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RECEPTORES EP1 E EP3 MODULAM AS CRISES EPILÉPTICAS INDUZIDAS POR PENTILENOTETRAZOL E ÁCIDO CAÍNICO EM CAMUNDONGOS / EP1 AND EP3 RECEPTORS MODULATE PENTYLENETETRAZOLAND KAINIC ACID-INDUCED SEIZURES IN MICE

Reschke, Cristina Ruedell 27 June 2013 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Epilepsy is one of the most common neurologic disorders. It has been suggested that seizures may be facilitaded by inflammation. PGE2 is one of the most important inflammatory mediators, and facilitates pentylenetetrazol (PTZ)-induced seizures by stimulating EP1 and EP3 receptors. However, up to the present moment, no study has investigated whether EP1 and EP3 receptors blocking attenuate seizures induced by convulsants other than PTZ. It is also unknown whether Na+,K+-ATPase activity alterations are involved in such an effect. Therefore, in the current study we investigated whether EP1 and EP3 ligands (agonists and antagonists) modulate PTZ- and kainic acid (KA)-induced seizures, and whether alterations in Na+,K+-ATPase activity mediate such a protective effect, in mice. EP1 and EP3 antagonists (ONO-8713 and ONO-AE3-240, respectively, 10 Og/kg, s.c.) attenuated PTZ (60 mg/kg, i.p.)- and KA (20 mg/kg, i.p.)-induced seizures. The respective agonists (ONO-DI-004 and ONO-AE-248, 10 Og/kg, s.c.) facilitated seizures in both acute models, and at noneffective doses, prevented the protective effects of the antagonists. Animals injected with PTZ presented decreased Na+,K+-ATPase activity in the cerebral cortex and hippocampus. On the other hand, animals injected with KA presented increased Na+,K+-ATPase activity in the same cerebral structures at the end of the experiment. These divergent findings suggest that alterations in Na+,K+-ATPase activity in both acute models depends on the convulsant agent used and make difficult to establish a relationship between Na+,K+-ATPase activity and seizure development. Moreover, EP1 and EP3 antagonists administration abolished Na+,K+- ATPase activity alterations induced by PTZ and KA, in such a way that these alterations seem to be related more to the presence of ictal phenomenon itself than to the seizure induction mechanisms. Notwithstanding, the currrent results clearly show that EP1 and EP3 receptors might constitute novel targets for anticonvulsants development, since EP1 and EP3 decreased seizures, regardless of the convulsant agent used. / A epilepsia é uma das disfunções neurológicas mais comuns. Tem sido sugerido que as crises epilépticas podem ser facilitadas pela ocorrência de inflamação. A PGE2 é um dos mediadores inflamatórios mais importantes que, agindo por meio dos receptores EP1 e EP3, facilita as convulsões induzidas por pentilenotetrazol (PTZ). Contudo, até a presente data, nenhum estudo investigou, de maneira sistêmica, se a ativação ou bloqueio de receptores EP1 e EP3 facilitam as convulsões induzidas por outros agentes; tampouco se alterações na atividade da Na+,K+-ATPase estão envolvidas nesse efeito. Assim, no presente estudo, investigamos se ligantes (agonistas e antagonistas) de receptores EP1 e EP3 modificam as crises induzidas por PTZ e ácido caínico (KA), e se tais efeitos estão associados a alterações na atividade da enzima Na+,K+-ATPase, em camundongos. Os antagonistas EP1 e EP3 (ONO-8713 e ONO-AE3-240, respectivamente, 10 Og/Kg, s.c.) atenuaram as convulsões induzidas por PTZ (60 mg/Kg, i.p.) e KA (20 mg/Kg). Os seus respectivos agonistas (ONO-DI-004 e ONO-AE-248 de 10 Og/Kg, s.c.) facilitaram as convulsões em ambos modelos agudos de crises epilépticas e, em doses não efetivas para gerar crises, preveniram os efeitos dos antagonistas. Os animais submetidos à administração de PTZ apresentaram, ao final do experimento, a atividade Na+,K+-ATPásica diminuída no córtex cerebral e hipocampo. Por outro lado, animais tratados com KA apresentaram um aumento na atividade Na+,K+-ATPásica nestas mesmas estruturas, que se correlacionou positivamente com a vigência de status epilepticus no momento do sacrifício. Os achados divergentes no que diz respeito à alteração da atividade da Na+,K+-ATPase nos dois modelos de crises agudas sugere que tais alterações estejam relacionadas ao tipo de agente convulsivante utilizado, e dificultam estabelecer, de forma inequívoca, uma relação entre atividade desta ATPase e sensibilidade à crises agudas. Ademais, a administração de antagonistas EP1 e EP3 aboliu as alterações da atividade da Na+,K+-ATPase induzidas tanto por PTZ como por KA, de tal forma que estas parecem estar mais associadas com o fenômeno ictal em si, do que com os mecanismos de indução da crise. Contudo, os resultados mostram de forma clara que os receptores EP1 e EP3 podem se constituir possíveis novos alvos para o desenvolvimento de drogas antiepilépticas, pois antagonistas EP1 e EP3 diminuíram as crises, independente do agente convulsivante utilizado.
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Efeitos das isoflavonas da soja (Glycine max) na síntese de fatores vasoativos derivados de células endoteliais humanas da linhagem ECV304 / Effects of soy isoflavones (Glycine max) in the synthesis of vasoactive factors derived from human endothelial cells line ECV304.

Michele Paulo 03 April 2008 (has links)
As mulheres na fase reprodutiva apresentam menor incidência de doenças cardiovasculares (DCV), em relação aos homens de mesma idade. Porém, essa vantagem desaparece na pós-menopausa, sugerindo que os hormônios sexuais femininos exercem algum efeito cardioprotetor. Um dos mecanismos propostos para explicar essa proteção é o fato dos estrógenos promoverem a produção de importantes fatores vasoativos pelo endotélio vascular, entre eles o óxido nítrico e a prostaglandina I2. Com a diminuição da quantidade de estrógenos circulante, as mulheres na pós-menopausa, estão mais suscetíveis à disfunção endotelial e a doenças cardiovasculares. Estudos têm demonstrado que a terapia de reposição hormonal (TRH) utilizada por mulheres na pós-menopausa combate os sintomas deste período, melhora o quadro de disfunção endotelial e o perfil lipídico e aumenta a síntese de fatores vasoativos, que auxiliam na prevenção da DCV. Entretanto a TRH vem sendo questionada por grandes estudos como o WHI (Writing Group for the Women\'s Health Initiative Investigators) e o HERS (Heart and Estrogen/Progestin Replacement Study), que mostraram um risco aumentado de desenvolvimento de câncer de mama e endometrial em mulheres fazendo uso da TRH. Entre as terapias alternativas para combater os sintomas indesejáveis da menopausa e as implicações mórbidas que acompanham esse período, sem expor as pacientes aos efeitos colaterais da TRH, a literatura aponta os fitoestrógenos, principalmente os extraídos da soja (Glycine max). O objetivo geral deste estudo é avaliar a ação das isoflavonas da soja, que vem sendo utilizadas por mulheres na pós-menopausa, na produção de óxido nítrico, prostaglandina E2 e endotelina-1, por células endoteliais, utilizando um modelo \"in vitro\", células endoteliais da linhagem ECV304. / During their reproductive years, women have a lower incidence of coronary heart disease (CHD) compared to men of similar age. However, this advantage disappears in post-menopause, suggesting that female sex hormones exert some cardio protective effect. One of the mechanisms proposed to explain this protection is the fact that estrogens promote the production of important vasoative factors by vascular endothelium, including nitric oxide and prostaglandin I2. By decreasing circulating estrogen, women in post-menopause are more susceptible of endothelial dysfunction and cardiovascular diseases. Studies have shown that the hormone replacement therapy (HRT) used by post-menopausal women in combating the symptoms of this period, improve endothelial dysfunction and lipid profile and increases the synthesis of vasoative factors, which help in the prevention of CHD. Meanwhile the HRT has been questioned by two large trials, the WHI (Writing Group for the Women\'s Health Initiative Investigators) and HERS (Heart and Estrogen/Progestin Replacement Study), which showed an increased risk of developing breast cancer and endometrial cancer in women using HRT. Among the alternative therapies to combat the symptoms of menopause and undesirable morbid implications that accompany this period, without exposing the patients to the side effects of HRT, the literature suggests the phytoestrogens, especially those from the soybean (Glycine max). The aim of this study is to evaluate the effect of isoflavones from soy, which are used by women in post-menopause, in the production of nitric oxide, prostaglandin E2 and endothelin-1 by endothelial cells, using an \"in vitro\" model: human endothelial cell line ECV304.
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Prostaglandina F2 alfa associada à ocitocina ou carbetocina na indução de partos em suínos / Prostaglandin f2 alpha associated with oxytocin or carbetocin in induction on parturition in swines

Gheller, Neimar Bonfanti January 2009 (has links)
O presente estudo teve como objetivo avaliar a aplicação de análogo sintético da prostaglandina F2 (PGF2 ) associado à carbetocina ou ocitocina sobre a eficiência na indução ao parto em suínos. Foram analisados o tempo entre aplicação e início do trabalho de parto, duração do parto e percentual de natimortalidade. A indução do parto foi realizada aos 113 dias de gestação através da aplicação do análogo da PGF2 (cloprostenol sódico) via submucosa vulvar (SMV). As ocitocinas foram aplicadas 24 horas após a indução, pela via intramuscular (IM). O experimento 1 contou com 284 fêmeas em 4 tratamentos: T1- cloprostenol sódico; T2- cloprostenol sódico e 0,10 mg de carbetocina; T3- cloprostenol sódico e 10 UI de ocitocina; T4- solução salina 0,9% (NaCl) via SMV. O experimento 2 contou com 276 fêmeas em 4 tratamentos: T1- cloprostenol sódico; T2- cloprostenol sódico e 0,10 mg de carbetocina; T3- cloprostenol sódico e 0,05 mg de carbetocina; T4- cloprostenol sódico e 10 UI de ocitocina. Não houve diferença entre os tratamentos no número de leitões nascidos totais, nascidos vivos e percentual de partos com intervenção obstétrica manual. A sincronização dos partos é maior quando induzidos com cloprostenol comparado ao grupo não induzido. A utilização de cloprostenol associado à carbetocina resulta em menor duração do parto. / The present study aimed the analysis of a synthetic analogue of prostaglandin F2 (PGF2 ) associated to carbetocyn or oxytocin on the efficiency of farrowing induction in swine. The following variables were assessed: time between injections and start of farrowing, farrowing length and stillbirth percentage. Farrowing induction was performed at 113 days of gestation using injection of PGF2 analogue (sodium cloprostenol) by vulvar sub mucosal route (SMV). The oxytocins were used 24 hours after induction, by intra-muscular route (IM). Experiment 1 used 284 females in 4 treatments: T1-sodium cloprostenol; T2- sodium cloprostenol and 0.10 mg of carbetocyn; T3- sodium cloprostenol and 10 UI of oxytocin; T4- saline solution by SMV route. Experiment 2 used 276 females in 4 treatments: T1- sodium cloprostenol; T2- sodium cloprostenol and 0.10 mg of carbetocyn; T3- sodium cloprostenol and 0.05 mg of carbetocyn; T4- sodium cloprostenol and 10 UI of oxytocin. There was no difference between treatments regarding number of total born piglets per farrowing, born alive and percentage of farrowing using manual obstetrical intervention. Farrowing synchronization was higher when induced with cloprostenol when compared to the noninduced group. The use of cloprostenol associated with carbetocyn resulted in a diminished farrowing length.
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Prostaglandina F2 alfa associada à ocitocina ou carbetocina na indução de partos em suínos / Prostaglandin f2 alpha associated with oxytocin or carbetocin in induction on parturition in swines

Gheller, Neimar Bonfanti January 2009 (has links)
O presente estudo teve como objetivo avaliar a aplicação de análogo sintético da prostaglandina F2 (PGF2 ) associado à carbetocina ou ocitocina sobre a eficiência na indução ao parto em suínos. Foram analisados o tempo entre aplicação e início do trabalho de parto, duração do parto e percentual de natimortalidade. A indução do parto foi realizada aos 113 dias de gestação através da aplicação do análogo da PGF2 (cloprostenol sódico) via submucosa vulvar (SMV). As ocitocinas foram aplicadas 24 horas após a indução, pela via intramuscular (IM). O experimento 1 contou com 284 fêmeas em 4 tratamentos: T1- cloprostenol sódico; T2- cloprostenol sódico e 0,10 mg de carbetocina; T3- cloprostenol sódico e 10 UI de ocitocina; T4- solução salina 0,9% (NaCl) via SMV. O experimento 2 contou com 276 fêmeas em 4 tratamentos: T1- cloprostenol sódico; T2- cloprostenol sódico e 0,10 mg de carbetocina; T3- cloprostenol sódico e 0,05 mg de carbetocina; T4- cloprostenol sódico e 10 UI de ocitocina. Não houve diferença entre os tratamentos no número de leitões nascidos totais, nascidos vivos e percentual de partos com intervenção obstétrica manual. A sincronização dos partos é maior quando induzidos com cloprostenol comparado ao grupo não induzido. A utilização de cloprostenol associado à carbetocina resulta em menor duração do parto. / The present study aimed the analysis of a synthetic analogue of prostaglandin F2 (PGF2 ) associated to carbetocyn or oxytocin on the efficiency of farrowing induction in swine. The following variables were assessed: time between injections and start of farrowing, farrowing length and stillbirth percentage. Farrowing induction was performed at 113 days of gestation using injection of PGF2 analogue (sodium cloprostenol) by vulvar sub mucosal route (SMV). The oxytocins were used 24 hours after induction, by intra-muscular route (IM). Experiment 1 used 284 females in 4 treatments: T1-sodium cloprostenol; T2- sodium cloprostenol and 0.10 mg of carbetocyn; T3- sodium cloprostenol and 10 UI of oxytocin; T4- saline solution by SMV route. Experiment 2 used 276 females in 4 treatments: T1- sodium cloprostenol; T2- sodium cloprostenol and 0.10 mg of carbetocyn; T3- sodium cloprostenol and 0.05 mg of carbetocyn; T4- sodium cloprostenol and 10 UI of oxytocin. There was no difference between treatments regarding number of total born piglets per farrowing, born alive and percentage of farrowing using manual obstetrical intervention. Farrowing synchronization was higher when induced with cloprostenol when compared to the noninduced group. The use of cloprostenol associated with carbetocyn resulted in a diminished farrowing length.
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Avaliação dos efeitos da administração oral do firocoxib sobre a quebra da barreira hematoaquosa induzida por paracentese em gatos saudáveis e com sorologia positiva para toxoplasmose

Schroder, Deise Cristine 13 March 2015 (has links)
Submitted by Simone Souza (simonecgsouza@hotmail.com) on 2018-05-15T15:58:32Z No. of bitstreams: 1 DISS_2015_Deise Cristine Schroder.pdf: 1269604 bytes, checksum: b4aaf38792fb2d963d422ec5bfeabadf (MD5) / Approved for entry into archive by Jordan (jordanbiblio@gmail.com) on 2018-05-24T16:46:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISS_2015_Deise Cristine Schroder.pdf: 1269604 bytes, checksum: b4aaf38792fb2d963d422ec5bfeabadf (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-24T16:46:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISS_2015_Deise Cristine Schroder.pdf: 1269604 bytes, checksum: b4aaf38792fb2d963d422ec5bfeabadf (MD5) Previous issue date: 2015-03-13 / CAPES / Objetivou-se avaliar a eficácia do firocoxib em impedir a quebra da barreira hematoaquosa em gatos saudáveis e naqueles com sorologia positiva para toxoplasmose. Avaliaram-se trinta e dois gatos divididos em quatro grupos (n=8). Os grupos saudável controle (SC) e toxoplasmose controle (TC) foram compostos respectivamente por gatos saudáveis e com sorologia positiva para toxoplasmose, enquanto os grupos saudável firocoxib (SF) e toxoplasmose firocoxib (TF) foram compostos respectivamente por gatos saudáveis e com sorologia positiva para toxoplasmose que receberam tratamento prévio com firocoxib (5 mg/kg), por via oral, 24 e uma hora antes da indução da uveíte experimental, através da paracentese da câmara anterior. Após indução anestésica colheu-se 0,2 mL de humor aquoso basal. Decorrido uma hora, realizou-se nova paracentese para colheita de 0,2 mL de humor aquoso inflamado. As amostras de humor aquoso foram acondicionadas a -80°C para posterior mensuração dos níveis de prostaglandina E2 (PGE2) e proteínas totais. No humor aquoso dos grupos TC e TF, realizou-se ainda, titulação para anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii. Mediante análise das amostras, observou-se aumento significativo dos níveis de PGE2 e proteína total do humor aquoso basal para o inflamado (p<0,05). No humor aquoso basal, os níveis de PGE2 no grupo TC, assim como os níveis de proteína total nos grupos SF e TF foram significativamente superiores aos demais (p<0,05). Os grupos TC e TF não apresentaram títulos IgG anti-Toxoplasma gondii no humor aquoso basal. No humor aquoso inflamado, os níveis de PGE2 e proteína total, bem como os títulos IgG anti-Toxoplasma gondii, não diferiram significativamente entre os grupos (p>0,05). Admite-se que gatos com títulos de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii possuem níveis de PGE2 no humor aquoso basal superiores aos apresentados por indivíduos saudáveis. Entretanto, a concentração de PGE2 no humor aquoso destes indivíduos não é suficiente para ensejar a quebra da barreira hematoaquosa e causar uveíte anterior. O firocoxib não é capaz de evitar a quebra da barreira hematoaquosa em gatos saudáveis e naqueles soropositivos para toxoplasmose. / The objective was to evaluate the efficacy of firocoxib in preventing the blood-aqueous barrier breakdown in healthy cats and those with positive serology for toxoplasmosis. Thirty-two cats divided into four groups (n=8/each). The healthy control (HC) and toxoplasmosis control (TC) groups, were composed respectively of healthy cats and cats with positive serology for toxoplasmosis, while healthy firocoxib (HF) and toxoplasmosis firocoxib (TF) groups, were composed respectively of healthy cats and cats with positive serology for toxoplasmosis who had received previous treatment with orally firocoxib (5 mg/kg), twenty-four and one hour before the experimental induction of uveitis. Under anesthesia 0.2 mL of baseline aqueous humor was collected via aqueocentesis. One hour later, the same procedure was repeated and inflamed aqueous samples were collected. Aqueous samples were conditioned at -80°C for subsequent measurement of the levels of prostaglandin E2 (PGE2) and total proteins. In the aqueous samples of TC and TF groups, anti-Toxoplasma gondii IgG specific antibodies were titrated. PGE2 and total protein levels increased significantly in inflamed aqueous humor in comparison to baseline aqueous samples (p<0.05). At baseline aqueous humor, levels of PGE2 in TC group and total protein in HF and TF groups were increased significantly, in comparison with the other groups (p<0.05). Anti-Toxoplasma gondii IgG specific antibodies were found only in inflamed aqueous humor, and aqueous titers did not change significantly between TC and TF (p=0.1051). Although we have observed that aqueous humor PGE2 levels were significantly higher in seropositive cats in baseline aqueous humor, such increase was not able to break the blood-aqueous barrier and cause anterior uveitis. Firocoxib did not prevent intraocular inflammation after aqueocentesis, in healthy and toxoplasmosis-seropositive cats.
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Produção de progesterona pelas células luteínicas esteroidogênicas bovina cultivadas e co-cultivadas in vitro

Destro, Flavia Caroline January 2016 (has links)
Orientador: João Carlos Pinheiro Ferreira / Resumo: O objetivo geral do trabalho foi caracterizar a produção de progesterona (P4) pelas células do corpo lúteo (CL) bovino submetidas a diferentes meios de cultivo e cocultivo in vitro. Para tanto foram realizados três experimentos descritos em dois artigos. No artigo I, CLs pertencentes à fase média (10-12 dias, n=5) foram coletados e processados em laboratório. As LCs foram cultivadas por 07 dias em atmosfera umida a 5% de CO2, com ou sem a adição de 10% de soro fetal bovino (SFB), com os respectivos tratamentos: CONTROLE; CONA (10 μg/mL); LH (100 μg/mL); CONALH; LHPGFβα (10 ng/mL); CONALHPGFβα. Amostras de meio de cultivo foram coletadas nos D1 e D7 para posterior dosagem de P4. Valores com P<0,05 foram considerados diferentes estatisticamente. O cultivo de LCs na presença de CONA diminuiu a capacidade secretória de P4 das LCs e este efeito foi revertido pela adição de LH no meio de cultivo no D1, mas não no D7. A ação supressora da CONA foi mais evidente no cultivo que não empregaram o SFB. No artigo II, No Exp. 1, foram utilizados CLs pertencentes à fase média (10-12 dias, n=4). No laboratório os CLs foram processados e as LCs foram cultivadas por 07 dias em atmosfera umida a 5% de CO2. As LCs receberam os respectivos tratamentos com ou sem LH: Controle; PGF2α (10 ng/mL); PGF2α (100 ng/mL); PGF2α (354,5 ng/mL). As amostras que receberam LH apresentaram maior produção de P4, e a administração de diferentes doses de PGFβα não mostrou alteração na secreção de P4. No Exp. β, for... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The general objective of this study was to characterize the production of progesterone (P4) by the cells of the bovine corpus luteum (CL) subjected to different culture and coculture media in vitro. To this end, three experiments described in two articles were conducted. Article I: CLs belonging to the middle phase (10-12 days, n=5) were collected and processed in the laboratory. The luteal cells (LCs) were cultured for 07 days in a humid atmosphere of 5% CO2, with or without the addition of 10% fetal bovine serum (FBS), with their respective treatments: CONTROL; CONA (concanavalin-A) (10 μg/mL); LH (100 μg/mL); CONALH; LHPGFβα (10 ng/mL); CONALHPGFβα. Samples of culture medium were collected on D1 and D7 for further P4 measurement. P values <0.05 were considered statistically different. Culture of LCs in the presence of CONA decreases the ability of LC to secrete P4, and this effect was reversed by addition of LH in the culture medium in D1, but not in D7. The suppressive action was more evident in CONA cultures without FBS. In Article II, Experiment 1, CLs of middle phase of the estrous cycle (10-12 days, n = 4) were used. In the laboratory, the CLs were processed and the LCs were cultured for 07 days in a humidified atmosphere of 5% CO2. The LCs received the respective treatments with or without LH (100 μg/mL): Control; PGFβα (10 ng/mL); PGFβα (100 ng/mL); PGFβα (354,5 ng/mL). The samples that received LH produced more P4, and the administration of different doses of PGFβα... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Interação angiotensina-(1-7) e bradicinina na microcirculação mesentérica, in vivo in situ. / Synergistic effect of angiotensin-(1-7) on bradykinin arteriolar dilation in vivo.

Maria Aparecida de Oliveira 11 July 2000 (has links)
Interação entre angiotensina-(1-7) [Ang-(1-7)] e bradicinina (BK) foi determinada no mesentério de ratos Wistar anestesiados utilizando-se microscopia intravital. Aplicação tópica de BK e Ang-(1-7) induziram vasodilatação que foi abolida por HOE-140 e A-779, respectivamente. Ang-(1-7) (100 pmol) potencializou a vasodilatação de BK (1 pmol) mas não a vasodilatação promovida por acetilcolina, nitroprussiato de sódio, histamina e ácido araquidônico. O efeito potencializador de Ang-(1-7) sobre BK foi abolido por A-779, HOE-140, indometacina, L-NAME e TEA, entretanto, losartan não bloqueou este efeito. Enalaprilato aumentou a resposta vasodilatadora de BK e Ang-(1-7) e não alterou o efeito potencializador do segundo sobre o primeiro. Conclui-se que: 1)efeito potencializador de Ang-(1-7) sobre BK depende da interação de ambos com seus respectivos receptores; 2)é dependente de óxido nítrico, produtos da cicloxigenase e hiperpolarização de membrana via canais de potássio; 3) o mecanismo de potencialização parece não depender da atividade catalítica da ECA. / The interaction between angiotensin-(1-7) [Ang-(1-7)] and bradykinin (BK) was determined in the mesentery of anesthetized Wistar rats using intravital microscopy. The response-induced by topical application of BK (1, 10 and 30 pmol), Ang-(1-7) (1, 10, 100 and 1000 pmol) and Ang-(1-7) (100 pmol) + BK (1 pmol) was determined in mesenteric arterioles (15-20 mm diameter). The BK (1 pmol)- and Ang-(1-7) (100 pmol)- induced vasodilation was abolished by BK B2 receptor antagonist HOE-140 (100 pmol applied during 60 seconds) and the Ang-(1-7) antagonist [d-Ala7]-Ang-(1-7)] (A-779) (100 pmol applied during 15 seconds), respectively. Indomethacin (5 mg/kg; IM, 30 min before), a cyclooxygenase inhibitor; L-NAME (10 nmol; topical application, 3 min before), a NO synthase inhibitor, decreased the Ang-(1-7)-induced vasodilation. However, TEA (90 pmol; topical application), a non specific K+ channels blocker, did not alter the response to BK or Ang-(1-7). BK (1 pmol)-induced vasodilation, however, was potentiated by Ang-(1-7) 100 pmol. Sodium nitroprusside (38 pmol), acetylcholine (1,6 nmol), histamine (5,4 nmol) and arachdonic acid (10 nmol) responses were not modified by Ang-(1-7) 100 pmol. The Ang-(1-7)-potentiating effect on BK-induced vasodilation was abolished by A-779, HOE-140, indomethacin, L-NAME and TEA. Losartan (15 mg/kg.IV, 40 min before), an AT1 angiotensin receptor antagonist was without effect. On the other hand, enalaprilat treatment (10 mg/kg; IV, 30 min before), to inhibit angiotensin-converting enzyme (ACE), enhanced the BK and Ang-(1-7)-induced vasodilation but did not modify the effect of Ang-(1-7) on BK vasodilation. In conclusion, the potentiation of BK-induced vasodilation by Ang-(1-7) is a receptor-mediated phenomenon dependent on cyclooxygenase-related products, NO release and K+ channel-mediated membrane hyperpolarization. The potentiating mechanism, apparently, is not related to ACE catalytic activity.
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Atividade antiluteolítica no microambiente uterino durante o período crítico para o estabelecimento da gestação em bovinos / Antiluteolytic activity in the uterine microenvironment during the critic period to pregnancy establishment in bovines

Vanessa Belentani Marques 14 December 2006 (has links)
A inibição da secreção pulsátil de prostaglandina F2alfa (PGF2&alpha;) uterina (atividade antiluteolítica) pela ação do interferon-tau (IFN-&tau;) trofoblástico, mantêm a secreção de progesterona pelo corpo lúteo, fundamental ao estabelecimento da gestação nas fêmeas bovinas. Supõe-se que essa atividade antiluteolítica esteja presente no microambiente uterino bovino, portanto objetivou-se estudá-la. Dada à inexistência de ensaios que meçam especificamente a atividade antiluteolítica propôs-se elaborar um ensaio biológico para tal. Observou-se que células BEND tratadas com forbol 12,13 dibutirato (PdBu) por 6 horas em cultivo sintetizam PGF2&alpha; e tal síntese é inibida na presença de interferon-tau recombinante bovino (rbIFN-&tau;). Em outro estudo definiu-se que 25 ng/mL de PdBu promove estímulo consistente à síntese de PGF2&alpha;. A partir da análise de regressão do percentual de inibição à síntese de PGF2&alpha; estimulada por PdBu, em função da concentração de interferon-tau recombinante (rbIFN-&tau;), calculou-se a concentração de rbIFN-&tau; que inibiu em 50% a síntese máxima de PGF2&alpha; (observada na presença apenas de PdBu). Definiu-se a atividade antiluteolítica como o recíproco da concentração proteica requerida para atingir esse percentual de inibição (50%), e que a solução com uma unidade antiluteolítica é aquela que com um micrograma exerça tal efeito. Caracterizou-se a utilização dessa isoforma como padrão do ensaio antiluteolítico e calculou-se a atividade antiluteolítica do mesmo, 9,61 x 10&sup2; UA/&micro;g de proteína. Em estudo seguinte observou-se a modulação da síntese de PGF2&alpha; estimulada por PdBu, em função da concentração proteica de um pool de lavados uterinos ou meios condicionados por conceptos obtidos no décimo sétimo dia de gestação. Notou-se que para cada fluido testado há um intervalo de concentrações onde observa-se aumento linear na atividade antiluteolítica em função do acréscimo proteico. A partir da análise por regressão linear desse evento calculou-se a atividade antiluteolítica de cada amostra. Para o pool de lavados uterinos calculou-se 1,63 x 10-&sup1; UA/ &micro;g de proteína, e para o pool de meios condicionados por conceptos 1,66 x 10&sup2; UA/&micro;g de proteína. Estes estudos permitiram desenvolver uma metodologia para observar a atividade antiluteolítica em humores biológicos. Aplicando o ensaio antiluteolítico estudou-se a atividade antiluteolítica presente em lavados uterinos obtidos durante o período crítico de fêmeas bovinas prenhes ou cíclicas ( respectivamente, 56,2 e 33,9 UA/&micro;g de proteina), notou-se que a atividade antiluteolítica foi maior no microambiente uterino de fêmeas gestantes. Tal resultado associado à potente atividade antiluteolítica observada para os meios condicionados por conceptos indicam a participação do IFN-&tau; secretado pelo concepto na modulação da síntese de PGF2&alpha;. Entretanto, observou-se atividade antiluteolítica nos lavados uterinos obtidos de fêmeas cíclicas, o que indica que a síntese de PGF2&alpha; estimulada por PdBu pode ser modulada por outras proteínas, além do IFN-&tau;. Sugere-se que a atividade antiluteolítica, observada através do ensaio biológico proposto, é resultante da atuação de fatores estimulatórios e inibitórios presentes nos humores biológicos. Conclui-se que a atividade antiluteolítica pode ser mensurada pelo ensaio biológico proposto, no entanto outros estudos devem ser conduzidos para correlacionar essa atividade com a atuação do IFN-&tau;. / The inhibition of pulsatile secretion of PGF2&alpha; mediated by interferon-tau (IFN) is fundamental on the maternal recognition of pregnancy, maintaining the progesterone secretion by corpus luteum. Therefore the measurement of interferon activity in the uterine microenvironment was studied. Due to a lack of assays those measure specific antiluteolytic capacities we suggest develop a biological assay for it. In this research we observed that BEND cells treated with PdBu synthesize PGF2&alpha;, wich is inhibited by the presence of recombinant bovine interferon-tau (rbIFN-&tau;). Following we defined 25ng/mL as PdBu (phorbol 12,13 dibutirate) stimulus at the PGF2&alpha; synthesis to be applied in this biological assay. Studies about the modulation of PdBu-stimulated PGF2&alpha; synthesis by the rbIFN-&tau; validate the use of this isoform as a reference, defining a standard-curve and allowing estimating the antiluteolytic activity of 9.61 x 10&sup2; antiluteolytic units per microgram (UA/&micro;g) of protein. Further, we observed the modulation of PdBu-stimulated PGF2&alpha; synthesis exerted by a pool of uterine flushings or conceptus conditioned medium, and for each tested fluid, there is a range of concentrations where is observed an increasing rate on the inhibition of PGF2&alpha; synthesis. A restrict analysis on this concentrations range shows a linear behavior and allow calculate the antiluteolytic activity of each sample1.63 x 10-&sup1; UA/ &micro;g of protein from a pool of uterine flushings, and 1.66 x 10&sup2; UA/&micro;g from conceptus conditioned medium. These studies validated a method to observe the antiluteolytic activity from biological fluids. Using the antiluteolytic assay, we studied the antiluteolytic activity present in uterine flushings obtained during the critic period by pregnant or cyclic bovine females cíclicas (respectively 56,2 e 33,9 UA/&micro;g of protein). We observed higher antiluteolytic activity from pregnant uterine microenvironment than in cyclic uterine microenvironment. This result linked with the high antiluteolytic activity observed to conceptus conditioned medium, suggest the participation of IFN-&tau; secreted by the conceptus in the PGF2&alpha; synthesis modulation. However, we observed the antiluteolytic activity in uterine flushing obtained by cyclic cows, suggesting that the PGF2&alpha; synthesis could be modulated by another proteins. We believe that the antiluteolytic activity, observed by the antiluteolytic assay, ensue the action of inhibitors or stimulators factors in the biological fluids. We conclude that the antiluteolytic assay could be measured by the proposed biological assay, nevertheless another studies must be done in order to correlate this activity with the interferon action.
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Prostaglandina F2 alfa associada à ocitocina ou carbetocina na indução de partos em suínos / Prostaglandin f2 alpha associated with oxytocin or carbetocin in induction on parturition in swines

Gheller, Neimar Bonfanti January 2009 (has links)
O presente estudo teve como objetivo avaliar a aplicação de análogo sintético da prostaglandina F2 (PGF2 ) associado à carbetocina ou ocitocina sobre a eficiência na indução ao parto em suínos. Foram analisados o tempo entre aplicação e início do trabalho de parto, duração do parto e percentual de natimortalidade. A indução do parto foi realizada aos 113 dias de gestação através da aplicação do análogo da PGF2 (cloprostenol sódico) via submucosa vulvar (SMV). As ocitocinas foram aplicadas 24 horas após a indução, pela via intramuscular (IM). O experimento 1 contou com 284 fêmeas em 4 tratamentos: T1- cloprostenol sódico; T2- cloprostenol sódico e 0,10 mg de carbetocina; T3- cloprostenol sódico e 10 UI de ocitocina; T4- solução salina 0,9% (NaCl) via SMV. O experimento 2 contou com 276 fêmeas em 4 tratamentos: T1- cloprostenol sódico; T2- cloprostenol sódico e 0,10 mg de carbetocina; T3- cloprostenol sódico e 0,05 mg de carbetocina; T4- cloprostenol sódico e 10 UI de ocitocina. Não houve diferença entre os tratamentos no número de leitões nascidos totais, nascidos vivos e percentual de partos com intervenção obstétrica manual. A sincronização dos partos é maior quando induzidos com cloprostenol comparado ao grupo não induzido. A utilização de cloprostenol associado à carbetocina resulta em menor duração do parto. / The present study aimed the analysis of a synthetic analogue of prostaglandin F2 (PGF2 ) associated to carbetocyn or oxytocin on the efficiency of farrowing induction in swine. The following variables were assessed: time between injections and start of farrowing, farrowing length and stillbirth percentage. Farrowing induction was performed at 113 days of gestation using injection of PGF2 analogue (sodium cloprostenol) by vulvar sub mucosal route (SMV). The oxytocins were used 24 hours after induction, by intra-muscular route (IM). Experiment 1 used 284 females in 4 treatments: T1-sodium cloprostenol; T2- sodium cloprostenol and 0.10 mg of carbetocyn; T3- sodium cloprostenol and 10 UI of oxytocin; T4- saline solution by SMV route. Experiment 2 used 276 females in 4 treatments: T1- sodium cloprostenol; T2- sodium cloprostenol and 0.10 mg of carbetocyn; T3- sodium cloprostenol and 0.05 mg of carbetocyn; T4- sodium cloprostenol and 10 UI of oxytocin. There was no difference between treatments regarding number of total born piglets per farrowing, born alive and percentage of farrowing using manual obstetrical intervention. Farrowing synchronization was higher when induced with cloprostenol when compared to the noninduced group. The use of cloprostenol associated with carbetocyn resulted in a diminished farrowing length.
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Estudo da relação entre a modulação da expressão de FASL pela PGE2 e a sobrevivência de linfócitos T CD4+. / Modulation of FASL expression by PGE2 and CD4+ T lymphocyte survival.

Luciana Paroneto Medina 18 November 2015 (has links)
Resultados obtidos pelo nosso grupo demonstraram, in vitro, que a PGE2 é capaz de modular a sobrevivência de linfócitos TCD4+ protegendo essas células da morte. Dentro do modelo de EAE, nossa hipótese é que a PGE2 liberada pelas APCs, durante a fase de indução, module a sobrevivência de linfócitos autorreativos específicos induzindo a doença. Realizamos o tratamento de camundongos submetidos à EAE com indometacina durante 5 dias e notamos que houve redução da EAE associada à redução de linfócitos produtores de IFN-&gamma;, IL-17 e GM-CSF, e macrófagos infiltrantes e microglias ativadas, no SNC. O tratamento alterou a freqüência de células em proliferação e a frequência de células produtoras de IFN-&gamma; e IL-17 na periferia e a concentração dessas citocinas. Esses resultados sugerem que a indometacina reduz o desenvolvimento da EAE e sua resposta antígeno-específica demonstrando a sua importância na modulação das respostas de linfócitos T na autoimunidade. / Results obtained by our group demonstrated in vitro that PGE2 is able to modulate CD4+ T cells survival protecting these cells from death. Within the EAE model, we hypothesized that PGE2 released by APCs during the induction phase, modulate survival of autoreactive specific lymphocytes by induction the disease. We carried out the treatment of EAE in mice subjected to indomethacin for 5 days and noticed that there is reduction of EAE associated with decreased IFN-&gamma;, IL-17 and GM-CSF producing T cells, and infiltrating macrophages and activated microglia in the CNS. The results suggest that indomethacin reduces EAE and its antigen-specif response demonstrating their importance in the modulation of T lymphocyte responses in autoimmunity.

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