Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-16Bitstream added on 2014-06-13T20:16:15Z : No. of bitstreams: 1 beneduzzi_ah_me_ilha.pdf: 873775 bytes, checksum: 569e9acbb6c8f6e1ac86e5b1913d3b8f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A cada ano que passa a necessidade de desenvolver novas técnicas de prevenção de falhas em equipamentos vem crescendo continuamente, devido à grande necessidade de obtenção de lucros com o menor custo de manutenção possível. Atualmente, turbinas à gás, são equipamentos de extrema importância para industrias de petróleo e gás, devido sua grande capacidade de geração de energia cinética para acionamento de compressores e geradores de energia. Os custos de manutenção, formação de verniz no sistema de óleo e disponibilidade são algumas das preocupações mais importantes que se deve ter com uma turbina a gás. Um bom planejamento de manutenção otimizará os custos e maximizará a disponibilidade destes equipamentos. Os programas de manutenção devem ser eficazes, todas as recomendações do fabricante do equipamento devem ser seguidas, como o número e tipos de inspeção realizadas, peças sobressalentes, e outros fatores importantes que afetam a vida útil dos componentes e o funcionamento do equipamento. Dentre as inspeções realizadas pode-se encontrar a análise de vibração, boroscopia, termografia e a análise de óleo lubrificante. Neste trabalho são apresentadas as técnicas utilizadas na análise preditiva de óleo lubrificantes e um histórico das análises de óleo de um caso real de turbina a gás em que são observados e discutidos o procedimento ideal da realização de coletas das amostras de óleo de turbinas a gás desde o planejamento até o envio aos laboratórios para análise, verificação e diagnóstico / Each passing year the necessity to develop new techniques to prevent equipment failures increases continuously due to the great need of financial gain at the lowest possible maintenance costs. Currently, gas turbines are extremely important equipment for oil and gas industries, because to its great capacity to generate kinetic energy to drive compressors and generators. Maintenance costs, formation of varnish in the oil system and availability are some of the most important concerns that must be taken with a gas turbine. Good planning will optimize maintenance costs and maximize the availability of this equipment. Maintenance programs must be effective, all the equipment manufacturer's recommendations should be followed, as the number and types of inspections performed, spare parts, and other important factors that affect the life of the components and operation of equipment. Among the inspections it can be performed to find the vibration analysis, endoscopy, thermography and analysis of lubricating oil. This work will present the techniques used in predictive analysis of oil lubricants and oil analysis history of a real case of a gas turbine that will be seen and discussed the ideal procedure of carrying out collections of samples of oil from gas turbines planning to send to laboratories for analysis, verification and diagnosis

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-11-12T18:47:10Z No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Edival Barreto de Magalhães Junior.pdf: 24814752 bytes, checksum: 9e66c47cd7fe4747372599f4870ed1ba (MD5) / Approved for entry into archive by Flávia Ferreira (flaviaccf@yahoo.com.br) on 2013-11-19T11:57:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Edival Barreto de Magalhães Junior.pdf: 24814752 bytes, checksum: 9e66c47cd7fe4747372599f4870ed1ba (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-19T11:57:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Edival Barreto de Magalhães Junior.pdf: 24814752 bytes, checksum: 9e66c47cd7fe4747372599f4870ed1ba (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar pela histomorfometria o comportamento de enxerto ósseo em bloco bovino mineralizado (Orthogen®; BAUMER®) em fêmur de coelho fotobiomodulado com laser diodo infravermelho l780hm. Foram utilizados 24 animais divididos em oito grupos nos quais cada animal recebeu enxerto em bloco, autógeno e xenógeno. Nos grupos III, IV, VII e VIII, o enxerto foi irradiado com laser infravermelho (780nm, 70mW, CW) a cada 48 horas com uma dose de 16J/cm2 por sessão, ao longo de 7 sessões. Os animais dos grupos I, II, III e IV foram sacrificados após o período de nove semanas. Nos grupos V, VI, VII e VIII, após o período de incorporação dos enxertos, foi instalado um implante de titânio de 3.5 mm de diâmetro por 7 mm de comprimento em cada bloco. Os animais foram sacrificados oito semanas após a fixação dos implantes. A peça histológica obtida foi corada com azul de toluidina e fucsina básica. A avaliação através da microscopia óptica indicou que após nove semanas, os grupos irradiados apresentaram maior quantidade de osso neoformado quando comparados ao grupo controle. A histomorfometria demonstrou que o grupo xenógeno irradiado obteve 40,55±7,16% de osso neoformado e foi estatisticamente significante quando comparado ao não irradiado (10,69±2,11%). Na análise do Contato Osso-Implante (COI) para os grupos que receberam implantes não houve diferença estatisticamente significante entre o enxerto xenógeno irradiado e o não irradiado. O grupo VIII obteve um percentual de 65,27±9,66% enquanto que o grupo VI apresentou 58,93±8,6%. Concluiu-se que a fotobiomodulação realizada pelo laser infravermelho agiu positivamente sobre os enxertos xenógenos durante a incorporação óssea, pelo aumento da quantidade de novo osso formado, o que não ocorreu com o COI.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-09-30T13:05:28Z No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Jouber Mateus dos Santos Aciole.pdf: 2641729 bytes, checksum: 21ca890e9cd66e34c736b4d68ba02e37 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2016-10-07T12:06:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Jouber Mateus dos Santos Aciole.pdf: 2641729 bytes, checksum: 21ca890e9cd66e34c736b4d68ba02e37 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-07T12:06:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Jouber Mateus dos Santos Aciole.pdf: 2641729 bytes, checksum: 21ca890e9cd66e34c736b4d68ba02e37 (MD5) / CNPq / A fotobiomodulação Laser/LED têm demonstrado resultados positivos na cicatrização de tecido ósseo, aumentando o aporte sanguíneo na área lesionada. O objetivo deste estudo foi de avaliar por meio de análise histológica, histomorfométrica e espectroscopia Raman, o efeito da fototerapia, laser ou LED, no processo de reparo de defeitos ósseos em fêmur de ratas osteoporóticas. Utilizaram-se 40 ratas Wistar igualmente divididas em 5 grupos. Com exceção do grupo basal normal, todos os grupos sofreram indução a osteoporose, através da ovariectomia (OVX). Após a anestesia geral, foi criado um defeito ósseo de 2 mm de diâmetro no fêmur direito de todos os animais com broca de titânio. No Grupo Osteo (osteoporótico): foram sacrificados 60 dias após a OVX; Grupo Basal normal: não houve OVX nem confecção de defeito ósseo, foram sacrificados juntamente com o grupo Osteo; Grupo Coágulo: 60 dias pós OVX, foi criado o defeito ósseo e submetidos à simulação de irradiação; Grupo LED: 60 dias pós OVX, foi criado o defeito ósseo sendo submetidos à irradiação com LED (λ = 850 ± 10 nm, P = 150 mW, CW, 20,4 J/cm2 por sessão, 163,2 J/cm2 por tratamento); Grupo Laser: 60 dias pós OVX, foi criado o defeito ósseo sendo submetidos à irradiação com laser (λ = 780 nm, P = 70 mW, CW, 20,4 J/cm2 por sessão, 163,2 J/cm2 por tratamento). Os protocolos de irradiação foram executados imediatamente após a cirurgia, repetindo as sessões a cada 48 horas durante 15 dias, totalizando 08 irradiaçoes. A morte dos animais ocorreu após 15 e 30 dias. As amostras foram divididas em duas partes, uma foi analisada por espectroscopia Raman, para avaliar o grau de mineralização óssea através das intensidades dos picos de Raman do conteúdo inorgânico (~960, ~1070 cm-1) e orgânico (~1454 cm-1) do tecido ósseo. A outra metade foi processada e corada com Hematoxilina-eosina (HE) e Tricômico de Masson (TM), sendo avaliada semi-quatitativamente através de microscopia de luz e comparado histomorfometricamente entre os grupos utilizando-se o teste exato de Fischer. Histologicamente e histomorfometricamente, os resultados indicaram que os grupos Irradiados encontravam-se em estágio mais avançado de reparo. Espectroscopicamente, as fototerapias, laser e LED, aumentaram a deposição de HA e, consequentemente, a mineralização do osso neoformado. Concluiu-se que a fotobiomodulação Laser ou LED foram eficazes na melhora no processo de reparo ósseo de defeitos ósseos confeccionados em fêmur de ratas osteoporóticas.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-02-17T15:57:19Z No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Jouber Mateus dos Santos Aciole.pdf: 2641729 bytes, checksum: 21ca890e9cd66e34c736b4d68ba02e37 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-05-02T12:45:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Jouber Mateus dos Santos Aciole.pdf: 2641729 bytes, checksum: 21ca890e9cd66e34c736b4d68ba02e37 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-02T12:45:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Jouber Mateus dos Santos Aciole.pdf: 2641729 bytes, checksum: 21ca890e9cd66e34c736b4d68ba02e37 (MD5) / CNPq / A fotobiomodulação Laser/LED têm demonstrado resultados positivos na cicatrização de tecido ósseo, aumentando o aporte sanguíneo na área lesionada. O objetivo deste estudo foi de avaliar por meio de análise histológica, histomorfométrica e espectroscopia Raman, o efeito da fototerapia, laser ou LED, no processo de reparo de defeitos ósseos em fêmur de ratas osteoporóticas. Utilizaram-se 40 ratas Wistar igualmente divididas em 5 grupos. Com exceção do grupo basal normal, todos os grupos sofreram indução a osteoporose, através da ovariectomia (OVX). Após a anestesia geral, foi criado um defeito ósseo de 2 mm de diâmetro no fêmur direito de todos os animais com broca de titânio. No Grupo Osteo (osteoporótico): foram sacrificados 60 dias após a OVX; Grupo Basal normal: não houve OVX nem confecção de defeito ósseo, foram sacrificados juntamente com o grupo Osteo; Grupo Coágulo: 60 dias pós OVX, foi criado o defeito ósseo e submetidos à simulação de irradiação; Grupo LED: 60 dias pós OVX, foi criado o defeito ósseo sendo submetidos à irradiação com LED (λ = 850 ± 10 nm, P = 150 mW, CW, 20,4 J/cm2 por sessão, 163,2 J/cm2 por tratamento); Grupo Laser: 60 dias pós OVX, foi criado o defeito ósseo sendo submetidos à irradiação com laser (λ = 780 nm, P = 70 mW, CW, 20,4 J/cm2 por sessão, 163,2 J/cm2 por tratamento). Os protocolos de irradiação foram executados imediatamente após a cirurgia, repetindo as sessões a cada 48 horas durante 15 dias, totalizando 08 irradiaçoes. A morte dos animais ocorreu após 15 e 30 dias. As amostras foram divididas em duas partes, uma foi analisada por espectroscopia Raman, para avaliar o grau de mineralização óssea através das intensidades dos picos de Raman do conteúdo inorgânico (~960, ~1070 cm-1) e orgânico (~1454 cm-1) do tecido ósseo. A outra metade foi processada e corada com Hematoxilina-eosina (HE) e Tricômico de Masson (TM), sendo avaliada semi-quatitativamente através de microscopia de luz e comparado histomorfometricamente entre os grupos utilizando-se o teste exato de Fischer. Histologicamente e histomorfometricamente, os resultados indicaram que os grupos Irradiados encontravam-se em estágio mais avançado de reparo. Espectroscopicamente, as fototerapias, laser e LED, aumentaram a deposição de HA e, consequentemente, a mineralização do osso neoformado. Concluiu-se que a fotobiomodulação Laser ou LED foram eficazes na melhora no processo de reparo ósseo de defeitos ósseos confeccionados em fêmur de ratas osteoporóticas.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-09-26T14:32:42Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_Laila da Silva Santos.pdf: 2234004 bytes, checksum: f03ac10a5c8de1a9ce10b68496a45d2e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-26T14:32:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_Laila da Silva Santos.pdf: 2234004 bytes, checksum: f03ac10a5c8de1a9ce10b68496a45d2e (MD5) / FAPESB / O Laser é fotobiomodulador celular consagrado que vem despertando o interesse da sua utilização na proliferação e diferenciação de células-tronco. Verificou-se a influência da fototerapia Laser (λ660nm, 40mW, 6J/cm²,  0,04cm2, CW, Twin Flex Evolution, MMoptics®, São Carlos, SP) na imunomarcação com o marcador de células-tronco CD49 no tecido adiposo de ratos submetidos a dieta hiperlípidica. Quarenta e oito ratos Wistar albinus, desmamados foram divididos em dois grupos experimentais: Dieta Padrão (DP) e Dieta Hiperlipídica (DH), alimentados com suas respectivas rações por 20 semanas. Em seguida, os ratos foram submetidos à anestesia geral para confecção de feridas cutâneas dorsais, excisionais, padronizadas em 1cm². Os grupos foram subdivididos em DPC e DHC sem tratamento adicional e DPL e DHL irradiados pelo protocolo supracitado, imediatamente após o ato cirúrgico e a cada 48 horas durante 7 ou 14 dias. Os ratos foram mortos por aprofundamento anestésico, os espécimes processados pela técnica de imunohistoquímica e avaliados por microscopia de luz. O grupo DPC apresentou anticorpos marcados com intensidade de moderada a intensa, enquanto no grupo DHC prevaleceu a coloração fraca para o tempo de 14 dias. O protocolo de irradiação empregado não teve influência sobre o marcador CD49 quando comparados os grupos controle e irradiados sob o mesmo período de tempo; no entanto, quando comparados os grupos DHL em 7 e 14 dias, o marcador apresentou aumento na intensidade da imunomarcação em relação ao tempo, suscitando a hipótese da influência da luz laser sobre células-tronco adipoderivadas recrutadas para o processo de reparo tecidual.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-12-28T15:23:57Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ DA SILVA, A. C. P..pdf: 3186466 bytes, checksum: 7ad0834e7f4b319a38c64920ad4f7147 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-28T15:23:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ DA SILVA, A. C. P..pdf: 3186466 bytes, checksum: 7ad0834e7f4b319a38c64920ad4f7147 (MD5) / CNPq / Ao lado dos biomateriais, as fototerapias Laser e LED têm mostrado resultados positivos como terapias auxiliares no processo de reparo ósseo, especialmente quando envolvem grandes perdas de tecido. O objetivo deste estudo foi avaliar, através da análise histológica por microscopia de luz, a influência da fotobiomodulação Laser ou LED sobre o processo de reparação de fraturas completas em tíbias de coelhos, tratadas com fixação semi-rígida (fio de aço), com ou sem implante de MTA. 21 coelhos Oryctolagus foram aleatoriamente divididos em sete grupos de três animais. Após anestesia geral, fraturas completas foram criadas com disco carborundum. Os animais dos outros grupos (I -VI) a fratura completa foi criada e estabilizado com a fixação semi-rígida. Nos Grupos II, V e VI a fratura foi preenchida por coágulo sanguíneo e implante de MTA, antes da fixação semi-rígida. Nos Grupos III e V a fratura foi preenchida por coágulo sanguíneo e irradiada com Laser ( λ = 780 nm , P = 70 mW , CW , Ф = 0,04 cm2 , 20,4 J/cm2 , dividida em 4 pontos de 5,1 J/cm2 por sessão , t = 300s , 142,8 J/cm2 por tratamento). Nos Grupos IV e VI a fratura foi preenchida por coágulo sanguíneo e irradiada com LED ( λ = 850 ± 10 nm , P = 150 mW, CW, Ф = 0,5 cm2 , 20,4 J/cm2 por sessão, t = 64 s, 142,8 J/cm2 por tratamento). Os protocolos de irradiação Laser e LED foram aplicados imediatamente após a cirurgia e repetidos a cada 48 horas durante 15 dias. A morte dos animais ocorreu no 30o dia pós-operatório, através de overdose de anestesia geral. Após a remoção dos espécimes, as amostras foram rotineiramente processadas, coradas e avaliadas por microscopia de luz. Histologicamente, observou-se que nos grupos implantados com MTA e irradiados com Laser ou LED, as fraturas foram preenchidas por um osso trabecular mais maduro e organizado, quando comparados com outros grupos sem esta associação. Concluiu-se que a fotobiomodulação Laser ou LED foram eficazes na melhoria do processo de reparação óssea de fraturas completas na tíbia de coelhos, submetidos ou não a implante de MTA.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2018-01-09T14:25:54Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Aline Cavalcanti Pereira da Silva.pdf: 3186466 bytes, checksum: 7ad0834e7f4b319a38c64920ad4f7147 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-09T14:25:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Aline Cavalcanti Pereira da Silva.pdf: 3186466 bytes, checksum: 7ad0834e7f4b319a38c64920ad4f7147 (MD5) / CNPq / Ao lado dos biomateriais, as fototerapias Laser e LED têm mostrado resultados positivos como terapias auxiliares no processo de reparo ósseo, especialmente quando envolvem grandes perdas de tecido. O objetivo deste estudo foi avaliar, através da análise histológica por microscopia de luz, a influência da fotobiomodulação Laser ou LED sobre o processo de reparação de fraturas completas em tíbias de coelhos, tratadas com fixação semi-rígida (fio de aço), com ou sem implante de MTA. 21 coelhos Oryctolagus foram aleatoriamente divididos em sete grupos de três animais. Após anestesia geral, fraturas completas foram criadas com disco carborundum. Os animais dos outros grupos (I -VI) a fratura completa foi criada e estabilizado com a fixação semi-rígida. Nos Grupos II, V e VI a fratura foi preenchida por coágulo sanguíneo e implante de MTA, antes da fixação semi-rígida. Nos Grupos III e V a fratura foi preenchida por coágulo sanguíneo e irradiada com Laser ( λ = 780 nm , P = 70 mW , CW , Ф = 0,04 cm2 , 20,4 J/cm2 , dividida em 4 pontos de 5,1 J/cm2 por sessão , t = 300s , 142,8 J/cm2 por tratamento). Nos Grupos IV e VI a fratura foi preenchida por coágulo sanguíneo e irradiada com LED ( λ = 850 ± 10 nm , P = 150 mW, CW, Ф = 0,5 cm2 , 20,4 J/cm2 por sessão, t = 64 s, 142,8 J/cm2 por tratamento). Os protocolos de irradiação Laser e LED foram aplicados imediatamente após a cirurgia e repetidos a cada 48 horas durante 15 dias. A morte dos animais ocorreu no 30o dia pós-operatório, através de overdose de anestesia geral. Após a remoção dos espécimes, as amostras foram rotineiramente processadas, coradas e avaliadas por microscopia de luz. Histologicamente, observou-se que nos grupos implantados com MTA e irradiados com Laser ou LED, as fraturas foram preenchidas por um osso trabecular mais maduro e organizado, quando comparados com outros grupos sem esta associação. Concluiu-se que a fotobiomodulação Laser ou LED foram eficazes na melhoria do processo de reparação óssea de fraturas completas na tíbia de coelhos, submetidos ou não a implante de MTA.

86f. / Submitted by Suelen Reis (suziy.ellen@gmail.com) on 2013-04-23T13:59:20Z No. of bitstreams: 1 Tese - Antonio Marcio.pdf: 4443227 bytes, checksum: 11ef696551c6a19fa5033123778b8ab6 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Meirelles(rodrigomei@ufba.br) on 2013-05-08T11:46:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Antonio Marcio.pdf: 4443227 bytes, checksum: 11ef696551c6a19fa5033123778b8ab6 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-08T11:46:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Antonio Marcio.pdf: 4443227 bytes, checksum: 11ef696551c6a19fa5033123778b8ab6 (MD5) Previous issue date: 2008 / O reparo tecidual inicia-se com a inflamação e tem continuidade com a presença de células secretoras e contráteis. Intervenções terapêuticas, como a fototerapia e a dexametasona, podem interferir neste processo biológico. Este trabalho teve o objetivo de avaliar a influencia destes dois agentes sobre o processo inflamatório e cicatricial. Foram realizadas feridas cutâneas padronizadas em 80 ratos, wistar, distribuídos em quatro grupos. O grupo controle isento de terapêutica. O grupo laser com a aplicação da radiação do laser diodo de AsGaAl, 9mW, l670nm, 0,031W/cm2 e 4J/cm2, em dose única após a cirurgia. O grupo dexametasona submetido à administração de 2mg/kg deste medicamento 1 hora antes da cirurgia e o grupo com associação de ambas as terapias submetido aos mesmos parâmetros descritos anteriormente. Após a morte dos animais o tecido foi corado com HE e avaliou-se edema, células polimorfonucleares e mononucleares. Com o sírius vermelho analisouse a matriz de colágeno. Foram utilizadas também a imuno-histoquímica e microscopia eletrônica de transmissão para avaliar os miofibroblastos. As mudanças nos achados das variáveis foram analisadas de forma semiquantitativa. Os resultados demonstraram que o laser e a dexametasona atuaram de forma semelhantes atenuando a inflamação aguda. A síntese de colágeno e a expressão de miofibroblastos foi mais intensa no grupo laser, do que no grupo dexametasona com diferenças estatisticamente significativas em alguns períodos (p 0,005). Na associação das terapias, a expressão do colágeno e de células actino- e desmino positivas foram menos expressivas do que o grupo tratado apenas com o laser. Assim, o laser foi eficiente em reduzir o edema e as células polimorfonucleares e acelerar o reparo tecidual, agindo como um bioestimulador, mesmo na presença da dexametasona. / Salvador

MARÍLIA,B.C. Análise de expressão dos genes de reparo da lesão de fita simples do DNA de trabalhadores rurais expostos à agrotóxicos. 2017.118 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Ivone Sousa (ppgcm.ufc@gmail.com) on 2017-08-22T14:28:14Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_mbc.pdf: 2549794 bytes, checksum: 28bfda64f0b63d5f3aff76ae45562b1f (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-22T15:28:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_mbc.pdf: 2549794 bytes, checksum: 28bfda64f0b63d5f3aff76ae45562b1f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-22T15:28:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_mbc.pdf: 2549794 bytes, checksum: 28bfda64f0b63d5f3aff76ae45562b1f (MD5) Previous issue date: 2017-02-15 / Population growth and the arising of the modern chemical industry have culminated in significant changes in agricultural productivity. The need of a increasingly food production has been linked to the use of chemicals to control and improve the development of agricultural products. In Ceará, specifically in region of Baixo Jaguaribe, the arrival of business agriculture has caused a re-ordering of agribusiness. Exposure to pesticides is often considered a major factor underlying increased risk of bone marrow disorders, including leukemia, myelodysplastic syndrome (MDS) and multiple myeloma in agricultural populations. Cumulative genetic damages are important events for the development of carcinogenesis and lack of efficacy in the DNA repair system is considered a major contributing factor.We evaluated the gene expression of targets related to DNA repair mechanisms, namely genes from the classes single strand break (SSB: CSA, CSB, XPA, XPC and XPG), using quantitative real time PCR from bone marrow samples of ninety farmers. Further, we also investigated karyotype of bone marrow cells by G-Band to confirm cytogenetic alterations. The participants were recruited from Limoeiro do Norte, a municipality in the northeastern of Brazil recognized by its intense agriculture activity, and divided into three groups according to their work segments: agriculture industry (AI), family farmers (FF) and organic farming (OF). There were significant differences across the three groups. AI individuals presented significantly lower transcript levels of XPG (p=0.004) and CSA (p=0.000) compared to the OF group. Similarly, FF presented significantly lower XPG (p=0.012) mRNA expression levels than OF. Among the farmers exposed to agrochemicals, we detected that those with more than 12 years of exposure showed an overall decrease in expression of XPC (p=0.001), XPG (p=0.010) and CSB (p=0.05) compared to those who had been exposed to less than 12 years. In addition, we detected significant correlations (p<0.05) between XPC and CSB (r=0.658), XPC and XPG (r=0.641), XPA and CSB (r=0.635), XPA and XPG (r=0.627), XPG and CSA (r=0.536), CSA and CSB (r=0.515), XPA and XPC (r=0.496), XPA and CSA (r=0.327). Whilst these correlations highlights the overall intrinsic relationship between single and double DNA strand breaks genes in bone marrow cells of these individuals, it is certainly notable the fact that the vast majority of the DNA repair genes investigated were downregulated in farmers exposed to pesticides, which vastly increments the risk of developing bone marrow cancers. / O crescimento da população e o surgimento da indústria química moderna culminou em mudanças significativas na produtividade agrícola. A necessidade de uma produção cada vez maior de alimentos tem estado atrelada ao uso de substâncias químicas afim de controlar e melhorar o desenvolvimento dos produtos agrícolas. No Ceará, especificamente na região do Baixo Jaguaribe, foi com a chegada da agricultura empresarial que houve uma reordenação do agronegócio na região. A exposição a pesticidas é muitas vezes considerada um fator importante subjacente ao aumento do risco de distúrbios da medula óssea, incluindo leucemia, síndrome mielodisplásica (MDS) e mieloma múltiplo em populações agrícolas. Os danos genéticos cumulativos são eventos importantes para o desenvolvimento da carcinogênese e a falta de eficácia no sistema de reparo do DNA é considerado um dos principais fatores contribuintes. Avaliamos a expressão gênica de alvos relacionados aos mecanismos de reparo do DNA, nomeadamente os genes de reparo de fita simples do DNA (SSB: CSA, CSB, XPA, XPC e XPG) utilizando PCR quantitativa em tempo real a partir de amostras de medula óssea de noventa agricultores. Além disso, também investigamos Cariótipo das células da medula óssea pela G-Band para confirmar as alterações citogenéticas. Os participantes foram recrutados no Limoeiro do Norte, um município no Nordeste do Brasil reconhecido pela intensa atividade agrícola e dividido em três grupos de acordo com seus segmentos de trabalho: grande produtor (GP), agricultura familiar (AF) e agricultura ecológica (AE). Houve diferenças significativas entre os três grupos. Os indivíduos do grupo GP apresentaram níveis de transcrição significativamente inferiores de XPG (p = 0,004), CSA (p = 0,000), em comparação com o grupo AO. Entre os agricultores expostos aos agroquímicos, descobrimos que aqueles com mais de 12 anos de exposição apresentaram uma diminuição geral da expressão de XPC (p = 0,001), XPG (p = 0,010) e CSB (p = 0,05) em comparação com aqueles que foram expostos a menos de 12 anos. Além disso, detectamos correlações significativas (p <0,05) entre XPC e CSB (r = 0,658), XPC e XPG (r = 0,641), XPA e CSB (r = 0,635), XPA e XPG (r = 0,627), XPG E CSA (r = 0,536), CSA e CSB (r = 0,515), XPA e XPC (r = 0,496), XPA e CSA (r = 0,327). Embora essas correlações mostrem a relação intrínseca global entre os genes de fita simples e fita dupla do DNA nas células da medula óssea desses indivíduos, é certamente notável o fato de que a grande maioria dos genes de reparo de DNA investigados estavam baixo expressos em agricultores expostos à pesticidas, o que muito aumenta o risco de desenvolver câncer de medula

Metarhizium anisopliae é um fungo entomopatogênico usado como agente de controle biológico devido a sua capacidade de infectar mais de 300 espécies de artrópodes. É um organismo muito utilizado como modelo de estudo de interação patógeno-hospedeiro sendo um dos focos de estudo a descrição de genes envolvidos no processo de infecção pela construção de mutantes funcionais. Esse processo pode ser facilitado pelo uso da metodologia do sistema CRISPR/Cas9 para manipulação genômica, que foi derivada do sistema imune adaptativo de procariotos que vem demonstrando potencial tecnológico em edição genética de eucariotos pela incorporação de protoespaçadores (sequencias oriundas de bacteriófagos ou plasmídeos invasores) em seus loci. CRISPR e a proteína associada à CRISPR (Cas) formam uma endonuclease guiada (Cas9) a qual tem como alvo o sítio específico do DNA invasor, provocando a clivagem da dupla fita do DNA alvo em uma sequência específica. Muitos estudos realizados pela edição gênica têm sido desenvolvidos em diferentes organismos por meio da sua adaptação em eucariotos. Com o objetivo de melhorar a eficiência na geração de mutantes em em M. anisopliae, o sistema CRISPR/Cas9 e um sistema de RNAi foram usados a fim de desenvolver novas ferramentas. As metodologias CRISPR/Cas9 e RNAi foram desenvolvidas para ter como alvo o gene reporter gfp da linhagem M. anisopliae E6 GFP+. Para realizar a edição genômica em M. anisopliae, foram gerados, por transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens, fungos transgênicos estáveis que expressam a endonuclease Cas9 códon-otimizada para fungos filamentosos. Oligonucleotídeos foram projetados para ter como alvo quatro regiões diferentes na sequencia do gene gfp com o auxílio da ferramenta CRISPR RGEN tool com o objetivo de evitar o pareamento aleatório. O vetor binário utilizado foi o plasmídeo pPZP com o promotor U6-1 para a expressão do RNA guia. Para a metodologia de RNA interferente foi reproduzido o knockdown do gene repórter gfp por meio de agrotransformação do vetor pPZP::SUR::DP que contém um sistema de dois promotores em direções opostas (dual promoter Pdgp e Ptrpc) e um cassette de expressão com o gene marcador sur (resistência a sulfoniluréia) para a seleção dos transformantes. Foram clonados 420 pares de bases do gene gfp entre os promotores gerando o plasmídeo pPZP::SUR::DP::GFP. O desenvolvimento dessas duas metodologias se mostra viável para análise funcional de genes de M. anisopliae. / Metarhizium anisopliae is an entomopathogenic fungus used as a biological control agent due to its capacity to infect more than three hundred species of arthropods. It is broadly used as a model to the development of host-pathogen interaction studies, including the study of the description of the involved genes in the infection process by the construction of functional mutants. This process may be facilitated by the use of the CRISPR/Cas9 methodology to genomic manipulation, which was derived from the immune adaptive system in prokaryotes and has demonstrated technological potential in genetic of eukaryotes edition through the activity of incorporation of protospacers (sequences arising from bacteriophages or plasmids invaders) in their loci. CRISPR and CRISPR associated protein (Cas) code a guided nuclease (Cas9) that targets a specific site of the invading DNA leading to breakage of double-stranded target DNA in a specific sequence. Multiple gene editing studies have been developed in different organisms including its adaptation to eukaryotes. In order to improve the efficiency of the generation of mutants in M. anisopliae, CRISPR/Cas9 system and a RNAi system were used in order to develop new tools. Both CRISPR/Cas9 and RNAi methodologies were developed having as a target the gfp gene from M. anisopliae E6 GFP+ strain. To perform genome editing in M. anisopliae, stable transgenic fungi that express fungal codon-optimized Cas9 were generated by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation. Oligonucleotides were designed to target four different regions along the gfp gene by using the CRISPR RGEN tool in order to avoid off-targets. The binary vector was the pPZP plasmid with the U6-1 to RNAi expression. For RNAi analysis, gene knockdown were developed by agrotransformation with a suitable plasmid (pPZP::SUR::DP) containing dual promoters with opposite directions (Pdgp and Ptrpc) and a cassette for the expression of the selective marker (gene sur, conferring sulfonylurea resistance) for the selection of transformants. The 420 bp gfp sequence was cloned between promoters, obtaining thus the plasmid pPZP::SUR::DP::GFP. The development of these two techniques proves itself viable for functional analysis of M. anisopliae genes.