Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O tratamento cirÃrgico da doenÃa hemorroidÃria pela Anopexia MecÃnica (AM), utilizando grampeador circular PPH de 33mm (Ethicon EndoSurgery) pode estar relacionado a lesÃo esfincteriana perianal, com repercussÃo no padrÃo evacuatÃrio. O objetivo deste estudo à avaliar a sensibilidade e complacÃncia retal em pacientes submetidos a esta tÃcnica operatÃria. Foram estudados 10 pacientes portadores de hemorrÃidas grau III ou IV sintomÃticas. Todos os pacientes foram avaliados prÃ-operatoriamante utilizando-se um barostato (Visceral Stimulator; Synetics Medical), com base em dois protocolos de pesquisa da sensibilidade retal: um contÃnuo (Ramp Test) e outro aleatÃrio (Random test), nos quais foram aferidas as diferentes reaÃÃes dos pacientes frente à distensÃo volumÃtrica de um balÃo retal sob controle de um "software" (Polygram for Windows; Medtronic), o que permitiu a reprodutibilidade do mÃtodo no pÃs-operatÃrio. Foram observadas a sensaÃÃo retal inicial (1a. sensaÃÃo), a sensibilidade evacuatÃria (2a. sensaÃÃo) e a sensibilidade a dor (3a. sensaÃÃo). ApÃs cirurgia os pacientes foram reavaliados ao final de 2, 4 e 6 meses. Utilizou-se um grupo controle de 10 pacientes portadores de doenÃa pilonidal sacro-coccÃgea, submetidos ao mesmo protocolo de avaliaÃÃo no prà e pÃs-operatÃrio, diferenciando-os do grupo cirÃrgico pela nÃo realizaÃÃo da anopexia mecÃnica. Foram aplicados os testes estatÃsticos de Pearson e t-student para a anÃlise dos estatÃstica dos resultados. Observou-se diminuiÃÃo dos valores de complacÃncia e sensibilidade retal ao final de 2 meses de pÃs-operatÃrio no grupo submetido a AM, para todas as sensaÃÃes pesquisadas, em ambos os protocolos de insuflaÃÃo do barostato. NÃo se observou diferenÃa entre a complacÃncia e sensibilidade retal observada nas avaliaÃÃes prÃ-operatÃria e aos quatro e seis meses no grupo submetido a AM, bem como em nenhuma das avaliaÃÃes realizadas no grupo controle. Conclui-se que a Anopexia MecÃnica causa uma diminuiÃÃo transitÃria da complacÃncia e sensibilidade retal aos dois meses de pÃs-operatÃrio, valores estes que se recuperam a partir do quarto mÃs pÃs-operatÃrio. / Post-graduation Course in Surgery (Strictu Sensu), Departament of Surgery, Medicine School, Federal University of Cearà (Master in Surgery Degree). 2005, September. Professor: Prof. Dr. Lusmar Veras Rodrigues Surgical treatment of haemorrhoids by Stapled Anopexy (SA), using a circular stapler PPH - 33mm (Ethicon EndoSurgery) may damage perianal muscle fibers, with changes In defecation pattern. The aim of this study was to evaluate rectal compliance and sensitivity in patients treated by SA. Ten patients with grade III or IV sintomatic haemorrhoids were elegible for this study. All patients were studied before surgery with a barostat (Visceral Stimulator; Synetics Medical), using two research protocols for rectal sensitivity: a continuous one (Ramp Test) and another one in steps (Random test), that could record patient's perception to volumetric distention of a rectal baloon, controled by a software (Polygram for Windows, Medtronic). This software made the method reproductible to all patients in the post-operative period. The barostat was able to record the first rectal sensation (1st. sensation), urge to defecate (2nd. sensation) and rectal pain (3rd. sensation). Patients were studied following the same protocol at two, four and six months after surgery. A control group of ten patients with pilonidal sinus disease was submitted to the same protocol, except for stapled anopexy. Statistical analysis was acomplished using Pearson and Student's t test. The study found a decrease in retal compliance and sensitivity of patients treated by stapled anopexy, during the second post-operative month evaluation, for all recorded sensations, to all distension protocols. There was no difference in rectal compliance and sensitivity between pre-operative and post-operative at four and six months evaluations for patients treated by stapled anopexy. There was no difference in rectal compliance and sensitivity for any patient in control group, for any sensation recordered, using any distension protocol. The conclusion was that stapled anopexy caused a transient decrease in rectal compliance and sensitivity at the second postoperative month, that returned to normal values at the fourth post-operative month.

O objetivo do trabalho foi avaliar a técnica de biópsia retal em equinos e as alterações histopatológicas encontradas na mucosa retal em animais clinicamente saudáveis e em animais com alterações do trato gastrintestinal. Foram utilizados 32 equinos divididos em três grupos: 10 animais clinicamente saudáveis (grupo 1), sete animais com alterações do trato gastrintestinal com diagnóstico estabelecido (grupo 2) e 15 animais com manifestações clínicas inespecíficas do trato gastrintestinal (grupo 3). Os equinos do grupo 1 foram biopsiados duas vezes, a segunda biópsia sendo realizada 48 horas após a primeira. As biópsias retais foram realizadas com os animais em estação, utilizando-se pinça de biópsia tipo jacaré. As amostras de mucosa retal foram coradas por hematoxilina-eosina (HE), azul de alciano com ácido periódico de Schiff a 2,5% e azul de toluidina. No grupo 1, não foram observadas diferenças significativas entre a primeira e a segunda biópsia, mas três equinos apresentaram pequenas alterações que podem ser decorrentes da palpação retal. Na primeira avaliação, sete animais desse grupo apresentaram padrão semelhante, permitindo estabelecer um padrão de normalidade histológica para a mucosa retal: epitélio superficial preservado; criptas uniformes e alinhadas perpendicularmente à superfície com grande número de células caliciformes com mucinas ácidas em maior quantidade; linfócitos intra-epiteliais na superfície do epitélio em número de até 15 linfócitos para cada 100 colonócitos; pequeno número de linfócitos, plasmócitos e eosinófilos infiltrando a lâmina própria e a submucosa. Os outros três equinos deste grupo apresentaram um aumento na intensidade das células inflamatórias (discreto a moderado na intensidade de linfócitos e plasmócitos na lâmina própria e submucosa, e moderado na intensidade dos eosinófilos na submucosa). Os equinos do grupo 2, todos com síndrome cólica, apresentaram as seguintes alterações histopatológicas: proctite linfoplasmocítica simples (4/7) e proctite eosinofílica (1/7). No grupo 3 (12 equinos com diarreia crônica e três com emagrecimento progressivo), apenas um animal apresentou mucosa retal com padrão de normalidade. Nos outros animais foram observadas: proctite linfoplasmocítica simples (6/15), proctite erosiva (3/15), proctite linfoplasmocítica com aumento de neutrófilos (2/15), proctite eosinofílica (2/15), proctite linfoplasmocítica com aumento de neutrófilos e eosinófilos (1/15) e infiltração por linfócitos atípicos/linfoma (1/15). Concluiu-se que: a técnica de biópsia retal avaliada é de fácil execução e segura; embora algumas alterações histológicas possam ser observadas na mucosa retal de equinos clinicamente saudáveis, causadas ou não por palpação retal, há um padrão de normalidade que deve ser usado para a avaliação de equinos com alterações gastrintestinais; apenas em alguns casos as alterações histológicas encontradas na mucosa retal em equinos permitem um diagnóstico definitivo, mas elas podem direcionar o raciocínio diagnóstico em outros, sendo este um importante exame complementar a ser indicado em casos de equinos com alterações gastrintestinais inespecíficas. / The purpose of this study was to asses the rectal biopsy techique in horses and the histopathological changes found in the rectal mucosa in clinically healthy animals and in animals with clinical signs of intestinal disorders. 32 horses were divided into three groups: 10 animals clinically healthy (group 1), seven animals with gastrointestinal disorders with an established diagnosis (group 2) and 15 animals with nonspecific clinical manifestations of the gastrointestinal tract (group 3). The horses in group 1 had two biopsies, the second biopsy was performed 48 hours after the first. Rectal biopsies were performed on the animals station, using alligator biopsy forceps. The samples of rectal mucosa were stained with hematoxylin end eosin (HE), alcian blue PAS pH 2.5% and toluidine blue. In group 1, no significant differences between the first and second biopsy were observed, but three horses showed small changes that may result from rectal palpation. In the first evaluation, seven animals of this group showed a similar pattern, establishing a standard of normality for histological rectal mucosa: Surface epithelial preserved; crypts of uniform length, diameter and perpendicular arrangement to the surface with acid mucins strongly dominated over neutral mucins in the goblet cell population; intraepithelial lymphocytes in the surface of the epithelium with sparse population of approximately 15 cells per stretch of 100 epithelial cells; sparse individual lymphocytes, plasma cells and eosinophils infiltrating the lamina propria and submucosa. The other three horses in this group had an increase in the intensity of inflammatory cells (mild to moderate in intensity of lymphocytes and plasma cells in the lamina propria and submucosa, and moderate intensity of eosinophils in the submucosa). The horses in group 2, all with colic syndrome, showed the following pathological changes: simple lymphocyticplasmacytic proctitis (4/7) and eosinophilic proctitis (1/7). In group 3 (12 horses with chronic diarrhea and three with progressive weight loss), only one animal showed rectal mucosa with normal histology. It was observed in the other animals: simple lymphocytic-plasmacytic proctitis (6/15), erosive proctitis (3/15), lymphocyticplasmacytic proctitis with increased neutrophils (2/15), eosinophilic proctitis (2/15), lymphocytic-plasmacytic proctitis with increased neutrophils and eosinophils (1/15) and atypical lymphocytes infiltration/lymphoma (1/15). It was concluded that: the rectal biopsy technique evaluated is effective and safe; although some histological changes can be observed in the rectal mucosa of clinically healthy horses, whether or not caused by rectal palpation, there is a normal range that should be used to the evaluation of horses with gastrointestinal disorders; only in some cases the histological changes found in the rectal mucosa in horses allow a definitive diagnosis, but they can lead to a diagnostic logic in others, which is an important complementary test to be indicated in cases of horses with nonspecific gastrointestinal disturbances.

O objetivo deste estudo foi investigar a qualidade de vida do paciente com estoma intestinal secundário ao câncer cólon-retal na cidade de Aracaju-Se. Trata-se de estudo descritivo-exploratório, na vertente quantitativa, utilizando-se um instrumento contendo três partes, dados sócio-demográficos e clínicos, itens referentes à Escala de Qualidade de Vida de Flanagan (EQVF), e EORTC-QLQ-C-30. A amostra constou de 18 pacientes atendidos no Centro de Oncologia Dr Oswaldo Leite, localizado na cidade de Aracaju – Sergipe no período de janeiro a dezembro de 2005. Os instrumentos mostraram propriedades psicométricas satisfatórias quanto à consistência interna e validade do construto. Quanto às características sócio-demográficas e clínicas, 50% eram do sexo feminino, e 50% masculino. A média de idade foi de 51,3 anos. Quanto à localização do tumor, 38,9% tumor de reto, seguida de cólon-retal 33,3% e cólon 27,8%. 83,3% apresentavam metástase e 16,7% não apresentavam. Em relação ao tipo de estoma, 72,2% tinham colostomia definitiva e 27,8% colostomia provisória. 77,8% dos pacientes apresentaram menos de um ano de estoma e 22,2% mais de um ano de estoma. A análise de qualidade de vida da amostra mostra para EQVF média de 52,3 (DP=1,40) para EQVF Geral. Para EORTC QLQ-C30, a média estado geral de saúde foi de 35,64 (DP=12,39). Foram estatisticamente significativos os resultados obtidos nas escalas: relações com outras pessoas, atividades sociais e desenvolvimento pessoal e realização. Pacientes com menos de um ano de estoma, apresentam maior atividade social,desenvolvimento pessoal e realização do que aqueles com mais de um ano de estoma. Foram estatisticamente significativas as escalas: função física, dor, estado geral de saúde, dificuldades financeiras, dispnéia, fadiga, náusea e vômito, constipação e função emocional. A função física teve como variável estatisticamente significante o estado civil, com maior média entre pessoas casadas, assim como a escala dor, porém com maior média entre as pessoas viúvas. A função física entre as pessoas casadas foi maior. No sintoma dor, a presença desta, foi maior entre o grupo de pessoas viúvas e separadas. Na escala estado geral de saúde, foram estatisticamente significativos o sexo e complicações do estoma, com médias superiores entre aqueles do sexo masculino e com presença de complicações. Na escala dificuldades financeiras, a procedência e as complicações do estoma foram estatisticamente significantes. Com maiores médias entre aqueles da área rural e com presença de complicações do estoma. No sintoma dispnéia, a variável estatisticamente significante foi a presença ou não de metástase, com maior média entre aqueles com metástases. Já os sintomas fadiga, náusea e vômitos e constipação, apresentou como única variável estatisticamente significante o tempo de estoma. Na escala função emocional, a variável complicações do estoma foi estatisticamente significante, havendo maior média entre aqueles com presença de complicações do estoma. A escala relações com outras pessoas foi influenciada pelas variáveis: sexo, tempo de estoma e estado de origem, conforme cálculo de Regressão Linear Múltipla. As escalas função emocional, dispnéia, dificuldade financeira e estado geral de saúde tiveram influência das variáveis sexo, estado civil, estado de procedência, metástase, tempo de estoma e complicações. / The objective of this study was to investigate the quality of life of the patient with secondary intestinal estoma to the cancer colo-retal in the city of Aracaju-Se. This is an description-exploratory study, in the quantitative source, using an instrument contends three parts, given partner-demographic and clinical, itens referring to Scale of Quality of Life of Flanagan (EQVF), and EORTC QLQ-C30. The sample consisted of 18 patients taken care of in the Center of Oncologia Dr Oswaldo Leite located in the city of Aracaju - Sergipe in the period of January to December of 2005. The instruments had shown to satisfactory psicometrics properties such as the internal consistency and validity of construct. About the partner-demographic and clinical characteristics, 50% were of the feminine sex, and 50% masculine. The age average was 51,3 years. About the localization of tumor, 38,9% tumor of rectum, followed 33,3% colo-rectum and colon 27,8%. Metastase were presented by 83,3% and 16.7% didn’t present. In relation to the type of stoma, 72,2% had definitive colostomia and 27,8% provisory colostomia. 77,8% of the patients had presented less than 1 year of stoma and 22,2% more than 1 year of stoma. The analysis of quality of life of the sample shows for average EQVF of 52,3 (DP=1,40) for general EQVF. For EORTC QLQ-C30, the been average general of health was of 35,64 (DP=12,39). The scales had been statisticaly significant: social relations with other people, activities and personal development and accomplishment. Patients with less than one year of stoma, present greater social activity, personal development and accomplishment of that those with more than one year of stoma. The scales had been statistically significant: physical function, pain, general state of health, financial difficulties, dispneia, fatigue, nausea and vomit, constipation and emotional function. The physical function had as changeable statistically significant the civil state, with average greater between married people, as well as the scale pain, however with average greater between the people widowers. The physical function between the married people was bigger. In the symptom pain, the presence of this, it was bigger enters the group of people separate widowers and. In the scale general of health, the sex and complications of stoma had been statisticaly significant, with superior averages between those of the masculine sex and with presence of complications. In the scale financial difficulties, the origin and the complications of stoma they had been statisticaly significant. With average greaters between those of the agricultural area and with presence of complications of stoma. In the dispneia symptom, the statisticaly significant variable was the presence or not of metastase, with average greater it enters those with metastases. Already the symptoms fatigue, nausea and vomits and constipation, the stoma time presented as only statisticaly significant variable. In the scale emotional function, the variable complications of stoma was statisticaly significant, having bigger average between those with presence of complications of stoma. The scale Relations with other people was influenced by the variable: sex, time of stoma and state of origin, as calculation of Multiple Linear Regression. The scales emotional function, dispneia, financial difficulty and general state of health had had influence of the variable sex, civil state, state of origin, metastase, time of stoma and complications.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / SÃndrome de DefecaÃÃo ObstruÃda (SDO) pode ser produzida por alteraÃÃo funcional (anismus) ou por alteraÃÃes anatÃmicas, especialmente retocele e prolapso mucoso retal. VÃrias tÃcnicas cirÃrgicas vÃm sendo utilizadas no tratamento da retocele, com vias de acesso transvaginal, perineal ou transanal, aquelas mais utilizadas por ginecologistas e a transanal por coloproctologistas, isto em funÃÃo das pacientes recorrerem a especialistas diferentes, dependendo da predominÃncia dos sintomas, sendo apresentados resultados semelhantes. O objetivo deste estudo foi avaliar os resultados do tratamento cirÃrgico de pacientes portadoras de SDO por retocele e prolapso mucoso retal, submetidas à ressecÃÃo transanal da retocele e mucosectomia com um grampeador (procedimento âTRREMSâ. Foram avaliadas 35 pacientes, sendo uma nulÃpara e as demais multÃparas, com idade mÃdia de 47,5 Â10,83 anos (31 â 67), portadoras de retocele e prolapso mucoso retal interno, sendo 13 (37,10%) com grau II e 22 (62,90%) com grau III. Os parÃmetros avaliados foram os escores de defecaÃÃo obstruÃda e de constipaÃÃo, o Ãndice funcional para continÃncia assim como a avaliaÃÃo da dor, satisfaÃÃo com o resultado e com a funÃÃo sexual e realizaÃÃo de defecografia no prà e no pÃs-operatÃrio. O escore mÃdio de SDO de 10,63 no prÃ-operatÃrio reduziu significativamente para 2,91 no pÃs-operatÃrio (p = 0,000). O escore mÃdio de constipaÃÃo de 15,23 no prÃ-operatÃrio reduziu significativamente para 4,46 no pÃs-operatÃrio (p = 0,000). O Ãndice funcional mÃdio para continÃncia, de 2,77 no prÃ-operatÃrio reduziu significativamente para 1,71 no pÃs-operatÃrio (p = 0,000). A dor no primeiro dia pÃs-operatÃrio, avaliada atravÃs da escala visual analÃgica (EVA) apresentou valor mÃdio de 5,23 reduzindo para 1,20 no oitavo dia (p = 0,000). A satisfaÃÃo com o resultado do tratamento, avaliada tambÃm atravÃs da EVA, ao final do primeiro mÃs foi 79,97, no terceiro 86,54, no sexto 87,65 e no dÃcimo segundo 88,06. TambÃm se obteve elevaÃÃo significativa, entre os valores mÃdios de 42,91 no prÃ-operatÃrio e 70,41 no sexto mÃs de pÃs-operatÃrio, para a satisfaÃÃo sexual avaliada atravÃs da EVA (p = 0,000). A defecografia demonstrou reduÃÃo significativa do tamanho mÃdio da retocele de 19,23 mm  8,84 (3 â 42) para 6,68 mm  3,65 (0 â 17) na fase de repouso e de 34,89 mm  12,30 (20 â 70) para 10,94 mm  5,97 (0 â 25) na fase evacuatÃria quando comparado o prà com o pÃs-operatÃrio (p = 0,000) (P=0,000) respectivamente. Procedimento âTRREMSâ à uma tÃcnica segura, eficiente e produziu resultados anatÃmicos e funcionais satisfatÃrios e nÃveis reduzidos de complicaÃÃes pÃs-operatÃrias / Obstructed defecation syndrome (ODS) can be induced by functional changes (anismus) or anatomical abnormalities, especially rectocele and rectal mucosal prolapse (RMP). Several surgical techniques with transvaginal, perineal or transanal access have been used in the treatment of rectocele. The first two are more commonly used by gynecologists, the last one is favored by proctologists. Depending on the prevalence of symptoms, patients may go to either specialist with the same result. The objective of the present study was to make a clinical and functional evaluation of patients submitted to the TRREMS procedure (transanal repair of rectocele and rectal mucosectomy with a single circular stapler) as treatment for ODS caused by rectocele and RMP. The study included 35 female patients (34 of whom multiparous) aged 47.5Â10.83 years (31â67) diagnosed with ODS caused by RMP-associated rectocele grade II (n=13; 37.1%) or grade III (n=22; 62.9%). The study parameters included SDO and constipation scores, functional continence index, sexual function and treatment outcome satisfaction and pre- and postoperative defecographic measures. The average preoperative ODS score (10.63) was significantly reduced after surgery (2.91) (p=0.000). The average constipation score fell from 15.23 to 4.46 (p=0.000). The average functional continence score decreased from 2.77 to 1.71 (p=0.000). Between the first and the eighth postoperative day, the average visual analog scale pain score fell from 5.23 to 1.20 (p=0.000). Using the same scale, satisfaction with the treatment outcome was 79.97, 86.54, 87.65 and 88.06 at 1, 3, 6 and 12 months, respectively, and the average sexual function satisfaction was 42.91 (19â70) and 70.41 (39â97) before and after surgery, respectively (p=0.000). On defecography, average reductions in rectocele size were from 19.23Â8.84 mm (3â42) to 6.68Â3.65 mm (0â17) at rest and from 34.89Â12.30 mm (20â70) to 10.94Â5.97 mm (0â25) during evacuation (both p=0.000). The TRREMS procedure is a safe, efficient technique associated with satisfactory anatomical and functional results and reduced levels of postoperative pain and complications.

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Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-01-26T13:56:45Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_AvaliacaoPotencialBiotecnologico.pdf: 1386641 bytes, checksum: 94f8b0196b1a33ca4a9d5eec8af30944 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-01-27T13:26:30Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_AvaliacaoPotencialBiotecnologico.pdf: 1386641 bytes, checksum: 94f8b0196b1a33ca4a9d5eec8af30944 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-27T13:26:30Z (GMT). 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A avaliação da citotoxicidade frente a 5 linhagens tumorais e uma normal, revelou que o extrato teve ação citotóxica em linhagens de câncer coloretal (HCT-116 e HT-29), já os limonoides foram citotóxicos para câncer colorretal (HCT-116) e melanoma (SKMEL-19). Diante desses resultados, foram selecionados o limonoide L3 e a linhagem HCT-116 para avaliação do mecanismo de ação, assim como a linhagem HT-29, que possui o gene TP53 mutado para comparação do possível mecanismo de ação do composto, haja vista que foi menos sensível a L3. Além disso, L3 se mostrou mais seletiva para células tumorais. Nenhum dos compostos causou hemólise em eritrócitos de camundongos. Para avaliação da ação antiproliferativa de L3, foi realizado o ensaio clonogênico, onde nas duas linhagens houve significativa redução de colônias, no entanto essa redução foi mais expressiva em HCT-116. O composto L3 também causou morte por apoptose de maneira dose-dependente nas linhagens, onde o número de células em processo de apoptose foi maior na HCT-116. Para avaliação de dano ao DNA, foi realizado o ensaio do cometa, o qual demonstrou que L3 causa dano no DNA das duas linhagens, com índice de dano maior na HCT-116. A avaliação da distribuição de células pelo ciclo celular após tratamento com L3 mostrou que houve bloqueio do ciclo na fase G2/M, principalmente na HCT-116 (45% das células). A partir desses dados, foi realizado um estudo de genes implicados nessa fase do ciclo, a partir da análise de suas expressões por PCR-RT. O gene ATM, o qual é ativado mediante a danos no DNA, ativa o CHK-2 que por sua vez fosforila p53. p53 pode ativar a transcrição de p21, o qual desencadeia parado ciclo celular, ou ativar vias de morte celular. Neste trabalho, foi verificado aumento da expressão dos genes ATM, CHK-2, TP53, ARF de maneira dose dependente nas duas linhagens, sendo essa expressão foi maior em células da linhagem HCT-116. A expressão de p21 foi aumentada em HCT-116, ao passo que em HT-29 diminuiu, isso se deve ao fato que HT-29 possuir o gene TP53 mutante, logo sua proteína não funciona corretamente. Quanto a via da apoptose, foi avaliado o gene da caspase-3 e o gene antiapoptótico BCL-2. Houve aumento na expressão de caspase-3, principalmente em HCT-116, e diminuição de BCL-2. Esses resultados sugerem que L3 possa estar causando danos ao DNA das células, desencadeando uma via de sinalização celular dependente de p53. Para avaliação da toxicidade do extrato de S. macrophylla, foi realizado o teste de toxicologia aguda em camundongos, onde o extrato não causou nenhuma alteração nos parâmetros fisiológicos dos animais. Assim como, o teste de claustogenicidade (micronúcleo) também mostrou que o extrato não é mutagênico em células da medula óssea de camundongos. / Swietenia macrophylla (mahogany) is a species of plant widely known for its therapeutic potential. The main constituents isolated extracts of this plant are structures known as limonoids. The limonoids also have several biological activities, among them, antitumor activity. The aim of this study was to evaluate the antitumor potential of the extract and limonoid obtained from leaves of S. macrophylla in cancer cell lines. Cytotoxicity to 5 cancer cell lines and normal revealed that the extract had cytotoxic effect in colorectal cancer cell lines (HCT-116 and HT-29), as the limonoids were cytotoxic for colorectal cancer (HCT-116) and melanoma (SKMEL-19). Given these results, we selected the limonoid L3 and HCT-116 cell line to evaluate the mechanism of action, as well as the HT-29 lineage, which has the TP53 gene mutated for comparison as possible of the compound mechanism of action, once it was less sensitive to L3. Moreover, L3 showed more selective for tumor cells. None of the compounds caused hemolysis of erythrocytes in mice. To evaluate the antiproliferative action of L3, the clonogenic assay was performed, where the two lines there was a significant reduction of colonies, however this reduction was more significant in HCT-116. The L3 compound also has caused death by apoptosis in a dose-dependent manner in the lines, where the number of cells in apoptosis was higher in HCT-116. To evaluate DNA damage, it was held the comet assay, which showed that L3 cause damage to the DNA of the two cancer cell lines, with greater damage index in HCT-116. The assessment of cell cycle distribution of cells after treatment with L3 showed that there was blocking the cycle at the G2 / M phase, mainly in HCT-116 (45% of the cells). From these data, it conducted a study of genes involved in this phase of the cycle, from analysis of their expression by RT-PCR. The ATM gene, which is activated by DNA damage activates the CHK-2 which in turn phosphorylates p53 protein. p53 protein can activate the transcription of p21 gene, which triggers cell cycle stopped, or activate cell death pathways. In this study, we found increased expression of genes ATM, CHK-2, TP53, ARF in a dose dependent in both cacer cell lines, and this expression was higher in HCT-116 cell line. The expression of p21 was increased in HCT-116, while in HT-29 decreased, this is due to the fact that HT-29 possess the mutant TP53 gene, then your protein does not work properly. As the path of apoptosis was evaluated caspase-3 gene and the anti-apoptotic gene BCL-2. There was increase in the expression of caspase-3 mainly in HCT-116 and decrease of BCL-2. These results suggest that L3 may be causing damage to the DNA of cells, triggering a cellular signaling pathway dependent on p53. To evaluate the toxicity of S. macrophylla extract, it was held the acute toxicology testing in mice, where the extract did not cause any changes in the physiological parameters of animals. As the claustogenicidade test (micronucleus) also showed that the extract is not mutagenic in the mouse bone marrow cells.

Este estudo teve como objetivo avaliar a influência de recursos de climatização, ventilação e nebulização sobre a fisiologia e o comportamento de vacas Holandesas alojadas em free-stall, durante o verão do sudeste brasileiro. Foram utilizadas 20 vacas Holandesas lactantes em duas fases experimentais. No experimento I, foram avaliados os efeitos do tratamento ventilação e nebulização e, no experimento II, analisou-se a influência da ventilação isolada. Os parâmetros ambientais registrados foram temperatura do ar, umidade relativa, temperatura de globo negro e pluviosidade, e posteriormente, foi calculado o índice do globo negro e umidade. Os parâmetros fisiológicos avaliados foram temperatura retal, temperatura caudal e freqüência respiratória. Os parâmetros comportamentais observados foram atividade, postura, posição e localização dos animais dentro da instalação. Para obtenção das estatísticas descritivas para as variáveis fisiológicas e comportamentais foi utilizada metodologia de quadrados mínimos. As variáveis fisiológicas para ambas fases experimentais não apresentaram diferenças e indicaram conforto térmico. As respostas comportamentais indicaram que o estudo do comportamento é uma ferramenta importante na avaliação do bem-estar dos animais. O sistema de climatização, com ventilação e nebulização, associadas ou não, podem proporcionar um ambiente de maior conforto, determinando alterações comportamentais. / This studys main goal was to evaluate the influence of resources of climatization, fun and mist, on the physiology and the behaviour of Holstein cows housed in free-stall, during Brazilian southeast summer. Was used twenty Holstein milking cows in two experiments. In Trial one the effects of fun and mist were evaluated and in Trial II the influence of fun was analyzed. The environmental parameters registered were air temperature, relative humidity, black globe temperature and rain precipitation, and subsequently was computed the black globe temperature and humidity index. The physiological parameters evaluated were rectal temperature, tail basis temperature and respiratory rate. The behavioral parameters observed were activity, posture and animal position inside of stall. The obtainment of descriptive statistical for the physiological and behavioral variables was used the minimum square method. There were no differences in the physiological variables for both phases indicating thermal comfort. The behavioral responses indicated that the behaviour study is an important tool to evaluate the animal welfare. The climatization system with fun, with or without mist, can to promote an environment with more comfort, determining behavioral changes.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-04-10T14:53:50Z No. of bitstreams: 1 Erica Carla Lopes da Silva.pdf: 203269 bytes, checksum: ab5a02b245da76e627d8cedac1a4bc09 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-10T14:53:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erica Carla Lopes da Silva.pdf: 203269 bytes, checksum: ab5a02b245da76e627d8cedac1a4bc09 (MD5) Previous issue date: 2008-02-26 / The research was carried out at “Pedra Preta” farm, Itambé-PE, and aimed to analyze milk production, milk composition, fatty acid profile,physiological parameters, and behavior of Pitangueiras cows under grazing conditions and submitted to the presence or absence of shade in the paddock. The environment was monitored daily using a meteorological station at the research site. A complete randomized experimental design was used and 20 lactating cows were allocated inpaddocks with shade or without shade. Milk daily productivity did not differ for cow s submitted to the presence (9.02 kg/cow) or absence of shade (9.03 kg/cow). There was no difference also in the fatty acid profile and milk composition. Cows with shade available stayed under the shade during periods where thermal comfort index was greater. Physiological responses did not show significant differences, however, differences were observed between morning and afternoon periods, with greater values observed for the afternoon period. The use of artificial shade favoured animals’ weight gain. / O trabalho foi realizado na fazenda Pedra Preta, Itambé-PE, e foram avaliados: produção e composição do leite, perfil dos ácidos graxos, parâmetros fisiológicos e atividades comportamentais de vacas da raça Pitangueiras, submetidas à condição de pastejo com e sem acesso à sombra. O ambiente foi monitorado diariamente por intermédio de uma estação meteorológica no local do estudo. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, onde 20 vacas em lactação foram divididas em piquetes nos tratamentos com e sem acesso a sombra. Os valores da produção de leite não apresentaram diferenças significativas, para os tratamentos com e sem acesso a sombra (9,02 e 9,03 kg, respectivamente). Não houve diferença significativa no perfil dos ácidos graxos e composição do leite. Os animais com acesso a sombra buscaram o sombrite nos horários onde os índices de conforto térmico foram mais elevados. As variáveis fisiológicas não apresentaram diferenças significativas, houve variação com relação aos turnos, à tarde os valores obtidos foram mais elevados em comparação ao turno da manhã. O uso do sombrite foi favorável em relação ao ganho de peso dos animais.

Este estudo teve como objetivo avaliar a influência de recursos de climatização, ventilação e nebulização sobre a fisiologia e o comportamento de vacas Holandesas alojadas em free-stall, durante o verão do sudeste brasileiro. Foram utilizadas 20 vacas Holandesas lactantes em duas fases experimentais. No experimento I, foram avaliados os efeitos do tratamento ventilação e nebulização e, no experimento II, analisou-se a influência da ventilação isolada. Os parâmetros ambientais registrados foram temperatura do ar, umidade relativa, temperatura de globo negro e pluviosidade, e posteriormente, foi calculado o índice do globo negro e umidade. Os parâmetros fisiológicos avaliados foram temperatura retal, temperatura caudal e freqüência respiratória. Os parâmetros comportamentais observados foram atividade, postura, posição e localização dos animais dentro da instalação. Para obtenção das estatísticas descritivas para as variáveis fisiológicas e comportamentais foi utilizada metodologia de quadrados mínimos. As variáveis fisiológicas para ambas fases experimentais não apresentaram diferenças e indicaram conforto térmico. As respostas comportamentais indicaram que o estudo do comportamento é uma ferramenta importante na avaliação do bem-estar dos animais. O sistema de climatização, com ventilação e nebulização, associadas ou não, podem proporcionar um ambiente de maior conforto, determinando alterações comportamentais. / This studys main goal was to evaluate the influence of resources of climatization, fun and mist, on the physiology and the behaviour of Holstein cows housed in free-stall, during Brazilian southeast summer. Was used twenty Holstein milking cows in two experiments. In Trial one the effects of fun and mist were evaluated and in Trial II the influence of fun was analyzed. The environmental parameters registered were air temperature, relative humidity, black globe temperature and rain precipitation, and subsequently was computed the black globe temperature and humidity index. The physiological parameters evaluated were rectal temperature, tail basis temperature and respiratory rate. The behavioral parameters observed were activity, posture and animal position inside of stall. The obtainment of descriptive statistical for the physiological and behavioral variables was used the minimum square method. There were no differences in the physiological variables for both phases indicating thermal comfort. The behavioral responses indicated that the behaviour study is an important tool to evaluate the animal welfare. The climatization system with fun, with or without mist, can to promote an environment with more comfort, determining behavioral changes.

Septinas constituem uma família de proteínas de ligação a GTP que foram inicialmente identificadas em levedura Saccharomyces cerevisiae, mas também estão presentes em outros eucariotos com exceção de plantas. Septinas são purificadas de leveduras, Drosophila e cérebros de mamíferos na forma de filamentos, porém o mecanismo através do qual acorre a formação destes filamentos ainda não é muito bem compreendido. Septinas são constituídas de três regiões principais: um N-terminal variável, um domínio central GTPase altamente conservado e um domínio coiled-coil C-terminal. O gene SEPT4 foi identificado por M. Tanaka e colaboradores a partir do cDNA de cérebro humano e apresentou duas distintas transcrições: Bradeiona ? e ?. Interessantemente, além de cérebro e coração, as proteínas Bradeiona Α e Β. são detectadas somente em câncer do cólon, reto, próstata e melanoma maligno. Neste trabalho, o gene da proteína Bradeiona Β foi subclonado em um vetor de expressão bacteriano, produzido em E. coli e purificado com sucesso. O espectro de dicroísmo circular (CD) mostrou o perfil característico de proteínas com hélices a na estrutura secundária. Resultados de cromatografia de exclusão molecular (SEC) e espalhamento dinâmico de luz (DLS) indicam que a septina Bradeina foi produzida na forma de um estável oligômero com características monodispersivas, que foi subseqüentemente cristalizado em PEG6000. A atividade GTPase da Bradeiona Β foi comprovada através da técnica de eletroforese capilar (CE), mostrando-se absolutamente dependente de íons Mg2+. Inibição da atividade GTPase foi verificada em altas concentrações de Mg2+ (maiores que 5 mM). Com a finalidade de caracterizar os domínios preditos da Bradeiona Β (Fragmento Conservado e domínio GTPase), essas regiões foram previamente definidas, expressas em E. cozi e purificadas com sucesso. Resultados de CD, SEC, espectroscopia de fluorescência e NMR-600MHz indicam que o FC foi produzido na forma de um estável monômero com pouca estrutura secundária regular. Resultados de DLS e CD indicam que a fusão 6xHis-DGTPase foi produzida na forma de um oligômero com a presença de hélices a na estrutura secundária. A fusão 6xHis-DGTPase mostrou-se instável a altas concentrações na ausência de imidazol. A atividade GTPase da fusão GST+DGTPase foi comprovada, similarmente a Bradeiona , através da técnica de CE. Novamente, verificou-se dependência de íons Mg2+ (para a atividade catalítica) e inibição em altas concentrações de Mg2+. A fusão GST+DGTPase também foi capaz de hidrolisar ATP. Espera-se que as informações relatadas neste estudo proporcionem um alicerce para estudos estruturais/funcionais futuros das proteínas Bradeiona Α e Βoutras septinas. / Septins form a class of eukaryoyic guanine nucleotide-binding proteins that were first identified in budding yeast. Septins purified from yeast, Drosophila and mammalian brain form filaments, however the mechanism by which the filaments assemble is unclear. Septins have a highly conserved structure, which includes a central GTP-binding domain, a variable N-terminal region, and most septins also contain a coiled coil domain at the Cterminus. Bradeion p is one of the splice variants of the human septin gene, SEPT4, recently isolated by expression screening of an adult human brain cDNA library. The Bradeion gene resides at 17q23, and has been shown to present specific expression in both human colorectal cancer, urologic cancers and malignant melanoma. In order to characterize the GTPase activity of Bradeion Β , the protein was successfully expressed in E. coli and purified. The recombinant protein was characterized by circular dichroism (CD), dynamic light scattering (DLS) and a novel non-radioactive enzyme assay, which utilizes capillary electrophoresis (EC) to monitor GTP hydrolysis. The CD spectrum exhibited the typical shape characteristic of the presence of helical elements of secondary structure and the DLS pattern was indicative of a monodisperse solution, which was readily crystallized in the presence of PEG6000. GTP hydrolysis was shown to be Mg2+ dependent within the low millimolar range but at 5 mM was inhibitory. In order to characterize the predicted domains of Bradeion Β, these defined regions were successfully expressed in E. cozi and purified. The CD spectrum of CF exhibited the shape typically found for non-regular structure. The results of fluorescence spectroscopy, gel filtration (SEC) and NMR-600MHz also corroborate with the CD results indicating an irregular structure. The fusion protein 6xHis-DGTPase exhibited a CD spectrum with the typical shape characteristic of the presence of helical elements but was show to be instable at high concentrations in the absence of imidazole. To characterize the GTPase activity of the fusion protein GST+DGTPase, the CE technique was used to monitor GTP hydrolysis. Analysis by CE showed that GST+DGTPase was functional, since both GTP and ATP hydrolysis was observed in a Mg2+ dependent manner. This work provides novel approaches, which should aid in the fbture study of the structure and fùnction of Bradeion Α e Β, others septins and related GTPases.