Existen diversos estudios que relacionan a las Enfermedades Cardiovasculares relacionadas a Aterosclerosis con la Infección que producen las Enfermedades Periodontales, entre ellas la Periodontitis Crónica, estos se dan por diversos mecanismos inflamatorios, de reacción cruzada y de entrada directa de bacterias orales al torrente sanguíneo. El presente estudio tuvo la finalidad de identificar la frecuencia y porcentaje de aquellos pacientes que tienen Periodontitis Crónica asociada a Placa Bacteriana en una muestra de pacientes con Enfermedad Cardiovascular con el uso de una fuente secundaria (Historias Clínicas). Se consultaron 172 Historias Clínicas Médicas con el debido diagnóstico médico de Angina de Pecho, Infarto de Miocardio y Enfermedad Coronaria Crónica, todas ellas del Departamento de Cardiología del Centro Médico Naval “Cirujano Mayor Santiago Távara”, con esta muestra se consultaron las Historias Clínicas Odontológicas en la cual se observaron los siguiente resultados: 33,7% presentaban un diagnóstico de Periodontitis Crónica y 66,3% no presentaba ningún diagnóstico periodontal, este resultado se comparó con el resultado obtenido por Lipari y col. (45%) mediante la Prueba de Proporciones resultando una diferencia de resultados al 95% de confianza. Dentro de los factores de riesgo para padecer Enfermedad Cardiovascular relacionada a Aterosclerosis podemos mencionar que la Hipertensión Arterial es la principal enfermedad que tiene una cantidad mayor de pacientes con periodontitis seguidos de las Dislipidemias y la Diabetes. Según los resultados obtenidos en el presente estudio se concluye que existe una baja prevalencia de periodontitis crónica en pacientes con enfermedad cardiovascular relacionada a aterosclerosis. / --- There are several studies related to cardiovascular disease related to atherosclerosis with infections that cause periodontal diseases, including chronic periodontitis, these are given by various inflammatory mechanisms, cross-reactive and direct entry of oral bacteria into the bloodstream. This study was intended to identify the frequency and percentage of patients with chronic periodontitis associated with bacterial plaque in a sample of patients with cardiovascular disease using a secondary source (Medical Histories). 172 were consulted medical history with proper medical diagnosis of angina pectoris, myocardial infarction and chronic coronary disease, all from the Department of Cardiology, Naval Medical Center "Cirujano Mayor Santiago Távara" with this show were consulted Dental Medical Histories in which we noted the following results: 33.7% had a diagnosis of chronic periodontitis and 66.3% no periodontal diagnosis, this result was compared with the result obtained by Lipari et al. (45%) using the proportions test results resulting in a difference of 95% confidence. Among the risk factors for cardiovascular disease related to atherosclerosis may be mentioned that hypertension is a major disease with a greater number of patients with periodontitis followed by dyslipidemia and diabetes. According to the results obtained in the present study concludes that there is a low prevalence of chronic periodontitis in patients with cardiovascular disease related to atherosclerosis.

La periodontitis crónica es la causa más común de pérdida de dientes en el mundo y muchos factores de riesgo tales como las infecciones, la respuesta inflamatoria, la higiene oral, la edad, los hábitos de fumar y las características genéticas individuales están involucrados en el desarrollo de esta enfermedad. La identificación de los factores genéticos que condicionan la inflamación oral puede ayudarnos a comprender la predisposición a desarrollar periodontitis. Las interleuquinas, en especial la IL-1, tienen mucha importancia en la evolución de la enfermedad periodontal, debido a que son proteínas solubles que median interacciones complejas entre los linfocitos, las células inflamatorias y otros elementos celulares del tejido conectivo. Por tal motivo, el propósito de este estudio fue determinar la asociación de los polimorfismos genéticos de la IL-1A C(-889)T, IL-1B C(+3953/4)T, con la periodontitis crónica en un grupo de peruanos. Para ello se reclutaron 94 personas con periodontitis crónica y 96 personas periodontalmente sanas, a quienes se les extrajo una muestra de sangre para obtener el ADN y realizar la genotipificación de la IL-1A e IL-1B, con la técnica de PCR-RFLP. Los datos fueron analizados con el test de 2, 2de tendencia lineal y regresión logística, con un 95% de intervalo de confianza. Los resultados muestran una asociación estadísticamente significativa entre el genotipo positivo de la IL-1B y el genotipo compuesto positivo, con la periodontitis crónica. Palabras clave: Interleuquinas, Citoquinas, Periodontitis Crónica, Polimorfismo Genético, PCR- RFLP. / --- Chronic periodontitis is the most common cause of tooth loss in the world and many risk factors such as infections, inflammatory response, oral hygiene, age, smoking habits and individual genetic characteristics are involved in the development of this disease. The identification of genetic factors that influence oral inflammation may help us understand the predisposition to developing periodontitis. Interleukins, in particular IL-1, are very important in the development of periodontal disease because they are soluble proteins that mediate complex interactions among cells, inflammatory cells and other cellular elements of connective tissue. Therefore the purpose of this study was to determine the association of genetic polymorphisms of the IL-1A C (-889) T, IL-1B C (+3953/4) T, with chronic periodontitis in a group of Peruvians. For this purpose, 94 people with chronic periodontitis and 96 periodontally healthy people were recruits and blood for DNA and perform genotyping of IL-1A and IL-1B, with the PCR-RFLP was extracted to them. Data were analyzed with the test 2, 2 of linear trend and logistic regression with 95% confidence interval. The results show a statistically significant association between positive genotype of the IL-1B and the positive composite genotype with chronic periodontitis. Keywords: Interleukins, cytokines, Chronic Periodontitis, Genetic Polymorphism, PCR-RFLP.

Memoria para optar el título de Bioquímico / La periodontitis crónica es una enfermedad de etiología infecciosa, caracterizada por la respuesta inflamatoria e inmune exacerbada por parte del hospedero que produce la destrucción de tejidos de soporte del diente. Actualmente, se postula que para el establecimiento de esta patología se produce una sucesión ecológica desde una comunidad microbiana asociada a salud hacia una asociada a enfermedad periodontal. En esta sucesión es imprescindible la presencia de ciertos patógenos que faciliten el remodelamiento de la microbiota oral y la progresión hacia enfermedad, siendo Porphyromonas gingivalis un patógeno clave en este proceso. P. gingivalis es una bacteria anaerobia estricta capaz de invadir y permanecer al interior de células epiteliales gingivales. Interesantemente, la infección por P. gingivalis produce una mayor viabilidad celular, mediante la modulación de proteínas relacionadas con apoptosis. Se ha sugerido que la proteína inhibidora de la apoptosis, survivina, podría contribuir a la inhibición de la apoptosis mediada por P. gingivalis; sin embargo, su participación en este proceso no está completamente dilucidada. En esta memoria de título se estudió si P. gingivalis es capaz de modular los niveles de survivina en la línea celular de epitelio gingival OKF6/TERT2 y si esta modulación está relacionada con el grado de virulencia de la bacteria. Para ello, se infectaron células OKF6/TERT2 utilizando dos cepas de referencia y un aislado clínico, cada una con diferente virulencia. Luego, se determinaron los niveles de proteína y transcrito de survivina a tiempos tempranos y tardíos post-invasión, mediante Western blot y RT-PCR. Los resultados obtenidos indican que P. gingivalis es capaz de disminuir los niveles de survivina y que esta modulación podría estar relacionada con la virulencia de la bacteria. Sin embargo, la disminución de survivina no estaría relacionada directamente con la inhibición de apoptosis que genera la infección por P. gingivalis / Chronic periodontitis is an infectious disease characterized by an exacerbated inflammatory and immune response by the host, which causes the destruction of the tooth supporting tissues. Nowadays, it is assumed that for the onset of this pathology an ecological succession from a bacterial community associated to health, to one associated with periodontal disease is produced. In this succession, the presence of certain pathogens facilitate the remodeling of the oral microbiota and the consequent progression to disease, being Porphyromonas gingivalis a key pathogen in this process. P. gingivalis is a strict anaerobic bacterium capable of invading and persisting within gingival epithelial cells. Interestingly, infection by P. gingivalis produce an increase in the viability of these cells by modulation of apoptosis related proteins. It has been suggested that the apoptosis inhibitory protein, survivin, could contribute to the inhibition of apoptosis mediated by P. gingivalis; however, its participation in this process is still unknown. In this work, we studied whether P. gingivalis is capable of modulate survivin levels in gingival epithelial cells OKF6/TERT2 and if this modulation is related to bacterial virulence. To achieve this goals we infected OKF6/TERT2 cells with two reference strains and one clinical isolate, each with different virulence. Survivin protein and transcript levels were determined at early and late post-infection times by Western blot and RT-PCR. The results of this work indicated that P. gingivalis is capable of decreasing survivin levels and this modulation could be related to virulence features of the bacterium. Nevertheless, survivin decrease would not be directly related to the inhibition of apoptosis induced by P. gingivalis

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su tesis en el Portal de Tesis Electrónicas / Introducción: Porphyromonas endodontalis es una especie de bacilos anaerobios, Gram-negativo, que ha sido fuertemente asociada a infecciones endodónticas, pudiendo ser encontrada en casos de necrosis pulpar, participando en la infección del sistema de canales radiculares (SCR) y en la periodontitis apical. Los estudios que describen la presencia de P. endodontalis en pacientes con Periodontitis Apical Asintomática (PAA) presentan grandes discrepancias respecto de la microbiota encontrada. El objetivo de este estudio es determinar la presencia de P. endodontalis en dientes con diagnóstico de PAA en un grupo de pacientes chilenos. Materiales y Métodos: La muestra del estudio se conformó por 53 pacientes con dientes unirradiculares sin tratamiento endodóntico previo, que presentaran el diagnóstico de PAA. Se tomaron muestras siguiendo el método de Shimauchi en condiciones de asepsia y con el diente aislado en forma absoluta. Las muestras fueron depositadas en viales con medio reducido de transporte (RTF) y llevadas al laboratorio para su procesamiento. Mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se detectó la presencia de P. endodontalis. Los datos fueron sometidos a un análisis descriptivo. La edad fue analizada con valores promedio y desviación estándar. Resultados: P. endodontalis fue detectada en un 41,5% (22 pacientes) de las muestras microbiológicas obtenidas de dientes diagnosticados con PAA. Conclusión: La detección realizada para P. endodontalis confirma que esta especie forma parte de la microbiota habitual en pacientes con PAA, con un 41,5% en la población estudiada.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La periodontitis apical asintomática (PAA) corresponde a una patología infecciosa generada por la invasión microbiana del sistema de canales radiculares que resulta en la destrucción del periodonto apical. Clínicamente no presenta sintomatología, por lo que usualmente su hallazgo es radiográfico, observándose un área radiolúcida periapical. La mieloperoxidasa (MPO) es una enzima que cataliza la formación de ácido hipocloroso (HClO) y su presencia ha sido descrita en PAA. El HClO es un potente oxidante con rol defensivo contra los agentes infecciosos y que paralelamente provoca daño a los tejidos adyacentes. Las pastas de hidróxido de calcio (Ca(OH) ) son utilizadas como medicación intracanal entre sesiones en el tratamiento endodóntico de dientes con PAA para desinfectar y evitar la reinfección de los canales ya tratados. A la fecha no se ha estudiado el efecto del Ca(OH) 2 2 sobre los niveles de MPO en patologías periapicales. Objetivo: Comparar los niveles de MPO en exudado periapical de dientes con diagnóstico de PAA antes y después de la medicación intracanal con Ca(OH) Materiales y métodos: Se seleccionaron 15 pacientes con diagnóstico de PAA e indicación de endodoncia, y se obtuvieron muestras de exudado periapical al inicio del tratamiento y después de dos semanas de medicación con Ca(OH) . Las muestras fueron eluídas y se les realizó cuantificación de proteínas totales. Para determinar los niveles de MPO se realizó test de ELISA. Los resultados se analizaron con el programa GraphPad PRISM 5.0. Resultados: La concentración de proteínas totales (CPT) y los niveles de MPO en exudado periapical de dientes con PAA son significativamente mayores previo a la medicación intracanal con Ca(OH) con respecto a los niveles detectados posterior a dicha medicación. 2 Conclusiones: La medicación intracanal con Ca(OH) se asocia a una disminución en los niveles de MPO y CPT en exudado periapical de dientes con PAA, sin embargo faltan estudios para determinar la influencia de otros factores como la instrumentación biomecánica y la utilización de irrigantes durante la terapia endodóntica. 2 IV 2 2 . INTRODUCCIÓN

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Las periodontitis son enfermedades infecciosas cuya causa es la interacción entre el biofilm patogénico que coloniza el microambiente subgingival y la respuesta inmuno-inflamatoria del hospedero. Esta interacción provoca la destrucción de los tejidos de soporte periodontal: cemento radicular, ligamento periodontal y hueso alveolar, y eventualmente puede llevar a la pérdida de los dientes. Aggregatibacter actinomycetemcomitans es una bacteria ampliamente asociada al inicio, progresión y severidad de las periodontitis. Sin embargo, aunque esta bacteria puede causar daño directo a los tejidos periodontales, es la respuesta inmune del hospedero inducida ante los periodontopatógenos el principal determinante del carácter destructivo de la enfermedad. Sobre la base de la antigenicidad del polisacárido O componente del LPS, en A. actinomycetemcomitans se describen 6 serotipos bacterianos distintos y entre ellos se ha especulado una virulencia variable y una distinta patogenicidad. Con el objeto de establecer diferencias de inmunogenicidad que contribuirían a explicar esta variable virulencia y patogenicidad, en este trabajo de investigación se analizó la respuesta de las células dendríticas humanas al ser estimuladas in vitro con los distintos serotipos de A. actinomycetemcomitans, definiendo mediante PCR el tipo de receptores CCR expresado y mediante ELISA el patrón de citoquinas secretado. Los datos obtenidos en este trabajo de investigación permiten establecer que los niveles de expresión de CCRs y de secreción de citoquinas son diferentes en las células dendríticas humanas cuando son estimuladas con los distintos serotipos de A. actinomycetemcomitans, con mayores niveles de secreción de IL-1β, IL-6, IL-12, IL-23, IFN-γ y TNF-α cuando el microorganismo estimulante fue la cepa ATCC® 43718™ (serotipo b). Por lo tanto, es factible especular que el serotipo b de A. actinomycetemcomitans induciría predominantemente un patrón de respuesta inmune tipo Th1 y/o Th17 durante las periodontitis.

ABSTRACT Aim The aim of this study is to compare the degree of severity of chronic periodontitis in HIVseropositive subjects with chronic periodontitis to control subjects with chronic periodontitis, in the Ga-Rankuwa area in South Africa. Methods Two cohorts of subjects with chronic periodontitis were recruited for this study over a period of time: thirty HIV-seropositive subjects; and 30 control subjects presumed to be HIV - seronegative and apparently in good health. Results When all the periodontal indices were compared and evaluated there was no association between HIV-serostatus and the periodontal indices. When periodontal indices were compared between HIV-seropositive subjects using highly active anti-retroviral therapy (HAART), and HAART-naïve subjects, there was no statistical differences regarding gingival recession, plaque index and bleeding index. However, the mean pocket depth in HAARTnaïve seropositive subjects was slightly greater than in HIV-seropositive subjects using HAART. Correlation coefficient of mean pocket depth in relation to log CD4+ T cell count in the HIV-seropositive HAART-naïve group of subjects showed a significant negative correlation (P = -0.947), but there was no correlation between the mean gingival recession values and the log CD4+ T cell counts in the same group (P=0.303). For the HIVseropositive subjects using HAART the correlation coefficient test failed to show significant statistical relationships between log CD4+ T cell count and mean pocket depth (P=0.903) and mean gingival recession (P=0.312) in HIV-seropositive subjects using HAART. Conclusion HIV-seropositive subjects with chronic periodontitis show clinical manifestations of similar degree of their periodontal disease to those of healthy control subjects with chronic periodontitis, with no differences in the mean pocket depth, gingival recession, plaque index and bleeding index.

Introduction: Chronic peridontitis is an inflammatory disease that is caused by the accumulation of bacteria in the form of a biofilm in the periodontal pocket. It can be treated with oral hygiene in conjunction with β-lactam antibiotics. Many oral anaerobic bacteria associated with chronic periodontal diseases have developed resistance to β-lactam antibiotics by virtue of their production of β-lactamase enzymes. This study investigated the prevalence of β-lactamase-producing anaerobic bacteria in the oral cavities of South African patients with periodontitis and the genes responsible for these enzymes production. Methods: Periodontal pocket debri was collected from 48 patients with chronic periodontitis and cultured anaerobically on blood agar plates with and without β-lactam antibiotics. Presumptive β-lactamase-producing isolates were evaluated for definite β-lactamase production using the nitrocefin slide method and identified using the API Rapid 32A system. Antimicrobial sensitivity was performed using a disc diffusion test. Isolates were screened for the presence of the BlaTEM and BlacfxA genes using Polymerase Chain Reaction (PCR). Amplified PCR products were sequenced and the BlacfxA gene was further characterized using Genbank databases. Seventeen isolates containing BlacfxA gene were subjected to broth microdilution technique to determine minimum inhibitory concentrations of Amoxycillin, Augmentin, and Penicillin. Results: Seventy five percent (36 of 48) of patients carried, on average 2 strains of β-lactamase-producing oral anaerobic bacteria, which constituted 10% of the total cultivable oral flora. A total of 85 oral anaerobes were isolated from patients. The predominant isolates were gram negative species such as Prevotella spp (58%), Bacteroides spp (18%) and Porphyromonas spp (7%). The disc diffusion antimicrobial sensitivity test showed that 40% of the strains were resistant to β-lactam antibiotics. PCR results revealed that none of the anaerobes carried BlaTEM. The BlacfxA gene was identified in 51% of the β-lactamase-producing bacteria. Variants of the BlacfxA gene included cfxA2 (77%), cfxA3 (14%) and cfxA6 (9%). Minimum inhibitory concenration antimicrobial susceptibility test results showed that more than 53% of the strains were resistant to β-lactam antibiotics when the BlacfxA gene was present. Conclusions: A high prevalence of β-lactamase-producing oral anaerobic bacteria was found in South African patients with chronic periodontitis. Although, it comprised 10% of their oral flora these anaerobes can protect non-β-lactamase-producers by releasing these enzymes into the environment. The most prevalent β-lactamase gene in this population was BlacfxA subcategory cfxA2 which has epidemiological implications and genetic transfer can occur among these bacteria. On average fifty percent of the isolates that carried this gene were resistant to β-lactam antibiotics therefore alternative antimicrobial agents should be considered in patients that are non-responsive to β-lactam antibiotics. This study indicates that there is a need for education in the dental community regarding antibiotic resistance and regular surveillance with diagnostic testing is needed.

Periodontal disease is a chronic inflammatory disease affecting the structures supporting the teeth. It results from the interaction between a microbial biofilm on the tooth surface and a de‐regulated host response in the periodontal tissues of a genetically susceptible host. There are strong correlations between specific ‘red complex’ micro‐organisms within the subgingival biofilm and disease. Dysbiosis, a deleterious shift in the relative abundance of components of the microbiota in disease, is a recognised property of microbiomes at other sites of the GI tract in chronic diseases. Exploring dysbiosis in the oral commensal microbiota using a mouse model of periodontitis, we have shown that a ‘red complex’ organism (Porphyromonas gingivalis) caused significantly more periodontal bone loss in specific pathogen free (SPF) mice than controls and no bone loss in germ free (GF) mice. This confirms the oral commensal microbiota is fundamentally required for periodontal bone loss. In addition, low level colonisation of SPF mice with P. gingivalis led to qualitative and quantitative changes to the microbiota; dysbiosis. The oral commensal microbiota of the SPF mice was stable for our aging population of SPF mice and this led to increased alveolar bone loss with age. Through a series of co‐caging experiments we have shown that the oral commensal microbiota of different strains of mice was transmissible into GF mice and led to periodontal bone loss. We have also demonstrated that a dysbiotic oral commensal microbiota was transmissible into GF mice and led to increased periodontal bone loss. In conclusion, the oral commensal microbiota is fundamental in the pathogenesis of periodontal disease in this mouse model. Moreover, it is dysbiosis of this oral commensal microbiota, brought about by P. gingivalis, that drives accelerated alveolar bone loss. We propose that P. gingivalis be considered as a keystone species.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción La periodontitis es una enfermedad de etiología infecciosa y de naturaleza inflamatoria que afecta los tejidos de inserción del diente, la cual para desarrollarse necesita de patógenos periodontales específicos, además de un hospedero susceptible y el accionar de la respuesta inmunológica. El tratamiento periodontal convencional no quirúrgico de pulido y alisado radicular es la terapia de primera línea para el tratamiento de la periodontitis y comúnmente es usada con una terapia antibiótica adjunta, la cual tiene baja especificidad, no logra mejoras a largo plazo y puede presentar resistencia a los mismos en el tiempo. Por esta razón existe un interés en los enfoques que inhiben selectivamente a los patógenos periodontales o modulan la composición microbiana de la placa para el control de la patogénesis microbiana. Entre ellos los probióticos, microorganismos vivos que al ser administrados en cantidades adecuadas confieren beneficios al hospedero. Los probióticos han demostrado efectividad a través de parámetros microbiológicos, clínicos e inmunes en la periodontitis, y de esta forma ofrecen un nuevo acercamiento preventivo y terapéutico para el control de la enfermedad periodontal. Objetivos Determinar los efectos clínicos e inmunológicos en pacientes con periodontitis crónica tratados con terapia periodontal convencional no quirúrgica con y sin probiótico oral. Materiales y métodos Se realizó un ensayo clínico de diseño paralelo, aleatorizado, enmascarado y con control mediante placebo para determinar el efecto producido por el probiótico Lactobacillus rhamnosus SP1, dispensado en polvo de disolución oral, en conjunto con el tratamiento de pulido y alisado radicular (PAR). La muestra fue de 16 pacientes los que fueron divididos en 2 grupos, el primer grupo (probiótico) estuvo compuesto por 8 pacientes a los que se le realizó el tratamiento de PAR y consumieron el probiótico 1 vez por día por los 3 meses de estudio, el segundo grupo (control) estuvo compuesto por 8 pacientes a los que se les realizó el tratamiento de PAR y consumieron un placebo con el mismo régimen descrito para el grupo probiótico. Al inicio y al final del tiempo de estudio fueron medidos los parámetros clínicos y fueron recopiladas muestras de fluido crevicular gingival para determinar los parámetros inmunológicos mediante ELISA, los cuales fueron comparados intragrupo durante el tiempo de estudio y comparados intergrupos al inicio y al final del estudio. Resultados Al finalizar la intervención, en el grupo probiótico se observó una disminución significativa en la profundidad al sondaje, índice de sangrado e índice de placa, y un aumento significativo en la recesión gingival, respecto a lo obtenido al comienzo del estudio, no existiendo diferencias significativas entre ambos grupos al finalizar la intervención. Respecto a los parámetros inmunológicos, fue reportado un aumento significativo de los niveles de Interleuquina 8 en el grupo probiótico y control, al comparar los niveles al inicio y al final del estudio. Y al observar las mediciones de los niveles de interleuquina 17 se puede observar una diferencia significativa entre los grupos probiótico y control al finalizar el estudio. Conclusiones En conclusión, el presente estudio clínico sugiere que el tratamiento periodontal convencional de pulido y alisado radicular en combinación con la administración oral de la cepa probiótica Lactobacillus rhamnosus SP1, genera mejorías estadísticamente significativas en los parámetros inmunológicos de pacientes con periodontitis crónica, al ser comparados con un placebo.