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Identification et caractérisation fonctionnelle de gènes impliqués dans la voie de biosynthèse des furocoumarines chez les végétaux supérieurs / Identification and functional characterization of genes involved in furocoumarines biosynthesis by higher plants

Vialart, Guilhem 06 April 2012 (has links)
Les furocoumarines sont des métabolites secondaires qui dérivent de la voie de biosynthèse des phénylpropanoïdes. Ces phytoalexines interviennent notamment dans les mécanismes de défense des plantes tels que la résistance aux bioagresseurs. Le déterminisme moléculaire de cette voie de biosynthèse est encore mal connu mais il a néanmoins été démontré depuis les années 1960 que les enzymes catalysant les différentes étapes de la voie la synthèse des furocoumarines appartenaient à différentes familles. Les travaux présentés dans ce document se sont focalisés sur deux familles d'enzymes : les dioxygenases oxoglutarate dépendantes et les cytochromes P450s. La première étape de la voie de biosynthèse des furocoumarines consiste en une ortho-hydroxylation du p-coumarate qui mène à la formation de l'umbelliférone. Basé sur des travaux récents sur Arabidopsis, six gènes codants pour des dioxygénases ont été isolés chez Ruta graveolens, Citrus limetta et Pastinaca sativa. Les protéines correspondantes présentent plus de 58% d'identité avec la Féruloyle 6' Hydroxylase (F6'H) d'A. thaliana. La caractérisation fonctionnelle de ces enzymes a été réalisée dans un système d'expression hétérologue procaryote. Sur les 6 enzymes, trois n'ont pu être exprimée efficacement, et deux présentent une activité F6'H similaire à celle décrite pour A. thaliana. La dernière enzyme dispose de caractéristiques nouvelles non décrites à ce jour. Elle est en mesure de réaliser l'hydroxylation du féruloyle coA et du p-coumaroyle coA. Ces études in vitro ont été complétées par une exploration des fonctions de la protéine dans la plante. Une analyse fine du profil d'expression du gène a permis de mettre en évidence une expression qui est en corrélation avec le niveau de production d'umbelliférone. La fonction de la protéine a également été validée par une analyse des produits formés dans des feuilles de Nicotiana benthamiana transformées transitoirement. Les cytochromes P450 catalysent 60% des réactions de la voie de biosynthèse de furocoumarines. Un travail de criblage fonctionnel de cytochromes P450 identifiés au préalable chez Ammi majus et Thapsia garganica a été entrepris. Les analyses de bio-informatiques et les modifications apportées au niveau du mode opératoire pour l'expression dans la levure ont permis d'émettre des hypothèses concernant le rôle de certains P450 candidats. Ces travaux exploratoires et préliminaires font supposer de nouvelles conjectures relatives à cette voie de biosynthèse / Furanocoumarins are secondary metabolites deriving from the phenylpropanoid biosynthetic pathway. These phytoalexins are especially involved in plant defense mechanisms against insects or phytopatogenous fungi and bacteria. The molecular control of this biosynthetic pathway is still poorly understood even though it has been demonstrated since the 1960s that enzymes catalyzing the different steps are belonging to different enzymatic families. The work presented here is focused on two enzyme families: oxoglutarate dependent dioxygenases and cytochrome P450s. The first step in the furanocoumarins biosynthetic pathway is the ortho-hydroxylation of p-coumarate, which leads to the formation of umbelliferone. Based on a recent work done on Arabidopsis, we isolated six genes encoding dioxygenases from Ruta graveolens, Citrus limetta and Pastinaca sativa. The corresponding proteins share more than 58% identity with the A. thaliana féruloyle 6' Hydroxylase (F6'H). The functional characterization of these enzymes was performed in a prokaryotic heterologous expression system. Of the six enzymes, three could not be functionnaly expressed and two exhibited a similar F6'H activity as described for A. thaliana. The last enzyme has new properties not described to date. It is able to achieve both hydroxylation of féruloyle CoA and p-coumaroyle CoA. These in vitro studies were completed by a functional exploration of the protein in planta. A detailed analysis of the gene expression pattern highlighted a link with the level of umbelliferone synthesis. The function of the protein was also confirmed by an analysis of the products formed in transiently transformed Nicotiana benthamiana leaves. Cytochrome P450s catalyze 60% of the reactions of the furanocoumarin biosynthetic pathway. Therefore, a functional screening of cytochrome P450 previously identified in Ammi majus and Thapsia garganica was undertaken. The bioinformatic analyses and the changes undertaken in the procedure for expression in yeast allowed drawing hypotheses on the function of some of these P450 candidates. These exploratory and preliminary experiments allowed suggesting new hypotheses about the biosynthetic pathway
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Identification moléculaire et caractérisation fonctionnelle d'une nouvelle sous-famille de cytochromes P450, CYP71AZ, impliquée dans la synthèse de furanocoumarines et coumarines chez Pastinaca sativa / Molecular isolation and functional characterization of a novel cytochrome P450 subfamily, CYP71AZ, involved in the biosynthesis of furanocoumarins and coumarins in Pastinaca sativa

Krieger, Célia 16 December 2014 (has links)
Les furanocoumarines (FCs) sont des métabolites secondaires principalement synthétisés chez quatre familles botaniques et dérivent de la voie de biosynthèse des phénylpropanoïdes. Ces phytoalexines interviennent dans les processus de défense de la plante et présentent un fort potentiel thérapeutique. Des travaux réalisés dans les années 1960 sur des cultures cellulaires en parallèle de l’utilisation de précurseurs radiomarqués ont permis de démontrer que de nombreuses enzymes impliquées dans cette voie appartenaient à la famille des cytochromes P450 (P450s). Seules deux d’entre elles avaient pu être identifiées d’un point de vue moléculaire au début de ce travail de thèse. Afin de générer des informations concernant le génome de plantes productrices de FCs, nous avons fait séquencer les ARNm extraits de feuilles de Pastinaca sativa, de Ruta graveolens et de Cullen cinereum. L’analyse in silico de ces trois banques de données a permis d’identifier près de 800 fragments d’ADNc codants pour des P450s. Des travaux antérieurs réalisés au laboratoire et l’analyse comparative des transcriptomes de ces 3 plantes nous ont amenés à nous focaliser sur la sous-famille CYP71AZ au travers d’une étude fine de CYP71AZ3 et CYP71AZ4. La caractérisation fonctionnelle de ces enzymes a été réalisée dans un système d’expression hétérologue eucaryote : Saccharomyces cerevisiae. Les résultats obtenus ont permis de montrer que CYP71AZ4 avait une spécificité de substrat assez large puisqu’elle pouvait métaboliser au moins une FC et 4 coumarines. L’analyse et la comparaison des constantes cinétiques pour chacun de ces substrats indiquent néanmoins que le psoralène est le substrat préférentiel. La caractérisation fonctionnelle de CYP71AZ3 a mis en évidence que cette enzyme pouvait hydroxyler l’esculétine, une coumarine, mais ne jouait aucun rôle dans la synthèse de FCs. Ces travaux mettent en évidence la diversité fonctionnelle au sein d’une même sous-famille enzymatique et permettent d’émettre des hypothèses nouvelles quant à l’apparition de cette voie de biosynthèse chez les Apiacées d’une part, et chez les autres familles botaniques d’autre part / Furanocoumarins (FCs) are secondary metabolites mainly synthetized in four botanical families deriving from the phenylpropanoid biosynthetic pathway. These phytoalexins are involved in plant defense mechanisms and present strong therapeutic potential. Early studies in the 1960s based on cell cultures and the use of radiolabeled precursors have shown that many enzymes involved in this pathway belong to the cytochrome P450 family (P450s). Only two of them had been identified from a molecular point of view at the beginning of this thesis. In order to generate information regarding the genome of plants producing FCs, we sequenced the mRNA extracted from leaves of Pastinaca sativa, Ruta graveolens, and Cullen cinereum. In silico analysis of these three libraries identified nearly 800 cDNA fragments encoding for P450s. Previous studies in the laboratory and comparative transcriptome analysis of these three plants have led us to focus on the subfamily CYP71AZ through a detailed study of CYP71AZ3 and CYP71AZ4. Functional characterization of these enzymes was performed in an eukaryote heterologous expression system: Saccharomyces cerevisiae. The results showed that CYP71AZ4 had a broad substrate specificity enough as it could metabolize one FC and 4 coumarins. The analysis and comparison of the kinetic constants for each of these substrates indicate, however, that the preferred substrate is psoralen. The functional characterization of CYP71AZ3 showed that this enzyme could hydroxylate esculetin, a coumarin, but played no role in the synthesis of FCs. This study highlights the functional diversity within a single enzyme subfamily and allows to issue new hypotheses about the emergence of this biosynthetic pathway in Apiaceae on one hand, and among other botanical families on the other hand
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ENVISIONING YOUNG ADULT LITERATURE : A STUDY ON TEACHING ENVISIONMENT IN THE ESL-CLASSROOM

Heier, Karolina January 2017 (has links)
This essay is based on Judith A. Langer’s many years of literacy research and her concepts of ‘the literate mind’ and ‘envisionment building’ in the classroom. In addition to Langer’s theories, I consider several other strategies for reading, some of which have evolved from Langer’s ideas and are adapted to fit the teaching of English for Swedish upper secondary school. Furthermore, I discuss the benefits of teaching a foreign language with the help of literature in general and Young Adult (YA) literature in particular. Working with YA literature in the classroom can not only help students develop a greater empathy towards others, but is also well suited for teaching reading strategies to teenagers. In the analysis, I demonstrate a didactic approach with the help of extracts from Ruta Sepetys’ Between Shades of Gray (2011). My findings indicate that reading Young Adult literature can benefit teenagers’ personal growth as well as their language learning and general knowledge. Lastly, I assert that envisionment building can both lead to reevaluation of the readers themselves as well as to a greater understanding of different texts and the readers’ perception of the historical and contemporary world.
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Desarrollo de un modelo de elección de ruta en metro

Herrera Rojas, Cristián January 2014 (has links)
Ingeniero Civil / El presente trabajo aborda el problema de modelar la elección de ruta en el Metro de Santiago para construir una herramienta capaz de capturar la comparación que realizan los usuarios de sus rutas disponibles. La motivación de este trabajo es el uso de información automatizada generada por las transacciones bip! y las variables operacionales de Metro para incorporarlas a modelos de elección de ruta en modalidad predictiva, en desmedro de metodologías tradicionales más costosas tales como las encuestas EOD, tomando en cuenta que la red aumentará su extensión en 37% para el año 2018 con la puesta en marcha de las Líneas 3 y 6. El enfoque del modelo de elección propuesto es mixto, ya que se modelan usuarios con comportamiento semicompensatorio, en que existe tradeoff entre los atributos de algunas rutas y en que hay descarte de las demás rutas disponibles. En este trabajo se utiliza un modelo con umbrales de tolerancia de los atributos, para modelar que si una ruta posee uno o varios atributos que sobrepasan el umbral, la alternativa correspondiente se descarta del conjunto de rutas disponibles. En particular, este trabajo ocupa el modelo Logit Multinomial Restringido CMNL, que emplea la heurística de incorporación de funciones de penalización o cutoffs a las funciones de utilidad para modelar implícitamente el descarte de rutas que superan uno o más valores umbrales de los atributos, por lo que no se requiere conocer a priori el conjunto de elección de cada individuo. Se propone un modelo liviano que emplee variables sencillas de obtener, tanto para calibración como para su uso en modalidad predictiva, con el objetivo de observar si la elección de ruta se explica apropiadamente, o bien si requiere de atributos más sofisticados. Para este estudio, se consideran las variables explicativas tradicionales de tiempo de viaje y el número de transbordos, además de la variable de costo angular para medir cuán directa es una ruta. Las técnicas de calibración del CMNL están basadas en el principio de máxima verosimilitud. Los resultados muestran que los usuarios poseen un comportamiento semicompensatorio en la decisión sobre las rutas en Metro, por lo que se cumple el objetivo de este trabajo. Dada la estructura de la red de Metro y los resultados de las calibraciones, se concluye que el transbordo es un factor penalizador, mientras que el costo angular y el tiempo de viaje son factores compensatorios. De cierta manera, este resultado confirma que el modelo CMNL reproduce el modelo Logit Multinomial MNL, o sea, el modelo CMNL delata si existe o no comportamiento compensatorio en vez de hacer dicho supuesto a priori.
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Avaliação da atividade antimicrobiana de tintura e pomada da Ruta graveolens sobre bactérias isoladas de feridas cutâneas em cães

MENDES, Zélia Ferraz 23 February 2007 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-08T14:53:32Z No. of bitstreams: 1 Zelia Ferraz Mendes.pdf: 315816 bytes, checksum: 51bdc2df924254a5384aebfb6ff6656d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-08T14:53:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zelia Ferraz Mendes.pdf: 315816 bytes, checksum: 51bdc2df924254a5384aebfb6ff6656d (MD5) Previous issue date: 2007-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / With the objective of evaluating the antimicrobian activity of the Ruta graveolens dye and ointment on isolated bacteria of dogs’ cutaneous wounds, they were provoked by several traumas and considered polluted or infected and proceeding from ambulatorial casuistry of the Veterinary Hospital of DMV of UFRPE. The wounds were submitted to the collecting of bed material of the cruenta area through swab’s for bacterial cultures accomplishment. In the first phase, the isolated bacteria were stocked in Agar Nutrient and submitted to the in vitro evaluation test of the antimicrobian activity by using the Ruta graveolens’ extract with alcoholic content to 65% and their serial dilutions (100, 10-1, 10-2 and 10-3). The isolated bacteria were Staphylococcus sp, Streptococcus sp, Proteus sp, Escherichia coli. It was just observed inhibited effect in the bacterial growth in the concentration 1:1 of Ruta graveolens. In the second phase, the wounds material was collected before the cleaning and 48 hours after the treatment with Ruta graveolens ointment. Before the observed results, it is ended that Ruta graveolens dye presented antimicrobian activity in vitro when it is used in the proportion of 1:1 under the ointment form for the isolated bacteria of dogs’ cutaneous wounds and it could be an option of a phytoterapical to aid in the treatment of polluted or infected cutaneous losses. / Com o objetivo de avaliar a atividade antimicrobiana da tintura e pomada da Ruta graveolens sobre bactérias isoladas de feridas cutâneas em cães, foram utilizadas feridas provocadas por traumas diversos e consideradas contaminadas ou infectadas provenientes da casuística ambulatorial do Hospital Veterinário do DMV da UFRPE. As feridas foram submetidas à coleta de material do leito da área cruenta, através de swab’s, para realização de culturas bacterianas. Na primeira fase, as bactérias isoladas foram estocadas em Ágar Nutriente e submetidas ao teste in vitro para avaliação da atividade antimicrobiana utilizando-se o extrato da Ruta graveolens com teor alcoólico a 65% e suas diluições seriadas (100, 10-1, 10-2 e 10-3). As bactérias isoladas foram Staphylococcus sp, Streptococcus sp, Proteus sp, Escherichia coli, sendo observado efeito inibitório no crescimento bacteriano apenas na concentração 1:1 de Ruta graveolens. Na segunda fase, foi coletado material das feridas antes da limpeza e após 48 horas do tratamento com pomada de Ruta graveolens. Diante dos resultados observados, conclui-se que tintura da Ruta graveolens apresentou atividade antimicrobiana in vitro quando utilizada na proporção de 1:1 e sob a forma de pomada para as bactérias isoladas de feridas cutâneas de cães, podendo ser uma opção de um fitoterápico para auxiliar no tratamento de perdas cutâneas contaminadas ou infectadas.
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Optimización de rutas de transporte en la distribución física de equipos celulares de un operador logístico en la ciudad de Lima - Perú

Tataje Lovera, Elizabeth Carolina, Montenegro Giraldo, Marycely January 2015 (has links)
La tesis de investigación estuvo orientada a la optimización de las rutas que operan en el transporte de la distribución de mercancía de equipos celulares que se encuentra a cargo del Operador Logístico, a través de la aplicación de la metodología de programación lineal con el uso del solver de Excel. Para lo cual el primer trabajo realizado fue la búsqueda de información asociada al tema de tesis para la confección del marco teórico y la definición de los conceptos básicos utilizados en el tema como son por ejemplo los términos de Investigación de operaciones, programación lineal, distribución física, transporte, ruta óptima y simulación; para posteriormente continuar con el diagnóstico de la situación actual y el análisis de la problemática existente en la distribución física de los productos, relacionado al diseño y desempeño actual de las rutas en la empresa. Luego con la identificación y selección de las rutas a optimizar, se procedió a encontrar la ruta óptima en distancias para cada una de ellas, a través del uso de la programación lineal y uso del software Excel en donde se ingresaron los datos correspondientes de cada ruta. Finalmente se presentaron los resultados obtenidos de cada simulación realizada en el software informático, en donde luego del análisis y comparación entre las distancias de las rutas reales y las rutas ideales simuladas, se pudo comprobar la disminución de distancias a través del uso de la ruta óptima. La disminución de distancias en las rutas disminuyó también el costo de combustible utilizado en la unidad de transporte. The thesis research was oriented to the optimization of routes operating in the transport of distribution of cellular equipment that is in charge of the Logistics Operator, through the application of linear programming methodology. For which the first work was the search for information associated with the thesis topic to prepare the framework and the definition of the basic concepts used in the subject as such terms are operations research, linear programming, physical distribution , transportation, simulation and optimal route; and then continue with the diagnosis of the current situation and identify the problems in the physical distribution of products related to the design and performance of current routes in the company. Then with the identification and selection of routes to optimize, we proceeded to find the optimal route distances for each of them, through the use of linear programming and using the software Excel where the data of each route is entered. Finally the results of simulation performed on each computer software, where after analysis and comparison of the distances of the actual paths and routes ideal simulated showed it was found decreasing distances through the use of the optimum route. Decreasing distances on routes also reduced the cost of fuel used in the transport unit.
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The efficacy of Ruta graveolens 6CH together with ergonomic interventions in the work-place in the treatment of computer vision syndrome

Hassim, Zeenat 30 May 2012 (has links)
M.Tech. / As computers become more common in the work environment, more people are developing symptoms linked to long-term computer use. These include visual and eye-related symptoms as well as musculo-skeletal symptoms (Sheedy & Shaw-McMinn, 2003; Yan, Hu, Chen & Lu, 2007). This collection of symptoms is known as Computer Vision Syndrome (CVS). There are various allopathic modes of treatment available which are limited in terms of their long term use and side effects. Yan and colleagues (2007) indicate that a correctly designed, ergonomically efficient work place plays a significant role in limiting the development of CVS symptoms. Depending on the reasons for CVS and the symptoms associated with it, alternative treatment options may be appropriate (Yan, et al., 2007). Homoeopathy offers alternate treatment, however no extensive research has been done on the homoeopathic treatment of this condition. The aim of this study was to determine the efficacy of the homoeopathic remedy Ruta graveolens 6cH together with ergonomic interventions in the work environment in the treatment of Computer Vision Syndrome. This was done by means of a selection questionnaire (APPENDIX B) and a symptom index form (APPENDIX C), rating the severity and frequency of symptoms. This research study is paired to a related study which investigated the efficacy of Ruta graveolens 6cH without ergonomic interventions. These two studies can later be compared to determine whether the remedy Ruta graveolens 6cH by itself is sufficient in treating computer vision syndrome. This study was approved by the Higher Degrees Committee (HDC48/2009) and the Academic Ethics Committee (AEC50/09) at the University of Johannesburg on the 19 June 2009. Thirty one people joined the study. They were recruited by means of flyers and advertisements (APPENDIX E) placed at the University of Johannesburg as well as corporate companies. Participation was voluntary and by means of informed consent (APPENDIX A). Participants were required to fill in a selection questionnaire (APPENDIX B) to see if they qualified for the study. It was a double-blind placebo controlled study in which participants were placed into one of 2 groups. Both groups were required to change the layout of their work environment in order to ensure ergonomic efficiency at their work station (APPENDIX D). Of the two groups, one was dispensed vi the medicated prescription and the other an identically presented unmedicated prescription. Participants were requested to take the medication twice a day for 4 weeks. They were also required to complete a symptom index form (APPENDIX C) on a weekly basis. These forms were collected by the researcher at the end of the four weeks. There was no risk associated with taking the medication. Participants’ right to privacy was adhered to and they were free to withdraw from the study at any time. Of the 31 people who joined the study, 29 completed the study.
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The efficacy of Ruta graveolens 6cH in the treatment of computer vision syndrome

Du Toit, Chrisna 04 June 2012 (has links)
M. Tech. / The homoeopathic remedy, Ruta graveolens, is used for the treatment of eyestrain and eye related symptoms caused by the over use of the eyes (Kent, 2006). The aim of this study was to determine the efficacy of the homoeopathic remedy Ruta graveolens 6cH in the treatment of Computer Vision Syndrome. This study can be compared to related studies by means of the symptom index form (Appendix C). This double-blind study included thirty participants between the ages of 20 and 35. The participants had to be regular users of a visual display terminal for a minimum of three hours per day. The participants also had to experience at least two or more eye or vision related symptoms due to VDT use for at least one month prior to the start of the study. During the first consultation, each participant was tested for any refractive errors by a qualified optometrist. The participants were divided into two groups of fifteen each. One group received the remedy, Ruta graveolens 6cH, while the other group received the placebo. The participants were required to take four pillules twice a day for the duration of the study. The data was statistically analysed by means of the Mann-Whitney u Test, Friedman Analysis of Variance by Ranks Test and Wilcoxon Signed-Rank Test. Crosstabs were used to check for confounding variables. The two groups, the placebo and the treatment group were tested against each other. The findings from the data illustrated that in the treatment group there was a statistically significant improvement in the severity of symptoms in seven of the fourteen symptoms over the duration of the study, while five of the fourteen symptoms of the placebo group had a statistically significant improvement in severity over the four week period. Overall the severity of the treatment group had an improvement of 42% compared to the 28% improvement of the placebo group. Both groups showed a reduction of the frequency of symptoms over the duration of the study.
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La intención de internacionalización de las pymes españolas hacia China en la era de la Nueva Ruta de la Seda -- un estudio desde el enfoque de redes sociales

Yang, Yang 15 July 2022 (has links)
China ha llamado mucho la atención en el ámbito económico y comercial, especialmente en la era de la iniciativa de la Nueva Ruta de la Seda (NRS). Ante este mercado tan gigante, dinámico y atractivo, pero no tradicional para España, la intención de internacionalización de las pymes españolas hacia ella podría ser una temática interesante, relevante y significativa, tanto para los decisores estratégicos empresariales como para los responsables políticos, puesto que tal intención representará los intereses de las pymes en explorar y aprovechar este mercado. En el presente estudio, basándose en la teoría de la intención emprendedora y el enfoque de redes sociales, se propone un modelo integral que revela qué factores y cómo ellos determinan sistemáticamente la intención de internacionalización hacia China en el caso de las pymes españolas, bajo el contexto de la NRS. A través de un cuestionario online y la técnica de análisis multivariante (modelos de ecuaciones estructurales), 161 pymes españolas han sido estudiadas. Descubrimos que: 1) la percepción emprendedora es un firme factor antecedente para la intención emprendedora internacional de los líderes empresariales hacia China; 2) desde la perspectiva del emprendedor, su percepción emprendedora internacional depende de la red de gobierno, la red de clúster y la red interna de la empresa, pero no de la red de intermediarios y la red social básica; 3) entre las cinco redes clasificadas, el conocimiento de la NRS sólo modera la relación entre la red de gobierno y la percepción del emprendedor.
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Aproximações explicativas a partir da análise de sentidos e significados constituídos em espaços/momentos/situações de escolha na escola

Alfredo, Raquel Antonio 09 February 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T20:56:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Raquel Antonio Alfredo.pdf: 1441608 bytes, checksum: 04ae4345859764b73a0273c9b685eac5 (MD5) Previous issue date: 2006-02-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / RESUMEN Emprendemos en este trabajo el objetivo de producir aproximaciones explicativas a respecto del proceso de construcción de los sentidos y significados sobre espacios, momentos y situaciones entendidos como constitutivos de la actividad escoja, en la escuela, más específicamente, al respecto de los que se componen como posibles determinantes de la escoja profesional. Por eso, acométemelo, por medio de la mediación de los presupuestos teórico-metodológicos del materialismo histórico dialéctico, ruta sicológica/ socio-histórica. Cuando partimos teniendo como referencial teórico-metodológico, la sicología socio-histórica, estamos comprometidos con una determinada manera de investigación, registro y al fin de análisis de las informaciones producidas en este precurso. Modo este que nos llevó, a trabajar con categorías peculiares, tales como: trabajo, mediación, alienación, necesidad, motivo, sentidos y significados. Así, apoyados en los presupuestos producidos por Vigotski, podemos concretizar la pesquisa como camino explicativo y no descriptivo, y así, volver nuestros estudios para más que la apariencia del fenómeno estudiado, considerando su esencia, o sea, sus trazos esenciales (aspectos individuales, particulares y universales). En estas condiciones, el presente estudio se dio en escuela de enseñaza pública, en el desarrollo de un programa de orientación profesional con dos turmas de 3º año de Enseñanza Media. En la concretización del programa hubimos podido seleccionar una alumna, para entonces, iniciar un precurso de interlocución, por medio de entrevistas predirigidas. Así, hubimos podido focalizar a escoja como actividad (movimiento de la subjetividad objetivada en acción), en determinado contexto socio-histórico y hacer una análisis como fenómeno imbricado con la realidad social. En el proceso de análisis, más precisamente, en los momentos conclusivos de este precurso, se ha hecho la significación de la preponderancia de la constitución de sentidos y significados sobre la escoja en general, en detrimento dos relacionados específicamente, con la escoja profesional. Inferimos que, una das posibilidades explicativas, sobre tal preponderancia puede ser la no sistematización pedagógica de contenidos relacionados con temas que consideren el mundo del trabajo, de las ocupaciones y de las profesiones, para mucho más de la espontaneidad casuística. / Empreendemos este trabalho com o fito de produzir aproximações explicativas a respeito do processo de constituição dos sentidos e significados sobre espaços, momentos e situações entendidos como constitutivos da atividade escolha, na escola, mais especificamente, a respeito daqueles que se constituem como possíveis determinantes da escolha profissional. Para tanto, empreendemo-lo, por meio da mediação dos pressupostos teórico-metodológicos do materialismo histórico dialético, via psicologia sócio-histórica. Ao adotarmos, como referencial teórico-metodológico, a psicologia sócio-histórica, nos comprometemos com um determinado modo de investigar, registrar e por fim de analisar as informações produzidas nesse percurso. Modo este que nos levou, necessariamente, a trabalhar com categorias peculiares, tais como: Trabalho, mediação, alienação, necessidade, motivo, sentidos e significados. Assim, ancorados nos pressupostos produzidos por Vigotski, pudemos concretizar a pesquisa como via explicativa e não descritiva, podendo então, encaminhar nossos estudos para além da aparência do fenômeno estudado, considerando sua essência, isto é, seus traços essenciais (aspectos individuais, particulares e universais). Nessas condições, o presente estudo se deu em escola de ensino público, no desenvolvimento de um programa de orientação profissional com duas turmas de 3º ano de Ensino Médio. Na concretização do programa pudemos selecionar uma aluna, para então, iniciar um percurso de interlocução, através de entrevistas semi-dirigidas. Assim, pudemos focalizar a escolha como atividade (movimento da subjetividade objetivada em ação), em determinado contexto sócio-histórico e analisá-la como fenômeno imbricado com a realidade social. No processo de análise, mais precisamente, nos momentos conclusivos deste percurso, significou-se nos a preponderância da constituição de sentidos e significados sobre a escolha em geral, em detrimento dos relacionados especificamente, com a escolha profissional. Inferimos que, uma das possibilidades explicativas, sobre tal preponderância pode ser a não sistematização pedagógica de conteúdos relacionados com temas que contemplem o mundo do trabalho, das ocupações e das profissões, para além da espontaneidade casuística.

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