Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Felipe Rydygier de Ruediger.pdf: 337503 bytes, checksum: 788a40d59ee5b6ff8427348218069a3d (MD5) Previous issue date: 2014-06-20 / Reproductive efficiency is one of factors for improving livestock production indices cutting factors. The contribution of the bull to the reproductive efficiency of the herd is of great importance. Bovine testes should be kept below the core body temperature for the production of morphologically viable, normal sperm. The scrotal and testicular thermoregulation is a system for maintaining the physiological temperature of the testicles. Infrared thermography is a noninvasive technique that is used to measure the surface temperature of the scrotum bulls. The objective of this work was to study the relationship of scrotal temperature on semen quality by use of infrared thermography in Nellore bulls bred extensively. 6 Nellore by performing scrotal thermography and semen collection every 10 days were used, totaling 36 ejaculates. Climatic data were collected through globe thermometer. The thermograms of the scrotum were obtained by digital infrared thermography and analyzed by software to the scrotal surface temperatures, the right and left sides, neck of the scrotum, dorsal thirds, middle, and ventral of the testes and cauda epididymis. We conducted ejaculates through electroejaculation for analysis of quantitative and qualitative characteristics. For the data, we used analysis of variance and subsequently applied the Tukey test at 5%, and Pearson correlation. There was a positive correlation between sperm motility and the temperatures of the scrotum; between concentration and temperature of the scrotum; between climatic factors and rectal temperature. There was a negative correlation between temperature and sperm concentration (p <0.05). There was no correlation between the climatic data, and temperatures between the scrotum and rectal temperature and temperature of the scrotum. It was concluded that the surface temperatures of the scrotum and climatic factors, temperature and humidity, influence the quality of semen. Thermography is recommended as a complementary test in the evaluation of reproductive bulls. / A eficiência reprodutiva é um dos fatores determinantes para melhorar os índices zootécnicos da pecuária de corte. A contribuição do touro para a eficiência reprodutiva do rebanho é de grande importância. Os testículos bovinos devem ser mantidos abaixo da temperatura corporal central, para a produção de espermatozoides morfologicamente viáveis, normais. A termorregulação escrotal e testicular é um sistema de manutenção da temperatura fisiológica dos testículos. A termografia infravermelha é uma técnica não invasiva que é utilizada para medir a temperatura da superfície escrotal em touros. O objetivo deste trabalho, foi de estudar a relação da temperatura do escroto sobre a qualidade seminal pelo uso da termografia por infravermelho em touros Nelore criados extensivamente. Foram utilizados 6 touros Nelore realizando-se termografia escrotal e colheita de sêmen a cada 10 dias, totalizando 36 ejaculados. Os dados climáticos foram coletados por meio de globo termômetro. Os termogramas do escroto foram obtidos por meio de termografia digital de infravermelho e analisados por meio de software para as temperaturas da superfície escrotal, dos lados direito e esquerdo, colo do escroto, terços dorsal, médio, e ventral dos testículos e cauda do epidídimo. Efetuou-se colheitas de sêmen, por meio de eletroejaculação para analise das características quantitativas e qualitativas. Para os dados, utilizou-se análise de variância e posteriormente aplicou-se o teste de Tukey a 5%, e correlação linear de Pearson. Houve correlação positiva entre motilidade espermática e as temperaturas do escroto; entre concentração, e as temperaturas do escroto; entre os fatores climáticos e temperatura retal. Houve correlação negativa entre temperatura ambiente e concentração espermática (p<0,05). Não houve correlação entre os dados climáticos, e as temperaturas do escroto e entre temperatura retal e as temperaturas do escroto. Concluiu-se que as temperaturas da superfície do escroto e os fatores climáticos, temperatura e umidade do ar, influenciaram na qualidade do sêmen. A termografia é recomendada como exame complementar na avaliação reprodutiva de touros.

Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fernando.pdf: 431045 bytes, checksum: 5ae1b35993c556c6871734dee523f3dc (MD5) Previous issue date: 2008-06-26 / Libido is an important component of a bull s breeding ability; however it is difficult to make as assessment of libido during a breeding soundness examination. It is best assessed in young bulls and scrotal circumference is favorably correlated with semen traits. Sixteen Brangus and eight Brown-Swiss bulls, with 36 months old, extensively managed were evaluated. The objective of this work is to study the relationship between scrotal circumference, libido, hormones and semen characteristics in Brangus and Brown-Swiss bulls. Bulls were divided into two experimental groups: group 1, with 16 bulls Brangus, and group 2, with 8 bulls Brown-Swiss, evaluated for sexual soundness using physical and morphological characteristics of semen, sexual behavior, testosterone and cortisol serum concentrations. There was a difference in the serum testosterone (P<0,05) and cortisol (P<0,01) concentrations between groups. No correlation (P>0,05) between libido, scrotal circumference, motility , concentration, testosterone and major defects were obtained. It was observed correlation among motility and mass movement (0,50; P<0,01), vigor and mass movement (0,58; P<0,01), libido and vigor (0,55; P<0,01), libido and cortisol (-0,41; P<0,05). In conclusion, were not correlations between libido and sperm quality, libido and scrotal circumference, libido and testosterone. / A libido é um importante componente da habilidade de procriação dos touros, todavia, não é fácil realizar a mensuração da mesma durante o exame do aparelho reprodutor. A libido é melhor traduzida em touros jovens e a circunferência escrotal está favoravelmente correlacionada com o perfil do sêmen. Dezesseis touros Brangus e oito Pardos-suiços, com 36 meses de idade, criados extensivamente, foram avaliados. O objetivo deste trabalho foi estudar as relações entre circunferência escrotal, libido, hormônios e características do sêmen em touros Brangus e Pardos-suiços. Os touros foram divididos em dois grupos experimentais: grupo 1, com 16 touros Brangus e grupo 2, com 8 touros Pardos-suiços, avaliados sexualmente por meio de exame físico e das características morfológicas do sêmen, comportamento sexual e concentrações séricas de testosterona e cortisol. Houve diferença nas concentrações séricas de testosterona (P>0,05) entre libido, circunferência escrotal, motilidade, concentração, testosterona e defeitos maiores foi obtida. Observou-se correlação entre motilidade e turbilhão (0,50: P<0,05), vigor e turbilhão (0,58: P<0,01), libido e vigor (0,55; p<0,01) e para libido e cortisol (-0,41; P<0,05). Conclui-se que não há correlações entre libido e qualidade espermática, libido e circunferência escrotal e entre libido e testosterona.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao.pdf: 371163 bytes, checksum: 00d67c3200895b27fd357306527c561c (MD5) Previous issue date: 2011-03-18 / The objective of this work was to study the seasons influence (spring, summer, autumn and winter) on semen characteristics and hormones (testosterone and cortisol) in Nelore and Simental bulls. Five Nelore and five Simental bulls were 48-72 months old, extensively managed, were evaluated for sexual soundness using physical and morphological characteristics of semen and hormonal serum levels. There was decreased motility and vigor semen (P<0.05) during winter in Simental bulls. There was correlation between serum testosterone and cortisol (P<0.01) to motility and vigor in either Nelore and Simental bulls. In conclusion, these results showed a hormonal and semen characteristics variation throughout the season change the semen quality. Bulls from Nelore breed differed from Simental, demonstrating adaptability to the field conditions. / O objetivo desse trabalho foi estudar a influência das quatro estações do ano: (primavera, verão, outono e inverno), nas características do sêmen e nos níveis de testosterona e cortisol em touros Nelore e Simental. Cinco touros Nelore e cinco Simental com 48-72 meses de idade, criados extensivamente, foram avaliados andrologicamente por meio de exame físico e das características morfológicas do sêmen, concentrações séricas de testosterona e cortisol. Houve queda na motilidade e vigor do sêmen no inverno (p<0,05) para a raça Simental. Houve correlação entre a concentração sérica de testosterona e cortisol (P<0,01) para a motilidade e vigor espermático para os touros Nelore e Simental. Conclui-se que houve variação hormonal e nas características do sêmen ao longo das estações modificando a qualidade do sêmen. Os touros da raça Nelore diferiram dos da raça Simental, demonstrando adaptabilidade às condições do campo.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aline Silva.pdf: 343244 bytes, checksum: 747b2ff671732dd29f9e774a854fb28c (MD5) Previous issue date: 2012-09-20 / The Bulls have a great influence on the genetic composition of livestock so it is necessary to know the evidence of modern evaluation and apply them, thus obtaining, breeding for reproductive traits through the use of semen quality. The spermiogram conjunction with techniques such as scrotal thermogram and electrophoresis, to detect possible proteins in seminal plasma markers of fertility may contribute significantly to the selection of superior breeding. This study will use 10 Nelore bulls aged 30 months raised on a farm in the municipality of Presidente Prudente-SP, which will be evaluated during 6 months of the year (spring and summer), will be held 12 semen samples with an interval of 15 days. Be done spermiogram electrophoresis on polyacrylamide gel (SDS-PAGE) and the measured surface temperature for half of the scrotum infrared thermometer for obtaining the temperature gradient scrotal animals. The environment will be monitored daily for the minimum and maximum temperatures and relative humidity. The goal from study to study the influence of climatic factors on the surface temperature of the scrotum, spermiogram and protein profile (SDS-PAGE) of seminal plasma in Nellore bulls in the spring and summer seasons. / Os touros têm uma grande influência sobre a composição genética dos rebanhos por isso é necessário conhecer as provas modernas de avaliação e aplicá-las, obtendo, assim, melhoramento genético para as características reprodutivas, por meio do uso de sêmen com qualidade. O espermiograma aliado às técnicas como termograma escrotal e a eletroforese, para detecção de possíveis proteínas do plasma seminal marcadoras de fertilidade poderão contribuir significativamente na escolha de reprodutores superiores. Neste estudo foram utilizados 10 touros da raça Nelore com idade de 24 meses criados em uma propriedade rural no município de Presidente Prudente SP, que foram avaliados durante os meses de agosto a novembro, quando foram realizadas 12 colheitas de sêmen com intervalo de 15 dias. Foram realizados o espermiograma, a eletroforese do plasma seminal em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), aferida a temperatura da superfície do escroto, por meio de termometria de infravermelho para a obtenção do gradiente de temperatura escrotal destes animais e dosagem sérica de testosterona e cortisol O ambiente foi monitorado diariamente, para as temperaturas mínima e máxima, umidade relativa do ar e índices pluviométricos. O objetivo desde estudo foi estudar a influência dos fatores climáticos na temperatura da superfície do escroto, espermiograma e perfil protéico (SDS-PAGE) do plasma seminal em touros Nelore, nas estações primavera e verão.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliana Domingos Archanjo dos Reis.pdf: 354121 bytes, checksum: 0cd34b34c6da8a41a0682be81e391638 (MD5) Previous issue date: 2013-09-23 / Seminal plasma is a complex of secretions of the accessory reproductive organs of males with effects on sperm function. The quality of seminal plasma proteins may contribute to the fertility of bulls. The aim of this study was to determine the influence of season on the morphologic characteristics of the testes, epididymis, sperm and seminal plasma proteins by SDS-PAGE in Bos taurus indicus and Bos taurus taurus, bulls raised extensively. In this study 5 Nellore and 2 Simmental bulls, wewe used evaluated the scrotal and testicular morphometry, semen quality and the seminal plasma protein profile in SDS-PAGE in the dry and rainy seasons. Was obtained for a testicular volume TV = 460.14 cm3 during the rainy season and TV = 571.26 cm3 in the dry season. With respect to Zebu, in the rainy season the TV was 524.75 cm3 and 515.13 cm3 in the dry season. Sperm motility in the dry season for the taurine and total sperm defects in the rainy season for this same group of animals, showed as critical situation in the seminal analysis, suggesting the same attention when selecting bulls for purposes of natural mating. it is observed in 100% of the samples of the protein bands of 14 kDa, 21 kDa and 65 kDa in two stations evaluated. The seasons influence on morphology, and semen. The subspecies taurine showed great plasticity testicular volumes reflected in the testicle that reduces the rainy season. With respect to morphology, we found that there were significant effects of the dry season, improving the quality of sperm morphology. For electrophoresis, it was verified the presence of a large diversity of protein bands present in seminal plasma, and the bands 14, 21 and 65 kDa present in all the animals studied subspecies stations. It is suggested that the three protein bands found in all samples probably have beneficial action in relation to the framework sperm of bulls, collaborating with fertility. / O plasma seminal é um complexo de secreções dos órgãos reprodutores acessórios dos machos e aparentemente exercem importantes efeitos sobre a função espermática. A qualidade das proteínas do plasma seminal pode colaborar com a fertilidade dos touros. O objetivo desse estudo foi de determinar a influência das estações do ano sobre as características morfológicas dos testículos, epidídimos, sêmen e das proteínas do plasma seminal por meio da eletroforese SDS PAGE em touros Bos taurus indicus e Bos taurus taurus, criados extensivamente. Foram utilizados 5 touros Nelore e 2 Simental, avaliou-se a morfometria testicular e escrotal, qualidade do sêmen e perfil proteico do plasma seminal em SDS-PAGE nas estações seca e chuvosa. Obteve-se para os taurinos um volume testicular VT = 460,14 cm3 na estação chuvosa e VT = 571,26 cm3 na estação seca. Com relação aos zebuínos, na estação chuvosa o VT foi de 524,75 cm3 e de 515,13 cm3 na estação seca. A motilidade espermática na estação seca para os taurinos e os defeitos espermáticos totais na estação chuvosa para esse mesmo grupo de animais, mostraram-se como pontos de estrangulamento dentro da análise do espermograma, sugerindo especial atenção dos mesmos quando da seleção de touros para fins de monta natural. As estações influenciaram nas características morfológicas e do sêmen. A subespécie taurina revelou uma grande plasticidade testicular, refletida na volumetria do testículo que se reduz na estação chuvosa. Com relação à morfologia espermática, verificou-se que houve efeito significativo da estação seca, melhorando a qualidade morfológica dos espermatozóides. Para a eletroforese, verificou-se a presença de grande diversidade de bandas proteicas presentes no plasma seminal, sendo as bandas de 14, 21 e 65 kDA presentes em todos os animais das duas subespécies nas estações estudadas. Sugere-se que as três bandas protéicas encontradas em todas as amostras, provavelmente, possuam ação benéfica em relação ao quadro espermático dos touros, colaborando com a fertilidade.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Felipe Rydygier de Ruediger.pdf: 337503 bytes, checksum: 788a40d59ee5b6ff8427348218069a3d (MD5) Previous issue date: 2014-06-20 / Reproductive efficiency is one of factors for improving livestock production indices cutting factors. The contribution of the bull to the reproductive efficiency of the herd is of great importance. Bovine testes should be kept below the core body temperature for the production of morphologically viable, normal sperm. The scrotal and testicular thermoregulation is a system for maintaining the physiological temperature of the testicles. Infrared thermography is a noninvasive technique that is used to measure the surface temperature of the scrotum bulls. The objective of this work was to study the relationship of scrotal temperature on semen quality by use of infrared thermography in Nellore bulls bred extensively. 6 Nellore by performing scrotal thermography and semen collection every 10 days were used, totaling 36 ejaculates. Climatic data were collected through globe thermometer. The thermograms of the scrotum were obtained by digital infrared thermography and analyzed by software to the scrotal surface temperatures, the right and left sides, neck of the scrotum, dorsal thirds, middle, and ventral of the testes and cauda epididymis. We conducted ejaculates through electroejaculation for analysis of quantitative and qualitative characteristics. For the data, we used analysis of variance and subsequently applied the Tukey test at 5%, and Pearson correlation. There was a positive correlation between sperm motility and the temperatures of the scrotum; between concentration and temperature of the scrotum; between climatic factors and rectal temperature. There was a negative correlation between temperature and sperm concentration (p <0.05). There was no correlation between the climatic data, and temperatures between the scrotum and rectal temperature and temperature of the scrotum. It was concluded that the surface temperatures of the scrotum and climatic factors, temperature and humidity, influence the quality of semen. Thermography is recommended as a complementary test in the evaluation of reproductive bulls. / A eficiência reprodutiva é um dos fatores determinantes para melhorar os índices zootécnicos da pecuária de corte. A contribuição do touro para a eficiência reprodutiva do rebanho é de grande importância. Os testículos bovinos devem ser mantidos abaixo da temperatura corporal central, para a produção de espermatozoides morfologicamente viáveis, normais. A termorregulação escrotal e testicular é um sistema de manutenção da temperatura fisiológica dos testículos. A termografia infravermelha é uma técnica não invasiva que é utilizada para medir a temperatura da superfície escrotal em touros. O objetivo deste trabalho, foi de estudar a relação da temperatura do escroto sobre a qualidade seminal pelo uso da termografia por infravermelho em touros Nelore criados extensivamente. Foram utilizados 6 touros Nelore realizando-se termografia escrotal e colheita de sêmen a cada 10 dias, totalizando 36 ejaculados. Os dados climáticos foram coletados por meio de globo termômetro. Os termogramas do escroto foram obtidos por meio de termografia digital de infravermelho e analisados por meio de software para as temperaturas da superfície escrotal, dos lados direito e esquerdo, colo do escroto, terços dorsal, médio, e ventral dos testículos e cauda do epidídimo. Efetuou-se colheitas de sêmen, por meio de eletroejaculação para analise das características quantitativas e qualitativas. Para os dados, utilizou-se análise de variância e posteriormente aplicou-se o teste de Tukey a 5%, e correlação linear de Pearson. Houve correlação positiva entre motilidade espermática e as temperaturas do escroto; entre concentração, e as temperaturas do escroto; entre os fatores climáticos e temperatura retal. Houve correlação negativa entre temperatura ambiente e concentração espermática (p<0,05). Não houve correlação entre os dados climáticos, e as temperaturas do escroto e entre temperatura retal e as temperaturas do escroto. Concluiu-se que as temperaturas da superfície do escroto e os fatores climáticos, temperatura e umidade do ar, influenciaram na qualidade do sêmen. A termografia é recomendada como exame complementar na avaliação reprodutiva de touros.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Fernando.pdf: 431045 bytes, checksum: 5ae1b35993c556c6871734dee523f3dc (MD5) Previous issue date: 2008-06-26 / Libido is an important component of a bull s breeding ability; however it is difficult to make as assessment of libido during a breeding soundness examination. It is best assessed in young bulls and scrotal circumference is favorably correlated with semen traits. Sixteen Brangus and eight Brown-Swiss bulls, with 36 months old, extensively managed were evaluated. The objective of this work is to study the relationship between scrotal circumference, libido, hormones and semen characteristics in Brangus and Brown-Swiss bulls. Bulls were divided into two experimental groups: group 1, with 16 bulls Brangus, and group 2, with 8 bulls Brown-Swiss, evaluated for sexual soundness using physical and morphological characteristics of semen, sexual behavior, testosterone and cortisol serum concentrations. There was a difference in the serum testosterone (P<0,05) and cortisol (P<0,01) concentrations between groups. No correlation (P>0,05) between libido, scrotal circumference, motility , concentration, testosterone and major defects were obtained. It was observed correlation among motility and mass movement (0,50; P<0,01), vigor and mass movement (0,58; P<0,01), libido and vigor (0,55; P<0,01), libido and cortisol (-0,41; P<0,05). In conclusion, were not correlations between libido and sperm quality, libido and scrotal circumference, libido and testosterone. / A libido é um importante componente da habilidade de procriação dos touros, todavia, não é fácil realizar a mensuração da mesma durante o exame do aparelho reprodutor. A libido é melhor traduzida em touros jovens e a circunferência escrotal está favoravelmente correlacionada com o perfil do sêmen. Dezesseis touros Brangus e oito Pardos-suiços, com 36 meses de idade, criados extensivamente, foram avaliados. O objetivo deste trabalho foi estudar as relações entre circunferência escrotal, libido, hormônios e características do sêmen em touros Brangus e Pardos-suiços. Os touros foram divididos em dois grupos experimentais: grupo 1, com 16 touros Brangus e grupo 2, com 8 touros Pardos-suiços, avaliados sexualmente por meio de exame físico e das características morfológicas do sêmen, comportamento sexual e concentrações séricas de testosterona e cortisol. Houve diferença nas concentrações séricas de testosterona (P>0,05) entre libido, circunferência escrotal, motilidade, concentração, testosterona e defeitos maiores foi obtida. Observou-se correlação entre motilidade e turbilhão (0,50: P<0,05), vigor e turbilhão (0,58: P<0,01), libido e vigor (0,55; p<0,01) e para libido e cortisol (-0,41; P<0,05). Conclui-se que não há correlações entre libido e qualidade espermática, libido e circunferência escrotal e entre libido e testosterona.

Submitted by Michele Mologni (mologni@unoeste.br) on 2018-11-22T11:15:18Z No. of bitstreams: 1 Camila Dutra de Souza Francisquini.pdf: 2946141 bytes, checksum: d4a8301da20ac5338becde2b5af3e95b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-22T11:15:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camila Dutra de Souza Francisquini.pdf: 2946141 bytes, checksum: d4a8301da20ac5338becde2b5af3e95b (MD5) Previous issue date: 2018-10-10 / In regions of tropical climate, mating occurs during warmer months, bulls are subject to environmental variations that interfere with their fertility and reproductive efficacy of the herd. The use of some biotechnologies contributes to the efficiency of the production system and to evaluate the fertilization potential of a semen sample, be it fresh, chilled or frozen. A combination of several analyzes and seminal assay methods offers greater accuracy to define a complex functionality. For Chapter 1, the objectives of the study were: (1) to evaluate the effect of the seasons on the surface temperature of the scrotum and ocular globe, the semen quality and plasma concentration of testosterone from Nellore bulls raised extensively, (2) to verify the plasma protein composition (3) investigate the relationships of these proteins with seminal parameters, surface temperatures of the scrotum and THI. Nellore bulls (n = 20) were evaluated with two data collections with a 30-day interval within each season of the year. Infrared thermography (FLIR E40®) with image analysis (FLIR tools software) for spermatic cord (SCT), proximal pole of the testis (PPT), distal pole of the testis (DPT), tail of the epididymis (TeT) and scrotal temperature gradient (TG), and semen collected and analyzed for quantitative and qualitative characteristics. Blood samples were collected by venipuncture of the jugular to obtain the plasma concentration of testosterone by radioimmunoassay (RIA). The seminal plasma proteins were identified by electrophoresis on SDS-PAGE. The temperature-humidity index (THI) calculated per season. The TG was higher (P <0.05) in autumn (5ºC) and winter (4.4ºC) compared to spring (3.4ºC) and summer (3.7ºC). The THI of spring (73.5) and summer (72) differed (P <0.05) from autumn (64.5) and winter (59.6) and there were correlations (P <0.01) with SCT (0.54), TeT (0.74), PPT (0.71), DPT (0.72) and TG (-0.35). Similarly, MOT (61.5%) and VIG (2.7) in spring were lower in relation to autumn and winter (P <0.05). The plasma concentration of testosterone was higher (P <0.05) in the autumn, in relation to the other seasons of the year. Seminal plasma proteins of 20, 55 and 66KDa contributed positively to seminal quality. The concentration of the protein with 50KDa was high in all seasons, being considered indispensable for the fertility of the bulls. In the spring and summer seasons, in which the THI exceeded the value of 72, there was a decrease in progressive motility and spermatic vigor. The summer and fall, the seasons that presented greater percentages of major and total sperm defects. Ocular globe and scrotal surface temperatures increased in spring and summer and the thermal gradient and testosterone plasma concentration decreased in the same seasons, concluding that the thermal stress with THI above 72 in the spring and summer seasons was sufficient for negatively affect the reproduction of Nelore bulls raised in pasture in the tropics. The chapter 2, the objectives of the study were: (1) assess the quality of refrigerated beef semen transported by 3 hours, passive systems of transport of semen BotuBOX® and BotuFLEX®, diluted in TRIS and BotuBOV®; and (2) evaluate the spermatic kinetics, oxidative stress, mitochondrial potential and cell membrane integrity and acrossomal bovine semen after thawing, diluted in TRIS and BotuBOV® and transported in passive systems semen transport BotuBOX® and BotuFLEX®. The six bulls semen of Nellore breed (Bos taurus indicus), cooled and frozen in 2 extenders TRIS and BotuBOV® and transported in 2 cooling systems BotuBOX® and BotuFLEX®. In a semen sample refrigerated was made a subjective analysis of motility (MOT) and sperm vigor (VIG) and in the sample frozen-thawed, computer-assisted sperm analysis (CASA) and flow cytometry, evaluation of integrity of plasma membrane and acrossomal (IPAM), production of superoxide (O2-) and integrity of cells (IC). On after cooled analysis, the MOT of semen in the BotuBOV® and BotuFLEX® (69.4%) and TRIS and BotuFLEX® (62.9%), were higher (P < 0.05) when compared to the TRIS and BotuBOX®. The largest (P < 0.05) MOT (45.9%) observed in subjective analysis, TM (47.3%) and PM (37%) in the CASA, IPAM (29%), IC (19.8%) and lower production of the O2- (82%) found in the samples frozen-thawed diluted in BotuBOV® extender and transported in the BotuFLEX® system. We conclude that the diluted semen in the BotuBOV® and transported on BotuBOX® or BotuFLEX®, and diluted TRIS extender and transported on BotuFLEX® maintained the viability for using the cooled semen, as well as employment for freezing. The association between the BotuBOV® diluent and refrigerated transport of semen BotuFLEX® presented best effect on the frozen semen in regard to kinetics parameters, integrity of plasma and acrossomal membranes and oxidative stress reduction. / Em regiões de clima tropical, o acasalamento ocorre durante os meses mais quentes, os touros estão sujeitos às variações ambientais que interferem com a sua fertilidade e eficácia reprodutiva do rebanho. A utilização de algumas biotecnologias colabora para a eficiência do sistema de produção e avaliar o potencial de fertilização de uma amostra de sêmen, seja ela fresca, refrigerada ou congelada e Uma combinação de várias análises e métodos de avalição seminal oferece maior acurácia para definir uma complexa funcionalidade. Para o capítulo 1, os objetivos do estudo foram (1) avaliar o efeito das estações do ano na temperatura da superfície do escroto e do globo ocular, na qualidade do sêmen e concentração plasmática de testosterona de touros Nelore criados extensivamente, (2) verificar a composição proteica do plasma seminal em cada estação do ano e as proteínas com maior frequência e (3) investigar as relações dessas proteínas com parâmetros seminais, temperaturas da superfície do escroto e ITU. Touros Nelore (n=20) foram avaliados com duas coletas de dados com intervalo de 30 dias dentro de cada estação do ano, sendo realizados: termografia infravermelha (FLIR E40®) com análise de imagens (software FLIR tools) para cordão espermático (TCE), polo proximal do testículo (PPT), polo distal do testículo (PDT, cauda do epidídimo (TCEp) e gradiente de temperatura escrotal (GT). O sêmen foi coletado e analisado quanto às características quantitativas e qualitativas. Amostras de sangue foram coletadas por venopunção da jugular para obter a concentração plasmática de testosterona por radioimunoensaio (RIA). As proteínas do plasma seminal foram identificadas por eletroforese em SDS-PAGE. O índice de temperatura-umidade (ITU) por estação do ano. O GT foi maior (P<0.05) no outono (5ºC) e inverno (4.4ºC) comparado a primavera (3.4ºC) e verão (3.7ºC). O ITU da primavera (73.5) e verão (72) diferiram (P<0,05) do outono (64.5) e inverno (59.6) e houveram correlações (P<0,01) com TCE (0.54), TCEp (0.74), PPT (0.71), PDT (0.72) e GT (-0.35). Assim como, motilidade espermática (61.5%) e vigor (2.7) na primavera foram inferiores, em relação ao outono e inverno (P<0.05). A concentração plasmática de testosterona foi superior (P<0,05) no outono, em relação às demais estações do ano. As bandas proteicas do plasma seminal de 20, 55 e 66KDa contribuíram de forma positiva para a qualidade seminal. A concentração da banda com 50KDa foi elevada em todas as estações, sendo considerada indispensável para a fertilidade dos touros. Nas estações primavera e verão, nas quais o ITU excedeu o valor de 72, observou-se decréscimo na motilidade progressiva e vigor espermático. O verão e outono, as estações que apresentaram maiores porcentagens de defeitos espermáticos maiores e totais. As temperaturas do globo ocular e da superfície do escroto aumentaram na primavera e verão e o gradiente térmico e a concentração plasmática de testosterona diminuiu nas mesmas estações, concluindo que o estresse térmico com ITU acima de 72, nas estações primavera e verão, foi suficiente para afetar negativamente a reprodução de touros Nelore criados a pasto nos trópicos. Para o capítulo 2, Os objetivos do estudo foram: (1) avaliar a qualidade do sêmen bovino refrigerado transportado por 3 horas, nos sistemas passivos de transporte de sêmen BotuBOX® e BotuFLEX®, diluídos nos meios TRIS e BotuBOV®; e (2) avaliar a cinética espermática, estresse oxidativo, potencial mitocondrial e integridade de membrana plasmática e acrossomal do sêmen bovino pós-descongelação, diluídos nos meios TRIS e BotuBOV® e transportados nos sistemas passivos de transporte de sêmen BotuBOX® e BotuFLEX®. O sêmen de seis touros da raça Nelore (Bos taurus indicus), refrigeradas e congeladas em 2 meios diluentes TRIS e BotuBOV® e transportados em 2 sistemas de refrigeração BotuBOX® e BotuFLEX®. Em uma amostra de sêmen refrigerado foi realizada a análise subjetiva de motilidade (MOT) e vigor (VIG) e na amostra pós-descongelação, realizada a análise computadorizada da motilidade espermática (CASA) e por citometria de fluxo, avaliação de integridade de membrana plasmática e acrossomal (MPA), produção de superóxido (O2) e células íntegras (CI). Na análise pós-refrigeração, a MOT do sêmen na associação BotuBOV® e BotuFLEX® (69.4%) e TRIS e BotuFLEX® (62.9%), foram maiores (P<0.05) quando comparado à TRIS e BotuBOX®. A maior (P<0.05) MOT (45.9%) observada na análise subjetiva, MT (47.3%) e MP (37%) no CASA, MPAI (29%), CI (19.8%) e menor produção de O2- (82%) encontrados nas amostras pós-descongelação diluídas em meio BotuBOV® e transportados no sistema BotuFLEX®. Concluímos que o sêmen diluído no meio BotuBOV® e transportado na BotuBOX® ou BotuFLEX®, e diluído em meio TRIS e transportado na BotuFLEX® mantiveram a viabilidade seminal para uso do sêmen refrigerado, bem como o emprego para a congelação. A associação entre o meio diluente BotuBOV® e o sistema de transporte refrigerado de sêmen BotuFLEX® apresentou melhor efeito sobre o sêmen congelado em relação aos parâmetros de cinética espermática, integridade de membrana plasmática e acrossomal e redução do estresse oxidativo.

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da N-acetil-L-cisteína (NAC), adicionada ao diluente composto de leite em pó desnatado, sobre a viabilidade espermática e o estresse oxidativo do sêmen equino resfriado a 5°C. Ejaculados de 8 pôneis da raça Brasileira foram coletados em triplicata resultando em 24 ejaculados. O sêmen foi distribuído em 4 grupos: Equidil® + 0,00 mM (controle), 0,5 mM, 1,0 mM ou 2,5 mM de NAC. As amostras foram armazenadas em tubos de 15mL e mantidas em caixas de transporte de sêmen BotuFLEX® (Botupharma, Botucatu-SP, Brasil). Parâmetros como motilidade total (MT), motilidade progressiva (MP), vigor, pH, resposta ao teste hiposmótico (HOST) e atividade mitocondrial (MTT) foram avaliados nas 24 e 48 h, bem como no sêmen fresco, após a diluição. O vigor, MT e MP foram também avaliados após teste de termorresistência (TTR), na ausência e presença de peróxido. A MT, a MP, o vigor espermático e a MTT foram similares (P > 0.05) entre as concentrações de NAC, nas 24 e 48 h. A resposta ao HOST foi semelhante entre as concentrações de NAC (P > 0,05) nas 24 h de resfriamento, porém nas 48 h ocorreu diminuição da funcionalidade da membrana no grupo NAC 2,5 mM em comparação ao grupo EQUIDIL, sem adição de NAC. A MT, a MP e vigor, das amostras resfriadas por 24 h e submetidas ao TTR, diferiu entre sem e com peróxido (P < 0,05) nos grupos Equidil, 0,5 mM e 1,0 mM, mas foi similar na concentração de 2,5 mM de NAC. Quando o sêmen foi resfriado por 48 h, houve diferença no vigor e MT entre amostras com e sem peróxido (P < 0,05), em todos os grupos testados, mas a MP foi similar entre amostras com e sem peróxido, na concentração 2,5 mM. O pH do diluente Equidil® foi o maior e os grupos Equidil + 0,5 mM e 1,0 mM tiveram valores intermediários, enquanto a concentração de 2,5 mM de NAC gerou valores mais baixos, nos três momentos avaliados (P < 0,05). Não houve variação significativa de pH entre os momentos 0 e 24 h (P= 0,7075) e entre 0 e 48 h (P= 0,4617), em todos os grupos testados. As concentrações de NAC testadas não melhoraram a motilidade, integridade da membrana plasmática, atividade mitocondrial e resposta ao HOST de espermatozoides equinos resfriados a 5°C e armazenados por 48 h. Após TTR, as concentrações de NAC testadas não evitaram a diminuição da motilidade e vigor espermático, na presença de peróxido. / The aim of this study was to evaluate the effect of N-acetyl-L-cysteine (NAC) based on skim milk powder extender on sperm viability and oxidative stress of equine semen cooled to 5°C. Ejaculate of 8 ponies of the Brazilian breed were collected in triplicate, resulting in 24 ejaculates, distributed in 4 groups: Equidil® extender + 0.00mm (control), 0.5mM, 1.0mM and 2.5mM of NAC with the semen samples were The samples were stored in 15mL tubes and kept in BotuFLEX® semen transport boxes (Botupharm, Botucatu/SP/Brazil). Parameters, such as motility, vigor, pH, osmolarity, HOST, and MTT were evaluated at 24 and 48 h of cooling also in fresh semen. Vigor, total (TM) and progressive motility (PM) were also evaluated after thermoresistance test (TTR), in the absence and presence of peroxide. TM, PM, sperm vigor and MTT were similar (P > 0.05) between NAC concentrations at 24 and 48 h. The response to HOST was similar between NAC concentrations (P > 0.05) at 24 h cooling, but at 48 h there was a decreased in membrane functionality in 2.5mM NAC group compared to the EQUIDIL group. TM, PM, and vigor of the samples cooled by 24 h and submitted to TTR differed between without and with peroxide (P< 0.05) in the EQUIDIL, 0.5mM and 1.0mM groups, but was similar in 2.5mM NAC. After cooling for 48 h, there was difference in vigor and TM between samples with and without peroxide (P < 0.05) in all groups tested, but the PM was similar between samples with and without peroxide at concentration 2.5mM of NAC. The pH of the EQUIDIL extender was higher and the EQUIDIL + 0.5mM and 1.0mM groups had intermediate values, while the 2.5mM NAC concentration generated lower values in the three evaluated periods (P < 0.05). There was no significant variation of pH between 0 and 24 h (P=0.7075) and between 0 and 48 h (P=0.4617) in all groups tested. The concentrations of NAC tested did not improve motility, plasma membrane integrity, mitochondrial activity and response to HOST equine spermatozoa cooled to 5°C and stored for 48 h. After TTR, the concentrations of NAC tested did not prevent the decrease of motility and sperm vigor in the presence of peroxide.

Entre as biotécnicas da reprodução, a inseminação artificial (IA) é a que proporciona maior amplitude de resultados nos programas de melhoramento genético animal. A adequada seleção dos atributos produtivos e reprodutivos de fêmeas e principalmente dos machos é a base essencial para a maximização do potencial dessa técnica. O sêmen para IA pode ser fresco, fresco diluído, refrigerado e congelado. Os diluidores têm papel fundamental na expansão do volume seminal, permitindo seu fracionamento na preservação do sêmen no processo de refrigeração, eles devem ser atóxicos, ter pH e pressão osmótica compatíveis com a sobrevivência espermática, de baixo custo e fácil preparo. Sendo assim o objetivo deste trabalho foi avaliar a conservação de sêmen ovino resfriado com diluente de Kenney (K) ou diluente de Kenney mais gema de ovo (KG) por até 48 horas. Foram utilizados quatro carneiros, sendo feitas 40 colheitas. Logo após o sêmen era dividido em duas alíquotas uma com o diluente de K e outra alíquota com diluente de KG. As amostras foram resfriadas à 10ºC. As análises subjetivas usuais foram feitas nos tempos 0, 24 e 48 horas. Estas análises incluíram turbilhonamento, motilidade e vigor. Foram feitas também análises de testes funcionais como a avaliação da integridade das membranas plasmática e acrossomal através das colorações de eosina-nigrosina e técnica da coloração Fast Green / Rosa Bengala (POPE, 1991) respectivamente, avaliação da atividade citoquímica mitocondrial através da coloração de diaminobenzidina (DAB) e avaliação da susceptibilidade do espermatozóide ao estresse oxidativo através da avaliação dos níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico após a incubação com sistema gerador constituído de sulfato de ferro e ascorbato. Neste trabalho o tempo afetou significativamente a motilidade e o vigor espermático, caindo de 79,16±1,41 para 40,25±2,55 após 48hs e de 3,92±0,06, para 2,57±0,10 após 48hs respectivamente. O tempo influenciou também a integridade das membranas plasmática e acrossomal, fazendo com que houvesse uma queda gradativa nas integridades (0hs=95,75±0,36, 24hs=90,69±0,99, 48hs=86,11±1,45) e (0hs=90,34±0,80, 24hs=84,33±1,30, 48hs=76.67±1,69) respectivamente. Foi possível observar também que ao longo do tempo houve uma diminuição da atividade mitocondrial e um aumento nas espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), que diferiu do tempo 0hs para o tempo 48hs (807,42±39.22 e 937,76 ± 41,87). Verificou-se ainda que o meio K apresentou maiores valores de vigor do que o meio KG (p=0,0144), e que o meio K foi capaz de preservar melhor a atividade mitocondrial P=0,0005. A concentração de TBARS no diluente K correlacionou-se negativamente com as variáveis motilidade, vigor, integridade de membrana plasmática e acrossomal. No diluente KG as correlações do TBARS e DAB III foram positiva (r=0,35), demonstrando que quanto maior a quantidade de células com baixa atividade mitocondrial, maior a concentração de TBARS. Foi também encontrada uma correlação negativa entre a variável integridade de acrossomo (ACRO) e TBARS (r=-0,40; P=0,0001), mostrando que quanto menor a porcentagem de células com acrossomo integro, maior a concentração de substancias reativas ao acido tiobarbitúrico. Concluindo que o diluente K foi eficaz em preservar as características seminais de ovino por até 48 horas e que a adição da gema de ovo ao diluente de Kenney não foi capaz de melhorar estas características. / Among the reproductive biotechniques routinely used in animal production, the artificial insemination (AI) is known to provide a greater gain in genetic improvement programs. The adequate selection of female and especially male productive and reproductive traits is the keystone to maximize the potential of this technique. Semen used for AI can be used fresh diluted or not, chilled and frozen. An essential role is played by semen extenders on volume expansion, allowing not only the fractioning in multiple insemination doses, but also the maintenance of sperm fertilizing potential. Therefore, for semen fractioning, chilling or cryopreservation, extenders are required to be atoxic, must maintain pH and osmolarity compatible to the sperm survival, and should be preferably inexpensive and easy to prepare. Therefore, the objective of the present study was to evaluate chilled ram semen using the Kenney extender (K) of the Kenney extender with egg yolk (KG) for 48 h. Forty ejaculates of four rams were (n=40) were used. Samples were equally divided into two aliquots and extended in K extender and KG extender. Samples were chilled at 10ºC and evaluated immediately after chilling (0h), 24 and 48 h later. These analyses included gross motility (swirl pattern), individual motility and vigor. Functional test analyses such as evaluation of plasma membrane integrity using the eosin-nigrosin staining technique, acrosome integrity using the fast green / bengal rose staining method (POPE, 1991), mitochondrial cytochemical activity evaluation utilizing diaminobenzidine (DAB) staining and assessment of sperm susceptibility to the oxidative stress based the levels of thiobarbituric acid reactive substances after the incubation with ferrous sulphate and ascorbate (TBARS) were performed. In this study, a significant influence of chilling period was found for spermatic motility and vigor dropping from 79.16±1.41 to 40.25±2.55 after 48 hours and from 3.92±0.06 to 2.57±0.10 after 48 hours, respectively. Time also negatively influenced the integrity of plasma and acrosomal membrane (0hr=95.75±0.36, 24hrs=90.69±0.99, 48hrs=86.11±1.45; and 0hr=90.34±0.80, 24hrs=84.33±1.30, 48hrs=76.67±1.69, respectively). Also, during the course of time there was a decrease in mitochondrial activity and an increase in TBARS, with an increase from moment 0 to 48 hrs (807.42 ± 39.22 and 937.76 ± 41.87). It was also found that the medium K had greater values of vigor than the medium KG (p=0.0144), and that the medium K was capable of better preserve mitochondrial activity (P=0.0005). A negative correlation was found between the TBARS concentration with motility and vigor and plasma and acrosomal membrane integrity when samples were stored with the extender K. In the KG extender, the TBARS and DAB III correlations were positive (r=0, 35) indicating that showing that the greater the number of cells with low mitochondrial activity, the higher the TBARS concentration. Also, a negative correlation between the acrosomal integrity variable (ACRO) and TBARS (r=-0, 40; P=0,0001) was found, which demonstrates that the lower the percentage of cells with intact acrosomal, the higher the susceptibility to the oxidative stress. Therefore, results indicated that the K extender was effective in preserve the seminal characteristics of ovine for 48 hours and the addition of egg yolk to kenney extender was not capable of improving such characteristics.