A família Rubiaceae se caracteriza por produzir uma grande variedade de metabólitos secundários. Alcalóides, triterpenos iridóides e antraquinonas destacam-se entre os produtos naturais de maior ocorrência nas rubiaceas. Espécies desta família ocorrem com frequência no cerrado brasileiro, sendo que o gênero Alibertia, não havia sido estudado até recentemente. O presente trabalho, que é o primeiro com a espécie Alibertia edulis A. Rich, descreve o isolamento, identificação e determinação estrutural de triterpenos presentes nas folhas de um espécimen coletado nas proximidades de Campo Grande, Mato Grosso do Sul. O estudo da fração clorofórmica do extrato etanólico mostrou a ocorrência predominante de triterpenos. Foram isolados através dos métodos cromatográficos usuais (coluna e placa preparativa), os pares oleanano-ursano urs-12-en-3β,28-diol e olean-12-en-3β,28-diol; 3β-hidroxiurs-12-en-28-óico e 3β-hidroxiolean-12-en-28-óico; 3β,23-diidroxiurs-12-en-28-óico e 3β,23-diidroxiolean-12-en-28-óico, que foram identificados através dos espectros de RMN de 13C e 1H. A mistura dos ésteres metílicos dos ácidos 3β, 19α,23,24-tetraidroxiurs-12-en-28-óico e 3β, 19α,23,24-tetraidroxiolean-12-en-28-óico também foi isolada desta mesma fração. Após ser acetilada, esta mistura foi submetida à cromatografia líquida de alta eficiência, o que possibilitou a separação dos seus componentes. Destes, o triterpeno com esqueleto tipo ursano foi identificado pelos seus espectros de RMN de 13C e 1H. Como não foi encontrado registro na literatura do triterpeno com esqueleto oleanano, a determinação estrutural deste foi feita por comparação com os dados de RMN do éster metílico do ácido 3β,19α,23,24-tetraidroxiur-12-en-28-óico, associado a uma análise do espectro bidimensional 1H-1H (COSY). Do extrato hexânico de A. edulis também foi isolada uma mistura, constituída por α e β-amirina, além de fitol. / The Rubiaceae family affords as secondary metabolites, mainly alkaloids, triterpenes and iridoids. Species of this family are spread in the region of Brazilian \"cerrado\". The genus Alibertia has not been studied until recently. This work, the first one with the specie Alibertia. edulis A. Rich, reports the isolation, identification and structural determination of the triterpenes that occurred in the leaves of a specimen colleted in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil. The chloroform fraction of the ethanolic extract shows the predominance of triterpene compounds. From this fraction, we isolate, by means of chromatographic procedures, the ursane-oleanane pairs: 3β,28-dihydroxy-urs-12-en and 3β,28-dihydroxy-olean-12-en; 3β-hydroxyurs-12-en-28-oic and 3β-hydroxyolean-12-en-28-oic; 3β,23-dihydroxyurs-12-en-28-oic and 3β,23-dihydroxyolean-12-en-28-oic; 3β,19α,23,24-tetrahydroxyurs-12-en-28-oic and 3β,19α,23,24-tetrahydroxyolean-12-en-28-oic. The last compound is a new natural product and its structure was determined based on methyl-triacetylated derivative. From the hexanic extract we isolated α and β-amyrin and phytol.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2017-07-25T12:53:59Z No. of bitstreams: 2 Tese - Aline Pereira Moraes - 2017.pdf: 5958230 bytes, checksum: 799ef005b7ec97bfd8fd06e0e7f3a36b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-07-26T11:58:55Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Aline Pereira Moraes - 2017.pdf: 5958230 bytes, checksum: 799ef005b7ec97bfd8fd06e0e7f3a36b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-26T11:58:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Aline Pereira Moraes - 2017.pdf: 5958230 bytes, checksum: 799ef005b7ec97bfd8fd06e0e7f3a36b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-04-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Palicourea and Psychotria (Rubiaceae) are known for the presence of compounds with potential biological activity, such as the indole alkaloids, flavonoids and norisoprenoids. In order to increase the chemical knowledge of Palicourea species, the phytochemical study of the aerial parts of Palicourea officinalis was carried out for the first time, through the isolation by chromatography and structural elucidation of the compounds by NMR and mass spectrometry. The following secondary metabolites were identified: the novel alkaloid 18-epi-brachycerine; the norisoprenoids: guettardionoside, 3-oxo--ionol 9-O--D-apiofuranosyl-(1®6)--D-glucopyranoside, vomifoliol 9-O--D - apiofuranosyl-(1®6)--D-glucopyranoside and 7,8-dihydro-vomifolol 9-O--D-apiofuranosyl-(1®6)--D-glucopyranoside; the lignan syringaresinol--D-glucoside; the pyrazines 2,5-deoxyfructosazine, 2,6-deoxyfructosazine and fructosazine; the flavonoids quercetin 3-O-sophoroside and kampferol 3-O-sophoroside; 3-caffeoyl and 4-caffeoylquinic acids; feruloylquinic acids; salicylic acid; coumarin scopoletin; besides ursolic and oleanolic triterpenes acids and glycosylated sitesterol and stigmasterol steroids. In addition, for the first time, the indirect and direct DESI-MSI techniques were applied in the study of the spatial distribution of alkaloids in the leaves of Palicourea coriacea and Psychotria prunifolia. The indirect approach was applied successfully and showed distinct distribution patterns of the alkaloids detected. The image data were confirmed by LC-MS. / Palicourea e Psychotria (Rubiaceae) são gêneros conhecidos pela presença de compostos com potencial atividade biológica, tais como os alcaloides indólicos, flavonoides e norisoprenoides. Com o objetivo de ampliar o conhecimento químico de espécies de Palicourea, foi realizado pela primeira vez o estudo fitoquímico das partes aéreas de P. officinalis, através do isolamento por cromatografia e elucidação estrutural dos compostos por RMN e espectrometria de massas. Os seguintes metabólitos secundários foram isolados e identificados: o alcaloide inédito 18-epi-braquicerina; os norisoprenoides: guettardionosídeo e 3-oxo--ionol 9-O--D-apiofuranosil(1”®6’)- -D-glicopiranosídeo e a mistura vomifoliol 9-glicopiranosídeo, vomifoliol 9-O--D-glucopiranosil-(1®6)--D-apiofuranosídeo e 7,8-diidro-vomifoliol 9-O--D-glucopiranosil-(1®6)--D-apiofuranosídeo; a lignana siringaresinol-4’--D-glicosídeo; a mistura de pirazinas 2,5-desoxifructosazina, 2,6-desoxifructosazina e fructosazina; os flavonoides quercetina 3-O-soforosídeo e canferol 3-O-soforosídeo; os ácidos clorogênicos 3-cafeoil e 4-cafeoil-quínicos; uma mistura de ácidos feruloil-quínicos; ácido salicílico; a cumarina escopoletina; além das misturas dos triterpenos ácidos ursólico e oleanólico e dos esteroides sitosterol e estigmasterol glicosilados. Além disso, pela primeira vez, as técnicas de produção de imagem química por DESI-MS direto e indireto foram aplicadas no estudo da distribuição espacial dos alcaloides nas folhas de Palicourea coriacea e Psychotria prunifolia. O método indireto apresentou melhores resultados, com distintos padrões de distribuição dos alcaloides detectados. Os dados da imagem foram confirmados por LC-MS.

Ho, Wing Shan. / Thesis (M.Phil.)--Chinese University of Hong Kong, 2008. / Includes bibliographical references (leaves 116-137). / Abstracts in English and Chinese. / Acknowledgements --- p.i / Abstract --- p.ii / Abstract (Chinese Version) --- p.v / Table of Contents --- p.vii / List of Figures --- p.x / List of Tables --- p.xi / List of Abbreviations --- p.xii / Chapter Chapter One: --- General Introduction / Chapter 1.1 --- Respiratory Syncytial Virus (RSV) --- p.1 / Chapter 1.2 --- RSV biology --- p.2 / Chapter 1.3 --- RSV strains --- p.10 / Chapter 1.4 --- RSV pathogenesis and host antiviral responses --- p.11 / Chapter 1.5 --- Prevention of RSV infection --- p.13 / Chapter 1.5.1 --- Vaccines --- p.13 / Chapter 1.5.2 --- Passive anti-RSV antibodies --- p.17 / Chapter 1.6 --- Treatment for RSV infections --- p.20 / Chapter 1.6.1 --- Ribavirin (Virasole®) --- p.20 / Chapter 1.6.2 --- Other antiviral strategies --- p.21 / Chapter 1.6.2.1 --- Attachment inhibitors --- p.22 / Chapter 1.6.2.2 --- Fusion inhibitors --- p.23 / Chapter 1.6.2.3 --- Replication inhibitors --- p.25 / Chapter 1.6.2.4 --- Ethnobotanic medicines --- p.28 / Chapter 1.6.2.4.1 --- Anti-RSV medicinal plant components --- p.31 / Chapter 1.6.2.4.1.1 --- Phenolics and polyphenols --- p.31 / Chapter 1.6.2.4.1.2 --- Flavonoids --- p.32 / Chapter 1.6.2.4.1.3 --- Terpenoids and essential oils --- p.34 / Chapter 1.6.2.4.1.4 --- Lectins --- p.34 / Chapter 1.6.2.4.1.4.1 --- General introduction to lectins --- p.34 / Chapter 1.6.2.4.1.4.2 --- Historical aspects of lectins --- p.35 / Chapter 1.6.2.4.1.4.3 --- Applications of lectins --- p.36 / Chapter 1.7 --- Objectives of the project --- p.37 / Chapter Chapter Two: --- Screening of medicinal plants and phytochemicals for antiviral activity against RSV / Chapter 2.1 --- Introduction --- p.39 / Chapter 2.2 --- Materials and methods --- p.47 / Chapter 2.2.1 --- Medicinal plants and phytochemicals --- p.47 / Chapter 2.2.2 --- Plant extracts preparation --- p.48 / Chapter 2.2.2.1 --- Aqueous extracts --- p.48 / Chapter 2.2.2.2 --- Ethanol extracts --- p.48 / Chapter 2.2.3 --- Cell and virus --- p.49 / Chapter 2.2.4 --- Endpoint titration of RSV infectivity --- p.50 / Chapter 2.2.5 --- Cytotoxicity test --- p.50 / Chapter 2.2.6 --- Antiviral assay --- p.52 / Chapter 2.3 --- Results --- p.53 / Chapter 2.4 --- Discussion --- p.58 / Chapter Chapter Three: --- "Mechanistic studies of anti-RSV actions of various fractions of Adina pilulifera, and daphnoretin, a purified compound from Wikstroemia indica" / Chapter 3.1 --- Introduction --- p.60 / Chapter 3.2 --- Materials and methods --- p.65 / Chapter 3.2.1 --- Fractionation of A. pilulifera ethanol extract --- p.65 / Chapter 3.2.2 --- Cell and virus --- p.65 / Chapter 3.2.3 --- Cytotoxicity test --- p.65 / Chapter 3.2.4 --- Endpoint titration of RSV by TCID50 method --- p.66 / Chapter 3.2.5 --- Antiviral study by CPE reduction assay --- p.66 / Chapter 3.2.6 --- Endpoint titration of RSV by plaque assay --- p.66 / Chapter 3.2.7 --- Antiviral study by plaque reduction assay --- p.67 / Chapter 3.2.8 --- Mode of antiviral action study --- p.68 / Chapter 3.3 --- Results --- p.70 / Chapter 3.4 --- Discussion --- p.76 / Chapter Chapter Four: --- Antiviral activity of Narcissus tazetta proteins / Chapter 4.1 --- Introduction --- p.81 / Chapter 4.2 --- Materials and methods --- p.88 / Chapter 4.2.1 --- Crude proteins extraction from Narcissus tazetta cultivar --- p.88 / Chapter 4.2.2 --- Separation of proteins with affinity column --- p.88 / Chapter 4.2.3 --- Gel filtration of protein fractions on Superose column --- p.89 / Chapter 4.2.4 --- Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) --- p.89 / Chapter 4.2.5 --- Electroblotting and N-terminal amino acid sequence analysis --- p.90 / Chapter 4.2.6 --- Protein concentration determination --- p.90 / Chapter 4.2.7 --- Isolation and purification of N. tazetta lectin (NTL) --- p.91 / Chapter 4.2.8 --- Antiviral activities of N. tazetta proteins and NTL --- p.92 / Chapter 4.2.8.1 --- Cell and virus --- p.92 / Chapter 4.2.8.2 --- Cytotoxicity test --- p.92 / Chapter 4.2.8.3 --- Endpoint titration of RSV by TCID50 method --- p.92 / Chapter 4.2.8.4 --- Antiviral study by CPE reduction assay --- p.92 / Chapter 4.2.8.5 --- Endpoint titration of RSV by plaque assay --- p.92 / Chapter 4.2.8.6 --- Antiviral study by plaque reduction assay --- p.93 / Chapter 4.2.8.7 --- Mode of antiviral action study --- p.93 / Chapter 4.3 --- Results --- p.94 / Chapter 4.4 --- Discussion --- p.107 / Chapter Chapter Five: --- General Discussion and Conclusions --- p.111 / References --- p.116

This work describes the isolation of some chemical constituents from the extracts of leaves and stems of Guettarda grazielae M.R.V. Barbosa, guided by larvicidal, anticholinesterase and antioxidant activities. Furthermore, a review of the biological activities of extracts and substances described in species this genus, and a compilation of triterpenes reported in the Rubiaceae species was also made. The leaves and stems, after drying and grounded, were extracted by maceration with acetone and/or ethanol. The extracts were submitted to a liquid partition between MeOH-H2O 3:2 and solvents of different polarity (hexane, chloroform and ethyl acetate). The crude extracts, as well as the fractions from this procedure, were evaluated for their potential larvicidal (larvae of the 4th stage of Aedes aegypti), antioxidant (total phenols content and DPPH) and anticholinesterase. The hexane and EtOAc fractions from ethanol extract of the leaves and stem, respectively, were the most promising in larvicidal assays, LC50 131.73 ppm and LC50 58.18 ppm. In comparison with caffeine (standard), the crude acetone extract from the leaves, as well as some of its sub-fractions from filtering into the silica gel of the fractions in hexane and chloroform, were qualitatively effective in inhibiting the action of the enzyme acetylcholinesterase. On the other hand, in the antioxidants tests, MeOH-H2O from stem (347.75 ± 0.02 GAE/g) and EtOAc fractions from the leaves (298.03 ± 0002 GAE/g) exhibit higher phenolic content. Of these, only the EtOAc fraction showed moderately active (IC50 164.85 ± 2.76 μg/mL) against DPPH. The other fractions showed weak activity or were inactive. Some of the fractions from leaves and stems that were considered promising in these assays were investigated and led to the isolation and identification structural (NMR, including DEPT) of a phytosteroid (Sitostenone) and five triterpenes (Cicloartenone, 3β,19α,23- trihydroxy-urs-12-ene, 3β,6β,19α,23-tetrahydroxy-urs-12-en-28-oic acid, 3-O-β-Dglucopyranosylquinovic acid and ursolic acid), that in general will help to expand the chemical profile of the genus Guettarda as well as of the family Rubiaceae. The review of the triterpenes that occurs in the family Rubiaceae revealed that among all species investigated, it was isolated a total of 373 triterpenes with 12 different types of skeletons and being oleanane and ursane the most representatives. Regarding the genus Guettarda, the literature records the occurrence of 44 different compounds distributed in ten species, which alkaloids and triterpenes are the most abundant compounds. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente trabalho descreve o isolamento, monitorado pelas atividades larvicida, anticolinesterásica e antioxidante, de alguns dos constituintes químicos presentes em extratos das folhas e do caule de Guettarda grazielae M.R.V. Barbosa. Ademais, também foi efetuada uma revisão das atividades biológicas observadas para extratos e substâncias descritas em espécies deste gênero, bem como uma compilação dos triterpenos relatados em Rubiaceae. Folhas e caule, após secagem e trituração, foram extraídos através de maceração com acetona e/ou etanol. Os extratos obtidos foram então particionados entre MeOH-H2O 3:2 e solventes de diferentes polaridades (hexano, clorofórmio e acetato de etila). Os extratos brutos, bem como as frações provenientes deste procedimento, foram avaliados quanto ao potencial larvicida (larvas do 4º estádio de Aedes aegypti), anticolinesterásico e antioxidante (teor de fenóis totais e DPPH). As frações em hexano e em AcOEt, oriundas dos extratos em etanol das folhas e do caule foram as mais promissoras nos ensaios larvicidas (CL50 131,73 e 58,18 ppm, respectivamente). O extrato bruto em acetona das folhas, bem como algumas das suas subfrações provenientes de filtração em gel de sílica das frações em hexano e em clorofórmio, foram efetivas em inibir qualitativamente a ação da enzima acetilcolinesterase, quando comparados com a cafeína. Por outro lado, nos ensaios antioxidantes, as frações em MeOHH2O do caule (347,75 ± 0,02 EAG/g) e em AcOEt das folhas (298,03 ± 0,002 EAG/g) foram as mais ricas em compostos fenólicos. Destas, somente a fração em AcOEt foi moderadamente ativa (CI50 164,85 ± 2,76 μg/mL) frente ao DPPH. As demais frações apresentaram fraca atividade ou foram inativas. Algumas das frações das folhas e do caule, consideradas promissores nestes ensaios, foram investigadas e conduziram ao isolamento e identificação estrutural (RMN, incluindo DEPT) de um fitoesteróide (Sitostenona) e de cinco triterpenos (Cicloartenona, 3β,19α,23-triidroxi-urs-12-eno, ácido 3β,6β,19α,23-tetrahidroxi-urs-12-en- 28-óico, ácido 3-O-β-D-glicopiranosilquinóvico e ácido ursólico) que de um modo geral, irão contribuir para ampliar o perfil químico do gênero Guettarda, bem como da família Rubiaceae. O levantamento bibliográfico dos triterpenos que ocorrem na família Rubiaceae revelou que dentre as espécies até então investigadas, um total de 373 triterpenos com 12 diferentes tipos de esqueletos, sendo oleanano e ursano os mais representativos, foram até então isolados. Em relação ao gênero Guettarda, a literatura registra a ocorrência de 44 diferentes compostos distribuídos em dez espécies, sendo os alcalóides e os triterpenos os mais abundantes.

A família Rubiaceae se caracteriza por produzir uma grande variedade de metabólitos secundários. Alcalóides, triterpenos iridóides e antraquinonas destacam-se entre os produtos naturais de maior ocorrência nas rubiaceas. Espécies desta família ocorrem com frequência no cerrado brasileiro, sendo que o gênero Alibertia, não havia sido estudado até recentemente. O presente trabalho, que é o primeiro com a espécie Alibertia edulis A. Rich, descreve o isolamento, identificação e determinação estrutural de triterpenos presentes nas folhas de um espécimen coletado nas proximidades de Campo Grande, Mato Grosso do Sul. O estudo da fração clorofórmica do extrato etanólico mostrou a ocorrência predominante de triterpenos. Foram isolados através dos métodos cromatográficos usuais (coluna e placa preparativa), os pares oleanano-ursano urs-12-en-3β,28-diol e olean-12-en-3β,28-diol; 3β-hidroxiurs-12-en-28-óico e 3β-hidroxiolean-12-en-28-óico; 3β,23-diidroxiurs-12-en-28-óico e 3β,23-diidroxiolean-12-en-28-óico, que foram identificados através dos espectros de RMN de 13C e 1H. A mistura dos ésteres metílicos dos ácidos 3β, 19α,23,24-tetraidroxiurs-12-en-28-óico e 3β, 19α,23,24-tetraidroxiolean-12-en-28-óico também foi isolada desta mesma fração. Após ser acetilada, esta mistura foi submetida à cromatografia líquida de alta eficiência, o que possibilitou a separação dos seus componentes. Destes, o triterpeno com esqueleto tipo ursano foi identificado pelos seus espectros de RMN de 13C e 1H. Como não foi encontrado registro na literatura do triterpeno com esqueleto oleanano, a determinação estrutural deste foi feita por comparação com os dados de RMN do éster metílico do ácido 3β,19α,23,24-tetraidroxiur-12-en-28-óico, associado a uma análise do espectro bidimensional 1H-1H (COSY). Do extrato hexânico de A. edulis também foi isolada uma mistura, constituída por α e β-amirina, além de fitol. / The Rubiaceae family affords as secondary metabolites, mainly alkaloids, triterpenes and iridoids. Species of this family are spread in the region of Brazilian \"cerrado\". The genus Alibertia has not been studied until recently. This work, the first one with the specie Alibertia. edulis A. Rich, reports the isolation, identification and structural determination of the triterpenes that occurred in the leaves of a specimen colleted in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil. The chloroform fraction of the ethanolic extract shows the predominance of triterpene compounds. From this fraction, we isolate, by means of chromatographic procedures, the ursane-oleanane pairs: 3β,28-dihydroxy-urs-12-en and 3β,28-dihydroxy-olean-12-en; 3β-hydroxyurs-12-en-28-oic and 3β-hydroxyolean-12-en-28-oic; 3β,23-dihydroxyurs-12-en-28-oic and 3β,23-dihydroxyolean-12-en-28-oic; 3β,19α,23,24-tetrahydroxyurs-12-en-28-oic and 3β,19α,23,24-tetrahydroxyolean-12-en-28-oic. The last compound is a new natural product and its structure was determined based on methyl-triacetylated derivative. From the hexanic extract we isolated α and β-amyrin and phytol.

Further mechanistic studies demonstrated that both Radix Rubiae and realgar were capable of inducing cellular apoptosis on HaCaT cells in a dose- and time-dependent manner as shown by morphological inspection, DNA fragmentation, TUNEL assay, cell cycle analysis, annexin V---PI staining and Western blot analysis. HPLC fingerprintings were constructed for quality control of the Radix Rubiae extract using mollugin as the chemical marker. Further phytochemical study found that ethyl acetate fraction of this herb possessed potent growth inhibition on HaCaT cells, with IC50 of 0.9 microg/ml. However, the chemical compounds obtained from commercial sources including mollugin, alizarin, purpurin, and quinizarin failed to induce growth inhibition. Meanwhile, arsenic trioxide, arsenic pentoxide and arsenic iodide, three arsenic salts presented in realgar, had significant anti-proliferative effect on HaCaT cells, with IC50 values of 2.4, 16 and 6.8 microM, respectively; and cellular apoptosis was found to be the underlying mechanism for the observed growth inhibitory activity. Furthermore, Radix Rubiae, realgar and arsenic compounds were also revealed to possess growth inhibition when evaluated in a PHA-activated PBMC model, and all of the substances except arsenic pentoxide significantly attenuated the release of inflammatory cytokines such as IFN-y, TNF-alpha and IL-2 in PBMC, indicating an anti-inflammatory effect. The in vivo mouse tail model experiments demonstrated that arsenic trioxide, arsenic pentoxide and arsenic iodide were able to markedly induce mouse tail keratinocyte differentiation, while such differentiation-modulating effect observed in the fraction of Radix Rubiae was only marginal. / In summary, Radix Rubiae and realgar extracts and three arsenic compounds have been identified and characterized as potential anti-psoriatic agents. The discoveries from the present PhD project not only help put the traditional use of these medicinal substances for psoriasis treatment on a scientific footing, but also open up new opportunities for their development into novel anti-psoriatic therapies. / Psoriasis, a chronic inflammatory skin disorder affecting approximately 2-3% of the population worldwide, is characterized histologically by hyperproliferation and aberrant differentiation of epidermal keratinocytes. Many conventional therapies are offered for psoriasis treatment but there exist problems such as unsatisfactory efficacy, side effects and drug resistance. Many patients therefore turn to alternative and complementary medicines for help. Traditionally, Chinese herbal medicine has been extensively used to treat psoriasis and produced promising clinical results. The present PhD study was conducted to investigate psoriasis-treating Chinese herbal medicines with an aim to identify effective anti-psoriatic agents. Sixty Chinese medicinal materials were selected for the screening project based on their ethnomedical use in psoriasis. The ethanolic extracts of these medicinal substances were evaluated for their anti-proliferative action on cultured HaCaT human keratinocytes using microplate SRB and MTT assays. Among them, the root of Rubia cordifolia L. (Radix Rubiae) and realgar were found to have significant anti-proliferative effects, with IC50 values of 1.4 and 6.6 microg/ml, respectively as measured by MTT assay, while they exerted mild significant cytotoxicity on the human fibroblast Hs-68 cell line. / Tse, Wai Pui. / Advisers: C. T. Che; Z. X. Lin. / Source: Dissertation Abstracts International, Volume: 70-09, Section: B, page: . / Thesis submitted in: October 2008. / Thesis (Ph.D.)--Chinese University of Hong Kong, 2009. / Includes bibliographical references (leaves 298-340). / Electronic reproduction. Hong Kong : Chinese University of Hong Kong, [2012] System requirements: Adobe Acrobat Reader. Available via World Wide Web. / Electronic reproduction. [Ann Arbor, MI] : ProQuest Information and Learning, [200-] System requirements: Adobe Acrobat Reader. Available via World Wide Web. / Abstracts in English and Chinese. / School code: 1307.

Submitted by VIVIANE MAGRINI null (viviane_magrini@yahoo.com.br) on 2016-03-01T20:13:04Z No. of bitstreams: 1 Viviane Magrini.pdf: 5645437 bytes, checksum: 25fafce9b5405010cb429b17c172011c (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-03-03T19:58:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 magrini_v_me_araiq_par.pdf: 1328742 bytes, checksum: 4a2b2b27d644fb4d71ce706407afdc38 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-03T19:58:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 magrini_v_me_araiq_par.pdf: 1328742 bytes, checksum: 4a2b2b27d644fb4d71ce706407afdc38 (MD5) Previous issue date: 2016-02-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O gênero Calycophyllum pertence à família Rubiaceae, conhecida pela diversidade de metabólitos secundários, e pela variedade de atividades biológicas: antifúngica, bactericida, antiviral e inseticida. A espécie vegetal Calycophyllum spruceanum Benth (Rubiaceae) é muito utilizada pelas populações da América do Sul no combate a doenças dermatológicas, estomacais, diabetes, parasitoses, câncer, entre outras, despertando o interesse pela investigação química deste táxon. A presente pesquisa objetivou o estudo bio-guiado dos extratos obtidos das folhas, galhos e de cascas do caule de C. spruceanum visando à identificação das substâncias bioativas isoladas, incluindo as inativas. A meta é identificar nas substâncias isoladas aquelas com propriedades cosméticas associadas ao uso popular desta espécie, conhecida na região Amazônica por esta propriedade. Diferentes extratos foram preparados e analisados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e Espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear (RMN 1H), acompanhados por ensaios biológicos (ensaio de capacidade redutora dos radicais DPPH˙ e ABTS˙+) para determinação de atividade antioxidante. O direcionamento do estudo foi feito em função dos ensaios antioxidantes aplicados aos extratos, conduzindo o estudo experimental para o extrato hidroetanólico de folhas ao foco do estudo, por ter apresentado a maior atividade antioxidante. Por meio de métodos espectroscópicos e espectrométricos (CLAE-DAD, CLAE-EM, CLAE-EM/EM; RMN de 1H e 13C; TOCSY 1D; HMBC; EM-IES) deste extrato e respectivas frações, pode-se identificar algumas substâncias antioxidantes potencialmente ativas, sendo estas: ácido 3,5-di-O-E-cafeoilquínico; duas séries homólogas de proantocianidinas (tipo-B) com grau de polimerização de 1 a 4, e proantocianidinas monoglicosiladas (tipo-B O-glicosilada) com grau de polimerização de 1 a 3; ácido 1,4-di-O-E-cafeoilquínico, quercetina 3-O-α-arabinopiranosil (16) β-glucopiranosídeo, ácido cafeoilquínico e canferol 3-O-β-D-glicopiranosil (12) β-D-xilopiranosídeo. Espera-se que ao final deste estudo, as informações forneçam subsídios para uma possível aplicação dos resultados científicos sobre a espécie vegetal, visando um produto para a linha de cosmético funcional. / The Calycophyllum genus belongs to the Rubiaceae’s family, known for its high diversity of secondary metabolites, which have a wide range of biological activities (antifungal, antibacterial, antiviral and pesticide). It is widely used by the people of South America against skin diseases, stomach, diabetes, parasites, cancer, among others. It is therefore essential to study the chemical composition of these species used in folk medicine, aiming to validate the traditional use, with scientific data and thus contributing to the search for new bioproducts. This research aimed the bio-guided fractionation of the extracts from the leaves, branches and stem bark extracts of Calycophyllum spruceanum Benth (Rubiaceae), to identify the secondary metabolites in the extracts and fractions, including bioactive ones, for further evaluation of the cosmetic potential of this species, commonly known in the Amazon region. Different extracts were prepared and analyzed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy (1H NMR), and screened by biological assays (assay of reducing capability of ABTS˙+ and DPPH˙radicals) to determine the antioxidant activity. The chemical investigation was carried out based on the antioxidant activity of the extracts. The experimental study focused on the hydroethanolic extract of leaves, that presented the higher antioxidant activity, which would support the traditional uses of this specie as cosmetic. By means spectroscopic and spectrometric analysis (HPLC-DAD, HPLC-MS, HPLC-MS/MS; 1H NMR and 13C; TOCSY 1D; HMBC, ESI-MS) of this extract and its fractions, some compounds were identified: the 3,5-di-O-E-caffeoylquinic acid; two homologous series of proanthocyanidins (B-type) with a degree of polymerization from 1 to 4 and monoglicosyl proanthocyanidins (B-type O-glycosylated) with degree of polymerization from 1 to 3; 1,4-di-O-E-caffeoylquinic acid, quercetin-3-O-α-arabinopyranosyl (16) β-glucopyranoside, caffeoylquinic acid and kaempferol 3-O-β-D-glucopyranosyl (12) β-D-xilopyranosil, which could be responsible for the activity. It is expected that the the complete study of this species provide chemical information, which will validate this plant specie as a potential source of antioxidant natural products that could be material for functional cosmetics. / CNPq: 166069/2014-0

Orientador: João Semir / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T15:39:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_AlexandreSilvade_M.pdf: 919948 bytes, checksum: 62728b178a7491953c3c10b5ae74f123 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Psychotria, com cerca de 1650 espécies, é o maior gênero da família Rubiaceae. A maior parte dos representantes desse grupo são arbustos que habitam o subosque das formações florestais tropicais do mundo inteiro. Muitas espécies são heterostílicas. Aspectos sobre a reprodução de algumas espécies desse grupo foram investigados em florestas do Panamá, Costa Rica e Brasil (sobretudo na Mata Atlântica dos estados de São Paulo, Minas Gerais, Rio de Janeiro e Pernambuco). Como poucos estudos envolvendo espécies de Psychotria foram realizados nas formações florestais do Domínio Cerrado, este estudo teve como objetivo conhecer a fenologia e biologia reprodutiva de cinco espécies simpátricas de Psychotria que ocorrem nesse ecossistema. As espécies escolhidas foram P. trichophoroides Muell. Arg., P. prunifolia (Kunth.) Steyerm., P. hoffmannseggiana (Roem & Schult) Muell. Arg., P. gracilenta Muell. Arg. e P. cephalatha (Muell. Arg.) Standl. O estudo foi desenvolvido em um fragmento urbano (11 ha) de Floresta Estacional Semidecídua, localizado no município de Araguari, Minas Gerais. Antes do início da floração, 100 indivíduos de Psychotria (20 de cada espécie) foram marcados, aleatoriamente, em toda área de estudo e tiveram seu comportamento fenológico observado, mensalmente, entre março de 2006 e fevereiro de 2008. Durante as observações, determinou-se o período de mudança foliar (brotação e senescência), floração (produção de flores) e frutificação (produção de frutos). Os visitantes florais de cada espécie foram coletados ou fotografados e identificados por especialistas. A eficiência desses visitantes na frutificação foi averiguada por meio da comparação entre a taxa de produção de frutos em inflorescências ensacadas e abertas. Além disso, o sistema reprodutivo de cada espécie foi analisado por meio de polinizações manuais e análise da germinação dos grãos de pólen e crescimento dos tubos polínicos. A morfometria floral e produção de néctar foram descritas para P. trichophoroides e P. prunifolia. As espécies apresentaram pico de brotação no início da estação chuvosa. O desenvolvimento de novas folhas foi seguido pela emissão de inflorescências, no entanto, o pico de floração para cada espécie foi distinto e seqüencial. A produção de flores em cada espécie ocorreu por, aproximadamente, um mês, e a sincronia entre os indivíduos da população foi alta. A frutificação e queda de folhas foram maiores durante a estação seca. P. trichophoroides e P. prunifolia possuem flores maiores que as demais espécies e foram visitadas, principalmente, por abelhas grandes (Epicharis, Euglossa, Rhathymus e Bombus). Vespas, borboletas, mariposas e dípteros também foram vistos visitando as flores dessas espécies. Os dados de morfometria floral mostraram a existência de dois grupos distintos de flores: flores brevistilas e longistilas de P. trichophoroides. O único tipo de flor encontrado em P. prunifolia é mais parecido com as flores longistilas de P. trichophoroides. Houve formação de frutos, através da autopolinização espontânea, nas inflorescências ensacadas de P. prunifolia e P. gracilenta. Nessas espécies, também, foi verificada a germinação dos grãos de pólen e crescimento dos tubos polínicos, nos tratamentos de autopolinização manual. As demais espécies apresentam um sistema de auto-incompatibilidade heteromórfico, no qual a formação de frutos só ocorre mediante polinizações entre flores longistilas e brevistilas. As espécies heterostílicas são xenógamas, apresentando um sistema de autoincompatibilidade e incompatibilidade entre tipos florais semelhantes, como o descrito para outras espécies de Rubiaceae. Em contrapartida, as espécies não heterostílicas são autógamas. A produção de néctar não foi significativamente diferente entre os tipos florais encontrados. Os resultados obtidos nesse trabalho indicam que tanto os fatores abióticos (pluviosidade), quanto filogenéticos são importantes na regulação do ciclo fenológico das espécies de Psychotria. No que diz respeito aos fatores bióticos, a competição por polinizadores parece ser uma pressão seletiva que influência a fenologia da floração. As espécies se mostraram generalistas, sendo visitadas por uma diversidade de insetos. No entanto, as abelhas foram os visitantes mais freqüentes e parecem ser os mais eficientes na polinização dessas espécies. / Abstract: Psychotria, with about 1650 species, is the largest genus of the family Rubiaceae. Most of the representatives of that group are shrubs, which inhabit the subcanopy of tropical forest formations around the world. Many species are heterostyly and have a heteromorphic self-incompatibility. Issues on the reproduction of some species have been investigated in the forests of Panama, Costa Rica and Brazil (particularly in the Atlantic Forest in the states of Sao Paulo, Minas Gerais, Pernambuco and Rio de Janeiro). As few studies involving Psychotria species of forest formations were made in the Cerrado, this study aimed to know the reproductive biology of five Psychotria that occur together in that biome. The species were P. trichophoroides M. Arg., P. prunifolia (H.B.K.) Steyerm., P. hoffmannseggiana (Roem & Schult) M. Arg., P. gracilenta M. Arg., and P. cephalata (M. Arg.) Standl. The study was conducted in an urban fragment (11 ha) of semideciduous forest, located in the municipality of Araguari, Minas Gerais. The climate of the region is seasonal, with a dry season, from April to September, and a rainy season, between October and March. Before the beginning of flowering, one hundred individuals of Psychotria (twenty of each species) were marked at random, throughout the study area and had observed their behavior phenologic, monthly, between March 2006 and February 2008. It was determined the period of change leaf (shooting and senescence), flowering (production of flowers) and fruit (production of fruit). Visitors floral species were collected or photographed and identified by specialist. The efficiency of these visitors was investigated by the rate of production of fruits in inflorescences bagged and control. Moreover, the system of incompatibility of each species were examined by manuals pollination and analysis of germination and growth of pollen tubes. The morphology floral and production of nectar were described for P. trichophoroides and P. prunifolia. The species had a single peak of shooting at the beginning of the rainy season. The development of new leaves was followed by the issuance of inflorescences. The peak of flowering for each species was distinct and sequential. The production of flowers occurred for roughly a month. Synchrony between individuals of the population was high. The fall of leaves and fruit were higher during the dry season. The two species, whose flowers are bigger, have been visited, mainly by large bees (Epicharis, Euglossa, Rhathymus and Bombus). The other species, with smaller flowers, were visited by small bees (Augochloropsis, Apis and Trigona). Wasps, butterflies, moths, flies and mosquitoes also were seen visiting the flowers of Psychotria species. There was formation of fruit in bagged head of P. prunifolia and P. gracilenta. In these species there was the germination and growth of pollen tubes in treatments of self-pollination. The other species are heterostyly and have a heteromorphic selfincompatibility, in which the formation of fruit only occurs through pollination between different kinds of flowers. Data from floral morphology showed the existence of two distinct groups of flowers. The thrum flowers can be characterized by greater length of fillets, floral tube and stigma surface. In contrast, the pin flowers have greater stylos. Three species are heterostyly and have a heteromorphic self-incompatibility system, as described for other species of Rubiaceae. However, the other two are monomorphic and self-compatibility. The production of nectar was not significantly different between flowers. The results in this study indicate that both the abiotic factors, as phylogenetic are important in regulating the cycle phenology of Pychotria species. The species were generalists, being visited by a diversity of insects. However, the bees were the most frequent visitors and seem to be more efficient in the pollination of these species. / Mestrado / Mestre em Biologia Vegetal

Orientador: Eliana Regina Forni-Martins / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T11:15:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Correa_AndreaMacedo_D.pdf: 19211818 bytes, checksum: 07d31bbebbd33e949ec374c90c095f2a (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: As Rubiaceae (A. L. de Jussieu), ordem Gentianales, subclado Euasteride I do clado Asteride, é composta por plantas de hábito variado, e compreende uma das maiores famílias de Angiospermas. A família está subdividida em quatro subfamílias, 637 gêneros e aproximadamente 10.700 espécies. São plantas cosmopolitas, com espécies de considerável expressão econômica como o café (C. arabica L. e C. canephora Pierre ex A. Froehner), além de espécies de interesse farmacológico (Cinchona L.) e florístico (Ixora L., Gardenia J. Ellis e Pentas Benth.). Apresenta ampla distribuição, com considerável representação no Cerrado brasileiro, região considerada para esse estudo. Foram realizadas análises cromossômicas em espécies da subfamília Rubioideae, encontradas no estado de São Paulo, nas áreas das Estações Experimentais de Itirapina e Assis, na Reserva Biológica de Mogi-Guaçu e em Corumbá e Três Lagoas, Mato Grosso do Sul. Algumas contagens cromossômicas apresentadas concordaram com as já relatadas na literatura, como 2n = 20 (Coccocypselum lanceolatum (Ruiz & Pav.) Pers.) e 2n = 22 (Coussarea hydrangeifolia (Benth.) Müll. Arg. e Psychotria hoffmannseggiana (Willd. Ex Roem. & Schult.) Müll. Arg.). Foram obtidas contagens inéditas para o gênero Rudgea Salisb. (2n = 44 R. viburnoides (Cham.) Benth.), e para uma espécie da tribo Hedyotideae, Manettia cordifolia Mart. (2n = 66). Para a tribo Psychotria, foram apresentados dados inéditos para espécies pertencentes a três gêneros: Decleuxia H.B.K., com Decleuxia fruticosa (R. & S.) Kuntze (2n = 20); Palicourea Aubl. com 2n = 22 em Palicourea croceoides Ham., P. marcgravii St. Hil. e P. rigida H.B.K., sendo que em P. marcgravii, a contagem divergiu da encontrada na literatura; e Psychotria L. com 2n = 22 para Psychotria lupulina Benth., P. marginata Sw., P. tenerior (Cham.) M. Arg. e P. trichophora Müll. Arg.; 2n = 40 para Psychotria mapourioides DC. e 2n = 44 para Psychotria carthagenensis Jacq., P. gracilenta M. Arg., P. sessilis (Vell) M. Arg., P. suterella M. Arg. e P. vellosiana Benth. São apresentados também dados de hibridação in situ com DNAr 45S para a tribo Psychotrieae com seis espécies de Psychotria, sendo uma do subgênero Psychotria (P. carthagenensis), cinco de Heteropsychotria (Psychotria deflexa, P. hoffmannseggiana, P. trichophora, P. tenerior e P. vellosiana), além de uma espécie do gênero Palicourea (Palicourea marcgravii) e uma Rudgea (Rudgea. viburnoides). O número de pares de sítios de DNAr 45S foi variável, assim como o número cromossômico das espécies. Não se observou relação entre o número de sítios e o nível de ploidia das espécies. A hibridação in situ DNAr 45S também foi aplicada em duas espécies da tribo Spermacoceae, gênero Borreria G. Mey. (Borreria latifolia (Aubl.) K. Schum. e B. verticillata (L.) G. Mey.), nesse caso, as duas espécies apresentaram mesmo número cromossômico e ideogramas muito semelhantes, no entanto, a diferenciação no número de sítios de DNAr 45S possibilitou a discriminação das duas espécies de Borreria / Abstract: The Rubiaceae (A. L. de Jussieu) family, order Gentianales, sub-clade Euasteride I, steride clade, is composed by plants of varied habit, comprising one of the largest Angiosperm amilies, with four subfamilies, 637 genera and approximately 10.700 species. The family is cosmopolitan, including species of considerable economic expression like coffee (C. arabica L. and C. canephora Pierre ex A. Froehner), as well as with pharmacological (Cinchona L.) and floristic interest (Gardenia J. Ellis, Ixora L. and Pentas Benth.). It is a great family showing a broad range of distribution, with considerable representation in the Brazilian Cerrado the ecosystem considered in this study. Chromosome analyses were carried out in some species of Rubiaceae belonged to subfamily Rubioideae that occur in areas of Cerrado on the states of São Paulo (Experimental station of Itirapina and Assis and Biological Reserve of Mogi-Guaçu) and Mato Grosso do Sul (Corumbá and Três Lagoas counties). Some chromosome counts were in agreement to literature, as 2n = 20 (Coccocypselum lanceolatum (Ruiz & Pav.) Pers.) and 2n = 22 (Coussarea hydrangeifolia (Benth.) Müll. Arg. and Psychotria hoffmannseggiana (Willd. Ex Roem. & Schult.) Müll. Arg.). On the other hand, new counts werw obtained for genus Rudgea Salisb. (2n = 44 Rudgea viburnoides (Cham.) Benth.), and for Manettia cordifolia Mart. (2n = 66), wich belongs to the Hedyotideae tribe. For Psychotria tribe, we present new data for species from three genera: Decleuxia fruticosa (R. & S.) Kuntze (2n = 20); Palicourea croceoides Ham., P. marcgravii St. Hil. and P. rigida H.B.K., 2n = 22 and Psychotria with 2n = 22 for Psychotria lupulina Benth., P .marginata Sw., P. tenerior (Cham ) M. Arg. and P. trichophora Müll. Arg.; 2n = 40 for Psychotria mapourioides DC. and 2n = 44 for Psychotria carthagenensis Jacq., P. gracilenta M. Arg., P. sessilis (Vell) M. Arg., P. suterella M. Arg. and P. vellosiana Benth. Inedit data of in situ hybridization with the 45S rDNA were obtained for eight species beloning to Psychotrieae tribe, being six for genus Psychotria (Psychotria carthagenensis subgenus Psychotria; Psychotria deflexa, P hoffmannseggiana, P.sciaphila, P. tenerior and P vellosiana, subgenus Heteropsychotria) one for genus Palicourea (Palicourea marcgravii) and one for genus Rudgea (Rudgea viburnoides). The number of rDNA 45S sites varied among species. No relation was observed between the number of rDNA sites and the ploidy level of the species. The in situ hybridization with 45S rDNA was also applied in two species of the Spermacoceae tribe, Borreria latifolia (Aubl.) K. Schum. and B. verticillata (L.) G. Mey. Both species present the same chromosome number and very similar ideograms, but different number of 45S rDNA sites made possible the Karyotype discrimination between the two species of Borreria / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: André Olmos Simões / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T06:10:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carmo_JoaoAfonsoMartinsdo_M.pdf: 3355945 bytes, checksum: 16b576b537fd2aadac50a20488537515 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Rubiaceae é uma família cosmopolita, distribuída principalmente por regiões tropicais e subtropicais do planeta. Nela estão incluídos cerca de 620 gêneros e mais de 13000 espécies. No Brasil são reconhecidos 120 gêneros e 1392 espécies. A Mata Atlântica, considerada um "hotspot" para conservação da biodiversidade, abriga cerca de 600 espécies de Rubiaceae. A Serra da Mantiqueira, na qual se localiza a região de Camanducaia, extremo sul de Minas Gerais, apresenta importantes remanescentes deste domínio fitogeográfico. O presente estudo tem como objetivos produzir uma monografia taxonômica sobre a família Rubiaceae no município de Camanducaia, bem como a produção de uma chave interativa de entradas múltiplas para as espécies inventariadas, e avaliar aspectos fitogeográficos da região de estudo com base na distribuição geográfica de suas espécies nativas. O levantamento florístico foi realizado através de viagens de coleta e consulta a herbários. A família Rubiaceae está representada no município de Camanducaia por 17 gêneros e 34 espécies, duas subespécies e duas variedades. Os gêneros mais diversos foram Psychotria, com sete espécies, seguido por Manettia e Borreria, ambos com cinco espécies. Uma monografia taxonômica foi produzida. A análise da distribuição de espécies selecionadas corrobora a separação entre as regiões norte e sul da Mata Atlântica. Neste contexto, a região de Camanducaia desempenha a função de corredor e refúgio de espécies endêmicas da floresta Atlântica do sul. Uma chave interativa de entradas múltiplas é apresentada para as espécies inventariadas / Abstract: Rubiaceae is a cosmopolitan family, mainly distributed along tropical and subtropical regions throughout the world, and comprises around 620 genera and 13000 species. In Brazil 120 genera and 1392 species have been recognized. The Atlantic Rain Forest, considered to be a hotspot for biodiversity conservation, harbors ca. 600 Rubiaceae species. The Mantiqueira Mountain Range, in which Camanducaia municipality is located, Southern Minas Gerais, exhibits important remnants of this phytogeographic domain. This study aims to produce a taxonomic monograph about the Rubiaceae at Camanducaia municipality, as well as to produce an interactive key of multiple entries for the inventoried species, and to asses phytogeographic aspects of the region on the basis of native species geographic distribution analysis. The Rubiaceae family is represented at Camanducaia municipality by 17 genera and 34 species, two subspecies and two varieties. The most diverse genera were Psychotria, presenting seven species, followed by Manettia and Borreria, both presenting five species. A taxonomic monograph is presented. The geographic distribution analysis of the selected species corroborates for a separation of southern and northern Atlantic forests. Within this context, the Camanducaia region performs the function of corridor and refuge of species endemic to the southern Atlantic forest. An interactive key of multiple entries for the inventoried species is presented / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Biologia Vegetal