O objetivo do presente estudo foi o de analisar o efeito da irradiação com laser em baixa intensidade no sistema antioxidante enzimático de glândulas salivares submandibular (GSM) e parótida (GP) de ratas diabéticas induzidas por estreptozotocina. As ratas foram inicialmente divididas em grupos não-diabéticas (C) e diabéticas (D) e mantidas pelo período experimental de 30 dias. No vigésimo nono dia as ratas foram subdivididas em seis grupos, sendo três grupos de animais não diabéticos (C0, C5 e C20) e três de animais diabéticos (D0, D5 e D20), de acordo com a dose de irradiação laser que cada grupo recebeu (0, 5 e 20 J/cm2 respectivamente). Para a indução do diabetes foi realizada a injeção intraperitoneal de estreptozotocina (60 mg/kg de peso corporal) dissolvida em tampão citrato de sódio 0,1 M, pH 4,5. Os animais pertencentes aos grupos C (não diabéticos) receberam a injeção somente do veículo. As glicemias foram verificadas 72 horas após a indução do diabetes, para a confirmação do estado diabético nos grupos D. Foram considerados diabéticos os animais que apresentaram glicemia superior a 250mg de glicose/dl de sangue. A irradiação com laser em baixa intensidade seguiu a metodologia determinada pelo método de Simões et. al. (2009). Os animais foram eutanasiados 24 horas após a irradiação, sendo imediatamente removidas as glândulas salivares para a realização das análises bioquímicas. Foram determinados através de espectrofotometria, os valores de total antioxidante (TAS) e as atividades das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx). Através da análise dos resultados podemos concluir que em GSM de ratas diabéticas o laser com dose de 20J/cm2 causou aumento na atividade da enzima SOD. E independente da dose, causou aumento nos valores de TAS e atividade da enzima CAT. Já em GSM de ratas não diabéticas a dose de 20J/cm2 causou diminuição dos valores de TAS. E independente da dose a irradiação com laser levou a um aumento da atividade da enzima CAT. Nas parótidas de ratas diabéticas, independente da dose, a irradiação com laser causou diminuição da atividade da enzima CAT. E em GP de ratas não diabéticas a dose de 5J/cm2 causou diminuição da atividade da enzima CAT. / The aim of the present study was to analize the effect of low-power laser irradiation in the antioxidant enzymatic system of submandibular (GSM) and parotid (GP) salivary glands of diabetic rats induced by streptozotocin. The rats were initially divided into non-diabetic animals (C) and diabetic-animals (D) and maintained by the experimental period of thirty days. Twenty-nine days after diabetes induction, the animals were randomly divided into six groups: three diabetic groups (D0, D5 and D20) and three non-diabetic groups (C0, C5 and C20), according with laser irradiation dose that each one received (0, 5 and 20J/cm2, respectively). For diabetes induction an intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ) (60mg/Kg body weight), dissolved in 0.1M sodium citrate buffer, pH 4.5 was performed. In non-diabetic animals, only the citrate buffer was used. The diabetes condition was confirmed seventy-two hours after animals have received the STZ injection. Rats with blood glucose level higher than 14mM (250 mg/100ml) were considered diabetic. The laser irradiation was performed according to Simões et.al. method (2009). Twenty-four hours after the irradiation rats were euthanized. Then, immediately after the euthanasia, salivary glands were removed for biochemical analysis. The total antioxidant values (TAS) and the activity of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxide (GPx) enzymes were determined in spectrophotometer. Analyzing the results we can conclude that in GSM of diabetic rats the laser irradiation with 20J/cm2 increased the SOD activity. With the two different doses, increased the TAS values and CAT activity. However, in GSM of non-diabetic rats, laser irradiation with 20J/cm2, decreased the TAS values and led to an increase in CAT activity, regardless of the dose. In parotid glands laser irradiation decreased the CAT activity with either dose of 5J/cm2 or 20 J/cm2 and the laser irradiation with dose of 5J/cm2, decreased the CAT activity in parotid glands of non-diabetic rats.

RESUMO Proposta de um método prático para avaliação do poder de neutralização existente na cavidade oral.A prevenção da doença cárie ainda é uma das principais metas da Odontologia. Considerando a multifatoriedade de sua etiologia, torna-se necessário o conhecimento do maior número de informações possíveis a respeito do paciente para que o cirurgião-dentista possa estabelecer um plano de tratamento preventivo individualizado a seus pacientes. A saliva, devido a suas várias funções, apresenta grande importância no combate a patogênese da doença. A análise da capacidade tampão é de extrema importância para que se possa prever o risco do paciente ao desenvolvimento da doença cárie. Vários testes têm sido utilizados para a determinação da capacidade tampão salivar, sendo que alguns exigem equipamentos laboratoriais e outros, mais simplificados, que permitem a utilização no consultório odontológico. A proposta do presente trabalho foi desenvolver um método prático para determinação do poder neutralizante existente na cavidade oral. O método proposto consiste na realização de bochecho com 10 ml de Coca-cola® durante 30 segundos, por parte dos 50 participantes (crianças, adolescentes e adultos) e determinação da variação do pH entre a mistura saliva + Coca-cola® e o pH inicial do refrigerante. Foram realizados dois métodos de determinação da capacidade tampão salivar – titulação com ácido lático e o método simplificado Dentobuff Strip® -e, após teste de correlação entre o método de neutralização proposto e os dois testes descritos acima foi encontrada correlação estatisticamente significante entre o método proposto e a titulometria com ácido lático (Pearson=0,304;p=0,032). Porém em relação ao Dentobuff Strip® não foi verificada correlação estatisticamente significante. De acordo com a proposta da metodologia apresentada nesta pesquisa, foi encontrada uma média de neutralização da saliva após o bochecho com o refrigerante, de 23,8% (dp=16,5) até o pH crítico do esmalte (5,5) e considerando o pH fisiológico da saliva em torno de 7,0, a neutralização até este valor foi de 17% (dp=12,4). Diante dos resultados foi possível concluir que o método desenvolvido apresentou-se prático e satisfatório para avaliação da capacidade de neutralização existente na cavidade oral e pode ser utilizado como mais um recurso para predição do risco de cárie do paciente. / SUMMARY Caries prevention remains one of the main goals in dentistry. Since caries is a multifactorial disease, it becomes necessary to obtain all possible information about the patient during anamnesis. Hence, the professional is able to establish an individual preventive treatment for each patient. Saliva bears several functions in the oral cavity; consequently, it is an important host factor that modifies the caries process. Saliva buffering capacity is one of the important factors usually taken into account to predict the individual caries risk. Several tests have been applied to identify this saliva function. Some of them require laboratorial features, whereas others are easy to handle, and can be applied at dental offices. The purpose of the present study was to develop a practical method to assess the neutralizing power inherent of the oral cavity. The methodology was based on a rinse of Coke Ô for 30 seconds, performed by 50 subjects (including children, teenagers and adults), followed by the assessment of pH variation between the initial sample of soft drink and the final mixture (saliva + Coke Ô). Along with this method, two other well known buffer capacity tests were performed – titration with lactic acid and Dentobuff Strip®. We found statistically significant correlation between the proposed method and the titration with lactic acid (Pearson=0.304;p=0.032). On the other hand, there was no significant correlation between the proposed method and the test using Dentobuff Strip®. According to our results, the mean saliva neutralizing power after soft drink rinse, considering the cases of the critical enamel pH (5.5) and physiological saliva pH (7.0), were 23.8% (sd=16.5) and 17.0% (sd=12.4), respectively. The proposed method was practical and reliable to assess the neutralizing power of oral cavity and may be an additional technique to predict caries risk.

O objetivo desse estudo é o de avaliar o potencial efeito de uma goma de mascar (chiclete) experimental, que contém Cimento de Ionômero de Vidro (CIV), na prevenção da doença cárie. Metodologia: seleção de quinze crianças/adolescentes, com idade entre 06 e 19 anos, que necessitam da adoção de medidas de tratamento e prevenção à cárie. Após expresso Termo de Consentimento Livre e Esclarecido em participar, os sujeitos da pesquisa foram divididos aleatoriamente em três grupos distintos: Grupo A: goma de mascar experimental; Grupo B: goma de mascar neutra (placebo); Grupo C: selamentos convencionais não invasivos. Para a avaliação do potencial efeito preventivo à cárie foram realizadas repetidas avaliações clínicas e coleta de saliva total estimulada, para análises de pH, fluxo, capacidade tampão e concentração de flúor. Inspeções nas superfícies oclusais de molares e/ou prémolares foram realizadas por meio de minucioso exame clínico, documentação fotográfica com luz convencional, com luz fluorescente (Quantitative Light Fluorescence) e microscopia eletrônica de varredura, por meio de réplicas com silicona de adição, a fim de se constatar a presença de CIV nas áreas de cicatrículas e fissuras. Adicionalmente, foram aplicados questionários de perguntas e respostas aos responsáveis e aos próprios sujeitos da pesquisa, com objetivo de avaliar a aceitação da goma de mascar como veículo de finalidade terapêutica. Todas as análises foram feitas por pesquisadores independentes (exame cego). Resultados: as avaliações clínicas e fotográficas não demonstraram qualquer tipo de selamento das cicatrículas e fissuras de molares e/ou pré-molares bem como a análise de réplicas em microscopia eletrônica de varredura. No período avaliado, não foram identificadas áreas de remineralização com o uso de luz fluorescente. Os resultados laboratoriais demonstraram sinais favoráveis ao processo de remineralização dos tecidos dentários. Teste estatístico não paramétrico Kruskal-Wallis indicou significante aumento no fluxo e na capacidade tampão salivar, após o uso de uma goma de mascar e significante aumento da concentração de íons flúor salivar para os grupos A e C (p<0,05). De modo geral, os grupos A e B obtiveram boa receptividade. Conclusão: resultados apontam importantes indícios de um potencial remineralizante da goma com CIV. Esse atributo implica realização de futuros trabalhos com o veículo de liberação flúor utilizado nesse trabalho, especialmente se considerado o apelo comercial, a faixa etária média dos habituais usuários, a frequência e o tempo médio de permanência de uma goma de mascar na cavidade oral. Trabalhos em que os sujeitos da pesquisa tenham maior frequência de utilização (e não somente uma única ocorrência de uso), maior tempo de observação (estudo longitudinal), em diferentes apresentações e concentrações (diversos tipos de fluoretos), podem demonstrar que o uso de gomas de mascar, como veículo de liberação de flúor para a cavidade oral, é uma alternativa promissora às medidas de prevenção à cárie no potencial grupo de pacientes/consumidores. / The aim of this study is to evaluate the potential effect of a chewing gum containing experimental Glass Ionomer Cement (GIC) in preventing caries. Methodology: fifteen children / adolescents aged between 06 and 19 years old in need of treatment and prevention of dental caries were selected. After formal agreement to take part in the research, the participants were divided randomly into three groups: Group A: experimental gum; Group B: neutral gum (placebo); Group C: conventional noninvasive sealing. To assess the potential preventive effect on caries, repeated clinical assessments were carried out, as well as a collection of stimulated saliva for analysis of pH, flow, buffering capacity and fluoride concentration. In order to verify the presence of GIC in the areas of pits and fissures, inspections on the occlusal surfaces of molars and / or premolars were conduced by thorough clinical examination, photographic documentation with conventional light, fluorescent light (Quantitative Light Fluorescence) and scanning electron microscopy, using replicas with addition silicone. Additionally, volunteers and researchs staff were submitted to extensive questionnaires, aiming to evaluate the acceptance of chewing gum as a vehicle for therapeutic purposes. All analyses were conducted by independent researchers (blind review). Results: neither clinical and photographic assessments, nor analyses of replicas in scanning electron microscopy showed any kind of sealing pits and fissures of molars and / or premolars. During the specified period, any kind of remineralization was identified with the use of fluorescent light. Nevertheless, laboratory results showed favorable signs in the process of remineralization of dental tissues. Nonparametric statistical test Kruskal-Wallis indicated a significant increase in flow and buffering capacity of saliva after the use of chewing gum, and a significant increase in salivary fluoride concentration for groups A and C (p<0.05). As a general rule, groups A and B showed good responsiveness. Conclusion: the results showed significant evidence that gums containing GIC present a significant remineralizing potential. This attribute implies the realization of further researches making use of this vehicle for fluoride release, especially if we consider its commercial appeal, the average age of regular users, the frequency and mean duration of a chewing gum in the oral cavity. Works in which the subjects have a higher frequency of use (and not just a single instance of use), a longer observation time (longitudinal study), in different concentrations and presentations (different types of fluoride), demonstrate that the use of chewing gum as a vehicle for fluoride release into the oral cavity is a promising alternative for the prevention of tooth decay in a potential group of patients/consumers.

Na prática das atividades físicas há, enquanto o metabolismo energético ocorre, a transformação de subprodutos das reações metabólicas. Uma das substancias formadas é o Lactato, que auxilia a atividade motora durante sua contração, servindo como fonte energética. Porém quando o atleta apresenta atividade intensa de treino seu organismo é incapaz de eliminar as altas concentrações deste subproduto, sobrecarregando as vias de eliminação do ácido lático. Se a presença de tal ácido em grandes concentrações causa alterações de pH salivar, isso pode levar a lesões nas estruturas dentais e de suporte, além de mucosas e língua, podendo, a longo prazo, alterar oclusão, mastigação, bem como causar hipersensibilidade dentinária, dores e podendo ser maléfico ao desempenho do atleta que sofre de tais condições. O objetivo do estudo é observar, por meio de mensuração do Lactato salivar em sobrenadante de saliva, se há alteração do pH salivar após os treinos realizados. Foram coletadas amostras de 124 indivíduos, pré e pós treino em tubos Falcon, contendo 2ml de saliva de cada voluntário, que foram submetidas à centrífuga Eppendorf 5804®, pipetados com pipetas Nichiryo Nichipet P1000® e o sobrenadante das salivas pré e pós esforços foi testado laboratorialmente por meio do pHmetro pH 150 policontrol e lactímetro YSI 1500. O lactato teve média pré-esforço uma concentração de 0,299 mmol/L de saliva, a média pós-esforço subiu para 1,416 mmol/L. Enquanto que o pH teve durante as coletas pré esforço um valor médio de 7,09, a análise pós esforço nos deu um valor médio de pH em 5,87. Observa-se que atividades intensas podem influenciar o pH oral e, consequentemente, causar possíveis lesões em estruturas orais desde que associadas a outros fatores, como má higiene, dieta rica em açúcares, isotônicos, e assim, trazer malefícios para a saúde oral dos atletas e esportistas amadores. / When practicing physical activities are noticed, while the energy metabolism occurs, the processing byproducts of metabolic reactions. One of the substances formed is Lactate, which aids motor activity during its contraction, serving as an energy source. But when the athlete has some intense activities their body is unable to eliminate high concentrations of this byproduct, burdening the acid elimination pathways. If the presence of such acid, in high concentrations, can cause pH changes salivate, this process can lead to injuries in the dental structures and in the support tissues, as mucous membranes and tongue. Which possibly can change occlusion, quality nutrition, causing tooth sensitivity, pain, and may be harmful to the performance of the athlete who suffer from such conditions. By the measurement of salivary lactate in saliva supernatant, and pH present in these samples from athletes in activity, will be observed if there are changes during scheduled practice. Samples of 124 athletes were collected before and after training, where saliva was deposited on Falcon® tubes containing 2 ml of this body fluid from each volunteer, what underwent Eppendorf centrifuge 5804®, pipetted with Nichiryo Nichipet P1000® pipettes and the supernatant of pre and after saliva efforts has been tested in laboratory for measurement with pHmeter pH policontrol 150® and lactometer YSI 1500®. Lactate, averaged prestressing a concentration of 0.299 mmol/L of saliva, the post-exercise average climbed to 1,416 mmol/L. While the pH during pre-effort has collected an average of 7,09, the post stress analysis gave an average value of pH 5.87. It is observed that intense activities can influence the oral pH and thus cause possible injuries in oral structures from that associated with other factors such as poor hygiene, diet rich in sugars, sports drinks, and thus bring harm to the oral health of athletes.

A ansiedade ao atendimento odontológico, apesar do aprimoramento das técnicas e dos materiais, ainda é freqüente em pacientes de urgência. O objetivo deste trabalho foi relacionar ansiedade ao tratamento odontológico à concentração de cortisol salivar de pacientes em atendimento de urgência odontológica, com e sem queixa de dor. Foram entrevistados 73 pacientes entre 18 a 76 anos (média 38,22 anos) que compareceram ao Setor de Urgência Odontológica da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo (SUO-FOUSP), e coletadas amostras de saliva para mensuração do cortisol salivar antes do atendimento. A ansiedade foi medida através da Modified Dental Anxiety Scale (MDAS) e a intensidade da dor através da escala visual analógica (VAS). Foram classificados como ansiosos 30 participantes e 41 relataram dor. Os ansiosos relataram maior vivência de eventos traumatizantes (p<0,05), relacionados aos procedimentos mais invasivos. Não houve relação entre ansiedade e concentração de cortisol salivar. Entre os gêneros, só houve diferença no grupo dos não ansiosos (p<0,05). Pacientes não ansiosas independente da dor apresentavam menor concentração de cortisol que seus pares. Pacientes com dor eram mais jovens e apresentavam maior concentração de cortisol salivar (p<0,05). A concentração de cortisol aumentou com a intensidade da dor medida pela VAS. Houve diferença nos níveis de cortisol entre ansiosos com e sem dor (p<0,05), entre não ansiosos com dor e ansiosos sem dor (p<0,05) e entre os não ansiosos com e sem dor (p<0,05). Apesar da ansiedade ao tratamento odontológico ter efeito sobre os níveis de cortisol salivar, a dor desencadeia maior liberação do hormônio. / Dental anxiety is still prevalent in patients undergoing urgency attendance, despite technical and materials improvements. The purpose of this study was to determine the relationship between dental anxiety and salivary cortisol concentrations in urgency patients in Setor de Urgência Odontológica da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo (SUO-FOUSP).The mean age of participants was 38,22 years (range 18 to 76). 73 patients completed a questionnaire including the Modified Dental Anxiety Scale (MDAS) and provided a saliva sample prior to attendance. Pain intensity was assessed by a visual analogue scale (VAS). Among the participants 30 were dentally anxious and 41 had a pain complaint. There were no differences in gender and age between anxious and non anxious patients. Anxious patients reported more aversive experiences (p<0,05), mainly related to surgical and anesthetic procedures. There was no relationship between dental anxiety and salivary cortisol concentration. There was a difference between gender only in non anxious group (p<0,05). Non anxious female patients had lower concentration than their counterparts. Patients with pain complaint were younger and showed higher salivary cortisol concentrations (p<0,05). Salivary cortisol concentration increased with pain intensity measured by VAS, but there was no difference between the extremes (VAS until 10mm e VAS up to de 91mm). There was a statistical difference in salivary cortisol levels between anxious patients with and without pain (p<0,05), between non anxious patients with pain and anxious patients without pain (p<0,05) and between non anxious patients with and without pain (p<0,05). Although dental anxiety induces stress, pain was a stronger stimulus for increases in salivary cortisol concentration.

O presente projeto levantou uma discussão a respeito das condições psicológicas, fisiológicas e éticas pelas quais passam os cães de trabalho da Polícia Militar, com foco em investigar se a rotina de trabalho leva a condições de estresse e a influência desses fatores no desempenho reprodutivo e na qualidade de vida dos animais. O estudo foi realizado no Canil da Polícia Militar de Campinas, com a participação de oito cães machos de quatro diferentes raças (2 Pastor Alemão, 2 Belga Malinois, 2 Dobermann e 2 Rotwailler), sendo divididos em dois períodos: Período trabalho - animais que estavam em treinamento e trabalho e Período controle - animais que estavam no dia de descanso. Foram colhidas amostras de saliva para a dosagem de cortisol no método de eletroquimioluminescência, fez-se a observação comportamental através da elaboração e analise de um etograma de trabalho e houve a coleta e análise de sêmen. Os resultados mostraram concentrações médias de cortisol salivar no Período Controle de 0,361 à 0,438&micro;g/dl e no Período trabalho 0,312 à 0,592 &micro;g/dl, sendo os maiores valores encontrados após o retorno do trabalho. Nas avaliações de comportamento observamos que na maior parte do período, os animais apresentaram-se em repouso e poucos comportamentos estereotipados foram destacados e as raças Pastor Alemão, Belga Malinois e Dobermann apresentaram parâmetros seminais desejáveis. A raça Rotwailler apresentou cortisol elevado, comportamentos estereotipados e maior taxa de anormalidades espermáticas, portanto acreditamos que não seja a raça mais indicada para os trabalhos desenvolvidos pelas polícias Nosso estudo indica que os cães de trabalho avaliados adaptados ao ambiente desde filhote, apresentam boa capacidade de adaptação ao ambiente de confinamento rotina de trabalho e treinamento, uma vez que não sofrem distresse. / This project raised a discussion about the psychological and ethical conditions under which pass the military working dogs, on investigating whether routine work leads to stress conditions and the influence of these factors on reproductive performance and quality of animals life. The study was conducted at military police Kennel in Campinas, using 8 male dogs of 4 different races (2 German Shepherd, 2 Belgian Malinois, 2 Dobermann and 2 Rotwailler), divided into two periods: Period work - animals that were in training and work and control period - animals that were in day off. Saliva samples were collected for cortisol measurement in eletroquimioluminecence method, behavioral observation through the preparation and analysis of a ethogram and collection and analysis semen. Our results showed average concentrations of salivary cortisol in the control period of 0.361 to 0.438 and 0.312 to 0.592 working period, with the highest values found after returning from work. In behavioral assessments we observed that in most of the period, the animals showed up at rest and few stereotyped behaviors were highlighted and. The breeds German Shepherd, Belgian Malinois and Dobermann showed desirable semen parameters, which did not occur in Rotwailler. The Rotwailler breed had high cortisol, stereotyped behaviors and higher rate of sperm abnormalities, so we believe that it is not the most suitable breed for the military working dog. Our study indicates that the assessed working dogs adapted to the environment as a puppy, show good ability to adaptation to environmental containment routine work and training, since it does not suffer distress.

Determinação da composição da Película Adquirida formada sobre o esmalte humano in vivo e da sua modificação após estimulação química e mecânica do fluxo salivar: estudo proteômico. Todas as superfícies sólidas expostas na cavidade bucal são cobertas por uma camada proteinácea denominada película adquirida do esmalte. Trata-se de um filme orgânico, livre de bactérias, que recobre os tecidos dentários e é composto basicamente por proteínas. Diversos trabalhos têm se concentrado na caracterização e no impacto protetor da película adquirida formada sobre a superfície do esmalte. Porém tanto para a película adquirida formada sobre o esmalte in situ quanto in vivo, as considerações sobre o tipo de saliva que contribuiu para sua formação são bastante limitadas, senão inexistentes. Com base nisto, o objetivo deste estudo foi comparar o perfil proteico em películas adquiridas formadas in vivo sobre o esmalte humano em condições de repouso, bem como analisar as películas formadas após estimulação salivar mecânica e química, através de espectrometria de massa. Os experimentos foram realizados por três dias consecutivos, seguindo um delineamento cruzado. Em cada dia, os voluntários (n=9) receberam uma meticulosa profilaxia dentária. Em seguida, aguardaram por duas horas para que a película adquirida fosse formada naturalmente sobre o esmalte (saliva não estimulada Grupo 1, controle). Após o período em questão, cada quadrante da boca foi enxaguado, seco e a película adquirida foi então coletada com auxílio de um papel filtro de eletrodos (electrode wick filter paper, Bio-Rad) embebido em ácido cítrico 3%. Os procedimentos descritos acima foramrepetidos em outros dois dias consecutivos para cada voluntário, sendo que em um dos dias os voluntários estimularam o fluxo salivar mecanicamente (saliva com estimulação mecânica Grupo 2), através da mastigação de Parafilm®, durante o mesmo período de tempo. Em outro dia, o fluxo salivar foi estimulado através de gotejamento de ácido cítrico 2% (p/v) em ambas as bordas laterais da língua, em intervalos de 1 minuto, durante o mesmo período de tempo. O restante dos procedimentos foi repetido como descrito. Para cada grupo, foi feito um pool com os papéis de filtro dos 9 voluntários. Após extração e digestão das proteínas presentes nos papéis, foi realizada a separação dos peptídeos por nano-HPLC (nano- Cromatografia Líquida de Alta Performace) interligada a um espectrômetro de massa (LC-ESI-MS/MS). Os dados MS/MS obtidos foram processados e pesquisados junto ao banco de dados de proteínas humanas (UniProt and TrEMBL, Swiss Institute of Bioinformatics) utilizando algorítimo SEQUEST no software Proteome Discoverer 1.3 (Thermo Scientific). Foram detectadas no total 115 proteínas/peptídeos identificados por pelo menos dois peptídeos. Todos apareceram em pelo menos três corridas de cada Grupo, sendo que 51 proteínas apareceram nos três grupos. O perfil protéico da película adquirida foi semelhante em todos os grupos, embora tenham sido detectadas proteínas específicas para cada grupo. Utilizando a tecnologia de quantificação SIEVE, foi observado que a concentração de proteínas foi maior nos grupos nos quais houve estimulação salivar (2 e 3). Os resultados sugerem que a estimulação do fluxo salivar, tanto mecânica quanto química, promove a formação de película adquirida com maior concentração de proteínas protetoras como anidrase carbônica, mucinas, cistatinas e imunoglobulinas, o que pode resultar num maior caráter protetor para o esmalte dentário. Contudo, são necessários mais estudos para se compreender por completo o complexo processo de formação (mediante variadas condições) e as dinâmicas funções deste importante tegumento. / All solid surfaces exposed in the oral cavity are covered by a closely adherent protein film termed the acquired enamel pellicle (AEP). It is an organic, bacteria-free film that overlies the hard dental tissues and is basically composed by glycoproteins and proteins. Recently, many studies have focused on the characterization and the protector impact of the acquired pellicle formed over the enamel surface. However either for the in situ or in vivo formed AEP, information regarding the type of saliva which has contributed for its formation is quite limited, or even inexistent. Based on this, the aim of the present study was to compare the protein profile of acquired pellicles formed in vivo over the human enamel surfaces under resting condition and also to analyze the protein profile of the pellicles formed after mechanical and chemical salivary flow stimulation using mass spectrometry. The experiments were performed on three consecutive days, following a crossover design. On each day, the volunteers (n=9) received a meticulous dental prophylaxis and then waited for two hours to allow the AEP formation (non stimulated saliva - group 1). After the time span, each quadrant of the mouth was rinsed with water, dried by air spray and then the collection of the AEP was carried out using a filter paper (electrode wick filter paper, Bio-Rad) presoaked in 3% citric acid The procedures described above were repeated on two other consecutive days for each volunteer. However, in one day their salivary flow was mechanically stimulated (mechanical stimulation Group 2) by chewing on Parafilm® during the same period of time. In another day, the salivary flow was chemically stimulated (Chemical stimulation Group 3) by 2% citric acid drops on each side of the tongue, once per minute, for the same period of time. For each group, a pool with the wick filters from all 9 volunteers was made. After the extraction and digestion of the proteins from the paper strips, peptide separation and mass spectrometric analyses were carried out with a nano-HPLC Proxeon linked to mass spectrometer (LC-ESI-MS/MS). The obtained MS/MS spectra were searched against human protein databases (UniProt and TrEMBL, Swiss Institute of Bioinformatics) using SEQUEST algorithm in Proteome Discoverer 1.3 software (Thermo Scientific). The combination of all 3 experiments yielded a total of 115 proteins/peptides identified by at least two peptides. All proteins were identified in at least three runs at each Group fifty-one proteins were found in all three Groups. The protein profile of the AEP observed in each study group was similar, but all groups presented specific proteins. Using the SIEVE quantification technology, it was observed that the amount of proteins that compose the AEP was greater in the groups in which the salivary stimulation was performed (2 and 3). The data suggest that salivary flow stimulation, either mechanical or chemical/gustatory, promotes the formation of AEP with higher concentration of protective proteins, such as carbonic anhydrase, mucins, cystatins and immunoglobulins, which may result with a greater protective character for the tooth enamel. However, further studies are necessary to fully understand the complex process of formation (under various conditions) and the dynamic functions of this important integument.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Este trabalho teve como objetivo elucidar o efeito do 5-fluorouracil (5-FU) em glÃndulas salivares maiores, fluxo e composiÃÃo salivar, utilizando um modelo prà estabelecido de mucosite oral (MO) induzida em hamsters. A MO foi induzida por administraÃÃes intraperitoneais de 5-FU, nos 1 e 2 dias do modelo experimental (60mg/kg e 40mg/kg, respectivamente). No 4 dia, os animais foram submetidos ao trauma mecÃnico em mucosa jugal. Previamente a coleta das glÃndulas salivares, foi administrado pilocarpina (10mg/kg) para a medida do fluxo salivar e posterior coleta da saliva. As glÃndulas salivares maiores foram coletadas para anÃlise histopatolÃgica, contagem das cÃlulas inflamatÃrias, avaliaÃÃo do estresse oxidativo (SOD, CAT, nitrito/nitrato, NPSH e MDA), quantificaÃÃo de citocinas prÃ-inflamatÃrias (TNF-&#945; e IL-1&#946;) e investigaÃÃo de morte e proliferaÃÃo celular celular, nÃveis de CAT, SOD, lisozima e IgA foram avaliados em amostras de saliva. Os resultados mostraram que o 5-FU reduziu significativamente o fluxo salivar estimulado pela pilocarpina no 4 dia do modelo experimental, associado ao aumento dos nÃveis de SOD na saliva. No 10 dia, foi observada recuperaÃÃo do fluxo salivar, concomitante a reduÃÃo dos nÃveis de lisozima de saliva. AlÃm disso, o 5-FU promoveu vacuolizaÃÃo na glÃndula parÃtida e edema periductal na glÃndula submandibular no 4 dia, associada ao aumento do influxo de cÃlulas inflamatÃrias, principalmente no 4 dia na glÃndula submandibular e nos 4 e 10 dias na glÃndula parÃtida. O 5-FU estimulou a produÃÃo de citocinas prÃ-inflamatÃrias (IL-1&#946; e TNF-&#945;) no dia 10 nas glÃndulas submandibular e sublingual concomitante ao estresse oxidativo. Contudo, apesar do aumento do estresse oxidativo no 10 dia, o 5-FU produziu efeito inibitÃrio das mesmas citocinas prÃ-inflamatÃrias na glÃndula parÃtida. De acordo com os resultados acima descritos, podemos concluir que o 5-FU induz resposta inflamatÃria nas glÃndulas salivares maiores, mais frequentemente observado 10 dias apÃs a primeira administraÃÃo do 5-FU, o que pode contribuir para a hipofunÃÃo das glÃndulas salivares, levando a alteraÃÃes no fluxo e composiÃÃo salivar. / The aim of this study was to elucidate the effect of 5-Fluorouracil (5-FU) on major salivary glands, salivary flow and saliva composition using an established oral mucositis (OM) model, in hamsters. OM was induced by two intraperitoneal administrations of 5-FU on 1st and 2nd days of the experimental model (60mg/kg and 40mg/kg, respectively), followed by cheek pouch mucosa scratch. Pilocarpine stimulated salivary flow were measured, saliva was collected, salivary glands were harvested for histopathologycal analysis, measurement of inflammatory cells, evaluation of oxidative stress (SOD, CAT, nitrite, NP-SH and MDA), quantification of pro-inflammatory cytokines (TNF-&#945; and IL-1&#946;) and investigation of cell death and proliferation. CAT and lysozyme activities and IgA and SOD levels were evaluated in saliva samples. This study demonstrated that 5-FU significantly reduced the pilocarpine stimulated salivary flow rate on the 4th experimental day, associated with an increase in SOD levels in saliva. Recovery of salivary flow was observed on day 10, when a decrease in the saliva lysozyme levels was detected. In addition, 5-FU promoted vacuolization in parotid gland and periductal edema in submandibular gland, combined with an increase in the inflammatory cells influx, mostly observed on the 4th day in submandibular gland and on 4th and 10th days in parotid gland. 5-FU stimulated pro-inflammatory cytokines (TNF-&#945; and IL-1&#946;) production on 10th day in submandibular and sublingual glands associated with oxidative stress. Although the stimulation of oxidative stress on 10th day, 5-FU promoted inhibitory effect on both pro-inflammatory cytokines in parotid gland. According to the above mentioned results, 5-FU induced an inflammatory response in major salivary glands, most observed 10 days after its first injection, which may contribute to glands hypofunction, leading to alterations in the salivary flow rate and composition.

Displasia ectodérmica hipoidrótica é uma doença genética rara, clinicamente caracterizada por alterações envolvendo os dentes, pele e suas estruturas anexas. Manifestações orais comuns incluem anadontia ou oligodontia, dentes conóides e xerostomia. Poucos relatos associam displasia ectodérmica e redução do fluxo salivar. O objetivo desse estudo é analisar possíveis alterações nas glândulas salivares de dez portadores de displasia ectodérmica que fazem acompanhamento no Departamento de Dermatologia Pediátrica da Universidade de São Paulo. Ultrassonografia foi realizada em dez casos em infantes portadores de displasia ectodérmica hipoidrótica nas suas glândulas salivares parótida e submandibular. Três apresentaram alterações na glândula parótida e/ou submandibular. Aplasia ou hipoplasia das glândulas salivares maiores é associada a casos de displasia ectodérmica e sugere-se acompanhamento rotineiro das glândulas salivares maiores usando ultrassonografia para prevenção de alterações decorrentes da hiposalivação na cavidade oral. / Background- Hypohidrotic ectodermal dysplasia is a rare genetic disease, clinically characterized by defects involving skin and their adnexal structures, as well as oral structures such as teeth, and occasionally salivary glands. These latter manifestations include anodontia or hypodontia, conical teeth and xerostomia. Objective- To analyze possible alterations in major salivary glands of ten patients with ectodermal dysplasia, using image exam. Methods- Ultrasonography was performed in ten pediatric cases of hypohidrotic ectodermal dysplasia to investigate the status of parotid and submandibular salivary gland. Results- Three patients presented aplasia/hypoplasia of at least one gland examined. The other 7 patients did not present any alterations in parotid and submandibular glands. Limitations- Although ultrasonography exam is adequate to investigate the presence and status of major salivary glands, other important glands such as sublingual and minor mucous salivary glands are not well-visualized using this technique. Conclusions- Aplasia or hypoplasia of the major salivary gland is strongly related to ectodermal dysplasia and we suggest routine evaluation of the major salivary gland using ultrasound to monitor and manage the possible impact of xerostomia in oral health.

RESUMO Proposta de um método prático para avaliação do poder de neutralização existente na cavidade oral.A prevenção da doença cárie ainda é uma das principais metas da Odontologia. Considerando a multifatoriedade de sua etiologia, torna-se necessário o conhecimento do maior número de informações possíveis a respeito do paciente para que o cirurgião-dentista possa estabelecer um plano de tratamento preventivo individualizado a seus pacientes. A saliva, devido a suas várias funções, apresenta grande importância no combate a patogênese da doença. A análise da capacidade tampão é de extrema importância para que se possa prever o risco do paciente ao desenvolvimento da doença cárie. Vários testes têm sido utilizados para a determinação da capacidade tampão salivar, sendo que alguns exigem equipamentos laboratoriais e outros, mais simplificados, que permitem a utilização no consultório odontológico. A proposta do presente trabalho foi desenvolver um método prático para determinação do poder neutralizante existente na cavidade oral. O método proposto consiste na realização de bochecho com 10 ml de Coca-cola® durante 30 segundos, por parte dos 50 participantes (crianças, adolescentes e adultos) e determinação da variação do pH entre a mistura saliva + Coca-cola® e o pH inicial do refrigerante. Foram realizados dois métodos de determinação da capacidade tampão salivar – titulação com ácido lático e o método simplificado Dentobuff Strip® -e, após teste de correlação entre o método de neutralização proposto e os dois testes descritos acima foi encontrada correlação estatisticamente significante entre o método proposto e a titulometria com ácido lático (Pearson=0,304;p=0,032). Porém em relação ao Dentobuff Strip® não foi verificada correlação estatisticamente significante. De acordo com a proposta da metodologia apresentada nesta pesquisa, foi encontrada uma média de neutralização da saliva após o bochecho com o refrigerante, de 23,8% (dp=16,5) até o pH crítico do esmalte (5,5) e considerando o pH fisiológico da saliva em torno de 7,0, a neutralização até este valor foi de 17% (dp=12,4). Diante dos resultados foi possível concluir que o método desenvolvido apresentou-se prático e satisfatório para avaliação da capacidade de neutralização existente na cavidade oral e pode ser utilizado como mais um recurso para predição do risco de cárie do paciente. / SUMMARY Caries prevention remains one of the main goals in dentistry. Since caries is a multifactorial disease, it becomes necessary to obtain all possible information about the patient during anamnesis. Hence, the professional is able to establish an individual preventive treatment for each patient. Saliva bears several functions in the oral cavity; consequently, it is an important host factor that modifies the caries process. Saliva buffering capacity is one of the important factors usually taken into account to predict the individual caries risk. Several tests have been applied to identify this saliva function. Some of them require laboratorial features, whereas others are easy to handle, and can be applied at dental offices. The purpose of the present study was to develop a practical method to assess the neutralizing power inherent of the oral cavity. The methodology was based on a rinse of Coke Ô for 30 seconds, performed by 50 subjects (including children, teenagers and adults), followed by the assessment of pH variation between the initial sample of soft drink and the final mixture (saliva + Coke Ô). Along with this method, two other well known buffer capacity tests were performed – titration with lactic acid and Dentobuff Strip®. We found statistically significant correlation between the proposed method and the titration with lactic acid (Pearson=0.304;p=0.032). On the other hand, there was no significant correlation between the proposed method and the test using Dentobuff Strip®. According to our results, the mean saliva neutralizing power after soft drink rinse, considering the cases of the critical enamel pH (5.5) and physiological saliva pH (7.0), were 23.8% (sd=16.5) and 17.0% (sd=12.4), respectively. The proposed method was practical and reliable to assess the neutralizing power of oral cavity and may be an additional technique to predict caries risk.