Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / As imunoglobulinas sÃo proteÃnas do soro humano que despertam maior interesse em sua utilizaÃÃo devido Ãs inÃmeras funÃÃes diagnÃsticas e terapÃuticas. Pesquisas nessa Ãrea contemplam assuntos de Ãmbito tÃcnico cientÃfico, beneficiando setores carentes no nosso paÃs no quesito da saÃde humana. Nesse contexto, o presente trabalho teve por finalidade avaliar o potencial da matriz quitosana/alginato epoxilado (QAE) com corantes reativos imobilizados, na purificaÃÃo de IgG humana utilizando a tÃcnica por cromatografia de afinidade. Os corantes Cibacron Blue F3GA, Reativo Verde 5 (Procion HE-4G) e o Reativo Azul 4 (Procion Blue MX-R) foram imobilizados nas partÃculas de quitosana/alginato epoxilada e nÃo foi observado desprendimentos desses corantes nos ensaios cromatogrÃficos. A matriz de QAE com e sem corantes imobilizados foram caracterizados por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) visando verificar os grupos especÃficos dos corantes na superfÃcie da matriz. Foi investigado a influÃncia do tipo de tampÃo e pH na adsorÃÃo de IgG de alta pureza. Os materiais apresentaram elevada capacidade de adsorÃÃo para diferentes sistemas tamponantes: MOPS (Ãcido morfolinopropanosulfÃnico), HEPES (Ãcido N-2-hidroxietilpiperazino-Nâ-2-etanosulfÃnico), MES (4 â Ãcido morfolinoetanosulfÃnico) e FS (Fosfato de SÃdio). As isotermas de adsorÃÃo foram obtidas em sistemas em batelada e os dados experimentais foram bem correlacionados pelos modelos de Langmuir e Langmuir-Freundlich. O adsorvente quitosana/alginato epoxilado com corante Reativo Azul 4 imobilizado apresentou quantidade mÃxima de adsorÃÃo de IgG superior a 180 mg/g, superando os outros materiais. Os trÃs adsorventes apresentaram constantes de dissociaÃÃo (KD e KDLF) entre 10-5 e 10-6 mol/L. Os ensaios cromatogrÃficos foram realizados com IgG de alta pureza e soro humano diluÃdo 10 vezes e realizaram-se balanÃos de massas, anÃlises de eletroforeses e quantificaÃÃo de proteÃnas totais pelo mÃtodo de Bradford. Nos ensaios em leito fixo com soro humano necessitou-se de 15,0 mL de soro diluÃdo para a saturaÃÃo do leito e as amostras coletadas das fraÃÃes cromatogrÃficas indicaram a purificaÃÃo de IgG do soro humano atravÃs da eletroforese. Entre os trÃs ligantes pseudobiespecÃficos (corantes) estudados no presente trabalho, o corante Cibacron Blue F3GA apresentou maior potencial para purificar IgG do soro humano em todos os trÃs tampÃes analisados, devido a maior seletividade deste por IgG comparado aos demais corantes imobilizados.

O diagnóstico sorológico da cisticercose vem se destacando como uma fonte alternativa seguramente eficaz ao estudo da doença. Com a proposta de acessibilidade, devido primordialmente a relação custo, os testes ELISA são promissores à pesquisa sorológica de campo. O problema iminente está na utilização de extratos antigênicos capazes de gerar ao teste, parâmetros compatíveis para a pesquisa de anticorpos na população de baixa prevalência. Nesse contexto, o presente trabalho objetivou a avaliação de um teste ELISA com alto valor preditivo positivo (VPP) para a pesquisa de anticorpos anti-cisticercos de Taenia solium em inquéritos sorológicos na população geral. Os antígenos ensaiados foram proteína 18/14 kDa de líquido vesicular de T. crassiceps (18/14-Tcra), liquido vesicular de T. crassiceps (LV-Tcra) e total de cisticercos de T. solium (T-Tso), respectivamente estes constituíram os testes ELISA-18/14, ELISA-Tcra e ELISA-Tso. Foram ensaiadas 610 amostras de soro de indivíduos supostamente saudáveis e 20 amostras de soro de indivíduos com neurocisticercose confirmados por critérios clínicos e laboratoriais. Após os ensaios, o teste ELISA-18/14 apresentou sensibilidade e especificidade de 100% e mesmo em diferentes prováveis prevalências (0,1; 0,5; 1,0 e 5,0%) o VPP e o valor preditivo negativo (VPN) foram fixados também em 100%. A repetitividade das leituras do teste expressa em coeficiente de variação apresentou-se entre 16 e 18%. O teste ELISA-Tcra não demonstrou o mesmo desempenho, a especificidade foi calculada em 96,3% e o VPP variou entre 2,6 a 59,3% para prevalências de 0,1 a 5,0%; quanto à sensibilidade e VPN houve similaridade entre os resultados. O ELISATso apresentou resultados ainda menos expressivos, a especificidade foi calculada em 95,7% e o VPP variou entre 2,3 a 55% para as prevalências de 0,1 a 5,0%; essa redução na especificidade se dá pelo aumento do número de resultados falso-positivos no teste em conseqüência da expressão de proteínas de alto peso molecular. Através dos parâmetros avaliados fica notório o desempenho promissor do teste ELISA-18/14 na pesquisa de anticorpos anti-cisticercos de Taenia solium em inquéritos sorológicos da população geral. / The serum diagnosis of cyticercosis has been highlighted as an efficient alternative source in the study of the disease. With an accessability proposal , due to the expense, the ELISA´s tests are promising to the serum´s field research. This problem makes necessary the use of antigens extracts able to give the test, trusted and compatible parameters to the research of antibodies in the population of low prevalence. In this context, this current work stablished the evaluation of the ELISA´s test with a high predictive value positive(PPV) to the anti-cysticerci of Taenia solium antibodies research in a serum inquiry of the general population. The antigens tested were the 18/14 kDa protein of the vesicular liquid of T. crassiceps (18/14-Tcra), the vesicular liquid of T. crassiceps (LV-Tcra) and the total of T.solium (T-Tso). That constituted in the ELISA 18/14, ELISATcra and ELISA-Tso test respectively. There were 610 sample of serum were tested of healthy people and 20 samples of serum with confirmed neurocysticercosis by clinical and laboratorial criterias. After these tests, the ELISA´s test showed sensibility and specificity in 100% of the cases, even in different prevalences (0,1; 0,5; 1,0 and 5,0%) the VPP and the predictive value negative (VPN) were also fixed in 100%. The repetition of the test expressed in variation coefficient occurred between 16 and 18% of the cases. The ELISATcra didn´t show the same development, the specificity were calculation in 96,3% and the VPP wanted between 2,6 and 59,3% to the prevalences of 0,1 to 5,0%; there were similarities of the results of sensibility and VPP. The ELISA-Tso showed less important results the specificity was calculated in 95,7% and the VPP between 2,3 and 55,0% to the prevalences of 0,1 to 5,0%, this reduction of specificity is due to the increase of the number of false-positive results in the test because of the expression of proteins of high molecular weight. Through these parameters it´s clear the promising development of the ELISA-18/14 test, as been arbitrary in the studies of serology inquiry in the general population.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:55:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:05:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A prevalência do diabetes mellitus está aumentando de forma exponencial, adquirindo características epidêmicas em vários países. Nos países em desenvolvimento, particularmente, constitui-se de um grave problema de saúde pública. Dessa forma, o desenvolvimento de novas metodologias que auxiliem no diagnóstico e controle de doenças traz uma importante contribuição não somente ao tratamento de pacientes portadores desta doença como também no estabelecimento de políticas públicas de prevenção da mesma. A presença dos metais em amostras de soro humano tem sido utilizada por diversos autores para o diagnóstico da doença. Entretanto sua interpretação constitui-se ainda um desafio. A principal razão para esta dificuldade consiste no fato de que, na maioria dos estudos encontrados na literatura, o nível de metais tanto nos pacientes como no grupo de controle estão, muitas vezes, na mesma faixa de distribuição. Neste estudo, é discutida uma nova abordagem para a interpretação dos níveis de metais em amostras de soro de indivíduos portadores de diabetes mellitus tipo 2 e a possibilidade de sua utilização no diagnóstico da doença. Foram recrutados pelo Hospital da Universidade Federal de Juiz de Fora, 86 sujeitos com diabetes mellitus tipo 2 e 67 sujeitos controle. As amostras de sangue foram colhidas para separar o soro. Os elementos Cu, Mg, Mn, Se, V e Zn foram determinados pela da técnica de espectrometria de massa de alta resolução com fonte de plasma indutivamente acoplado. A interpretação dos dados foi realizada utilizando-se as técnicas de análise discriminante, componentes principais e de cluster. O conteúdo de metais nas amostras analisadas foi concordante com os dados da literatura. No entanto, a principal conclusão deste estudo é que as concentrações de cada elemento, por si mesmas, não podem ser utilizadas no diagnóstico de diabetes mellitus. Porém, a determinação de todos os metais associados à doença e a utilização de técnicas estatísticas multivariadas podem proporcionar uma excelente alternativa para esta avaliação. / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Orientador: Raquel Fernanda Gerlach / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-13T11:49:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_GlauceReginaCostade_D.pdf: 2702175 bytes, checksum: 662776089e445cabdc4c43cd85b1ff92 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Devido ao aumento das evidências de que o desenvolvimento mental das crianças pode ser afetado quando elas apresentam concentrações de chumbo no sangue < 10 $g/dL, estudos a respeito de novos biomarcadores de dose interna são necessários, principalmente para se obter informações em relação à exposição de populações residentes em áreas sem contaminação conhecida pelo chumbo. No Brasil, não existe programa nacional para detecção de crianças contaminadas por este metal, as quais são as mais vulneráveis aos efeitos neurológicos resultantes da exposição crônica a baixas concentrações de chumbo, entretanto, alguns estudos mostraram altas concentrações de chumbo no esmalte superficial de dentes decíduos de crianças brasileiras. Os objetivos deste estudo foram: 1) determinar e correlacionar a concentração de chumbo de crianças residentes no Bairro Campos Elíseos de Ribeirão Preto, no sangue total, soro, saliva e amostras de esmalte superficial in vivo; 2) comparar a concentração de chumbo encontrada nos diferentes biomarcadores de acordo com a presença ou ausência de anemia; 3) avaliar a influência dos polimorfismos da ALAD e VDR nos níveis de chumbo dos diferentes biomarcadores. 444 crianças, com idades entre 6 e 8 anos, participaram deste estudo. Amostras de sangue, soro, saliva total, saliva submandibular e da parótida foram coletadas. Duas microbiópsias de esmalte sucessivas foram realizadas em dente decíduo e permanente, nas quais o fósforo foi determinado colorimetricamente, para calcular sua profundidade. As concentrações de chumbo no sangue, soro, saliva e esmalte dental foram determinadas por espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado (ICPMS). O limite de detecção (LD) do método foi 0,03 $g/L e 0,02 $g/L para o soro e saliva, respectivamente. A concentração de hemoglobina foi determinada pelo contador de células Micros - ABX. Os genótipos para os polimorfismos da ALAD e VDR foram determinados por PCR e enzimas de restrição. Para a realização das análises de correlação, as crianças foram divididas em 2 grupos de acordo com a concentração de chumbo no sangue (< 4 and = 4 $g/dL) e no esmalte dental (< 400 e = 400 $g/g). O nível de significância utilizado em cada uma das estatísticas foi de 0,05. Os níveis de chumbo no sangue e no soro variaram de 0,2 a 9,4 (mediana, 2,1) $g/dL e < LD a 2,6 (mediana, 0,4) $g/L, respectivamente. Dez por cento das crianças apresentaram concentração de chumbo no sangue = 4 $g/dL. Os meninos mostraram quantidades de chumbo no sangue total significantemente maiores do que as meninas (2,3 versus 2,0 $g/dL, p<0.0003). As concentrações de chumbo na saliva total, sublingual e parótida foram 1,7; 1,4 e 1,3 $g/L, respectivamente. Não houve correlação entre a concentração de chumbo no sangue e soro e nem entre chumbo no sangue e saliva. Também não encontramos correlação entre concentração de chumbo no soro e saliva. Nas profundidades de 3,1 e 7,0 $m, a mediana da concentração de chumbo, para a primeira e segunda microbiópsias nos decíduos, foi 109,3 e 45,9 $g/g, respectivamente. Para a primeira e segunda microbiópsias nos permanentes, a mediana da concentração de chumbo foi de 308,3 e 99,7 $g/g, respectivamente, e a mediana de suas profundidades 2,9 e 6,0 $m, respectivamente. Não houve correlação entre concentração de chumbo no sangue e no esmalte dental. Nove (n= 35) e 3% (n= 12) das crianças apresentaram concentração de chumbo = 400 $g/g na superfície do esmalte decíduo, para a primeira e segunda microbiópsias, respectivamente, e 33 (n= 92) e 7% (n= 18) tiveram chumbo = 400 $g/g no esmalte permanente, para a primeira e segunda microbiópsias, respectivamente. Uma forte e significante correlação entre chumbo no plasma e no esmalte foi encontrada apenas para crianças que possuíam concentração de chumbo no esmalte superficial = 400 $g/g (r= 0,65, p< 0,0001, para decíduos e 0,51, p< 0,0001, para permanentes). Além disso, não encontramos correlação entre chumbo no esmalte e chumbo nas salivas. Nenhuma diferença estatística foi encontrada entre a distribuição dos alelos da ALAD e VDR (para os polimorfismos BsmI, ApaI e FokI) e chumbo no sangue, soro e esmalte. Nossos resultados mostram uma exposição indevida ao metal na população de 6-8 anos, residente no bairro dos Campos Elíseos (Ribeirão Preto, SP), com 10% das crianças com concentração de chumbo no sangue entre 4,0 e 9,4 $g/dL. Uma forte e significativa correlação foi encontrada somente entre a concentração de chumbo no soro e no esmalte dental, nas crianças que foram mais expostas ambientalmente ao metal. Os dados sugerem que as fontes em que as crianças estão expostas ao chumbo merecem mais estudos no Brasil, assim como dados de concentrações do metal no sangue total de crianças mais novas, pois já está descrito que os níveis de chumbo no sangue < 10 $g/dL podem causar danos neurológicos às crianças. / Abstract: With increasing evidence of adverse health effects of lower levels of lead (below 10 $g/dL in whole blood), studies on novel internal dose biomarkers are needed. In Brazil, some studies showed high amounts of lead in the superficial enamel of deciduous enamel. The aim of this study was 1) to determine and to correlate the lead concentration in children living in Campos Elíseos district (in Ribeirao Preto, SP, Brazil), in whole blood (BL), serum, saliva, and surface enamel; 2) to correlate lead concentrations found using these biomarkers with anemia; 3) to evaluate the influence of ALAD and VDR polymorphisms on lead concentrations in these biomarkers. 444 children aged 6-8 years were enrolled in this study. BL, serum, parotid, submandibular and whole saliva were collected in trace element free tubes. Two successive acid etch enamel microbiopsies were performed on one deciduous and one permanent teeth. Phosphorus was colorimetrically determined to calculated microbiopsy depth. Lead concentrations were determined by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICPMS). The detection limit (DL) was 0.03 $g/L (serum) and 0.02 $g/L (saliva). The hemoglobin level was determined by an automated cell counter (Micros - ABX). Genotypes for the ALAD and VDR polymorphism were determined by PCR and restriction fragment length digestion. For correlations, children were subdivided in two groups according to BL concentration (< 4 and = 4 $g/dL) and enamel lead concentration (< 400 and = 400 $g/g). Statistical significance was accepted when p< 0.05. BL and serum lead levels ranged from 0.2 to 9.4 (median, 2.1) $g/dL and < DL to 2.6 (median, 0.4) $g/L, respectively. 10% of the children showed BL above 4 $g/dL. Boys showed higher BL concentrations than girls (2.3 versus 2.0 $g/dL, p< 0.0003). Lead concentrations in whole, sublingual and parotid saliva were 1.7, 1.4 and 1.3 $g/L, respectively. No correlations between BL and serum, and between BL and saliva lead concentrations were found, nor between serum lead versus whole, sub and parotid lead values. The median lead concentrations found in the first and second deciduous tooth enamel microbiopsy were 109.3 and 45.9 $g/g, respectively, when median biopsy depths were 3.1 and 7.0 $m. For the first and second microbiopsies in permanent teeth, median lead concentrations were 308.3 and 99.7 $g/g, respectively, and median biopsy depths were 2.9 and 6.0 $m, respectively. There was no correlation between BL and enamel lead. Nine % (n= 35) and 3% (n= 12) of the children showed surface enamel lead levels in the first and second deciduous enamel microbiopsy = 400 $g/g, respectively, and 33% (n= 92) and 7% (n= 18) had lead = 400 $g/g in the first and second permanent enamel microbiopsies, respectively. A significant correlation between serum and enamel lead levels was found for children with surface enamel lead concentrations = 400 $g/g (r= 0.65, p< 0.0001 for deciduous and 0.51, p< 0.0001 for permanent teeth). No correlation was found between lead content in enamel and saliva. No difference between the distribution of ALAD alleles and among VDR alleles (for BsmI, ApaI and FokI polymorphisms) and BL, serum and enamel lead levels was found. In conclusion, our data showed an undue exposure in the study population of 6-8-yearsold children living in Campos Elíseos (Ribeirão Preto, SP), as observed in the BL and enamel samples. We found a strong correlation between serum and enamel lead levels only for children who were probably more exposed to lead. Our data suggests that sources of exposure to lead by children deserve further studies in Brazil, as well as the BL lead levels of younger children. / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

O objetivo deste trabalho foi analisar a influência dos fatores etários, sexuais, da gestação, do puerpério, da lactação e dos sistemas de criação nos constituintes do metabolismo lipídico e glicemia de búfalos. A análise bioquímica foi obtida por meio da determinação dos teores séricos de colesterol, triglicérides, ß-hidroxibutirato (ß-HBO), ácidos graxos não esterificados (NEFA), e teores plasmáticos de glicose. Também foi objetivo sugerir valores de referência para estes metabólitos. Foram utilizadas seis propriedades de bubalinos das raças Murrah, Mediterrâneo, e mestiços, todas localizadas no Estado de São Paulo. No total, foram colhidas amostras de soro e plasma de 635 animais, entre novembro de 2009 e julho de 2010. Para a avaliação da condição do estado geral dos animais, foi utilizada avaliação do escore de condição corporal (ECC) atribuindo notas de 1 a 5 somente para animais acima de 24 meses. Os valores da média aritmética, desvio padrão, erro padrão da média, coeficiente de variação, intervalo de confiança (95%), e valores mínimo e máximo foram calculados utilizando o procedimento Means do SAS versão 9.2. Os testes de normalidade dos resíduos e homogeneidade das variâncias foram realizados utilizando o Guide Data Analise do SAS. Os dados foram analisados por ANOVA, usando o procedimento Glimmix do SAS. As informações de grupo (Idade; Gestação; Lactação; Sexo; Puerpério; Sistema de Criação), Fazenda; Categoria; Número de Crias e ECC, assim como suas interações, foram utilizadas nos modelos estatísticos. Concluiu-se que os constituintes metabólicos foram consideravelmente influenciados pela idade, sexo, puerpério, lactação e sistema de criação, não sendo verificada influência relevante pela gestação de novilhas. Devido à grande quantidade de amostras estrategicamente colhidas, obtidas de diferentes realidades criatórias, também foi possível sugerir valores de referência para o lipidograma e glicemia de búfalos de diferentes idades, sexos, momentos gestacionais, fases do periparto e períodos de lactação. / The aim of this study was to analyze the influence of age, gender, pregnancy, puerperium, lactation and breeding systems in the constituents of lipid metabolism and glucose of buffaloes. The biochemical analysis was obtained by determining the levels of serum cholesterol, triglycerides, beta-hydroxybutyrate (ß-HBO), non-esterified fatty acids (NEFA) and plasma glucose levels. It was also meant to suggest reference values for these metabolites. Were used six properties of buffaloes Murrah, Mediterranean, and crossbreed, all located in the São Paulo state. Were collected 635 samples of serum and plasma between November 2009 and July 2010. To assess the condition of the general state of animals was used to evaluate body condition score (BCS) by assigning scores from 1 to 5 only for animals over 24 months. The values of the arithmetic mean, standard deviation, standard error means, coefficient of variation, confidence interval (95%), and minimum and maximum values were calculated using the Means procedure of SAS version 9.2. Tests for normality of residuals and homogeneity of variances were performed using the SAS Guide to Data Analysis. Data were analyzed by ANOVA using the SAS procedure Glimmix. The group information (Age, Pregnancy, Lactation, Gender, Puerperium; Creation System), Farm, Category, Number of Offspring and BCS, as well as their interactions, were used in statistical models. It was concluded that the metabolic components were significantly influenced by age, gender, postpartum, lactation and breeding system, and is not verified by the relevant influence pregnant heifers. Due to the large number of samples strategically taken, obtained from different stock breeding, were also suggest reference values for serum lipids and glucose of buffaloes in different ages, genders, moments of pregnancy, stages of peripartum and lactation periods.

Orientador: Jaime Amaya-Farfan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:55:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Abecia-Soria_MariaInes_M.pdf: 6366468 bytes, checksum: 63eea23a2f2c230409dad7e988b0f3bd (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: As proteínas de soro de leite, além de possuírem um alto valor biológico e escore químico superior à de outras proteínas de origem animal/ são consideradas proteínas de rápida absorção facilitando o metabolismo, esta característica especial resulta em maior influência na recuperação de organismos debilitados, estimulando a síntese de proteína, o que parece justificar a sua utilização como suplemento na alimentação de esportistas. Recentemente as proteínas do soro vêm sendo muito utilizadas por atletas, devido a suas características fisiológicas e funcionais. Contudo não se sabe ainda qual é o melhor grau de hidrólise dessas proteínas capaz de proporcionar resultados benéficos ao exercício físico, Tendo em vista o papel energético da proteína no exercício prolongado, várias pesquisas sobre exercício e metabolismo protéico têm sido realizadas na tentativa de elucidar a dosagem correta de proteínas em dietas para esportitas em função do exercício. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as possíveis conseqüências metabólicas do consumo sub-crônico do isolado de soro de leite (ISL) e seu proteolisado (HSL) de grau de hidrólise 7,8%/ como única fonte protéica, em ratos sumetidos ao exercício fisico. Ratos machos Wistar (-100g)/ foram divididos em três pares de grupos: Treinados (HT fIT), treinados e exercitados até a exaustos CHEfIE) e sedentários (HS/IS). Observou-se que o ponto de exaustão do grupo tratado com isolado de soro de leite (ISL) foi alcançado muito antes que os alimentados com o hidrolisado de soro de leite (HSL), (60:t13min e 156:t18min,respectivamente). Nos níveis de lactato sangüíneo foi encontrada diferença significativa nas diferentes categorias. Para os níveis de GH foi encontrada diferença significativa para quase todas as categorias, mostrando que nos grupos alimentados com HSL as reservas foram maiores/ enquanto que os níveis de GM e de AGL não apresentaram diferenças significativas entre os grupos. Os níveis de GC nos grupos HE/IE apresentaram diferenças significativas quando comparadas aos sedentários. A concentração sérica de glicose e de colesterol não apresentaram diferenças significativas, enquanto que os de TGL apresentaram diferenças significativas quase em todos os grupos. De acordo com os resultados obtidos conclui-se que a dieta com hidrolisado de soro de leite de grau de hidrólise médio promoveu um melhor desempenho físico em animais treinados, como foi evidenciado pelo teste de exaustão.No segundo ensaio trabalhou-se apenas com um tipo de dieta (hidrolisado) para todos os ratos. O experimento teve a duração de 10 semanas, objetivando verificar a capacidade de recuperação de ratos submetidos a exercício físico exaustivo. O estudo mostrou que o desempenho dos sedentários no momento do treinamento exaustivo era sempre inferior (42:t14 e 79:t16 min). Em relação aos níveis de glicose não houve diferenças significativas entre os grupos. Os níveis de lactato sangüíneos apresentaram diferenças significativas nos grupos submetidos à atividade física exaustiva (p<0,05), mostrando que o hidrolisado foi vantajoso. O GH não apresentou diferenças significativas entre os grupos SM e TM, mas mostraram diferenças significativas quando comparados aos demais grupos, havendo uma recuperação gradual do glicogênio, todavia incompleta. Os resultados do GM foram semelhantes aos do GH, porém a recuperação foi completa. Quanto ao GC, estes não apresentaram diferenças significativas entre os grupos SEM e TEM, mas apresentaram diferenças significativas quando comparados aos demais grupos. Os parâmetros de glicose sérica, insulina e colesterol não apresentaram diferenças significativas em nenhum dos grupos. A concentração de AGL foi maior para o grupo SEM e menor para o grupo TER/24 significativamente. Finalmente em relação aos níveis de TGL, os grupos SM, SEM e TM não apresentaram diferenças significativas entre si, mas apresentaram diferenças significativas em relação aos grupos TEM, TER/24 e TER/48, sendo notada uma recuperação gradual deste parâmetro / Abstract: Milk whey proteins, besides their high biological value and superior chemical score in comparison to other proteins of animal origin, are considered proteins of fast absorption and metabolism. Fast proteins are thought to be more efficient in the recovery of debilitated organisms ina pronounced catabolic state because of great stimulation to protein synthesis, which justifies its possible use as food supplement for of sports men. Today, the whey proteins have beco me widely used by athletes due to their various properties. Regarding the effect of the degree of hydrolysis, it is not yet known what influence this factor can have on the beneficia I effects to the exercising rato In view of the energy value of proteins in exhaustive exercise, several studies on exercise and protein metabolism have been carried out in the attempt to elucidate the proper amount of protein that must be consumed by sportsmen. The present work had the objective of evaluating the possible metabolic consequences of the sub-chronic consumption of milk-whey protein isolate and its enzymatic hydrolyzate, with medium degree of hydrolysis, as the only protein source, for rats submitted to physical exercise in the treadmill. Male Wistar (-100g), were divided in to three groups: Trained (HT fIT), trained and taken to exhausts (HEfIE) and sedentary (HS/IS).It was observed that the point of exhaustion in the group consuming the whey protein isolate (ISL) was reached long before the group fed the whey protein hydrolyzate (HSL) (60:t13min vS. 156:t18min). For the lactate levels in blood, significant difference (p<0,O5) was found between the different categories indicating that, at 24h after exhaustion, the hydrolyzed protein of the diet was responsible for the faster recovery of the basal blood lactate. For the GH leveJs significant differences for almost ali the categories were found, showing that the groups fed the HSL exhibited greater GH concentrations than did their cohorts, GM did not present significant differences between the pairs of groups and the same was observed with regard to the concentration of fatty acids. The GC showed that the HE/IE groups had significant differences when compared to the sedentary groups. The cholesterol and glucose parameters did not present significant differences between any two groups, whereas the TGL levels presented significant differences for almost ali of the groups. The results suggest that the hydrolyzed protein was considerably more efficient thanthe whole protein in promoting better physical performance and conservation of the biochemical parameters. In the second experiment only one diet type (hydrolized)was used to feed ali rats. This experiment took 10 weeks to complete. The study showed that the performance of the sedentary rats during exercise was always inferior compared to the group of rats submitted to continuous exercise (79:t16min vs. 42:t14). In relation to the glucose levels, there were no significant differences among the different groups. The lactate levels in blood presented significant differences in the groups submitted to the exhausting physical activity (p<O,OS), as compared to the groups not submitted to exhaustion (SM and TM). In the case of the GH, it was observed that the SM and TM groups presented significant differences with the other groups and the recovery of the glycogen was not complete. A similar behavior was observed for the GM except that the recovery was complete. The SEM and TEM groups presented significant differences in comparison with the other groups in the case of the GC. The serum glucose, insulin and cholesterol parameters presented no significant differences in any of the groups. For the fatty acids, it was observed that the SEM and the TER/24 groups had the highest and lowest concentrations, respectively. These groups were statically different from the rest of the groups. Finally, for the TGL levels, it was observed that the recovery of this parameter was gradual and not complete / Mestrado / Mestre em Alimentos e Nutrição

>Magister Scientiae - MSc / Crude extracts from Myrothamnus flabellifolius were fractionated through variouschromatography techniques in order to achieve satisfactory separations. Two compounds, arbutin and lupeol, were isolated from the butanol and ethyl acetate extracts, respectively. Structural elucidation of the compounds was carried out on the basis of 1H and 13C NMR spectroscopy. It was the first time that lupeol had been isolated from M. flabellifolius.The water extract was found to contain heterogeneous pectic polysaccharides. Three polysaccharide fractions were separated from the water extract, namely; MPS, MPS-I and MPS-II. The predominant fraction was found to be MPS, with a molecular weight distribution of 2 X 105 Da. The polysaccharides were made up the following monosaccharides; arabinose, rhamnose, xylose, mannose, galactose and glucose. Monosaccharide composition was determined through acid hydrolysis at high temperatures, followed by GC analysis. The linkage analysis was carried out by GC-MS, following partial methylation of the polysaccharides. The use of human serum albumin (HSA) following its anchoring on magnetic nanoparticles, in order to isolate targeted saponins from Sutherlandia frutescens led to successful isolation of four saponins, namely; sutherlandiosides A-D. The saponins showed great affinity to bind to the HSA.

Proteins represent major constituent of the extracellular matrix which plays an important role in the formation, maintenance and remodeling of tissues, this project focuses on adsorption of two specific serum proteins fibronectin (FN) and vitronectin (VTN) responsible for mediating cell matrix interaction through integrin binding, tripeptide Arg-Gly-Asp (RGD) sequence found in these protein features are recognized by αβV3 integrin which ultimately helps in clot formation.

Background: Silica is the common name for silicon dioxide (SiO2) materials and exists in both crystalline and amorphous forms. While crystalline silica is known for its severe health effects, amorphous silica has been considered safe and applied in many areas. However, some recent studies have showed evidence of their toxicity, raising concerns about its use as nanomaterial for biomedical applications. When nanomaterials enter the body, they are enveloped in biological fluids rich in biomolecules, which compete for binding to the nanomaterial. Such effect could alter their surface chemistry and therefore affect their bio-distribution and interaction with cells. Aim and objectives: As part of the EU-funded NANODRUG network programme, the aim of this project was the in vitro toxicity assessment of commercially-sourced fumed and colloidal amorphous silica particles in relation to their physico-chemical properties and potential application as carriers for drug delivery. The objectives were 1) characterization of silica particles hydrodynamic (Hd) size and dispersity in different cell culture media; 2) in vitro toxicological assessment of silica particles in human skin cells; 3) delineation of toxicity mechanisms in relation to their size; 4) assessment of the influence of Foetal Bovine Serum (FBS) on particle Hd size and toxicity; and 5) contributing to the overall objective of the NANODRUG programme - development of safe nanodrugs for skin application - through collaborations with different partners.

Maternal iron deficiency is a world wide and major public health issue. Despite recent researchers’ interest related to this topic, its impact in the offspring still remains unclear. The aim of this study is to understand the impact of maternal iron deficiency on the auditory functions and serum cortisol levels in the young and adult guinea pig at post-natal day (PNd) 24 and PNd84, respectively. Pregnant guinea pigs were given an iron deficient (ID) or iron sufficient (IS) diet during gestation and lactation. An iron sufficient diet was provided to all pups after weaning day. No significant difference was observed in the hearing threshold and latencies in siblings from both groups at PNd24 and PNd84. However, ID offspring showed a significant higher interpeak latency I-IV at 100 dB than IS pups at PNd24. ID offspring also had significant elevated cortisol levels at PNd24 compared to IS control group. Maternal iron deficiency affects negatively the auditory functions and raises the serum cortisol levels, a biomarker of stress in the offspring.