Orientador: Mario Roberto Vizioli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:00:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Abdalla_CelsoMaury_D.pdf: 6451909 bytes, checksum: 1797153d2119eadcb885b294c9b6448b (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Esta pesquisa teve por finalidade avaliar a ação da vitamina E, como radioprotetora nos fibroblastos no processo de reparação tecidual em ratos. Após sofrerem um procedimento cirúrgico, que constituiu da produção de uma ferida na região dorsal anterior. Os animais foram divididos em 8 grupos: grupo C (controle) - constituido de animais onde foi realizada somente a ferida, grupos VE 60 e VE 90 - pré tratamento com vitamina E (60 e 90 UI, respectivamente), grupo IR irradiação 3 dias após à cirurgia, grupos VE60 IR e VE90 IR - pré tratamento com 60 e 90 UI de vitamina E e irradiação de suas bordas 3 dias após às cirurgias, grupo OOl - pré tratamento com óleo de oliva e grupo OOl IR - pré tratamento com óleo de oliva e irradiação de suas bordas 3 dias após à cirurgia. A ação radioprotetora da vitamina E foi avaliada pelo método da hematoxilina-eosina para análise morfológica do tecido de granulação, aos 4,7, 14 e 21 dias após a cirurgia e contagem de fibroblastos aos 4 e 7 dias após da ferida. A análise dos resultados mostrou que o retardo no processo de reparação tecidual causado por 6 Gy de radiação de elétrons com um feixe de 6 MeV, não ocorreu no grupo de animais que recebeu vitamina E. Quanto ao número de fibroblastos, verificou-se menor quantidade dos mesmos nos grupos IR, OOl e OOl IR, quando comparado com o grupo controle, enquanto os demais grupos não apresentaram diferença com o controle, nos 2 períodos analisados. Assim, a vitamina E mostrou-se efetiva como radioprotetora / Abstract: This research had for purpose to evaluate the action of the vitamin E as a radioprotector in the process of the tissue repair in rats, that suffered previously a surgical procedure, which consists of the wound production in the dorsal area. The animais were divided into 8 groups: group C (control) - it consists only of animais in which the wound was made; VE60 and VE90 UI groups previously treated with vitamin E (60 and 90 UI respectively); IR group - constituted by wound and irradiation of its borders, 3 days after surgery; VE60 IR and VE90 IR - these groups were previously treated with 60 and 90 UI of the vitamin E and with irradiation of their borders, after 3 days surgery; OOL groups - the wound plus the previous treatiment of olive oit; OOL IR groups the woun plus the previous treatment with olive oil and the irradiation of its bordes, 3 days after surgery. The radioprotection action of the vitamin E was evaluated by the hematoxylin-eosin staining for morphologic analysis of the granulation tissue, to the 4, 7, 14 and 21 days after surgery and fibroblasts counting to the 4 and 7 days after wound. The analysis of the results showed that the retard in the process of tissue repair, caused by 6 Gy of electrons irradiation with a beam of 6 MeV, did not happen in the groups of animais that received vitamin E. Concerning to the fibroblasts number, smaller amount of the same ones was verified in IR, OOL and OOL IR groups when compared with the control groups, while the other groups did not present difference with the control, in 2 analyzed periods. Thus, vitamin E effectively acts as a as radioprotector, as it was shown / Doutorado / Doutor em Radiologia Odontológica

Este trabalho teve por objetivos: levantar conceitos alternativos sobre radicais livres na mídia impressa e em livros de Bioquímica; examinar os conceitos alternativos prevalentes em pós-graduandos e em professores de Química e Biologia do Ensino Médio; e, planejar e aplicar intervenção para reduzir a influência destes conceitos. Para o levantamento na mídia impressa, foi selecionada a revista Veja, período de 01/01/2000 a 31/07/2014, e foram criadas as seguintes categorias para classificar o material encontrado: Conceito Alternativo (CA), Informação Indutiva (II), Conceito Indutivo (CI) e Generalização Indevida (GI), formando o grupo dos Conceitos Não Científicos (CNC); Conceito Correto (CC); Conceito Errado (CE); e, não preenche os critérios de inclusão (NPCI). Foram encontrados 294 trechos dos quais: 55,4% CA; 21,1% II; 9,2% CI; 5,4% GI; 4,1% CC; 2,7% CE; 2,0% NPCI; e, 91,2% CNC. Para o levantamento em livros de Bioquímica foram selecionados: Campbell - Bioquímica; Lehninger - Princípios de Bioquímica; Marzzoco e Torres Bioquímica Básica; Stryer - Bioquímica; e, Voet e Voet - Bioquímica. A maior parte dos conceitos encontrados nos livros foram conceitos corretos, contudo 77,5% dos conceitos encontrados destacavam aspectos negativos sobre radicais livres. Para o levantamento de conceitos alternativos em pós-graduandos e professores foi desenvolvido o Questionário de Radicais Livres (QRL), versões piloto e final, aplicadas, respectivamente, a 14 pós-graduandos matriculados na disciplina de pós-graduação Planejamento e Aplicação de Sequências Didáticas Envolvendo o Conteúdo Radicais Livres e 31 professores matriculados no curso de extensão Radicais Livres e suas Interfaces com a Vida, planejado com o auxílio dos pós-graduandos da disciplina. O QRL é um questionário de múltipla-escolha em etapas, composto por uma etapa de avaliação do conteúdo e outra sobre a percepção do participante sobre seu nível de certeza. Os pós-graduandos revelaram baixo domínio sobre o tema e baixo nível de certeza. Os professores, testados pré- e pós-intervenção, também apresentaram alta frequência de erros, bastante semelhante no pré- e no pós-teste, e baixo nível de certeza no pré-teste e aumento do nível de certeza no pós-teste. Acredita-se que estes resultados, tanto entre os pós-graduandos e como entre os professores, sejam reflexo da falta de contato acadêmico com o tema. Aos professores, também foram aplicados dois questionários complementares denominados Perfil Profissional e Conhecimentos Sobre Radicais Livres. Entre outras informações, os dados coletados a partir destes questionários, indicaram que os professores lecionam juntos para aproximadamente 12000 estudantes e que o curso de extensão contribuiu para aumentar seus conhecimentos sobre radicais livres. Estes dados oferecem suporte para a escolha do público-alvo e justificam a execução de cursos de extensão, tanto pelo o potencial de alcançar indiretamente um grande número de pessoas, como pela possibilidade de difusão do tema. Tanto o curso de extensão como a disciplina de pós-graduação foram muito bem avaliados pelos professores e pós-graduandos. Os altos percentuais de conceitos não científicos, principalmente conceitos alternativos, encontrados na mídia impressa, bem como os conceitos alternativos apresentados por pós-graduandos e professores, devem preocupar especialistas e cientistas, pois este tema é objeto de muitos anúncios publicitários que frequentemente incentivam o consumo de suplementos de antioxidantes. Em livros de Bioquímica, o aumento de conteúdo destacando o papel fisiológico dos radicais livres deve contribuir para desfazer o conceito disseminado de que radicais livres seriam prejudiciais à saúde. / This work aimed to survey the misconceptions regarding free radicals published in printed media and in biochemistry textbooks; to examine the misconceptions regarding free radicals prevalent among graduate students and chemistry and biology high school teachers; and to design and implement instructional intervention to reduce the influence of these misconceptions. For surveying printed media, publications from Veja magazine, dating from 01/01/2000 to 07/31/2014, were selected. The published material was categorized as follows: Misconception (MC), Inductive Information (II), Inductive Concept (IC), and Inadequate Generalization (IG) - collectively called Non-Scientific Concepts (NSC) - and Right Concept (RC), Wrong Concept (WC), and not fit for the inclusion criteria (NFIC). A total of 294 text excerpts were obtained, comprising 55.4% MC, 21.1% II, 9.2% IC, 5.4% IG, 4.1% RC, 2.7% WC, 2.0% NFIC, and 91.2% NSC. In order to examine the content in biochemistry textbooks, the following were selected: Campbell - Biochemistry; Lehninger - Principles of Biochemistry; Marzzoco & Torres - Basic Biochemistry; Stryer - Biochemistry; and Voet & Voet - Biochemistry. Most of the excerpts selected from the biochemistry textbooks were right concepts. However, 77.5% of the concepts highlighted negative aspects of free radicals. To investigate misconceptions among graduate students and high school teachers, a Free Radicals Questionnaire (FRQ) was developed. Pilot and final versions were given to 14 students enrolled in the graduate course Planning and Application of Didactical Sequences Encompassing Free Radicals Content and to 31 high school teachers enrolled in the extension course Free Radicals and its Interfaces with Life, respectively. The extension course was planned with the assistance of graduate students enrolled in the graduate course. FRQ is a multiple choice tier test with tiers for content evaluation and the participants perception of their level of certainty. Graduate students exhibited low levels of subject expertise and certainty. Teachers were tested pre- and post-intervention, and exhibited a high frequency of mistakes, comparable to graduate students, with similar pre- and post-test outcomes. However, their certainty level increased post-test. It is believed that these results may have occurred due to an academic lack of contact with the subject of free radicals. Additionally, two complementary questionnaires were given to the teachers: Professional Profile and Free Radicals Knowledge. Data collected from these questionnaires indicated that teachers collectively taught approximately 12,000 students and that the extension course contributed to increasing the teachers knowledge on free radicals. These results support the choice of the target audience and justify the implementation of the extension courses, because these courses have the potential to indirectly reach a large audience and can be used for thematic dissemination of knowledge in the subject area. The extension and graduate courses were highly rated by the teachers and graduate students, respectively. The high percentage of non-scientific concepts, especially misconceptions, found in printed media, as well as the misconceptions regarding free radicals prevalent among graduate students and teachers must concern specialists and scientists, as this topic is the subject of many advertisements encouraging consumption of antioxidant supplements. In biochemistry textbooks, increasing the content highlighting the physiological role of free radicals would contribute considerably in dispelling the widespread notion that free radicals are harmful to health.

Evidências experimentais e epidemiológicas sugerem que o Iicopeno e o β-caroteno, presentes em tomates, produtos de tomates, muitas frutas e vegetais, podem prevenir certos tipos de câncer em seres humanos. Entretanto, para estabelecer firmemente as relações do licopeno com a prevenção de doenças, maiores informações sobre os possíveis mecanismos bioquímicas associados a esses processos são necessárias. Com este intuito, investigamos o efeito do licopeno em células de mamífero e em ratos submetidos a excesso de ferro, sistema conhecido por promover o estresse oxidativo gerando lesões em biomoléculas. Inicialmente investigamos o efeito protetor do licopeno em lipoperoxidação e danos oxidativos em DNA de células de rim de macaco verde africano (linhagem CV1-P) expostas ao tratamento com nitrilotriacetato de ferro (Fe-NTA)/ascorbato. Constatamos que as células pré-tratadas com licopeno e· submetidas ao tratamento com Fe-NTA/ascorbato mostram uma redução de 86% na lipoperoxidação e redução em 77% na formação de 8-oxo-7,8-dihidro-2\'-desoxiguanosina (8-oxodGuo), quando comparadas com as células tratadas apenas com Fe-NTA/ascorbato. Considerando esses resultados, resolvemos seguir nossos estudos, in vivo, verificando se o pré-tratamento com licopeno e β-caroteno protegeria ratos Wistar, submetidos a tratamento com injeção intraperitonial de Fe-NTA, da lipoperoxidação, de danos oxidativos em DNA e de mudanças histopatológicas em fígado, rim, próstata e linfócitos. Comparados com os tecidos de ratos do grupo controle, o fígado, o rim, o pulmão, a próstata e os linfócitos de ratos tratados com Fe-NTA mostraram um aumento de 2-5 vezes na concentração de 8-oxodGuo e um aumento de 40-75% na concentração de malonaldeído (MOA). Concomitantes mudanças histopatológicas no rim e no fígado (necrose e esteatose) foram.também observadas. Com o pré-tratamento por cinco dias consecutivos com Iicopeno ou β-caroteno (10 mg/kg de massa corpórea, í.p), observamos completa prevenção dos danos oxidativos em DNA, da lipoperoxidação e das alterações histológicas nos tecidos estudados. Diversos estudos in vitro têm demonstrado a habilidade desses carotenóides em seqüestrar radicais peroxila e suprimir oxigênio singlete. O presente trabalho indica que essa ação antioxidante ocorre também em células e in vivo, através da proteção de lesões oxidativas em biomoléculas e danos em tecidos induzidos por ferro. Os dados apresentados contribuem para o esclarecimento da ação biológica dos carotenóides em organismos submetidos a sistemas que induzem o estresse oxidativo e suportam um dos possíveis mecanismos responsáveis pelo potencial anticâncer de carotenóides observados em estudos epidemiológicos. / Experimental and epidemiological evidences suggest that lycopene and β-carotene, carotenoids present in tomatoes, tomato products and several fruits and vegetables may play a role in preventing certain cancers in humans. However, to establish their role in health, more information is required to identify the biochemical mechanisms associated with these processes. With the aim of producing such information, we have first investigated the effect of lycopene on lipid peroxidation and on the formation of 8-oxo-7,8-dihydro-2\'-deoxyguanosine (8-oxodGuo) in CV1-P monkey cells exposed to ferric nitrilotriacetate (Fe-NTA) plus ascorbate. Cells supplemented with lycopene (20 fmol/106 cells) showed an approximate reduction of 80% in Fe-NTA/ascorbate-induced lipid peroxidation (TBARS). Levels of 8-oxodGuo in the cells increased over tenfold after treatment with Fe-NTA/ascorbate as compared to the control group. Lycopene supplementation decreased 8-oxodGuo in Fe-NTA/ascorbate-treated cells to approximately 70%. In arder to verify if these effects are also operative in vivo, we have investigated the effect of lycopene and β-carotene pre-treatment on lipid peroxidation, oxidative damage to DNA and histopathological changes in liver, kidney, lung, prostate and Iymphocytes of animais subjected to i.p. ferric nitrilotriacetate (Fe-NTA) administration. Compared with control rats, liver of Fe-NTA treated animais showed a 2-5 fold increase in 8-oxodGuo level and 40-75 % increase in malodialdehyde (MDA) accumulation concomitant with tissue histopathological changes. Five days of lycopene and β-carotene pre-treatment (10 mg/kg body weight, i.p.) almost completely prevented liver biomolecule oxidative damage and protected the tissue against the observed histological alterations. In conclusion, it is shown that lycopene and β-carotene prevented oxidative damage to DNA, membranes and markedly reduced the histological changes induced by Fe-NTA. Inhibition of these oxidative processes by carotenoids is likely due to their ability to trap peroxyl radical and to quench singlet oxygen. The results described herein may contribute toward a better understanding of the biological mechanisms associated with the potential cancer-preventing property of carotenoids observed in epidemiological studies.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-15Bitstream added on 2014-06-13T18:26:25Z : No. of bitstreams: 1 almeida_mgj_me_arafcf_parcial.pdf: 82683 bytes, checksum: 49424d5182616aaa8e926f756efd65e1 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-09T14:35:42Z: almeida_mgj_me_arafcf_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-02-09T14:36:22Z : No. of bitstreams: 1 000710077.pdf: 903439 bytes, checksum: 7ad6ad625787ddd4aff6f1d6cad4169e (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-09T17:15:05Z: 000710077.pdf,Bitstream added on 2015-02-09T17:15:41Z : No. of bitstreams: 1 000710077.pdf: 903439 bytes, checksum: 7ad6ad625787ddd4aff6f1d6cad4169e (MD5) / A tendência atual na indústria cosmética é o desenvolvimento de produtos multifuncionais, ou seja, aqueles com capacidade de apresentar diferentes funções, possibilitando diferentes resultados para o consumidor. Seguindo esta tendência, ativos naturais são alternativas interessantes como substitutos a um único composto ativo, uma vez que são matrizes complexas e apresentam diversos componentes que podem possuir diferentes mecanismos de ação e, assim, conferir ao produto mais de uma função. Por este motivo, nos últimos anos o uso de extratos naturais tem crescido muito nesta área. Com o aumento da aplicação de extratos naturais em produtos cosméticos, há também a necessidade de estudos que comprovem sua eficácia e segurança. Uma das principais funções buscadas em produtos cosméticos é a ação antienvelhecimento, ou seja, a capacidade dos produtos em atuar neutralizando radicais livres. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia e segurança do extrato de Ascophyllum nodosum, além de desenvolver um sistema emulsionado para sua incorporação e verificar a eficácia deste sistema. Os resultados de citotoxicidade mostraram que este extrato pode ser utilizado com segurança na concentração proposta (1,2% m/m). Além disso, foi avaliado, por metodologias in vitro, o potencial antioxidante e o potencial de inibir a atividade da tirosinase, sendo verificado que o extrato de A. nodosum apresenta a capacidade de atuar neutralizando radicais livres e inibindo a atividade enzimática da tirosinase no processo de melanogênese. Apesar de serem necessários estudos complementares para garantir a eficácia, o fitocosmético desenvolvido com o extrato aquoso de A. nodosum apresenta enorme potencial de aplicação podendo resultar em preparações cosméticas multifuncionais / The current trend in the cosmetic industry is the development of multifunctional products, or, those with the ability to have different functions, facilitating the results to the consumer. Following this trend, natural actives are interesting alternatives as substitutes for a single active compound, since they are complex matrices and present various components that may have different mechanisms of action and thereby give the product more than one function. For this reason, in recent years the use of natural extracts has grown a lot in this area. With the increased use of natural extracts in cosmetic products, there is also a need for studies to prove its effectiveness and safety. A major function is sought in cosmetic anti-aging action, for instance, the ability of the products act by neutralizing free radicals. In this context, the aim of this study was to evaluate the effectiveness and safety of the extract of Ascophyllum nodosum, and develop a system for incorporation emulsified and verify the effectiveness of this system. The results of cytotoxicity have shown that this extract can be safely used in the proposed concentration (1.2% w/w). Furthermore, it was evaluated by in vitro methods, the antioxidant potential and the potential to inhibit the activity of tyrosinase, and found that the extract of A. nodosum has the ability to act by neutralizing free radicals and inhibiting the enzymatic activity of tyrosinase in the process of melanogenesis. Although additional studies are needed to ensure effectiveness, phytocosmetic developed with aqueous extract of A. nodosum has enormous potential application may result in multifunctional cosmetic preparations

Orientador: Chung Man Chin / Coorientador: Vera Lucia Borges Isaac / Banca: Marcos Antônio Correa / Banca: Helena Margarida Ribeiro / Resumo: A tendência atual na indústria cosmética é o desenvolvimento de produtos multifuncionais, ou seja, aqueles com capacidade de apresentar diferentes funções, possibilitando diferentes resultados para o consumidor. Seguindo esta tendência, ativos naturais são alternativas interessantes como substitutos a um único composto ativo, uma vez que são matrizes complexas e apresentam diversos componentes que podem possuir diferentes mecanismos de ação e, assim, conferir ao produto mais de uma função. Por este motivo, nos últimos anos o uso de extratos naturais tem crescido muito nesta área. Com o aumento da aplicação de extratos naturais em produtos cosméticos, há também a necessidade de estudos que comprovem sua eficácia e segurança. Uma das principais funções buscadas em produtos cosméticos é a ação antienvelhecimento, ou seja, a capacidade dos produtos em atuar neutralizando radicais livres. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia e segurança do extrato de Ascophyllum nodosum, além de desenvolver um sistema emulsionado para sua incorporação e verificar a eficácia deste sistema. Os resultados de citotoxicidade mostraram que este extrato pode ser utilizado com segurança na concentração proposta (1,2% m/m). Além disso, foi avaliado, por metodologias in vitro, o potencial antioxidante e o potencial de inibir a atividade da tirosinase, sendo verificado que o extrato de A. nodosum apresenta a capacidade de atuar neutralizando radicais livres e inibindo a atividade enzimática da tirosinase no processo de melanogênese. Apesar de serem necessários estudos complementares para garantir a eficácia, o fitocosmético desenvolvido com o extrato aquoso de A. nodosum apresenta enorme potencial de aplicação podendo resultar em preparações cosméticas multifuncionais / Abstract: The current trend in the cosmetic industry is the development of multifunctional products, or, those with the ability to have different functions, facilitating the results to the consumer. Following this trend, natural actives are interesting alternatives as substitutes for a single active compound, since they are complex matrices and present various components that may have different mechanisms of action and thereby give the product more than one function. For this reason, in recent years the use of natural extracts has grown a lot in this area. With the increased use of natural extracts in cosmetic products, there is also a need for studies to prove its effectiveness and safety. A major function is sought in cosmetic anti-aging action, for instance, the ability of the products act by neutralizing free radicals. In this context, the aim of this study was to evaluate the effectiveness and safety of the extract of Ascophyllum nodosum, and develop a system for incorporation emulsified and verify the effectiveness of this system. The results of cytotoxicity have shown that this extract can be safely used in the proposed concentration (1.2% w/w). Furthermore, it was evaluated by in vitro methods, the antioxidant potential and the potential to inhibit the activity of tyrosinase, and found that the extract of A. nodosum has the ability to act by neutralizing free radicals and inhibiting the enzymatic activity of tyrosinase in the process of melanogenesis. Although additional studies are needed to ensure effectiveness, phytocosmetic developed with aqueous extract of A. nodosum has enormous potential application may result in multifunctional cosmetic preparations / Mestre

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Kelly de S Fernandes.pdf: 1950956 bytes, checksum: d7d86cb439d48b7497073c72333930a0 (MD5) Previous issue date: 2011-08-17 / NOTE: As programs do not copy or copy errors with certain symbols, formulas, formatting ... etc, to view the summary and the entire file, click rm PDF - dissertation at the bottom of the screen. / OBS: Como programas não copiam ou copiam com erros certos símbolos, fórmulas, formatações... etc, para visualizar o resumo e todo o arquivo, click rm PDF - dissertação na parte de baixo da tel.

Evidências experimentais e epidemiológicas sugerem que o Iicopeno e o β-caroteno, presentes em tomates, produtos de tomates, muitas frutas e vegetais, podem prevenir certos tipos de câncer em seres humanos. Entretanto, para estabelecer firmemente as relações do licopeno com a prevenção de doenças, maiores informações sobre os possíveis mecanismos bioquímicas associados a esses processos são necessárias. Com este intuito, investigamos o efeito do licopeno em células de mamífero e em ratos submetidos a excesso de ferro, sistema conhecido por promover o estresse oxidativo gerando lesões em biomoléculas. Inicialmente investigamos o efeito protetor do licopeno em lipoperoxidação e danos oxidativos em DNA de células de rim de macaco verde africano (linhagem CV1-P) expostas ao tratamento com nitrilotriacetato de ferro (Fe-NTA)/ascorbato. Constatamos que as células pré-tratadas com licopeno e· submetidas ao tratamento com Fe-NTA/ascorbato mostram uma redução de 86% na lipoperoxidação e redução em 77% na formação de 8-oxo-7,8-dihidro-2\'-desoxiguanosina (8-oxodGuo), quando comparadas com as células tratadas apenas com Fe-NTA/ascorbato. Considerando esses resultados, resolvemos seguir nossos estudos, in vivo, verificando se o pré-tratamento com licopeno e β-caroteno protegeria ratos Wistar, submetidos a tratamento com injeção intraperitonial de Fe-NTA, da lipoperoxidação, de danos oxidativos em DNA e de mudanças histopatológicas em fígado, rim, próstata e linfócitos. Comparados com os tecidos de ratos do grupo controle, o fígado, o rim, o pulmão, a próstata e os linfócitos de ratos tratados com Fe-NTA mostraram um aumento de 2-5 vezes na concentração de 8-oxodGuo e um aumento de 40-75% na concentração de malonaldeído (MOA). Concomitantes mudanças histopatológicas no rim e no fígado (necrose e esteatose) foram.também observadas. Com o pré-tratamento por cinco dias consecutivos com Iicopeno ou β-caroteno (10 mg/kg de massa corpórea, í.p), observamos completa prevenção dos danos oxidativos em DNA, da lipoperoxidação e das alterações histológicas nos tecidos estudados. Diversos estudos in vitro têm demonstrado a habilidade desses carotenóides em seqüestrar radicais peroxila e suprimir oxigênio singlete. O presente trabalho indica que essa ação antioxidante ocorre também em células e in vivo, através da proteção de lesões oxidativas em biomoléculas e danos em tecidos induzidos por ferro. Os dados apresentados contribuem para o esclarecimento da ação biológica dos carotenóides em organismos submetidos a sistemas que induzem o estresse oxidativo e suportam um dos possíveis mecanismos responsáveis pelo potencial anticâncer de carotenóides observados em estudos epidemiológicos. / Experimental and epidemiological evidences suggest that lycopene and β-carotene, carotenoids present in tomatoes, tomato products and several fruits and vegetables may play a role in preventing certain cancers in humans. However, to establish their role in health, more information is required to identify the biochemical mechanisms associated with these processes. With the aim of producing such information, we have first investigated the effect of lycopene on lipid peroxidation and on the formation of 8-oxo-7,8-dihydro-2\'-deoxyguanosine (8-oxodGuo) in CV1-P monkey cells exposed to ferric nitrilotriacetate (Fe-NTA) plus ascorbate. Cells supplemented with lycopene (20 fmol/106 cells) showed an approximate reduction of 80% in Fe-NTA/ascorbate-induced lipid peroxidation (TBARS). Levels of 8-oxodGuo in the cells increased over tenfold after treatment with Fe-NTA/ascorbate as compared to the control group. Lycopene supplementation decreased 8-oxodGuo in Fe-NTA/ascorbate-treated cells to approximately 70%. In arder to verify if these effects are also operative in vivo, we have investigated the effect of lycopene and β-carotene pre-treatment on lipid peroxidation, oxidative damage to DNA and histopathological changes in liver, kidney, lung, prostate and Iymphocytes of animais subjected to i.p. ferric nitrilotriacetate (Fe-NTA) administration. Compared with control rats, liver of Fe-NTA treated animais showed a 2-5 fold increase in 8-oxodGuo level and 40-75 % increase in malodialdehyde (MDA) accumulation concomitant with tissue histopathological changes. Five days of lycopene and β-carotene pre-treatment (10 mg/kg body weight, i.p.) almost completely prevented liver biomolecule oxidative damage and protected the tissue against the observed histological alterations. In conclusion, it is shown that lycopene and β-carotene prevented oxidative damage to DNA, membranes and markedly reduced the histological changes induced by Fe-NTA. Inhibition of these oxidative processes by carotenoids is likely due to their ability to trap peroxyl radical and to quench singlet oxygen. The results described herein may contribute toward a better understanding of the biological mechanisms associated with the potential cancer-preventing property of carotenoids observed in epidemiological studies.

A produção de radicais de carbono \"in vivo\" durante a biotransformação da hidrazina foi demonstrada por ressonância para magnética eletrônica, utilizando o método do captador de spin. Eritrócitos de rato também oxidaram a hidrazina, formando radicais de carbono e nitrogênio, além de espécies reativas de oxigênio. Todas estas espécies, possivelmente formadas \"in vivo\", são potencialmente causadoras de dano a macromoléculas. Podem, por exemplo, iniciar reações secundárias formando radicais de componentes celulares, como ocorreu com a hemoglobina que foi oxidada a radicais tiil-hemoglobina em eritrócitos tratados com hídrazina. Radicais de carbono formados durante a biotransformação da hidrazina em animais expostos provêm necessariamente de substâncias endógenas e podem ser direta ou indiretamente responsáveis pela modificação ( alquilação ) de bases no DNA \"in vivo\". A hidrazona do formaldeído é descrita na literatura como um intermediário da alquilação induzida por hidrazina \"in vivo\". Células L 1210, catalase ou oxihemoglobina de rato foram capazes de formar radicais de carbono durante a oxidação da hidrazona do formaldeído. A oxidação da hidrazona do formaldeído pela catalase foi estudada \"in vítro\" e os radicais de carbono formados, identificados como radicais metila. A base modificada C8 -metil-guanina foi formada em animais expostos, como demonstrado por cromatografia líquida de alta eficiência associada à detecção eletroquímica, sugerindo que ocorreu alquilação do DNA por radicais metila durante a biotransformação da hidrazina \"in vivo\". / The production of carbon-centered radicais during hydrazine biotransformation \"in vivo\" was demonstrated by electron paramagnetic resonance ( EPR ) spin trapping technique. Rat red blood cells also oxidized hydrazine, forming carbon and nitrogen centered radicais, besides oxygen reactive speties. Ali these species, possibly formed \"in vivo\", are potentially harmful to macromolecules. For example, they can initiate secondary reactions in which the radicais from cell components are formed, as it occurred with hemoglobin, forming thiyl-hemoglobin radicais in the red blood cells treated with hydrazine. Carbon-centered radicais produced during the biotransformation of hydrazine in exposed animais must be derived from endogenous sources and may be directly or indirectly responsible for the modificaton ( alkylation ) of DNA bases \"in vivo\". The formaldehyde hydrazone is reported in the literature as an intermediate of hydrazine-induced alkylation \"in vivo\". L1210 cells, catalase and rat hemoglobin were able to produce carbon-centered radicais during the oxidation of the formaldehyde hydrazone. The oxidation of formaldehyde hydrazone by catalase was studied \"in vitro\" and the generated carbon-centered radicais were identified as methyl radicais. The modified base C8 -methylguanine was formed in exposed animais, as demonstrated by high performance liquid chromatography with electrochemical detection, suggesting that DNA alkylation by methyl radicais occurred during hydrazine biotransformation \"in vivo.\"

A produção de radicais de carbono \"in vivo\" durante a biotransformação da hidrazina foi demonstrada por ressonância para magnética eletrônica, utilizando o método do captador de spin. Eritrócitos de rato também oxidaram a hidrazina, formando radicais de carbono e nitrogênio, além de espécies reativas de oxigênio. Todas estas espécies, possivelmente formadas \"in vivo\", são potencialmente causadoras de dano a macromoléculas. Podem, por exemplo, iniciar reações secundárias formando radicais de componentes celulares, como ocorreu com a hemoglobina que foi oxidada a radicais tiil-hemoglobina em eritrócitos tratados com hídrazina. Radicais de carbono formados durante a biotransformação da hidrazina em animais expostos provêm necessariamente de substâncias endógenas e podem ser direta ou indiretamente responsáveis pela modificação ( alquilação ) de bases no DNA \"in vivo\". A hidrazona do formaldeído é descrita na literatura como um intermediário da alquilação induzida por hidrazina \"in vivo\". Células L 1210, catalase ou oxihemoglobina de rato foram capazes de formar radicais de carbono durante a oxidação da hidrazona do formaldeído. A oxidação da hidrazona do formaldeído pela catalase foi estudada \"in vítro\" e os radicais de carbono formados, identificados como radicais metila. A base modificada C8 -metil-guanina foi formada em animais expostos, como demonstrado por cromatografia líquida de alta eficiência associada à detecção eletroquímica, sugerindo que ocorreu alquilação do DNA por radicais metila durante a biotransformação da hidrazina \"in vivo\". / The production of carbon-centered radicais during hydrazine biotransformation \"in vivo\" was demonstrated by electron paramagnetic resonance ( EPR ) spin trapping technique. Rat red blood cells also oxidized hydrazine, forming carbon and nitrogen centered radicais, besides oxygen reactive speties. Ali these species, possibly formed \"in vivo\", are potentially harmful to macromolecules. For example, they can initiate secondary reactions in which the radicais from cell components are formed, as it occurred with hemoglobin, forming thiyl-hemoglobin radicais in the red blood cells treated with hydrazine. Carbon-centered radicais produced during the biotransformation of hydrazine in exposed animais must be derived from endogenous sources and may be directly or indirectly responsible for the modificaton ( alkylation ) of DNA bases \"in vivo\". The formaldehyde hydrazone is reported in the literature as an intermediate of hydrazine-induced alkylation \"in vivo\". L1210 cells, catalase and rat hemoglobin were able to produce carbon-centered radicais during the oxidation of the formaldehyde hydrazone. The oxidation of formaldehyde hydrazone by catalase was studied \"in vitro\" and the generated carbon-centered radicais were identified as methyl radicais. The modified base C8 -methylguanine was formed in exposed animais, as demonstrated by high performance liquid chromatography with electrochemical detection, suggesting that DNA alkylation by methyl radicais occurred during hydrazine biotransformation \"in vivo.\"

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The antioxidant effects of the hydro-alcoholic guaraná extracts (Paullinia cupana var. sorbilis Mart.) on nitric oxide (NO ) and other compounds generated from degradation of Sodium Nitroprusside (SNP) in embryonic fibroblast culture (NIH-3T3 cells) were evaluated. The guaraná bioactive compounds were initially determined by a high-performance liquid chromatography (HPLC): caffeine=12.240 mg/g, theobromine=6.733 mg/g and total catechins= 4.336 mg/g. To the experiments, initially the cells were grown in DMEM (Dulbecco s Modified Eagle Medium) medium and incubated in a humidified atmosphere of 5% CO2 and 37°C until reach 90% confluence. Cell cultures were exposed to 10μM SNP during six hours since in this concentration the cells present >90% mortality. Guaraná diluted in water was added in the cultures in five concentrations (0.5, 1, 5, 10 and 20 mg/mL). MTT and Trypan blue viability, biochemical oxidative markers and genotoxicity (DNA Comet assay) analysis were performed. Additionally, the cell oxidative stress was evaluated by 2,7 dihydrodichlorofluorescein diacetate (DCFDA) fluorescence assay by confocal microscopy. Guaraná reverted the SNP toxicity mainly in lower concentrations (<5 mg) decreasing cell mortality, lipid peroxidation, DNA damage and cell oxidative stress and increasing the SOD levels. However, guarana was unable to reverse the inhibition of catalase probably triggered by the presence of cyanide which is also produced in the decomposition of SNP. The results suggest that guarana has effects on the modulation of excessive amounts of NO probably through its antioxidant properties. These results supported previous studies that suggest guarana have a protective effect against morbidity as obesity and metabolic syndrome that are related to metabolism. / Os efeitos antioxidantes do extrato hidro-alcoólico de guaraná (Paullinia cupana var. sorbilis) sobre o Óxido Nítrico (NO ) e outros compostos gerados a partir da decomposição do Nitroprussiato de Sódio (NPS) em cultura de fibroblastos embriônicos (NIH 3T3) foram avaliados. Os compostos bioativos do guaraná foram inicialmente determinados por cromatografia líquida de alta performance (HPLC): cafeína=12,240 mg/g, teobromina=6,733 mg/g e catequinas totais=4,336 mg/g. Para os experimentos as células foram inicialmente cultivadas em meio DMEM (Dulbecco s Modified Eagle Medium) e incubadas em uma atmosfera umidificada de 5% de CO2 a 37°C até chegar a uma confluência de 90%. As culturas de células foram expostas ao NPS na concentração de 10μM durante seis horas. Nesta concentração de NPS e tempo de exposição ocorre uma taxa de mortalidade celular >90%. O guaraná diluído em água foi adicionado em cinco diferentes concentrações (0,5, 1, 5, 10 e 20 mg/mL). Os ensaios de viabilidade MTT e azul de tripan, de marcadores bioquímicos de estresse oxidativo e genotoxicidade (ensaio cometa) foram realizados. Adicionalmente, o estresse oxidativo celular foi avaliado através do ensaio da fluorescência do diacetato de 2,7 diclorofluoresceína (DCFDA) via microscopia confocal. O guaraná reverteu à toxicidade induzida pelo NPS principalmente em concentrações mais baixas (<5mg/mL), diminuindo a: mortalidade celular, peroxidação lipídica, dano de DNA e produção de espécies reativas a aumentou os níveis da enzima Super Óxido Dismutase (SOD). Entretanto, o guaraná não conseguiu reverter a inibição da catalase provavelmente desencadeada pela presença de cianeto que também são produzidos na decomposição do NPS. Os resultados sugerem que o guaraná tem efeitos na modulação das quantidades excessivas de NO provavelmente através de suas propriedades antioxidantes. Estes resultados confirmaram estudos prévios que sugerem que o guaraná tem efeito protetor contra morbidades como obesidade e síndrome metabólica que são relacionadas ao metabolismo.