Orientador: Jose Luiz Moraes Vasconcelos / Resumo: Este estudo compara a fertilidade do sêmen sexado e convencional de 6 diferentes touros Holandeses em vacas holandesas lactantes submetidas a protocolo de (IATF). Foram utilizadas 116 novilhas e 978 vacas em lactação, sincronizadas com o seguinte protocolo de IATF: D-11, 2mg de benzoato de estradiol i.m (Gonadiol®, Zoetis, SP, Brasil) + 100 mg diacetatotetraidratado de gonadorelina i.m (vacas) (Cystorelin®, Merial, SP, Brasil) administrados concomitante à inserção do dispositivo intravaginal de 1,9 g de P4 (CIDR®, Zoetis, SP, Brasil); No D-4, foi administrado 25 mg de dinoprost i.m (vacas) ou 12,5 mg (novilhas) (Lutalyse®, Zoetis, SP, Brasil); No D-2, 25 mg de dinoprost i.m (vacas) ou 12,5 mg (novilhas) (Lutalyse®, Zoetis, SP, Brasil) + 1,0 mg (vacas) ou 0,5 mg (novilhas) de cipionato de estradiol i.m (ECP, Zoetis, SP, Brasil) + remoção do dispositivo intravaginal; no D0 IATF os animais foram divididos aleatoriamente para serem inseminadas com sêmen sexado ou convencional. A taxa de concepção média do sêmen convencional foi maior que a do sêmen sexado aos 31 dias [35,6% (198/557) vs. 25,7% (138/537)], e aos 59 dias [28,7% (160/557) vs. 20,7% (111/537)], respectivamente. As perdas de gestação não diferiram entre sêmen convencional e sexado [19,2% (38/198) vs. 19,6% (27/138)]. Não houve diferença na taxa de concepção aos 31 dias no sêmen convencional e sexado em novilhas [45,76% (27/59) vs. 42,11% (24/57)]; em primíparas [34,69% (51/147) vs. 30,6% (41/134)] em secundíparas [33,... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-30Bitstream added on 2014-06-13T20:47:24Z : No. of bitstreams: 1 lehmkuhl_rc_dr_botfmvz.pdf: 1482245 bytes, checksum: 30e1c612a38d10c841536db8a5de2264 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar a técnica de tomografia computadorizada como meio da visibilização e identificação dos órgãos reprodutivos (gônadas). Utilizou-se 38 aves da espécie Amazona aestiva, com sexo indeterminado e idade superior a cinco anos, para realizar o exame tomográfico utilizou-se anestesia dissociativa a base de quetamina e xilazina. As aves foram posicionadas em decúbito dorsal, e realizou-se os cortes axiais com intervalo de um milímetro. As imagens tomográficas adquiridas foram submetidas à reconstrução multiplanar (MPR) com cortes dorsais e sagitais, possibilitando a caracterização das gônadas tanto masculina, quanto feminina, com 100% de eficiência, confirmadas por meio de análise comparativa com técnica de polimorfismo de DNA, demonstrando a eficácia da tomografia computadorizada na avaliação e sexagem de psitacídeos da espécie Amazona aestiva / The aim of this study was to evaluate the technique of computed tomography (CT) to visualize and identify the reproductive organs (gonads). Thirty-eight Amazona aestiva parrots of unknown sex, older than 5 years of age were used. For anesthesia, ketamine and xylazine were administered. The birds were placed in dorsal recumbency for CT and images were acquired with axial slices at 1-mm collimation. Multiplanar reconstruction (MPR) was performed using dorsal and sagittal slices in order to identify male and female gonads, reaching 100% efficiency as confirmed by the DNA polymorphism technique, so demonstrating the efficacy of the tomography for sexing Psittacidae parrots of the species Amazona aestiva

Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a técnica de tomografia computadorizada como meio da visibilização e identificação dos órgãos reprodutivos (gônadas). Utilizou-se 38 aves da espécie Amazona aestiva, com sexo indeterminado e idade superior a cinco anos, para realizar o exame tomográfico utilizou-se anestesia dissociativa a base de quetamina e xilazina. As aves foram posicionadas em decúbito dorsal, e realizou-se os cortes axiais com intervalo de um milímetro. As imagens tomográficas adquiridas foram submetidas à reconstrução multiplanar (MPR) com cortes dorsais e sagitais, possibilitando a caracterização das gônadas tanto masculina, quanto feminina, com 100% de eficiência, confirmadas por meio de análise comparativa com técnica de polimorfismo de DNA, demonstrando a eficácia da tomografia computadorizada na avaliação e sexagem de psitacídeos da espécie Amazona aestiva / Abstract: The aim of this study was to evaluate the technique of computed tomography (CT) to visualize and identify the reproductive organs (gonads). Thirty-eight Amazona aestiva parrots of unknown sex, older than 5 years of age were used. For anesthesia, ketamine and xylazine were administered. The birds were placed in dorsal recumbency for CT and images were acquired with axial slices at 1-mm collimation. Multiplanar reconstruction (MPR) was performed using dorsal and sagittal slices in order to identify male and female gonads, reaching 100% efficiency as confirmed by the DNA polymorphism technique, so demonstrating the efficacy of the tomography for sexing Psittacidae parrots of the species Amazona aestiva / Orientador: Luiz Carlos Vulcano / Coorientador: Carlos Roberto Teixeira / Banca: Vania Maria de Vasconcelos Machado / Banca: Sheila Canevesse Rahal / Banca: Masao Iwasaki / Banca: João Batista da Cruz / Doutor

Orientador: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Banca: Lindsay Unno Gimenes / Banca: Beatriz da Costa Aguiar Alves Reis / Resumo: Os procedimentos durante a sexagem pelo citômetro de fluxo garantem a acuidade de 85%, mas causam danos na viabilidade espermática que levam a baixa taxa de prenhez após os 90 dias. Os objetivos dessa Dissertação foram: 1) caracterizar a expressão gênica diferencial em transcriptoma de espermatozoides congelados pelo método convencional, sexados por centrifugação em gradiente de densidade ou sexados por citometria de fluxo; 2) comparar as taxas de clivagem e de blastocistos produzidos in vitro de bovinos utilizando sêmen convencional, sexado por citometria de fluxo ou por centrifugação em gradiente de densidade. Os grupos experimentais para sêmen e embriões foram: 1) grupo controle: sêmen convencional submetido ao gradiente de PercollTM 45/90% e respectivos embriões produzidos com esse sêmen; 2) grupo gradiente: centrifugação em gradiente de densidade e respectivos embriões produzidos com esse sêmen; 3) grupo citometria: sêmen sexado pelo citometro de fluxo, submetido ao mini gradiente de PercollTM 45/90% e respectivos embriões produzidos com esse sêmen. O RNA total foi extraído dos espermatozoides (20 x 10 6 células) obtendo-se 400 ng RNA/ 20 x 10 6 células/ animal, ou seja, 20 fg RNA por espermatozoide. Entretanto, não foi posível a construção da biblioteca de cDNA, provavelmente, devido ao alto grau de degradação do RNA. Os Complexos cumulus oócito (COCs) classificados como graus 1, foram aspirados de folículos antrais de 3 a 8 mm de diâmetro a partir de ovários de abatedouros e maturados durante 18 horas em estufa a 38,5°C, 100% de umidade e atmosfera de 5% de CO2 em ar. Os oócitos maturados serão colocados em contato com os espermatozoides previamente preparados para fecundação e incubados por 20 horas em 5% de CO2, na temperatura de 38,5°C. Os prováveis zigotos serão lavados por três vezes em meio SOF (meio sintético de fluido de oviduto) sem SFB e sem glicose e cultivados e transferidos... / Abstract: The procedures for sexing by flow cytometry guarantee the accuracy of 85%, but cause damage in sperm viability leading to lower pregnancy rate after 90 days of pregnancy. The objectives of this study were: 1) to characterize differential gene expression in transcriptome of spermatozoa frozen by conventional method, sexed by density gradient centrifugation, by flow cytometry. 2) Compare blastocyst and cleavageratesproduced in vitro by conventional semen sexed by flow cytometry and by density gradient centrifugation. The experimental groups for semen and embryos were: 1) control group: conventional semen subjected to PercollTM gradient of 45/90% and their embryos produced with this semen, 2) gradientgroup: centrifugation in density gradient and their embryos produced with this semen, 3) cytometry group: semen sexed by flow cytometer, subjected to PercollTMmini gradient 45/90% and their embryos produced with this semen. Total RNA was extracted from sperm (20 x 10 6 cells) and it was possible to extract 400 ngRNA/ 20x10 6 cells/animal or it means, 20 fg of RNA per spermatozoa. However cDNA libraries were not built, probably due a high RNA degradation. The cumulus oocyte complexes (COCs) were classified as grade 1, aspirated from antral follicles with 3-8 mm in diameter, ovariesfromslaughterhouse were used and matured for 18 hours in an incubator at 38.5°C, 100% humidity and atmosphere of 5% of CO2 in air. The matured oocytes are going to be placed in contact with the prepared spermatozoa for fertilization and incubated for 20 hours in 5% CO2 at a temperature of 38.5 °C. Presumptive zygotes are going to be washed three times in SOF (half synthetic oviduct fluid) without FBS and without glucose, cultivated and transferred to plates with four wells containing 500 ul of the same medium used for washing zygotes after fertilization. Embryonic development was evaluated 7-8 days after fertilization. The cleavage and blastocysts rates were ... / Mestre

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-17. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:06Z : No. of bitstreams: 1 000864722.pdf: 2629115 bytes, checksum: 66c11f771d4567d46705749086273afb (MD5) / Os procedimentos durante a sexagem pelo citômetro de fluxo garantem a acuidade de 85%, mas causam danos na viabilidade espermática que levam a baixa taxa de prenhez após os 90 dias. Os objetivos dessa Dissertação foram: 1) caracterizar a expressão gênica diferencial em transcriptoma de espermatozoides congelados pelo método convencional, sexados por centrifugação em gradiente de densidade ou sexados por citometria de fluxo; 2) comparar as taxas de clivagem e de blastocistos produzidos in vitro de bovinos utilizando sêmen convencional, sexado por citometria de fluxo ou por centrifugação em gradiente de densidade. Os grupos experimentais para sêmen e embriões foram: 1) grupo controle: sêmen convencional submetido ao gradiente de PercollTM 45/90% e respectivos embriões produzidos com esse sêmen; 2) grupo gradiente: centrifugação em gradiente de densidade e respectivos embriões produzidos com esse sêmen; 3) grupo citometria: sêmen sexado pelo citometro de fluxo, submetido ao mini gradiente de PercollTM 45/90% e respectivos embriões produzidos com esse sêmen. O RNA total foi extraído dos espermatozoides (20 x 10 6 células) obtendo-se 400 ng RNA/ 20 x 10 6 células/ animal, ou seja, 20 fg RNA por espermatozoide. Entretanto, não foi posível a construção da biblioteca de cDNA, provavelmente, devido ao alto grau de degradação do RNA. Os Complexos cumulus oócito (COCs) classificados como graus 1, foram aspirados de folículos antrais de 3 a 8 mm de diâmetro a partir de ovários de abatedouros e maturados durante 18 horas em estufa a 38,5°C, 100% de umidade e atmosfera de 5% de CO2 em ar. Os oócitos maturados serão colocados em contato com os espermatozoides previamente preparados para fecundação e incubados por 20 horas em 5% de CO2, na temperatura de 38,5°C. Os prováveis zigotos serão lavados por três vezes em meio SOF (meio sintético de fluido de oviduto) sem SFB e sem glicose e cultivados e transferidos... / The procedures for sexing by flow cytometry guarantee the accuracy of 85%, but cause damage in sperm viability leading to lower pregnancy rate after 90 days of pregnancy. The objectives of this study were: 1) to characterize differential gene expression in transcriptome of spermatozoa frozen by conventional method, sexed by density gradient centrifugation, by flow cytometry. 2) Compare blastocyst and cleavageratesproduced in vitro by conventional semen sexed by flow cytometry and by density gradient centrifugation. The experimental groups for semen and embryos were: 1) control group: conventional semen subjected to PercollTM gradient of 45/90% and their embryos produced with this semen, 2) gradientgroup: centrifugation in density gradient and their embryos produced with this semen, 3) cytometry group: semen sexed by flow cytometer, subjected to PercollTMmini gradient 45/90% and their embryos produced with this semen. Total RNA was extracted from sperm (20 x 10 6 cells) and it was possible to extract 400 ngRNA/ 20x10 6 cells/animal or it means, 20 fg of RNA per spermatozoa. However cDNA libraries were not built, probably due a high RNA degradation. The cumulus oocyte complexes (COCs) were classified as grade 1, aspirated from antral follicles with 3-8 mm in diameter, ovariesfromslaughterhouse were used and matured for 18 hours in an incubator at 38.5°C, 100% humidity and atmosphere of 5% of CO2 in air. The matured oocytes are going to be placed in contact with the prepared spermatozoa for fertilization and incubated for 20 hours in 5% CO2 at a temperature of 38.5 °C. Presumptive zygotes are going to be washed three times in SOF (half synthetic oviduct fluid) without FBS and without glucose, cultivated and transferred to plates with four wells containing 500 ul of the same medium used for washing zygotes after fertilization. Embryonic development was evaluated 7-8 days after fertilization. The cleavage and blastocysts rates were ...

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-12-11. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:33Z : No. of bitstreams: 1 000542466.pdf: 656729 bytes, checksum: 7179155aa051b9a7cdef57c48ecc8123 (MD5) / O trabalho avaliou três métodos de sexagem em tilápias do Nilo, nas idades de 30, 60 e 90 dias, que foram revertidas mediante a administração do andrógeno 17a¬metiltestosterona incorporado às rações de diferentes granulometrias (0,25; 0,35 e 0,50 mm) na dosagem de 60 mg/kg de ração. Para os parâmetros biométricos de peso e comprimento total utilizou-se o Delineamento Inteiramente Casualizado (DIC), em parcelas subdivididas, três tratamentos e três repetições, sendo parcelas as três granulometrias e subparcelas as três idades. Ao término do estudo, os peixes alimentados com as granulometrias 0,35 e 0,25 mm, respectivamente, obtiveram os melhores resultados para peso (14,42 g e 13,36 g) e comprimento total (83,13 mm e 82,72 mm), não sendo embora, estatisticamente significativos. Perante os três métodos de sexagem avaliados, a histologia das gônadas obteve o diagnóstico mais seguro / This work evaluated three methods of sexual identification of Nile tilapias with ages of 30, 60 and 90 days of age reverted through administration of androgen 17u¬methyltestosterone added to the rations of different diameters (0.25; 0.35 and 0.50 mm) in dosage of 60 mglkg of ration. To the biometricals parameters as weight and length total were used a completely randomized design in subdivided instalments with three treatments and three repetitions, where the instalments were the three diameters of ration and the subinstalments, the three ages. In the end of this work, fishes feeded with diameters 0.35 and 0.25 mm, respectively, have obtained the best results for weight (14.42 g and 13.36 g) and length total (83.13 mm and 82.72 mm), although being statisticaly not significant. In the presence of the three methods of sexual identification evaluated, histology of gonads has shown the most confident diagnosis

Submitted by BRUNA CRISTINA JERONIMO null (bruna.jer@gmail.com) on 2016-09-27T23:44:59Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Bruna - Correções Adriane versão final para imprimir.pdf: 2531830 bytes, checksum: 468a11d8d93e4d6cdb8212717e577790 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-09-29T18:29:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 jeronimo_bc_me_bot.pdf: 2531830 bytes, checksum: 468a11d8d93e4d6cdb8212717e577790 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-29T18:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 jeronimo_bc_me_bot.pdf: 2531830 bytes, checksum: 468a11d8d93e4d6cdb8212717e577790 (MD5) Previous issue date: 2016-06-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Em contraste ao padrão de cromossomos sexuais de mamíferos (XX/XY), as aves apresentam um sistema de determinação sexual em que os machos representam o sexo homogamético (ZZ) e as fêmeas constituem o sexo heterogamético (ZW). Adicionalmente, embora mamíferos apresentem um mecanismo de compensação de dose, a inativação completa de um dos cromossomos Z não é observada em machos de aves e, portanto, estes possuem um maior nível de expressão de vários genes presentes nesse cromossomo. A despeito disso, um mecanismo ainda não completamente esclarecido de compensação de dose parcial em aves resulta em expressão equivalente entre os sexos para alguns genes do cromossomo Z. A região MHM (Male Hypermethylated), localizada no cromossomo Z de Galliformes, está associada a um padrão de hipermetilação em machos e hipometilação em fêmeas, levando à síntese de um RNA não-codificante longo (lncRNA) somente em fêmeas. A presença deste lncRNA é associada ao aumento da expressão de genes próximos à região MHM em fêmeas, o que parece resultar em uma compensação de dose local entre os sexos. Dado que, até o momento, segmentos MHM foram somente identificados em Galiformes e Anseriformes, o presente estudo visou isolar e caracterizar esta região em Galliformes (galinha doméstica, codorna européia, peru) e também em Struthioniformes (avestruz), Strigiformes (coruja-orelhuda, corujinha-do-mato, coruja-da-igreja, coruja-buraqueira), Piciformes (tucanuçu), Psittaciformes (arara-azul-grande) e Apodiformes (beija-flor-da-banda-branca, beija-flor-tesoura, beija-flor-preto). Indivíduos adultos e embriões com seis dias de desenvolvimento foram sexados com base em caracteres morfológicos e moleculares - por meio de PCR (Polymerase Chain Reaction) para amplificação de uma região intrônica dos genes CHD1-Z e CHD1-W, seguida de eletroforese em gel de agarose e poliacrilamida, análise SSCP e análise automatizada de fragmentos de DNA. Métodos de sexagem molecular mostraram-se adequados para identificação de machos e fêmeas de galinha doméstica, codorna européia, peru, tucanuçu, arara-azul-grande, coruja-orelhuda, corujinha-do-mato, coruja-buraqueira, beija-flor-da-banda-branca, beija-flor-tesoura e beija-flor-preto. Entretanto, as técnicas moleculares utilizadas não permitiram identificar diferenças entre machos e fêmeas de avestruz. Análises in silico da região MHM de galinha doméstica mostraram que esta se encontra localizada no braço curto do cromossomo Z, sendo constituída por 260Kb (chrZ:27,000,000-27,260,000) e alto conteúdo de CG. Esta região é delimitada por duas LINES (Long Interspersed Nuclear Elements) e possui múltiplos elementos repetitivos da classe LTR (Long Terminal Repeat), especialmente os pertencentes à família EVRL (Endogenous Retrovirus), denominados GGLTR5A. Com base em sua composição genômica, a região MHM de galinha doméstica foi subdividida em sub-regiões - denominadas de 1 (chrZ:27,176,712-27,260,282), 2 (chrZ:27,132,044-27,174,901), 3a (chrZ:27,094,512-27,132,043), 4 (chrZ:27,036,950-27,094,511) e 3b (chrZ:27,000,000-27,036,949) - que apresentam-se compostas por três unidades de repetições diferentes (denominadas de repeats 1, 2 e 3) flanqueadas por LTRs específicas. PCR multiplex em amostras de galinha doméstica levou à amplificação de dois fragmentos de DNA de aproximadamente 240 e 750 pares de bases, sendo o fragmento maior correspondente à repeat 1 da região MHM. Assim como observado para galinha doméstica, também foram gerados, via PCR, dois fragmentos de DNA de diferentes tamanhos associados à região MHM para as outras espécies de aves estudadas. Um maior nível de identidade (80-97%) foi observado entre a região MHM de galinha doméstica e as sequências nucleotídicas obtidas de codorna européia, peru e avestruz, o que demonstra que a presença de segmentos MHM não se restringe ao genoma de Galliformes e Anseriformes. Ensaios de digestão enzimática em DNA genômico de galinha doméstica, codorna européia e peru, por meio do uso de endonucleases de restrição sensíveis à metilação e dependentes de metilação (MspI, HpaII e McrBC), seguidos de amplificação de um fragmento de DNA associado à sub-região 1 MHM, evidenciaram padrões diferenciais de metilação dessa região entre os sexos, sendo hipometilada em fêmeas e hipermetilada em machos. Tais padrões diferenciais mostram-se potencialmente adequados para aplicação em testes de sexagem molecular em espécies de aves. / In contrast to the sexual chromosomes pattern found in mammals (XX/XY), birds present a sex determination system in which males represent the homogametic sex (ZZ) and females correspond to the heterogametic sex (ZW). Furthermore, although mammals present a dosage compensation mechanism, the complete inactivation of one Z chromosome is not observed in male birds and, therefore, they have a higher expression level of several genes that are found in this chromosome. Despite this, a mechanism of partial dosage compensation that was not clearly explained so far for birds results on an equivalent expression between sexes for some of the genes found at the Z chromosome. The MHM region (Male Hypermethylated), localized at the Z chromosome of Galliformes, is associated to a hypermethylation pattern in males and hypomethylation in females, which leads to the synthesis of a long non-coding RNA (lncRNA) only in females. The presence of this lncRNA is associated with a higher expression of genes that are located near to the MHM region in females, which seems to result in a local dosage compensation between sexes. As MHM segments were so far identified only in Galliformes and Anseriformes, the present study aimed to isolate and characterize this region on Galliformes (chicken, European quail, turkey) and also on Struthioniformes (ostrich), Strigiformes (striped owl, tropical screech-owl, barn owl, burrowing owl), Piciformes (toco toucan), Psittaciformes (hyacinth macaw), and Apodiformes (versicolored emerald, swallow-tailed hummingbird, black jacobin). Adult individuals and six-day embryos were sexed based on morphological and molecular characters - throughout PCR (Polymerase Chain Reaction) to amplify an intronic region of the CHD1-Z e CHD1-W genes, followed by agarose and polyacrylamide electrophoresis, SSCP analysis and automated fragment DNA analysis. Molecular sexing methodologies were useful for the identification of males and females of chicken, European quail, turkey, toco toucan, hyacinth macaw, striped owl, tropical screech-owl, burrowing owl, versicolored emerald, swallow-tailed hummingbird, and black jacobin. However, the applied techniques were not effective to identify differences between male and female ostriches. In silico analyses of the chicken MHM region showed that it is localized at the short arm of the Z chromosome and is constituted by 260Kb (chrZ:27,000,000-27,260,000) and a high CG content. This region is delimited by two LINES (Long Interspersed Nuclear Elements) and presents multiple repetitive elements of the LTR (Long Terminal Repeat) class, especially those of the EVRL (Endogenous Retrovirus) family, denominated GGLTR5A. Based on its genomic composition, the MHM region was subdivided into sub regions – denominated as 1 (chrZ:27,176,712-27,260,282), 2 (chrZ:27,132,044-27,174,901), 3a (chrZ:27,094,512-27,132,043), 4 (chrZ:27,036,950-27,094,511), and 3b (chrZ:27,000,000-27,036,949) - that are composed by three different repeat units (denominated as repeats 1, 2 e 3) flanked by specific LTRs. Multiplex PCR on chicken samples resulted in the amplification of two different size DNA fragments of around 240 and 750 base pairs, and the larger fragment corresponds to the repeat 1 of the MHM region. As observed for chicken, two different DNA fragments associated to the MHM region were also generated, by PCR, for the other studied species. A higher identity index (80-97%) was recognized between the chicken MHM region and the obtained nucleotide sequences of European quail, turkey and ostrich, which evidences that the presence of MHM segments is not restricted to the Galliformes and Anseriformes genomes. Enzymatic digestion assays in genomic DNA samples of chicken, European quail and turkey, through the use of methylation sensitive and methylation dependent restriction endonucleases (MspI, HpaII e McrBC), followed by the amplification of a DNA fragment associated to the sub region 1 MHM, showed differential methylation patterns between sexes - hypomethylated in females and hypermethylated in males. These differential patterns are potentially applicable for molecular sexing tests in bird species. / CNPq: 131152/2014-9

Orientadora: Laura Satiko Nakaghi / Banca: Heid Sueli Leme dos Santos / Banca: Elizabeth Romagosa / Resumo: O trabalho avaliou três métodos de sexagem em tilápias do Nilo, nas idades de 30, 60 e 90 dias, que foram revertidas mediante a administração do andrógeno 17a¬metiltestosterona incorporado às rações de diferentes granulometrias (0,25; 0,35 e 0,50 mm) na dosagem de 60 mg/kg de ração. Para os parâmetros biométricos de peso e comprimento total utilizou-se o Delineamento Inteiramente Casualizado (DIC), em parcelas subdivididas, três tratamentos e três repetições, sendo parcelas as três granulometrias e subparcelas as três idades. Ao término do estudo, os peixes alimentados com as granulometrias 0,35 e 0,25 mm, respectivamente, obtiveram os melhores resultados para peso (14,42 g e 13,36 g) e comprimento total (83,13 mm e 82,72 mm), não sendo embora, estatisticamente significativos. Perante os três métodos de sexagem avaliados, a histologia das gônadas obteve o diagnóstico mais seguro / Abstract: This work evaluated three methods of sexual identification of Nile tilapias with ages of 30, 60 and 90 days of age reverted through administration of androgen 17u¬methyltestosterone added to the rations of different diameters (0.25; 0.35 and 0.50 mm) in dosage of 60 mglkg of ration. To the biometricals parameters as weight and length total were used a completely randomized design in subdivided instalments with three treatments and three repetitions, where the instalments were the three diameters of ration and the subinstalments, the three ages. In the end of this work, fishes feeded with diameters 0.35 and 0.25 mm, respectively, have obtained the best results for weight (14.42 g and 13.36 g) and length total (83.13 mm and 82.72 mm), although being statisticaly not significant. In the presence of the three methods of sexual identification evaluated, histology of gonads has shown the most confident diagnosis / Mestre

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-12T14:02:16Z No. of bitstreams: 1 Cristiano Rocha de Aguiar Filho.pdf: 339447 bytes, checksum: 7967475b6ae9056cd19a6eebafa8adf7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-12T14:02:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cristiano Rocha de Aguiar Filho.pdf: 339447 bytes, checksum: 7967475b6ae9056cd19a6eebafa8adf7 (MD5) Previous issue date: 2008-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Two experiments have been performed to evaluate the efficiency of ultrasound to visualization the external genital of fetuses goat. The first study determined the ideal period to sex goat fetuses by the ultrasound in the transrectal way being considered external genital structures. Daily had been monitored, 94 fetuses, being Boer (n = 36), Alpine Brown (n = 31) and Anglo-Nubian (n = 27), from day 40th to 60th of gestation, using linear transducer of 6.0 and 8.0 MHz. The final positioning of the genital tubercle (GT) occurred at day 47.11 ± 1.45 in the males and at day 45.62 ± 1.36 in the females and visualization of the structures of the external genital in the day 49.42 ± 2.20 (scrotum), day 49.37 ± 2.19 (penis), day 49.23 ± 1.75 (nipples) and at day 49.98 ± 2.52 (clitoris). The scrotum, penis, nipples and clitoris had been only visualized, respectively, after days 2.28 ± 2.16, 2.23 ± 2.23, 3.62 ± 1.50 and 4.36 ± 2.27 of the end of the GT migration. The data had shown that the migration of the GT in the female fetus is earlier (P < 0.05) than in the male and that the visualization of the scrotum and the penis is earlier (P < 0.05) than nipples and clitoris, having no difference (P > 0.05) between same sex structures. It was concluded that ultrasound by the transrectal via is an important tool to identify the fetal sex in goat and that is possible to sex fetuses of the studied breeds before 55th day of gestation, considering only the visualization of the external genital structures. The second study the objective was to determine the ideal period to early sex goat fetuses proceeding from simple (SP) and twin (TP) pregnancy. Daily 94 fetuses of Boer (11 SP and 25 TP), Alpine Brown (10 SP and 21 TP) and Anglo-Nubian (8 SP and 19 TP) had been examined, from day 40 to 60 of gestation, to determine the day of the final positioning of the GT and the first visualization day of the scrotum, penis, nipples and clitoris, using a double frequency (6.0 and 8.0 MHz) linear transducer. The final positioning of the GT of male fetuses in the SP occurred in the day 46.83 ± 0.72 and in the females was at day 45.71 ± 1.10, with no difference (P > 0.05) between female and male fetus, as well as between breeds. The visualization of the scrotum occurred in day 49.17 ± 2.41, penis in day 49.25 ± 2.09, nipples in day 49.06 ± 1.78 and the clitoris in day 50.88 ± 3.26, having no difference (P > 0.05) between visualization days. The scrotum, penis, nipples and clitoris had been only visualized, respectively, after days 2.33 ± 2.35, 2.42 ± 2.19, 3.35 ± 1.46 and 5.18 ± 2.81 the migration end of the GT, with no difference (P > 0.05) between scrotum, penis and nipples and between nipples and clitoris, however the clitoris visualization was later (P < 0.05) than scrotum and penis. In TP, the final positioning of the GT of the male fetuses occurred at day 47.13 ± 1.59 and the females at day 45.54 ± 1.45, having difference (P < 0.05) between female and male fetus. The visualization of the scrotum occurred in day 49.43 ± 2.13, penis in day 49.33 ± 2.25, nipples in day 49.21 ± 1.66 and clitoris in 49.36 day ± 1.83, with no difference (P > 0.05) between the visualization days. The scrotum, penis, nipples and clitoris had been only visualized, respectively, after days 2.30 ± 2.15, 2.20 ± 2.25, 3.68 ± 1.54 and 3.82 ± 1.72 in the end of the GT migration, with no difference (P > 0.05)involving scrotum and penis, between nipples and clitoris, although the visualization of the clitoris was more delayed (P < 0.05) than the scrotum and penis. One concludes that the ultrasound by the transrectal via is an efficient to identify the goat fetal sex of the studied breeds before day 55th of gestation, only considering the visualization the external genital structures in simple and twin gestation. / Foram conduzidos dois experimentos para avaliar a eficiência da ultra-sonografia na visualização da genitália externa de fetos caprinos. No primeiro estudo determinou-se o período ideal para sexar fetos caprinos pela ultra-sonografia transretal considerando as estruturas da genitália externa. Foram monitorados diariamente, 94 fetos das raças Boer (n = 36), Parda Alpina (n = 31) e Anglo-Nubiana (n = 27), do 40o ao 60o dia de gestação, utilizando um transdutor linear de 6,0 e 8,0 MHz, para determinar o dia do posicionamento final do tubérculo genital (TG) e o primeiro dia de visualização da bolsa escrotal, pênis, tetas e clitóris. O posicionamento final do TG ocorreu no dia 47,11 ± 1,45 nos machos e no dia 45,62 ± 1,36 nas fêmeas e a visualização das estruturas da genitália externa no dia 49,42 ± 2,20 (bolsa escrotal), dia 49,37 ± 2,19 (pênis), dia 49,23 ± 1,75 (tetas) e no dia 49,98 ± 2,52 (clitóris). A bolsa escrotal, pênis, tetas e clitóris somente foram visualizadas, respectivamente, após os dias 2,28 ± 2,16, 2,23 ± 2,23, 3,62 ± 1,50 e 4,36 ± 2,27 do final da migração do TG. Os dados mostraram que a migração do TG no feto fêmea é mais precoce (P < 0,05) do que no macho e que a visualização da bolsa escrotal e do pênis é mais precoce (P < 0,05) do que a das tetas e do clitóris, não havendo diferença (P > 0,05) entre as estruturas do mesmo sexo. Conclui-se que a ultra-sonografia pela via transretal é uma ferramenta importante para identificar o sexo fetal de caprinos visualizando as estruturas da genitália externa antes do 55o dia de gestação. No segundo estudo, teve-se o objetivo de determinar o período ideal de sexar fetos caprinos provenientes de gestação simples (GS) e dupla (GD), utilizando o transdutor linear de dupla freqüência (6,0 e 8,0 MHz). Foram diariamente examinados 94 fetos das raças Boer (11 GS e 25 GD), Parda Alpina (10 GS e 21 GD) e Anglo-Nubiana (8 GS e 19 GD), do 40o ao 60o dia de gestação, para determinar o dia do posicionamento final do TG e o primeiro dia de visualização da bolsa escrotal, pênis, tetas e clitóris. Na GS, o posicionamento final do TG dos fetos machos ocorreu no dia 46,83 ± 0,72 e das fêmeas no dia 45,71 ± 1,10, não havendo diferença (P > 0,05) entre feto macho e fêmea, bem como entre raças. A visualização da bolsa escrotal ocorreu no dia 49,17 ± 2,41, do pênis no dia 49,25 ± 2,09, das tetas no dia 49,06 ± 1,78 e do clitóris no dia 50,88 ± 3,26, não havendo diferença (P > 0,05) entre os dias ix de visualização. A bolsa escrotal, pênis, tetas e clitóris somente foram visualizados, respectivamente, após os dias 2,33 ± 2,35, 2,42 ± 2,19, 3,35 ± 1,46 e 5,18 ± 2,81 do final da migração do TG, não havendo diferença (P > 0,05) entre bolsa escrotal, pênis e tetas, entre tetas e clitóris, sendo a visualização do clitóris mais tardia (P < 0,05) do que a da bolsa escrotal e do pênis. Na GD, o posicionamento final do TG dos fetos machos ocorreu no dia 47,13 ± 1,59 e das fêmeas no dia 45,54 ± 1,45, havendo diferença (P < 0,05) entre feto macho e fêmea. A visualização da bolsa escrotal ocorreu no dia 49,43 ± 2,13, do pênis no dia 49,33 ± 2,25, das tetas no dia 49,21 ± 1,66 e do clitóris no dia 49,36 ± 1,83, não havendo diferença (P > 0,05) entre os dias de visualização. A bolsa escrotal, pênis, tetas e clitóris somente foram visualizados, respectivamente, após os dias 2,30 ± 2,15, 2,20 ± 2,25, 3,68 ± 1,54 e 3,82 ± 1,72 do final da migração do TG, não havendo diferença (P > 0,05) entre bolsa escrotal e pênis, entre tetas e clitóris, sendo a visualização do clitóris mais tardia (P < 0,05) do que a da bolsa escrotal e do pênis. Conclui-se que a ultra-sonografia pela via transretal é eficaz para sexar fetos através da visualização das estruturas da genitália externa, tanto em gestação simples quanto dupla, antes do 55o dia de gestação.

Orientador: Adriane Pinto Wasko / Coorientador: Claudia Aparecida Rainho / Resumo: Em contraste ao padrão de cromossomos sexuais de mamíferos (XX/XY), as aves apresentam um sistema de determinação sexual em que os machos representam o sexo homogamético (ZZ) e as fêmeas constituem o sexo heterogamético (ZW). Adicionalmente, embora mamíferos apresentem um mecanismo de compensação de dose, a inativação completa de um dos cromossomos Z não é observada em machos de aves e, portanto, estes possuem um maior nível de expressão de vários genes presentes nesse cromossomo. A despeito disso, um mecanismo ainda não completamente esclarecido de compensação de dose parcial em aves resulta em expressão equivalente entre os sexos para alguns genes do cromossomo Z. A região MHM (Male Hypermethylated), localizada no cromossomo Z de Galliformes, está associada a um padrão de hipermetilação em machos e hipometilação em fêmeas, levando à síntese de um RNA não-codificante longo (lncRNA) somente em fêmeas. A presença deste lncRNA é associada ao aumento da expressão de genes próximos à região MHM em fêmeas, o que parece resultar em uma compensação de dose local entre os sexos. Dado que, até o momento, segmentos MHM foram somente identificados em Galiformes e Anseriformes, o presente estudo visou isolar e caracterizar esta região em Galliformes (galinha doméstica, codorna européia, peru) e também em Struthioniformes (avestruz), Strigiformes (coruja-orelhuda, corujinha-do-mato, coruja-da-igreja, coruja-buraqueira), Piciformes (tucanuçu), Psittaciformes (arara-azul-grande) e Apodiform... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre