nÃo hà / Algas marinhas sÃo seres classificados no reino protista, predominantemente aquÃticos e com grande capacidade adaptativa. Encontradas em todas as regiÃes do planeta, as algas desempenham importante papel ecolÃgico e econÃmico, representando um grande potencial de biorrecursos. A alga marinha vermelha Gracilaria birdiae, submetida à extraÃÃo aquosa de polissacarÃdeos, apresentou rendimento de 6,4% na fraÃÃo extraÃda à temperatura ambiente (25-28 ÂC) (Gb-f), e 56 % na fraÃÃo extraÃda a 100 ÂC (Gb-q). O teor de sulfato nas fraÃÃes Gb-f e Gb-q apresentaram valores de 6,4 e 1,36%, respectivamente. O grau de sulfataÃÃo de Gb-f foi de 0,22, enquanto Gb-q apresentou valor de 0,04. O conteÃdo protÃico encontrado nas amostras Gb-f e Gb-q foi de 7,6 e 2,0 %, respectivamente. As amostras foram caracterizadas quimicamente por cromatografia de permeaÃÃo em gel (GPC), espectroscopia na regiÃo do infravermelho (FT-IR) e por ressonÃncia magnÃtica nuclear (RMN). Os cromatogramas de GPC de ambas as amostras apresentaram semelhanÃas e caracterÃsticas tÃpicas de polissacarÃdeos das algas vermelhas. A fraÃÃo Gb-f apresentou um pico e um ombro com massas moleculares estimadas em 1,11 x 106 e 1,26 x 105 g/mol, respectivamente, enquanto a fraÃÃo Gb-q tambÃm apresentou um pico e um ombro com massas moleculares estimadas em 3,18 x 105 e 1,09 x 105g/mol, respectivamente. Os espectros de infravermelho das fraÃÃes Gb-f e Gb-q apresentaram perfis semelhantes, com as bandas caracterÃsticas de agarocolÃides, mais especificamente, do tipo agarana, e com traÃos que evidenciam a presenÃa de proteÃnas. RMN 1 D e 2 D foram empregados para a caracterizaÃÃo estrutural das amostras Gb-f e Gb-q e, revelaram que a estrutura do polissacarÃdeo à composta por segmentos de (1→ 3)-β-D-galactopiranosil ligada a (1→4)-α-L-anidrogalactopiranosil. A avaliaÃÃo toxicolÃgica aguda, em camundongos, demonstrou ausÃncia de mortalidade e de sinais de toxicidade nos indivÃduos submetidos ao tratamento com polissacarÃdeo, por via intraperitoneal, nas doses de 0,5; 1,0 e 2,5 mg/100g de massa corpÃrea. A avaliaÃÃo toxicolÃgica sub-crÃnica tambÃm nÃo evidenciou sinais de toxicidade em ratos, na dose de 50 mg/100g de massa corpÃreo, por via oral, tendo como parÃmetros avaliados: acompanhamento dos massa dos animais durante 90 dias de tratamento, anÃlises hematolÃgicas e bioquÃmicas (contagem de leucÃcitos, dosagem de glucose, proteÃnas totais, creatinina, colesterol, AST e ALT) e histopatolÃgicas (baÃo, fÃgado, rim, pulmÃo, coraÃÃo, estÃmago e intestino). / Seaweeds beings are classified in the Kingdom Protist, predominantly aquatic and with great adaptive capacity. Found in all regions of the planet, algae play an important role ecological and economic, representing a great potential for biorrecursos. The red seaweed Gracilaria birdiae, submitted to aqueous extraction of polysaccharides, showedyield of 6.4% in the cold extraction (25-28 ÂC) (Gb-f), and 56 % in the hot extraction, at 100 ÂC (Gb-f). The sulfate content of the fractions Gb-f and Gb-q showed values of 6.4 and 3.6 %, respectively. The sulfate degree of Gb-f was 0.22, whereas Gb - q showed value of 0.04. The protein content in the samples Gb - f e Gb - q was 7.6 and 2.0%, respectively. The samples were characterized by Gel Permeation Chromatography (GPC), Infrared (FT-IR) and Nuclear Magnetic Resonance (NMR) spectroscopy. The GPC chromatograms of both samples showed similarity and typical characteristics of red seaweeds polysaccharides. The fraction Gb-f showed a peakand a shoulder with molecular weight of 1.11 x 106 and 1.26 x 105 g/mol, respectively, whereas, the fraction Gb - q showed both a peak and a shoulder, with molecular weight of 3.18 x 105 and 1.09 x 105 g/mol, respectively. The infrared spectra of Gb-f and Gb-q presented s imilar profiles, with bands characteristics of agarocolloids, more specifically agaran - like, with evidence of protein. NMR 1 D and 2 D were employed to the structural characterization of the samples Gb - f and Gb - q and revealed that they were composed by (1 →3) - β - D - galactopyranosyl linkage to (1→4) - α - L - anhydrogalactopyranosyl segments. The acute toxicological evaluation in mice demonstrated the absence of signs of toxicity with no mortality in the groups submited to polysaccharides treatment, by intraperitone al way, at doses of 0.5; 1.0 e 2.5 mg/100g of body weight. The sub chronic toxicological analysis evidenced no toxicity signs in rats, in the 50 mg/g body weight dosage, by oral way. The parameters evaluated were: animal body followed during 90 days of exp eriment, hematological and chemical analysis (counting of leukocities, glucose, total protein, creatinnin, cholesterol, AST and ALT dosages) and hystopatological analyses (spleen, liver, kidney, lung, hearth, stomach and gut).

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Com base na necessidade de obter novas formulaÃÃes mais eficientes e diante das propriedades apresentadas pelas molÃculas oriundas de algas marinhas, acredita-se que estas possam ser eficazes no processo de cicatrizaÃÃo. A lectina da alga marinha vermelha Pterocladiella capillacea (PcL) e os polissacarÃdeos da alga vermelha Solieria filiformis (SfP) inicialmente foram analisados em ensaio de toxicidade. PcL foi aplicada no ensaio do edema de pata seguido da dosagem de mieloperoxidase (MPO). Avaliou-se o efeito da lectina da alga Pterocladiella capillacea (PcL) e os polissacarÃdeos das algas Solieria filiformis (SfP) na cicatrizaÃÃo de feridas induzidas em ratos. Ambas as molÃculas foram submetidas a ensaios microbiolÃgicos e analisadas quanto ao efeito no processo de cicatrizaÃÃo em feridas limpas induzidas no dorso de ratos. SfP foi utilizado como um possÃvel veÃculo para a administraÃÃo de PcL e comparado ao Carbopol 940 (C). Os gÃis (0,9%) foram submetidos a anÃlise reolÃgica e entÃo aplicados nas lesÃes durante um perÃodo de tratamento de 10 (dez) dias, utilizando kollagenase como controle. O processo de cicatrizaÃÃo foi avaliado quanto ao tamanho das feridas, dosagem de MPO e anÃlise histolÃgica. PcL e SfP nÃo demonstraram toxicidade quanto aos parÃmetros de peso corpÃreo, ÃrgÃos e dosagens bioquÃmicas. Entretanto a anÃlise histolÃgica mostrou pequenas alteraÃÃes no fÃgado e rim. PcL (1, 3 e 9 mg/kg, i.v.) reduziu o edema induzido por carragenana e quando administrada com seu inibidor mucina nÃo foi possÃvel verificar a reduÃÃo do edema o qual foi confirmado pela dosagem de MPO. As duas molÃculas foram aplicadas em ensaios microbiolÃgicos e nÃo inibiram o crescimento de nenhum micro-organismo testado, os quais tambÃm nÃo foram capazes de utilizar SfP como fonte de carbono. A anÃlise reolÃgica mostrou que os SfP utilizados na formulaÃÃo dos gÃis (PcL+SfP e SfP) apresentaram a caracterÃstica de um pseudoplÃstico. A anÃlise macroscÃpica das feridas mostrou uma reduÃÃo da Ãrea da lesÃo nos animais tratados com PcL+SfP e PcL+C (53,5 e 60%, respectivamente) no sexto dia de administraÃÃo. Na anÃlise histolÃgica, nÃo foi observado infiltrado inflamatÃrio acentuado nos tecidos obtidos atà o 4 dia da administraÃÃo dos gÃis (PcL+SfP e PcL+C) e Kollagenase (controle positivo). No 6 dia, os animais nÃo tratados e os tratados apenas com SfP mostraram infiltrado inflamatÃrio. A dosagem de MPO demonstrou reduÃÃo no processo inflamatÃrio nas amostras contendo PcL, cujo resultado corrobora com a anÃlise histolÃgica. Em conclusÃo, PcL auxiliou no reparo de feridas, sugerindo seu uso futuro como uma possÃvel ferramenta para o tratamento de lesÃes. O papel biolÃgico e farmacolÃgico das lectinas e polissacarÃdeos de algas marinhas faz parte de uma Ãrea de estudos ainda pouco explorada, onde muito conhecimento deverà ser investido visto que estas biomolÃculas podem ser promissoras para a indÃstria farmacÃutica. / Based on the need for new formulations that are more efficient and on the properties provided by molecules derived from seaweed, it is believed that these can be effective in healing process. The lectin from the red seaweed Pterocladiella capillacea (PcL) and the polysaccharides of red algae Solieria filiformis (SfP) were initially analyzed in toxicity testing. PcL was applied to the paw edema test followed by measurement of myeloperoxidase (MPO). We evaluated the effect of the seaweed Pterocladiella capillacea lectin (PcL) and algal polysaccharides Solieria filiformis (SfP) in healing wounds in rats induced. Both molecules were submitted to microbiological tests and assayed for the effect on wound healing in wounds clean induced on the back of rats. SfP was used as a possible vehicle for the administration of PcL and compared to Carbopol 940 (C). The gels (0.9%) were analyzed rheological and then applied to the lesions during a treatment period of 10 days, using kollagenase  as control. The healing process was evaluated on the size of the wounds, levels of MPO and histological analysis. The molecule SfP and PcL is not toxic for the parameters of body weight, organ and biochemical measurements. However, the histological analysis showed minor changes in liver and kidney. PcL (1, 3 and 9 mg / kg, i.v) reduced the edema induced by carrageenan and its inhibitor when administered with mucin was not possible to check the reduction of edema which was confirmed by measurement of MPO. The two molecules were used in microbiological assays and not inhibit growth of any microorganism tested and unable to use SfP as carbon source. The rheological analysis showed that the SfP used in the formulation of the gels (PcL+SfP and SfP) had the characteristic of a pseudoplastic. Macroscopic analysis of wounds showed a reduction in lesion area in the animals treated with PCL, PCL+SfP, PCL+C (53.5 and 60% respectively) on the sixth day of administration. In histological analysis, there was no severe inflammatory infiltrate in the tissues obtained until 4th day of administration of the gels (PcL and PcL+SfP, PcL+C) and Kollagenase (positive control). On day 6, the untreated animals and those treated only with SfP showed inflammatory infiltrate. The measurement of MPO showed a reduction in the inflammatory process in the samples containing PcL, whose results corroborate the histological analysis. In conclusion, PcL aid in wound repair, suggesting its use as a possible future tool for the treatment of lesions. The biological and pharmacological role of lectins and polysaccharides of seaweed is part of a study area little explored, where a lot of knowledge should be invested since these biomolecules can be promising for the pharmaceutical industry.

Universidade Federal do Cearà / The demand for biodegradable materials extracted from renewable sources that have high performance and lower cost is increasingly growing. The galactomannan extracted from Cassia fistula seeds was characterized by several methodologies: Elemental Analysis; Protein content; Uronic acid content; Gel Permeation Chromatography (GPC); Intrinsic Viscosity; Rheological Studies;Turbidity; Thermogravimetry; Infrared and 1H, 13C NMR. The yield of the extraction was 26.5 % m/m. The values obtained for protein content, humidity and uronic acid content were: 2.5%, 11.9% and 3.6% respectively. The values of molar weight (Mw = 2.2 x106g/mol) and intrinsic viscosity (9.73 dL/g) found for GCF were close to those from locusta bean galactomannan. For galactomannan of locusta bean is the second galactomannan commercializes most in the world, for this reason a comparative between GCF was done andGLB. The rheological analysis showed that GCF solutions exhibited pseudoplastic behavior at concentrations higher than 1%. Thermogravimetry analysis for GCF showed three events: 1 related to water loss; 2 related to matter decomposition and the 3 related to loss of organic matter which is more resistant to degradation. The infrared spectrum showed characteristic bands for polysaccharide and the 1H and 13C NMR spectra showed galactomannan characteristic peaks. The ratio mannose/galactose of GCF determined by 1H NMR spectrum analysis was 3.2, value close to that one from locusta bean galactomannan. The GCF was modified by reacting with sodium periodate at several concentrations to obtain the modified polysaccharide with oxidation degrees of: 10%; 20%; 50%; 65% and 80% [(periodate molar rate/glycosidic unities) x100]. The yield values obtained for the reactions were around 70% w/w. The oxidated materials were characterized by Rheology; GPC and 1H ,13C NMR. It was observed a decrease of molar mass (Mw) of 2.3 x 106 g/mol (GCF) to 6.4 x 104 g/mol (GCFO10%). As the degree of oxidation increases there is a reduction of the molecular weight, confirming that there was a degradation of the polymeric chain by the oxidation reaction with sodium periodate. The rheological analysis for 1% (w/v) non-modified GCF solutions and of GCFOXâs showed a reduction of apparent viscosity with oxidation degree increase (at 596 s-1): of 60.0 mPa.s (GCF) to 14 and 1.7 mPa.s (GCFO10) and 80%, respectively. The 1H NMR spectra showed for samples until 20% a few signals on anomeric range, when compared with samples with oxidation degree higher than 50 %. The ratio Man/Gal increased from 3.2 for the original sample to 3.3 and 4.6 for those samples of 10 and 20%, respectively. That increase means that the oxidation takes place preferably at the galactose units. / A procura por materiais biodegradÃveis, extraÃdos de fontes enovÃveis que apresentem alto desempenho e um menor custo à cada vez mais rescente. A galactomanana extraida das sementes de Cassia fistula (GCF) foi caracterizada atravÃs das anÃlises elementar; teor de proteÃna; teor de Ãcido urÃnico;cromatografia de permeaÃÃo em gel; viscosidade intrinseca; estudos reolÃgicos; turbidez; anÃlise termogravimÃtrica; espectroscopica na regiÃo do infravermelho e RMN de 1H e 13C. O rendimento da extraÃÃo foi de 26,5 % em massa. Os valores de teor de proteÃna, umidade e Ãcido urÃnico obtidos foram de 2,5%, 11,9% e 3,6%, respectivamente. O valor da massa molar mÃdia (Mw) (2,2 x 106 g/mol) e viscosidade intrÃseca (9,73 dL/g) encontrado para GCF foram prÃximos aos valores encontrados para galactomanana de locusta bean. As anÃlises reolÃgicas mostraram que as soluÃÃes de GCF apresentam comportamento pseudoplÃtico em concentraÃÃes acima de 1% m/v. Na anÃlise termogravimÃtrica a amostra de GCF apresentou trÃs eventos, o 1 referente à perda de Ãgua; o 2 evento referente à decomposiÃÃo da matÃria e o 3 evento referente à perda da matÃria orgÃnica mais resistente a degradaÃÃo. O espectro de infravermelho mostrou bandas caracterÃsticas de polissacarÃdeo e os espectros de RMN de 1H e 13C mostraram picos caracterÃsticos de galactomanana. A razÃo manose/galactose da GCF determinado pelo espectro de RMN de 1H foi de 3,2 razÃo prÃxima a galactomanana de locusta bean (GL). A galactomanana da locusta bean à a segunda galactomanana mais comercializada no mundo, por essa razÃo foi feito um comparativo entre a GCF e a GL. A GCF foi modificada atravÃs da reaÃÃo com periodato de sÃdio em vÃrias concentraÃÃes para obter o polissacarÃdeo modificado com graus de oxidaÃÃo de 10%; 20%; 50%; 65% e 80% [(razÃo molar de periodato/unidades glicosÃdicas)x100]. Os valores obtidos do rendimento das reaÃÃes foram em torno de 70% em massa. Os materiais oxidados foram caracterizados atravÃs das anÃlises reolÃgicas, por GPC e RMN 1H e 13C. Observa-se uma diminuiÃÃo da massa molar (Mw) de 2,3 x 106 g/mol da GCF para 6,4 x 104 g/mol da galactomanana de Cassia fistula oxidada a 10% GCFO10%).A medida que aumenta o grau de oxidaÃÃo ocorre uma reduÃÃo da massa molar, confirmando que houve uma degradaÃÃo da cadeia polimÃrica pela reaÃÃo de oxidaÃÃo com o periodato de sÃdio. A anÃlise reolÃgica de soluÃÃes 1% (m/v) de GCF nÃo modificada e das galactomananas de Cassia fÃstula oxidadas (GCFOXâs) mostrou uma reduÃÃo da viscosidade aparente com o aumento do grau de oxidaÃÃo: de 60,0 mPa.s da GCF para 14 e 1,7 mPa.s da GCFO10% e GCFO80%, respectivamente. Os espectros de RMN 1H mostraram que para as amostras com o grau de oxidaÃÃo atà 20% aparecem poucos novos sinais na regiÃo de anomÃrico, quando comparados com as amostras com grau de oxidaÃÃo acima de 50%. A razÃo Man/Gal aumenta de 3,2 da amostra original para 3,3 e 4,6 nas amostras de 10 e 20%, respectivamente. Esse aumento indica que a oxidaÃÃo ocorre preferencialmente nas unidades de galactose.

nÃo hà / PolissacarÃdeos sulfatados de algas marinhas sÃo polÃmeros heterogÃneos que representam biomolÃculas de interesse comercial, principalmente nas indÃstrias alimentÃcia e farmacÃutica. O presente trabalho teve como finalidade avaliar os efeitos dos polissacarÃdeos sulfatados totais (PST) da alga marinha verde Caulerpa mexicana em modelos clÃssicos de nocicepÃÃo e inflamaÃÃo aguda em animais. Foram utilizados camundongos Swiss machos (18-25 g) e ratos Wistar machos (120-260 g). O rendimento de PST obtidos da extraÃÃo por digestÃo enzimÃtica foi de 1,7%. Na anÃlise por espectroscopia na regiÃo do infravermelho foram caracterizados como polissacarÃdeos contendo, principalmente, galactose sulfatada e Ãcido urÃnico. Os PST da alga C. mexicana foram capazes de reduzir (p<0,05) o nÃmero de contorÃÃes abdominais induzidas por Ãcido acÃtico (1%) em 31,8; 74,5 e 88,9% nas doses de 5, 10 e 20 (mg/kg; i.v.), respectivamente. No teste da formalina, os PST inibiram (p<0,05) o tempo de lambedura da pata somente na segunda fase do teste (88,6 e 98,5% para as doses 10 e 20 mg/kg; i.v., respectivamente). No teste da placa quente, os PST nÃo demonstraram efeito antinociceptivo no decorrer dos 90 minutos do teste. Desta forma, os resultados sugerem que os PST exerceram um efeito antinociceptivo de aÃÃo perifÃrica. Em adiÃÃo, os PST (5, 10 e 20 mg/kg) apresentaram efeito anti-inflamatÃrio quando administrados por via s.c. em ratos Wistar no modelo de edema de pata induzido por carragenana, dextrana e histamina. Para analisar o envolvimento da via heme oxigenase (HO) no efeito anti-inflamatÃrio dos PST (20 mg/kg; s.c.), os animais foram prÃ-tratados por via s.c. com um inibidor de HO especÃfico (zinco protopofirina IX). Os resultados obtidos demonstraram que os PST foram capazes de reduzir o edema de pata induzido por carragenana na terceira hora, cujo resultado foi comprovado pela quantificaÃÃo da mieloperoxidase. AlÃm disso, os PST reduziram o edema induzido por dextrana ou histamina em modelos de edema de pata nos primeiros 30 minutos apÃs a aplicaÃÃo dos agentes flogÃsticos. O efeito anti-inflamatÃrio dos PST no edema de pata induzido por carragenana nÃo foi observado apÃs inibiÃÃo prÃvia por zinco protopofirina IX. Portanto, sugerimos que o efeito anti-inflamatÃrio dos PST da alga C. mexicana pode estar relacionado com a inibiÃÃo da liberaÃÃo de histamina, reduÃÃo da migraÃÃo celular e ativaÃÃo da via da HO. Para avaliar os efeitos sistÃmicos dos PST, estes foram administrados por via i.v. (20 mg/kg) em camundongos em dose Ãnica e as alteraÃÃes sistÃmicas avaliadas durante 48 h. Os resultados obtidos demonstraram que os PST nÃo causaram mortalidade e nem alteraÃÃes macroscÃpicas significativas dos ÃrgÃos e dos parÃmetros bioquÃmicos avaliados, sendo, portanto, considerados seguros na dose testada. Em resumo, os PST da alga C. mexicana apresentaram efeitos antinociceptivos e anti-inflamatÃrios significativos, tornando-se uma importante ferramenta biotecnolÃgica para estudos posteriores. / Sulfated polysaccharides from seaweed are heterogeneous polymers representing biomolecules of commercial interest, especially in food and pharmaceutical industries. The aim this study was to evaluate the effects of total sulfated polysaccharides (TSP) of the green seaweed Caulerpa mexicana in classical models of nociception and acute inflammation in animals. Swiss male mice (18-25 g) and male Wistar rats (120-260 g) were used. The yield of the extraction of TSP obtained by enzymatic digestion was 1.7%. In analysis by Fourier transformed infrared were characterized as polysaccharides containing mainly sulfated galactose and uronic acid. The TSP of the alga C. mexicana were able to decrease (p <0.05) the number of writhes induced by acetic acid (1%) on 31.8, 74.5 and 88.9% at doses of 5, 10 and 20 mg/kg; i.v., respectively. In the formalin test, the TSP inhibited (p <0.05) the licking time of the paw only on the second of the test phase (88.6 and 98.5% for the doses 10 and 20 mg/kg; i.v., respectively). In the hot plate test, the TSP did not show antinociceptive effect in the course of 90 minutes of the test. Thus, the results suggest that the TSP presented analgesic effect by a peripheral action. In addition, TSP (5, 10 and 20 mg/kg) showed anti-inflammatory effect when administered s.c. in rats on paw edema models induced by carrageenan, dextran or histamine. To analyze the involvement of heme oxygenase (HO) pathway in the anti-inflammatory effect of TSP (20 mg/kg, sc), the animals were pretreated (s.c.) with a specific HO inhibitor (zinc protoporphirin IX). The results showed that the TSP were able to reduce the paw edema induced by carrageenan in the third hour, which was confirmed by myeloperoxidase quantification. In addition, the TSP reduced the edema induced by dextran or histamine in paw edema models in the first thirty minutes after application the flogistic agents. The anti-inflammatory effect of TSP on paw edema induced by carrageenan was not observed after prior inhibition by zinc protoporphyrin IX. Therefore, we suggest that the anti-inflammatory effect of TSP of the alga C. mexicana algae may be related to inhibition of the histamine release, reduction of cell migration and activation of the HO pathway. To evaluate the systemic effects of TSP, they were administered (i.v.) in mice (20 mg/kg) in a single-dose and evaluated the systemic changes for 48 h. The results showed that the TSP did not cause mortality or significant alterations on organs and on biochemical parameters being considered safe in the tested dose. In summary, the TSP from the algae C. mexicana have showed significant antinociceptive and anti-inflammatory effects, becoming an important biotechnological tool for further studies.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / PolissacarÃdeos ocorrem em grandes quantidades nas sementes como componentes da parede celular ou como reserva. Dentre estes Ãltimos, incluem-se as xiloglucanas cotiledonÃrias e as galactomananas endospÃrmicas. As xiloglucanas apresentam uma cadeia principal de &#946;-D-(1&#8594;4)-glucana ramificada com ligaÃÃes &#945;-(1&#8594;6) por resÃduos D-xilopiranosÃdeos ou &#946;-D-galactopiranosÃdeo-(1&#8594;2)-D-xilopiranosÃdeos, enquanto as galactomananas endospÃrmicas consistem em cadeias polimÃricas de resÃduos &#946;-D-manopiranosil (1&#8594;4) ligados, substituÃdos em O-6 por unidades de &#945;-D-galactopiranosil. O objetivo deste trabalho foi analisar a interaÃÃo de xiloglucanas e galactomananas com lectinas galactose-ligantes e, assim, sugerir o uso de tais polissacarÃdeos como alternativa barata e eficaz na preparaÃÃo de matrizes cromatogrÃficas para o isolamento e determinaÃÃo da especificidade anomÃrica de novas lectinas. Dessa forma, as interaÃÃes das lectinas das sementes de Artocarpus integrifolia (frutalina), Artocarpus incisa (jacalina), Ricinus communis (ricina) e Arachis hypogaea (PNA) com matrizes de xiloglucanas de sementes de Copaifera langsdorffii, Mucuna sloanei e Hymenaea courbaril (MC, MMu, MJ, respectivamente) e de galactomananas de Mimosa scabrella, Stryphnodendron barbatiman, Adenanthera pavonina e Dimorphandra mollis (MM, MS, MA; MD, respectivamente) foram analisadas. As galactomananas apresentaram melhor capacidade de retenÃÃo da jacalina (MA â 0,92 mg ; MM â 1,48 mg ; MD â0,88 mg ; MS â 0,83 mg) e da frutalina (MA â 0,99 mg ; MM â 1,09 mg ; MD â 0,94 mg ; MS â 0,85 mg), lectinas que possuem especificidade por &#945;-D-galactose. Vale destacar que a galactomanana de M. scabrella apresentou melhor capacidade de retenÃÃo da lectinas testadas. Por outro lado a ricina, capaz de ligar-se aos dois anÃmeros, mas que se liga preferencialmente ao anÃmero &#946;, teve maior massa retida nas colunas de xiloglucana (MMu â 2,17 mg ;MJ â 1,30 mg; MC â 2,83 mg). Houve diferenÃa nos perfis de retenÃÃo da PNA, que tambÃm se liga aos anÃmeros &#945; e &#946; da galactose, sendo que a melhor retenÃÃo foi na coluna contendo matriz de M. sloanei (0,12 mg). As colunas foram todas saturadas com extrato bruto a partir das farinhas das sementes, para que se utilizasse a capacidade mÃxima de retenÃÃo de cada matriz. Atividade hemaglutinante foi detectada em ambos os picos PI e PII. Para a ricina, atividade tÃxica foi realizada e detectada para todos os PII obtidos. Por meio de SDS-PAGE, a pureza de cada uma das lectinas foi confirmada. Diante dos resultados expostos, pode-se sugerir o uso de xiloglucanas e galactomananas para o isolamento, purificaÃÃo e determinaÃÃo da especificidade anomÃrica de lectinas galactose-ligantes. / Polysaccharides are found in large quantity in seeds and they represent the main compounds of cell wall or reservoir. Among reservoir compounds, it included cotyledonary xyloglucans and endospermic galactomannans. The xyloglucans are made of a main chain of &#946;-D-(1&#8594;4)-glucan with &#945;-(1&#8594;6) ramifications of D-xylopyranoside or &#946;-D-galactopyranoside-(1&#8594;2)-D-xylopyranoside residues. Endospermic galactomannans are polimeric chains of &#946;-D-mannopyranosil (1&#8594;4) and replaceabled in O-6 for units of &#945;-D-galactopyranosil. The aim of this work is investigate the interaction of xyloglucans and galactomannans with galactose bounding lectins and show the possibility of the usage of these polysaccharides as cheap and useful chromatographic matrices for isolation and determination of anomeric specificity of galactose bounding lectins. The interactions of lectins from seeds of Artocarpus integrifolia (frutalin), Artocarpus incisa (jacalin), Ricinus communis (ricin) e Arachis hypogaea (PNA) were performed with coluns of xyloglucans of seeds from Copaifera langsdorffii, Mucuna sloanei and Hymenaea courbaril (MC, MMu, MJ, respectively) and galactomannans from Mimosa scabrella, Stryphnodendron barbatiman, Adenanthera pavonina and Dimorphandra mollis (MM, MS, MA; MD, respectively). The galactomannans showed the best colun interaction capacity for the jacalin (MA â 0,92 mg ; MM â 1,48 mg ; MD â0,88 mg ; MS â 0,83 mg) and frutalin (MA â 0,99 mg ; MM â 1,09 mg ; MD - 0,94 mg ; MS - 0,85 mg) lectins. Remarkably the M. scabrella galactomannan showed the best colun interaction among all lectins analysed. On the other hand, ricin was better hold in coluns made of xyloglucan (MMu â 2,17 mg ;MJ â 1,30 mg; MC â 2,83 mg). For PNA lectin, differences were detected in colun interaction capacity. The best colun interaction was with the M. sloanei matrix (0,12 mg) for PNA lectin. All coluns were fill with sample extract of flour from seeds and hemagglutination assays was performed with PI and PII. In these assays, hemagglutination activity was detected in both PI and PII from the coluns. For ricin, toxic activity was made and it was detected for all obtained chromatographic samples. With SDS-PAGE it was possible confirmed the purification of the studied lectins. The bands in polyacrilamid gel were the same for the lectins purified. In conclusion, it can be suggested the usage of xyloglucans and galactomannans for isolation, purification and determination of anomeric specificity of galactose-bounding lectins.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The seaweed Gracilaria are important sources of agar sulfated polysaccharides that are commonly used in the food, pharmaceutical and biotechnology industries. For characterization of the media, the kelp was subjected to analysis of their chemical composition, which indicated their percentages of moisture, ash, protein and lipids. Extractions in which extraction by enzymatic digestion native extract (a seaweed is not subjected to pretreatments and obtaining the polysaccharides is by their boiling) is: For evaluation of red seaweed polysaccharides Gracilaria intermedia fractions were obtained for the following extraction methods seaweed is pretreated with NaOH and KOH in concentrations of 1% and 5%. The extracted material was subjected to colorimetric test chemical composition (protein content determination and quantification of carbohydrates, sulfate and 3,6-anhydro-galactose). The material was further analyzed by infrared spectroscopy with Fourier transform and Nuclear Magnetic Resonance ( NMR). Antioxidant activity with each of the fractions obtained tests were performed. Antioxidants tests (total antioxidant capacity, chelation of ferrous ion) indicated that such polysaccharides have the ability to scavenge free radicals and significant dose-dependent manner. Due to these results, the polysaccharide obtained from seaweed Gracilaria show potential intermediate that they will not be used as a synthetic antioxidant compound. Experiments to evaluate the rheological behavior of aqueous solutions of polysaccharides under study were performed at 25  1 ÂC, using stationary and dynamic oscillatory measurements, which indicated that the material obtained should be classified as pseudoplastic and highlighted the skills of such polymer solutions in acting as thickeners and gelling agents. / Algas marinhas do gÃnero Gracilaria sÃo importantes fontes de Ãgar, polissacarÃdeos sulfatados que sÃo comumente usados nas indÃstrias alimentÃcia, farmacÃutica e biotecnolÃgica. Para caracterizaÃÃo do material de trabalho, a alga marinha foi submetida à anÃlise de sua composiÃÃo centesimal, a qual indicou seus percentuais de umidade, cinzas, proteÃnas, lipÃdios e carboidratos totais. Para avaliaÃÃo dos polissacarÃdeos da alga vermelha Gracilaria intermedia foram obtidas fraÃÃes pelas seguintes metodologias de extraÃÃo: 1. extraÃÃo por meio de digestÃo enzimÃtica, 2. extraÃÃo nativa (a alga nÃo à submetida à prÃ-tratamentos e a obtenÃÃo dos polissacarÃdeos ocorre pela sua fervura) e 3. extraÃÃes nas quais a alga à prÃ-tratada com NaOH e KOH nas concentraÃÃes de 1% e 5%. Os materiais extraÃdos foram submetidos a testes colorimÃtricos de composiÃÃo quÃmica (determinaÃÃo do teor de proteÃnas e quantificaÃÃo de carboidratos, sulfato e 3,6 anidrogalactose). Os materiais foram ainda analisados por espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier e RessonÃncia MagnÃtica Nuclear (RMN). Foram realizados testes de atividade antioxidante com cada uma das fraÃÃes obtidas. Os testes antioxidantes realizados (capacidade antioxidante total e quelaÃÃo do Ãon ferroso) indicaram que tais polissacarÃdeos possuem capacidade de sequestrar radicais livres de maneira significativa e dose-dependente. Devido a estes resultados, os polissacarÃdeos obtidos a partir da alga marinha Gracilaria intermedia mostram potencial de virem a ser utilizados como um composto antioxidante nÃo sintÃtico. Experimentos para avaliar o comportamento reolÃgico de soluÃÃes aquosas dos polissacarÃdeos em estudo foram realizados a 25  1 ÂC, usando medidas estacionÃrias e dinÃmicas oscilatÃrias, que indicaram que os materiais obtidos devem ser classificados como pseudoplÃsticos e apontaram as habilidades de tais soluÃÃes polimÃricas em atuar como agentes espessantes e gelificantes.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / MolÃculas bioativas extraÃdas a partir de algas marinhas, tais como os polissacarÃdeos sulfatados,vÃm se destacando como possuidores de diversas atividades biolÃgicas. Este estudo teve como objetivo avaliar as atividades antiviral e anti-inflamatÃria de uma fraÃÃo polissacarÃdica sulfatada da alga marinha Gracilaria birdiae. Os polissacarÃdeos sulfatados totais (PST) foram extraÃdos por digestÃo enzimÃtica e em seguida, fracionados em coluna de DEAE-celulose, originando duas fraÃÃes (FI- 0,5 M e FII- 0,75 M). A fraÃÃo FI, de maior rendimento, foi objeto de estudo, sendo identificada como uma agarana por espectroscopia de infravermelho (FT-IR) e de elevada massa molecular (>100 KDa) por cromatografia de permeaÃÃo em gel. A viabilidade celular da fraÃÃo FI foi determinada por alteraÃÃo da morfologia celular com posterior quantificaÃÃo a 492 nm. As cÃlulas foram tratadas com diluiÃÃes seriadas de FI (1000 a 7,8 &#956;g/mL) e em seguida, incorporado o corante vermelho neutro, com posterior leitura de absorbÃncia. O grau de atividade antiviral foi expresso como percentagem de inibiÃÃo viral. Os resultados mostraram que FI na concentraÃÃo de 250 &#956;g/mL nÃo apresentou toxicidade em cÃlulas C6/36, Vero e HEp-2 e apresentou um efeito antiviral significativo com inibiÃÃo de 95,8% contra o HSV-1, de 94,4 % contra o HSV-2 em cÃlulas Vero e de 89,2 % contra DENV-1 em cÃlulas C6/36, quando comparado ao grupo controle. Em adiÃÃo, FI (10 mg/kg) apresentou efeito anti-inflamatÃrio quando administrada por via subcutÃnea (s.c.) em ratos Wistar no modelo de peritonite utilizando carragenina como agente flogÃstico ou no edema de pata induzido por carragenina ou dextrana. FI (10 mg/kg) provocou um efeito anti-inflamatÃrio por uma diminuiÃÃo no nÃmero de leucÃcitos na cavidade peritoneal, alÃm de tambÃm reduzir o edema de pata induzido por carragenina na terceira hora, comprovado pela quantificaÃÃo da mieloperoxidase e tambÃm o edema por dextrana nos primeiros trinta minutos. Para analisar o envolvimento da via heme oxigenase na atividade anti-inflamatÃria de FI, os animais foram prÃ-tratados por via s.c. com um inibidor especÃfico do grupo heme (zinco rotoporfirina IX). Depois de inibida por ZnPP IX, o efeito anti-inflamatÃrio de FI no edema de pata induzido por carragenina nÃo foi observado. Para avaliar os efeitos sistÃmicos, FI (10 mg/kg) foi administrada por via intraperitoneal em camundongos em dose Ãnica. As alteraÃÃes sistÃmicas foram avaliadas durante 48 h ou por dose repetida, uma vez ao dia durante 14 dias, sendo que FI (10 mg/kg) nÃo causou mortalidade ou alteraÃÃes significativas nos parÃmetros bioquÃmicos, hematolÃgicos e histolÃgicos, sendo considerada segura na dose testada. / Bioactive molecules extracted from seaweed, such as sulfated polysaccharides, have been highlighted as having diverse biological activities. This study aimed to evaluate the antiviral activity and anti-inflammatory effect of a sulfated polysaccharide from seaweed Gracilaria birdiae. Total sulfated polysaccharides (TSP) were extracted by enzimatic digestion and following fractioned on DEAE-cellulose column, obtaining two fractions (FI - 0.5 M and FII - 0.75 M). The FI fraction, which had the highest yield, was object of this study, has been identified as an agar by IR spectroscopy (FT-IR) and with a high molecular weight (>100KDa) by gel permation cromatography. The cell viability of FI fraction was determined by the change of the cell morphology with further quantification at 492 nm. Cells were treated with serial dilutions of FI (1000 to 7.8 &#956;g/mL) and then, neutral red dye was incorporated, with subsequent measurement of absorbance. The degree of antiviral activity was expressed as percent inhibition of the virus. The results showed that FI at a concentration of 250 &#956;g/mL showed no toxicity on C6/36, Vero and HEp-2 cells and had a significant antiviral effect with inhibition of 95.8% against HSV-1, 94.4% against HSV-2 on Vero cells and 89.2% against DENV-1 on C6/36 cells, when compared to the control group. In addition, FI (10 mg /kg) presented anti-inflammatory effect when administered by subcutaneous route (s.c.) in Wistar rats in a model of peritonitis using carrageenan with a flogistic agent or in the paw edema using carrageenan or dextran. FI (10 mg/kg) induced an anti-inflammatory effect by a decrease in the leukocytes into the peritoneal cavity. FI also reduced the paw edema induced by carrageenan in the third hour comproved by the mieloperoxidase quantification and also inhibited the paw edema induced by dextran on the first thirty minutes. To analyze the involvement of the heme oxygenase pathway on antiinflammatory activity of FI, animals were pretreated by s.c. route with an specific inhibitor of heme group (zinc protoporphyrin IX). After inhibition by ZnPP IX, the anti-inflammatory effect of FI on carrageenan-induced paw edema has not been observed. To evaluate the systemic effects, FI (10 mg/kg) was administered by intraperitoneal route in mice in a single dose. The systemic changes were evaluated during 48 h or by repeated dose, once a day for 14 days. The results showed that, FI (10 mg/kg) did not cause mortality or significant changes in the biochemical, hematological and histopathological parameters, considered safe in the tested dose.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Anticoagulantes atualmente disponÃveis apresentam limitaÃÃes significativas, o que demonstra a necessidade de agentes alternativos. Os polissacarÃdeos sulfatados de algas marinhas com atividade anticoagulante e/ou antitrombÃtica abrem novas perspectivas no tratamento de distÃrbios tromboembÃlicos. No presente estudo, analisamos a atividade anticoagulante e antitrombÃtica da galactana sulfatada alga marinha vermelha Acanthophora muscoides (AmII). A atividade anticoagulante foi analisada atravÃs dos ensaios de TTPa, TTPa ex vivo e do tempo de recalcificaÃÃo. AlÃm disso, as proteases (IIa ou Xa) e inibidores da coagulaÃÃo (AT ou HCII) foram utilizados para melhor avaliar a atividade anticoagulante. Modelos experimentais de trombose venosa e arterial foram utilizados para investigar o potencial antitrombÃtico da galactana sulfatada. O teste de ativaÃÃo do fator XII tambÃm foi realizado. A investigaÃÃo da interaÃÃo AmII-antitrombina foi realizada atravÃs da medida de emissÃo de fluorescÃncia. AlÃm disso, AmII foi utilizada em ensaios de agregaÃÃo plaquetÃria induzida por ADP ou por colÃgeno. A galactana sulfatada de A. muscoides apresentou baixo potencial anticoagulante no TTPa, TTPa ex vivo e no tempo de recalcificaÃÃo quando comparada à heparina. A galactana sulfatada, somente em altas concentraÃÃes, apresentou um aumento na inibiÃÃo da trombina mediada por AT ou HCII. Em contraste, quando o fator Xa foi utilizado como a protease alvo, a galactana apresentou efeito anticoagulante semelhante à heparina. AlÃm disso, a galactana sulfatada mostrou-se um antitrombÃtico potente em doses baixas (atà 0,5 mg/kg de peso corporal), em modelo trombose venosa, no entanto em doses elevadas, seu efeito antitrombÃtico foi reduzido. Na avaliaÃÃo da trombose arterial, a galactana sulfatada apresentou efeito antitrombÃtico semelhante à heparina em todas as doses testadas. Em contraste com a heparina, a galactana sulfatada ativou fator XII e nÃo apresentou tendÃncia hemorrÃgica. AlÃm disso, AmII nÃo apresentou nenhum efeito sobre a agregaÃÃo plaquetÃria e, em associaÃÃo com antitrombina, nÃo alterou a emissÃo de fluorescÃncia, indicando que esta interaÃÃo pode ocorrer por um mecanismo diferente da interaÃÃo heparina-antitrombina. A galactana sulfatada da alga A. muscoides apresentou baixo potencial anticoagulante e elevado potencial antitrombÃtico. Esses resultados sugerem que esta galactana abre novas perspectivas para um possÃvel desenvolvimento de novos fÃrmacos antitrombÃticos. / Currently available anticoagulants have significant limitations, which demonstrate the necessity of alternative agents. Sulfated polysaccharides from marine algae with anticoagulant and/or antithrombotic activities open new perspectives in the treatment of thromboembolic disorders. In the present study, we analyzed the anticoagulant and the antithrombotic activities of a sulfated galactan from the marine red alga Acanthophora muscoides (AmII). The anticoagulant activity was analyzed using the aPTT, the aPTT ex vivo and the recalcification time assays. In addition, specific proteases (IIa or Xa) and coagulation inhibitors (AT or HCII) were used to further investigate the anticoagulant activity. Experimental models of venous and arterial thrombosis were used to investigate the antithrombotic potential of the sulfated galactan. The factor XII activation assay was also performed. The AmII-antithrombin interaction was analyzed by measures of fluorescence emissions. Furthermore, AmII was used in ADP or collagen-induced platelet aggregation assays. The sulfated galactan from A. muscoides presented a lower anticoagulant activity on aPTT, the aPTT ex vivo and the recalcification time assays when compared with heparin. The sulfated galactan only enhanced the thrombin inhibition mediated by AT or HCII at high concentrations. In contrast, when factor Xa was used as the target protease, the sulfated galactan from A. muscoides presented a potent anticoagulant effect, similar to heparin. In addition, the sulfated galactan was shown to be a very potent antithrombotic agent in low doses (up to 0.5 mg/kg body weight), on venous thrombosis model, but these effects were reduced in higher doses. In the arterial experimental thrombosis, the sulfated galactan had antithrombotic effect similar to heparin at all doses tested. In contrast with heparin, the sulfated galactan activated factor XII, but the sulfated galactan did not present hemorrhagic effect in rats. In addition, AmII had no effect on platelet aggregation, and AmII together with antithrombin did not alter the fluorescence emission, indicating that this interaction might occur by a different mechanism than heparin-antithrombin interaction. The sulfated galactan from alga Acanthophora muscoides presented low anticoagulant potential and potent antithrombotic effect. These results suggest that this sulfated galactan opens new perspectives for a possible development of new antithrombotic drugs.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / As algas marinhas sÃo fontes abundantes de polissacarÃdeos sulfatados com vÃrias atividades biolÃgicas dessa forma suas biomolÃculas sÃo de grande interesse comercial principalmente nas indÃstrias farmacÃutica e alimentÃcia No presente trabalho investigou-se uma fraÃÃo polissacarÃdica sulfatada obtida da alga marinha verde Caulerpa racemosa (CrII) quanto aos seus efeitos na nocicepÃÃo e inflamaÃÃo Inicialmente a CrII (1,0 mg/kg i.v.) foi avaliada quanto a toxicidade em camundongos utilizando um modelo por dose repetida (sete dias) ApÃs o perÃodo experimental a CrII mostrou-se atÃxica A atividade antinociceptiva foi avaliada atravÃs dos ensaios de contorÃÃes abdominais induzidas por Ãcido acÃtico teste da formalina e da placa quente Camundongos Swiss machos foram tratados com CrII (0,01 0,1 e 1,0 mg/kg i.v.) 30 min antes de receber os estÃmulos de dor (Ãcido acÃtico 0,8% ou formalina 2%) ou exposiÃÃo ao calor Nos ensaios de contorÃÃes abdominais induzidas por Ãcido acÃtico CrII reduziu significativamente o nÃmero de contorÃÃes abdominais e no teste da formalina CrII tambÃm foi capaz de reduzir o tempo de lambedura da pata na segunda fase do experimento Em relaÃÃo ao estÃmulo tÃrmico CrII nÃo foi capaz de prolongar o tempo de reaÃÃo dos animais. Com relaÃÃo aos efeitos na inflamaÃÃo CrII (0,01 0,1 e 1,0 mg/kg i.v.) foi avaliada quanto seu potencial anti-inflamatÃrio utilizando-se ratos Wistar Foram utilizados ensaios de migraÃÃo celular para a cavidade peritoneal induzida por carragenana (Cg - 700 Âg/cavidade) de edema de pata induzido por Cg (700 Âg/pata) ou dextrana (300 Âg/pata) Com relaÃÃo a migraÃÃo celular para a cavidade peritoneal ocorreu uma reduÃÃo significativa de neutrÃfilos em todos os grupos tratados com a CrII No ensaio de edema de pata induzido por Cg ou dextrana CrII tambÃm foi capaz de reduzir significativamente o edema em todas as doses utilizadas O efeito anti-inflamatÃrio da CrII foi confirmado atravÃs da reduÃÃo dos nÃveis teciduais da mieloperoxidase do tecido das patas nos grupos com Cg AlÃm disso foi realizado um ensaio de inibiÃÃo da enzima Hemo-oxygenase-1 (HO-1) utilizando-se o inibidor ZnPP IX com o intuito de avaliar se o efeito anti-inflamatÃrio da CrII estava relacionado com a expressÃo dessa enzima Os resultados demonstraram que a inibiÃÃo da via HO-1 està associada à inibiÃÃo da resposta anti-inflamatÃria da CrII No intuito de avaliar se CrII tambÃm possui efeito prÃ-inflamatÃrio CrII (0,01 0,1 e 1,0 mg/kg i.pl) foi injetada na pata de ratos Wistar onde o resultado obtido demonstrou um processo inflamatÃrio apenas para animais que receberam a dose de 1,0 mg/kg Portanto os possÃveis mediadores que poderiam estar envolvidos com o processo inflamatÃrio da CrII foram avaliados utilizando-se o ensaio de edema de pata induzido por CrII Os resultados demonstraram que a aÃÃo prÃ-inflamatÃria da CrII pode estar relacionada com a liberaÃÃo de mediadores provindos da via da ciclooxigenase (COX-2 prostaglandinas e tromboxanos) A CrII quando utilizada como agente anti-inflamatÃrio nÃo foi capaz de inibir seu efeito prÃ- inflamatÃrio no ensaio de edema de pata em nenhuma das doses utilizadas (0,01 0,1 e 1,0 mg/kg i.v.) confirmando que sua aÃÃo anti-inflamatÃria està relacionada com a via da HO-1 / Marine algae are abundant sources of sulfated polysaccharides with various biological activities thereby altering its biomolecules are great of commercial interest especially in the pharmaceutical and food industries In this study we investigated a sulfated polysaccharide obtained from the green seaweed Caulerpa racemosa (CrII) as to its effects on nociception and inflammation Initially the CrII (1.0 mg/kg, i.v.) was evaluated for toxicity in mice using a repeated dose model (seven days) After the trial period the CrII proved to be nontoxic The antinociceptive activity was evaluated by the writings of abdominal constrictions induced by acetic acid formalin test and hot plate Swiss male mice were treated with CrII (0.01 0.1 and 1.0 mg/kg i.v.) 30 min before receiving pain stimuli (acetic acid 0.8% or 2% formalin) or heat exposure In trials of abdominal constrictions induced by acetic acid and the formalin test CrII significantly reduced the number of abdominal writhing and paw licking time in the second phase of the experiment respectively In relation to thermal stimulation CrII was unable to prolong the reaction time of animals With respect to effects on inflammation CrII (0.01 0.1 and 1.0 mg/kg i.v.) was evaluated for its potential antiinflammatory using Wistar rats We used assays of cell migration into the peritoneal cavity induced by carrageenan (Cg - 700 mg/cavity) paw edema induced by Cg (700 Âg/paw) or dextran (300 Âg/paw)With respect to cell migration into the peritoneal cavity there was a significant reduction of neutrophils in all groups treated with the CrII In the test paw edema induced by dextran or Cg CrII was also able to significantly reduce the swelling at all doses used The anti-inflammatory effect of CrII was confirmed by reducing the tissue levels of myeloperoxidase in the tissue of the paws Cg groups In addition we performed an enzyme inhibition assay Hemo-oxygenase-1 (HO-1) using the inhibitor ZnPP IX in order to assess whether the anti-inflammatory effect of CrII was related to the expression of this enzyme The results showed that the inhibition of the HO-1 is associated with inhibition of the inflammatory response of CrII In order to assess whether CrII also has pro-inflammatory effect CrII (0.01 0.1 and 1.0 mg/kg i.pl) was injected into the paw of the rats where the result demonstrated a process inflammation only for animals which received the dose of 1.0 mg/kg Therefore the potential mediators that could be involved in the inflammatory process of CrII were evaluated using the test paw edema induced by CrII The results showed that the pro-inflammatory effect of CrII may be related to the release of mediators emanating from the path of cyclooxygenase (COX-2 prostaglandins and thromboxanes) The CrII when used as anti-inflammatory agent was unable to inhibit pro-inflammatory effect in the paw edema test in any of the doses (0.01 0.1 and 1.0 mg/kg i.v.) confirming that its anti-inflammatory effect is related to HO-1

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Three experiments were conducted involving 78 pigs castrated males of commercial line. In the first experiment were used 16 animals with average weight of 23.94  0.63 kg, in order to evaluate the chemical composition and nutrient digestibility, nitrogen balance and determination of digestible and metabolizable energy HSC for pigs . The animals were housed in metabolic cages and distributed in two treatments: control diet and food testing, the latter being composed of 70% of the control diet and 30% of HSC. Each treatment with 8 replicates. Although the FPAM have adequate Chemical Composition has low-energy 1,142 kcal / ME / kg and based on this result rations of other experiments were calculated. Nitrogen balance was affected by the inclusion of HSC. In the second experiment, we used 30 pigs with average weight of 22.73  1.79 kg, with the objective of evaluating increasing levels of HSC in diets for growing and finishing pigs on performance, digestibility of feed, carcass characteristics , color and pH of the meat and bioeconomic evaluation of rations. 5 treatments were used, considering increasing levels of HSC 0; 3; 6; 9:12% and 6 replicates per treatment. Increasing levels of HSC affected the performance by detecting downward linear effect for feed intake increased as the inclusion of the ingredient, reflecting positively a better conversion in the growth phase II. It reiterated that the inclusion of 12% of HSC improves the ether extract digestibility coefficients, neutral detergent fiber and gross energy of the feed. It was found that the inclusion of HSC did not affect carcass characteristics, color and pH of animal meats. There was a decreasing linear effect for all economic variables of the growth phase II, except for the economic efficiency ratio which found increasing linear effect. In the finishing phase was quadratic effect for economic efficiency ratio and average cost ratio of feed consumed and decreasing linear effect for partial gross revenue. In the third experiment, we used 32 pigs live weight of 22.64  0.63 kg for evaluating the inclusion of HSC in diets with or without addition of an enzyme supplement composed of xylanase, glucanase and mannanase on digestibility of diets, blood concentrations of triglycerides and urea, performance, carcass characteristics and bioeconomic evaluation of rations. 4 treatments were used: control diet, 12% inclusion of HSC, 12% inclusion of HSC with reduced energy matrix in 100 kcal / kg with and without addition of enzyme complex with 8 replicates per treatment. Enzyme supplementation did not improve the digestibility of nutrients and energy. The inclusion of the ingredient reduced the level of serum urea in all evaluated phases. There were no treatment effects for growth performance, carcass characteristics and bioeconomic evaluation of rations. The inclusion of 12% of HSC without enzyme supplementation can be an economically viable food alternative in the production of pigs for slaughter. / Foram conduzidos trÃs experimentos envolvendo 78 suÃnos, machos castrados de linhagem comercial. No primeiro experimento foram utilizados 16 animais com peso vivo mÃdio de 23,94Â0,63 kg, com o objetivo de avaliar a composiÃÃo bromatÃlogica e os coeficientes de digestibilidade dos nutrientes, balanÃo de nitrogÃnio e determinaÃÃo da energia digestÃvel e metabolizÃvel FPAM para suÃnos. Os animais foram alojados em gaiolas metabÃlicas e distribuÃdos em 2 tratamentos: raÃÃo controle e raÃÃo teste, sendo esta Ãltima composta por 70% da raÃÃo controle e 30% do FPAM. Cada tratamento com 8 repetiÃÃes. Apesar de o FPAM possuir adequada composiÃÃo bromatÃlogica apresenta baixa concentraÃÃo energÃtica 1.142 kcal/EM/kg e com base nesse resultado foram calculadas as raÃÃes dos demais experimentos. O balanÃo de nitrogÃnio foi prejudicado com a inclusÃo do FPAM. No segundo experimento, foram utilizados 30 suÃnos com peso vivo mÃdio de 22,73Â1,79 kg, com o objetivo de avaliar nÃveis crescentes do FPAM em raÃÃes para suÃnos em crescimento e terminaÃÃo sobre o desempenho, digestibilidade das raÃÃes, caracterÃsticas de carcaÃa, cor e pH das carnes e avaliaÃÃo bioeconÃmica das raÃÃes. Foram utilizados 5 tratamentos, considerando nÃveis crescentes do FPAM 0; 3; 6; 9 e 12% e 6 repetiÃÃes por tratamento. Os nÃveis crescentes do FPAM afetaram o desempenho, detectando-se efeito linear decrescente para o consumo de raÃÃo à medida que aumentou a inclusÃo do ingrediente, refletindo positivamente numa melhor conversÃo na fase de crescimento II. Ratificou-se que a inclusÃo de 12% do FPAM melhora os coeficientes de digestibilidade do extrato etÃreo, fibra em detergente neutro e energia bruta das raÃÃes. Verificou-se que a inclusÃo do FPAM nÃo afetou as caracterÃsticas de carcaÃa, cor e pH das carnes dos animais. Houve efeito linear decrescente para todas as variÃveis econÃmicas da fase de crescimento II, exceto para o Ãndice de eficiÃncia econÃmica onde foi verificado efeito linear crescente. Na fase de terminaÃÃo houve efeito quadrÃtico para Ãndice de eficiÃncia econÃmica e Ãndice de custo mÃdio de raÃÃo consumida e efeito linear decrescente para receita bruta parcial. No terceiro experimento, foram utilizados 32 suÃnos de peso vivo mÃdio de 22,64Â0,63 kg para avaliar a inclusÃo do FPAM em raÃÃes com ou sem adiÃÃo de um suplemento enzimÃtico composto por xilanase, glucanase e mananase sobre a digestibilidade das dietas, concentraÃÃes sanguÃneas de triglicerÃdeos e ureia, desempenho, caracterÃsticas de carcaÃa e avaliaÃÃo bioeconÃmica das raÃÃes. Foram utilizados 4 tratamentos: raÃÃo controle, 12% de inclusÃo de FPAM, 12% de inclusÃo do FPAM com reduÃÃo da matriz energÃtica em 100 kcal de EM/kg com e sem adiÃÃo de complexo enzimÃtico com 8 repetiÃÃes por tratamento. A suplementaÃÃo enzimÃtica nÃo melhorou a digestibilidade dos nutrientes e da energia. A inclusÃo do ingrediente reduziu o nÃvel de ureia sÃrico em todas as fases avaliadas. NÃo foram observados efeito dos tratamentos para o desempenho zootÃcnico, caracterÃsticas de carcaÃa e avaliaÃÃo bioeconÃmica das raÃÃes. A inclusÃo de 12% do FPAM sem suplementaÃÃo enzimÃtica pode ser uma alternativa alimentar economicamente viÃvel na produÃÃo de suÃnos para o abate.