Orientador: Fabiana Pilarski / Banca: Reinaldo José da Silva / Banca: Eduardo Makoto Onaka / Resumo: Esta revisão esclarece as perspectivas em relação aos tratamentos atuais e futuros de enfermidades de peixes. Atualmente, surto de doenças parasitárias e bacterianas tem atuado como importante fator limitante para a piscicultura. Com isso os produtores tem lançado mão de massivas quantidades de antimicrobianos e desinfetantes para controlar mortalidades e evitar grandes perdas econômicas. A terapêutica em doenças em peixes é vista com criticismo devido aos efeitos colaterais dos produtos disponíveis para uso nos dias de hoje, sendo necessários estudos de tratamentos alternativos eficazes e mais seguros. O uso de fitoterápicos na produção animal tem se mostrado promissor por serem produtos naturais, biodegradáveis e com atividade antimicrobiana contra diversos patógenos, inclusive de peixes. Em experimentos in vitro e in vivo, foi avaliado o potencial de três fitoterápicos contra um importante patógeno de peixe, Ichthyophthirius multifiliis. Foram utilizados os óleos essenciais de Melaleuca alternifolia, Lavandula angustifolia e Mentha piperita, os quais mostraram atividade in vitro contra I. multifiliis e o tratamento com o óleo essencial de M. alternifolia na água foi eficaz contra a doença causada por este parasito. Os três fitoterápicos apresentaram potencial como substitutos aos atuais tratamentos utilizados para controlar esta importante parasitose em peixe / Abstract: This study explains about prospects in relation to current and future treatments for fish diseases. Currently, outbreaks of parasite and bacterial diseases have acted as an important limiting factor for fish farming. So producers have made use of massive amounts of chemicals and antibiotics to control mortalities and avoid economic losses. The therapy of fish diseases is not well regarded due to the side effects of the products available for use today, thus, studies of safer and more effective alternative treatments are needed. The use of herbal medicines in animals has shown promising to be a natural, biodegradable and have antimicrobial activity against many pathogens, including fish. In in vitro and in vivo experiments, we evaluated the potential of three herbal medicines against an important pathogen of fish, Ichthyophthirius multifiliis. Essential oils of Melaleuca alternifolia, Lavandula angustifolia and Mentha piperita, showed in vitro activity against I. multifiliis. Treatment with the essential oil of M. alternifolia in water was effective against the disease caused by this parasite. These three herbal oils showed potential as replacements to current treatments used to control of this important parasitic disease in fish / Mestre

Através de Testes de Diluição em Sistema de Tubos Múltiplos determinou-se in vitro atividade antibacteriana em inflorescências de Achyrocline satureioides (Lam.) DC. – Asteraceae (“macela”, “marcela”), expressa como Intensidade de Atividade de Inibição Bacteriana (IINIB / bacteriostasia) e Intensidade de Atividade de Inativação Bacteriana (IINAB / bactericidia), a partir de formas de extração etanólica (hidroalcoolaturas) e hídrica (decoctos), sobre inóculos padronizados de Enterococcus faecalis (ATCC 19433), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Escherichia coli (ATCC 11229) e Salmonella Enteritidis (ATCC 11076). Enterococcus faecalis apresentou a maior sensibilidade, seguido por Staphylococcus aureus, enquanto Salmonella Enteritidis e Escherichia coli apresentaram-se mais resistentes. Dentre as formas de extração, a hidroalcoolatura apresentou capacidade de inibição e/ou inativação intensa e seletiva frente aos quatro inóculos bacterianos. Os decoctos mostraram-se completamente ineficazes frente às bactérias Gram-negativas, enquanto que as Gram-positivas apresentaram somente bacteriostasia/inibição. / Dilutions Tests in Multiple Tubes System were used to establish the antibacterial activity “in vitro” of inflorescences of Achyroclines satureioides (Lam.) DC. – Asteraceae – (“macela”, “marcela”), from ethanolic extracts (hydroalcoholics) and hydrics (decoction) on pattern baterial suspension such as Enterococcus faecalis (ATCC 19433), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Escherichia coli (ATCC 11229) and Salmonella Enteritidis (ATCC 11076) expressed as Intensity Activity of Bacterial Inhibition (IINIB) and Intensity Activity of Bacterial Inativation (IINAB). The mentioned extract showed to be more sensibility with Enterococcus faecalis, followed by Staphylococcus aureus, however Salmonella Enteritidis and Escherichia coli showed to be more resistent. Behind the extraction forms, the hydroalcoholic extract presented intense and selective inhibition and / or inactivation capacity in relation of the four agents. However the hydroalcoholic extract presented better antibacterial activity intensity (inhibition / inativation) in relation of the four bacterial suspensions. Decoctions showed to be completely without capacity in front of the Gram-negatives bacterias, on the other hand the Gram-positive the bacteriostasy / inhibition were observed.

Orientador: Filipe Pereira Giardini Bonfim / Banca: Pablo Forlan Vargas / Banca: Regina Marta Evangelista / Resumo: As plantas medicinais têm importância fundamental para a sociedade. Porém, o conhecimento e uso em larga escala estão mais voltados para as comunidades tradicionais, quilombolas e indígenas, que detêm as diversas formas de uso. Uma destas plantas é a ora-pro-nobis (Pereskia aculeata Mill.), hortaliça não convencional que possui alto potencial de utilização, com elevado potencial nutricional comparando-se com outras hortaliças importantes na culinária. Mesmo com o conhecimento ainda pouco expandido em relação à qualidade de determinadas plantas e o desenvolvimento dos fármacos sintéticos, as plantas medicinais permanecem como alternativa de tratamento, para fins terapêuticos e alimentos nutracêuticos. Neste sentido, a adubação é um ponto de extrema importância na produção das hortaliças, visto que, são culturas exigentes em manejo e nutrição. Sendo assim, objetivou-se neste estudo avaliar os efeitos dos diferentes níveis de composto orgânico, no cultivo, qualidade e conservação pós-colheita em mudas de ora-pro-nobis (Pereskia aculeata Mill.). Foram conduzidos dois experimentos distintos, diferindo a origem do composto orgânico, sendo estes: composto orgânico comercial e cama de frango. O trabalho foi desenvolvido nos Laboratórios de Plantas Medicinais e de Pós-colheita do Departamento de Horticultura da Faculdade de Ciências Agronômicas - FCA/UNESP, Campus de Botucatu-SP. O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado com 5 tratamentos e 4 repetições, cada parcela experimental constituída por uma planta. No experimento utilizando composto comercial, os tratamentos referem-se a diferentes doses do adubo orgânico, sendo: T1 - Solo + 0 kg m-2 (controle); T 2 - solo + 3 kg m-2 de composto orgânico comercial; T 3 - solo + 6 kg m-2 de composto orgânico comercial; T 4 - solo + 9 kg m-2 de composto orgânico comercial; T 5 - solo + 12 kg m-2 de ... / Abstract: Medicinal plants have an essential importance to society. However, the knowledge and large-scale use are more geared towards traditional communities, quilombola and indigenous, which hold various forms of use. One of these plants is orapro- nobis, an unconventional herb which has a high usage potential and high nutritional potential when compared with other important cooking herbs. Even if there is an unexpanded knowledge regarding the quality of some plants and the development of synthetic drugs so far, medicinal plants remain as an alternative treatment for therapeutic and nutraceutical foods purposes. In this sense, fertilization is an extremely important point on herbs production, considering they are demanding cultures in terms of managing and nutrition. Thus, it is our goal in this study to evaluate the effects of organic matter different levels, in ora-pro-nobis seedlings culture, quality and post-harvest conservation. Two distinct experiments were held, changing the origin of the matter, these being commercial organic matter and poultry manure. The work was developed in the Medicinal Plants and Post-Harvest Laboratories from the Agronomic Sciences University's Horticulture Department (FCA/UNESP) Botucatu - SP Campus. The desing we used was completely randomized with five treatments and four repetitions, each portion constituted by a plant. In the commercial matter experiment, the treatments refer to different doses of organic manure, such as: T1 - Soil + 0 kg m-2 (control); T2 - soil + 3 kg m-2 of organic commercial matter; T3 - soil + 6 kg m-2 of organic commercial matter; T 4 - soil + 9 kg m-2 of organic commercial matter; T 5 - soil + 12 kg m-2 of organic commercial matter. In the poultry manure experiment, the treatments also refer to different doses of organic manure, such as: T1 - Soil + 0 kg m-2 (control); T2 - soil + 2 kg m-2 of poultry manure; T3 - soil + 4 kg m-2 ... / Mestre

Orientador: Filipe Pereira Giardini Bonfim / Banca: Reiko Oliveira Higuti / Banca: Glyn Mara Figueira / Resumo: O presente trabalho teve por objetivo avaliar o efeito da rebrota na produtividade de biomassa e teor de alfa-humuleno em populações cultivadas de Varronia curassavica Jacq. (Boraginaceae), em diferentes latitudes, nos municípios de Parnaíba, estado do Piauí e Botucatu, estado de São Paulo. Ambas foram cultivadas a partir de sementes da mesma origem. Em Parnaíba, PI, esta avaliação foi realizada em função de adubação orgânica e diferentes tempos de rebrota. O experimento foi instalado em área agrícola do Grupo Centroflora, em condições de campo, sendo o delineamento experimental adotado em blocos casualizados, em esquema fatorial 4 x 2, sendo os fatores adubação (com ou sem adubação) e rebrota (60, 90, 120 e 150 dias de rebrota). Foram utilizadas 50 plantas úteis por tratamento. O espaçamento utilizado foi de 0,60m entre plantas e 2,70m entre linhas, seguindo o padrão de espaçamento já utilizado na produção em escala. Para obtenção das amostras a serem avaliadas, a altura de corte foi padronizada 0,30m acima do solo. As colheitas foram realizadas a partir do corte de uniformização seguido pelos diferentes tratamentos de avaliação de rebrota. A extração do óleo essencial foi realizada imediatamente após cada colheita, por arraste a vapor, sendo o tempo de extração padronizado em duas horas. As análises de determinação de teor de alfa-humuleno foram realizadas por Cromatografia Gasosa (CG). Os resultados encontrados no experimento de Parnaíba sugerem que a adubação orgânica não... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of regrowth on biomass productivity and alpha-humulene content in cultivated populations of Varronia curassavica Jacq. (Boraginaceae) in different latitudes, in the municipalities of Parnaiba, state of Piaui and Botucatu, state of Sao Paulo. Both were cultivated from seeds of the same origin. In Parnaiba, PI, this evaluation was based on organic fertilization and different regrowth times. The experiment was implemented under field conditions in an agricultural area of Centroflora Group. The experimental design was based on randomized blocks, with a 4 X 2 factorial scheme, where the factors were fertilization (with or without fertilization) and regrowth times (60, 90, 120 and 150 days). Fifty plants per treatment were used. The spacing was of 0.60m between plants and 2.70m between lines, following the pattern already used in large-scale production. To obtain the samples to be evaluated, the cutting height was standardized at 0.30m above the ground. The harvests were carried out starting from the standardization cut, followed by the different treatments and regrowth evaluation. The extraction of the essential oil was done immediately after each harvest through steam distillation, and the extraction time was standardized in two hours. The analyses to determine the alpha-humulene content were carried out through Gas chromatography (GC). The results found in the Parnaiba experiment suggest that the organic fertilization did not provide higher biomass productivity and alpha-humulene content. In the Botucatu-SP experiment, the experimental design adopted included 4 treatments in 5 randomized blocks, and harvests carried out 60, 90, 120 and 150 days after the initial standardization cut. The experiment was conducted from the previously existing population, with adult plants (2 years and three months old), and spacing between plants and lines of 0.60m X 1.80m... / Mestre

Orientador: Filipe Giardini Pereira Bonfim / Resumo: Stachytarpheta cayennensis (Rich.) Vahl é conhecida popularmente como gervão-roxo, utilizada na medicina popular por sua ação estomáquica, antipiréticos, doenças hepáticas crônicas, e por sua utilização na indústria na composição de um fitomedicamento para o tratamento do vitiligo. A ação terapêutica das plantas medicinais muitas vezes está atrelada a produtos de seu metabolismo secundário, sendo este influenciado diretamente por diversos fatores bióticos e abióticos. Diante disso, a aplicação de ferramentas que visem compreender a dinâmica de resposta das plantas e o ambiente faz-se necessária afim de fornecer subsídio para o cultivo e domesticação destas espécies. Dentre estas ferramentas está a fenologia, que avalia a resposta da planta a mudanças climatológicas, a anatomia que descreve a estrutura interna e a histoquímica que identifica e localiza as classes de compostos produzidos. Desse modo, o estudo teve como objetivo avaliar a resposta fenológica em resposta ao ambiente e a caracterização anatômica e histoquímica em Stachytarpheta cayennensis (Rich.) Vahl. O experimento foi realizado na área experimental do Departamento de Horticultura da Fazenda Experimental Lageado na Faculdade de Ciências Agronômicas da Universidade Estadual Paulista, em Botucatu-SP. Foram avaliados 52 indivíduos mensalmente de setembro/2018 a agosto/2019 quanto a resposta fenológica da espécie em relação as variações climáticas. Além disso, as folhas e flores foram coletadas, fixadas e analisadas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Stachytarpheta cayennensis (Rich.) Vahl is popularly known as purple gervão, used in folk medicine for its stomatal action, antipyretics, chronic liver diseases, and for its use in industry in the composition of a phytomedicine for the treatment of vitiligo. The therapeutic action of medicinal plants is often linked to products of their secondary metabolism, which is directly influenced by several biotic and abiotic factors. Therefore, the application of tools that aim to understand the response dynamics of plants and the environment is necessary in order to provide support for the cultivation and domestication of these species. Among these tools is phenology, which assesses the plant's response to climatological changes, the anatomy that describes the internal structure and the histochemistry that identifies and locates the classes of compounds produced. Thus, the study aims to evaluate the phenological response in response to the environment and the anatomical and histochemical characterization in Stachytarpheta cayennensis (Rich.) Vahl. The experiment was carried out in the experimental area of the Horticulture Department of Fazenda Experimental Lageado at the Faculty of Agronomic Sciences of Universidade Estadual Paulista, in Botucatu-SP. 52 individuals were evaluated monthly from September / 2018 to August / 2019 for the phenological response of the species in relation to climatic variations. In addition, the leaves and flowers were collected, fixed and analyzed for thei... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-02-22T16:58:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 938895 bytes, checksum: 382a06e0b19f8a91aa1a4772c2582330 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-22T16:58:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 938895 bytes, checksum: 382a06e0b19f8a91aa1a4772c2582330 (MD5) Previous issue date: 2004-02-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da temperatura de secagem (ar ambiente e ar aquecido a 40, 50, 60, 70 e 80 oC) no teor e na composição dos óleos essenciais de guaco e hortelã-comum, e também na cumarina do guaco. Para a secagem das espécies medicinais foi utilizado um secador de bandejas a gás (GLP). O teor e a composição dos óleos essenciais extraídos de cada espécie, depois de submetida à secagem, foi comparado com os valores obtidos da planta fresca (testemunha). Para a quantificação do teor de óleo essencial foi realizada a extração pelo método de hidrodestilação e a identificação da composição deste óleo foi realizada por cromatografia gasosa, acoplada ao espectrofotômetro de massas (CG- EM). A quantificação desta composição foi realizada por cromatografia gasosa, acoplada ao detector por ionização de chamas (CG-DIC). A extração da cumarina foi realizada pelo método a quente, em banho-maria a 65 oC, e a identificação e a quantificação foram realizadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Em função dos resultados obtidos pode-se concluir que a temperatura do ar mais adequada para a secagem de guaco e hortelã-comum deve ser igual a 50 oC. / The aim of the work was to evaluate the effect that the temperature of drying has on the contents and composition of the essential oils of guaco and mint-common, and also a coumarin of guaco. The temperatures used were ambient temperature and air heated to 40, 50, 60, 70, and 80 oC. For the drying of medicinal species a dryer containing trays, connected to a liquefied petroleum gas container (LPG) was used. The content and composition of essential oils extracted from each species, were submitted to drying, and afterwards were compared with the value obtained from the fresh control plant. To accomplish the quantification of the content of the essential oil, extraction by a hydro distillation method was done, while the identification of the composition of the oil was accomplished by gas chromatography combined with mass spectrometric (GC-MS). The quantification of this composition was then accomplished by gas chromatography along with flame ionization detection (GC-FID). The extraction of coumarin was accomplished by a heating method in a double-boiler at 65 oC, and the identification and quantification were achieved by high performance liquid chromatography (HPLC). From the obtained results one is able to conclude that for adequate drying of guaco and mint-common the air temperature must be equal to 50 oC. / Tese importada do Alexandria

Orientador: Wagner Vilegas / Banca: Ian Castro-Gambôa / Banca: Fernando Batista da Costa / Banca: Mitsue Haraguchi / Banca: André Luiz Meleiro Porto / Resumo: Neste trabalho foram estudadas a composição química e atividades farmacológicas de folhas de Alchornea glandulosa e Alchornea triplinervia (Euphorbiaceae) e partes aéreas de Indigofera truxillensis e Indigofera suffruticosa (Fabaceae), usadas na medicina popular brasileira no tratamento de problemas gástricos. Nos extratos clorofórmicos das espécies de Alchornea foram identificados estigmasterol, campesterol, sitosterol, lupeol, friedelan-3-ol, friedelan-3-ona e pteroginidina. O estudo dos extratos metanólicos das espécies de Alchornea forneceu ácido gálico, galato de metila, ácido carboxílico da brevifolina, amentoflavona, isocorilagina, miricetina 3-O-α-L-raminopiranosídeo, quercetina e quatro derivados glicosilados. Análise por FIA-ESI-IT-MS indicou a presença de derivados do ácido galoilquínico, elagitaninos e proantodicianidinas em A. triplinervia. Nos extratos clorofórmicos das espécies de Indigofera foram identificados índigo (indigotina) e indirubina. O extrato metanólico de I. truxillensis forneceu índigo, indirubina, indicana, pinitol, sitosterol 3-O-β-D-glicopiranosídeo e cinco derivados glicosilados do kaempferol, entre eles a substância inédita kaempferol 3-O-[α-Larabinopiranosil-( 2→1)-α-L-apiofuranosil] -7-O-α-L-raminopiranosídeo. O extrato metanólico de I. suffruticosa forneceu as mesmas substâncias descritas para I. truxillensis, exceto derivados do kaempferol, além do ácido gálico, alantoína e quatro derivados glicosilados da quercetina. Deste extrato também foram isoladas as substâncias inéditas 6'-metoxi 2, 5, 6-triidroxiisoindirubina, indigotina-3-O-β-D- glicopiranosídeo, dioxindol-3-O-β-D-glicopiranosídeo e quercetina 3-O-β-Dglicopiranosil-[( 4→1)-α-L-raminopiranosil]- (6→1)-α-L-apiofuranosídeo. O uso de FIA-ESI-ITMS possibilitou a identificação de glicerolipídeos, enquanto o emprego de HPLC-ESI-IT-MS permitiu...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In this work we studied the chemical composition and pharmacological activities of the leaves of Alchornea glandulosa and A. triplinervia (Euphorbiaceae), as well as aerial parts of Indigofera truxillensis and I. suffruticosa (Fabaceae), used in Brazilian folk medicine against gastric problems. In the chloroform extracts of the Alchornea species we identified stigmasterol, campesterol, sitosterol, lupeol, friedelan-3-ol, friedelan-3-one and pterogynidine. The study of the methanolic extracts of the Alchornea species afforded gallic acid, methyl gallate, brevifolin carboxylic acid, amentoflavone, isocorilagin, miricetin 3-O-α-L-rhamnopyranoside, quercetin and four glycosilated derivatives. Analyses by FIA-ESI-IT-MS helped to detect the presence of galloylquinic acid derivatives, ellagitannins and proanthodicyanidins in A. triplinervia. The chloroform extract of both Indigofera species led to the identification of indigo (indigotin) and indirubin. The methanolic extract of I. truxillensis gave indigo, indirubin, indican, pinitol, sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside and five glycosilated kaempferol derivatives, among them the new substance kaempferol 3-O-[β-D-apiofuranosyl-(1→2)-α-L- arabinopyranoside]-7-O-α- L-rhamnopyranoside. The methanolic extract of I. suffruticosa contained the same substances described for I. truxillensis, except for kaempferol derivatives, besides gallic acid, allantoin and four quercetin derivatives, besides the new substances 6'-methoxy-2,5,6- trihydroxiisoindirubin, indigotin-3-O-β-D-glucopyranoside, dioxindol-3-O-β-D-glucopyranoside and quercetin-3-O-[α- L-rhamnopyranosyl-(1→4)-[β-D-apiofuranosyl-(1→6)]-β-D-glucoyranoside. The use of FIAESI- IT-MS led the identification of glicerolipids, whereas the use of HPLC-ESI-IT-MS allowed to establish the chemical fingerprint of these species. The Alchornea species presented ...(Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Lin Chau Ming / Banca: Maria Christina de Mello Amorozo / Banca: Valdely Ferreira Kinupp / Banca: Izabel de Carvalho / Banca: Filipe Pereira Giardini Bonfim / Resumo: Mais de 3,3 milhões de pessoas no mundo estão expostas a malária. Os medicamentos utilizados no combate à doença já apresentam sinais de resistência. No Brasil 99% dos casos acontecem na Amazônia legal. É uma doença endêmica da região do Alto rio Negro, considerada uma região cultural sui generis, onde mais de 90% dos habitantes são indígenas, falantes de 23 línguas, e a floresta é preservada e pouco conhecida pela ciência acadêmica. É o primeiro trabalho etnobotânico sobre plantas antimaláricas na região. As negociações para obtenção de autorização de pesquisa foram intensas entre os anos de 2010 e 2013, a pesquisa de campo foi realizada entre setembro de 2011 e julho de 2012 e setembro a novembro de 2013 em cinco comunidades indígenas. Foram registradas 46 espécies utilizadas no tratamento da malária pertencentes a 24 famílias botânicas, a maioria nativa do domínio fitogeográfico da Amazônia. As percepções culturais acerca da doença foram registradas, assim como o nome de algumas plantas nas principais línguas da região e foi feito um estudo de fitonímia da Língua Geral Amazônica. Das 46 espécies 14 possuem estudos científicos comprovando sua atividade antimalárica e 25 podem ser consideradas interessantes para estudos científicos futuros. Apenas cinco espécies apresentaram consenso de uso. O grande número de espécies nativas utilizadas, os fatores históricos e as percepções culturais dos participantes a cerca da doença demonstram que há conhecimento local e sua aplicação, assim com a necessidade de proteção ambiental e cultural da área, e a urgência de programas que promovam a cultura medicinal local e auxiliem o entendimento intercultural / Abstract: More than 3.3 million people worldwide are exposed to malaria. The drugs used in combating the disease already show signs of resistance. In Brazil 99% of cases occur in Legal Amazônia. It is an endemic disease in the Upper Negro River considered a sui generis cultural region, where more than 90 % of inhabitants are native speakers of 23 languages, and the forest is preserved and unknown to science. It is the first ethnobotanical work on antimalarial plants in the region. Negotiations for obtaining research permission were intense between 2010 and 2013. And the fieldwork was carried out between September 2011 and July 2012 and September and November 2013, in five indigenous communities . 46 species are used to treat malaria were recorded belonging to 24 botanical families, most native of the Amazon phytogeographical area. Cultural perceptions of the disease were recorded, as well as the name of some plants in the two major languages of the region and a study of fitonímia in Língua Geral Amazônica was made. 14 of the 46 species have scientific studies proving its antimalarial activity and 25 can be considered interesting for future scientific studies. Only five species showed consensus in use. The large number of native species used and cultural perceptions of the participants about the disease demonstrate that there is local knowledge and its application as the need for environmental and cultural protection of these area, and the urgency of programs that promote the local medical culture and assist intercultural understanding. / Doutor

As raízes de Pfaffia paniculata (Ginseng brasileiro) são comercialmente encontradas como cápsulas contendo as raízes pulverizadas, misturadas ou não ao extrato etanólico destas raízes. Estas raízes são popularmente recomendadas para vários propósitos, e têm sido utilizadas na terapia contra o câncer pela medicina popular. Os principais componentes encontrados nestas raízes já isolados incluem o ácido pfáffico e os pfaffosideos A, C, D, E e F; estes componentes inibiram o crescimento de células do melanoma B-16, demonstrado em um outro estudo. O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos dos extratos etanólico, butanólico ou aquoso das raízes de Pfaffia paniculata sobre o crescimento das linhagens tumorais de células mamárias humanas MCF-7 e SKBR-3, utilizando método colorimétrico (cristal violeta) e quantificação das células que incorporaram bromodeoxiuridina (BrdU). A coloração por laranja de acridina/brometo de etídeo foi utilizada para avaliar morte celular, e as alterações subcelulares foram avaliadas por microscopia eletrônica. O extrato butanolico apresentou efeitos citotóxicos nas linhagens MCF-7 e SKBR-3. Morte celular foi observada pelo tratamento com o extrato butanólico por 1 h; alterações morfológicas foram observadas com 500µg/mL deste extrato, após 24 h de tratamento. Após o tratamento por 48 h com o extrato butanólico nesta mesma concentração, foi observado degeneração de componentes citoplasmáticos e alterações morfológicas sugestivas de morte celular. O tratamento com 1000µg/mL deste extrato levou a profundas alterações citoplasmáticas e nucleares, incompatíveis com a viabilidade celular. O tratamento com o extrato etanólico não causou efeitos significantes no crescimento das células MCF-7 e SKBR-3; o extrato aquoso, por outro lado, estimulou o crescimento das células MCF-7, após o tratamento por 1 h. Estes resultados indicam efeitos citotóxicos exercidos pelo extrato butanólico das raízes de Pfaffia paniculata em linhagens celulares de tumor de mama humano / The roots of Pfaffia paniculata (Brazilian ginseng) are commercially available as capsules containing the powdered roots, mixed or not with the ethanolic extract of the roots. These roots have been populary recommended for many purposes, and have also been used on cancer therapy by folk medicine. The main components found in these roots that have already been isolated include pfaffic acid and pfaffosides A, C, D, E and F; these components inhibited the growth of melanoma B-16 cells, as shown in another study. The aim of this study was to investigate the effects of ethanolic, butanolic or aqueous extract of the roots of Pfaffia paniculata on the growth of human breast tumor cell lines MCF-7 and SKBR-3, using a colorimetric method (crystal violet) and quantification of bromodeoxiuridine (BrdU) positive cells. Acridine orange/ethidium bromide staining was utilized to evaluate cell death, and subcellular alteration was evaluated by electron microscopy. The butanolic extract presented cytotoxic effects in MCF-7 and SKBR-3 cell lines. Cell death was observed following treatment with the butanolic extract for 1 h; morphologic alterations were observed with 500µg/mL of this extract, after 24 and 48 h of treatment. Following treatment for 48 h with the butanolic extract with this same concentration, degeneration of cytoplasmic components and morphological alterations suggestive of cell death were observed. Treatment with 1000µg/mL of this extract lead to profound cytoplasmic and nuclear alterations, incompatible with cell viability. The treatment with ethanolic extract didn´t lead to significant effects on the growth of MCF-7 and SKBR-3 cells; the aqueous extract, on the other hand, stimulated the growth of MCF-7 cells, following treatment for 1 hour. These results point to cytotoxic effects exerted by the butanolic extract from the roots of Pfaffia paniculata on human breast tumor cell lines

Considerando que diversas atividades biológicas dos ácidos clorogênicos já foram descritas na literatura, uma melhor compreensão da biossíntese e do acúmulo desses polifenois nas plantas está diretamente vinculada aos parâmetros de qualidade de fitoterápicos. Este trabalho teve o objetivo de monitorar a variação na concentração de metabólitos secundários do grupo dos ácidos clorogênicos no tecido foliar de diversas espécies diante de diferentes tratamentos pós-coleta. Este monitoramento foi realizado através da quantificação das substâncias por cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas em sequência (CLUE-EM/EM). Na primeira fase do estudo, foram coletadas folhas de cada espécie selecionada para o estudo (Caju - Anacardium occidentale L.; Graviola - Annona muricata L.; Pata-de-Vaca - Bauhinia variegata L.; Limão - Citrus limon (L.) Burm. f.; Café - Coffea arabica L.; Pitanga - Eugenia uniflora L.; Alecrim - Rosmarinus officinalis L., e Jambolão - Syzygium cumini (L.) Skeels). As folhas foram submetidas a um processo de extração e os extratos obtidos foram analisados por CLAE-EM/EM. Foram encontradas nove substâncias monossubstituídas nas posições 3, 4 e 5 pertencentes aos subgrupos dos ácidos p-cumaroilquínicos, cafeoilquínicos e feruloilquínicos dos ácidos clorogênicos, além de ácidos dicafeoilquínicos. A identificação dos sinais cromatográficos foi realizada por meio dos padrões de fragmentação de cada composto. Na segunda fase do estudo, foram coletadas quatro folhas dos indivíduos em estudo. As folhas foram congeladas em nitrogênio líquido (para interrupção do metabolismo) em tempos diferentes: imediatamente após a coleta (T0), 30 min após a coleta (T0,5), 1 h após a coleta (T1) e 2 h após a coleta (T2). Este procedimento foi realizado uma vez por mês durante seis meses. Em outro momento foram retiradas seis folhas de três indivíduos de espécies selecionadas (Alecrim, Pitanga, Pata-de-Vaca, Limão e Café) e cada folha foi congelada nos tempos T0 (imediatamente após a coleta), T6 (6 h após a coleta), T12 (12 h após a coleta), T24 (24 h após a coleta), T48 (48 h após a coleta) e Ts (após secagem das folhas - aproximadamente 30 dias após a coleta). O material coletado foi extraído e analisado por CLUE-EM/EM, no modo MRM. O método analítico quantitativo foi validado, considerando os parâmetros de linearidade, exatidão e precisão. As concentrações dos ácidos clorogênicos em estudo não apresentaram um padrão de variação que se relacione com os tempos de tratamento ou um aumento linear nas respostas dentro do intervalo de 2 h após o início do catabolismo do tecido. As amostras com tempos de tratamento mais longo, por sua vez, apresentaram aumento significativo de diversos compostos nas folhas que não tiveram seu metabolismo interrompido 30 dias após a coleta. Este acúmulo de ácidos clorogênicos corrobora a hipótese de que o aumento da concentração destes compostos pode estar relacionado ao catabolismo de polímeros fenólicos de maior massa. / Considering that diverse chlorogenic acids\' biological activities have been described, a better understanding of their biosynthesis and accumulation is closely related to phytotherapics\' quality parameters. This research aimed to monitor the variation on the concentration of secondary metabolites from the chlorogenic acids\' group on the leaf\'s tissue of diverse species, towards different post-harvest treatments. The monitoring was performed through the quantification of the compounds by UPLCMS/ MS. On the first phase of the project, leaves from each selected species (Cashew - Anacardium occidentale L.; Soursop - Annona muricata L.; Pata-de-Vaca - Bauhinia variegata L.; Lemon - Citrus limon (L.) Burm. f.; Coffee - Coffea arabica L.; Cherry - Eugenia uniflora L.; Rosemary - Rosmarinus officinalis L., and Jambolan - Syzygium cumini (L.) Skeels) were harvested. This material was submitted to an extraction process, and the obtained extracts were analyzed by HPLC-MS/MS. Nine substances were found, monossubstituted on positions 3-, 4- and 5-, belonging to the subgroups of p-coummaroylquinic, caffeoylquinic and feruloylquinic acids, in addition to dicaffeoylquinic acids. The chromatographic signals\' identification was preceded observing the fragmentation pattern of each compound. On the second phase of the study, four leaves were collected from each individual. The leaves were frozen with liquid nitrogen (to interrupt the metabolism) on different moments - immediately after the collection (T0), 30 min after de collection (T0,5), 1 h after the collection (T1) and 2 h after the collection (T2). This procedure happened once a month during six months. On August, 2016, a different collection was performed for a broader observation: six leaves were harvested from three individuals from selected species (Rosemary, Cherry, Pata-de-Vaca, Limon and Coffee), and each leave was frozen on T0 (immediately after the collection), T6 (6 h after the collection), T12 (12 h after the collection), T24 (24 h after the collection), T48 (48 h after the collection) and Ts (after leaf\'s drying - approximately 30 days after collection). The harvested material was extracted and analyzed by UPLC-MS/MS, on MRM mode. The analytical method was validated for linearity, accuracy and precision. Chlorogenic acids\' concentrations did not show a pattern of variation that related to the different treatments or a linear increase on response until 2 hours after the beginning of the tissue catabolism. The samples submitted to a broader treatment interval, however, showed a significant rise on the concentration of different compounds, on leaves that did not have their metabolism interrupted until 30 days after the collection. This accumulation of chlorogenic acids agrees with the hypothesis that the raise on the concentration of these substances can be related to the catabolism of polymeric phenols of higher mass.