Orientador: Fernando Leite Hoffmann / Coorientador: Raquel Guttierres Gomes / Banca: Adriane Elisabete Antunes de Moraes / Banca: Crispin Humberto Garcia-Cruz / Banca: Marco Antonio Trindade / Banca: Maria Luiza Fazio / Resumo: Os embutidos fermentados, são definidos como mistura de carne magra e gordura, sais de cura, açúcares, especiarias, embutidos em envoltórios e submetidos à fermentação e secagem. A aplicação de micro-organismos probióticos mostra-se promissora para este tipo de produto, pois não sofrem tratamento térmico durante o processamento, assim não afetando a viabilidade dos micro-organismos adicionados. Entretanto existe o desafio, em virtude da sensibilidade dos micro-organismos aos sais utilizados nesse produto, competição com os micro-organismos presentes na carne, resistência à passagem pelo trato gastrointestinal, além de interferir nas características sensoriais dos embutidos fermentados. Diante disso, foram realizados testes de resistência com as bactérias Enterococcus faecium e Lactobacillus helveticus frente aos sais de cura, cloreto de sódio, acidez, sais biliares e antibióticos. As bactérias apresentaram boa viabilidade na presença de sais de cura, porém na presença de cloreto de sódio apenas E. faecium apresentou resistência nas 3 concentrações testadas. Os micro-organismos não foram afetados na presença dos sais biliares, permanecendo em concentrações elevadas, porém apresentaram sensibilidade em diferentes concentrações de pH. Na análise de resistência a antibióticos, E. faecium apresentou sensibilidade a maioria dos testados, enquanto que o L. helveticus apresentou resistência. Após estas análises, foram realizados os processamentos dos embutidos de acordo com as formulações, Formulação 1 (E. faecium), Formulação 2 (L. helveticus) e formulação 3 (E. faecium + L. helveticus). Durante o período de maturação até final do processamento foram realizados o monitoramento físico-químico e microbiológico do embutido, onde os mesmos ficaram dentro dos padrões estabelecidos pela legislação. As formulações 1 e 2 mantiveram-se a viabilidade no final do processamento com 8,2 log UFC/g ... / Abstract: Fermented sausages are defined as a mixture of lean meat and fat, the curing salts, sugar, and spices, stuffed into a casing and hung for fermentation and an drying process. The application of probiotic microorganisms shows promise for this type of product, provided that the sausage does not need to be applied to heat treatments during processing, so there not a affecting the viability of microorganisms added. However there is a challenge, due to the sensibility of microorganisms to the curing salts used in this type of product, competition with microorganisms present in meat, resistance to passage through the gastrointestinal tract, besides to interfering sensory characteristics of fermented sausages. Initially were performed resistance tests with the bacteria Enterococcus faecium and Lactobacillus helveticus the front curing salts, sodium chloride, acidity, bile salts and antibiotics. The bacteria showed good viability in the presence of curing salts, but in the presence of sodium chloride only E. faecium showed resistance in three concentrations tested. The microorganisms were not affected in the presence of bile salts remaining in high concentrations, but showed sensibility of different concentrations of pH. In the analysis of resistance to antibiotics, E. faecium showed sensibility to most tested, while the L. helveticus showed resistance. After these analyses, were processed fermented sausages in accordance with the formulations, Formulation 1 (E. faecium), Formulation 2 (L. helveticus) and Formulation 3 (E. faecium + L. helveticus). During the ripening until the end of processing were performed physical and chemical and microbiological analysis, where the results were within the in agreement with legislation. The Formulations 1 and 2 were maintained viable at the end of processing with 8.2 log CFU / g of L. helveticus and 8.4 log CFU / g for E. faecium. After the verification the viability of the bacteria was performed microscopy, ... / Doutor

Orientador: André Mendes Jorge / Coorientador: Ivanor Nunes do Prado / Banca: Paulo Henrique Moura Dian / Banca: José Nicolau Puoli Filho / Resumo: Este experimento foi realizado para avaliar o desempenho animal e as características de carcaça de 27 bovinos mestiços (½ Angus vs. ½ Nelore) não castrados terminados em confinamento por 130 dias com a adição de níveis de óleos essenciais na dieta. O experimento foi conduzido em um experimento inteiramente casualizado e distribuídos em 3 tratamentos: Controle (CON), com adição de 3,5 g/animal/dia (E3,5) e com adição de 7,0 g/animal/dia (E7,0) de óleos essenciais. Os óleos essenciais eram formados por um mix de extratos vegetais: orégano (Origanum vulgare), alho (Allium sativum), limão (Citrus limonium), alecrim (Rosmarinus officinalis), tomilho (Thymus vulgaris), eucalipto (Eucalyptus saligna) e laranja doce (Citrus aurantium). Os bovinos iniciaram o experimento com 12 meses de idade e peso vivo de 243,4 kg. A razão de volumoso e concentrado foi de 10% e 90%, respectivamente. A adição de óleos essenciais na dieta não alterou o peso vivo final, ganho médio diário, ingestão de nutrientes e conversão alimentar. O GMD foi de 1,64 kg. Os animais ingeriram 7,1 kg de MS/dia, com uma conversão da MS de 4,31. Os óleos essenciais não influenciaram as características físicas da carcaça. O rendimento de carcaça quente foi de 55,1%. A espessura de gordura de cobertura dos bovinos nos diferentes tratamentos foi de 6,7 mm. Da mesma forma, a adição de diferentes níveis de óleos nas dietas não alterou as percentagens de músculo, gordura e osso que foram de 60,3, 17,5 e 15,6%, respectivamente / Abstract: This experiment was carried out to evaluate the animal performance and carcass characteristics of 27 crossbred bulls (½ Angus vs. ½ Nellore) finished in feedlot for 130 days with the addition different levels of essential oils in the diets. The experiment was conducted in a completely randomized and distributed into three treatments: control (CON), with addition 3.5 g/animal/day of essentials oils (E3.5) and with addition 7.0 g/animal/day of essentials oils (E7.0). The essentials oils were composed of a mix of vegetal extracts: oregane (Origanum vulgare), garlic (Allium sativum), lemon (Citrus limonium), rosemary (Rosmarinus officinalis), thymus (Thymus vulgaris), eucalyptus (Eucalyptus saligna) and sweet orange (Citrus aurantium). The bulls began the experiment with an average of 12 months of age and 243.4 kg. The roughage and concentrate ratio was 10% and 90%, respectively. The inclusion of essentials oils in the diets did not affect final body weight, average daily gain feed intake and feed efficiency. The ADG was 1.64 kg. The DM intake was 7.06 kg/day and feed conversion was 4.31. Essentials oils levels did not affect the carcass characteristics. The average dressing carcass hot was 55.1%. The fat thickness of bulls in the different diets was 6.7 mm. The same, the addition of different levels of essentials oils in the diets did not change the muscle, fatty and bone percentages with the average 60.3, 17.5 and 15.6%, respectively / Mestre

Orientador: Fabiana Pliarski / Banca: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: Róberson Sakabe / Resumo: A intensificação na produção da tilápia ocasionou enfermidades bacterianas frequentes principalmente pela elevada densidade de estocagem e manejo estressante. Esse quadro ocasiona o uso desenfreado e sem critérios de antimicrobianos, produzindo um produto com qualidade final duvidosa e danos ao meio ambiente. Uma alternativa promissora para prevenir enfermidades na piscicultura é a alimentação dos peixes com o mananoligossacarídeo (MOS), que promove a adsorção de agentes patógenos no intestino, melhorando a saúde do animal. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o uso do mananoligossacarídeo na caracterização da microbiota e morfologia intestinal da tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus) durante 45 dias de alimentação. Após sete dias de suplementação com mananoligossacarídeo, os peixes alimentados com a ração contendo a partir de 2 g kg-1 do suplemento apresentaram menor número de bactérias aeróbias totais (p<0,05) no intestino quando comparados ao grupo controle e a porcentagem dessas bactérias foi reduzida quanto maior foi o tempo de alimentação (p<0,05). Os peixes alimentados com todos os níveis de suplementação com mananoligossacarídeo demonstraram maior porcentagem de bactérias anaeróbias e Bacillus sp. no intestino (p<0,05) e o maior número dessas bactérias foi observada no grupo alimentado com 15 g kg-1 (bactérias anaeróbias) e com 8 g kg-1 (Bacillus) após 45 dias. A análise histológica do intestino das tilápias alimentadas com 10 g kg-1 de mananoligossacarídeo, durante sete dias mostrou microvilos com largura, altura e altura total das vilosidades superiores a dos peixes alimentados com os demais níveis de suplementação e o grupo controle (p>0,05), enquanto a maior espessura das vilosidades foi observada nos peixes alimentados com 8 g kg-1 de mananoligossacarídeo, no mesmo período de alimentação, porém a largura das ... / Abstract: The intensification of tilapia production caused bacterial diseases frequent especially for high density storage and stressful handling. This scene brings unbridled and indiscriminate use of antimicrobials, producing a final product with dubious quality and damage to the environment. A promising alternative to prevent diseases in fish farming is the use of mannan oligosaccharide (MOS) in fish diet, which promotes the adsorption of pathogens in the intestine, improving the health of the animal. The aim of this study was to evaluate the use of mannan oligosaccharide in the characterization of the microbiota and intestinal morphology of Nile tilapia for 45 days of feeding. After seven days of mannan oligosaccharide supplementation, fish fed with diet containing 2 g kg-1 of the supplement had the lowest number of total aerobic bacteria (p<0.05) in the intestine when compared to the control group and the percentage of these bacteria was reduced the longer the feeding time (p <0.05). Fish fed all levels of mannan oligosaccharide supplementation showed a higher percentage of anaerobic bacteria and Bacillus sp. in the intestine (p<0.05) and the increasing number of these bacteria was observed in the group fed with 15 g kg-1 (anaerobic bacteria) and 8 g kg-1 (Bacillus) after 45 days. Histological analysis of tilapia intestine fed 10 g kg-1 mannan oligosaccharide for seven days showed microvilli width, height and total height superior to other levels of supplementation and the control group (p> 0.05), while the greater thickness of villi was observed in the fish diet with 8 g kg-1 mannan oligosaccharide in the same feeding period, however the villi width in period of 45 days in diet supplemented with 8 g Kg-1 mannan oligosaccharide it was significance in relation to control (p<0.05). The add of mannan oligosaccahride in diet of Oreochromis niloticus, from level of inclusion 2 g Kg-1 is able ... / Mestre

Orientador: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Otto Mack Junqueira / Banca: Lizandra Amoroso / Banca: Ricardo de Albuquerque / Banca: Karina Ferreira Duarte / Resumo: Foi realizado um estudo para verificar o efeito da inoculação in ovo de Bacillus subtilis e sua suplementação na ração durante a fase de criação, sobre as características morfológicas e morfométricas do intestino delgado, desempenho e rendimento de carcaça de frangos de corte. O estudo foi composto por dois experimentos. No primeiro foram utilizados 500 ovos férteis de frango distribuídos em cinco incubadoras horizontais. O delineamento utilizado foi em blocos casualizados, sendo cada incubadora considerada um bloco, com cinco tratamentos (Controle, NaCl, 106 UFC, 107 UFC, 108 UFC), e 100 ovos/tratamento. Aos 18 dias de incubação os ovos foram inoculados com as soluções na câmara de ar e ao eclodirem foram avaliados à quantificação e identificação de Bacillus subtilis na mucosa intestinal, taxa de eclosão de ovos de matrizes pesadas, taxa de eclosão total, mortalidade embrionária, qualidade dos pintinhos, peso ao nascer e pesos do intestino, fígado e saco de vitelo dos pintinhos machos. No segundo experimento foram incubados 2700 ovos férteis em uma incubadora CASP de estágio único. Aos 18 dias de incubação 1350 ovos foram inoculados com 107 UFC Bacillus subtilis e 1350 ovos permaneceram sem inoculação. Ao eclodirem os machos foram alojados no galpão de acordo com os tratamentos. O delineamento utilizado foi em blocos casualizados com esquema fatorial 2x2 (inoculação in ovo de Bacillus subtilis X suplementação de Bacillus subtilis na ração), com seis repetições com 35 aves cada, totalizando 840 aves. Foram analisados a morfometria do intestino delgado, os pesos do fígado, intestino e pâncreas aos um, quatro, oito, 13, 20 e 41 dias de idade, o desempenho aos 21 e 42 dias de idade, o rendimento de carcaça e cortes, e a qualidade da carne aos 42 dias de idade. A inoculação in ovo e a suplementação de Bacillus subtilis na ração promoveram melhores resultados para altura das vilosidades e ... / Abstract: A study was conducted to verify the effect of in ovo inoculation of Bacillus subtilis and feed supplementation during the creation, on the morphological and morphometric characteristics of the small intestine, performance and carcass yield of broilers. The study consisted of two experiments. In the first 500 fertile chicken eggs over five horizontal incubators were used. The experimental design was randomized blocks, each considered as a block incubator, with five treatments (control, NaCl, CFU 106, CFU 107, CFU 108), and 100 eggs/treatment. At 18 days of incubation the eggs were inoculated with the solutions in the air cell and the hatch were evaluated for quantification and identification of Bacillus subtilis in the intestinal mucosa, hatchability of fertile eggs, total rate of hatching, embryo mortality and chick quality, birth weight and weights of the intestine, liver and yolk sac of male chicks. The concentration 107 provided better results relative to hatchability and chick weight at birth. In the second experiment in 2700 fertile eggs were incubated in an incubator CASP single stage. At 18 days of incubation 1350 eggs were inoculated with 107 CFU Bacillus and 1350 eggs remained without inoculation. When the hatch in the shed males were housed according to the treatment. The design was a randomized block design with a 2x2 factorial design (in ovo inoculation of Bacillus subtilis or not X supplementation of Bacillus subtilis in the creation phase or not), with six replicates of 35 birds each, totaling 840 birds. Were analyzed the morphometry of the small intestine, the weights of the liver, intestine and pancreas at one, four, eight, 13, 20 and 41 days of age, the results at 21 and 42 days of age, performance at 21 and 42 days of age, carcass yield and cuts, and meat quality at 42 days of age. The in ovo inoculation of Bacillus subtilis and feed supplementation promoted best results for depths length of villi and crypts in ... / Doutor

Orientador: Juliana Campos Junqueira / Banca: Silvana Soléo Ferreira dos Santos / Banca: Renata de Oliveira Mattos Graner / Resumo: Estudos prévios demonstraram que algumas cepas de Lactobacillus podem inibir Streptococcus mutans. Assim, cepas de Lactobacillus pertencentes à microbiota oral residente de indivíduos saudáveis precisam ser investigadas como possíveis estratégias de prevenção para a cárie dentária e outras infecções bucais. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de cepas do gênero Lactobacillus isoladas de indivíduos livres de cárie sobre S. mutans utilizando modelos de estudo in vitro e in vivo. No estudo in vitro, trinta cepas de Lactobacillus isoladas da cavidade bucal foram avaliadas quanto à atividade antibacteriana contra S. mutans em crescimento planctônico. A seguir, as cinco cepas que apresentaram maior atividade antibacteriana foram selecionadas para o estudo dos efeitos antimicrobianos sobre biofilmes de S. mutans em discos de hidroxiapatita. Para estudo in vivo, foi selecionada a cepa de Lactobacillus com maior efeito inibitório sobre biofilme de S. mutans, procurando-se avaliar seus efeitos no desenvolvimento de cárie experimental em ratos. Os resultados demonstraram que a maioria das cepas de Lactobacillus testadas foi capaz de inibir as células de S. mutans em crescimento planctônico, alcançando percentual de redução de até 99 %. As cepas, com maior percentual de inibição, selecionadas para os testes em biofilme foram uma de L. fermentum e quatro de L. paracasei. Todas as cinco cepas foram capazes de inibir a formação do biofilme de S. mutans, entretanto diferenças estati... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Previous studies have demonstrated that certain strains of Lactobacillus can inhibit Streptococcus mutans. Thereby, Lactobacillus strains belonging to the oral microbiota resident from healthy subjects need to be investigated as possible strategies to prevent dental caries and other oral infections. The aim of this study was to evaluate the effect of Lactobacillus spp. strains isolated from caries-free subjects on S. mutans using study models in vitro and in vivo. In the in vitro study, thirty Lactobacillus strains recovered from the oral cavity of caries-free subjects were evaluated for antibacterial activity against S. mutans in planktonic culture. Next, the five strains that showed higher antibacterial activity were selected for the study of antimicrobial effects on biofilm of S. mutans formed on hydroxyapatite disks. For in vivo study, we selected the Lactobacillus strain with greater inhibitory effect on S. mutans biofilm, in order to evaluate its effects on the development of experimental caries in rats. The results showed that most of the tested Lactobacillus strains were able to inhibit S. mutans cells in planktonic culture, reaching a percentage reduction up to 99 %. The strains with higher percentage of inhibition selected for biofilm tests were one strain of L. fermentum and four of L. paracasei. All five of these strains were able to inhibit biofilm formation of S. mutans, however statistically significant differences were only observed for three strains. Thus, fo... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Kátia Sivieri / Banca: Luís Fernando Barbisan / Banca: Fernanda Lopes Kinoushi / Banca: Luis Vitor Silva do Sacramento / Banca: Ana Lúcia Martiniano Nasser / Resumo: Ocâncer de cólon e reto representa a terceira causa mais comum de câncer no mundo, sendo que pesquisas apontam ação benéfica dos probióticos, prebióticos e simbióticos no câncer de cólon. O objetivo desta pesquisa foi definir as etapas da carcinogênese de cólon que são mais afetadas pelo consumo de extrato aquoso de yacon, Lactobacillus acidophilus CRL 1014 e extrato aquoso de yacon + Lactobacillus acidophilus CRL 1014 em ratos induzidos quimicamente ao câncer de cólon com 1,2-dimetilhidrazina (DMH). Cem ratos Wistar machos foram divididos aleatoriamente em cinco tratamentos: G1: ratos não tratados; G2: DMH; G3 (probiótico): DMH + L. acidophilus CRL 1014; G4 (prebiótico): DMH + extrato aquoso de yacon; G5 (simbiótico): DMH + L. acidophilus CRL 1014 + extrato aquoso de yacon. Todos os tratamentos foram administrados via oral durante 8 meses, sendo que o L. acidophilus CRL 1014 foi administrado na quantidade de 3 mL/ kg de peso/ dia na concentração de 109 UFC/ mL e o extrato aquoso de yacon administrado foi calculado em relação ao seu conteúdo de frutooligossacarídeos (FOS). Os animais ingeriram 10% de FOS na dieta. A concentração de FOS no extrato aquoso de yacon foi previamente determinada utilizando kit enzimático (Megazyme®). Cinco animais pertencentes a cada grupo experimental foram sacrificados após a primeira administração de DMH, no terceiro, quinto e oitavo meses. Os tecidos foram submetidos à análise macroscópica, verificando-se o número e volume de massa tumorais, análise de focos de criptas aberrantes (FCA), análise histológica do tecido, ensaio cometa em amostras de sangue periférico, índice de apoptose, imunohistoquímica para p53 e Ki-67. Houve redução no dano no DNA nos tratamentos G3, G4 e G5. Os grupos G5 e G4 apresentaram aumento no índice de apoptose e diminuição da proliferação celular em relação ao G2 (p<0.05). Não houve diferença na marcação de p53 nos grupos G3, G4 e G5 ... / Abstract: Colorectal cancer is the third commonest type of cancer in both sexes in the world. Research suggests beneficial effects of consuming probiotics and prebiotics on colon cancer. The aim of this project was to define the phases of the development of colon cancer that are more affected by aqueous yacon extract, Lactobacillus acidophilus CRL 1014 and aqueous yacon extract + Lactobacillus acidophilus CRL 1014 ingested by rats chemically treated with 1,2 dimethylhydrazine (DMH) to induce colon cancer. Hundred male Wistar rats were randomly divided into five treatments: G1: untreated rats; G2: DMH; G3 (probiotic): DMH + L. acidophilus CRL 1014; G4 (prebiotic): DMH + aqueous yacon extract; G5 (synbiotic): DMH + L. acidophilus CRL 1014 + aqueous yacon extract. All treatments were administered orally for 8 months, L. acidophilus CRL 1014 was administered at 109 CFU/ mL in 3 mL/ kg body weight and amount of aqueous yacon extract administered was calculated in relation of its fructooligosaccharides (FOS) content using fructan assay kit (Megazyme®). Animals ingested 10% of FOS in diet. Five animals from each treatment group were sacrificed after the first DMH injection and in the third, fifth and eighth months. Tissues were subjected to macroscopic analysis, measuring polyp number, volume and thickness, aberrant crypt foci (ACF) analysis, histological tissue analysis, comet assay in peripheral blood, apoptosis index, and colon samples from the first sacrifice were assessed for K-67 and p53 by immunohistochemical procedures. G3, G4 and G5 showed DNA damage reduction. G5 and G3 groups showed higher apoptosis index and decrease of Ki-67, compared to G2 (p<0.05). p53 staining did not differ among G2, G3, G4, G5. G5 showed fewer ACF number per colon in third month and in the fifth month G3, G4 and G5 showed a reduction of ACF number per colon relative to G2 (p<0.05). In the last month, G3, G4 and G5 showed no effect on ACF number per colon relative to G2.. / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-19Bitstream added on 2014-06-13T19:18:23Z : No. of bitstreams: 1 redondo_nc_me_arafcf.pdf: 1795708 bytes, checksum: 2cebfc96cd2f986b6bad66834d77de3d (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Tendo em vista verificar algumas características essenciais aos microrganismos para serem considerados como probióticos, o objetivo deste trabalho foi avaliar *in vitro* de características probióticas do *Enterococcus faecium *CRL183 e do* Lactobacillus helveticus *ssp* jugurti* 416. Primeiramente foi testada a capacidade destes microrganismos em resistir aos pH 1.5, 2.0, 3,0 e 4,0 em meio de cultivo específico para cada espécie. Em seguida foi realizado o teste de sobrevivência ao trânsito gastrintestinal, onde, foram simuladas as condições do estômago e do intestino delgado, determinando-se a viabilidade dessas bactérias frente à pepsina em pH 2.0 e a pancreatina em pH 8.0. A resistência aos sais biliares foi avaliada inoculando o *Enterococcus faecium *CRL183 e do* Lactobacillus helveticus * ssp* jugurti* 416 em meio de cultivo suplementado com 0,1; 0,2; 0,3 e 0,5% de Oxgall. Já para teste de produção da hidrolase de sais biliares, foi vericada a ocorrência da mudança de cor das colônias ou precipitação dos sais biliares taurodeoxicolico e glicodeoxicolico (TDCA e GDCA). No estudo de auto-agregação e coagregação essas cepas foram colocadas separadamente (auto-agregação) e associados (coagregação) e verificada a densidade óptica (*DO*560). Foi testada a produção de substâncias antagônicas pelos dois microrganismos estudado frente a *Escherichia coli* 0157: H7, *Listeria monocytogenes* V2 e *Salmonella Enteritidis *por meio do teste *spot-on-the lawn*.* *Os resultados demonstraram que os microrganismos resistiram a todos os pH. Essas bactérias mostraram também ser tolerantes ao teste de sobrevivência ao trânsito gastrintestinal e também no teste de sobrevivência a sais biliares, porém neste teste, o *Enterococcus faecium *CRL 183 obteve um tempo de retardo menor em relação ao *Lactobacillus helveticus ssp. jugurti* 416. Já os resultados obtidos... / The purpose of this work was to assess in vitro the probiotic characteristics of Enterococcus faecium CRL183 and Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, having as an aim to verify some characteristics which are essential to the microorganisms, in order to be considered as probiotic. Firstly, the capacity of these microorganisms to resist to pH 1.5, 2.0, 3.0and 4.0 was tested in a specific culture medium for each species. Then the survival test to the gastrointestinal passage was done, and the conditions of the stomach and small intestine were simulated, so determining the viability of these bacteria comparing with pepsin at pH 2.0 and pancreatin at pH 8.0. The resistance to bile salts was assessed by inoculating Enterococcus faecium CRL183 and Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416 in a culture medium supplemented with 0,1; 0,2; 0,3 and 0,5 % of Oxgall. However, for the production test of the hydrolase of bile salts, it was verified the occurrence of change in color of the colonies, or the precipitation of the bile salts taurodeoxycholic and glycodeoxycholic (TDCA and GDCA). In the auto-aggregation and co-aggregation studies, these strains were placed separately (auto-aggregation) and associated (co-aggregation), and then the optical density was verified (DO560), for completion and adhesion intestinal epithelium was tested Enterococcus faecium CRL183 and Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416 with the Escherishia coli 0157: H7. The production of antagonist substances by both studied microorganisms was tested in comparison with Escherishia coli 0157: H7, Listeria monocytogenes V2 and Salmonella enteriotidis, by using the spot-on-the-lawn test. The results demonstrated that the microorganisms resisted to all pH. These bacteria also showed to be tolerant to the survival test to the gastrointestinal passage and also to the survival test to bile salts, though in this test,...(Complete abstract click electronic access below)

Introdução: Fibrose hepática é a resposta cicatricial a lesões celulares agudas ou crônicas do fígado. Produtos derivados do intestino podem chegar ao fígado através da veia porta e mediar resposta inflamatória via receptores TLR4. O aumento de citocinas inflamatórias induz a ativação de células estreladas, fibroblastos periportais e células de Kupffer. A ativação destas células estimula a secreção de TGFβ e a deposição excessiva de colágeno. Assim, a modulação da microbiota intestinal com uso de probióticos poderia reduzir a inflamação e fibrogênese hepática. Objetivo: Avaliar o efeito do Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) sobre a fibrose hepática em modelo de hepatopatia colestática crônica em ratos. Métodos: Ratos Wistar (n = 29) adultos machos (299,89g ± 42,89 g) foram submetidos a ligadura de ducto biliar (BDL) ou a manipulação de ducto biliar comum sem ligadura (Ctrl). Após 14 dias, os grupos foram novamente divididos para receber gavagens durante 14 dias: os grupos Ctrl e BDL receberam 1 ml de PBS e os grupos Ctrl-P e BDL-P, 1 ml de PBS contendo 2,5 × 107 UFC de LGG. A eutanásia ocorreu 5 dias após o término do tratamento quando foram coletados amostras de sangue e fígado. Resultados: A ligadura de ducto biliar promoveu redução no peso e na albumina plasmática acompanhado da elevação das provas de disfunção hepatobiliar em comparação aos grupos controle. O tratamento com LGG não alterou os parâmetros séricos ou o peso corporal dos animais. Não houve diferença na atividade de superóxido dismutase (SOD) entre os grupos. A atividade de catalase (CAT) e os níveis de sulfidrilas foram significativamente menores no grupo BDL em relação aos controles. O tratamento com LGG mostrou uma tendência ao aumento dos níveis de sulfidrilas. A razão SOD/CAT foi maior no grupo BDL em relação aos controles e o tratamento com LGG preveniu este desequilíbrio. O tratamento com LGG mostrou uma tendência a redução da razão SOD / CAT. A expressão gênica de Tlr4, Tnfα e Il6 e os níveis de IL1β foram maiores no grupo BDL em relação ao controle. O tratamento com LGG atenuou parcialmente a elevação de IL1β e Tlr4. O grupo BDL-P teve redução da expressão gênica de Il6 em relação ao grupo BDL. A expressão gênica de Tgfβ foi maior no grupo BDL em comparação ao Ctrl. A expressão de metaloproteinases 2 e 9 foi significativamente maior nos grupos BDL e BDLP, sem diferença em relação ao tratamento com LGG. A deposição de colágeno e a reação ductular avaliado pelo conteúdo de citoqueratina 7 (CK7) foi maior nos animais submetidos a ligadura de ducto biliar. O tratamento com LGG reduziu significativamente a deposição de colágeno e conteúdo de CK7 no fígado em comparação com grupo de BDL. Conclusão: O tratamento com LGG foi capaz de reduzir a fibrose hepática, a reação ductular e a expressão gênica de Il6 em modelo de hepatopatia colestática crônica em ratos. / Introduction: Liver fibrosis is a wound-healing response to acute or chronic cellular liver injury. Gut-derived products can reach the liver through the portal vein and mediate inflammatory response via TLR4. The increase of inflammatory cytokines induces the activation of stellate cells, periportal fibroblasts and Kupffer cells. The activation of these cells stimulates the secretion of TGFβ and the excessive collagen deposition. Thus, modulation of gut microbiota using probiotics could reduce inflammation and hepatic fibrogenesis. Aim: To evaluate the effect of Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) on liver fibrosis in a model of cholestatic liver disease in rats. Methods: Adult male (n = 29) Wistar rats (299.89 g ± 42.89 g) were subjected to bile duct ligation (BDL) or the manipulation of common bile duct without ligation (Ctrl). After 14 days, groups were again divided to receive gavagens during 14 days: Ctrl and BDL groups received 1 ml of PBS and Ctrl-P and BDL-P groups, 1 ml of PBS containing 2.5 × 107 CFU of LGG. Euthanasia occurred five days after the end of the treatment when were collected samples of blood and liver tissue. Results: The bile duct ligation promoted a reduction in body weight and plasma albumin levels followed by an increase of liver dysfunction parameters in comparison to control groups. LGG treatment did not change serum analyses or body weight of animals. There was no difference in superoxide dismutase activity (SOD) between groups. The catalase activity (CAT) and sulfhydryl levels were significantly lower in the BDL group compared to controls. Treatment with LGG showed a tendency to increase sulfhydryl levels. The SOD / CAT ratio was higher in BDL group compared to controls and treatment with LGG prevented this imbalance. Treatment with LGG showed a tendency to decrease SOD / CAT ratio. The gene expression of Tlr4, Tnfα and Il6 and IL1β levels were higher in the BDL group compared to the control. Treatment with LGG partially attenuated the increase of IL1β and Tlr4. The BDL-P group had decreasing in Il6 gene expression compared to the untreated group. The gene expression of Tgfβ was higher in the BDL group compared to the Ctrl. The expression of metalloproteinases 2 and 9 was significantly higher in BDL and BDL-P groups, with no difference in comparison to treatment with LGG. The collagen deposition and ductular reaction evaluated by the content of cytokeratin 7 (CK7) was higher in animals submitted to the bile duct ligation. The hepatic collagen deposition and CK7 content was significantly decreased in BDL-P compared to BDL group. Conclusion: Treatment with LGG was able to reduce liver fibrosis, ductular reaction and Il-6 gene expression in a model of chronic cholestatic liver disease in rats.

A demanda por novos produtos alimentícios tem motivado o desenvolvimento da área de embutidos, embora ainda exista certo preconceito com estes produtos, devido ao alto teor de gorduras, aditivos e especiarias neles contidos. A adição de probióticos aos embutidos pode trazer benefícios à saúde, contribuindo para o aumento do consumo destes produtos, os quais podem também se tornar alimentos funcionais. Nesse sentido, o desenvolvimento de um embutido funcional apresenta vantagem adicional, uma vez que a maioria dos alimentos funcionais são produtos lácteos, que não podem ser consumidos por pessoas intolerantes à lactose. Esta tese teve os seguintes objetivos: 1) isolar e caracterizar bactérias ácido lácticas a partir de linguiças suínas defumadas, sem adição de culturas iniciadoras de fermentação, produzidas em uma indústria de embutidos; 2) testar o potencial probiótico das cepas isoladas in vitro e in vivo e desenvolver uma linguiça suína adicionada da bactéria probiótica selecionada, nativa do produto elaborado. Os resultados demonstraram que dentre as vinte e seis cepas isoladas, Lactobacillus plantarum BLS29 apresentou propriedades tecnológicas adequadas para a industrialização de embutidos, como a rápida acidificação do meio de cultura, ausência da produção hemólise e de CO2, rápida multiplicação em temperaturas de 15°C e 37°C e em presença de sais de cura. Esta cepa também foi capaz de inibir a multiplicação de diversos patógenos in vitro, inclusive Salmonella Enteritidis SE86 (importante causador de surtos alimentares no estado do RS). Além disso, a BLS29 não causou nenhuma lesão em camundongos gnotobióticos, sugerindo ser segura para a utilização em alimentos. Em um segundo momento desse trabalho, Lactobacillus plantarum BLS29 foi utilizado como cultura starter funcional para desenvolvimento da linguiça funcional, a qual foi elaborada utilizando a mesma formulação de onde a bactéria foi isolada. Nesse produto, a bactéria persistiu por períodos compatíveis com o período de consumo da região onde foi produzido o embutido. Foi verificada contagem total de 12,9 log UFC/g-1 de bactérias lácticas, no produto testado, e 10,6 log UFC/g-1, no controle, sendo que as características físico-químicas de ambos foram muito semelhantes. Baseado nesses resultados a BLS29 pode ser utilizada na produção de embutido fermentado. / The demand for new food products has motivated the development of the area of embedded, although there is still some prejudice with these products, due to the high fat, additives and spices contained therein. The addition of probiotics to inline can bring health benefits, contributing to the increased consumption of these products, which may also become functional foods. Accordingly, the development of a functional features embedded additional advantage , since most of the functional food are dairy products, which can’t be consumed by lactose-intolerant people. This thesis has the following objectives: 1) to isolate and characterize lactic acid bacteria from smoked pork sausages without addition of starter cultures fermentation, produced in a embedded industry; 2) test the potential of probiotic strains in vitro and in vivo and develop a swine sausage added the probiotic bacteria selected, native to manufactured product. The results showed that among the twenty isolated six strains of Lactobacillus plantarum showed BLS29 technological properties suitable for the manufacturing of sausages, such as fast acidification of the culture medium, absence of CO2 production, multiplying rapidly at temperatures of 15°C and 37°C and in the presence of curing salts. This strain was also able to inhibit the growth of various pathogens in vitro, including Salmonella Enteritidis SE86 (important cause of food borne outbreaks in the state of RS). Furthermore, BLS29 caused no damage in gnotobiotic mice, demonstrating to be safe for use in foods. In a second phase of this study, Lactobacillus plantarum BLS29 was used as functional starter culture for the development of functional sausage, which was prepared using the same formulation from which the bacterium was isolated. In this product, the bacteria persisted for periods consistent with those of consumption in the region where it was produced the embedded periods. Total count of 12.9 log UFC/g-¹ of lactic acid bacteria in the tested product was verified, and 10.6 log UFC/g-¹, in control, and the physic-chemical characteristics were very similar to the control. Based on these results BLS29 can be used in the production of fermented sausages.

A hidrólise enzimática de penas residuais da indústria avícola constitui uma alternativa ao descarte irregular e uma fonte rica em aminoácidos para a produção de rações animais. A presença de queratinases em linhagens bacterianas probióticas, pode, concomitantemente, permitir um melhor aproveitamento de rações contendo queratina, devido a possibilidade de suplementação da dieta de animais monogástricos com tais microrganismos. Igualmente, proteases queratinolíticas possuem ampla utilização na indústria. Neste contexto, uma protease queratinolítica da linhagem probiótica FTC01PR01 de Bacillus subtilis foi purificada através de cromatografia líquida (Sephadex G-75 e DEAE Sepharose) e caracterizada por ensaio de proteólise em azocaseína com diversos interferentes, revelando uma serinoprotease com, aproximadamente, 31 kDa e atividade ótima a 60 °C em pH neutro e alcalino. Embora a enzima não seja termoestável, constatou-se que sua atividade é alterada na presença de íons manganês, apresentando estimulação em temperatura de 37 °C e aumento da termotolerância à 55°C. O crescimento do microrganismo em substratos queratinosos demonstrou eficiência para degradação de farinha de pena e penas brancas seguido por menor degradação de penas melânicas. Sendo constituído exclusivamente de α-queratina, o cabelo humano não sofreu proteólise. A enzima pode ser aplicada na indústria para a degradação de materiais recalcitrantes bem como a produção de ração animal. A efetividade do microrganismo in vivo para aumentar a digestibilidade da farinha de pena aliada a função probiótica, demanda mais estudos. / Enzymatic hydrolysis of waste feathers constitute an alternative to irregular disposal and a rich source of aminoacids for animal feed production. The presence of keratinases in probiotic bacterial strains may, concomitantly, allow better use of keratin-based feeds, due to the possibility of diet supplementation with beneficial microorganisms. In this context, a keratinolytic protease of Bacillus subtilis FTC01PR01 was purified by liquid chromatography (Sephadex G-75 and DEAE Sepharose) and characterized by azocasein proteolysis assay, revealing a serine protease with, approximately 31 kDa, and optimal activity at 60 ° C on neutral and alkaline pH. Although the enzyme was not thermostable, it’s activity was altered in presence of manganese ions, with stimulation at temperature of 37 °C and increased thermal tolerance at 55 °C. Microorganism growth on keratin substrates demonstrated efficiency for feather meal and white feathers degradation, followed by less degradation of melanized feathers. As a source of pure α-keratin, human hair was not degraded. The enzyme may be applied in industry for recalcitrant materials degradation and animal feed production. The effectiveness of the microorganism to increase the feather meal digestibility; ally to the probiotic function, demand further studies.