição pulpar e 30 dias depois da exposição pulpar. Após este período, o sangue foi coletado, por meio de punção cardíaca, para a realização do hemograma e quantificação sérica das citocinas pró-inflamatórias fator de necrose tumoral alfa (TNF-), Interleucina 6 (IL-6) e Interleucina 17 (IL-17), pelo método ELISA. Após a coleta sanguínea, os ratos foram eutanasiados e as maxilas e mandíbulas foram coletadas e submetidas a processamento para análise histológica, em hematoxilina e eosina, bem como análise imunoistoquímica para os marcadores fosfatase ácida resistente ao tartrato (TRAP), osteocalcina (OCN), TNF-, IL-6, IL-17, Interleucina 1 (IL-1) e Interleucina 10 (IL-10). Os resultados foram analisados por testes estatísticos específicos para cada caso (p<0,05). O grupo PA apresentou infiltrado inflamatório mais intenso, bem como maior área de reabsorção óssea na região periapical quando comparado ao grupo PA-O (p<0,05). Além disso, observou-se maior número de osteoclastos e citocinas pró-inflamatórias, representadas por TNF-, IL-1, IL-6 e IL-17, bem como menor número de osteoblastos e da citocina anti-inflamatória IL-10 no grupo PA quando comparado ao grupo PA-O (p<0,05). Em relação às alterações sistêmicas, a presença de quatro focos de PA aumentou os níveis séricos de leucócitos, linfócitos, monócitos, TNF- e IL-6 (p<0,05) e a suplementação alimentar com os ácidos graxos ômega-3 diminuiu os níveis séricos de leucócitos e linfócitos de ratos com PA (p<0,05). Conclui-se que a suplementação alimentar com os ácidos graxos ômega-3 reduz o processo inflamatório e a reabsorção óssea da região periapical, bem como as células inflamatórias do sangue, de ratos com infecção endodôntica. / The aim of this study was to evaluate the effects of the dietary supplement omega 3 polyunsaturated fatty acids on the local and systemic inflammatory response of rats with apical periodontitis (AP). Forty male rats were divided into groups: control untreated rats (C), control rats treated with omega 3 alone (C-O), rats with pulp exposure-induced apical periodontitis (AP), and rats with pulp exposure-induced AP treated with omega 3 (AP-O). The pulps were exposed to the oral environment during 30 days for the development of AP. Omega 3 was administered by gavage method, once a day, for 15 days before pulp exposure and, subsequently, 30 days after pulp exposure. After 30 days, blood samples were collected by cardiac puncture and subjected to blood count and the serum levels of the proinflammatory cytokines tumor necrosis factor alpha (TNF-), Interleukin 6 (IL-6), and Interleukin 17 (IL-17) were measured using ELISA method. Subsequently, rats were killed and maxillae and jaws were collected and subjected to histologic analysis, using hematoxylin and eosin staining. Immunohistochemistry was performed in order to detect TRAP-positive osteoclast cells (TRAP), Osteocalcin-positive osteoblasts cells (OCN), TNF-, IL-6, IL-17, Interleukin 1 (IL-1) and Interleukin 10 (IL-10). Results from the different analysis were subjected to statistical analysis, using specific statistical methods according to each analysis (p<0.05). AP group showed more severe inflammatory infiltrate as well as higher area of bone resorption in the periapical region compared to AP-O group (p<0.05). Moreover, the number of TRAP-positive cells as well as proinflammatory cytokines, such as TNF-, IL-1, IL-6, and IL-17 were higher in AP group compared to AP-O group (p <0.05). In addition, the number of OCN-positive cells and the anti-inflammatory cytokine IL-10 decreased in AP group compared to AP-O group (p<0.05). Regarding systemic alterations, the presence of four AP focus increased the serum levels of leukocytes, lymphocytes, monocytes, TNF-, and IL-6 (p<0.05). The dietary supplement with omega 3 decreased the serum levels of leukocytes and lymphocytes of rats with AP (p<0.05). It may be concluded that the dietary supplement with omega 3 fatty acids decrease the inflammatory process and the pathological bone resorption in the periapical region, as well as serum inflammatory cells of rats with apical periodontitis. / FAPESP: 2013/26390-0 / FAPESP: 2015/07107-0

As lesões periapicais são induzidas por uma infecção crônica da polpa dental. Antígenos microbianos estimulam a resposta imune específica e inespecífica nos tecidos apicais. Como consequência desse processo, diante da incapacidade das defesas do hospedeiro para erradicar a infecção, uma lesão periapical é formada, com o objetivo de restringir a invasão microbiana. O desenvolvimento da periodontite apical crônica depende de uma fina regulação da ativação dos linfócitos. A ativação das células T requer dois sinais, um mediado pelo complexo TCR, após o reconhecimento do antígeno, e o outro mediado pela interação dos receptores coestimulatórios. CD28 é um receptor coestimulatório, enquanto CTLA-4 e PD-1 induzem um sinal inibitório para a ativação de células T. Para compreender o envolvimento de células T na periodontite apical crônica, avaliamos a presença destas células na lesão periapical e os fatores coestimulatórios, citocinas e espécies reativas do oxigênio que estas células estariam produzindo. As amostras analisadas foram de tecido gengival para o grupo controle (n = 20) e lesões periapicais para o grupo com periodontite apical crônica (n = 20). Quanto ao perfil celular das lesões periapicais, os resultados mostraram que linfócitos T (59,3 ± 3,7%) foram as células predominantes, sendo a subpopulação CD4+ (72,7 ± 3,4%) a mais encontrada. A seguir, verificou-se a expressão de moléculas de superfície em células T. Observou-se que a expressão de CD28 (0,5 ± 0,5%) foi significativamente mais baixa em amostras de lesões periapicais que no grupo controle principalmente para linfócito T CD8+. Já CTLA-4 foi identificado em altos níveis para pacientes com periodontite apical tanto para CD3+CD4+ (86,1 ± 2,6%) quanto para CD3+CD8+ (59,8 ± 8,6%). PD-1 (73,5 ± 5,6%) e PD-L1 (59,8 ± 8,6%) apresentaram alta positividade para CD3+CD4+. Esses resultados indicaram um possível envolvimento da via de sinalização de PD-1 e PD-L1 na modulação da resposta de células T de pacientes com periodontite apical crônica. A dosagem de citocinas revelou alta positividade para todas as citocinas investigadas (TGF-; TNF-; IFN- e IL-10). Óxido Nítrico e mieloperoxidase produzidas por neutrófilos e responsáveis pela degradação tecidual também foram detectadas em altas doses nas amostras de pacientes com periodontite apical. O conhecimento sobre o papel das moléculas coestimulatórias na imunopatogênese da periodontite apical crônica servirá de base para o direcionamento de novas estratégias de prevenção, assim como o desenvolvimento de novos procedimentos terapêuticos. / Periapical lesions are induced by the chronic infection of dental pulp. Microbial antigens stimulate both non-specific and specific immune response in periapical tissue. As a consequence of these processes and the inability of host defense mechanisms to eradicate infection, chronic periapical lesion are formed, with the aim of restricting microbial invasion. Negative co-stimulatory signals mediated via cell surface molecules such as cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen 4 (CTLA-4) and programmed death-1 (PD-1) play a critical role in down- modulation immune responses and maintaining peripheral tolerance. Both CTLA-4 and PD-1 are induced on actived T cell, and these are involved in the immunophatogenesis of periapical lesions. Inhibitory signals mediated via molecules such as programmed-death-1 (PD-1) play a critical role in down-modulating immune responses and maintaining peripheral tolerance. We investigated the involvement of cytokines and PD-1 engagement in mediating the T cell activation in chronic periapical diseases. Gingival samples from healthy individuals (n= 20) and patients with chronic periapical periodontitis (n= 20) were collected and used for the subsequent assays. The leukocytes in the lesion site were evaluated using flow cytometry. The production of cytokines interferon-gamma (IFN-), interleukin (IL)-10, tumor necrosis factor-alpha (TNF-) and transforming growth factor-beta (TGF-) was evaluated by ELISA. We observed a significant increase in the total number of leukocytes from periapical lesions as compared with healthy group. Our results for the composition of infiltrating cell in periapical lesion showed that the predominant cells were lymphocytes T (59,3 ± 3,7%) and contained a higher proportion of CD4+ cells (72,7 ± 3,4%). T cells from patients with periapical lesions expressed significantly higher levels of PD-1 (73,5 ± 5,6%) and PD-L1 (59,8 ± 8,6%). The levels of CTLA-4 were higher in CD3+CD4+ (86,1± 2,6%) and CD3+ CD8+ (59,8 ± 8,6%) cells, but in contrast the expression of CD28 was lower than control group. In addition, CD4+ and CD8+ T cells expressing PD-1 accumulate in lesions with chronic periapical periodontitis. Moreover, PD-L1 expression was intense in macrophage from patients. Our data clearly showed that lesions samples contained elevated amounts of TGF-, IL-10, TNF- and IFN- when compared with healthy gingival tissue from control individuals. These data show that PD-1 and CTLA-4 engagement could be involved in the modulation of T cells activation in patients with chronic periapical periodontitis.

Made available in DSpace on 2014-07-29T12:03:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissetacao augusto.pdf: 470357 bytes, checksum: d1f27e85a7915373969a90cec182659a (MD5) Previous issue date: 2008-11-11 / This cross-sectional study examined the prevalence of endodontically treated teeth in 1,401 Brazilian adults. Panoramic radiographs were selected at the Radiological Center of Orofacial Images (CRIOF, Cuiabá, MT, Brazil) between August 2002 and September 2007. Three independent endodontists discussed interpretation criteria and classified specimens according to the following data: presence of root canal treatment, which was defined as partially or completely filled canal space, regardless of whether filling ended at the radiographic apex or not; presence of intracanal post; and associated apical periodontitis. Odds ratio, logistic regression and a chi-square test were used for statistical analyses. Significance level was set at p<0.05. Of 29,467 teeth evaluated, 6,313 (21.4%) were treated endodontically. Endodontic treatment was most frequent in maxillary premolars and molars, whereas mandibular incisors showed the lowest prevalence. Most endodontically treated teeth were found in people aged 46 to 60 years (47.6%, p<0.001) and the prevalence increased with age in this age range. Females (61.9%, p<0.001) showed a higher prevalence of teeth with root fillings than males. The present study found a higher prevalence of endodontically treated teeth in a Brazilian adult population compared to the prevalence reported in epidemiological studies conducted in other countries. / O objetivo do estudo transversal foi avaliar a prevalência dentes tratados endodonticamente em uma população de brasileiros adultos. Um total de 1.401 radiografias panorâmicas, oriundas do banco de imagens do Centro de Radiologia e Imagens Orofacial de Cuiabá (CRIOF, Cuiabá, MT, Brazil), entre agosto de 2002 e setembro de 2007 foi analisado. Três examinadores avaliaram todas as imagens, considerando-se a presença de tratamento endodôntico, indiferente à qualidade do tratamento (presença ou ausência de retentor intra-radicular ou periodontite apical). Os dados foram estatisticamente avaliados empregando-se razão de chances (odds ratio), regressão logística e teste Qui-quadrado. A partir de 29.467 dentes avaliados, 6.313 (21,4%) eram endodonticamente tratados. Os pré-molares e molares superiores foram os dentes com maior prevalência de tratamento, enquanto os incisivos inferiores representaram o grupo de menor prevalência. Indivíduos do gênero feminino (61.9%), e com idade entre 46 a 60 anos apresentaram maior prevalência de tratamento endodôntico. O presente estudo encontrou elevada prevalência de dentes tratados endodonticamente em adultos Brasileiros comparada com outros estudos epidemiológicos.

Este estudo clínico prospectivo avaliou a taxa de sucesso do tratamento endodôntico utilizando um protocolo antimicrobiano definido. Trinta e cinco dentes unirradiculares com periodontite apical primária foram submetidos ao tratamento endodôntico. O preparo químico-cirúrgico foi realizado com instrumentos reciprocantes, utilizando NaOCl 2,5%, seguidos de ativação com o instrumento XP-endo Finisher e irrigação ultrassônica passiva como procedimentos complementares de desinfecção (PCD) na 1a consulta. Os canais radiculares foram preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio por 14 dias e obturados após reinstrumentação dos canais radiculares na 2a consulta. Coletas microbiológicas realizadas no momento da obturação, analisadas por qPCR baseada em 16S rDNA, foram correlacionadas com o prognóstico do tratamento. Vinte e sete casos retornaram para acompanhamento, aproximadamente 12 meses após o tratamento. O sucesso do tratamento endodôntico foi analisado baseado em critérios clínicos, radiográficos e tomográficos. A análise das imagens foi realizada por 2 avaliadores treinados, com valor de Kappa igual a 0,74 e 0,6 para tomografia e radiografia, respectivamente. A tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC) apresentou maior especificidade (37%) pós tratamento quando comparada com a radiografia periapical (59,3%) (p = 0,03). Porém, quando o sucesso do tratamento foi analisado pela ausência ou redução da lesão periapical, ambos os métodos apresentaram o mesmo índice de sucesso (89%). A variação do volume das lesões periapicais foi significativa 1 ano após o tratamento (p < 0.0001). Dos 22 casos que possuíam dados microbiológicos, 32% apresentaram reações qPCR positivas no momento da obturação. A presença de baixos níveis de DNA bacteriano no momento da obturação dos canais radiculares não exerceu influência no prognóstico do tratamento. Concluiu-se que a taxa de sucesso do tratamento endodôntico utilizando PCD foi elevada, provavelmente devido à drástica redução bacteriana promovida pelo protocolo estudado. / This prospective clinical trial evaluated the success rate of endodontic treatments using a defined antimicrobial protocol. Thirty-five unirradicular teeth with primary apical periodontitis were submitted to endodontic treatment. The chemicalsurgical preparation was performed with reciprocating instruments, using NaOCl 2.5%, followed by activation with XP-endo Finisher and passive ultrasonic irrigation as complementary procedures in the 1st session. The root canals were dressed with calcium hydroxide paste for 14 days and root filing were performed after re-instrumentation. Microbiological samples were performed at the time of root filling, analyzed by qPCR based on 16S rDNA, and correlated with the treatment outcome. Twenty-seven cases returned for follow-up, approximately 12 months after treatment. The success of endodontic treatment was analyzed based on clinical, radiographic and tomographic criteria. The images analysis was performed by 2 trained evaluators with a Kappa value of 0.74 and 0.6 for tomography and radiography, respectively. Cone-beam computed tomography (CBCT) showed higher rate of specificity (37%) post treatment when compared to periapical radiography (59.3%) (p = 0.03). However, when the success was analyzed by absence or reduction of the periapical lesion, both methods had similar success rate (89%). The periapical lesions volume was significantly reduced 1 year after treatment (p <0.0001). From 22 cases with microbiological data, 32% had positive qPCR reactions at the time of root filling. The presence of low levels of bacterial DNA at the moment of root filling had no influence on the treatment outcome. It was concluded that the success rate of endodontic treatment using complementary disinfection procedures was high, probably due to the drastic bacterial reduction promoted by the studied protocol.

O principal objetivo do tratamento endodôntico em dentes com infecções primárias é a cura da periodontite apical, o que ocorre geralmente após a máxima redução de micro-organismos do canal radicular. Métodos microbiológicos moleculares são os métodos de escolha para avaliar a redução de micro-organismos após o tratamento endodôntico por serem mais sensíveis, específicos e precisos do que os métodos baseados em cultura bacteriológica. Entretanto, poucos estudos clínicos avaliaram a eficácia antimicrobiana do tratamento endodôntico por métodos moleculares. Além disso, até o presente momento, não há nenhum estudo correlacionando esses dados com o sucesso do tratamento endodôntico. Portanto, os objetivos do presente estudo foram: (a) avaliar in vivo, por métodos moleculares quantitativos, a concentração de bactérias nos canais radiculares e sua, correlação com aspectos clínicos e radiográficos; (b) correlacionar a redução bacteriana após o tratamento endodôntico com reparo apical após controle radiográfico e tomográfico. Trinta e quatro pacientes portadores de dentes com necrose pulpar e periodontite apical foram selecionados para o estudo. O protocolo de antissepsia consistiu em realizar o Preparo Químico-Cirúrgico (PQC) com sistema Reciproc e NaOCl 2,5%; irrigação final com EDTA-T 17%; e medicação intracanal com pasta de hidróxido de cálcio por 14 dias antes da obturação dos canais radiculares. Foram realizadas coletas microbiológicas dos canais radiculares no início do tratamento e na segunda sessão, após a remoção da medicação intracanal antes da obturação. As amostras microbiológicas foram analisadas por Reação em Cadeia da Polimerase quantitativa (qPCR) para detecção e quantificação de bactérias utilizando iniciadores universais para o domínio Bactéria. Para análise do sucesso do tratamento endodôntico, foram analisados aspectos clínicos, radiográficos e tomográficos após um período mínimo de controle de 1 ano. Os casos foram classificados em 4 categorias: ausência de rarefação óssea periapical, redução ou aumento e incerto. Bactérias foram observadas em 100% das amostras iniciais coletadas, com concentrações medianas de 1,68 x 106 cópias de DNA. A análise estatística de regressão logística não apresentou correlação entre concentrações de DNA bacteriano com dados clínicos. Após o tratamento endodôntico, as medianas das concentrações de bactérias foram de 8.72 x 102, os resultados mostraram que houve diminuição significativa na concentração de DNA bacteriano (p<0,05), correspondendo a porcentagem de redução de 99.98% nos canais radiculares após os procedimentos de antissepsia. Retornaram para o controle, 20 dos 34 pacientes (58,82%), entre 13 a 22 meses após o tratamento endodôntico. Dois dentes foram extraídos, restando um total de 18 dentes para análise clínica e radiográfica. O sucesso classificado por ausência ou redução da rarefação óssea na radiografia periapical foi observada em 16 dos 18 dentes (88,83%). Dos 2 casos de insucesso radiográfico, um apresentou elevada quantidade de bactérias (>104) persistentes após os procedimentos de antissepsia e um caso apresentou obturação deficiente. Entretanto, a análise estatística de regressão logística não identificou nenhum fator específico associado ao insucesso endodôntico. A análise tomográfica foi realizada em 12 dos 18 pacientes. Os achados tomográficos confirmaram ausência/ redução da rarefação periapical verificada na radiografia, com exceção de um caso onde não houve redução da área da rarefação. Conclui-se que dentes com necrose pulpar e periodontite apical apresentam uma elevada concentração de bactérias no sistema de canais radiculares. O tratamento endodôntico foi eficaz em reduzir significativamente a quantidade de bactérias dos canais radiculares e promover uma elevada taxa de sucesso endodôntico. / The objectives of the endodontic treatment of teeth with primary infections is the healing of apical periodontitis, which usually occurs after the maximum reduction of micro-organisms in the root canal. Molecular methods are the methods of choice for assessing the reduction of micro-organisms after endodontic treatment to be more sensitive, specific and accurate than methods based on bacteriological culture. The objectives of this study were to evaluate in vivo by molecular methods, the concentration of bacteria in root canals and correlation of bacterial reduction after endodontic treatment with apical repair after radiographic control and CBCT. Thirty four teeth with apical periodontitis, with radiographic evidence of periapical were selected for this study. The root canal preparation of all the teeth was carried out with reciprocating files and 2.5% NaOCl during preparation; and 17% EDTA for smear layer removal. The root canals were medicated with calcium hydroxide for 14 days. Microbiological sampling were performed before the preparation and after intracanal medication. The samples were analyzed by real time PCR, for the detection and quantification of bacteria,. Bacteria were observed in 100% of the initial samples. . Bacteria were observed in 100% of the initial samples, with median concentrations of 1.68 x 106 copies of the DNA. After endodontic treatment, the median bacterial concentrations were 8.72 x 102, the results showed a significant decrease in the concentration of bacterial DNA (p <0.05), corresponding to 99.98% reduction in the percentage of root canals after procedures of antisepsis. 13 to 19 months after treatment, the teeth were examined by using periapical radiography (PA) and cone-beam computed tomography (CBCT). Area and volume of the periapical lesions were measured, and the outcome was presented in 4 categories: absence, reduction or enlargement of the radiolucency, or uncertain. Lesions were classified as reduced or enlarged when the change in size of the radiolucency was 20% or more. The recall rate was 58,82%, and 18 teeth were analyzed. Success classified by the absence or reduction of bone thinning in periapical radiography was observed in 16 of the 18 teeth (88.83%). CT findings confirmed the absence / reduction of periapical rarefaction observed on radiographs, except for one case. Conclude that teeth with pulp necrosis and apical periodontitis have a high concentration of bacteria in the root canal system. The endodontic treatment was effective in significantly reducing the amount of bacteria from root canals and to promote a high rate of success endodontic.

O objetivo deste trabalho foi comparar a eficácia da Tomografia Computadorizada Cone Beam e a Radiografia Periapical como métodos de proservação de lesões periapicais após o tratamento endodôntico. Foram avaliadas no estudo Radiografias e Tomografias de 1.462 indivíduos com fissura labiopalatina no Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais Universidade de São Paulo, que compareceram para o tratamento endodôntico entre os anos 2009 e 2011. De acordo com os critérios de inclusão, foram selecionados 46 dentes unirradiculares com lesão periapical, os quais foram divididos nos grupos: avaliação Radiográfica (Grupo I) e avaliação Tomográfica (Grupo II). Os dados foram analisados por meio do escore PAI para as alterações periapicais encontradas. Nos resultados observou-se que houve diferença estatisticamente significativa nos grupos estudados. Em 34 casos os escores atribuídos às Tomografias dos dentes avaliados foram maiores do que os escores atribuídos às Radiografias Periapicais dos mesmos dentes avaliados, comprovando a maior precisão da Tomografia Computadorizada Cone Beam. Desta forma, a análise dos resultados obtidos neste trabalho permite constatar que a Tomografia Computadorizada Cone Beam é mais eficaz na proservação de lesões periapicais do que a Radiografia Periapical após o tratamento endodôntico em pacientes com fissura labiopalatina. / The aim of this study was to compare the effectiveness of Cone Beam Computed Tomography and periapical radiography as a follow-up method of periapical lesions after endodontic treatment. We evaluated in the study radiographs and tomography scans of 1,462 individuals with cleft lip and palate at the Hospital of Rehabilitation of Craniofacial Anomalies - University of Sao Paulo who came for treatment endodontic between the years 2009 and 2011. According to inclusion criteria were selected 46 single-rooted teeth with periapical lesions, which were divided into groups radiographic evaluation (Group I) and tomographic evaluation (Group II). Data were analyzed using the PAI score for periapical changes found. The results were observed that statistically significant differences in the groups studied. In 34 cases the CT scores attributed to the teeth evaluated were higher than the scores attributed to the radiographs of same teeth evaluated, demonstrating the greater precision of Cone Beam Computed Tomography. Thus, analysis of results obtained in this work demonstrates that the Cone Beam Computed Tomography is more effective in follow-up of periapical lesions than periapical radiography after endodontic treatment in patients with cleft lip and palate.

A periodontite apical é um processo inflamatório que ocorre na região do periápice, em decorrência de contaminação microbiana do sistema de canais que se origina a partir da necrose pulpar ou canais radiculares tratados inadequadamente. Estudos recentes avaliando os fatores genéticos envolvidos no desenvolvimento da periodontite apical crônica (PAC) relatam forte relação com uma predisposição genética do indivíduo e determinam que variantes polimórficas em certos genes envolvidos na remodelação da matriz óssea poderiam contribuir na persistência desta. As metaloproteinases da matriz (MMPs) são enzimas que estão fortemente associadas com os níveis de inflamação e desempenham um papel importante na remodelação e reabsorção óssea, e níveis elevados de MMPs têm relação com a deficiência de reparo da lesão induzindo a PAC. Além disso, as MMPs também participam do complexo desenvolvimento raniofacial o que faz com que também sejam consideradas para a ocorrência de malformações faciais. O objetivo deste trabalho foi determinar se variantes polimórficas nos genes MMP-2 e MMP-3, envolvidos na resposta inflamatória estão associados a permanência de periodontite apical persistente após o tratamento endodôntico em indivíduos com fissura labiopalatina. Foram selecionados para este estudo 180 indivíduos divididos em 3 grupos: GI: 34 indivíduos com fissura labiopalatina, não sindrômicos, com história de PAC relacionada ao tratamento endodôntico; GII: 45 indivíduos sem fissura labiopalatina, não sindrômicos com história de PAC e GIII: grupo controle composto por 101 indivíduos sem fissura e sem relato de PAC. Como critério de inclusão para o diagnóstico de PAC foram considerados os escores 4 e 5 do índice PAI (PeriApical Index) analisado em radiografias periapicais de controle de um ano ou mais após o tratamento dos dentes envolvidos. Foram selecionadas para a genotipagem 3 variantes polimórficas no gene MMP-2 (rs243865, rs2285053 e rs2287074) e 2 no gene MMP-3 (rs679620 e rs522616). Os resultados foram analisados usando o software SDS 1.7 (Applied Biosystems) e os dados foram tabulados no programa Excel 8.0. As comparações entre as frequências dos genótipos e alelos foram realizadas através do teste do qui-quadrado (2) e Odds Ratio com intervalo de confiança de 95% (IC). Valores de p<0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Das variantes polimórficas pesquisadas neste grupo populacional brasileiro, foi encontrada associação positiva do rs679620 no gene MMP-3 com a fissura labiopalatina e PAC somente quando comparado com o grupo com PAC e sem fissura. Sendo encontrada associação positiva também do rs522616 no gene MMP-3 com PAC e sem fissura, somente no comparativo com o grupo controle. Não foi encontrada nenhuma associação positiva das variantes no gene MMP-2 (rs243865, rs2285053 e rs2287074) nem com PAC nem com fissura labiopalatina. Dessa forma, são necessários estudos semelhantes analisando outras variantes polimórficas em outros genes envolvidos na cascata de sinalização da inflamação e na embriologia craniofacial, com amostras maiores, para esclarecer o papel do fator genético tanto para a periodontite apical crônica quanto para a fissura / Apical Periodontitis is an inflammatory process on periapical tissues, due to a microbial contamination of the canals system, arising from pulp necrosis or failed root canal treatment. Recent studies evaluating genetic factors involved on chronic apical periodontitis (CAP) show real relation with a genetic predisposition in individuals and determine whether polymorphic variability in some genes involved on bone matrix remodeling could contribute on the disease persistence. Matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes really associated with inflammation levels and take an important part of bone remodeling and resorption and high levels of MMPs have a relation with the lesion repair deficiency inducing CAP. Besides that, MMPs also participate on craniofacial development; being considered to the occurrence of some facial anomalies. The aim of this study was to determine whether polymorphic variability on genes MMP-2 e MMP-3 involved on inflammatory response is associated with the permanency of persistant apical periodontitis after endodontic therapy on individuals with cleft lip and/or palate. One hundred and eighty individuals were selected to this study, which was divided in 3 groups: GI: 34 individuals with cleft lip and/or palate, nonsyndromic, with CAP related to endodontic treatment; GII: 45 individuals without cleft lip and/or palate, nonsyndromic, with CAP, GIII: control group composed by 101 individuals without cleft and without report of chronic apical periodontitis. As inclusion criteria to CAP diagnosis were considered 4 and 5 of PAI score (PeriApical Index) analyzed on control periapical radiographies after one year or more after treatment of the teeth involved. Were selected for genotyping 3 polymorphic variabilities on gene MMP-2 (rs243865, rs2285053 e rs2287074) and 2 on gene MMP-3 (rs679620 e rs522616) were selected to genotyping. Results were analyzed by software SDS 1.7 (Applied Biosystems) and data were tabulated on 8.0 Excel program. Comparison among genotype frequencies and alleles were performed through qui square test (2) and Odds Ratio with 95% confidence. Values of p<0,05 were considered statistically significant. From polymorphic variability evaluated on this Brazilian group, it was only observed a positive association between rs679620 on MMP-3 gene with cleft lip and palate and chronic apical periodontitis only when compared with chronic apical periodontitis group and without cleft lip and palate. A positive association was also found on rs522616 gene MMP-3 with chronic apical periodontitis and without cleft lip and palate, only when compared to control group. It was not found any positive association of the variability of MMP-2 (rs243865, rs2285053 e rs2287074) gene neither with chronic apical periodontitis nor with cleft lip and palate. Therefore, other studies are required to analyze other polymorphic variability on other genes involved on inflammation cascade of signaling and craniofacial embryology with more samples, to a better understanding of genetic influence not only on chronic apical periodontitis but also on cleft lip and/or palate

Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-01-23T16:14:44Z No. of bitstreams: 5 george.pdf: 1321962 bytes, checksum: 4431a511a9e919efedb58883c89d3635 (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2109 bytes, checksum: aa477231e840f304454a16eb85a9235f (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2015-02-10T10:47:26Z (GMT) No. of bitstreams: 5 george.pdf: 1321962 bytes, checksum: 4431a511a9e919efedb58883c89d3635 (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2109 bytes, checksum: aa477231e840f304454a16eb85a9235f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-10T10:47:26Z (GMT). No. of bitstreams: 5 george.pdf: 1321962 bytes, checksum: 4431a511a9e919efedb58883c89d3635 (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) license.txt: 2109 bytes, checksum: aa477231e840f304454a16eb85a9235f (MD5) Previous issue date: 2013 / O objetivo deste estudo foi avaliar a influ?ncia da qualidade do tratamento de canal radicular (TCR), de fatores relacionados ? restaura??o coron?ria (RC), les?es por c?rie e par?metros cl?nicos periodontais no estado periapical de dentes tratados endodonticamente. Os pacientes foram tratados por estudantes de gradua??o na Cl?nica de Endodontia da Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, entre o per?odo de 2004 a 2009. A reavalia??o cl?nica e radiogr?fica foi realizada entre Setembro de 2010 e Fevereiro de 2011. Foram coletados dados contidos nos prontu?rios odontol?gicos (idade, g?nero, dente tratado, estado periapical pr?-operat?rio, tipo de tratamento, t?cnicas de instrumenta??o e obtura??o empregadas, radiografia final da obtura??o e tipo de restaura??o coron?ria). Clinicamente, foram considerados fatores relacionados a sinais e sintomas endod?nticos, les?es por c?rie, RC e par?metros periodontais. Radiograficamente avaliou-se o estado periapical, les?es por c?rie, RC e pino intrarradicular. Os resultados foram analisados estatisticamente usando os testes qui-quadrado de Pearson, exato de Fisher, McNemar e regress?o log?stica bivariada e multivariada (p<0,05). Foram reavaliados 122 pacientes ap?s per?odo de acompanhamento de 12 a 66 (37,7?16,4) meses, e estes apresentaram 154 dentes tratados endodonticamente. Os dados foram organizados e analisados conforme o desenho de estudo e vari?veis estudadas, sendo apresentados em dois artigos cient?ficos. No geral a taxa de sucesso cl?nico-radiogr?fico do TCR foi de 73,4%. No estudo longitudinal observou-se frequ?ncias elevadas de obtura??es perfeitas (41,6%) e satisfat?rias (46,1%) e frequ?ncia reduzida de obtura??es deficientes (12,3%). A qualidade das obtura??es e das restaura??es coron?rias, analisadas isoladamente, influenciou no sucesso cl?nico-radiogr?fico (p<0,05); a presen?a de pr?via les?o periapical (OR=10,24; IC=3,15-33,22) foi o fator decisivo para o insucesso do tratamento. No estudo transversal observou-se que a presen?a de les?es por c?rie (p=0,017), sangramento gengival ? sondagem (p=0,043) e mobilidade dent?ria (p=0,022) foram os fatores associados ao insucesso do TCR. As outras vari?veis relacionadas ?s les?es por c?rie, RC, qualidade da obtura??o e par?metros cl?nicos periodontais, n?o influenciaram no insucesso do tratamento (p>0,05). Concluiu-se que, no estudo longitudinal, o pr?vio estado periapical foi o principal fator que influenciou o progn?stico do TCR e, no estudo transversal, a presen?a de les?es por c?rie e aspectos periodontais influenciaram negativamente no estado periapical dos dentes tratados endodonticamente. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Odontologia, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2012. / ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the influence of root canal treatment (RCT) quality, factors related to the coronal restoration (CR), carious lesions and periodontal clinical parameters in the periapical status of endodontically treated teeth. The patients were treated by undergraduate students at the Clinic of Endodontics, Federal University of Jequitinhonha and Mucuri Valleys (UFVJM) in the period between 2004-2009. The clinical and radiographic recall was performed between September 2010 and February 2011. Data were collected in records dentistry (age, gender, treated tooth, periapical status preoperative, type of treatment, instrumentation and obturation techniques, final radiography of the filling and the type of coronal restoration). Clinically, factors related to carious lesions, CR and periodontal parameters were considered. Radiographic parameters were evaluated the periapical status, carious lesions, CR and cast post. The results were statistically analyzed using Pearson chi-square, Fisher?s exact and McNemar tests, bivariate and multivariate logistic regression (p<0.05). A total of 122 patients were reassessed after a follow-up of 12-66 (37.7?16.4) months which had 154 endodontically treated teeth. Data were organized and analyzed according to the study design and variables, and are presented in two papers. Overall, the success rate of the RCT was 73.4%. In the longitudinal study it was observed a high frequency of perfect (41.6%) and satisfactory (46.1%) fillings and a reduced frequency of deficient (12.3%) fillings. The quality of fillings and coronal restorations, when analyzed individually, influenced the clinical and radiographic success (p<0,05); preoperative periapical lesion was the main factor for the treatment insuccess (OR=10.24, CI=3.15-33.22). In cross-sectional study it was observed that the presence of carious lesions (p=0.017), gingival bleeding (p=0,043) and tooth mobility (p=0.022) were the factors associated with insuccess of RCT. The other variables related to carious lesions, CR, quality of fillings and periodontal clinical parameters, did not influence the insuccess treatment (p>0.05). In conclusion, the prior periapical status was the main factor affecting the prognosis of the RCT in the longitudinal study and, in the cross-sectional study the presence of carious lesions and periodontal aspects negatively influenced the periapical status of endodontically treated teeth.

O presente trabalho teve por objetivo investigar a microbiota de canais radiculares relacionadas ao insucesso do tratamento endodôntico, buscando a identificação e a quantificação destes micro-organismos. Foram selecionados 36 dentes com infecção endodôntica persistente. O material obturador foi removido do canal radicular e amostras microbiológicas foram coletadas dos canais com o auxílio de limas tipo Hedströen e cones de papel absorvente estéril. A técnica do Checkerboard DNA-DNA hybridization foi utilizada para detecção de até 79 espécies bacterianas em cada amostra, utilizando sondas de DNA específicas. Os dados microbiológicos foram expressos em percentagem média (prevalência), proporção e nível médio de cada espécie em cada amostra. Os testes t independente e de correlação de Pearson foram usados para correlacionar a contagem das bactérias testadas com os dados clínicos (p&#8804; 0,05). Foi encontrada uma média de 11 espécies por amostra. E. faecium (36%), S. epidermidis (36%), E. saburreum (28%), P. micra (28%), S. sanguis (28%), C. sputigena (28%), L. buccalis (28%), E. faecalis (28%) e S. warneri (28%) foram as espécies mais prevalentes, e as espécies encontradas em níveis médios mais altos foram E. faecium, D. pneumosintes, S. epidermidis, H. pylori e C. sputigena. T. socranskii (3%), F. periodonticum (3%), C. gingivalis (3%), S. ixodetis (3%) apresentaram prevalências mais baixas. E. faecium e S. epidermidis apresentaram os maiores valores de prevalência, níveis médios e proporção. Não houve correlação entre a microbiota detectada nas amostras com os sinais e sintomas clínicos apresentados pelos pacientes, porém nas lesões periapicais de maior área foi detectada contagem significativamente maior de bacilos e espécies Gram-negativas (p<0,05). Baseado nos resultados obtidos é possível concluir que a microbiota presente em dentes com periodontite apical persistente possui perfil misto e complexo, e que uma maior área de lesão perirradicular pode estar associada a contagem elevada de bacilos e de espécies Gram-negativas. / The present study investigated the composition of the root canal microbiota in endodontic failures, aiming to identify and quantify these microorganisms. Thirty six teeth with persistent endodontic infection were selected. The root-filling materials were removed and microbiological samples were taken from the root canals with a Hedströen-type file and sterile paper points. The Checkerboard DNA-DNA hybridization technique was used for the detection of 79 bacterial species in each sample, using specific DNA probes. Microbiological data were express in mean prevalence, proportions and levels of each species in each sample. t independent test and Pearson correlation test were use to correlate bacterial counts and clinical conditions (p&#8804; 0,05). There were found a mean of 11 different species per sample. E. faecium (36%), S. epidermidis (36%), E. saburreum (28%), P. micra (28%), S. sanguis (28%), C. sputigena (28%), L. buccalis (28%), E. faecalis (28%) and S. warneri (28%) were the most prevalent species, and the species found in highest mean levels were E. faecium, D. pneumosintes, S. epidermidis, H. pylori and C. sputigena. T. socranskii (3%), F. periodonticum (3%), C. gingivalis (3%) and S. ixodetis (3%) were found in low prevalence. E. faecium and S. epidermidis presented the highest values of prevalence, means levels and proportions. No correlation was found between the detected microbiota and clinical findings; however in periapical lesions with highest areas, higher levels of rods and Gram-negative species were detected (p<0.05). Based on these results it may be concluded that the microbiota in teeth with persistent apical periodontitis presents a mixed and complex profile, and periapical lesions with larger area might be high associated with higher counts of rods and Gram-negative species.

Apical periodontitis is an inflamatory process reported by literature in a prevalence that range from 39% to 83%, depending on the sample studied. The inflammatory process represents and infectious focus that may cause systemic manifestations. Many patients can t identify it, and health professionals may have difficulty in realizing an early diagnostic since this process may be silent. Therefore the objectives of this study ware to evaluate clinical signs and the prevalence of asymptomatic apical periodontitis, through a convenience sample. 146 patients with apical periodontitis were selected, and then answered to a questionnaire. After the data was collected, it was found that the prevalence of patients with asymptomatic apical periodontitis was 57.53%. The analysis of logistical regression was used to evaluate the association between the outcome and possible predictors. The variables that presented a value of p≤0, 20 in univariate analysis were selected and in the adjusted model were kept only the ones that presented a value of p≤0,05. Patients without cavities in their teeth have a odds ratio 2.45 times bigger of not mentioning any painful symptomatology (OR: 2.45 IC: 1.08 5.54); patients that related a response to the vertical percussion test have a 86% lesser odds ratio of not perceiving pain in the dental element (OR: 0.14 IC: 0.06 0.33); smoking patients have a chance 3.96 times bigger of not relating any painful symptomatology (OR: 3.96 IC: 1.09 14.38). It can be concluded that a set of evaluations may provide an early diagnostic and a better interpretation from the patient, reducing the prevalence of apical periodontitis / A periodontite apical é um processo inflamatório cuja a prevalência relatada na literatura varia de 39% a 83% dependendo da amostra estudada. O processo inflamatório representa um foco infeccioso que pode causar manifestações sistêmicas. Muitos pacientes não o identificam e profissionais da saúde podem ter dificuldade de realizar o diagnóstico precoce já que este processo poderá ser silencioso. Portanto os objetivos deste estudo foram avaliar sinais clínicos e sintomas e a prevalência de periodontite apical assintomática, através de uma amostra de conveniência. 146 pacientes com periodontite apical foram selecionados, e em seguida responderam a um questionário. Após a coleta de dados, constatou-se que a prevalência de pacientes com periodontite apical assintomática foi de 57.53%. A análise de regressão logística foi utilizada para avaliar a associação entre o desfecho e possíveis preditores. Foram selecionadas variáveis que apresentaram valor de p≤0,20 na análise univariada e foram mantidas no modelo ajustado somente as que apresentaram um valor de p≤0,05. Pacientes sem cárie no dente tem uma razão de chance 2.45 vezes maior de não ter relatado sintomatologia dolorosa (OR: 2.45 IC: 1.08 5.54); pacientes que relataram resposta ao teste de percussão vertical tem uma razão de chance 86% menor de não ter percebido dor no elemento dentário (OR: 0.14 IC: 0.06 0.33); pacientes fumantes tem uma chance 3.96 maior de não terem relato de sintomatologia dolorosa (OR: 3.96 IC: 1.09 14.38). Concluise que o conjunto dessas avaliações poderão proporcionar um diagnóstico precoce e uma melhor intepretação do paciente diminuindo a prevalência de periodontite apical.