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Estudo retrospectivo-sistemático e análise quantitativa da proliferação celular e apoptose; identificação da proteína conexina 43 e 26 aberrante em glândula perianal normal, hiperplásica e neoplásica em cães / Retrospective - systematic study and quantitative analysis of the cellular proliferation and apoptosis and identification of connexin 43 and aberrant 26 protein in normal, hyperplasic and neoplastic perianal glands in dogsAna Maria Cristina Rabello Pinto da Fonseca Martins 05 July 2006 (has links)
Duzentos e quarenta e cinco neoplasias de glândula perianal de cães dos arquivos do Departamento de Patologia da FMVZ/ USP, de 1984 à 2004, foram revisadas histologicamente. A grande maioria dos casos (34%) foi classificada como adenoma moderadamente diferenciado, grupo II, em machos com mais de oito anos de idade o que reflete a dependência androgênica dessas neoplasias. A análise quantitativa da proliferação celular e apoptose nos diferentes tipos histológicos de neoplasias, hiperplasia e tecido normal dessas glândulas determinou um padrão paralelo de aumento de ambas as quantificações. Com os resultados do índice de crescimento ajustado obtivemos que, embora os carcinomas tenham um nível de proliferação celular muito maior que os adenomas (grupo I), esses têm um potencial de crescimento maior, levando-se em conta a apoptose. Investigamos, também, a expressão de Cx43, 26 e 32 nessas glândulas perianais com métodos imunoistoquímicos. A Cx 43 expressava-se em glândulas perianais normais, hiperplásicas, adenomas (grupo I) e adenomas moderadamente diferenciados. Nos adenomas pouco diferenciados (grupo II), a expressão estava reduzida e não se expressava nos carcinomas (grupo III). A Cx 26 acumulava-se no citoplasma nas glândulas normais, hiperplásicas, adenomas (grupo I) e adenomas moderadamente diferenciados (grupo II). Nos adenomas pouco diferenciados (grupo II), a expressão estava reduzida e, ausente, nos carcinomas. A Cx 32 não foi identificada em nenhum dos grupos (I, II e III) ou glândulas normais e hiperplásicas. Concluindo, Cx 43 e Cx26 são importantes para a homeostasia de glândula perianal normal, podendo estar associadas aos receptores de andrógenos presentes em suas células. Este foi o primeiro estudo mostrando a apoptose e sua influência na fase promocional da carcinogênese e, também, o primeiro estudo mostrando a expressão de Cx43, Cx 26 citoplasmática e ausência de expressão da Cx 32 em glândulas perianais normais, hiperplásicas e neoplásicas em cães / Two hundred and forty five neoplasms of the perianal glands of dogs from the archives of the Department of Pathology of the FMVZ/USP, 1984 to 2004, have been reviewed hystologically. Most of the cases (34%) were classified as moderately differentiated adenomas, group II, in males over 8 years of age, which showed an androgenic dependence of these neoplasms. The quantitative analysis of the cellular proliferation and apoptosis, in the different hystologic types of neoplasia, hyperplasia and normal tissue of these glands, determined a parallel pattern of increase in both quantifications. The values of the net growth index showed that although carcinomas have a much higher level of proliferation than adenomas (group I), these latter have a much higher potential of growth, taking into account the effect of the apoptosis. The occurrence of Cx 43, 26 and 32 in these perianal glands was also investigated by immunohystochemical methods. Cx 43 expression was present in normal, hyperplasic, adenomas (group I) and moderately differentiated adenomas perianal glands. In poorly differentiated adenomas (group II), the expression was reduced and was absent in carcinomas. Cx 26 was accumulated in the cytoplasm in normal, hyperplasic, adenomas (group I) and moderately differentiated adenomas glands. In poorly differentiated adenomas (group II), the expression was reduced and was absent in carcinomas. Cx 32 was not found in all groups (I, II, III), normal and hyperplasic glands. In conclusion, Cx 43 and Cx 26 are important for homeostasis of normal canine perianal glands, being able to be associated with the androgen receptors present in their cells. This was the first study showing the apoptosis and its influence on the promotional phase of carcinogenesis and, also, the first study showing the occurrence of Cx 43, cytoplasmatic Cx 26 and no expression of Cx 32 in normal, hyperplasic and neoplastic canine perianal glands
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Relevância prognóstica da expressão imuno-histoquímica dos receptores KI-67 em adenomas hipofisários / Prognostic relevance of the imunohistochemical expression of KI-67 receptors in pituitary adenomasNascimento, Ana Gisélia Portela de Araújo Cortês 30 September 2016 (has links)
Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-05-17T21:14:35Z
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Previous issue date: 2016-09-30 / Pituitary adenomas represent 10-15% of all intracranial tumors with an incidence of 1/1000 of the population. They are considered benign and mostly slow growth. Despite this, about 35% may present with invasion of parasellar compartments and a significant number have a clinically aggressive behavior with early recurrence during follow-up, despite surgery and other therapeutic approaches. Such aggressive tumors should be identified early in order to provide a more incisive treatment and / or a strict clinical and radiological follow-up, with prompt djunctive therapy institution in persistence or recurrence of these tumors. Despite these considerations, to date, no clinical, radiological and histological marker predicting such behavior has been established. This study aims to reassess the role of Ki-67 through an improved immunohistochemical technique for the expression of these antigens and correlate it to demographic and clinicopathological parameters of pituitary adenomas. This is a crosssectional study conducted from November 2015 to August 2016 were used pituitary adenoma tissue from 62 patients from the Endocrinology Service of the University of the Federal University of Maranhão Hospital. For evaluation of adenomas of medical records data were analyzed, namely: clinical and serum levels of related hormones as well as magnetic resonance imaging of the pituitary gland. To analyze the expression of Ki-67 was performed immunohistochemical technique using the anti-human monoclonal primary antibody, expressed by the percentage of labeled nuclei in the form of labeling index Ki-67. In our sample of 62 patients, 31 patients were female (50%) with a mean age at surgery of 46.2 (± 13.3) years, ranging from 16 to 73 years. Ki-67 index, as well as their median had to be higher in females, with p = 0.04 and p = 0.02, respectively. There was no predominance of expression and Ki-67 index with respect to age and diagnosis. Adenomas giant had higher median Ki-67 with respect to non giants with p = 0.04, but there was no correlation of Ki-67 with tumor invasion. The pituitary adenomas previously submitted to specific pharmacotherapy showed expression of Ki-67 lower, however, only when the somatotropinomas were analyzed separately, there was statistically significant with p = .0,03. The Ki-67 antigen, a marker of tumor proliferative activity, play an important role in pituitary adenomas. In conjunction with other biomarkers such as tumor invasion, large volume adenoma the initial presentation of patients and / or rapid tumor growth rate documentation can lead to identification of patients which show an aggressive clinical behavior, in order to conduct a multimodal therapeutic approach more effective or more strict postoperative follow-up. / Adenomas hipofisários representam de 10-15% de todas as neoplasias intracranianas com prevalência de um caso para 1000 habitantes. Apresentam grande variação de comportamento clínico, sendo a maioria de crescimento indolente, enquanto cerca de 35% podem ser invasivos e um pequeno grupo francamente agressivo. Até o presente momento, não há um biomarcador que possa predizer seu comportamento de forma confiável, o que possibilitaria uma terapia adjuvante mais agressiva ou um seguimento clínico mais rigoroso. O objetivo desse estudo foi avaliar a expressão e o índice do marcador imuno-histoquímico de proliferação celular, antígeno Ki-67 em adenomas hipofisários e correlacioná-lo a parâmetros demográficos e clínico-patológicos, visando definir sua relevância prognóstica. Trata-se de um estudo transversal realizado no período de novembro de 2015 a agosto de 2016. Foram utilizados tecidos de adenomas hipofisários de 62 pacientes oriundos do Serviço de Endocrinologia do Hospital Universitário da Universidade Federal do Maranhão. Para avaliação dos adenomas foram analisados dados dos prontuários, a saber: avaliação clínica e dosagens séricas de hormônios relacionados, assim como ressonância nuclear magnética de hipófise. Para analisar a expressão do Ki-67, foi realizada a técnica de imuno-histoquimica utilizando-se o anticorpo primário monoclonal anti-humano expressado pela percentagem de núcleos imunopositivos sob forma de índice de marcação de Ki-67. Na amostra de 62 pacientes, 31 pacientes foram do sexo feminino (50%) com a média de idade à época da cirurgia de 46,2 (±13,3) anos, variando de 16 a 73 anos. O antígeno Ki-67 apresentou expressão em 37 (59,7%) pacientes, variando o seu índice de 0,1% a 2,4%. O índice Ki-67, assim como a sua mediana apresentaram-se mais elevados no sexo feminino com p=0,04 e p=0,02, respectivamente. Não houve predominância da expressão e do índice de Ki-67 com relação a idade e diagnóstico. Adenomas gigantes apresentaram mediana de Ki-67 mais elevada com relação aos não gigantes com valor de p=0,04, mas não houve qualquer correlação de Ki-67 com a invasão tumoral. Os adenomas hipofisários previamente submetidos à farmacoterapia específica apresentaram expressão de Ki-67 mais baixos, no entanto, somente quando os somatotropinomas foram analisados de forma isolada, houve significância estatística com p=0,03. O antígeno Ki-67, marcador de atividade proliferativa tumoral, tem papel relevante em adenomas hipofisários. Em conjunto com outros biomarcadores, como invasão tumoral, grande volume do adenoma à apresentação inicial dos pacientes e/ou documentação de rápida velocidade de crescimento do tumor, pode levar a identificação de pacientes que demonstrem um comportamento clínico agressivo, de forma a conduzir a uma abordagem terapêutica multimodal mais efetiva ou a um seguimento pós operatório mais estrito.
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Estudo retrospectivo-sistemático e análise quantitativa da proliferação celular e apoptose; identificação da proteína conexina 43 e 26 aberrante em glândula perianal normal, hiperplásica e neoplásica em cães / Retrospective - systematic study and quantitative analysis of the cellular proliferation and apoptosis and identification of connexin 43 and aberrant 26 protein in normal, hyperplasic and neoplastic perianal glands in dogsMartins, Ana Maria Cristina Rabello Pinto da Fonseca 05 July 2006 (has links)
Duzentos e quarenta e cinco neoplasias de glândula perianal de cães dos arquivos do Departamento de Patologia da FMVZ/ USP, de 1984 à 2004, foram revisadas histologicamente. A grande maioria dos casos (34%) foi classificada como adenoma moderadamente diferenciado, grupo II, em machos com mais de oito anos de idade o que reflete a dependência androgênica dessas neoplasias. A análise quantitativa da proliferação celular e apoptose nos diferentes tipos histológicos de neoplasias, hiperplasia e tecido normal dessas glândulas determinou um padrão paralelo de aumento de ambas as quantificações. Com os resultados do índice de crescimento ajustado obtivemos que, embora os carcinomas tenham um nível de proliferação celular muito maior que os adenomas (grupo I), esses têm um potencial de crescimento maior, levando-se em conta a apoptose. Investigamos, também, a expressão de Cx43, 26 e 32 nessas glândulas perianais com métodos imunoistoquímicos. A Cx 43 expressava-se em glândulas perianais normais, hiperplásicas, adenomas (grupo I) e adenomas moderadamente diferenciados. Nos adenomas pouco diferenciados (grupo II), a expressão estava reduzida e não se expressava nos carcinomas (grupo III). A Cx 26 acumulava-se no citoplasma nas glândulas normais, hiperplásicas, adenomas (grupo I) e adenomas moderadamente diferenciados (grupo II). Nos adenomas pouco diferenciados (grupo II), a expressão estava reduzida e, ausente, nos carcinomas. A Cx 32 não foi identificada em nenhum dos grupos (I, II e III) ou glândulas normais e hiperplásicas. Concluindo, Cx 43 e Cx26 são importantes para a homeostasia de glândula perianal normal, podendo estar associadas aos receptores de andrógenos presentes em suas células. Este foi o primeiro estudo mostrando a apoptose e sua influência na fase promocional da carcinogênese e, também, o primeiro estudo mostrando a expressão de Cx43, Cx 26 citoplasmática e ausência de expressão da Cx 32 em glândulas perianais normais, hiperplásicas e neoplásicas em cães / Two hundred and forty five neoplasms of the perianal glands of dogs from the archives of the Department of Pathology of the FMVZ/USP, 1984 to 2004, have been reviewed hystologically. Most of the cases (34%) were classified as moderately differentiated adenomas, group II, in males over 8 years of age, which showed an androgenic dependence of these neoplasms. The quantitative analysis of the cellular proliferation and apoptosis, in the different hystologic types of neoplasia, hyperplasia and normal tissue of these glands, determined a parallel pattern of increase in both quantifications. The values of the net growth index showed that although carcinomas have a much higher level of proliferation than adenomas (group I), these latter have a much higher potential of growth, taking into account the effect of the apoptosis. The occurrence of Cx 43, 26 and 32 in these perianal glands was also investigated by immunohystochemical methods. Cx 43 expression was present in normal, hyperplasic, adenomas (group I) and moderately differentiated adenomas perianal glands. In poorly differentiated adenomas (group II), the expression was reduced and was absent in carcinomas. Cx 26 was accumulated in the cytoplasm in normal, hyperplasic, adenomas (group I) and moderately differentiated adenomas glands. In poorly differentiated adenomas (group II), the expression was reduced and was absent in carcinomas. Cx 32 was not found in all groups (I, II, III), normal and hyperplasic glands. In conclusion, Cx 43 and Cx 26 are important for homeostasis of normal canine perianal glands, being able to be associated with the androgen receptors present in their cells. This was the first study showing the apoptosis and its influence on the promotional phase of carcinogenesis and, also, the first study showing the occurrence of Cx 43, cytoplasmatic Cx 26 and no expression of Cx 32 in normal, hyperplasic and neoplastic canine perianal glands
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Influência da idade gestacional sobre as taxas de proliferação e apoptose placentária em bovinos / Influence of gestational stage on cell proliferation and apoptosis in bovine placentaFacciotti, Patricia Reginato 26 June 2009 (has links)
A placenta dos mamíferos é um órgão transitório formado pela justaposição das membranas fetais e tecidos maternos, sendo responsável pelas trocas fisiológicas entre o feto e a mãe e pela síntese de hormônios fundamentais para o sucesso da gestação. O crescimento placentário e a nutrição fetal requerem altas taxas de crescimento e diferenciação celular, sendo fundamental um balanço adequado entre proliferação e morte celular das células trofoblásticas placentárias. Estas células possuem propriedades particulares no que diz respeito a suas funções metabólicas, endócrinas e angiogênicas, porém a atividade proliferativa destas células em diferentes regiões da placenta bovina é desconhecida. Neste estudo, levantamos a hipótese de que as células de diferentes regiões placentárias de bovinos devem apresentar padrões distintos de atividade proliferativa e morte celular, podendo ser algumas regiões mais ou menos responsáveis pelo desenvolvimento fetal ao longo da prenhez. Para testar esta hipótese, analisamos as células de diferentes regiões da placenta e em diferentes estágios gestacionais através de citometria de fluxo e coloração com marcador histoquímico, além de observações macroscópicas e histológicas para avaliar a morfologia da placenta e suas regiões. Foram analisadas as regiões: central e marginal dos placentônios, área interplacentomal, microplacentônios (≤1,0cm) e fusões placentomais. Por meio da citometria de fluxo realizamos uma distribuição das células placentárias nas diferentes fases do ciclo celular, observando a porcentagem de células em proliferação e apoptose. Em nossos resultados, encontramos particularidades macroscópicas, histológicas e metabólicas nas células de cada região placentária. A margem do placentônio apresentou um aumento prematuro de células em apoptose, com um aumento crescente a partir de 170 dias até o final da gestação, sugerindo que nesta região se inicie a desconexão placentomal. As áreas interplacentomais e fusões de placentônios apresentaram um equilíbrio na atividade proliferativa ao longo da gestação, sugerindo que a proliferação celular possua uma menor importância para a homeostase tecidual nestas regiões. Os microplacentônios apresentaram uma atividade proliferativa mais lenta, porém crescente ao longo da gestação, sugerindo pouca contribuição destas estruturas para a liberação placentária. Estes achados estão de acordo com nossa hipótese de que cada região placentária contribui de forma distinta para o crescimento da placenta bovina, cada uma delas participando de maneira particular no processo de maturação e desconexão placentária e no crescimento e nutrição fetal ao longo da gestação. O entendimento das taxas proliferativas e apoptóticas é importante para a compreensão da patogênese das perdas embrionárias e anormalidades no desenvolvimento placentário. A descrição dos processos de proliferação e morte celular em diferentes regiões da placenta de gestações bovinas poderá ajudar a elucidar processos fisiológicos desconhecidos relacionados ao desenvolvimento do concepto e a falhas gestacionais. Espera-se que este estudo forneça elementos essenciais à melhor compreensão do desenvolvimento placentário, estabelecendo padrões de normalidade para cada região da placenta bovina e auxiliando na compreensão dos mecanismos de falhas gestacionais que levam a anormalidades fetais e placentárias, muito comuns em técnicas avançadas de manipulação embrionárias, como a fertilização in vitro, a produção de animais transgênicos e a clonagem animal. / The mammalian placenta is a transitory organ consisting of maternal-fetal tissues union, responsible for nutrient exchange and synthesis of many hormones which are essential for success of the gestation. Placental growth and fetal nutrition require high rates of cellular turnover and differentiation, and a balance between proliferation and apoptosis in the trophoblastic cells are essential to the placental development. The trophoblastic cells, that form the fetal portion of placenta, has unique properties and a wide range of metabolic, endocrine and angiogenic functions, but the proliferative profile of those cells. In this study we hypothesed that cells from different placental regions on bovine placenta must reveal distinct patterns of proliferative activity and apoptosis, and some regions may be potentially responsible to distinct modulation patterns in fetal growth and nutrition throughout pregnancy. We analyzed cells form different regions of normal bovine placenta, namely the central region of the placentome, the placentomes edges, interplacentomal areas, placentomal fusion, and microplacentomes (≤1.0cm). The cells of those regions were analyzed by flow cytometry and with a histochemical marker, as well as macroscopical and histological analysis. Using flow cytometry we performed the percentage of cells in each cell cycle phase, including apoptosis. Our findings indicated macroscopical, histological and metabolic particularities in different placental region. The edges of the placentome revealed a premature increase in apoptotic cells, with a significantly higher number of apoptotic cells from 170 days of gestation. That suggests this region to be the point of initiation of placentomal detachment in cattle. Interplacentomal areas and placentomal fusions showed no significant variations during pregnancy, suggesting that proliferation is minor importance for tissue homeostasis in those regions. Microplacentomes revealed a lower but an ascending proliferative activity, that suggests the relatively small role of those structures, with microplacentomes not contributing significantly to normal of placental functions and conceptus development during pregnancy. Taken together, the complete understanding of placental apoptotic and proliferative profiles at distinct placental tissue regions during gestation will shed light to unknown physiological processes related to conceptus development, as some regions may be potentially responsible, at different degrees of influence, to distinct modulation patterns in fetal growth and nutrition throughout pregnancy. In that regard, results from the present study using non-manipulated bovine gestations indicated that proliferation and apoptosis exhibit patterns that are specific for the individual placental areas during gestation and at term in normal, non-manipulated pregnancies in cattle. Variations involving proliferation and apoptotic rates may influence placental maturation and detachment, compromising placental functions and leading to fetal stress, abnormalities in development and abortion, as frequently seen in bovine pregnancies from in vitro fertilization and cloning procedures. Our findings describing the pattern of cell proliferation and apoptosis in normal bovine pregnancies may be useful for unraveling some of the developmental deviations frequently seen in nature and after in vitro embryo manipulations.
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Interação funcional entre hormônios glicocorticóides e o gene supressor de tumor TP53 em um modelo celular de glioma de rato / Functional Link Between Glucocorticoid Hormones and the TP53 Tumor Suppressor Gene in a Rat Glioma Cell ModelMacedo, Antero Ferreira de Almeida 02 October 2007 (has links)
Tanto hormônios glicocorticóides (GCs) como o gene supressor de tumor TP53, medeiam a resposta celular a uma diversidade de condições fisiológicas de estresse, sendo reguladores fundamentais do processo de vida/morte de diversos tipos celulares. A interação funcional entre estes fatores vem sendo explorada, recentemente, revelando que GCs exercem um efeito dual sobre p53. O modelo celular ST1/P7 de glioma de rato é particularmente interessante para investigar o papel de p53 na ação de GCs, já que estas linhagens apresentam respostas distintas a GCs. O tratamento com Hidrocortisona (Hy) leva as células ST1 a uma complexa reversão fenotípica tumoral→normal, enquanto as células P7 são altamente resistentes ao tratamento. Foi possível observar que a ativação de p53 por Hy ocorre apenas em células ST1, mas não em P7. Esta ativação é mediada pela indução de fosforilação da Ser15 de p53 e seu acúmulo nuclear, o que resulta no aumento de sua ligação a elementos responsivos a p53 no DNA e na sua capacidade de transativação de p53, levando a um aumento da expressão de alguns de seus genes-alvo. Contudo, o bloqueio de p53 através de siRNA não foi suficiente para alterar a resposta de células ST1 a GCs, indicando que a regulação positiva de p53 por GCs pode ser um evento secundário, mas não essencial, para a resposta anti-tumoral exercida por estes hormônios em células ST1. / Both glucocorticoid hormones (GCs) and the TP53 tumor suppressor gene mediate cellular responses to a diversity of physiological stress conditions, acting as crucial regulators of the life/death process in a wide variety of cell types. The ST1/P7 rat glioma model cell system is particularly interesting to investigate the role of p53 in the action of GCs, since these cell lines display opposite responses to GCs. Treatment with Hydrocortisone (Hy) leads ST1 cells to a complete tumoral→normal phenotypic reversion, while P7 cells are highly resistant to this treatment. It was possible to observe that activation of p53 by Hy occurs only in ST1 cells, but not in GC-resistant P7 cells. This activation is mediated by induction of phosphorylation of the Ser15 residue of p53 and its accumulation in the nucleus, resulting in increased binding of p53 to its responsive elements on the DNA and in activation of its transactivating potential, leading to increased expression of some of its target genes. However, blocking of p53 through siRNA was not sufficient to alter ST1 cells response to GCs, indicating that the positive regulation of p53 by GCs may be a secondary, non-essential, event for the anti-tumor response exerted by these hormones in ST1 cells.
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Avaliação e caracterização proteica do muco de Phyllocaulis boraceiensis sobre a capacidade proliferativa de fibroblastos, células endoteliais e em modelos de cicatrização. / Evaluation and protein characterization of Phyllocaulis boraceiensis mucus in proliferative capability in fibroblasts, endothelial cells and cicatrization model.Piza, Ana Rita de Toledo 03 August 2012 (has links)
Gastrópodes terrestres secretam muco pela superfície corporal, quando se locomovem, para proteção do corpo contra injúria mecânica, dessecação ou contato com substâncias nocivas. O muco de moluscos tem sido estudado como fonte de novos compostos naturais com diversas atividades biológicas, entre elas a capacidade de induzir proliferação celular. O presente trabalho propôs o estudo do muco produzido pelas lesmas terrestres Phyllocaulis boraceiensis como agente indutor de proliferação celular e síntese de colágeno em cultura de fibroblastos humanos normais, células endoteliais e no reparo de processos cicatriciais no modelo de ferida cirúrgica da derme de camundongos. Fibroblastos tratados com proteínas do muco de P. boraceiensis em concentrações menores que 0,012 <font face=\"Symbol\">mg/µl apresentaram aumento nas taxas de proliferação avaliadas pelo método colorimétrico do MTT e em citometria de fluxo CSFE, mostrando um efeito dose-dependente. Os resultados obtidos mostraram que fibroblastos humanos normais e células endoteliais tratados com 0,012 g/<font face=\"Symbol\">ml de proteínas do muco, aumentaram significativamente a produção e secreção de elementos da matriz extracelular, como as fibras de colágeno. Houve a redução da produção de radicais livres lipídicos poli-insaturados. O ensaio de cicatrização da derme lesionada de camundongos Balb-c tratados com proteínas do muco de P. boraceiensis na concentração de 0,012 <font face=\"Symbol\">mg/µl induziu o reparo da cicatrização com maior eficácia e em menor tempo quando comparado ao grupo controle e aos tratados com a concentração de 0,18 <font face=\"Symbol\">mg/µl. Esses resultados corroboram a premissa de que o muco de P. boraceiensis, assim como o de outros gastrópodes, apresenta propriedade proliferativa das células envolvidas nos processos de cicatrização. / Mucus of molluscs has been studied as a source of new natural compounds with diverse biological activities, as ability to induce cell proliferation. The aim of this study is the potential use of mucus produced by land slugs Phyllocaulis boraceiensis as a promoter of cell proliferation and collagen synthesis in human fibroblasts, endothelial cells and in repair processes of healing wound skin of mice. Fibroblasts treated with P. boraceiensis mucus at concentrations below 0.012 <font face=\"Symbol\">mg/µl have high rates of proliferation as evaluated by the MTT and CFSE flow cytometer assays, proliferative effect was dose-dependent. Fibroblasts and endothelial cells treated with 0.012 <font face=\"Symbol\">mlowg/µl mucus induced a significant increase in production and secretion of extracellular matrix such as collagen fibers. There was a reduction in polyunsaturated lipid production. Healing assay of lesions in mice treated with mucus at 0.012 <font face=\"Symbol\">mg/µl induce repair of the scar more effectively and in less time when compared to the control group and those treated 0.18 <font face=\"Symbol\">mg/µl. These findings support the premise that the P. boraceiensis mucus demonstrates proliferative properties in cells involved in the healing process.
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Efeito da fotobiomodulação na proliferação de células-tronco da polpa de dentes decíduos esfoliados cultivadas sobre filmes de ácido polilácticoMacedo, Rômulo Augusto de Paiva 23 February 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-02-23 / A fotobiomodulação (PBM) estimula a proliferação de diferentes tipos celulares,
incluindo células-tronco. A células-tronco da polpa do dente decíduo esfoliado
(SHEDs) apresentam um potencial de diferenciação maior do que as demais célulastronco
mesenquimais, sendo o foco de diversas pesquisas na área da engenharia
tecidual. Para que as células proliferarem e se diferenciem in vitro é necessário o
desenvolvimento de um microambiente favorável, o qual pode ser fornecido por um
biomaterial que mimetize a matriz extracelular natural, destacando-se para esta
finalidade o ácido poliláctico (PLA) por suas propriedades de biocompatibilidade e
biodegradabilidade, além do baixo custo. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito
da PBM em diferentes doses na proliferação e viabilidade de SHEDs cultivadas sobre
arcabouços bidimensionais de PLA. As SHEDs foram cultivadas sobre os filmes e
divididas em três grupos: (C) controle não irradiado; (L1) irradiadas com dose de 1
J/cm2; e (L4) irradiadas com dose de 4 J/cm2. As irradiações foram realizadas com
laser diodo InGaAlP, com comprimento de onda de 660 nm e potência de 30 Mw, em
dose única. A viabilidade e a proliferação celular foram avaliadas nos intervalos de 24,
48 e 72 horas após a irradiação, através do ensaio do Alamar Blue, enquanto a
morfologia e a distribuição das células na superfície dos filmes foram avaliadas por
MEV no intervalo de 72 horas. Os dados quantitativos foram submetidos a testes
estatísticos não paramétricos. Os dados do ensaio do Alamar Blue mostraram que os
grupos L1 e L4 exibiram uma maior proliferação celular em comparação ao grupo C,
sendo as diferenças significativas entre L1 e C em 48 e 72 h (p<0,0001) e entre L4 e
C em 24 (p<0,01), 48 (p<0,001) e 72 h (p<0,0001). O percentual de redução do Alamar
blue mostrou-se significativamente maior em L4 em comparação com L1 em 24 e 72
h (p<0,05). A análise das amostras por MEV mostrou que nos grupos irradiados as
células apresentavam uma distribuição mais homogênea ao longo da superfície dos
filmes e uma maior densidade celular em comparação com o grupo C, sendo esta
diferença ainda mais evidente no grupo L4. Conclui-se que a PBM nos parâmetros
estudados, especialmente na dose de 4 J/cm2, estimula a proliferação de SHEDs em
contato com filmes de PLA, constituindo assim uma ferramenta metodológica com
potencial aplicação nas técnicas de engenharia tecidual / Photobiomodulation (PBM) stimulates the proliferation of different cell types,
including stem cells. Stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHEDs)
present a greater differentiation potential compared to other mesenchymal stem cells,
being the focus of several studies in the field of tissue engineering. In order for cells to
proliferate and differentiate in vitro it is necessary to develop a favorable
microenvironment, which can be provided by a biomaterial that mimics the natural
extracellular matrix, with polylactic acid (PLA) being distinguished for this purpose due
to its properties of biocompatibility and biodegradability, as well as low cost. The aim
of this study was to evaluate the effect of PBM in different doses on the proliferation
and viability of SHEDs cultured on two-dimensional PLA scaffolds. SHEDs were
cultured on the films and divided into three groups: (C) non-irradiated control; (L1)
irradiated with a dose of 1 J/cm2; and (L4) irradiated with a dose of 4 J/cm2. The
irradiations were performed with an InGaAlP diode laser, with wavelength of 660 nm
and power of 30 Mw, in a single dose. Cell viability and proliferation were evaluated at
24, 48 and 72 h after irradiation by Alamar Blue assay, while cell morphology and
distribution on the surface of the films were evaluated by SEM at 72 hours. The
quantitative data were submitted to non-parametric statistical tests. Data from Alamar
blue assay showed that groups L1 and L4 exhibited greater cell proliferation compared
to group C, with significant differences between L1 and C at 48 and 72 h (p<0.0001)
and between L4 and C in 24 (p<0.01), 48 (p<0.001) and 72 h (p<0.0001). The
percentage of reduction of Alamar blue was significantly higher in L4 compared to L1
at 24 and 72 h (p<0.05). Analysis of the samples by SEM showed that in the irradiated
groups the cells had a more homogeneous distribution along the surface of the films
and a higher cell density compared to the group C, with this difference being even
more evident in the group L4. We conclude that PBM in the studied parameters,
especially with the dose of 4 J/cm2, stimulates the proliferation of SHEDs in contact
with PLA films, thus constituting a methodological tool with potential application in
tissue engineering techniques.
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Desenvolvimento dos pré-estômagos de bezerros mestiços aleitados com leite em pó associado ao soro de queijo em póMiranda, Maria Vivianne Freitas Gomes de 21 August 2017 (has links)
Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-11-27T13:36:02Z
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Previous issue date: 2017-08-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to evaluate the use of whey powder associated with powdered milk as a substitute for whole milk without breastfeeding until 60 days of age on the development of pre-stomachs, growth and proliferation rate Cellular of the ruminal papillae, as well as an influence of the diets on as chymosin and pepsinogen producing cells of the calf abomasum through the immunohistochemical technique. To that end, 24 crossbred calves with one week of life were distributed in a completely randomized design with four treatments and six replicates: LI: whole milk (Control); LP: milk powder; LPS1: 80% milk powder + 20% whey powder; LPS2: 60% milk powder + 40% whey powder cheese. For the methods of dry matter (DM) consumption, measurements of hay consumption and concentrate are made by the supply / surplus method. The animals were slaughtered at 60 days of age. The cavity organs were weighed with contents, and soon thereafter emptied and newer, registering, full and empty weights, respectively. The weight of the stomach and its compartments were determined with absolute values (kg) and relative (%) as a function of the empty body weight (%PCVZ) and as a function of the weight of the whole stomach (%PE). Fragments of approximately one square centimeter (1cm2) of tissues were collected from 4 regions of the world: rumen atrium, dorsal sac, caudate-dorsal blind sac and ventral sac from where they are measured as heights of ruminal papillae. Proliferative activity was evaluated in tissue samples collected by counting Argirophilic Nucléole Organisms (AgNOR). Tissue samples of 1 cm2 of the abomasum were collected for immunohistochemistry. There was no difference for dry matter intake (P> 0.05). As averages obtained for absolute and relative weights as a function of the empty body weight of the digital compartments did not present significant residues (P> 0.05) between the treatments. Regarding the development of non-rumen papillae There were significant (P <0.05) for a height variable in the ventral sac, where animals receiving whole milk had higher averages. There were no significant differences (P> 0.05) for the rate of cell proliferation in ruminal papillae. The percentage of acini with immunoreactive cells to the chymosin and pepsinogen antibodies presented a statistical difference (P <0.05), where the calves that received a 100% whole milk diet presented a mean percentage of marking for upper chymosin (95.11%), Animals that consumed 60% milk powder + 40% whey powder (89.59%) / Objetivou-se avaliar o desenvolvimento dos pré-estômagos, o crescimento e a taxa de proliferação celular das papilas ruminais, em bezerros aleitados com sucedâneos (leite em pó e soro de queijo em pó) durante os 60 primeiros dias de vida. Verificar se a dieta pode influenciar as células produtoras de quimosina e pepsinogênio. Para isso, 24 bezerros mestiços com uma semana de vida foram distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado com 4 (quatro) tratamentos e 6 (seis) repetições: LI: leite integral (Controle); LP: leite em pó; LPS1: 80% leite em pó + 20% de soro de queijo em pó; LPS2: 60% leite em pó + 40% de soro de queijo em pó. Para os cálculos de consumo de matéria seca (MS) foram feitas medições diárias de consumo de feno e concentrado pelo método de oferta/sobra. Os animais foram abatidos aos 60 dias de vida. Os órgãos cavitários foram pesados com conteúdo, e logo em seguida, esvaziados e novamente pesados, registrando-se, os pesos cheios e vazios, respectivamente. Foi determinado o peso dos estômagos e de seus compartimentos com valores absolutos (kg) e relativos (%) em função do peso de corpo vazio (% PCVZ) e em função do peso do estômago completo (% PE). Foram retirados fragmentos de aproximadamente um centímetro quadrado (1cm2) de tecidos de 4 regiões do rúmen: átrio ruminal, saco dorsal, saco cego caudo-dorsal e saco ventral de onde foram medidas as alturas das papilas ruminais. A atividade proliferativa foi avaliada em amostras de tecidos retiradas do rúmen por meio da contagem de Regiões Organizadoras de Nucléolos Argirofílicos (AgNOR). Foram coletadas amostras teciduais de 1cm2 do abomaso para a realização da imunohistoquímica. Não houve diferença significativa para o consumo de matéria seca (P>0,05). As médias obtidas para pesos absolutos e relativos em função do peso do corpo vazio dos compartimentos gástricos não apresentaram diferenças significativas (P>0,05) entre os tratamentos. Quanto ao desenvolvimento de papilas no rúmen houve diferenças significativas (P<0,05) para a variável altura no saco ventral, onde os animais que receberam leite integral possuíram maiores médias. Não houve diferenças significativas (P>0,05) para a taxa de proliferação celular nas papilas ruminais. Os percentuais de ácinos contendo células imunorreativas aos anticorpos quimosina e pepsinogênio apresentaram diferença estatística (P<0,05), onde os bezerros que receberam a dieta 100% leite integral, apresentaram média percentual de marcação para quimosina superior (95,11%), aqueles animais que consumiram a dieta 60% leite em pó + 40% de soro de queijo em pó (89,59%) / 2017-11-27
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Transição epitelial-mesenquimal e fração de crescimento tumoral em carcinoma escamocelular de boca com a via hedgehog ativadaDantas, Rebeca Carolina Moraes January 2018 (has links)
Submitted by Programa de Pós-Graduação em Odontologia Saúde (mestrodo@ufba.br) on 2018-09-05T14:56:42Z
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Tese Final REBECA.pdf: 4431734 bytes, checksum: 07c03f057f035f7cfc830f968ac47ee6 (MD5) / Approved for entry into archive by Edvaldo Souza (edvaldosouza@ufba.br) on 2018-09-12T20:57:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1
Tese Final REBECA.pdf: 4431734 bytes, checksum: 07c03f057f035f7cfc830f968ac47ee6 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-12T20:57:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Tese Final REBECA.pdf: 4431734 bytes, checksum: 07c03f057f035f7cfc830f968ac47ee6 (MD5) / INTRODUÇÃO/OBJETIVO: A via Hedgehog (HH) está ativada no Carcinoma
Escamocelular de Boca (CEB) e pode estar relacionada a transição epitelialmesenquimal
(TEM) e a proliferação celular neste tumor. Diante disso, o presente
trabalho teve como objetivo avaliar a TEM e potencial proliferativo em CEBs com a via
HH ativada. MATERIAL E MÉTODOS: Vinte e três casos de CEBs GLI1 positivos
foram submetidos à reação imuno-histoquímica para as proteínas Snail, Slug, Ncaderina,
E-caderina, β-catenina e MCM3. As análises da imunoexpressão foram
realizadas em front de invasão e ilhas tumorais e os dados clínico-patológicos foram
avaliados e comparados. RESULTADOS: No front de invasão, os casos de CEBs
apresentaram expressão positiva para Snail, Slug e MCM3 no núcleo das células
tumorais e observou-se perda de expressão membranar e citoplasmática de E-caderina e
β-catenina. A expressão positiva para N-caderina foi observada em 31,78% dos casos.
Imunoexpressão de GLI1 foi associada com a perda de expressão de E-caderina
(p<0,001), β-catenina membranar (p<0,001) e β-catenina citoplasmática (p=0,02). Nas
ilhas tumorais, observou-se expressão nuclear GLI1, Snail, Slug e MCM3. E-caderina e
β-catenina exibiram marcação positiva membranar restabelecida. Observou-se uma
correlação positiva e estatisticamente significante entre GLI1 e Snail (p=0,05), Ecaderina
(p=0,01) e β-catenina citoplasmática (p=0,04). A expressão de β-catenina
membranar estava relacionada com presença de metástase em linfonodos e estadiamento
clínico e GLI1 apresentou associação com o estadiamento clínico. CONCLUSÕES: A
via HH pode atuar na regulação da expressão de fenótipo mesenquimal. A perda de
expressão de E-caderina e β-catenina está relacionada a região de front, enquanto que a
adesão celular se encontra reestabelecida em ilhas tumorais, de forma independente de
MCM3. O padrão de expressão de N-caderina e Slug não refletem de forma significante
o processo de TEM em CEBs com a via HH ativada. / INTRODUCTION/OBJECTIVE: The Hedgehog (HH) pathway is activated in the
Oral Squamous Cell Carcinoma (OSCC) and may be related to the epithelialmesenchymal
transition (EMT) and cellular proliferation in this tumor. The aim of the
present study was to evaluate the EMT and the cell proliferative potential in OSCC with
the activated HH pathway. MATERIAL AND METHODS: Twenty-three positive
GLI1 OSCC cases were submitted to the immunohistochemical reaction for Snail, Slug,
N-cadherin, E-cadherin, β-catenin and MCM3 proteins. Immunoexpression analyzes
were performed in front of invasion and tumor nests and the clinical and pathological
data were evaluated and compared. RESULTS: At the invasive front, OSCC cases
showed positive expression for Snail, Slug and MCM3 in the nucleus of tumor cells and
the loss of membrane and cytoplasmic expression of E-cadherin and β-catenin were
observed. Positive expression for N-cadherin was observed in 31.78% of the cases.
Immunoexpression of GLI1 was associated with loss of E-cadherin expression (p
<0.001), membrane β-catenin (p <0.001) and cytoplasmic β-catenin (p = 0.02). In the
tumor nests, it observes nuclear expression GLI1, Snail, Slug and MCM3. E-cadherin
and β-catenin showed re-established membrane positive expression There was a
positive and statistically significant correlation between GLI1, Snail (p = 0.05), Ecadherin
(p = 0.01) and cytoplasmic β-catenin (p = 0.04). The expression of β-catenin
membrane was related to the presence of matastasis in lymph nodes and to clinical
staging and GLI1 was associated with clinical staging. CONCLUSIONS: The HH
pathway may act to regulate the expression of mesenchymal phenotype. The loss of Ecadherin
and β-catenin expression is related to the front region, while cell adhesion is
re-established in tumor nests independently of MCM3. The expression pattern of Ncadherin
and Slug do not significantly reflect the TEM process in positive GLI1 OSCC
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Períodos de adaptação de bovinos Nelore confinados a dietas de alto teor de concentrado / Adaptation periods of Nellore cattle on feedlot in high-concentrate dietsEstevam, Daniela Dutra [UNESP] 22 January 2016 (has links)
Submitted by DANIELA DUTRA ESTEVAM null (daniela_estevam@yahoo.com.br) on 2016-02-01T14:08:30Z
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DISSERTAÇÃO DANIELA.pdf: 1615348 bytes, checksum: 18226c859c846688ff9fa236460a54de (MD5) / Approved for entry into archive by Sandra Manzano de Almeida (smanzano@marilia.unesp.br) on 2016-02-01T18:01:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2016-01-22 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos dos períodos de 6, 9, 14 e 21 dias de adaptação de bovinos da raça Nelore confinados a dietas de alto teor de concentrado em relação ao desempenho, variação na ingestão de massa seca, energia líquida, perfil metabólico sanguíneo, comportamento ingestivo, saúde ruminal e características de carcaça. Os animais foram alimentados durante 88 dias, independentemente do período de adaptação adotado e o delineamento utilizado foi em blocos casualizados, com seis repetições cada, em que 96 bovinos da raça Nelore não castrados (391,1 ± 30,9 kg) foram alimentados em 24 baias (4 animais/baia), de acordo com os diferentes períodos de adaptação adotados: 6, 9, 14 e 21 dias. O programa de adaptação utilizado foi em escadas, com três dietas ao longo de períodos de adaptação com seguintes níveis de concentrado: 70, 75, 80,5 e 86% da massa seca na dieta. Contrastes ortogonais foram utilizados para avaliar a relação linear, quadrática e cúbica entre os dias de adaptação e a variável dependente, além da interação de tratamento e fase (P≤0,10). Os animais adaptados por 14 dias apresentaram resultados superiores em relação ao ganho de peso diário, peso vivo final e eficiência alimentar, bem como peso de carcaça quente (P=0,04) e área de olho de lombo final (P=0,01). A adaptação por 14 dias também proporcionou aos animais melhor desenvolvimento do epitélio ruminal, pois apresentaram maior área de superfície absortiva (P=0,02) e largura de papilas (P=0,06). Além disso, esses animais demonstraram que estavam adequadamente adaptados, pois a renovação celular do epitélio ruminal demonstrou-se estabilizada no índice de proliferação celular (P=0,003) e nos núcleos em morte celular (P=0,0004). Com base nesses resultados, recomenda-se adaptar bovinos da raça Nelore a dietas de alto concentrado com o protocolo em escadas por 14 dias, pois este proporcionou maior desempenho produtivo e desenvolvimento do epitélio ruminal. / This study was designed to determine the effects of adaptation periods of 6, 9, 14 and 21 days on feedlot performance, dry matter intake fluctuations, energy gain, blood metabolic profile, feeding behavior, rumen health and carcass traits of Nellore cattle. Cattle were fed for 88-d regardless of adaptation period adopted and the experiment was designed as a completely randomized block, replicated 6 times, in which ninety-six 20-mo-old yearling Nellore bulls (391.1 ± 30.9 kg) were fed in 24 pens (4 animals/pen) according to the different adaptation periods adopted: 6, 9, 14, and 21 days. The adaptation program consisted of ad libitum feeding of 3 diets over adaptation periods with concentrate level increasing from 70, 75, 80.5 and 86% of diet dry matter. Orthogonal contrasts were used to evaluate linear, quadratic, and cubic relationship between adaptation periods and the dependent variable, moreover the interaction the treatment and phase (P≤0.10). Cattle adapted for 14 days had significantly greater for average daily gain, final body weight, G:F ratio, hot carcass weight (P=0,04) and rib-eye area (P=0,01). The adaptation for 14 days the animals also provided better development of the rumen epithelium for a greater absorptive surface area (P=0.02) and width papillae (P=0.06). Moreover, these cattle showed that were properly adapted because the cell epithelium renovation proved to be stable in cell proliferation index (P=0.003) and cell death (P=0.0004). Thus, based on the results of this study, yearling Nellore bulls should be adapted for the step protocol for 14 days, because these provided greater performance and development of the rumen epithelium. / FAPESP: 2013/25403-0
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